【発明の詳細な説明】
殺菌及び殺虫化合物発明の分野
本発明は、殺菌及び殺虫活性化合物、組成物及びそれらの誘導体、並びにその
ような化合物の製造方法に関する。本発明は、これらの化合物を単独又は他の殺
虫剤若しくは成長調節剤との組み合わせのいずれかにおいて含んで成る殺菌及び
殺虫組成物、並びに菌（fungi）及び／又は昆虫（insects）を防除するための本
発明の化合物又は組成物の使用にも関する。発明の背景
長年にわたり、様々な微生物が疾病及びペストを防除するための殺虫剤として
有用であるような生物学的活性を示す二次的代謝物を生産することが知られてき
た。
農業経済学的及び園芸学的重要性を有する植物及び動物における様々な疾病及
びペストを防除するための生物学的殺虫剤を同定し且つ開発する分野において進
歩してきたけれども、使用される殺虫剤のほとんどは、未だ、自然において分解
するのが困難であり且つ活性の広いスペクトルをもつ合成化合物である。
この十数年間、環境及び農場の周囲の生態系に対するこのような殺虫剤の影響
についての関心が高まってきており、そして結果として、それらの活性における
さらに特異的であり且つ自然環境において容易に分解することができる殺虫剤の
明らかな必要性が存在する。
天然製品は、それらが他の作用モードをもち、環境においてより生物分解性且
つ安全であることができるという点で、合成殺菌剤及
び殺虫剤に対する代替物を提供する。
幾つかの化合物が、Pyrenophora属から先に単離されている。Toxin A（以下
）を含むAspergillomarasaminesは、Pyrenophoraを含む菌の幾つかの属から得ら
れた一連の化合物である。これらの化合物は、高等植物に対して毒性であり、そ
して菌内に広く分布している。（Physio．Plant Path.，Vol.14，pp.41-46，197
9）。
Pyrenophoraを含む多くの属から単離された他のシリーズの化合物は、Ophiobo lins
である。P.teresからのこれらの植物毒性及び抗微生物化合物のレポートが
先に行われている。（Proc．Natl．A cad．Sci．USA，Vol.84，pp．3081-3085，
1987）。ピレノリド（Pyrenolide）化合物が、P.teresから単離されている。（A
gric．Biol．Chem，Vol．44，pp.2761-2762，1980）。しかしながら、それらの
生物学的活性スペクトルは、抗菌活性を含むが殺虫活性は含まない。
Pyrenophora属から報告された化合物は、以下の化合物：
である。
それ故、本発明の目的は、天然源に起源をもち又はこのような化合物の直接誘
導体であり、そして有害な菌及び昆虫に対しての植物の保護を与える新規の殺菌
及び殺虫化合物を提供することである。発明の要約
本発明は、Pyrenophora teresのバイオマスの抽出物が菌、昆虫及びバクテリ
アの成長を阻害することが発見されたという非常に驚くべき認識に基く。この構
造タイプの化合物は、文献中に以前に報告されていない。事実、Pyrenophora te res
のメンバーは、菌、昆虫及びバクテリアの成長を阻害する化合物を含むこと
を先に報告されていない。
一般的に言えば、１つの態様においては、本発明は、CL806（Internatlonal M
ycological Institute CC#351438）と命名された（Ascomycetesの綱に属する）P yrenophora teres
の実質的に純粋な株、及び33-971（ International Mycologlc
al Institute CC#355496）と命名されたDeuteromycetesの綱に属する実質的に純
粋な菌株、並びにそれらの変異体を提供する。本発明は、殺菌及び／又は殺虫組
成物として本発明に係る化合物を製造するための上記微生物の使用にも関する。
より特に、本発明は、以下の式（I）及び（IV）：
｛式中、
Ｒ1が水素、メチル又はアセチルであり、又はＲ1がナトリウム、カリウム、リチ
ウム又はいずれかの他の塩であり；
Ｒ2が水素又は直鎖又は分枝Ｃ1-10-アルキルであり；
Ｒ3が水素又は直鎖又は分枝Ｃ1-10-アルキルであり；そして
Ｒ4が水素又はメチルである。｝により表される化合物及びそれらのいすれかの
互変体に関する。
Ｃ1-10-アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシ
ル、ヘプチル、オクチル、ノニル及びデシルを包含する。
好ましい本発明に係る化合物は、以下の式（II）、（III）、（V）及び（VI）
：
により表される化合物である。
上記化合物及びそれらの互変形態は、抗菌及び殺虫活性を示し、そして菌又は
昆虫に対する植物の保護のための農業及び園芸化合物として使用されることがで
きる。
本発明の他の態様は、本発明に係る化合物により示される抗菌及び殺虫活性に
よる、本発明に係る新規の化合物を、好適な賦形剤、例えば、希釈剤、担体、等
との組み合わせにおいて、含んで成る殺菌及び殺虫組成物に関する。
さらに、本発明は、本発明に係る新規化合物を含んで成る組成物を感染領域に
適用することによる、特に、菌又は殺虫攻撃から生じる植物の病気を制御する方
法に関する。
本発明の文脈においては、新規の組み合わせ組成物を調製するために、本発明
の新規化合物を他の殺虫剤又は植物成長調節剤と組み合わせることをももくろま
れる。
それ故、本発明は、活性成分として式（I）、（II）、（III）、（IV）、（V
）又は（VI）の化合物を含む殺菌組成物をも包含する。本発明は、いずれかの殺
菌組成物における活性成分として、いずれかの他の本発明の化合物又はいずれか
の他の殺虫剤又は植物成長調節剤との組み合わせにおいて又は単独で使用される
本発明の化合物のいずれかの使用をもくろんでいる。
また、本発明は、本発明に係る殺虫及び殺菌活性化合物並びに農業及び園芸に
おいて許容される担体材料を含んで成る殺虫及び殺菌組成物を提供する。
さらに、本発明は、菌及び／又は昆虫により引き起こされるダメージから植物
を保護する方法であって、本発明に係る殺菌及び殺虫活性化合物の有効量を、例
えば、葉への適用（foliar application）により、その植物に、又はその植物の
周囲の土壌に、適用することを含んで成る方法を提供する。
さらに、本発明は、菌及び／又は昆虫により引き起こされるダメージから植物
の種を保護する方法であって、本発明に係る殺菌及び殺虫活性化合物の有効量を
、その植物の種に、適用することを含んで成る方法を提供する。
また、本発明は、植物病原性の菌及び昆虫を防除する方法であって、その菌又
は昆虫を、本発明に係る殺虫及び殺菌活性化合物の有効量と接触させることを含
んで成る方法を提供する。発明の詳細な説明
本発明は、CL806（IMI CC#351438）と命名されたAscomycetes綱に属するPyren ophora teres
の実質的に純粋な株、及び33-971（IMI CC#355496）と命名されたD
euteromycetes綱に属する実質的に純粋な菌株、並びにそれらの変異体を提供す
る。本発明は、殺菌及び／又は殺虫組成物としての本発明に係る化合物を製造す
るための上記微生物の使用をも提供する。
本発明は、以下の式（I）及び（IV）：
｛式中、
Ｒ1が水素、メチル又はアセチルであり、又はＲ1がナトリウム、カリウム、リチ
ウム又はいずれかの他の塩であり；
Ｒ2が水素又は直鎖又は分枝Ｃ1-10-アルキルであり；
Ｒ3が水素又は直鎖又は分枝Ｃ1-10-アルキルであり；そして
Ｒ4が水素又はメチルである。｝により表される化合物及びそれらのいずれかの
互変体を提供する。
好ましい本発明に係る化合物は、先に示した式（II）、（III）、（V）及び（
VI）の化合物である。
式（II）及び（III）の化合物は、Pyrenophora属に属する微生物及び特にCL80
6（IMI CC# 351438）と命名されたPyrenophora teresからの生産物として獲得さ
れ得る。これらの化合物は、Phomaの種からも単離されることができる。式（V）
及び（VI）の化合物は、菌及び33971（IMI CC# 355496）と命名された菌株から
の生産物として獲得され得る。誘導体は、当業者によく知られた方法により、式
（II）、（III）、（V）及び（VI）の化合物から合成されることができる。
式（I）、（II）、（III）、（IV）、（V）及び（VI）の化合物を製造するた
めの他の方法は、適当な出発材料からの伝統的な化学合成による。さらに、式（
II）の化合物は、式（III）の化合物に塩溶液、例えば、炭酸ナトリウムを添加
するとにより、合成されることができる。式（III）の化合物は、式（II）の化
合物を酸性にすることにより合成されることができる。式（I）の化合物のエポ
キシ基が開環され、式（IV）中の対応のアルコール基を与えることができる。
式（I）、（II）、（III）、（IV）、（V）及び（VI）の殺菌及び殺虫活性化
合物は、Pyrenophora又は他の好適な菌株から好ましくは得られる場合、他の菌
材料を本質的に含まないように精製されることができる。これらの化合物の微生
物生産及び精製を、以下のセクション中に記載する。生物IMI CC# 351438の分類学及び形態学
菌は、Pyrenophora teres Drechsler、Drechslera teres（Sacc.）Shoemaker
syn．Helminthosphorium teres Sacc.の完全状態として、Plant Protection Cen
tre，Lottenborgvej DK-2880 Lyngby，Denmarkにおいて、同定された。Ascomyce tes
網及びPleosporales目に属するこの株は、CL806（International Mycologica
l Institute CC# 351438）と命名され、そして1992年1月27日にブダペスト条約
に従って寄託された。
単離物は、植物の葉の上の特徴的な兆候（大麦上に網状のシミを生じさせる）
に基く単離時間において同定された。この同定は、カルチャーの顕微鏡検査及び
植物上への再接種実験により正当化された。
分生子柄（conidiophores）は、単生（solitary）又は2-3群の、直線状又はそ
の基で屈曲（flexuous）しばしば膨れており、青白〜茶色220 μμ長さ、7-11μ
厚であり、分生子（Conidia）は、直線状、円筒状、末端において丸く、透明に
近く（subhyaline）、滑らかで、そして1-10μの疑似隔膜（pseudoseptate）、
しばしば括れており、79-160μ ｘ 16-23μである。IMI CC# 355496
この菌株は、熱帯において採取された植物材料から単離された。この株は、De teromycetes
網に属し、33-971（（International MycoIogical Institute CC# 3
55496）と命名され、そして1993年1月6日にブダペスト条約に従って寄託された
。培養による式（II）の化合物の製造
室温において７日間PDA寒天上で増殖させた単離物の斜面培養物
を0.1%Tween 80（商品名）を含む10mlの無菌蒸留水と混合し、そして水道水を使
用した100ml Yeast-Extract-Sucrose培地（2%酵母エキス（Difco）；15%シュク
ロース；10ppm ZnSO4・7H2O）5ppm CuSO4・5H2O及び3g wheat bran）を含む500m
l のErlenmeyerフラスコ内に接種した。基質を121℃において40分間オートクレ
ーブ処理する前にpHを6.4に調整した。接種後、フラスコを26℃に置き、そして1
4日間120rpmにおいて振とうした。
活性化合物を発現するためには菌が先に記載したように培養されることが好ま
しいが、以下の発酵培地中で菌を増殖することによってもそれは発現されること
ができる：
蒸留水を使用するYeast-Extract-Sucrose培地：
2%酵母エキス（Difco）； 15%シュクロース； 10ppm ZnSO4・7H20、5ppm CuS04
・5H2O。基質を121℃において40分間滅菌する前にpHを6.4に調整した。
蒸留水を使用するYeast-Extract-Sucrose培地：
2%酵母エキス（Difco）；15%シュクロース； 0.05% MgSO4・7H20；10ppm ZnSO4
・7H2O、5ppm CuSO4・5H2O。基質を121℃において40分間滅菌する前にpHを6.4
に調整した。
蒸留水を使用するYeast-Extract-Glucose培地：
0.4%酵母エキス； 0.1%KH2 PO4、0.05% MgSO4・7H2O；グルコース1.5%； plur
onic（商品名）0.1ml/L 。基質を121℃において20分間滅菌した後pHは5.4。
Fries-saccharose培地：
0.1% KH 2 PO4、0.05% MgSO4・7H2O；NaCl 0.01%、0.013%CaCI2。・2H2O、0.1
% NH 4 NO3；0.5%（NH 4 NO3）酒石酸、3%サッカロース、1ml/Lの下の保存培地
（1L）： 1.0mg MgSO4・4H2O、1.0mg Boron酸； 0.1mg CuSO4、0.1mg ZnSO4・7H2
O。基質を121℃において40分間滅菌する前にpHを6.5に調整した。式（II）の化合物の抽出
殺菌及び殺虫苛性化合物を以下のように培養ブロスから抽出した：
100mlのヘキサンを１つのフラスコからのブロスに添加し、そして18℃におい
て２時間振とうし、そして次に４℃において16時間置いた。代謝物を含むヘキサ
ン上澄を、10分間、20,000rpmにおける遠心分離後に菌糸体を含むブロスから分
離した。式（II）の化合物の精製
得られた粗抽出物をシリカ・ゲル60上のフラッシュ・クロマトグラフィーによ
り精製した。粗抽出物をカラム上にロードし、ヘキサンから酢酸エチル対メタノ
ールへの溶媒グラジエントを適用した。活性化合物を、10:90メタノール：酢酸
エチルにより溶出した。HPLC法の詳細を以下に表１中に記す。
式（II）及び（III）の化合物の化学的特徴 式（II）の化合物
式（II）の実質的に純粋な殺菌及び殺虫活性化合物は、以下の物理的特徴をも
つ：
分子式：高分解能質量分析からC26H38NO4Na、分子イオン（M++H+-Na+）が430.
2585であることが実測された（430.2947計算）。
UVスペクトルのデータ（エタノール）：UV 244nm（ε=5694）、291nm（ε=800
1）。
IR：（NaCl）Vmax： 1475，1610，2950(br)cm -1。
式（II）の化合物のためのNMRデータを以下に記す：
式（II）の化合物は、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル中に溶解性であり
、そしてメタノール中に僅かに溶解性である。式（II）の化合物は、式（III）
の化合物に塩溶液、例えば、炭酸ナトリウムを添加することにより調製されるこ
とができる。式（III）の化合物
式（III）の実質的に純粋な殺菌及び殺虫活性化合物は、以下の物理的特徴を
もつ非晶質固体である：
分子式：高分解能質量分析からC26H39NO4、分子イオン（M+ +H+）が430.2585
であることが実測された（430.2947計算）。
UVスペクトルのデータ（エタノール）：UV 244nm（ε=5694）、291nm（ε=800
1）。
IR：（NaCl）Vmax： 1475，1610，2950(br)cm -1。
式（III）の化合物のためのNMRデータを以下に記す：
式（III）の化合物は、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチル中に溶解性であ
り、そしてメタノール中に僅かに溶解性である。式（III）の化合物は、式（II
）の化合物を酸性にすることにより調製されることができる。培養による式（V）及び式（VI）の化合物の生産
26℃において14日間、YPG-1寒天（酵母エキス4g/L、グルコース15g/L、KH2 PO4
、1g/L 、MgSO4・7H2O、0.5g/L 及びBacto寒天15g/L）上で培養した単離物のス
ラント・カルチャーを、0.1% Tween 80（商品名）を含む10mlの無菌蒸留水と混
合し、そして45ml（水道水及び30g wheat branを使用したYPG-1肉汁）を含む500
ml のErlenmeyerフラスコ内に接種した。基質を121℃において45分間オートクレ
ーブ処理した。
接種後、フラスコを26℃において15日間置いた。式（V）及び（VI）の化合物の抽出
化合物を以下のようにフラスコから抽出した：
200mlのエタノールを１つのフラスコに添加し、そして18℃において一夜振と
うした。代謝物を含むエタノールを、10分間、20,000rpmにおける遠心分離によ
り、菌糸体を含む培養培地から分離した。菌糸対及びwheat branを含む沈殿を廃
棄し、そして上澄を活性について分析した。式（V）及び（VI）の化合物の精製
得られた粗抽出物をシリカ・ゲル６０上のフラッシュ・クロマトグラフィーに
より精製した。粗抽出物をカラム上にロードし、ヘキサンから酢酸エチル対メタ
ノールへの溶媒グラジエントを適用した。活性化合物を、10:90メタノール：酢
酸エチルにより溶出した。HPLC法の詳細を表１中に記す。式（V）及び（VI）の化合物の化学的特徴 式（V）の化合物
式（V）の実質的に純粋な殺菌及び殺虫活性化合物は、以下の物理的特徴をも
つ：
分子イオン（M +H）+は、430であることが実測され、分子式Ｃ26H39NO4を特定
した。
UVスペクトルのデータ（メタノール）：UV 225nm（ε=12312）、292nm（ε=15
489）。
式（V）の化合物のためのＮＭＲデータを以下に記す：
式（V）の化合物は、クロロホルム、酢酸エチル、メタノール、ヘキサン及び
ヘプタン中に溶解性である。式（VI）の化合物
式（VI）の実質的に純粋な殺菌及び殺虫活性化合物は、以下の物理的特徴をも
つ
分子イオン（M +H）+は、444であることが実測され、分子式Ｃ27H41NO4を特定
した。
UVスペクトルのデータ（メタノール）：UV 222nm（ε=18211）、291nm（ε=16
671）。
式（VI）の化合物のためのNMRデータを以下に記す：
式（VI）の化合物は、クロロホルム、酢酸エチル、メタノール、ヘキサン及び
ヘプタン中に溶解性である。活性化合物の配合
その活性成分として本発明の殺菌活性化合物を含んで成る本発明に係る殺菌組
成物は、農業経済的及び／又は園芸的用途のために、活性化合物と好適な不活性
及び相溶性担体又は希釈剤とを混合することにより配合され、農業組成において
一般的に使用されるタイプの組成物、例えば、水和粉末、乳化性濃縮物、濃縮エ
マルジョン、粒状配合品、水溶性粉末、懸濁濃縮物、放出性配合品（緩行性放出
配合品を含む）、アルギン酸塩、キサンタン・ガム、溶液及び／又はエアロゾル
を得ることができる。固体担体として、ベントナイト
珪藻土、アパタイト、ジプサム、タルク、ピロフィライト、バーミキュライト、
粉砕貝殻、及び粘土(clay)が挙げられる。表面活性剤も均一な且つ安定した配合
品を製造する目的で添加されることができる。
本発明の組成物中に希釈剤又は担体は、先に示したように、固体又は液体であ
り、場合により表面活性剤、例えば、分散剤、乳化剤又は水和剤と会合してある
ことができる。好適な表面活性剤は、アニオン化合物、例えば、カルボキシレー
ト、例えば、長鎖脂肪酸の金属カルボキシレート；N-アシルサルコシネート（N-
acylsarcosinate）；脂肪アルコール・エトキシレートとの燐酸のモノ-若しくは
ジ-エステル又はこのようなエステルの塩；脂肪アルコール・スルフェート、例
えば、ドデシル硫酸ナトリウム、オクデシル硫酸ナトリウム又はセチル硫酸ナト
リウム；エトキシル化脂肪アルコール・スルフェート；エトキシル化アルキルフ
ェノール・スルフェート；リグニン・スルホネート；石油スルホネート；アルキ
ル・アリール・スルホネート、例えば、アルキル- べンゼン・スルホネート又は
低級アルキルナフタレン・スルホネート、例えば、ブチル- ナフタレン・スルホ
ネート；塩又はスルホネート化ナフタレン- ホルムアルデヒド縮合物；スルホネ
ート化フェノール- ホルムアルデヒド縮合物の塩；又はより複雑なスルホネート
、例えば、アミド・スルホネート、例えば、オレイン酸とＮ-メチル・タウリン
又はジアルキル・スルホスクシネートとのスルホネート化縮合物、例えば、ナト
リウム・スルホネート又はジオクチル・スクシネートを含む。非イオン剤は、酸
化エチレンによる、脂肪酸エステル、脂肪アルコール、脂肪酸アミド又は脂肪-
アルキル- 若しくはアルキニル- 置換フェノール、ポリヒドロ・アルコール・エ
ステルの脂肪エステルの縮合生成物、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、酸化
エチレンによるこ
のようなエステルの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレン・ソルビタン脂肪
酸エステル、酸化エチレンと酸化プロピレンのブロック・コポリマー、アセチレ
ン・グリコール、例えば、2,4,7,9-テトラエチル-5-decyn-4,7- ジオール、又は
エトキシル化アセチレン・グリコールを含む。
カチオン表面活性剤の例は、例えば、アセテート、ナフタレート若しくはオレ
エートとしての脂肪族モノ-,ジ-,若しくはポリアミン；酸素含有アミン、例えば
、ポリオキシエチレン・アルキルアミンのアミン・オキサイド；ジ- 若しくはポ
リアミンとのカルボン酸の縮合により製造されるアミド- 結合アミン；又は第四
アンモニウム塩を含む。
本発明の組成物は、農業化学物質の配合品として本分野において公知のいずれ
かの形態、例えば、溶液、分散剤、水性エマルジョン、粉剤（dusting powder）
、種ドレッシング（seed dressing）、分散性粉末、乳化性濃縮物又は粒状物を
とることができる。その上、それは、直接塗布のための好適な形態において、又
は塗布前に好適な量の水又は他の希釈剤による希釈が必要な濃縮物又は一次組成
物として存在することができる。
乳化性濃縮物は、水非相溶性溶媒中に溶解された活性成分を含んで成り、これ
は乳化剤の存在中で水とエマルジョンを形成する。
粉剤（dusting powder）は、固体微粉希釈剤、例えば、カオリンと直接混合及
び粉砕された活性成分を含んで成る。
粒状固体は、粉剤中で使用されることができるものに類似した希釈剤と会合し
た活性成分を含んで成るが、この混合物は公知方法により粒状化される。あるい
は、それは、前粒状希釈剤、例えは、Fuller's土、アタパルジット（attapulgit
e）又は石膏砂（limestone grit）上に吸収又は吸着された活性成分を含んで成
る。
水和粉末、粒状物（granules）又は粒状物（grains）は、普通には、好適な界
面活性剤及び不活性希釈剤、例えば、陶器粘土（china clay）と混合された活性
成分を含んで成る。
他の好適な濃縮物は、活性成分を水又は他の液体、水和剤及び懸濁剤と共に粉
砕することにより形成される流動性懸濁濃縮物である。
本発明の組成物中の、本明細書中に記載する本発明の活性化合物の濃度は、配
合品のタイプ及び適用の分野に依存して広いレンジ内で変動することができる。
本発明の活性化合物が、植物において菌を防除することにおける使用のために
、約0.01mg/ml から10mg/ml 、好ましくは0.1mg/mlから2mg/mlまでの濃度レンジ
において適用されることができるといううことが、企図される。
情況、例えば、菌がついた作物、環境条件又は他の要因に依存して、本発明の
組成物は、上記の殺菌活性の本発明の化合物に加えて、他の活性成分、例えば、
他の殺虫剤、殺菌剤、除草剤、殺虫剤、抗線虫剤（nematicides）、殺ダニ剤又
は植物栄養素、成長調節剤又は肥料を含むこともできる。
他の殺菌剤であって本発明の活性化合物と組み合わされることができるものの
例は、エルゴステロール生合成阻害剤（ergosterol biosynthesis inhibitors（
”EBIs”）を含む。これらは、一般的には、イミダゾール又はトリアゾール誘導
体であり、そして例は、一般名、プロクロラズ（prochloraz）、トリアジメフォ
ン（triadimefon）、プロピコナゾール（propiconazole）、ジクロブトラゾール
（diclobutrazol）、トリアジミノール（triadiminol）、フルシラゾール（flus
ilazole）、フルトリアフォール（flutriafol）、マイクロブタニル（myclobuta
nil）、ペンコナゾール（penconazole）、キンコナゾール（quinconazole）、イ
マザリル（imazalil）及びジニコナゾール（dinicon
azole）により知られているものを含む。非アゾールEBIsの例は、ナウリモール
（naurimol）、フェナリモール（fenarimol）、フェンプロピモルフ（fenpropim
orph）、トリデモルフ（tridemorph）及びフェンプロピジン（fenpropidine）を
含む。他の殺菌剤であって本発明の酵素調製物と組み合わせられることができる
ものは：
ジチオカーバメート類（Dithiocarbamates）、例えば、チラム（thiram）、マ
ネブ（maneb）、ジネブ（zineb）及びマンコゼブ（mancozeb）；
ファタリミド類（Phatalimides）、例えば、キャプタン（captan）、フォルペ
ット（folpet）及びキャプタフォール（captafol）；
カルボキシン類（Carboxines）、例えば、カルボキシン（carboxin）及びオキ
シカルボキシン（oxycarboxin）；
ベンズイミダゾール類（Benzimidazoles）、例えば、ベノミル（benomyl）、
カルベンダジム（carbendazim）及びフベリダゾール（fuberidazole）；
カーバメート類（Carbamates）、例えば、プロチオカルブ（prothiocarb）及
びプロパモカルブ（propamocarb）；
イゾキサゾール類（Isoxazoles）、例えば、ヒメキサゾール（hymexazol）；
シアノアセトアミド類（Cyanoacetamides）、例えば、シモキサニル（cymoxan
il）；
エチルホスホネート類（Ethylphosphonetes）、例えば、フォセチルアルミニ
ウム（fosetylaluminium）；
フェニルアミド類（Phenylamides）、例えば、フララキシル（furalaxyl）、
メタラキシル（metalaxyl）、ベナラキシル（benalaxyl）、オフレース（ofurac
e）、シプロフラム（cyprofuram）及びオクサンジキシル（oxandixyl）；
ジカルボキシミド類（Dicarboximides）、例えば、プロシミドン（procymidon
e）、イプロジオン（iprodione）及びビンクロゾリン（vinclozolin）；
有機燐殺菌剤、例えば、ピラゾホス（pyrazophos）、トリアミフォス（triami
phos）、ジタリムフォス（ditalimfos）及びトルコフォスメチル（tolcofosmeth
yl）；及び
芳香族炭化水素殺菌剤、例えば、キントゼン（quintozene）、ジクロレン（di
chloren）及びジフェニル（diphenyl）を含む。
本発明の他の態様は、本発明の殺菌活性化合物の有効量を治療されるべき領域
に適用するような、植物における菌の防除方法に関する。本発明のこの態様に関
しては、組成物は、処理されるべき領域に、緊急前処理として土壌に直接的にか
又は緊急後処理として植物の葉又は果実にかのいずれかで適用されることができ
る。作物及び周囲環境にに依存して、その処置は、菌が防除されるべき植物上に
種又は果実が現れるまで延期されることができる。
本発明の活性調製物又は組成物は、例えば、噴霧（spraying）又は粉剤散布（
dusting）により植物に直接的に、又は植物上に害虫が現れ始めるとき若しくは
保護手段として害虫の出現前に、適用されることができる。このようなケースの
両方において、適用の好ましいモードは、葉への噴霧によるものである。一般的
には、植物成長の初期の段階において害虫を良好な防除を得ることが重要である
。なぜなら、このときに、植物が最もひどくダメージを受けるからである。噴霧
又は粉剤は、便利には、それが必要と考えられる場合に、他の殺虫剤又は緊急前
若しくは後除草剤を含むことができる。
ときどき、植える（planting）前又は間に植物の根を、例えば、好適な液体又
は固体組成物中にその根を浸漬することにより、処理することを行うことができ
る。本発明の活性調製物が植物に直接的に適用されるとき、好適な適用の割合は
、１ヘクタール当たり5gから5kg まで、好ましくは１ヘクタール当たり100gから
2kg までである。
本発明の上記方法においては、本発明の活性調製物を単独又は慣用の殺虫剤と
の組み合わせにおいて種又は環境（habitat）に適用することもできる。これ故
、調製物を、土壌中の活性成分の存在が種を攻撃することができる菌の成長を防
除することができるように、穴を掘る（drilling）前、その時、又はその後に土
壌中に直接的に適用することができる。
式(I) 、(II)、(III) 、(IV)、 (V) 又は(VI)の化合物を含む本発明の組成物
は、１ヘクタール当たり約5gから約5kg までの活性成分をに対応する量で適用さ
れることができる。土壌が直接的に処理されるとき、単独又は慣用の殺虫剤と混
合された活性成分が、それが土壌とじかに混合されることを可能にするいずれか
のやり方において、例えば、噴霧、固体形態の粒状物をばらまくこと（broadcas
ting）、又は種と同じ穴の中にそれを入れることによる穴堀りと同時に活性成分
を適用することにより、適用されることができる。
本発明の組成物中の、本発明の殺菌活性化合物の濃度は、単独又は慣用の殺菌
剤との組み合わせにおいて使用するとき、好ましくは約0.001 から約30重量パー
セントまで、特に0.01〜3.0 重量パーセントのレンジ内にある。一次組成物中に
おいては、活性化合物の量は、広く変化することができ、例えば、その組成物の
約5 重量パーセントから約95重量パーセントまでのレンジ内で存在することがで
きる。
本発明の混合組成物中の他の殺菌活性成分の濃度は、植物に適用
されるとき、好ましくは0.001 〜50重量パーセント、特に0.01〜10重量パーセン
トのレンジ内にある。一次組成物中においては、他の活性成分の量は、広く変化
することができ、例えば、その組成物の5から80重量パーセントまでで存在する
ことができる。
本発明を菌又は昆虫の防除に関して詳細に記載してきたが、本発明の活性化合
物が、化合物を木の保存及び／又は浸潤組成物に添加することによる木の保存に
おいて菌を制御するために使用されることができるということも予期される。ま
た、本発明に係る活性化合物は、保存の間のペイント中の増殖、及びペイントさ
れるもの、例えば、家屋の石膏板上の増殖の両方を防ぐための、ペイント中の殺
菌及び保存剤として有用であることができる。実施例 実施例１ 式(II)の化合物の殺菌活性
式(II)の化合物は、Oomycetes，Ascomycetes及びDeuteromycetes網に属する菌
の成長に対する阻害効果をもつことが示された。それは、以下のものに特に有用
であることが発見された：
Oomycetes（オーミセテス）網
Pythium sp．Type F．（ピシウム・エスピー）
Phytophthora infestans（フィトフトーラ・インフェスタンス）
Plasmonpara viticola（ラズモパラ・ビティコーラ）
Ascomycetes（アスコミセーテス）網
Pyrenophora teres （ピレノフオーラ・テレス）
Phoma betae （ローマ・ベタエ）
Phoma lingam（ローマ・リンガム）
Ascochyta pisi（アスコチタ・ピシ）
Venturia inaequalis（ベンチュリア・イナクアリス）
Saccharomyces cerevisiae（サッカロミセス・セレビシエ）
Deuteromycetes（デュートロミセテス）網
Fusarium oxysporum（フサリウム・オキシポラム）
Botrytis cinerea（ボツリティス・シネレア）
Rhizoctonia solani（AG-3）（リゾクトニア・ソラニ）
Minilinia fructigena（ミニリニア・フルクチゲナ）
Aspergillus niger（アスペルギルス・ニガー）インビトロにおける検定
式(II)の化合物は、菌の成長に対するインビトロにおける阻害効果をもつこと
が発見された（表２）。インビトロにける検定においては、テスト生物を寒天培
地中に埋め込んだ。小wellを寒天内にパンチし、そしてそれぞれの濃度の15μl
サンプルをそのwellに適用した。テスト生物の阻害を示す明るい領域を室温にお
けるインキュベートの２日後に測定した。５のアスコミセーテス及び１のデュー
トロミセーテス（ミニリニア・フルクチゲナ）に対する活性についての様々な濃
度の化合物のスクリーニング後のインビトロにおける結果を表２中に示す。阻害
をmm明領域として表す（-１は、阻害領域が明るくないことを示す）。
ピシウム及びフィトフトーラ・インフェクタンスに対する阻害活性をマイクロ
タイター検定を使用して推定した：1ml の液体培地を、24wellマイクロタイター
・プレート内のそれぞれのwellに適用する（ピシウム検定のために培地１及びフ
ィトフトーラ検定のために培地２）。そおれぞれの濃度の20μl サンプルを次に
、それそれのwellに、その後、（P．infestansのための）100μl の胞子嚢（spo
rangia）懸濁液又は（Pythium検定のための）100μl の遊走子（zoospore）懸濁
液に添加した。
培地1: 0.9ml希釈塩溶液（Dill，B.C．& M.S．Fuller（1971）Archiv．Microb
.，Vol．87，pp.92-98）及び0.1ml Yeast Peptoneグルコース・ブロスをそれぞ
れのwellへの適用前に混合した。
培地2: 0.9ml希釈塩溶液及び0.1ml Pea懸濁液をそれぞれのwellへの適用前に
混合した。
P．infectansを含むマイクロタイター・プレートを17-20℃において散乱光中
でインキュベートした。３日後菌の成長を推定した。
Pythiumを含むマイクロタイター・プレートを30℃においてイン
キュベートした。１日後菌の成長を推定した。
先に記載したマイクロタイター検定を使用したオーミセーテスに対する活性に
ついての様々な濃度の化合物のスクリーニング後のインビトロにおける結果を表
３中に示す。数字４は、菌成長の全阻害を示す。
実施例２ Phytophthora infectans
に対する式(II)の化合物の活性
宿主：Solanum tuberosum（ポテト、変種Sava）
ポテト植物（発芽3-4 週間）を、ハンドホールド・スプレー装置（Bink Bullo
ws 900）を使用して液体懸濁液により流れ落ちるまで噴霧した。懸濁液（MeOH 5
0%）は、それぞれ、750ppm、500ppm、250ppm及び125ppmの式(II)の化合物を含ん
でいた。４複製をそれぞれの濃度において使用した。1ml 当たり１ｘ１０5胞子
を含む胞子嚢胞子の懸濁液によりそれらが接種される前に、植物を２４時間グリ
ーン・ハウス内で２４時間乾燥するまで栽培した。接種をハンドホールド・アト
マイザー（Wagner，Pico Bel）により行った。植物を次に透明ポリエチレン袋内
でインキュベートし、全テスト期間にわたりそのままにし、相対湿度を95-100%
に上昇させた。最初の２４時間の間、植物
をいずれの光に晒さず、そして温度を18℃に維持した。その後の条件は：16時間
光（約10,000 lux）及び８時間の暗であった。温度は、昼間の期間18℃、そして
夜の間13℃であった。
６日後に評価を行った。結果を表４中に示す：
実施例３ Plasmopra viticola
に対する式(II)の化合物の活性
宿主：Vitis vinifera（ブドウ，変種Ugni Blano）
ブドウ植物（発芽5-6 週間）を、ハンドホールド・スプレー装置（Bink Bullo
ws 900）を使用して液体懸濁液により流れ落ちるまで噴霧した。懸濁液（MeOH 5
0%）は、それぞれ、750ppm、500ppm、250ppm及び125ppmの式(II)の化合物を含ん
でいた。４複製をそれぞれの濃度において使用した。1ml 当たり１ｘ１０5胞子
を含む胞子嚢胞子の懸濁液によりそれらが接種される前に、植物をグリーン・ハ
ウス内で24時間乾燥するまで栽培した。接種をハンドホールド・アトマイザー（
Wagner，Pico Bel）により行った。植物を次に透明ポリエチレン袋内で20℃にお
いてインキュベートし（16時間光（約10,000 lux）及び８時間暗）、全テスト期
間にわたりそのままにし、相対湿度を95-100%に上昇させた。
６日後に評価を行った。結果を表５中に示す：
式(II)の化合物の殺虫活性
式(II)の化合物は、以下の属：Spodoptera exigua
（スポドプテラ・エキシグア）Helicoverpa virescens
（ヘリコバーパ・ビレセンスDrosophila melanogaster
（ドロソフィラ・メラノガスター）Trichoplusia ni．
（トリコプルシア・ニ）
に属する昆虫の成長に対する阻害効果をもつことも示された。
また、この化合物は、他の類似及び／又は関連昆虫に対しても活性であろうこ
とが予測される。昆虫バイオアッセイの説明 Spodoptera exigua
及びHelicoverpa virescens：
幼虫の食餌をテスト化合物（アルファーセルロース上で蒸発させたもの）と混
合し、所定の濃度にした。食餌（1ml）をwellトレー内の10wellのそれぞれの内
に注いだ。昆虫の卵を1.2g/Lにおいて寒天中に懸濁させた（3-6卵/50 μl）。寒
天懸濁液中の３〜６の卵をそれぞれのwell内に添加した。トレーを、mylar（登
録商標）によりカバーし、そしてそれぞれのwellに空気孔を開けた。テスト・ト
レーを28℃においてインキュベートした。生存率（Mortality）及び成長阻
害（stunting）を７日後に測定した。Drosophila melanogaster
（ドロソフィラ・メラノガスター）：
食餌（diet）を先に記載したように調製し、そして13 ｘ 100試験管に2ml の
処理食餌を充填した。試験管を8-10の舞化後１週間の成虫D．melanogasterによ
り寄生させた。試験管をインキュベートし、そして先に記載したように評価した
。これらの検定の結果を表６中に示す。
Trichoplusia ni（トリコプルシア・ニ）：
4gの幼虫の食餌を、トレー内で加圧透明プラスチックの形態において作られた
25カップのそれぞれに注いだ。100 μl のテスト成分、メタノール（対照）又は
水（対照）をマイクロピペットによりその食餌上に局所的に適用した。すべての
適用は２連であった。このトレーを、その液体がそれぞれのカップ内でその表面
を全体的に覆うことを確保するために傾け、そして回した。トレーを紙により16
時
間カバーした。
５匹の第二齢の幼虫をそれぞれのカップ内に入れ、そしてトレーを透明プラス
チック・二折判（folio）によりカバーし、この上にアイロンをかけ、そして次
にカップ内の水の凝縮を防ぐために孔をあけた。このトレーを温度及び光を調節
した（30℃、16/8光オン/ オフ）室内に４日間置いた。結果（%生存率）を１日
及び４日後に読み、そして表７中に示す。
経口毒性テスト
本実施例は、OECDガイドライン中に記載された方法の修飾法として、式(II)の
化合物の抽出物の３つの異なる濃度：18mg/kg（マウス）、400 mg/kg 及び917 m
g/kg による経口テストとして導入された”溶媒”としてコーン油を使用した粗
ヘキサン抽出物に対して行なわれた。式(II)の化合物の上記濃度のいずれも、マ
ウスに対する毒性を全く示さなかった。実施例４ 式(V)及び(VI)の化合物の殺菌活性
化合物(V)及び(VI)の化合物を含むブロスのエタノール抽出物は、Deuteromyce
tes及びOomycetes網に属する菌の成長に対する阻害効果をもっていた。
19ページ、10-20行目に記載したインビトロにおける検定法を使用すると、こ
の抽出物は、Deuteromycetes網に属するBotrytis cinereaの成長に対するインビ
トロにおける阻害効果をも持っていた。
この抽出物は、20 mm の不透明阻害領域として表されたBotrytis cinereaを阻
害し、そしてグラム陽性及びグラム陰性菌の両方- グラム陽性：バチルス・サブ
チリス（Bacillus subtilis）及びグラム陰性：シュードモナス（Pseudomonas）
- に対するインビトロにおける阻害効果をもっていた。
この抽出物は、Oomycetes網、例えば、Phytophthora infestansに対するイン
ビボにおける阻害効果をももっていた。
この抽出物は、実施例３において記載した昆虫バイオアッセイ（24頁1-12行）
を使用してのTrichoplusia niの成長に対する阻害効果をももっていた。Phytophthora infestans
に対する式(V) の化合物の活性
宿主：Solanum tubersum（ポテト、変種Sava）
ポテト植物（発芽3-4 週間）を、ハンドホールド・スプレー装置（Bink Bullo
ws 900）を使用して液体懸濁液により流れ落ちるまで噴霧した。懸濁液（MeOH 7
0%）は、それぞれ、1000ppm、100ppm及び10ppm の上記化合物を含んでいた。４
複製をそれぞれの濃度において使用した。1ml 当たり１ｘ１０5胞子を含むPhyto phthora infestans
の胞子嚢胞子の懸濁液によりそれらが接種される前に、植物
をグリーン・ハウス内で24時間乾燥するまで栽培した。接種をハンドホールド・
アトマイザー（Wagner，Pico Bel）により行った。植物を次に
透明ポリエチレン袋内でインキュベートし、全テスト期間にわたりそのままにし
、相対湿度を95-100% に上昇させた。最初の24時間の間、植物を光に全く晒さず
、そして温度を18℃に保った。その後の条件は、16時間光（約10,000 lux）及び
８時間暗であった。昼間の間の温度は18℃、そして夜間は13℃であった。
６日後に評価を行った。結果を表８中に示す：
バチルス・サブチリス（Bacillus subtilis）、サッカロミセス・セレビシエ（S accharomyces cerevisiae
）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）、
フサリウム・オキスポラム（Fusarium oxysporum）、ボトリティス・シネレア（Botrytis cinerea
）及びリゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）に対する
式(V)の化合物の活性
式(V) の化合物は、19頁10-20行に記載したインビトロにおける検定法を使用
して、３つの異なる濃度、すなわち、1000ppm、100ppm及び10ppmにおける上記の
菌の成長に対するインビトロにおける阻害効果をもつことが見つかった。結果を
表９中に提供する。
式(V)の化合物は、24頁1-12行目に記載した方法を使用してTrichoplusia niの
成長に対する阻害効果をもつことも見つかった。結果を表１０に示す。
本発明は、上記の実施例により範囲において限定されてはならない、なぜなら
、それらは、本発明の単なる説明として意図されているからである。もちろん、
本明細書中に示し、そして記載したものに加えての本発明の様々な変更は、これ
までの記載から当業者には明らかとなるであろう。このような変更は、添付のク
レームの範囲内に在ることを意図されている。
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フロントページの続き
(51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ
//(Ｃ１２Ｐ 17/16
Ｃ１２Ｒ 1:645）
(Ｃ１２Ｎ 1/14
Ｃ１２Ｒ 1:645）
(72)発明者 ローセンダール，コニー ニナ
デンマーク国，デーコー―2605 ブロムド
ビュ，アパルケン 15
(72)発明者 ヘイゼ，モルトン
デンマーク国，デーコー―2840 ホルテ,
ソレロズ パルク 12
(72)発明者 バックマン，トルベン ルン
デンマーク国，デーコー―2500 バルビ
ー，ブロンカエルバイ 12 ４．テーベー
(72)発明者 ニールセン，ルビー イルム
デンマーク国，デーコー―3520 ファル
ム，ゲゼバッケン ９