CN117530285A - 一种杀菌组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种杀菌组合物。具体地，本发明所述杀菌组合物包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。本发明杀菌组合物具有杀菌活性高、防治病害效果好、具有新的作用机制、低抗性风险等优点。

Description

一种杀菌组合物

技术领域

本发明属于农药技术领域，具体地涉及一种杀菌组合物。

背景技术

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂具有独特的作用机制、广泛的杀菌谱、优良的杀菌性能、杰出的防效，卓越的环境相容性等特点，是杀菌剂中应用最广泛的品种之一，全球销售额遥遥领先其它杀菌剂，其市场份额已位列各类杀菌剂首位。2016年，该类杀菌剂的全球销售额为33.96亿美元，占全球杀菌剂市场的22.2％。目前，全球甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂市场平均以约2％的速度逐年上涨，并将成为60亿美元杀菌剂市场的主要发展方向，其市场前景非常广阔。

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂通过键合在病原菌细胞线粒体中细胞色素b(Cytb)的还原型辅酶Q的氧化位点(Qo位点)，阻止细胞色素b和c1之间的电子传递，从而抑制线粒体的呼吸作用，干扰细胞能量三磷酸腺苷(ATP)的供给，发挥杀菌作用。由于作用位点单一，甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂最容易产生抗性。目前已发现在美国、欧盟、日本、巴西、中南美、亚洲的柬埔寨、日本、菲律宾、澳大利亚等十多个国家和地区发现病原菌对甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂产生抗性。这些植物病原真菌包括：白粉病菌、黑星病菌、赤霉病菌、链格孢菌、稻瘟病菌、早疫病菌、灰霉病菌、黑斑病菌、壳针孢叶斑病菌、纹枯病菌、霜霉病菌等60余种。其抗性的作用机制是病原真菌体内细胞色素b的氨基酸残基发生单点突变，抗药突变体发生突变的区域主要集中在Cytb基因序列上氨基酸127-147位和275-296位，其中在127-147位发生突变，表现出高水平的抗性。已报道的突变位点包括：1)G143A突变，该突变最普遍，已在小麦白粉病菌、单囊壳白粉病菌、瓜类霜霉病菌、葡萄霜霉病菌、香蕉叶斑病菌和苹果黑星病菌的抗性菌株中被检测到。2)F129L突变，已在瓜果腐霉病菌和稻瘟病菌的抗性菌株中被检测到。3)G137R、L275F、L275S等点突变。这些突变体使病原菌对抑制剂产生抗性的原因可能是由于靶蛋白与抑制剂分子间的结合能增加所致。另外，4)替代氧化酶(AOX)的作用也可降低甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的抑菌活性，研究表明，Qo位点和还原型辅酶Q的还原位点(Qi)可以被对氰化物不敏感的AOX所替代，从而可能产生抗性；当苯氧菌胺阻止了细胞色素途径时，稻瘟病菌就会诱导AOX呼吸作用。

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的商品化数量正在快速增加，该类杀菌剂在我国已有生产和使用。由于频繁和广泛地重复使用，该类杀菌剂残留问题正在引起各国相关管理部门的重视，美国、加拿大、欧盟等许多国家或国际组织均制订了该类杀菌剂在食品和农产品中的残留限量。该类杀菌剂残留问题有可能成为国外限制我国农产品出口的新一轮技术壁垒；另一方面，由于该类杀菌剂的作用位点单一，抗性问题日趋严重，使用者必须严格执行抗性治理策略，合理使用该类药剂，对使用者提出了越来越高的要求，提升了该类杀菌剂的实际使用成本。近年来，面临扩大防治谱、延缓该类杀菌剂的抗性、减低使用量、降低该类杀菌剂残留量等重要的现实问题，甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的复配产品是各大农药公司的研究重点。因此，本领域迫切需要开发新的杀菌活性高、防治病害效果好、具有新的作用机制、降低抗性风险的杀菌组合物。

发明内容

本发明的目的就是提供一种杀菌活性高、防治病害效果好、具有新的作用机制、降低抗性风险的杀菌组合。

本发明的第一方面，提供了一种杀菌组合物，所述杀菌组合物包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。

在另一优选例中，所述第一活性成分是吡唑醚菌酯或嘧菌酯。

在另一优选例中，所述第二活性成分选自下组：腐胺、组胺、尸胺、胱胺、亚精胺、5-(生物胺基)戊胺、荧光素尸胺，或其组合。

在另一优选例中，所述第二活性成分选自下组：组胺、胱胺、亚精胺、5-(生物胺基)戊胺，或其组合。

在另一优选例中，所述第一活性成分与第二活性成分的摩尔比为1：50～50:1。

在另一优选例中，所述第一活性成分与第二活性成分的摩尔比为1：20～20:1。

在另一优选例中，所述的组合物为水溶液形式，且所述第一活性成分的剂量为0.1～10000μg/mL。

在另一优选例中，所述的组合物为水溶液形式，且所述第二活性成分的使用浓度为10～10000μg/mL。

在另一优选例中，所述第二活性成分的使用浓度为10～1000μg/mL。

在另一优选例中，所述第二活性成分的使用浓度为1000～10000μg/mL。

本发明的第二方面，提供了一种农药组合，所述农药组合包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。

本发明的第三方面，提供了一种如本发明第一方面所述的杀菌组合物在防治植物病菌病害中的用途。

在另一优选例中，所述病害是植物真菌导致的病害；较佳地，所述病害是霉菌导致的病害。

在另一优选例中，所述植物是小麦或番茄。

在另一优选例中，所述病害是小麦赤霉病和/或番茄灰霉病。

在另一优选例中，所述杀菌组合物通过增加病菌的自噬作用和/或阻滞病菌细胞膜的渗透能力来防治植物病菌病害。

在另一优选例中，本发明提供了如本发明第一方面所述的杀菌组合物在防治小麦赤霉病和/或番茄灰霉病中的用途。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1A是吡唑醚菌酯和杀菌组合物防治番茄灰霉病的保护效果图；图1B是吡唑醚菌酯和杀菌组合物防治番茄灰霉病的治疗效果图。

图2A是嘧菌酯和杀菌组合物防治番茄灰霉病的保护效果图；图2B是嘧菌酯和杀菌组合物防治番茄灰霉病的治疗效果图。

图3A是吡唑醚菌酯和杀菌组合物防治番茄灰霉病的保护效果图；图3B是吡唑醚菌酯和杀菌组合物防治番茄灰霉病的治疗效果图。

图4A是吡唑醚菌酯和杀菌组合物防治小麦赤霉病的保护效果图；图4B是吡唑醚菌酯和杀菌组合物防治小麦赤霉病的治疗效果图。

图5A是不添加胱胺条件下，嘧菌酯对小麦赤霉病菌色素的抑制效果图；图5B是添加胱胺条件下，嘧菌酯对小麦赤霉病菌色素的抑制效果图。

图6是添加和不添加胱胺条件下，吡唑醚菌酯对小麦赤霉病菌产生自噬体的增强效果图。

具体实施方式

本发明人经过广泛而深入的研究，通过大量筛选，首次开发了一种新颖的杀菌组合物。本发明杀菌组合物包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。本发明还提供了一种农药组合，所述农药组合包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。在此基础上完成了本发明。

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂(Strobilurin fungicides)是以天然产物嗜球果伞素A(Strobilurin A)为先导化合物研发的仿生类农药，对子囊菌纲、半知菌纲、担子菌纲、和卵菌纲等几乎所有的真菌病害具有高效的杀菌活性，对苯并咪唑类、二羧酰胺类、苯甲酰胺类、和甾醇14α-脱甲基化酶抑制剂等产生抗性的病原真菌也具有良好的防治效果，具有低毒、高活性、广谱、内吸性等特点，该类杀菌剂还有延长作物的营养生长和提高产量的功效，被广泛应用于谷类作物、蔬菜、水果等作物。该类杀菌剂还具有高度选择性，对人、畜、作物及有益生物安全，对环境基本无污染作用。已成为近十年来全球农药领域中继苯并咪唑类和三唑类杀菌剂之后最具有发展潜力和市场活力的一类杀菌剂。

目前全球广泛使用的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂包括嘧菌酯、吡唑醚菌酯、肟菌酯、醚菌酯、啶氧菌酯、氟嘧菌酯、苯氧菌胺、醚菌胺、肟醚菌胺、唑菌胺酯、烯肟菌酯、烯肟菌胺、氯啶菌酯、丁香菌酯、苯醚菌酯等。

一级脂肪胺类化合物

本发明中与甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂复合使用的一级脂肪胺类化合物包括常见的谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase)竞争性胺类抑制剂，具体包括腐胺、胱胺、亚精胺、组胺、尸胺、5-(生物胺基)戊胺、荧光素尸胺中的一种或多种(结构如下图所示)。

农用组合物或制剂

可将本发明的杀菌组合物(杀菌组合物包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。)以常规的方法制备成农用制剂，例如溶液剂、乳剂、混悬剂、粉剂、泡沫剂、糊剂、颗粒剂、气雾剂、用活性物质浸渍的天然的和合成的材料、在多聚物中的微胶囊、用于种子的包衣剂。

这些制剂可用已知的方法生产，例如，将杀菌组合物与扩充剂混合，这些扩充剂就是液体的或液化气的或固体的稀释剂或载体，并可任意选用表面活性剂即乳化剂和/或分散剂和/或泡沫形成剂。例如在用水作扩充剂时，有机溶剂也可用作助剂。

用液体溶剂作稀释剂或载体时，基本上是合适的，如：芳香烃类，例如二甲苯，甲苯或烷基萘；氯化的芳香或氯化的脂肪烃类，例如氯苯，氯乙烯或二氯甲烷；脂肪烃类，例如环己烷或石蜡，例如矿物油馏分；醇类，例如乙醇或乙二醇以及它们的醚和脂类；酮类，例如丙酮，甲乙酮，甲基异丁基酮或环已酮；或不常用的极性溶剂，例如二甲基甲酰胺和二甲基亚砜，以及水。

就液化气的稀释剂或载体说，指的是在常温常压下将成为气体的液体，例如气溶胶推进剂，如卤化的烃类以及丁烷，丙烷，氮气和二氧化碳。

固体载体可用研磨的天然矿物质，例如高岭土，粘土，滑石，石英，活性白土，蒙脱土，或硅藻土，和研磨合成的矿物质，例如高度分散的硅酸，氧化铝和硅酸盐。供颗粒用的固体载体是碾碎的和分级的天然锆石，例如方解石，大理石，浮石，海泡石和白云石，以及无机和有机粗粉合成的颗粒，和有机材料例如锯木屑，椰子壳，玉米棒子和烟草梗的颗粒等。

非离子的和阴离子的乳化列可用作乳化剂和/或泡沫形成剂。例如聚氧乙烯-脂肪酸酯类，聚氧乙烯-脂肪醇醚类，例如烷芳基聚乙二醇醚类，烷基磺酸酯类，烷基硫酸酯类，芳基磺酸酯类以及白蛋白水解产物。分散剂包括，例如木质素亚硫酸盐废液和甲基纤维素。

在制剂中可以用粘合剂，例如羧甲基纤维素和以粉末，颗粒或乳液形式的天然和合成的多聚物，例如阿拉伯胶，聚乙烯基醇和聚乙烯醋酸酯。

可以用着色剂例如无机染料，如氧化铁，氧化钻和普鲁士蓝；有机染料，如有机染料，如偶氮染料或金属钛菁染料；和用痕量营养剂，如铁，猛，硼，铜，钴，铝和锌的盐等。

在本发明中，所述“农药组合”是农用植物生长调节剂，其含有本发明第一方面所述的杀菌组合物的第一活性成分和第二活性成分；以及农业上可接受的载体。

如本文所用，所述“农业上可接受的载体”是用于将本发明第一方面所述的杀菌组合物和/或本发明第二方面所述的农药组合传送给植物的农药学上可接受的溶剂、悬浮剂或赋形剂。载体可以是液体或固体。适用于本发明的农业上可接受的载体选自下组：水、缓冲液、DMSO、表面活性剂如Tween-20、或其组合。任何本领域技术人员已知的农业上可接受的载体均可用于本发明中。

本发明的杀菌组合物可与其他防治小麦赤霉病和/或番茄灰霉病的物质制成一种混合物存在于它们的商品制剂中或从这些制剂制备的使用剂型中。

此外，本发明的农用制剂也可与增效剂制成一种混合物存在于它们的商品制剂中或从这些制剂制备的使用剂型中，这些增效剂是提高活性物质作用的化合物，由于活性物质本身有活性，也可不必加增效剂。

本发明所述的农药组合的剂型可以是多种多样的，只要能够使活性成分有效地到达植物体内的剂型都是可以的，从易于制备和施用的立场看，优选的农用制剂是一种喷雾剂或溶液制剂。

本发明所述的杀菌组合物通常含有占所述农药组合总重量的0.0001-99wt％，较佳地，0.1-90wt％。商品制剂或使用剂型中的本发明的活性物质的浓度可在广阔的范围内变动。商品制剂或使用剂型中的本发明化合物的浓度可从0.0000001-100％(g/v)，最好在0.0001与1％(g/v)之间。

杀菌组合物在防治植物病菌病害中的用途

本发明提供了一种杀菌组合物在防治植物病菌病害中的用途，包括：将本发明第一方面所述的杀菌组合物，或本发明第二方面所述的农药组合与小麦赤霉病和/或番茄灰霉病病菌接触，从而抑制小麦赤霉病和/或番茄灰霉病病菌的生长。

施用可采用已知的各种方法，例如，通过在植物叶片、繁殖材料上喷洒、喷雾、喷粉或播撒本发明第一方面所述的杀菌组合物，或本发明第二方面所述的农药组合，或以其他方式使植物接触本发明第一方面所述的杀菌组合物，或本发明第二方面所述的农药组合，如果是种子，则通过涂布、包裹或以其他方式处理种子。另一种在种植前直接处理植物或种子的方法，还可将本发明的杀菌组合物或农药组合引入土壤或其他待播种种子的培养基。在一些实施方案中，还可以使用载体，所述载体可以是如上所述的固态、液态。

在一优选实施方式中，还可以通过喷洒(如飞机喷洒)或灌溉将本发明第一方面所述的杀菌组合物，或本发明第二方面所述的农药组合递送给所述植物。

本发明的主要优点包括：

(1)本发明杀菌组合物的杀菌活性高，效果好于单独使用甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。

(2)本发明杀菌组合物的防治病害效果好，效果好于单独使用甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。

(3)本发明杀菌组合物具有新的作用机制、抗性风险低。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。以下实施例中所用的实验材料和试剂如无特别说明均可从市售渠道获得。

实施例1.胱胺和吡唑醚菌酯杀菌组合物对番茄灰霉病的防治效果实验方法：用含0.1％(g/v)Triton X-100的去离子水稀释吡唑醚菌酯母液(1000μg/mL，二甲基亚砜溶液)和胱胺母液(10000μg/mL，水溶液)，吡唑醚菌酯的实验浓度为50μg/mL，杀菌组合物的实验浓度为吡唑醚菌酯(50μg/mL)+胱胺(50μg/mL)。用打孔器(直径3mm)在干净的番茄中部打孔，在A组番茄中，用移液枪向孔中注射10μL的实验药剂；在B组番茄中，向孔上接种培养3d的番茄灰霉病菌的菌饼(直径6mm)，将菌丝贴在孔上。将两组实验的番茄放在25℃培养箱中黑暗培养12h，然后向A组番茄上接种番茄灰霉病菌的菌饼，将B组番茄上的菌饼剔除，并向孔中注射10μL实验药剂。对照组番茄中注射10μL的清水。重新放进培养箱中恒温继续培养5天，检查番茄发病情况。

结果表明(如图1所示)，对照组番茄上的病斑已经侵染表面的1/2，并可见茂盛的灰色菌丝体，病害发生严重。在A组番茄上，吡唑醚菌酯单剂和杀菌组合物都显示出较好的保护作用，且杀菌组合物的保护效果优于吡唑醚菌酯单剂；在B组番茄上，吡唑醚菌酯单剂和杀菌组合物处理中番茄上都出现灰霉病的病斑，但杀菌组合物处理的番茄上的病斑明显较小，表明更高效的治疗效果。

实施例2.胱胺和嘧菌酯杀菌组合物对番茄灰霉病的防治效果

实验方法：采用与实施例1相同的实验方法，其中嘧菌酯的实验浓度为50μg/mL，杀菌组合物的实验浓度为嘧菌酯(50μg/mL)+胱胺(200μg/mL)。处理后置于25℃培养箱中恒温黑暗培养5天，检查番茄发病情况。

结果表明(如图2所示)，对照组番茄上具有明显的灰霉病病斑，且病斑上产生了灰色菌丝体和分生孢子，病害发生严重。在A组番茄上，嘧菌酯单剂处理的番茄上出现较小的病斑，且病斑上产生菌丝，而杀菌组合物处理的番茄上也出现较小的病斑，但没有产生明显的菌丝，显示出更优越的保护效果。在B组番茄上，嘧菌酯单剂和杀菌组合物处理中番茄上都出现灰霉病的病斑，但杀菌组合物处理的番茄上的病斑不显著，没有出现菌丝体，表明更高效的治疗效果。

实施例3.亚精胺和吡唑醚菌酯杀菌组合物对番茄灰霉病的防治效果

实验方法：用含0.1％(g/v)Triton X-100的去离子水稀释吡唑醚菌酯母液(1000μg/mL，二甲基亚砜溶液)和亚精胺母液(10000μg/mL，水溶液)，吡唑醚菌酯的实验浓度为100μg/mL，杀菌组合物的实验浓度为吡唑醚菌酯(100μg/mL)+亚精胺(100μg/mL)。在干净的番茄叶片上用针刺孔，在A组番茄叶片上喷施1mL药剂，室温下晾干，置于37℃光照培养箱中保湿培养1天后，接种处于生长对数期的菌饼(直径6mm)，将菌丝面贴在针孔处；在B组番茄叶片的针孔处接种处于对数生长期的菌饼，将菌丝面紧在针孔伤口，置于37℃光照培养箱中保湿培养1天后，剔除菌饼并喷施1mL药剂，室温下晾干。设清水对照。然后重新置于光照培养箱中保湿培养4天，观察番茄叶片的发病情况。

结果表明(如图3所示)，经保湿培养4天后，所有番茄叶片上都出现了灰霉病病斑，对照组叶片上病斑面积巨大，几乎侵占整个叶片。吡唑醚菌酯单剂和杀菌组合物均表现出良好的保护效果和治疗效果，并且杀菌组合物处理的叶片上病斑面积明显小于吡唑醚菌酯单剂处理组，说明杀菌组合物具有更高效的番茄灰霉病防治效果。

实施例4.组胺和吡唑醚菌酯杀菌组合物对小麦赤霉病的防治效果实验方法：用含0.1％(g/v)Triton X-100的去离子水稀释吡唑醚菌酯母液(1000μg/mL，二甲基亚砜溶液)和组胺母液(10000μg/mL，水溶液)，吡唑醚菌酯的实验浓度为50μg/mL，杀菌组合物的实验浓度为吡唑醚菌酯(50μg/mL)+组胺(50μg/mL)。选取长势一致的新鲜小麦芽鞘(40mm)，将A组芽鞘在药液浸渍中2-3s，取出后晾干，置于25℃培养箱中黑暗保湿培养24h，在芽鞘中部用针刺孔，接种处于对数生长期的小麦赤霉病菌菌饼(直径6mm)。将B组芽鞘中部用针刺孔，接种处于对数生长期的小麦赤霉病菌菌饼，置于25℃培养箱中黑暗保湿培养24h，剔除菌饼，将芽鞘在药液浸渍中2-3s，取出后晾干。设清水对照。然后重新放入25℃培养箱中黑暗保湿培养3天，观察芽鞘的发病状况。

结果表明(如图4所示)，经培养3天后，对照组中芽鞘均发病严重，病斑沿着针孔上下显著扩展。吡唑醚菌酯单剂和杀菌组合物处理组中，芽鞘上的病斑都明显小于对照，表现出良好的保护效果和治疗效果，并且杀菌组合物处理的芽鞘上病斑明显小于吡唑醚菌酯单剂处理组，说明杀菌组合物具有更高效的小麦赤霉病防治效果。同时还发现，在保护效果实验中，杀菌组合物处理的芽鞘上病斑几乎没有扩展，说明杀菌组合物对芽鞘具有优越的保护效果。

实施例5.胱胺和嘧菌酯杀菌组合物对小麦赤霉病菌产生色素的抑制效果

实验方法：向A组PDB培养液中加入嘧菌酯母液(1000μg/mL，二甲基亚砜溶液)，至终浓度为0(对照)、0.05和5μg/mL，向B组PDB培养液中加入嘧菌酯母液(1000μg/mL，二甲基亚砜溶液)，至终浓度为0(对照)、0.05和5μg/mL，同时向各处理中添加胱胺母液(10000μg/mL，水溶液)，至终浓度为50μg/mL。然后向PDB培养液中接种处于对数生长期的小麦赤霉病菌菌饼，置于25℃恒温摇床(120rpm)，黑暗培养72h，观察菌丝的生长状况。

结果表明(如图5所示)，在不添加50μg/mL胱胺条件下，对照组中菌丝大量产生色素，呈红色菌球。嘧菌酯单剂能够抑制菌丝的生物量，菌丝球中色素的产量随嘧菌酯单剂浓度升高而减少。而在添加50μg/mL胱胺条件下，对照组中菌丝球都不产生色素，在处理组中嘧菌酯能够抑制菌丝的生物量，但菌丝球同样不产生色素。

实施例6.胱胺和吡唑醚菌酯杀菌组合物增强小麦赤霉病菌的自噬作用

实验方法：采用单丹磺酰尸胺(Monodansylcadaverine，MDC)染色法。将处于对数生长期的小麦赤霉病菌的菌丝接种到含有0(对照)、0.5和5μg/mL吡唑醚菌酯的PDB培养液中，其中一组不添加胱胺，另一组添加50μg/mL胱胺，在培养72h时，取出菌丝，在用PBS(pH7.4)洗涤两次后，将菌丝与10μM MDC溶液(10mM MDC储备溶液与新鲜培养基混合，1:1000)在37℃的黑暗中培养20min。在用PBS(pH 7.4)再次洗涤菌丝后，通过荧光显微镜(200×，Leica Microsystems DMI 3000B，德国)在激发波长为488nm条件下拍摄菌丝，分析并确定菌丝体内自噬体的数量。

结果表明(如图6所示)，在不添加胱胺条件下，对照组中菌丝体内存在少量的自噬泡，吡唑醚菌酯单剂作用后，菌丝体内自噬泡变小，数量增多。而在添加50μg/mL胱胺条件下，对照组中自噬泡显著增多，体积大，且形态不规则；经吡唑醚菌酯处理后，菌丝体中自噬泡数量显著增多，体积虽比对照中自噬泡变小，但大于在不添加胱胺条件下同浓度吡唑醚菌酯处理中菌丝内自噬泡的体积，甚至菌丝变细，说明杀菌组合物能显著增强小麦赤霉病菌的自噬作用。

实施例7.5-(生物胺基)戊胺和吡唑醚菌酯杀菌组合物阻滞番茄灰霉病菌的膜渗透作用

实验方法：将处于对数生长期的小麦赤霉病菌的菌丝接种到含有0(对照)、0.5和5μg/mL吡唑醚菌酯的PDB培养液中，其中一组不添加胱胺，另一组添加50μg/mL胱胺，在培养72h时，取出菌丝，用去离子水冲洗3次，然后取各处理组中菌丝体40mg，置于2mL去离子水中，在室温条件下分别于30、60、90、120、180、240、300和360min测定电导率，之后将各菌丝悬浮液煮沸3min，测定冷却后菌悬液的电导率。相对电导率计算公式为：相对电导率(％)＝某时间的电导率/冷却后的电导率×100％。

结果表明(如表1所示)，在不添加胱胺条件下，每个时间段时灰霉病菌的膜相对渗透率均随着吡唑醚菌酯单剂浓度的增大而升高，在360min时，0.05和50μg/mL吡唑醚菌酯单剂处理组中相对电导率分别是对照的1.18倍和2.41倍。而在添加50μg/mL胱胺条件下，0.05μg/mL吡唑醚菌酯处理组中相对电导率显著低于对照，而5μg/mL吡唑醚菌酯处理组中相对电导率与对照没有显著差别。在360min时，0.05和50μg/mL吡唑醚菌酯处理组中相对电导率分别降低为对照的0.73倍和1.15倍。说明杀菌组合物能够显著阻滞番茄灰霉病菌细胞膜的渗透能力。

表1.吡唑醚菌酯和5-(生物胺基)戊胺杀菌组合物作用下番茄灰霉病菌的膜相对渗透率(％)

上述实施例的实验结果表明，本发明的杀菌组合物由于胺类化合物的加入，不仅使杀菌组合物的杀菌活性得到最大程度的发挥，提高病害防治效果，而且具有新的作用机制，降低抗性风险。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种杀菌组合物，其特征在于，所述杀菌组合物包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。

2.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述第一活性成分是吡唑醚菌酯或嘧菌酯。

3.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述第二活性成分选自下组：腐胺、组胺、尸胺、胱胺、亚精胺、5-(生物胺基)戊胺、荧光素尸胺，或其组合。

4.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述第一活性成分与第二活性成分的摩尔比为1：50～50:1。

5.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述第一活性成分与第二活性成分的摩尔比为1：20～20:1。

6.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述的组合物为水溶液形式，且所述第一活性成分的剂量为0.1～10000μg/mL。

7.如权利要求1所述的杀菌组合物，其特征在于，所述的组合物为水溶液形式，且所述第二活性成分的使用浓度为10～10000μg/mL。

8.一种农药组合，其特征在于，所述农药组合包括：(a)作为第一活性成分的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；和(b)作为第二活性成分的一级脂肪胺类化合物。

9.如权利要求1所述的杀菌组合物在防治植物病菌病害中的用途。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述病害是植物真菌导致的病害；较佳地，所述病害是霉菌导致的病害。