JPH08503657A

JPH08503657A - 膜を使用するタキサン溶質の処理

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Publication number: JPH08503657A
Application number: JP6513353A
Authority: JP
Inventors: アール．カーバー，デビッド; アール．プラウト，ティモシー; ティー．ワークマン，クリストファー; エル．ヒューズ，チャールズ
Original assignee: ナプロバイオセラピューティクス，インコーポレイテッド
Priority date: 1992-11-27
Filing date: 1993-11-24
Publication date: 1996-04-23
Anticipated expiration: 2014-09-06
Also published as: JP2945479B2; EP0675754A1; WO1994012268A1; US5549830A; EP0675754A4

Abstract

(57)【要約】溶質成分としてタキサン溶質を含有する供給液体（１２２）を処理して、少なくとも１種類の溶質成分を除去する方法において、第１領域と第２領域（１１６，１１８）を分離するために半透膜（１１５）を使用する。供給液体（１２２）を膜に接触させて第１領域（１１６）中に置き、逆浸透によって、膜（１１５）を通して第２領域（１１８）へ供給液体の成分を移動させるのに圧力をかけて、第１領域（１１６）に少なくとも１種類の溶質成分を含有する濃縮水を形成し、第２領域（１１８）に溶媒成分の一部を含有する浸透水を形成する。選択された濃縮水又は浸透水は、更に第２の膜（１１５’）、好ましくはより大きいか同等の孔径の膜を通して移動させられてもよい。

Description

【発明の詳細な説明】膜を使用するタキサン溶質の処理発明の分野一般に、本発明は、供給液体を処理して、供給液体中に溶解又は懸濁している溶質を除去する方法に関するものである。詳細には、本発明は、溶質からなる混合物を含有する非水性の供給液体を処理して、望ましい溶質を除去する方法に関するものである。より詳細には、この方法は溶液中に存在するタキサン（taxane ）物質の濃縮及び精製に関するものであり、また、この方法をタキサン生成物を製造するためにタキサンの濃縮及び精製への応用に関して以下に記載する。発明の背景本発明の方法においては、供給液体中の溶質量を濃縮／精製するために逆浸透技術又は限界濾過技術が利用される。逆浸透又は限界濾過のどちらかとしての方法の分類は、膜の孔径に依存する。逆浸透膜の呼び分子量カットオフは、１０００ドルトン以下であり、限界濾過膜の呼び分子量カットオフは、１０００ドルトンより大きい。本発明においては、溶質からなる混合物を含有する非水性溶液中の溶質を濃縮／精製するために、逆浸透法が利用される。非水性溶液は、主溶媒成分として水を含有しない溶液と定義される。逆浸透膜は、膜が水溶液に対して浸透性を有するように製造されるのが典型的である。水が通過するように適合させられた膜は、非水性溶媒の場合では実質的に異なる特徴を示し得る。本発明においては、逆浸透又は限界濾過をタキサンの精製／濃縮に使用する。タキサンは、セイヨウイチイ（Taxusbrevifolia）等の或る種の天然草木に見いだされるジテルペン類である。タキサンの例としては、タキソール、セファロマニン（cephalomannine）、バカティンIII（BaccatinIII）等がある。タキソールは抗ガン活性を明示しているので、タキサン特にはタキソールは医療界では多数の研究の対象となっている。他のタキサンの多くは、この抗ガン活性を明示していない。しかしながら、これら他のタキサンは、タキソール又はタキソールに類似した化合物へ実験室で合成し得るので興味が持たれている。タキソールを生成する最も容易に利用可能で便利な手段は、多量の溶剤を使用して植物原料からそれや他のタキサンを抽出して、タキサンと多量の溶剤からなる微細な濃縮液及び固体の残渣を含有するミセルを生成することである。ミセル中のタキサン特にタキソールは、約８５０ドルトンの分子量を有する。１０００ドルトンより大きい呼び分子量カットオフを有する限界濾過膜は、濃縮を示すことなく、これらの膜を通してタキサン物質を通過させることが求められるであろう。非水系溶媒だけでなく溶質からなる混合物を含有する精製されていないミセルでは、逆浸透方法は望ましい溶質を精製することに成功しそうもなかった。逆浸透膜は典型的には、混合された溶質を含まない溶液を少なくとも部分的に精製するのに最も好都合である。本発明の要約本発明の目的は、溶液中の溶媒を沸騰するまでは加熱することなく、溶液中のタキサンを濃縮する方法を提供することである。本発明の他の目的は、タキサンを含有する溶液を処理して、タキサンを分解させずにその中のタキサンを濃縮する方法を提供することである。更に本発明の他の目的は、供給液体を処理して、限界濾過方法で望ましくない溶質を除去することによって、望ましい溶質を濃縮する方法を提供することである。更に本発明の他の目的は、溶液からの溶媒を再利用する方法を提供することである。本発明によると、供給液体を含有するタキサンを処理する方法が提供されている。この供給液体は、溶媒成分と少なくとも１種類の溶質成分を含有する溶液として形成される。供給液体を含有するこのタキサンを処理する方法は、以下の工程によって供給液体から少なくとも１種類の溶質成分を除去する。：第２領域から第１領域を分離する半透膜を供給する工程；供給液体を第１領域と接触させる工程；逆浸透によって、膜を通して第１領域から第２領域へ供給液体の成分を移動させるのに十分な圧力をかける工程。この様に、第１領域に少なくとも１種類の溶質成分を含有する濃縮水を形成し、第２領域に溶媒を含有する浸透水を形成する。次の工程は、望ましい溶質成分を含有するそれぞれ１つの濃縮水及び浸透水を回収することからなる。最初の方に示した通り、本発明は特にタキサンを含有する溶液中のタキサンの濃縮に適用できる。溶液を処理する方法は、以下の工程によって溶液から溶質を分離する。：選択された溶質を保持させるように適合させられ、かつ１０００１ドルトン未満の孔径を有する第１半透膜によって、第２領域から第１領域を分離する工程；第１領域中に供給液体を置く工程；第１領域から第２領域へ、第１の半透膜を通して供給液体を移動させるのに十分な圧力をかけ、第１領域に濃縮水を形成し第２領域に浸透水を形成する工程；次いで、タキサンを含有するそれぞれ１つの濃縮水及び浸透水を回収する工程。本発明のこれらの目的及び他の目的は、添付の図面を一まとめにして好ましい実施態様に関する以下の詳細な説明を考慮すると、より容易に認識し理解するようになるであろう。図面の簡単な説明図１は、従来技術において知られており、本発明による方法の第１の実施態様において実現されている通りの逆浸透／限界濾過装置の図式の典型である。図２は、図１において示される逆浸透／限界濾過のモジュールの図式の典型である。図３は、本発明による方法の第２の実施態様において実現されている通りの２段階の装置の図式の典型である。実施態様の簡単な説明本発明は、供給液体を処理して、供給液体中に溶解又は懸濁している溶質を除去する方法に関するものである。より詳細には、この方法は、溶液中に望ましくない残渣が存在するタキサンを含有する溶液から溶質を濃縮／精製するのに特に有用である。この方法をタキサンの濃縮及び精製への応用に関して以下に記載し、本発明の方法論によって調製されたタキサン生成物を請求する。本発明は、逆浸透方法又は限界濾過方法のどちらかをタキサン及び他の化合物に適用することに関する。上記にて言及した通り、「逆浸透」と「限界濾過」の間の差異は１つの膜孔径である。約１０００ドルトンより小さい「カットオフ」即ち孔径を有する膜を使用して、約１０００ドルトンより小さい径の化合物を通過させそれより大きい化合物を保持する場合には、その方法は典型的に逆浸透と呼ばれる。限界濾過膜のカットオフは、約１０００ドルトンより大きい。本発明の逆浸透／限界濾過方法においては、従来技術において知られている標準的な装置が使用される。それら装置は、濾過膜、モジュール、供給液体を循環させるための循環装置、膜の供給側にある領域に圧力をかけるための加圧装置及び濃縮水や浸透水を収集するための収集貯蔵器からなる。第１の代表的な逆浸透／限界濾過装置の図式図を図１に示し、第２の代表的な逆浸透／限界濾過装置を図３に示す。図２は、図１及び図３に示された装置のどちらかで使用され得る代表的な膜のモジュールの図式図を描く。図１に示される装置は、溶質よりも小さい分子量を有する化合物から溶質を分離する状況で使用されるのが典型的である。ここで、濾過膜は溶質よりも小さいが他の望ましくない化合物よりも大きいカットオフを有するように選択される。望ましい溶質は浸透水中に保持される一方、溶媒及び望ましくない化合物は濃縮水を形成する。一方、図３の装置は、望ましい溶質をより大きな分子量の化合物から分離する場合に使用されるだろう。この場合、カットオフが望ましい溶質の分子量より大きいが、望ましくない化合物の分子量より小さい膜を有する第１の方法が使用される。従って、望ましい溶質及び溶媒が浸透水を形成し、一方望ましくない化合物が濃縮水中に残る。次いで第２の方法は、溶媒及び多分他の望ましくない化合物を望ましい溶質から分離するために使用され得る。この方法においては、カットオフが望ましい溶質の分子量よりも小さい膜により、溶質を第２の方法の濃縮水として保持する一方、溶媒及びより小さい化合物は第２の浸透水として膜を通り抜ける。図１及び図３に代表的に示されているどちらの装置においても、多岐管、バルブ、パイプ等の包含物を詳細に示すことを、簡単にするために、また、その装置の「配管工事」は当業者に知られているので省略していることが理解されるべきである。次いで、図１において、代表的な装置１０は、膜１５によって第１又は濃縮水領域１４と第２又は浸透水領域１６に分離することを示す逆浸透／限界濾過モジュール１２を含有する。供給液体は、供給液貯蔵器又は供給液源２２に接続されたポンプ２０を使用して、濃縮水領域１６側の逆浸透／限界濾過モジュール１２に供給される。圧力を圧力源２４によって濃縮水領域１６にかける。これにより、濃縮水領域１６の圧力が浸透水領域１８よりも大きい時には、膜１５を通して圧力差が生じる。モジュール１２は標準的な方法で作動し、供給液体を膜１５を通る浸透水と膜を通らず濃縮水領域１６中に「保持」される濃縮水に分離する。図１において、浸透水は逆浸透／限界濾過モジュール１２から取り除かれ、浸透水貯蔵器２６に貯蔵されるよう示されている。逆浸透／限界濾過モジュール１２からの濃縮水は貯蔵器２８に貯蔵される。装置１０の修正はよく知られているので、可能な変更の全ては図１に描写していない。例えば、圧力源２４は、浸透水領域１８に接続された真空源に置き換えられて、負の圧力をかけて膜１５を隔てて圧力差を生じさせ得る。少なくとも、使用される装置の型は、逆浸透／限界濾過系の大きさに合うように、また必要とされる圧力のレベルに合うように選択されるべきである。圧力が高まるに連れて、膜の寿命が短くなる傾向があり；圧力が低くなるに連れて、膜の寿命が長くなる傾向がある。圧力源及び圧力レベルを選択する際には、使用された膜の置き換えにかかる費用と努力を考慮すべきである。同様に、膜１５として使用され得る膜は様々あり、これらの膜は様々な幾何学的な外形を有していてよく、従来技術において知られている通りの、様々な型のモジュールに組み込み得る。一般に、膜には３つの幾何学的な形がある。：（１）平板形；（２）中空糸形；及び（３）管形。平板形膜は、比較的厚みの小さいシート状のパネルに形成されている。中空糸形膜は、連続的な環状の単繊維として形成されており、管形膜は、長い中空の管として形成されている。更には、逆浸透系において使用される膜は、化学的にはセルロース系又は非セルロース系として分類される。セルロース系とは、セルロースアセテート、セルローストリアセテート、及びその２つの混合から形成される膜を呼ぶ。非セルロース系膜は、様々な合成ポリマー、例えばポリスルホン等から形成される。化学的構造は丈夫さ及び費用に影響するので、膜を選択する場合には膜の実際の化学的構造を考慮に入れなければならない。これらの膜は、水溶液を濾過し非水溶媒を濾過しないように構成されているので、化学的構造はまた、非水系溶液における膜の挙動にも影響を与え得る。この様に、非水溶媒が膜に与える影響は測定されなければならない。膜は通常、次に望ましい系に組み入れられ得るモジュールの中に置かれ、モジュールの型は逆浸透／限界濾過方法において使用される特定の膜を収容するのに使用される物理的構造を呼ぶ。膜の外形に基づく異なる膜を収容するように適合させられた４つの異なるモジュールがある。「スパイラル形」モジュール及び「平板形」モジュールは、平板形膜と共に使用される。「管形」モジュールは管状膜と共に使用され、「中空糸形」モジュールは中空糸膜と共に使用される。それぞれの場合において、モジュールは膜を支持し、供給流と浸透水流からの濃縮水流とに分離する。図２に関して、代表的なモジュール１２が、平板形膜１５を支持する平板形モジュールとして図式の形で示されている。供給液体３０は矢印「Ａ」で示されるように、入口３２でモジュール１２に入る。圧力を圧力入口３４でかけ、矢印「Ｂ」で示されるように、無理に浸透水３６を膜１５を通してチャンバー３８に押しやる。次いで、得られた濃縮水４０は矢印「Ｃ」で示されるように、モジュール１２を出ていき得る。ここで、高圧力の供給液体３０は望ましい溶質４８を含有し、供給液体３０は第１の濃縮水領域１６において膜１５の第１の側４２に接触する。この実施態様において、供給液体３０は、浸透水３６及びその残りが濃縮水４０になるに連れて、膜１５を通り抜ける供給液体４５の一部と共に膜１５の第１の側４２上を接触しながら流れが連続的に通る。接触方向における供給液体３０の流体速度により、膜１５の表面４２で集まる傾向のある保持された望ましい溶質４８の大部分がさらわれる。次いで、濃縮水４０は回収され、望ましい溶質は更に精製させられ得る。浸透水３６として供給液体３０の一部を除去するのために、濃縮水４０中の溶質４８の得られる濃度は、元の供給液体３０中の溶質４８の元の濃度より増加する。典型的には、浸透水３６は捨てられるか又は溶媒を精製及び再利用するために処理される。少しの望ましい溶質４８が浸透水３６に通りに抜けることが判る場合には、浸透水３６は回収され、吸着カラムを通して失われた溶質４８を回収する。図３に関しては上記にて言及した通り、供給液体中の中位の大きさの溶質から大きい残渣と小さい残渣を除去するのが望ましい場合に使用するために、２段階の装置が開示されている。図３においては、２段階の装置１１０が示されており、それにおいては、供給液体がポンプ１２０を使用して供給液体源１２２から膜１１５を含有する第１モジュール１１２へくみ上げられる。膜１１５はモジュール１１２を第１の濃縮水領域１１６と第１の浸透水領域１１８とに分離する。濃縮水領域１１６は、圧力源１２４との接続によって加圧される。小さい大きさの望ましくない溶質を含む小さめの溶質を含有する第１の浸透水は、膜１１５を通って浸透水領域１１８へ移る。次いで、ポンプ１２１を使用して第２モジュール１１３へくみ上げられる。一方、取り除かれた大きめの望ましくない溶質を含有する濃縮水領域１１６に残っている濃縮水は、吸着カラム１１４に濃縮水として移され得る。このカラムは、１５０で濃縮水を各留分に、次いで更に処理することに関心が向けられるか、又は、１つまたはその他の理由から膜を通らなかった小さめの望ましい溶質をある程度含有し得る望ましい溶質（Ｉ）に分離するのに使用され得る。これは、１５２で代表される。これら吸着カラムを使用することは勿論従来技術においてよく知られている。浸透水をモジュール１１３へ導く。モジュール１１３は膜１１５よりも小さい孔径の膜１１５’を含有し、望ましい溶質を拒否する程機能的に作用する。濾過膜１１５’は、モジュール１１３を第２の濃縮水領域１１７と第２の浸透水領域１１９とに分離する。この例においては、望ましい溶質（II）は膜１１５の孔径が小さいために膜１１５を通らず、溶質（II）は１６０でモジュール１１３からの濃縮水として回収され得る。次いで、モジュール１１３からの浸透水を形成する溶媒及び小さめの大きさの溶質は１６２で回収され得る。前の通り、これら溶媒及び溶質は所望の通りにその溶媒又は溶質を精製するために更に処理され得る。本発明は、バイオマスからタキサンを回収する際に適用するにおいて、標準の逆浸透／限界濾過方法体系から外れない。知られている通り、タキサンは植物原料中に、特にはセイヨウイチの木、TaxusBrevifolia等のイチイ属種（イチイ科）に存在する。医療界で特に興味を持たれているこの植物原料から抽出されるタキサンはタキソール及び、バカティンIII、１０−デアセチルタキソール、セファロマニン、１０−デアセチルバカティンIII等のタキソールを合成し得る他のタキサン類である。本発明は、期待されていず驚いたことにタキサンを効率よく回収する方法で、逆浸透／限界濾過技術をバイオマスからタキサンを抽出するのに使用される溶媒系に適用する。好ましい実施態様におけるバイオマスは、Taxusbrevifoliaの樹皮又は葉及び小枝である。イチイ属のバイオマスからタキサンを抽出するのに使用される典型的な溶媒は、メタノール、エタノール若しくはメタノール及びメチレンクロライド等の有機溶媒の混合物である。これらの有機溶媒は典型的に湿ったバイオマスと接触させられて、溶液を溶媒によってバイオマスから抽出する。この溶液は化合物が粗混合されているミセルである。ミセルは溶媒及び望ましい溶質を含有しており、その溶質は好ましい実施態様においてタキサン化合物やタキサンよりも大きい分子量や小さい分子量の両方を有し得る他の化合物である。それゆえに、このミセルが逆浸透／限界濾過処理にとって供給液体を決定する。従って、本発明の好ましい実施態様において得られるミセルは非水系溶媒と少なくとも１種類の溶質としてのタキサンとから形成される非水系溶液である。また、供給液体が非水系である場合に逆浸透／限界濾過膜は予期できない程度に機能することも見いだした。本発明の開発過程において、供給液体中に存在する非水系溶媒が膜の期待されている浸透性に影響を及ぼすことが判明し、試験された膜の約半分は供給液体の存在下において特徴的でない挙動を示した。これは、逆浸透膜がその性質において親水性であることが多いためであろう。非水系溶媒は水和量や従って膜の表面の浸透性を変える傾向がある。それ故に、水溶液中の１０００ドルトン未満の分子量の溶質物質を通過するように適合させられている膜の中には、溶液が粗ミセルの場合分子量８５０ドルトンの大部分の溶質物質を保持するものもあるだろう。例えば、望ましい溶質がタキソール又は他のタキサンである場合、望ましい溶質の分子量は８５０ドルトンである。この様に、呼び分子量カットオフが１０００の膜は、浸透水に溶質を通すことが期待され、呼び分子量カットオフが５００の膜は、溶質を保持することが期待されている。しかしながら、これらの期待される結果は達成されるのが必要なわけではない。呼び分子量カットオフが１０００ドルトンの膜の中にはタキサンを９０％通過させたものもあるし、呼び分子量カットオフが１０００ドルトンの膜の中には約９０％保持したものもある。呼び分子量カットオフが１００００の膜は、９０％のタキサンのみを通過させ１０％保持し、一方呼び分子量カットオフが５００の膜は、４％のタキサン物質を通過させた。少なくとも３つの因子が膜の浸透性に影響し得ることが明らかであり、それは、膜の化学組成、供給液体中で使用される溶媒及び溶質、並びに、製造者の品質管理基準である。以下で議論された逆浸透／限界濾過の例を再検討する前に、本発明においてはミリポア社の平板形セルロースアセテート膜を、タキサンを分離するためにミリポア社のスパイラル形限界濾過カートリッジ又はヘリコン５０ｓｑ．ｆｔのスパイラル形カートリッジ内で使用したことを理解するできである。しかしながら、本発明においてはどんなモジュールでも、どんな形の膜でも、またどんな膜の型でも使用され得る。供給液体はアルコール溶媒及び望ましい溶質であるタキサンを含有する溶液である。アルコール溶媒がTaxusbrevifolia等のバイオマスを通過させられ、次いで貯蔵される場合、得られるミセルは５０００ドルトンより大きい分子量の残渣溶質を有するであろう。この様に、呼び分子量カットオフが５０００の膜は、望ましくない溶質及び残渣が濃縮液に入るのを退けるために使用され得る。呼び分子量カットオフが５０００の膜を使用することは、タキサンを含有する供給液体が加熱又はバイオマスから抽出された後長期間貯蔵された場合に特に有用である。加熱又は貯蔵された供給液体は、呼び分子量カットオフが５０００の膜で除去され得る分子量の大きい残渣を有する傾向がある。供給液体が不利な条件に置かれた場合、特徴的に機能する（即ち、１０００ドルトンより小さい溶質を通す）呼び分子量カットオフが１０００の膜を使用するのが典型的である。また、望ましい溶質の大きさよりも大きい望ましくない溶質を少量だけ含有する供給液体は、溶質が浸透膜を通って処理される必要はなく、望ましい溶質を退けて大部分の溶媒を浸透水に通す膜を通されるだけでよいことも当業者は理解するべきである。それ故にある例において、この膜が効果的に濃縮水中の大部分のタキサンを保持する場合には、タキサン及び溶媒を含有する供給液体が呼び分子量カットオフが１０００の逆浸透膜を通って処理される第１段階だけを使用し得る。（呼び分子量カットオフが１０００の膜は８５０ドルトンのタキサンを通過させることが期待されているだろうけれども。）本発明の２段階の方法において、第１の膜１１５が大部分のタキサンを第１の浸透水に通すのが望ましい。第２の膜１１５’ は非水溶液中の８５０ドルトンのタキサン溶質を退ける膜である。しかしながら、以下の実施例に見られる様に、第１の溶液を造る粗ミセルは様々な膜に様々に影響を与えるので、特定の膜の呼び分子量カットオフの孔径を知ることは十分ではない。次いで、下記の非制限的実施例は、図３に図で示された型の本発明に従った２つの膜の逆浸透方法から得られるタキサン類、詳細にはタキソールの濃縮に関するデーターを与える。科学的また技術的用語は全て当業者に理解される通りの意味を有する。以下の３つの例において、Taxusbrevifoliaの樹皮のメタノール抽出で形成された選択された量のミセルを分析して、溶液のタキソール純度を測定した。例Ｉ例Ｉの反応条件は以下の通りである。：供給液体のタキソール純度．２２％タキソール反応温度室温高圧濾過ハウジング内のＰＳＩ６０〜８０ｐｓｉ膜の直径１インチ第１の膜１０００呼び分子量カットオフスペクトル（Ｃ型）第２の膜５００呼び分子量カットオフ精密濾過系（ＭＦＳ）第１の膜の化学組成セルロースアセテート第２の膜の化学組成ポリイオニック選択された量の供給液体を６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で第１の膜を通して逆浸透にかけた。浸透水及び濃縮水を収集して、タキソールの存在割合及びそのタキソールの純度を評価した。呼び分子量カットオフが１０００のスペクトル膜は以下の結果を有していた。：Ａ．第１の膜呼び分子量カットオフが１０００のスペクトル膜は、約８５０ドルトンのタキソール物質を評価した。タキソールの約５％がこの段階で失われた。回収された浸透水液は、供給液体中に見いだされた残渣当たりのタキソールと比較して、１．３２倍の量の残渣当たりのタキーソル（単位体積当たりの重量）を含有していた。次いで、この浸透水を下記に記載される通りの第２の膜を通した。Ｂ．第２の膜浸透水を６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で膜を通して逆浸透にかけた。呼び分子量カットオフが５００の膜は、浸透水中で５〜１０％のタキソールだけ失われたが、ほとんどのタキソールを保持した。しかしながら、浸透水はタキソールを高割合、．５３％有しており、浸透水中の実際のタキソールの量は、非常に小さく、大部分のタキソールは濃縮水中にあった。第２の膜の濃縮水中のタキソールは、元の供給液体と比較して、１．４５倍純度が増加していた。例II 例IIの反応条件は以下の通りである。：供給液体のタキソール純度．２５％タキソール反応温度室温高圧濾過ハウジング内のＰＳＩ６０〜８０ｐｓｉ膜の直径１インチ第１の膜１０００呼び分子量カットオフスペクトル（Ｃ型）第２の膜５００呼び分子量カットオフスペクトル（Ｃ型）第１の膜の化学組成セルロースアセテート第２の膜の化学組成セルロースアセテート選択された量の供給液体を６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で第１の膜を通して逆浸透にかけた。浸透水及び濃縮水を収集して、タキソールの百分率、残渣の百分率及びそのタキソールの百分率純度を評価した。呼び分子量カットオフが１０００のスペクトル膜は以下の結果を有していた。：Ａ．第１の膜期待された通りに、大部分のタキソールが、呼び分子量カットオフが１０００のスペクトル膜を通って濃縮水に移った。この膜を通った第１の通過は、供給液体中のタキソール含有量の１．２４倍、浸透水中のタキーソル含有量を濃縮した。次いで、この浸透水を記載される通りの圧力下で第２の膜を通した。Ｂ．第２の膜浸透水を６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で膜を通して逆浸透にかけた。予期しないことに、呼び分子量カットオフが５００のスペクトル膜は、タキソールを保持しなかった。実際、分子量が８５０ドルトンのタキソール７５％が浸透水に移った。この浸透水へのタキソールの損失にも関わらず、濃縮水は供給液体中のタキソールの１．３６倍に濃縮されていた。勿論、浸透水を更に吸着カラムを通すか又はその代わりとして小さめの呼び分子量カットオフの膜を通して濾過を行い、失われたタキソールの一部を回収しようと試みた。例Ｉで行われた様に、精密濾過系（ＭＦＳ）から呼び分子量カットオフが５００の膜を浸透水を通して濾過することによって、失われたタキソールの大部分を回収すべきである。呼び分子量カットオフが５００のスペクトル膜と呼び分子量カットオフが５００のＭＦＳ膜との差異は、多分２つの膜の化学的構造における差異、非水系溶媒の使用及び膜を製造する個々の会社の品質管理基準の差異の結果であった。例III 例IIIの反応条件は以下の通りである。：供給液体のタキソール純度．２２％タキソール反応温度室温高圧濾過ハウジング内のＰＳＩ６０〜８０ｐｓｉ膜の直径１インチ第１の膜１０００呼び分子量カットオフスペクトル（Ｃ型）第２の膜１０００呼び分子量カットオフコッフ（Ｋｏｃｈ）第１の膜の化学組成セルロースアセテート第２の膜の化学組成ポリスルホン選択された量の非水系供給液体を６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で第１の膜を通して逆浸透にかけた。浸透水及び濃縮水を収集して、タキソール、残渣及びタキソールの純度の百分率を評価した。呼び分子量カットオフが１０００のスペクトル膜は以下の結果を有していた。：Ａ．第１の膜最初の２つの例は同様に機能するように期待された２つの膜の間に大きな差があることを証明したので、異なる製造業者及び異なる組成の２種類の呼び分子量カットオフが１０００の膜の比較を行った。得られたタキソールの濃縮は非常に驚くべきであった。勿論、２種類の呼び分子量カットオフが１０００の膜は、浸透水へタキソールを１００％通すことが期待されたが、少しも得られる流体中にタキソールの濃縮が増加しない結果となった。この実験において、呼び分子量カットオフが１０００のスペクトル膜は特徴的に機能し、６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で膜を通して逆浸透にかけた場合、９％のタキソールを除く全てを通した。濃縮水は、残渣３３％を保持した。；この様に、タキソールを精製し、浸透水中のタキソールを濃縮した。実際、浸透水は供給液体と比較して１．４倍のタキソールの純度を含有していた。次いで、浸透水を第２の膜を通過させた。Ｂ．第２の膜浸透水を６０〜８０ｐｓｉの圧力低下下で第２の膜を通して逆浸透にかけた。呼び分子量カットオフが１０００のコッフの膜は、期待していた通りには反応しなかった。コッフの膜は第１の膜からの浸透水中のタキソールの１０％を除く全てを保持した。更には、残渣の４４％が浸透水へ膜を通過して移った。この様に、濃縮水は非常に濃縮され精製されたタキソール溶液であった。コッフの膜の期待もしない挙動により、得られた流体中に実質的にタキソールの濃縮が生じた。元の供給液体中の残渣重量当たりのタキソールの量と比較して、得られた流体中の残渣重量当たりのタキソールの量は３．６倍であった。粗ミセル溶液特にはタキサン類に逆浸透又は限界濾過方法を使用することによって、多くの利点が提供される。逆浸透又は限界濾過方法により、得られる流体中のタキソールの純度が少なくとも供給液体中のタキサンの純度の３〜１／２倍増加する。溶媒を加熱することなく、この様に望ましい物質を分解させずに、又は他の物質例えば後の精製工程で除去されなければならないタンニンの重合を生じさせずに、精製及び濃縮が達成される。逆浸透又は限界濾過方法により精製されたタキサンは、プロセスを加熱する影響が証明されていないので、第１に引き続く処理工程においてよりよく「機能」する。従って、本発明は、本発明の好ましい実施態様に関してある程度詳細に記載されている。しかしながら、本発明は従来技術に照らして解釈される以下の請求項によって定義されるので、本明細書中に含まれる発明の概念から逸脱しない限り、本発明の好ましい実施態様を修正又は変更しても良いことを認識すべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ワークマン，クリストファーティー. アメリカ合衆国 80302 コロラド州ボウルダー，ナンバー 201，エイティーンスストリート 903 (72)発明者ヒューズ，チャールズエル. アメリカ合衆国 80301 コロラド州ボウルダー，ガモウレーン 3107

Claims

【特許請求の範囲】１．少なくとも１種類の溶質成分としてタキサン溶質を含有し、溶媒成分を有する溶液の形状の供給液体を処理して、供給液体から少なくとも１種類の溶質成分を除去する方法において、以下の工程、第２領域から第１領域を分離する半透膜を供給する工程、タキサン溶質を含有する供給液体を第１領域中に置き、供給液体を膜と接触させる工程、逆浸透によって、膜を通して第１領域から第２領域へ供給液体の成分を移動させるのに十分な圧力をかけ、第１領域に少なくとも１種類の溶質成分を含有する濃縮水が形成し、第２領域に溶媒成分の一部を含有する浸透水が形成する工程、及び、タキサン溶質を含有するそれぞれ１つの浸透水及び濃縮水を回収する工程を特徴とする前記方法。２．溶媒成分がアルコールである、請求項１に記載の方法。３．該アルコールがメタノールである、請求項２に記載の方法。４．該アルコールがエタノールである、請求項２に記載の方法。５．溶媒成分がエーテルである、請求項１に記載の方法。６．該エーテルがメチルターシャリブチルエーテルである、請求項５に記載の方法。７．該膜がモジュールの中に保持されている、請求項１に記載の方法。８．該モジュールが、平板形、スパイラル形、管形及び中空糸形モジュールからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。９．該膜の分子量カットオフが１０００１ドルトンより小さい、請求項１に記載の方法。１０．該膜が、中空糸形、平板形及び管形膜からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。１１．該浸透水及び該濃縮水の少なくとも１つから溶媒を回収する工程を含有する、請求項１に記載の方法。１２．該タキサンを含有するそれぞれ１つの浸透水及び濃縮水を回収した後、該それぞれ１つの第２の濃縮水及び第２の浸透水が形成される第２の膜を通して移動させ、該第２の濃縮水が該タキサンを含有する、請求項１に記載の方法。１３．該タキサンを含有するそれぞれ１つの該第２の浸透水及び該第２の濃縮水を回収する工程を含有する、請求項１２に記載の方法。１４．該第１の膜が該第２の膜よりも大きい孔を有する、請求項１３に記載の方法。１５．請求項１による方法に従って製造されたタキサン溶質を含有する溶液。１６．該タキサンを含有するそれぞれ１つの該浸透水及び該濃縮水を精製する工程を含有する、請求項１に記載の方法。１７．請求項１６による方法に従って製造された精製されたタキサン生成物。