JPH09238679A - サイレージ調製用セルラーゼ製剤及びそれを用いたサイレージの調製方法 - Google Patents
サイレージ調製用セルラーゼ製剤及びそれを用いたサイレージの調製方法Info
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- JPH09238679A JPH09238679A JP8078129A JP7812996A JPH09238679A JP H09238679 A JPH09238679 A JP H09238679A JP 8078129 A JP8078129 A JP 8078129A JP 7812996 A JP7812996 A JP 7812996A JP H09238679 A JPH09238679 A JP H09238679A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ドレインによる栄養成分の逸失をきたすこと
なく、サイレージの発酵品質改善効果を有する新たなセ
ルラーゼ製剤と、それを用いたサイレージ調製方法を提
供することを目的とする。 【解決手段】 アクレモニウム（Acremonium）属の菌が
生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の
菌が生産するセルラーゼとを含有するサイレージ調製用
セルラーゼ製剤を提供すると共に、この製剤を用いてサ
イレージ原料を処理することを特徴とするサイレージの
調製方法を提供する。
なく、サイレージの発酵品質改善効果を有する新たなセ
ルラーゼ製剤と、それを用いたサイレージ調製方法を提
供することを目的とする。 【解決手段】 アクレモニウム（Acremonium）属の菌が
生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の
菌が生産するセルラーゼとを含有するサイレージ調製用
セルラーゼ製剤を提供すると共に、この製剤を用いてサ
イレージ原料を処理することを特徴とするサイレージの
調製方法を提供する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、サイレージ調製用
セルラーゼ製剤と、それを用いたサイレージの調製方法
に関する。詳しくは、アクレモニウム（Acremonium）属
の菌が生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderm
a）属の菌が生産するセルラーゼとを、一定の割合で混
合してなるサイレージ調製用セルラーゼ製剤と、このサ
イレージ調製用セルラーゼ製剤を用いた、改良されたサ
イレージ調製方法とに関する。
セルラーゼ製剤と、それを用いたサイレージの調製方法
に関する。詳しくは、アクレモニウム（Acremonium）属
の菌が生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderm
a）属の菌が生産するセルラーゼとを、一定の割合で混
合してなるサイレージ調製用セルラーゼ製剤と、このサ
イレージ調製用セルラーゼ製剤を用いた、改良されたサ
イレージ調製方法とに関する。
【０００２】
【従来の技術】牧草のサイロへの詰め込みの際に添加
し、その発酵品質を改善せしめて、良質のサイレージを
調製することを目的とするサイレージ用酵素製剤とし
て、各種のセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、アミラーゼを
それぞれ単剤としたもの、或いはこれらを合剤として含
むもの、更に、これら酵素の効果を高めることを目的と
して、これら酵素と乳酸菌との合剤が既に市販されてい
る。
し、その発酵品質を改善せしめて、良質のサイレージを
調製することを目的とするサイレージ用酵素製剤とし
て、各種のセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、アミラーゼを
それぞれ単剤としたもの、或いはこれらを合剤として含
むもの、更に、これら酵素の効果を高めることを目的と
して、これら酵素と乳酸菌との合剤が既に市販されてい
る。
【０００３】サイレージ用途に用いることのできるセル
ラーゼとしては、特開平４−１１７２４４号公報によれ
ば、トリコデルマ属の菌が生産するセルラーゼやアクレ
モニウム属の菌が生産するセルラーゼやアスペルギルス
属の菌が生産するセルラーゼが知られている。
ラーゼとしては、特開平４−１１７２４４号公報によれ
ば、トリコデルマ属の菌が生産するセルラーゼやアクレ
モニウム属の菌が生産するセルラーゼやアスペルギルス
属の菌が生産するセルラーゼが知られている。
【０００４】また、特開平７ー２３６４３１号公報に
は、アクレモニウム属の菌が生産するセルラーゼを、良
質サイレージを調製するのが難しい生イネワラに応用
し、良好な結果が得られたことが記載されている。
は、アクレモニウム属の菌が生産するセルラーゼを、良
質サイレージを調製するのが難しい生イネワラに応用
し、良好な結果が得られたことが記載されている。
【０００５】ところで、特開平４ー１１７２４４号公報
記載のアクレモニウム属の菌が生産するセルラーゼは、
トリコデルマ属の菌が生産するセルラーゼやアスペルギ
ルス属の菌が生産するセルラーゼと比較し、より少ない
酵素（セルラーゼ活性）の添加量で、明瞭なサイレージ
発酵品質を改善すること（低ｐＨ、高乳酸産生、低揮発
性塩基態窒素産生）が知られている。
記載のアクレモニウム属の菌が生産するセルラーゼは、
トリコデルマ属の菌が生産するセルラーゼやアスペルギ
ルス属の菌が生産するセルラーゼと比較し、より少ない
酵素（セルラーゼ活性）の添加量で、明瞭なサイレージ
発酵品質を改善すること（低ｐＨ、高乳酸産生、低揮発
性塩基態窒素産生）が知られている。
【０００６】一方、上記したように、特開平７ー２３６
４３１号公報には、アクレモニウム属の菌が生産するセ
ルラーゼ製剤を用いることにより、良質なサイレージ調
製が困難な生イネワラでも、良好な発酵品質が得られ、
また、動物に供与した場合には消化率が向上することが
知られている。
４３１号公報には、アクレモニウム属の菌が生産するセ
ルラーゼ製剤を用いることにより、良質なサイレージ調
製が困難な生イネワラでも、良好な発酵品質が得られ、
また、動物に供与した場合には消化率が向上することが
知られている。
【０００７】しかしながら、その後の実用化研究による
と、アクレモニウム属の菌が生産するセルラーゼ製剤
は、通常用いられるイネ科やマメ科の牧草を用いた数百
トン以上の実規模サイレージを調製した際には、排汁
（ドレイン）が少なからず発生することが判明した。
と、アクレモニウム属の菌が生産するセルラーゼ製剤
は、通常用いられるイネ科やマメ科の牧草を用いた数百
トン以上の実規模サイレージを調製した際には、排汁
（ドレイン）が少なからず発生することが判明した。
【０００８】このことは、実規模に於いて草にかかる圧
力が大きいことが原因として考えられるが、サイレージ
の発酵品質を改善できる量の酵素（アクレモニウム属の
菌が生産するセルラーゼ製剤）を加えると、牧草を組織
学的に崩壊させる作用が相乗的に強まり、本来動物の栄
養となるべき成分が排汁（ドレイン）として失われ、飼
料価値を低下させることとなり、発酵品質と排汁（ドレ
イン）発生とが、二律背反となることが明らかとなっ
た。
力が大きいことが原因として考えられるが、サイレージ
の発酵品質を改善できる量の酵素（アクレモニウム属の
菌が生産するセルラーゼ製剤）を加えると、牧草を組織
学的に崩壊させる作用が相乗的に強まり、本来動物の栄
養となるべき成分が排汁（ドレイン）として失われ、飼
料価値を低下させることとなり、発酵品質と排汁（ドレ
イン）発生とが、二律背反となることが明らかとなっ
た。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、サイ
レージ発酵品質改善能の高いアクレモニウム属の菌が産
生するセルラーゼを用い、しかも排汁（ドレイン）によ
る栄養成分の逸失をきたすことなく、サイレージの発酵
品質改善効果を有する新たなセルラーゼ製剤と、それを
用いたサイレージ調製方法を提供することにある。
レージ発酵品質改善能の高いアクレモニウム属の菌が産
生するセルラーゼを用い、しかも排汁（ドレイン）によ
る栄養成分の逸失をきたすことなく、サイレージの発酵
品質改善効果を有する新たなセルラーゼ製剤と、それを
用いたサイレージ調製方法を提供することにある。
【００１０】本発明者らは、上記の目的に合致する酵素
製剤とサイレージ調製方法とを開発すべく鋭意検討した
結果、アクレモニウム属に属する菌が生産するセルラー
ゼと、トリコデルマ属に属する菌が生産するセルラーゼ
とを、一定範囲の比率で混合した製剤が、得られるサイ
レージの発酵品質が優れているにもかかわらず、排汁
（ドレイン）生成量が少ないことを見い出し、この知見
に基づいて本発明を完成するに至った。
製剤とサイレージ調製方法とを開発すべく鋭意検討した
結果、アクレモニウム属に属する菌が生産するセルラー
ゼと、トリコデルマ属に属する菌が生産するセルラーゼ
とを、一定範囲の比率で混合した製剤が、得られるサイ
レージの発酵品質が優れているにもかかわらず、排汁
（ドレイン）生成量が少ないことを見い出し、この知見
に基づいて本発明を完成するに至った。
【００１１】
【課題を解決するための手段】即ち、請求項１記載の本
発明は、アクレモニウム（Acremonium）属の菌が生産す
るセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の菌が生
産するセルラーゼとを含有するサイレージ調製用セルラ
ーゼ製剤を提供するものである。
発明は、アクレモニウム（Acremonium）属の菌が生産す
るセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の菌が生
産するセルラーゼとを含有するサイレージ調製用セルラ
ーゼ製剤を提供するものである。
【００１２】次に、請求項５記載の本発明は、アクレモ
ニウム（Acremonium）属の菌が生産するセルラーゼとト
リコデルマ（Tricoderma）属の菌が生産するセルラーゼ
とを含有する製剤を用いてサイレージ原料を処理するこ
とを特徴とするサイレージの調製方法を提供するもので
ある。
ニウム（Acremonium）属の菌が生産するセルラーゼとト
リコデルマ（Tricoderma）属の菌が生産するセルラーゼ
とを含有する製剤を用いてサイレージ原料を処理するこ
とを特徴とするサイレージの調製方法を提供するもので
ある。
【００１３】
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
請求項１記載の本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製
剤は、アクレモニウム（Acremonium）属の菌が生産する
セルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の菌が生産
するセルラーゼとを含有するものである。
請求項１記載の本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製
剤は、アクレモニウム（Acremonium）属の菌が生産する
セルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の菌が生産
するセルラーゼとを含有するものである。
【００１４】ここでアクレモニウム（Acremonium）属に
属する菌としては、例えばアクレモニウム・セルロリテ
ィカス（Acremonium cellulolyticus )を好適なものと
して挙げることができる。
属する菌としては、例えばアクレモニウム・セルロリテ
ィカス（Acremonium cellulolyticus )を好適なものと
して挙げることができる。
【００１５】このようなアクレモニウム属の菌が生産す
るセルラーゼは、例えば特公昭６０−４３９４５号公報
に記載された方法に従って製造することができる。この
際、培養後、遠心分離等により除菌して得られた上澄み
液を更に限外濾過法により濃縮し、スプレードライ法に
より水分を除去すれば、粉末製剤を得ることができる。
なお、スプレードライの際、上澄み液に更に乳糖、澱
粉、澱粉の部分分解物又はグルコースなどを添加するこ
とにより、プロセス収率の改善や、得られた粉末製剤の
物性、例えば溶解性や安定性の改善が期待される。
るセルラーゼは、例えば特公昭６０−４３９４５号公報
に記載された方法に従って製造することができる。この
際、培養後、遠心分離等により除菌して得られた上澄み
液を更に限外濾過法により濃縮し、スプレードライ法に
より水分を除去すれば、粉末製剤を得ることができる。
なお、スプレードライの際、上澄み液に更に乳糖、澱
粉、澱粉の部分分解物又はグルコースなどを添加するこ
とにより、プロセス収率の改善や、得られた粉末製剤の
物性、例えば溶解性や安定性の改善が期待される。
【００１６】一方、トリコデルマ（Tricoderma）属に属
する菌としては、例えばトリコデルマ・ビリデ（Tricod
erma viride)やトリコデルマ・レーゼイ( Trichoderma
reesei）などが挙げられ、これらを単独で、或いは二種
類以上を併用することもできる。
する菌としては、例えばトリコデルマ・ビリデ（Tricod
erma viride)やトリコデルマ・レーゼイ( Trichoderma
reesei）などが挙げられ、これらを単独で、或いは二種
類以上を併用することもできる。
【００１７】このようなトリコデルマ（Tricoderma）属
に属する菌が生産するセルラーゼを製造するには、一般
的な方法、例えば上述のアクレモニウム属の菌が生産す
るセルラーゼの製造方法等に従って行えば良い。
に属する菌が生産するセルラーゼを製造するには、一般
的な方法、例えば上述のアクレモニウム属の菌が生産す
るセルラーゼの製造方法等に従って行えば良い。
【００１８】請求項１記載の本発明のサイレージ調製用
セルラーゼ製剤は、上述の如きアクレモニウム（Acremo
nium）属の菌が生産するセルラーゼ（以下、しばしばＡ
ＣＣと略す。）とトリコデルマ（Tricoderma）属の菌が
生産するセルラーゼ（以下、しばしばＴＶＣと略す。）
とを含有するものである。
セルラーゼ製剤は、上述の如きアクレモニウム（Acremo
nium）属の菌が生産するセルラーゼ（以下、しばしばＡ
ＣＣと略す。）とトリコデルマ（Tricoderma）属の菌が
生産するセルラーゼ（以下、しばしばＴＶＣと略す。）
とを含有するものである。
【００１９】ここでアクレモニウム（Acremonium）属の
菌が生産するセルラーゼ、即ちＡＣＣと、トリコデルマ
（Tricoderma）属の菌が生産するセルラーゼ、即ちＴＶ
Ｃのうちのいずれか一方のみを用いたとしても、本発明
の目的を達成することはできない。即ち、ＡＣＣのみを
用いた場合には、排汁（ドレイン）の生成量が多く、サ
イレージの栄養価を低下させてしまう。一方、ＴＶＣの
みを用いた場合には、ｐＨが高くなり、発酵品質の優れ
た良質なサイレージを得ることができない。
菌が生産するセルラーゼ、即ちＡＣＣと、トリコデルマ
（Tricoderma）属の菌が生産するセルラーゼ、即ちＴＶ
Ｃのうちのいずれか一方のみを用いたとしても、本発明
の目的を達成することはできない。即ち、ＡＣＣのみを
用いた場合には、排汁（ドレイン）の生成量が多く、サ
イレージの栄養価を低下させてしまう。一方、ＴＶＣの
みを用いた場合には、ｐＨが高くなり、発酵品質の優れ
た良質なサイレージを得ることができない。
【００２０】請求項１記載の本発明のサイレージ調製用
セルラーゼ製剤は、通常、アビセラーゼ活性比で、前者
（ＡＣＣ）１に対して、後者（ＴＶＣ）０．１〜９．０
の割合で、好ましくはアビセラーゼ活性比で、前者（Ａ
ＣＣ）１に対して、後者（ＴＶＣ）０．２〜４．０の割
合で配合してなるものである。前者（ＡＣＣ）の比率が
１：０．１以上に高まると、排汁（ドレイン）が顕著に
増加してしまい、一方、前者（ＡＣＣ）の比率が１：
９．０以下になると、発酵品質が低下してしまうため、
いずれも好ましくない。
セルラーゼ製剤は、通常、アビセラーゼ活性比で、前者
（ＡＣＣ）１に対して、後者（ＴＶＣ）０．１〜９．０
の割合で、好ましくはアビセラーゼ活性比で、前者（Ａ
ＣＣ）１に対して、後者（ＴＶＣ）０．２〜４．０の割
合で配合してなるものである。前者（ＡＣＣ）の比率が
１：０．１以上に高まると、排汁（ドレイン）が顕著に
増加してしまい、一方、前者（ＡＣＣ）の比率が１：
９．０以下になると、発酵品質が低下してしまうため、
いずれも好ましくない。
【００２１】ここで、ＡＣＣとＴＶＣの配合比率を規定
するアビセラーゼ活性は、ｐＨ４．５（５０ｍＭ酢酸緩
衝液）、結晶性セルロースを基質とし、温度５０℃で行
い生成還元糖量をＤＮＳ法（ＩＵＰＡＣ規定方法）によ
り測定し、１分間に１マイクロモルのグルコース相当の
還元力の増加を有する活性を１単位とした。
するアビセラーゼ活性は、ｐＨ４．５（５０ｍＭ酢酸緩
衝液）、結晶性セルロースを基質とし、温度５０℃で行
い生成還元糖量をＤＮＳ法（ＩＵＰＡＣ規定方法）によ
り測定し、１分間に１マイクロモルのグルコース相当の
還元力の増加を有する活性を１単位とした。
【００２２】但し、ＡＣＣとＴＶＣの配合比率は、対象
とするサイレージ原料の種類等により若干異なるが、ア
ビセラーゼ活性比で、ＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：０．１〜
９．０、好ましくはＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：０．２〜４．
０である。
とするサイレージ原料の種類等により若干異なるが、ア
ビセラーゼ活性比で、ＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：０．１〜
９．０、好ましくはＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：０．２〜４．
０である。
【００２３】請求項１記載の本発明のサイレージ調製用
セルラーゼ製剤は、酵素の剤型としては上述の如き粉末
製剤をそのまま用いることも可能であるが、小麦粉など
を賦型剤にして混ぜ易い製剤としたものを用いても良
い。ここで賦型剤としては、例えば小麦粉、大豆粉、澱
粉、澱粉の部分分解物、グルコース、乳糖、米糠、フス
マなどを用いることができる。賦型剤の添加量は、原料
草へのセルラーゼ粉末製剤の設定添加量及び原料草への
添加作業の操作性を考慮すると、通常、セルラーゼ粉末
製剤の１０〜１００倍量の範囲が適当である。
セルラーゼ製剤は、酵素の剤型としては上述の如き粉末
製剤をそのまま用いることも可能であるが、小麦粉など
を賦型剤にして混ぜ易い製剤としたものを用いても良
い。ここで賦型剤としては、例えば小麦粉、大豆粉、澱
粉、澱粉の部分分解物、グルコース、乳糖、米糠、フス
マなどを用いることができる。賦型剤の添加量は、原料
草へのセルラーゼ粉末製剤の設定添加量及び原料草への
添加作業の操作性を考慮すると、通常、セルラーゼ粉末
製剤の１０〜１００倍量の範囲が適当である。
【００２４】また、請求項１記載の本発明のサイレージ
調製用セルラーゼ製剤としては、このような粉末製剤の
他、この粉末製剤を必要量水に溶解した液剤や、セルラ
ーゼ製造時に粉末化することなく、限外濾過法による濃
縮液より調製した液剤及び該液剤を適宜希釈した液剤で
も良い。液状製品は、限外濾過濃縮液に、通常は、安定
化剤としてソルビトールや還元マルトオリゴ糖類などの
糖アルコール類を添加し、保存剤として安息香酸やその
誘導体又はプロピオン酸などを添加して製造される。
調製用セルラーゼ製剤としては、このような粉末製剤の
他、この粉末製剤を必要量水に溶解した液剤や、セルラ
ーゼ製造時に粉末化することなく、限外濾過法による濃
縮液より調製した液剤及び該液剤を適宜希釈した液剤で
も良い。液状製品は、限外濾過濃縮液に、通常は、安定
化剤としてソルビトールや還元マルトオリゴ糖類などの
糖アルコール類を添加し、保存剤として安息香酸やその
誘導体又はプロピオン酸などを添加して製造される。
【００２５】なお、請求項１記載の本発明のサイレージ
調製用セルラーゼ製剤は、必要に応じて、ラクトバチル
ス、ストレプトコッカス、ラクトコッカス、ペディオコ
ッカス属の乳酸菌等からなる製剤及び／又はプロピオニ
バクテリウム属等の酸生成菌からなる製剤と併用するこ
とができる。この場合には、相乗作用による一層の品質
改善効果がある。
調製用セルラーゼ製剤は、必要に応じて、ラクトバチル
ス、ストレプトコッカス、ラクトコッカス、ペディオコ
ッカス属の乳酸菌等からなる製剤及び／又はプロピオニ
バクテリウム属等の酸生成菌からなる製剤と併用するこ
とができる。この場合には、相乗作用による一層の品質
改善効果がある。
【００２６】次に、請求項５記載の本発明は、上記の如
き請求項１記載の本発明の製剤で、サイレージ原料を処
理することを特徴とするサイレージの調製方法である。
き請求項１記載の本発明の製剤で、サイレージ原料を処
理することを特徴とするサイレージの調製方法である。
【００２７】ここでサイレージ原料としては、通常のサ
イレージに用いられる牧草、飼料作物、製造副産物、農
業副産物、飼料等の全てが対象となる。まず牧草として
は、例えば、イネ科牧草としては、チモシー、オーチャ
ードグラス、イタリアンライグラス、ペレニアルライグ
ラス、メドウフェスク、ギニアグラス等を用いることが
でき、マメ科牧草としては、アルファルファ、クローバ
等を用いることができる。次に、飼料作物としては、ト
ウモロコシ、ソルガム、大麦、ライムギ、ライコムギ等
を用いることができ、また、製造副産物としては廃糖
蜜、酢粕、ビール粕、トウフ粕、ミカン粕、焼酎粕等を
用いることができる。さらに、農業副産物としては、麦
藁、ビートトップ、ビートパルプ等を用いることができ
る。また、サイレージ原料としての飼料は、通常、発酵
飼料に使用される単味飼料及び配合飼料や濃厚飼料、こ
れら飼料と粗飼料とを混合した混合飼料等を用いること
ができる。
イレージに用いられる牧草、飼料作物、製造副産物、農
業副産物、飼料等の全てが対象となる。まず牧草として
は、例えば、イネ科牧草としては、チモシー、オーチャ
ードグラス、イタリアンライグラス、ペレニアルライグ
ラス、メドウフェスク、ギニアグラス等を用いることが
でき、マメ科牧草としては、アルファルファ、クローバ
等を用いることができる。次に、飼料作物としては、ト
ウモロコシ、ソルガム、大麦、ライムギ、ライコムギ等
を用いることができ、また、製造副産物としては廃糖
蜜、酢粕、ビール粕、トウフ粕、ミカン粕、焼酎粕等を
用いることができる。さらに、農業副産物としては、麦
藁、ビートトップ、ビートパルプ等を用いることができ
る。また、サイレージ原料としての飼料は、通常、発酵
飼料に使用される単味飼料及び配合飼料や濃厚飼料、こ
れら飼料と粗飼料とを混合した混合飼料等を用いること
ができる。
【００２８】サイレージ原料として牧草、飼料作物を用
いる場合は、原料草を刈り取り、そのまま用いるか、或
いは刈り取った後、１〜２日間放置して部分的に乾燥さ
せて用いる。この場合、原料草中の水分は５０〜８５
％、好ましくは６０〜８０％に調整する。その後、これ
らの原料草は、カッターなどで数センチメートル程度乃
至サイレージの方式に合わせた長さに切断してから用い
ることもできる。次に、製造副産物、農業副産物、原料
飼料等の場合も、水分を上記の範囲に調整した後、用い
ることができる。
いる場合は、原料草を刈り取り、そのまま用いるか、或
いは刈り取った後、１〜２日間放置して部分的に乾燥さ
せて用いる。この場合、原料草中の水分は５０〜８５
％、好ましくは６０〜８０％に調整する。その後、これ
らの原料草は、カッターなどで数センチメートル程度乃
至サイレージの方式に合わせた長さに切断してから用い
ることもできる。次に、製造副産物、農業副産物、原料
飼料等の場合も、水分を上記の範囲に調整した後、用い
ることができる。
【００２９】なお、サイレージの方式は、タワーサイ
ロ、バンカサイロ、スタックサイロ、ロールベール方
式、スチールやプラスチック容器を用いる方法など様々
な方式を適用できるが、気密性の高いものが好ましい。
ロ、バンカサイロ、スタックサイロ、ロールベール方
式、スチールやプラスチック容器を用いる方法など様々
な方式を適用できるが、気密性の高いものが好ましい。
【００３０】ところで、サイレージの発酵品質に大きく
影響を与える因子としては、水分を挙げることができ
る。水分は、通常、５０〜８５％、好ましくは６０〜８
０％に調整する。また、発酵温度もサイレージ品質に大
きな影響を与える。発酵品質保持、排汁（ドレイン）防
止の観点から、貯蔵温度は３０゜Ｃ以下、好ましくは２
５゜Ｃ以下にするのが良い。そして、貯蔵中の好気性菌
による変敗を抑制するため、容器を密閉し、嫌気度を高
めるのが基本である。さらに、サイレージ品質の安定や
開封後の好気的変敗を抑制する上で、原料草を詰め込ん
で密封したサイレージは、通常、少なくとも１ヶ月間以
上、好ましくは４５日間以上貯蔵・熟成させることが望
ましい。
影響を与える因子としては、水分を挙げることができ
る。水分は、通常、５０〜８５％、好ましくは６０〜８
０％に調整する。また、発酵温度もサイレージ品質に大
きな影響を与える。発酵品質保持、排汁（ドレイン）防
止の観点から、貯蔵温度は３０゜Ｃ以下、好ましくは２
５゜Ｃ以下にするのが良い。そして、貯蔵中の好気性菌
による変敗を抑制するため、容器を密閉し、嫌気度を高
めるのが基本である。さらに、サイレージ品質の安定や
開封後の好気的変敗を抑制する上で、原料草を詰め込ん
で密封したサイレージは、通常、少なくとも１ヶ月間以
上、好ましくは４５日間以上貯蔵・熟成させることが望
ましい。
【００３１】請求項５記載の本発明は、前記した如き請
求項１記載の本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤
を用いて、上記の如きサイレージ原料を処理することを
特徴とするものであり、具体的には、前記した如き請求
項１記載の本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤を
上記の如きサイレージ原料に添加して、これを処理する
ことを特徴とするものである。
求項１記載の本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤
を用いて、上記の如きサイレージ原料を処理することを
特徴とするものであり、具体的には、前記した如き請求
項１記載の本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤を
上記の如きサイレージ原料に添加して、これを処理する
ことを特徴とするものである。
【００３２】ここで請求項１記載の本発明のサイレージ
調製用セルラーゼ製剤をサイレージ原料に添加する時期
としては、牧草や飼料作物等の場合は、刈り取りから、
適当な長さに切断した原料草をサイロに詰め込み鎮圧ま
での作業時に添加することができる。また、その他の材
料の場合は、これをサイロに詰め込み鎮圧までの作業時
に添加することができる。添加方法としては、粉剤を散
布、混合しても良いし、液剤を噴霧しても良い。
調製用セルラーゼ製剤をサイレージ原料に添加する時期
としては、牧草や飼料作物等の場合は、刈り取りから、
適当な長さに切断した原料草をサイロに詰め込み鎮圧ま
での作業時に添加することができる。また、その他の材
料の場合は、これをサイロに詰め込み鎮圧までの作業時
に添加することができる。添加方法としては、粉剤を散
布、混合しても良いし、液剤を噴霧しても良い。
【００３３】サイレージ原料に対する請求項１記載の本
発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤の添加量、即
ち、上記ＡＣＣとＴＶＣの混合物の添加量は、アビセラ
ーゼ活性で、原料新鮮物重量１ｋｇ当たり、５〜３００
単位（Ｕ）、好ましくは１０〜２００単位（Ｕ）であ
る。サイレージ原料に対する上記ＡＣＣとＴＶＣの混合
物の添加量が、アビセラーゼ活性で、原料新鮮物重量１
ｋｇ当たり、５Ｕ／ｋｇ未満であると、サイレージとし
て発酵が不完全となりやすく、一方、３００Ｕ／ｋｇを
越えると、排汁（ドレイン）の増加や、コストパフォー
マンスの面から望ましくない。
発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤の添加量、即
ち、上記ＡＣＣとＴＶＣの混合物の添加量は、アビセラ
ーゼ活性で、原料新鮮物重量１ｋｇ当たり、５〜３００
単位（Ｕ）、好ましくは１０〜２００単位（Ｕ）であ
る。サイレージ原料に対する上記ＡＣＣとＴＶＣの混合
物の添加量が、アビセラーゼ活性で、原料新鮮物重量１
ｋｇ当たり、５Ｕ／ｋｇ未満であると、サイレージとし
て発酵が不完全となりやすく、一方、３００Ｕ／ｋｇを
越えると、排汁（ドレイン）の増加や、コストパフォー
マンスの面から望ましくない。
【００３４】なお、発酵品質、即ち得られたサイレージ
の品質としては、ｐＨが低く、乳酸産生量は高く、酪酸
産生量は少なく、揮発性塩基態窒素分の全窒素に対する
比率が低い方が良いとされている。ここで、低いｐＨ及
び乳酸産生量の増加は乳酸菌の増殖の、酪酸産生量の増
加は酪酸菌の増殖の、揮発性塩基態窒素分の全窒素に対
する比率の増加は蛋白質分解菌の増殖の、それぞれ指標
と考えられる。
の品質としては、ｐＨが低く、乳酸産生量は高く、酪酸
産生量は少なく、揮発性塩基態窒素分の全窒素に対する
比率が低い方が良いとされている。ここで、低いｐＨ及
び乳酸産生量の増加は乳酸菌の増殖の、酪酸産生量の増
加は酪酸菌の増殖の、揮発性塩基態窒素分の全窒素に対
する比率の増加は蛋白質分解菌の増殖の、それぞれ指標
と考えられる。
【００３５】
【実施例】次に、本発明を実施例により詳しく説明す
る。 実施例１ （１）アクレモニウム属由来のセルラーゼ粉末の調製 アクレモニウム属由来のセルラーゼ製剤を得るため、生
産培養を行った。培地は、全て以下の組成よりなる培地
を常法により加熱殺菌したものを用いた。
る。 実施例１ （１）アクレモニウム属由来のセルラーゼ粉末の調製 アクレモニウム属由来のセルラーゼ製剤を得るため、生
産培養を行った。培地は、全て以下の組成よりなる培地
を常法により加熱殺菌したものを用いた。
【００３６】〔培地組成〕セルロース４％、燐酸水素二
カリウム０．１６％、バクトペプトン１％、硝酸カリウ
ム０．６％、尿素０．２％、塩化カリウム０．１６％、
硫酸マグネシウム・７水塩０．１２％、硫酸亜鉛・７水
塩０．００１％、硫酸マンガン・７水塩０．００１％、
硫酸銅・５水塩０．００１％（ｐＨ４．０）。
カリウム０．１６％、バクトペプトン１％、硝酸カリウ
ム０．６％、尿素０．２％、塩化カリウム０．１６％、
硫酸マグネシウム・７水塩０．１２％、硫酸亜鉛・７水
塩０．００１％、硫酸マンガン・７水塩０．００１％、
硫酸銅・５水塩０．００１％（ｐＨ４．０）。
【００３７】上記培地５００ｍＬに、アクレモニウム・
セルロリティカス（Acremonium cellulolyticus TN)
(FERM BP-685)を接種し、４８時間撹拌し培養した。次
に、その培養液をシードとして１５リットル培養に、更
にスケールアップを続け、最終的に６００リットルタン
クで３００リットルの通気培養を７日間行った。得られ
た培養液をフィルタープレスにより濾過後、ろ液を限外
濾過装置により１５リットルまで濃縮し、乳糖２Ｋｇを
添加してスプレードライヤーを用い、粉末化した。この
結果、アビセラーゼ活性８５１単位／ｇのセルラーゼ粉
末を５．０ｋｇ得ることができた。
セルロリティカス（Acremonium cellulolyticus TN)
(FERM BP-685)を接種し、４８時間撹拌し培養した。次
に、その培養液をシードとして１５リットル培養に、更
にスケールアップを続け、最終的に６００リットルタン
クで３００リットルの通気培養を７日間行った。得られ
た培養液をフィルタープレスにより濾過後、ろ液を限外
濾過装置により１５リットルまで濃縮し、乳糖２Ｋｇを
添加してスプレードライヤーを用い、粉末化した。この
結果、アビセラーゼ活性８５１単位／ｇのセルラーゼ粉
末を５．０ｋｇ得ることができた。
【００３８】（２）トリコデルマ属由来のセルラーゼ粉
末の調製 一方、トリコデルマ属由来のセルラーゼ製剤を得るた
め、生産培養を行った。培地は、全て上記した如き培地
を、常法により加熱殺菌したものを用いた。
末の調製 一方、トリコデルマ属由来のセルラーゼ製剤を得るた
め、生産培養を行った。培地は、全て上記した如き培地
を、常法により加熱殺菌したものを用いた。
【００３９】上記培地５００ｍＬに、トリコデルマ・レ
ーゼイ（Trichoderma reesei MC-101 ）（FERM P-1465
0）を接種し、４８時間撹拌し培養した。次に、その培
養液をシードとして１５リットル培養に、更にスケール
アップを続け、最終的に６００リットルタンクで３００
リットルの通気培養を７日間行った。得られた培養液を
フィルタープレスにより濾過後、ろ液を限外濾過装置に
より１５リットルまで濃縮し、乳糖２ｋｇを添加してス
プレードライヤーを用い、粉末化した。この結果、アビ
セラーゼ活性５３０単位／ｇのセルラーゼ粉末を９．０
Ｋｇ得ることができた。
ーゼイ（Trichoderma reesei MC-101 ）（FERM P-1465
0）を接種し、４８時間撹拌し培養した。次に、その培
養液をシードとして１５リットル培養に、更にスケール
アップを続け、最終的に６００リットルタンクで３００
リットルの通気培養を７日間行った。得られた培養液を
フィルタープレスにより濾過後、ろ液を限外濾過装置に
より１５リットルまで濃縮し、乳糖２ｋｇを添加してス
プレードライヤーを用い、粉末化した。この結果、アビ
セラーゼ活性５３０単位／ｇのセルラーゼ粉末を９．０
Ｋｇ得ることができた。
【００４０】（３）アクレモニウム属由来のセルラーゼ
粉末とトリコデルマ属由来のセルラーゼ粉末との混合粉
末製剤の調製 次いで、アクレモニウム属由来のセルラーゼ粉末（ＡＣ
Ｃ）とトリコデルマ属由来のセルラーゼの粉末（ＴＶ
Ｃ）とを、アビセラーゼ活性比で、ＡＣＣ：ＴＶＣが、
それぞれ１：１、１：２、１：３、１：４となるように
秤量し、充分に混合して混合粉末製剤を調製した。
粉末とトリコデルマ属由来のセルラーゼ粉末との混合粉
末製剤の調製 次いで、アクレモニウム属由来のセルラーゼ粉末（ＡＣ
Ｃ）とトリコデルマ属由来のセルラーゼの粉末（ＴＶ
Ｃ）とを、アビセラーゼ活性比で、ＡＣＣ：ＴＶＣが、
それぞれ１：１、１：２、１：３、１：４となるように
秤量し、充分に混合して混合粉末製剤を調製した。
【００４１】得られた混合粉末製剤（ＡＣＣとＴＶＣが
１：１のもの）の各種酵素活性値は、次の表１に記載し
た通りであった。各種酵素活性測定は、ペクチナーゼ以
外は、ｐＨ４．５（５０ｍＭ酢酸緩衝液）、温度５０℃
の条件で行い、生成還元糖量をＤＮＳ法（ＩＵＰＡＣ規
定方法）により測定し、１分間に１マイクロモルのグル
コース相当の還元力の増加を有する活性を１単位とし
た。また、ペクチナーゼの活性測定は、ｐＨ４．５（５
０ｍＭ酢酸緩衝液）、温度２５℃の条件で行い、ペクチ
ン（１％）の粘度が１秒間に初発粘度の７５％に低下さ
せる活性を１単位として定義した。
１：１のもの）の各種酵素活性値は、次の表１に記載し
た通りであった。各種酵素活性測定は、ペクチナーゼ以
外は、ｐＨ４．５（５０ｍＭ酢酸緩衝液）、温度５０℃
の条件で行い、生成還元糖量をＤＮＳ法（ＩＵＰＡＣ規
定方法）により測定し、１分間に１マイクロモルのグル
コース相当の還元力の増加を有する活性を１単位とし
た。また、ペクチナーゼの活性測定は、ｐＨ４．５（５
０ｍＭ酢酸緩衝液）、温度２５℃の条件で行い、ペクチ
ン（１％）の粘度が１秒間に初発粘度の７５％に低下さ
せる活性を１単位として定義した。
【００４２】
【表１】
【００４３】実施例２ ０．０１Ｍの酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）で、サイレージ
原料１ｋｇ当たり５０Ｕの添加量に相当するように所定
の混合割合（ＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：４９〜１：０．０
５）に調整したＡＣＣ−ＴＶＣ合剤を溶解した液１ｍｌ
と、牧草を凍結乾燥させた後、０．１ｍｍの遠心型粉砕
器で粉砕した粉末（牧草乾燥粉末）０．２ｇとを、試験
管内で混合し、２５℃において２時間反応させた。反応
停止後、０．０１Ｍの酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）を２ｍ
ｌ加え、遠心（３０００ｒｐｍ、１０分）後、上清を蒸
留水で３０倍に希釈した。この液について、ＤＮＳ法で
還元糖を測定し、酵素の添加及び２５℃、２時間の反応
を除いて同様の処理をしたものをブランクとして、その
差を牧草粉末１ｇ当たりから生成された還元糖とし、こ
の結果を表２に示した。
原料１ｋｇ当たり５０Ｕの添加量に相当するように所定
の混合割合（ＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：４９〜１：０．０
５）に調整したＡＣＣ−ＴＶＣ合剤を溶解した液１ｍｌ
と、牧草を凍結乾燥させた後、０．１ｍｍの遠心型粉砕
器で粉砕した粉末（牧草乾燥粉末）０．２ｇとを、試験
管内で混合し、２５℃において２時間反応させた。反応
停止後、０．０１Ｍの酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）を２ｍ
ｌ加え、遠心（３０００ｒｐｍ、１０分）後、上清を蒸
留水で３０倍に希釈した。この液について、ＤＮＳ法で
還元糖を測定し、酵素の添加及び２５℃、２時間の反応
を除いて同様の処理をしたものをブランクとして、その
差を牧草粉末１ｇ当たりから生成された還元糖とし、こ
の結果を表２に示した。
【００４４】
【表２】
【００４５】表２の結果から、ＡＣＣ：ＴＶＣ＝１：0.
１〜１：９の混合比率において、ＴＶＣ単独及びＡＣＣ
単独の場合よりも糖生成力が多いことが分かる。
１〜１：９の混合比率において、ＴＶＣ単独及びＡＣＣ
単独の場合よりも糖生成力が多いことが分かる。
【００４６】実施例３ ０．０１Ｍの酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）で所定の添加量
（サイレージ原料１ｋｇ当たり１〜５００Ｕ）となるよ
うにＡＣＣ−ＴＶＣ（１：１）合剤を溶解した液１ｍｌ
と、実施例２と同様に調製した牧草乾燥粉末０．２ｇと
を、試験管内で混合し、２５℃で２時間反応させた。以
下、実施例２と同様の方法により還元糖の生成量を測定
し、この結果を表３に示した。
（サイレージ原料１ｋｇ当たり１〜５００Ｕ）となるよ
うにＡＣＣ−ＴＶＣ（１：１）合剤を溶解した液１ｍｌ
と、実施例２と同様に調製した牧草乾燥粉末０．２ｇと
を、試験管内で混合し、２５℃で２時間反応させた。以
下、実施例２と同様の方法により還元糖の生成量を測定
し、この結果を表３に示した。
【００４７】
【表３】
【００４８】第３表の結果から、チモシー、アルファル
ファとも、５Ｕ／ｋｇ以上の添加の場合、還元糖の生成
が顕著であることが分かる。
ファとも、５Ｕ／ｋｇ以上の添加の場合、還元糖の生成
が顕著であることが分かる。
【００４９】実施例４ 牧場で栽培した牧草（チモシー１番草）に乳酸菌（Lact
obacillus casei subsp. rhamnosus SBT-2300)株( FE
RM-P-13245 )、１０5 ｃｆｕ／ｇ・原料草新鮮物重）の
みを散布した実験区（対照区）、ＡＣＣ酵素製剤溶液
（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と乳酸菌とを散布し
た実験区（ＡＣＣ区）、実施例１記載のＡＣＣ−ＴＶＣ
混合粉末製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と
乳酸菌とを散布した実験区（実験区１〜４）、及びＴＶ
Ｃ酵素製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と乳
酸菌とを散布した実験区（ＴＶＣ区）を設け、各処理区
のｎ数は２とした。ハーベスターで収穫した牧草をカッ
ターで２〜３ｃｍに切断したものを２００ｋｇずつ計量
し、乳酸菌及び酵素を均一に混合後、３００リットルの
プラスティックサイロに詰め込み、ビニールフィルムで
密封した。１ヶ月間貯蔵後、開封し、得られたサイレー
ジの品質を分析した。なお、得られた７種のサイレージ
の乾物量は、全て約２０％であった。
obacillus casei subsp. rhamnosus SBT-2300)株( FE
RM-P-13245 )、１０5 ｃｆｕ／ｇ・原料草新鮮物重）の
みを散布した実験区（対照区）、ＡＣＣ酵素製剤溶液
（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と乳酸菌とを散布し
た実験区（ＡＣＣ区）、実施例１記載のＡＣＣ−ＴＶＣ
混合粉末製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と
乳酸菌とを散布した実験区（実験区１〜４）、及びＴＶ
Ｃ酵素製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と乳
酸菌とを散布した実験区（ＴＶＣ区）を設け、各処理区
のｎ数は２とした。ハーベスターで収穫した牧草をカッ
ターで２〜３ｃｍに切断したものを２００ｋｇずつ計量
し、乳酸菌及び酵素を均一に混合後、３００リットルの
プラスティックサイロに詰め込み、ビニールフィルムで
密封した。１ヶ月間貯蔵後、開封し、得られたサイレー
ジの品質を分析した。なお、得られた７種のサイレージ
の乾物量は、全て約２０％であった。
【００５０】サイレージの品質は、次のようにｐＨ、排
汁、有機酸組成（乳酸、酢酸、酪酸など）等を測定する
ことにより、評価した。即ち、サイレージを３倍量の蒸
留水で抽出した後、ｐＨはガラス電極法により、乳酸は
酵素法により、他の有機酸はガスクロマトグラフィーに
より、それぞれ測定した。また、排汁については、１０
０ｍｌの遠心管に一定量の砂、ガーゼ、検体１０ｇの順
に詰めて、５００Ｇ、１０分間の遠心後の検体の減少重
量より求め、それを以下の式により排汁指数として示し
た。この結果を表４に示す。
汁、有機酸組成（乳酸、酢酸、酪酸など）等を測定する
ことにより、評価した。即ち、サイレージを３倍量の蒸
留水で抽出した後、ｐＨはガラス電極法により、乳酸は
酵素法により、他の有機酸はガスクロマトグラフィーに
より、それぞれ測定した。また、排汁については、１０
０ｍｌの遠心管に一定量の砂、ガーゼ、検体１０ｇの順
に詰めて、５００Ｇ、１０分間の遠心後の検体の減少重
量より求め、それを以下の式により排汁指数として示し
た。この結果を表４に示す。
【００５１】
【数１】・排汁指数（％）＝〔（実験区排汁−対照区排
汁）／（ＡＣＣ区排汁−対照区排汁）〕×１００
汁）／（ＡＣＣ区排汁−対照区排汁）〕×１００
【００５２】
【表４】
【００５３】表４に示すように、ｐＨは、対照区、ＴＶ
Ｃ区に比べてＡＣＣ区の値が低く、ＡＣＣ−ＴＶＣ混合
粉末製剤区（実験区１〜実験区４）は、いずれもＡＣＣ
区と同等であった。次に、発酵品質を著しく低下させる
酪酸は、対照区、ＴＶＣ区で検出されたがＡＣＣ区及び
ＡＣＣ−ＴＶ混合粉末製剤区（実験区１〜実験区４）で
は検出されなかった。また、排汁指数から判断すると、
サイレージの栄養価を低下させる排汁の生成量は、対照
区、ＴＶＣ区に比べてＡＣＣ区が多いことが分かる。し
かし、ＡＣＣ−ＴＶＣ混合粉末製剤区（実験区１〜実験
区４）の排汁の生成量は、いずれもＡＣＣ区に比べて、
かなりの割合で減少することが分かる。
Ｃ区に比べてＡＣＣ区の値が低く、ＡＣＣ−ＴＶＣ混合
粉末製剤区（実験区１〜実験区４）は、いずれもＡＣＣ
区と同等であった。次に、発酵品質を著しく低下させる
酪酸は、対照区、ＴＶＣ区で検出されたがＡＣＣ区及び
ＡＣＣ−ＴＶ混合粉末製剤区（実験区１〜実験区４）で
は検出されなかった。また、排汁指数から判断すると、
サイレージの栄養価を低下させる排汁の生成量は、対照
区、ＴＶＣ区に比べてＡＣＣ区が多いことが分かる。し
かし、ＡＣＣ−ＴＶＣ混合粉末製剤区（実験区１〜実験
区４）の排汁の生成量は、いずれもＡＣＣ区に比べて、
かなりの割合で減少することが分かる。
【００５４】以上の傾向をまとめると、ＡＣＣ−ＴＶＣ
混合粉末製剤（実験区１〜実験区４）は、ＡＣＣ区と同
等に発酵品質が改善され、排汁の生成量はＡＣＣ区より
も少ないことが分かる。
混合粉末製剤（実験区１〜実験区４）は、ＡＣＣ区と同
等に発酵品質が改善され、排汁の生成量はＡＣＣ区より
も少ないことが分かる。
【００５５】実施例５ 実施例４で調製したサイレージを用いて、搾乳牛による
採食試験を行った。すなわち、搾乳牛２４頭を４群（各
群６頭ずつ）に分け、各群の搾乳牛の前にＴＶＣ区と実
験区のサイレージ（実験区１〜４のもの）とを、それぞ
れ別々のコンテナに１ｋｇずつ入れて同時に給与した。
搾乳牛に４分間自由摂取させ、各群６頭の平均採食量を
測定した。結果を表５に示す。
採食試験を行った。すなわち、搾乳牛２４頭を４群（各
群６頭ずつ）に分け、各群の搾乳牛の前にＴＶＣ区と実
験区のサイレージ（実験区１〜４のもの）とを、それぞ
れ別々のコンテナに１ｋｇずつ入れて同時に給与した。
搾乳牛に４分間自由摂取させ、各群６頭の平均採食量を
測定した。結果を表５に示す。
【００５６】
【表５】
【００５７】実施例６ 実施例４で調製したサイレージを用いて、搾乳牛による
採食試験を行った。すなわち、搾乳牛２４頭を４群（各
群６頭ずつ）に分け、各群の搾乳牛の前にＡＣＣ区と実
験区のサイレージ（実験区１〜４のもの）とを、それぞ
れ別々のコンテナに１ｋｇずつ入れて同時に給与した。
搾乳牛に４分間自由摂取させ、各群６頭の平均採食量を
測定した。結果を表６に示す。
採食試験を行った。すなわち、搾乳牛２４頭を４群（各
群６頭ずつ）に分け、各群の搾乳牛の前にＡＣＣ区と実
験区のサイレージ（実験区１〜４のもの）とを、それぞ
れ別々のコンテナに１ｋｇずつ入れて同時に給与した。
搾乳牛に４分間自由摂取させ、各群６頭の平均採食量を
測定した。結果を表６に示す。
【００５８】
【表６】
【００５９】表５及び表６の結果より、本発明のサイレ
ージ調製用セルラーゼ製剤により得られたサイレージ
（実験区１〜４）は、従来のＴＶＣ単独処理で得られた
サイレージ（ＴＶＣ区）、及びＡＣＣ単独処理で得られ
たサイレージ（ＡＣＣ区）と比べ、明らかに採食量が多
いことが分かる。従って、表４の結果などと考え合わせ
ると、本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤によれ
ば、発酵品質が高く、しかも排汁（ドレイン）による栄
養成分の逸失がないばかりでなく、牛の嗜好に合ったサ
イレージが得られると考えられ、飼料価値が高いもので
あると認められる。
ージ調製用セルラーゼ製剤により得られたサイレージ
（実験区１〜４）は、従来のＴＶＣ単独処理で得られた
サイレージ（ＴＶＣ区）、及びＡＣＣ単独処理で得られ
たサイレージ（ＡＣＣ区）と比べ、明らかに採食量が多
いことが分かる。従って、表４の結果などと考え合わせ
ると、本発明のサイレージ調製用セルラーゼ製剤によれ
ば、発酵品質が高く、しかも排汁（ドレイン）による栄
養成分の逸失がないばかりでなく、牛の嗜好に合ったサ
イレージが得られると考えられ、飼料価値が高いもので
あると認められる。
【００６０】実施例７ 牧場で栽培した牧草（チモシー１番草）に実施例４記
載の乳酸菌（１０5 ｃｆｕ／ｇ・原料草新鮮物重）のみ
を散布した実験区（対照区）と、牧場で栽培した牧草
（チモシー１番草）に実施例１記載のＡＣＣ−ＴＶＣ混
合粉末製剤溶液（配合比１：１、アビラーゼ活性で１
３．３、２６．５、５３．０、１０６．０Ｕ／ｋｇ・原
料新鮮物重）と乳酸菌とを散布した実験区（実験区Ａ〜
Ｄ）と、牧場で栽培した牧草（チモシー１番草）に実
施例４記載のＴＶＣ酵素製剤溶液（０．０１％）と乳酸
菌とを散布した実験区（ＴＶＣ区）とを設け、各処理区
のｎ数は２とした。ハーベスターで収穫した牧草をカッ
ターで２〜３ｃｍに切断したものを２００ｋｇずつ計量
し、乳酸菌及び酵素を均一に混合した後、３００リット
ルのプラスティックサイロに詰め込み、ビニールフィル
ムで密封した。１ヶ月間貯蔵後、開封し、得られたサイ
レージの品質を分析した。得られた６種のサイレージの
乾物量は全て約２０％であった。この結果を表７に示
す。
載の乳酸菌（１０5 ｃｆｕ／ｇ・原料草新鮮物重）のみ
を散布した実験区（対照区）と、牧場で栽培した牧草
（チモシー１番草）に実施例１記載のＡＣＣ−ＴＶＣ混
合粉末製剤溶液（配合比１：１、アビラーゼ活性で１
３．３、２６．５、５３．０、１０６．０Ｕ／ｋｇ・原
料新鮮物重）と乳酸菌とを散布した実験区（実験区Ａ〜
Ｄ）と、牧場で栽培した牧草（チモシー１番草）に実
施例４記載のＴＶＣ酵素製剤溶液（０．０１％）と乳酸
菌とを散布した実験区（ＴＶＣ区）とを設け、各処理区
のｎ数は２とした。ハーベスターで収穫した牧草をカッ
ターで２〜３ｃｍに切断したものを２００ｋｇずつ計量
し、乳酸菌及び酵素を均一に混合した後、３００リット
ルのプラスティックサイロに詰め込み、ビニールフィル
ムで密封した。１ヶ月間貯蔵後、開封し、得られたサイ
レージの品質を分析した。得られた６種のサイレージの
乾物量は全て約２０％であった。この結果を表７に示
す。
【００６１】
【表７】
【００６２】表７に示すように、ＡＣＣ−ＴＶＣ混合粉
末製剤区（実験区Ａ〜実験区Ｄ）のｐＨは、対照区に比
べて、いずれも低かった。ＡＣＣ−ＴＶＣ混合粉末製剤
区（実験区Ａ〜実験区Ｄ）では、散布量の増加に伴い、
ｐＨはより低下し、乳酸含量は増加した。また、ＡＣＣ
−ＴＶＣ混合粉末製剤区（実験区Ａ〜実験区Ｄ）は、少
ない酵素の添加量（ＴＶＣ区の１／４の活性量）で、Ｔ
ＶＣ区と同等のサイレージ品質が得られた。
末製剤区（実験区Ａ〜実験区Ｄ）のｐＨは、対照区に比
べて、いずれも低かった。ＡＣＣ−ＴＶＣ混合粉末製剤
区（実験区Ａ〜実験区Ｄ）では、散布量の増加に伴い、
ｐＨはより低下し、乳酸含量は増加した。また、ＡＣＣ
−ＴＶＣ混合粉末製剤区（実験区Ａ〜実験区Ｄ）は、少
ない酵素の添加量（ＴＶＣ区の１／４の活性量）で、Ｔ
ＶＣ区と同等のサイレージ品質が得られた。
【００６３】
【発明の効果】請求項１記載の本発明のサイレージ調製
用セルラーゼ製剤は、アクレモニウム属に属する菌が生
産するセルラーゼと、トリコデルマ属に属する菌が生産
するセルラーゼとを、一定範囲の比率で混合したもので
あって、得られるサイレージの発酵品質が優れているに
もかかわらず、排汁（ドレイン）生成量が少ないもので
ある。
用セルラーゼ製剤は、アクレモニウム属に属する菌が生
産するセルラーゼと、トリコデルマ属に属する菌が生産
するセルラーゼとを、一定範囲の比率で混合したもので
あって、得られるサイレージの発酵品質が優れているに
もかかわらず、排汁（ドレイン）生成量が少ないもので
ある。
【００６４】即ち、請求項１記載の本発明のサイレージ
調製用セルラーゼ製剤は、サイレージ発酵品質改善能の
高いアクレモニウム属の菌が産生するセルラーゼを用
い、しかもドレインによる栄養成分の逸失をきたすこと
なく、サイレージの発酵品質改善効果を保持している。
調製用セルラーゼ製剤は、サイレージ発酵品質改善能の
高いアクレモニウム属の菌が産生するセルラーゼを用
い、しかもドレインによる栄養成分の逸失をきたすこと
なく、サイレージの発酵品質改善効果を保持している。
【００６５】また、請求項１記載の本発明のサイレージ
調製用セルラーゼ製剤は、少ない酵素（セルラーゼ活
性）の添加量で、サイレージの発酵品質を改善すること
ができる。
調製用セルラーゼ製剤は、少ない酵素（セルラーゼ活
性）の添加量で、サイレージの発酵品質を改善すること
ができる。
【００６６】さらに、請求項５記載の本発明のサイレー
ジ調製方法は、サイレージ発酵品質改善能が高く、しか
もドレインによる栄養成分の逸失が少ない。このように
して得られたサイレージは、発酵品質が高く、しかもド
レインによる栄養成分の逸失が少なく、飼料価値が高い
ものである。
ジ調製方法は、サイレージ発酵品質改善能が高く、しか
もドレインによる栄養成分の逸失が少ない。このように
して得られたサイレージは、発酵品質が高く、しかもド
レインによる栄養成分の逸失が少なく、飼料価値が高い
ものである。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成９年３月３日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３９】 −１）（ＦＥＲＭ Ｐ−１４６５０）を接種し、４８時
間撹拌し培養した。次に、その培養液をシードとして１
５リットル培養に、更にスケールアップを続け、最終的
に６００リットルタンクで３００リットルの通気培養を
７日間行った。得られた培養液をフィルタープレスによ
り濾過後、ろ液を限外濾過装置により１５リットルまで
濃縮し、乳糖２ｋｇを添加してスプレードライヤーを用
い、粉末化した。この結果、アビセラーゼ活性５３０単
位／ｇのセルラーゼ粉末を９．０Ｋｇ得ることができ
た。
間撹拌し培養した。次に、その培養液をシードとして１
５リットル培養に、更にスケールアップを続け、最終的
に６００リットルタンクで３００リットルの通気培養を
７日間行った。得られた培養液をフィルタープレスによ
り濾過後、ろ液を限外濾過装置により１５リットルまで
濃縮し、乳糖２ｋｇを添加してスプレードライヤーを用
い、粉末化した。この結果、アビセラーゼ活性５３０単
位／ｇのセルラーゼ粉末を９．０Ｋｇ得ることができ
た。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正内容】
【００４９】実施例４ 牧場で栽培した牧草（チモシ−１番草）に乳酸菌（Ｌａ
ｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｒ
ｈａｍｎｏｓｕｓ ＳＢＴ−２３００）株（ＦＥＲＭ
Ｐ−１３２４５）、１０５ｃｆｕ／ｇ・原料草新鮮物
重）のみを散布した実験区（対照区）、ＡＣＣ酵素製剤
溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と乳酸菌とを散
布した実験区（ＡＣＣ区）、実施例１記載のＡＣＣ−Ｔ
ＶＣ混合粉末製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物
重）と乳酸菌とを散布した実験区（実験区１〜４）、及
びＴＶＣ酵素製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物
重）と乳酸菌とを散布した実験区（ＴＶＣ区）を設け、
各処理区のｎ数は２とした。ハーベスターで収穫した牧
草をカッターで２〜３ｃｍに切断したものを２００ｋｇ
ずつ計量し、乳酸菌及び酵素を均一に混合後、３００リ
ットルのプラスティックサイロに詰め込み、ビニールフ
ィルムで密封した。１ヶ月間貯蔵後、開封し、得られた
サイレージの品質を分析した。なお、得られた７種のサ
イレージの乾物量は、全て約２０％であった。
ｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｒ
ｈａｍｎｏｓｕｓ ＳＢＴ−２３００）株（ＦＥＲＭ
Ｐ−１３２４５）、１０５ｃｆｕ／ｇ・原料草新鮮物
重）のみを散布した実験区（対照区）、ＡＣＣ酵素製剤
溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物重）と乳酸菌とを散
布した実験区（ＡＣＣ区）、実施例１記載のＡＣＣ−Ｔ
ＶＣ混合粉末製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物
重）と乳酸菌とを散布した実験区（実験区１〜４）、及
びＴＶＣ酵素製剤溶液（５３Ｕ／ｋｇ・原料草新鮮物
重）と乳酸菌とを散布した実験区（ＴＶＣ区）を設け、
各処理区のｎ数は２とした。ハーベスターで収穫した牧
草をカッターで２〜３ｃｍに切断したものを２００ｋｇ
ずつ計量し、乳酸菌及び酵素を均一に混合後、３００リ
ットルのプラスティックサイロに詰め込み、ビニールフ
ィルムで密封した。１ヶ月間貯蔵後、開封し、得られた
サイレージの品質を分析した。なお、得られた７種のサ
イレージの乾物量は、全て約２０％であった。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:885） (72)発明者 山辺 倫 茨城県つくば市東１−１−３ 工業技術院 生命工学工業技術研究所内 (72)発明者 浜谷 徹 埼玉県坂戸市千代田５−３−１ 明治製菓 株式会社生物科学研究所内 (72)発明者 河野 敏明 埼玉県坂戸市千代田５−３−１ 明治製菓 株式会社生物科学研究所内 (72)発明者 窪田 英俊 神奈川県川崎市幸区堀川町580 明治製菓 株式会社内 (72)発明者 三浦 俊治 北海道江別市西野幌36番地１ 雪印種苗株 式会社技術研究所内 (72)発明者 北村 亨 北海道江別市西野幌36番地１ 雪印種苗株 式会社技術研究所内 (72)発明者 山下 征夫 北海道江別市西野幌36番地１ 雪印種苗株 式会社技術研究所内
Claims (5)
- 【請求項１】 アクレモニウム（Acremonium）属の菌が
生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の
菌が生産するセルラーゼとを含有するサイレージ調製用
セルラーゼ製剤。 - 【請求項２】 アクレモニウム（Acremonium）属の菌が
生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の
菌が生産するセルラーゼとを、アビセラーゼ活性比で、
前者１に対して、後者０．１〜９．０の割合で配合して
なる請求項１記載のサイレージ調製用セルラーゼ製剤。 - 【請求項３】 アクレモニウム（Acremonium）属の菌
が、アクレモニウム・セルロリティカス（Acremonium
cellulolyticus )である請求項１〜２記載のサイレージ
調製用セルラーゼ製剤。 - 【請求項４】 トリコデルマ（Tricoderma）属の菌が、
トリコデルマ・ビリデ（Tricoderma viride)及び／又は
トリコデルマ・レーゼイ( Trichoderma reesei）である
請求項１〜３記載のサイレージ調製用セルラーゼ製剤。 - 【請求項５】 アクレモニウム（Acremonium）属の菌が
生産するセルラーゼとトリコデルマ（Tricoderma）属の
菌が生産するセルラーゼとを含有する製剤を用いてサイ
レージ原料を処理することを特徴とするサイレージの調
製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8078129A JP3051900B2 (ja) | 1996-03-07 | 1996-03-07 | サイレージ調製用セルラーゼ製剤及びそれを用いたサイレージの調製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8078129A JP3051900B2 (ja) | 1996-03-07 | 1996-03-07 | サイレージ調製用セルラーゼ製剤及びそれを用いたサイレージの調製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09238679A true JPH09238679A (ja) | 1997-09-16 |
| JP3051900B2 JP3051900B2 (ja) | 2000-06-12 |
Family
ID=13653283
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8078129A Expired - Lifetime JP3051900B2 (ja) | 1996-03-07 | 1996-03-07 | サイレージ調製用セルラーゼ製剤及びそれを用いたサイレージの調製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3051900B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001231465A (ja) * | 2000-02-24 | 2001-08-28 | Natl Inst Of Advanced Industrial Science & Technology Meti | 反芻動物の飼料用酵素剤 |
| JP2010110742A (ja) * | 2008-11-10 | 2010-05-20 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | 発酵残渣濃縮液の製造方法及び飼料の製造方法 |
| JP2020184937A (ja) * | 2019-05-15 | 2020-11-19 | 雪印種苗株式会社 | セルロース分解能増強組成物及びセルロース分解能増強変異株 |
-
1996
- 1996-03-07 JP JP8078129A patent/JP3051900B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001231465A (ja) * | 2000-02-24 | 2001-08-28 | Natl Inst Of Advanced Industrial Science & Technology Meti | 反芻動物の飼料用酵素剤 |
| JP2010110742A (ja) * | 2008-11-10 | 2010-05-20 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | 発酵残渣濃縮液の製造方法及び飼料の製造方法 |
| JP2020184937A (ja) * | 2019-05-15 | 2020-11-19 | 雪印種苗株式会社 | セルロース分解能増強組成物及びセルロース分解能増強変異株 |
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|---|---|
| JP3051900B2 (ja) | 2000-06-12 |
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