JPH08501066A

JPH08501066A - ペプチド化合物

Info

Publication number: JPH08501066A
Application number: JP6500362A
Authority: JP
Inventors: ウンネアイム，チエル; クレミンガー，ペーテル; ソールバツケン，マグネ; アグネル，エーリク; ランゲ，マイノルフ
Original assignee: ハフスルンド・ニユコメド・アクシエセルカペト
Priority date: 1992-06-02
Filing date: 1993-06-02
Publication date: 1996-02-06
Also published as: EE9400180A; EP0673388A1; WO1993024523A1; ATE172204T1; NO944669D0; NO944669L; DE69321605D1; CN1086221A; LV10288A; LV10288B; AU4340393A; EP0673388B1; US5610141A

Abstract

(57)【要約】２個のペプチド鎖が、２価の架橋基-A-によって非−末端アミノ酸のＣα−原子において一緒に結合されているジペプチド化合物が開示されている。基-A-に結合しているＣα−原子は、それぞれのペプチド鎖における相当する位置に位置しておりそしてそれぞれ天然のα−側鎖を有していない。基-A-は、請求項１に定義される通りである。開示された架橋されたジペプチド化合物は、特に骨髄造血および骨髄細胞の細胞分裂に対して刺激活性を有している。

Description

【発明の詳細な説明】ペプチド化合物本発明は、細胞増殖に対して剌激効果を有するペプチドの使用、および特異的なおよび（または）一般的な細胞剌激効果を有する新規なペプチドに関するものである。哺乳動物の身体は、並みはずれた種々の構造および機能を有する細胞を含有しておりそして分化および発生の機構は、多くの研究の焦点になっている。連続的な繰返しを有する細胞の系においては、機構は普通、多能性の幹細胞の“貯蔵所 ”を包含し、これらの細胞が分裂しそして絶えず系に新らしい細胞を供給するということは知られている。一方“貯蔵所”から供給されている初め均一な幹細胞は間もなく一つまたは他の形態学に累を及ぼされてその後必要な機能細胞に発生する。このような幹細胞系の例は、骨髄における造血系および上皮もしくは表皮系である。幹細胞分裂の操作および制御は、治療的に大きな可能性を有しておりそして関係する機構および化学的メッセンジャー応答を解明するために多くの研究がつづけられている。現在までプロセス内の工程の刺激または抑制により細胞の産生および分化において役割を有するものとして、いくつかの生体分子が確認されている。この点に関して骨髄造血は特によく研究されておりそしてその制御に含まれる分子は、次のものを包含する：コロニー剌激因子(CSF)、例えば顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)、マクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)、顆粒球−マクロファージコロニー剌激因子(GM-CSF)、多系統コロニー剌激因子（マルチ−CSF;IL -3）〔Metcalf，Science 229 :16(1985)参照〕、インターロイキン11 (IL-11)〔Paul等、ProcNatl Acad Sc i USA 87:7521 (1990)参照〕、ラクトフェリン〔Broxmeyer等、Blood Cells 11: 429(1986)参照〕、プロスタグランジン〔Pelus等、J.Immunol 140:479(1988)参照〕、酸性（Ｈ−サブユニット）フエリチン〔Broxmeyer等、Blood 68:1257(198 6)参照〕、インターフェロン（α、βおよびγ）〔Pelus等およびBroxmeyer等、 J.Immunol 131:1300(1983)参照〕、腫瘍壊死因子（αおよびβ）〔Broxmeyer等、J.Immunol 136:4487(1986)参照〕、形質転換生長因子−β〔Ottman等、J.Immu nol 140:2661(1988)参照〕、およびアクチビンおよびインヒビン〔Broxmeyer等、Proc Natl Acad Sci USA86:779(1989)参照〕。また、血液調節ペンタペプチド(pEEDCK)が骨髄造血細胞の増殖を選択的に阻害するということ〔Paukovits等、Z.Naturforsch 37:1297(1982)参照〕および限定された一般式に相当する他のペプチドが造血において同様な抑制効果を示すことが発見されたということ〔EP-A-112656およびWO 90/02753参照〕も見出されている。ペプチド単量体の酸化は、システイン架橋によって結合された二量体分子を与えそしてこれらの二量体分子が骨髄造血を刺激することが見出されている〔La erum等、Exp.Hematol 16:274(1988)参照〕。(pEEDCK)₂二量体および他の同様な化合物は、WO-A-88/03535に開示されている。さらに、ジスルフィド結合が選択されたペプチド鎖を結合する炭素または炭素／硫黄架橋により置換された二量体ペプチド化合物が、EP-A 408371に開示されている。すなわち、この架橋は、加水分解に対して比較的安定であるが、それ自体不活性でありそして受容体−二量体相互反応に関与することができない。理論的考察により拘束されることを望むものではないけれども、現在、このようなペプチド化合物は生体内の間質細胞と相互反応するということおよびこの間質細胞が、他の可溶性因子により細胞分裂を刺激または抑制する原因となるということが信じられている。すなわち、二量体は刺激性細胞調節因子の間質産生を誘発または促進し、そして、これに対して単量体は、この処理することを抑制するかまたは細胞分裂を阻止するかまたは妨害する因子の産生を引き起すものであると信じられる。すなわち、現在の判断によれば間質細胞は、それぞれ二量体および単量体ペプチドの刺激効果または抑制効果を増幅するように作用することができる。生体内の有用なレベルまで細胞増殖を剌激することのできる二量体ペプチド化合物が引き続き要求されている。この点に関して、他の臨床状況よりもある臨床状況に対して異なる程度の剌激が適当であり、そして特に個々の細胞型の選択的剌激が重要である。本発明は、それぞれのペプチドの相当する位置における非−末端アミノ酸のＣ α−原子において、炭素−炭素結合によりまたは末端的に結合した２価の架橋基 -A-により一緒に結合した２個の単一鎖の血液調節性の特に造血を抑制するペプチドからなるペプチド化合物を提供する。上記ペプチド化合物において、天然α−側鎖は前記Ｃα原子にはなく、Ａは、C_1-6炭素鎖であり、そして（ｉ）(a) １個または２個以上の基-R^A、-OR^A、-SR^A、-NR^AR^Aまたは-COOR^A（式中、Ａは独立して水素原子またはモノ−またはポリヒドロキシル化されていてもよいC_1-6−アルキル、C_1-6−アルカノイルまたはC_1-6−アルコキシアルキル基を示す）によってまたは１個または２個以上のハロゲン原子、例えば弗素、塩素、臭素または沃素により置換されておりそして（または） (b)１個または２個以上の二重または三重炭素−炭素結合により中断されておりそして（または） (c)１個または２個以上の基-Z-〔式中、それぞれの-Z-は、独立して水素原子またはC_1-6アルキルまたはC_6-10アリール基である）であり、または、１個または２個以上の置換分または不飽和の炭素−炭素結合が-A-中に存在する場合は、-Z-はまた-S-であってもよい〕により中断されており、または（ii） (CH₂)_y（式中、ｙは、１、５または６である）であり、そして架橋基-A-中の炭素原子の総数は、好ましくは６より大でない。基R^Aがアルキル、アルコキシまたはアルカノイル基を示す場合は、これらはそれぞれ直鎖状または分枝鎖状である。適当なアルキル基は、メチル、エチル、２ −ヒドロキシエチル、プロピル、ブチル、1,3−ジヒドロキシブチル、２−メチル−３−ヒドロキシブチルおよびペンチルを包含する。メトキシ、エトキシ、プロポキシおよび２−ヒドロキシプロポキシが、すべて、基R^Aに対する適当したアルコキシ基であり、そしてこれに対して、アルカノイル基は、例えばホルミル、アセチル、プロピオニルである。アルキル基としてのR⁸としては、アルキル炭素鎖は、直鎖状または分枝鎖状でありそしてまた、R^Aに対して上述した基が適当である。すなわち、基Ａ（これは、上述したように、さらに置換されていてもよい）の適当な中枢は、次のものを包含する：血液調節効果を示す何れの単−鎖のペプチドも、本発明により架橋されるペプチドとして適している。上述した代りとして表現すると、本発明は、上記の血液調節性のペプチド鎖が式 R^a-R^b-R^C-R^d-(R^e)_n-R^f （Ｉ）のペプチドを包含する本発明による化合物を提供する。上記式において、 R^aは、を示し、 R^bは、を示し、 R^Cは、を示し、 R^dは、を示し、 R^eは、を示し、 R^fは、を示し、ｎおよびｍは、独立して、０または１を示し、ｐ、ｑおよびｒは独立して、１または２を示し、ｓは３または４を示し、 R¹およびR²は、両方水素原子であるか、または、一緒になってオキソ基を示し、 R³およびR⁴は、両方水素原子であるか、または一緒になって炭素−炭素結合を示し、 R⁵は、水素またはアシル基であり、各R⁶およびR⁷は、独立してヒドロキシ基またはアミノ基、好ましくはヒドロキシ基を示し、 R⁸は水素；C_2-6アルキル基；C_7-20アルアルキル基（これは１個または２個以上のヒドロキシ、アミノまたはメトキシ置換分を有していてもよい）；または代謝的に不安定なＳ−保護基を示し、 R⁹は水素またはメチル基を示し、そして R¹⁰はヒドロキシまたはアミノ基、アミノ酸グルタミンの残基またはＮ−末端グルタミン単位を有するペプチドの残基を示す。すべての上記アミノ酸残基は、Ｄ型またはＬ型にあることができる。しかしながら、Ｌ型のアミノ酸が好ましい。Ｎ−末端保護基R⁵が存在する場合は、これは、上述したように、１〜20個の炭素原子を有するアシル基、例えばアセチル基のような１〜５個の炭素原子を有する低級アルカノイル基またはベンゾイルまたはフェニルアセチル基のような７〜 20個の炭素原子を有するアロイルまたはアルアルカノイル基であることができる。 R⁵は、また、アミノ酸またはペプチド鎖から誘導されたアシル基であってもよい。特に、R⁵は、セリンまたは連続的なＮ−末端アミノ酸の除去による次のアミノ酸配列 Lys-Ile-Ile-His-Glu-Asp-Gly-Tyr-Ser から誘導された何れかのペプチドから誘導されたアシル基であることができる。式（Ｉ）の全体のペプチドの末端アミノ基は、好ましくは、例えばアルカノイル、アラルカノイルまたはアロイル基によるアシル化によって保護される。 R⁸がC_2-6アルキル基である場合には、これは、例えばエチル、ブチルまたはヘキシル基である。R⁸がアラルキル基である場合は、これは、有利にはアリールメチル基、例えばベンジル、ジフェニルメチルまたはトリフェニルメチルである。R⁸が代謝的に不安定な基である場合には、これは例えば、５〜10個の炭素原子を有するアリールチオ基、例えばピリジルチオ基、または上述したようなアシル基である。本発明の化合物は、好ましくは、ペンタペプチドである、すなわちｎは好ましくは０である。 R^a基における環状基は、好ましくは５−員である、すなわち、ｍは好ましくは０である。上記式Ｉにより定義されたペプチドの何れもが、低いまたは無視できる血液調節活性を有するものである限りにおいてもこれらは、やはり、本発明による架橋形態において、細胞増殖の剌激にそれに拘らず有効である。式Ｉに記載したようなペプチド鎖から形成された二量体のペプチドにおいては、鎖の架橋点は、望ましくはR^dにある。本発明による特に好ましいペプチド化合物は、式II （式中、R^a、R^b、R^c、R^e、R^f、Ａおよびｎはすべて上述した通りでありそして基 -NH-CH-CO-は、R^dの誘導された形態であって、それは、その天然側鎖が存在しないような方法で架橋基-A-に結合している）の化合物である。式IIの一つの特に好ましいペプチド化合物は、（式中、基-A-は、上述検討された２価の架橋基）である。本発明は、特に、骨髄損傷、無顆粒球症および再生不良貧血を包含する骨髄造血活性が減少した患者における骨髄造血を剌激するのに使用される。これは、例えば骨髄移植の外科手術におけるような、組織反応を抑制する免疫抑制処理のために低下した骨髄機能を有する患者の治療を包含する。本発明の化合物は、また、新生物形成およびウィルス疾患に対する細胞増殖性抑制化学療法および放射線療法後の骨髄のより急速な再生を促進するために使用することもできる。さらに、加えてこの新規な化合物は、患者が骨髄機能不全後の免疫応答の欠除のために重大な感染を有する場合に特に価値のあるものである。もう一つの臨床的適用は、EP-A-112656またはWO-A-90/02753に開示されているような相当する単量体または関連した骨髄造血阻害剤と組み合わせて、骨髄細胞における高いおよび低い活性度の交互のピークを誘発させ、それによって、造血の自然の日周期のリズムを増大させることである。この方法において、細胞増殖抑制治療を低い骨髄活性の期間に与え、それにより骨髄損傷の危険を減少し、一方では、引き続き起る活性のピークによって再生を促進させる。一般に、刺激効果を発揮させるために、本発明のペプチドは、１日に0.001〜1 00mg、例えば体重70kg当り１〜５mgの投与量範囲で、経口的にまたは注射によってヒト患者に投与することができる。もし静脈内にまたは皮下に投与される場合は、この投与量は、10日まで１日につき体重70kg当り１〜10mgの範囲例えば約６mgであってよい。鼻、局所（経皮的）または直腸的投与もまた勿論可能である。原則的に、患者の細胞外液において、約 10^-13Ｍ〜10^-5Ｍのペプチドの濃度を産生することが望ましい。さらに本発明の他の特徴によれば、医薬担体または賦形剤と一緒にした、活性成分として上述した式（Ｉ）の化合物またはその生理学的に許容し得る塩の１種または２種以上の化合物を含有する医薬組成物が提供される。本発明によるこの組成物は、例えば、経口的、鼻的、非経口的または直腸的投与に適した形態で与えられる。本明細書において使用される“医薬”なる用語は、本発明の家畜適用を包含する。本発明による化合物は、普通の薬理学的投与形態、例えば錠剤、被覆された錠剤、鼻スプレー、溶液、乳濁液、粉末、カプセルまたは持続性放出形態で与えることができる。これらの形態の製造に対しては、普通の医薬の賦形剤ならびに普通の製法を使用することができる。錠剤は、例えば、活性成分を既知の賦形剤、例えば、希釈剤、例えば炭酸カルシウム、燐酸カルシウムまたはラクトース、崩壊剤、例えばとうもろこし澱粉またはアルギン酸、結合剤、例えば澱粉またはゼラチン、滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウムまたはタルクおよび（または）持続性の放出を得るための剤、例えばカルボキシポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、セルロースアセテートフタレートまたはポリ酢酸ビニルと混合することによって製造することができる。錠剤は、必要に応じて、数層からなっていてもよい。被覆された錠剤は、錠剤と同様な方法で得られた芯を、普通錠剤コーティングに使用される剤、例えばポリビニルピロリドンまたはシェラック、アラビアゴム、タルク、二酸化チタンまたは糖で被覆することによって製造することができる。持続性放出を得るためにまたは禁忌性を回避するために、芯は、数層からなっていてもよい。また、錠剤−被覆は、持続性を得るために、数層からなっていてもよく、そしてこの場合において、錠剤に対して上述した賦形剤を使用することができる。器官特異的担体系も、また、使用することができる。注射用の溶液は、例えば防腐剤、例えばｐ−ヒドロキシベンゾエートまたは安定剤、例えばEDTAを添加することによるような普通の方法で製造することができる。それから、溶液を、注射用のバイアルまたはアンプルに充填する。鼻用のスプレーは、同様に水溶液で処方しそしてエーロゾル発射剤と一緒にスプレー容器に充填するかまたは手動圧搾の手段により与えられる。１種または数種の活性成分を含有するカプセルは、例えば活性成分を不活性担体、例えばラクトースまたはソルビトールと混合しそしてこの混合物をゼラチンカプセルに充填することによって製造することができる。適当な坐剤は、例えば、活性成分または活性成分の組み合わせを、この目的に対して予想される普通の担体、例えば天然の脂肪またはポリエチレングリコールまたはその誘導体と混合することによって製造することができる。本発明の化合物を含有する投与用量単位は、好ましくは、式（Ｉ）のペプチドまたはそれらの塩の0.1〜10mg、例えば１〜５mgを含有する。すなわち、本発明は、細胞分裂の剌激に使用される上述したペプチド化合物および組成物を提供する。細胞分裂を剌激する医薬り製造における本発明によるペプチド化合物の使用は、本発明のさらに別の見地を形成する。骨髄造血の骨髄再生の阻害は、特に重要なことである。さらに、本発明のさらに他の特徴によれば、上述した化合物または医薬組成物の有効量を投与することからなる細胞分裂、特に骨髄造血の刺激方法が提供される。しかしながら、新規なペプチドのさらに主要な使用は、免疫学的試験技術に対する物質の製造である。ペプチドは、それから、抗体−産生動物（例えばウサギ、モルモットまたはヤギ）に注射するために、アルブミン、ポリリジンまたはポリプロリンのような適当な高分子担体に共有的に結合させることができる。試験管内免疫化技術もまた使用することができる。高分子担体を使用して、公知の吸収技術の使用により、高い特異性の抗血清が得られる。ペプチド分子に放射能（³ H、¹²⁵I、¹⁴C、³⁵S）を導入することによって、放射免疫試験を企図しそして血清（血漿）、尿および脳脊髄液のような種々の生物液中のペプチドを測定するのに使用することができる。本発明のペプチドは、何れかの有利な方法で製造することができる。アミノ酸単位を形成する適当な方法は、例えばRobert M.Williamsによる“Synthesis of Optically Active α-Amino Acids”(Pergamon Press,1989)に記載されている。一般に、存在する反応性の側鎖基（アミノ、チオールおよび（または）カルボキシル）は、全合成のカップリング反応中保護されるが、ある側鎖基（ヒドロキシ基、イミダゾール基、第１アミド基、pyroGluのような環状アミノ酸のアミド基）は、全体の合成操作中保護しないで残しておくことが可能である。すなわち、最終工程は、一般式Ｉのペプチドの完全に保護されたまたは部分的に保護された誘導体の脱保護でありそしてこのような方法は、さらに本発明の他の一見地を形成する。ルキル化による種々のアミノ酸の製造を記載している〔例えば、Tetrahedron 39 :2085(1983)およびTopics Curr Chem 109:65(1983)参照〕。この方法の使用は、特に本発明の基部を形成する架橋されたアミノ酸の製造に対して特に有用であることが判明した。特に、バリン−グリシンジペプチドから誘導されたビス−ラクチムエーテルは、架橋反応に対して有用な出発化合物を形成する。この反応は以下の通り要約することができる。（式中、Ｘはハロゲン原子、例えば臭素のような脱離基である）。Ｄ−バリンを初期にビス−ラクチムエーテルを形成するために使用する場合は、この方法によって架橋された(S,S)−α，α′−ジアミノ酸を製造することができる。同様に、Ｌ−バリンの使用によって架橋された(R,R)−α，α′−ジアミノ酸を形成することができる。本発明の架橋されたジペプチド化合物の基部を形成する架橋されたα，α′− ジアミノ酸を製造するのに有用な他の方法は、Vederas等により開発されそしてJ .Am.Chem.Soc.107:7105(1985)およびJ.Am.Chem.Soc.110:2237(1988)に報告されている方法の使用である。この方法は、セリンから誘導されたβ−ラクトンの環開裂反応に依存する。β−ラクトンは、ラクトンアルキル−酸素結合の開裂を起す多数の“ソフト(soft)”求核試薬と反応させることができる。オキサおよびチア類似体を包含するアザ−置換した架橋されたアミノ酸を、この方法によって製造することができる。この方法は、次のスキームで説明される。 -A-が-CH₂-である本発明による架橋されたジペプチド化合物に対しては、Belo kon等、Izv．Akad．Nauk．SSSR．Ser Khim，(1987)，852(Chemical Abstracts 1 08 :132255v)が参照される。すなわち、本発明はまた、部分的にまたは完全に保護された誘導体を脱保護することからなるペプチド化合物の製法を提供する。もう一つの見地においては、本発明は、さらに (a)ビス−ラクチムエーテルを金属化しそして次にアルキル化してビス−ラクチムジペプチドエーテルを形成させ； (b)工程(a)のビス−ラクチムジペプチドエーテルを加水分解して架橋されたα， α′−ジアミノ酸を形成させ； (c)ペプチド鎖中の残りのアミノ酸を導入し；そして (d)保護された基を脱保護することからなるペプチド化合物を製造する方法を提供する。この技術により製造されたビス−ラクチムジペプチドエーテルおよび架橋された酸、α，α′−ジアミノ酸は、さらに、本発明の更の見地を形成する。一旦架橋されたジペプチドが形成したら、次に、ペプチド鎖中の残りのアミノ酸を、普通の技術を使用して導入することができる。ペプチド鎖の構成においては、原則的にＣ−末端またはＮ−末端において出発することができるけれども、Ｃ−末端出発操作のみが普通使用される。すなわち、例えばリジンの適当に保護された誘導体を、システインの適当に保護された誘導体と反応させることによって、Ｃ−末端において出発することができる。リジン誘導体は遊離のα−アミノ基を有し、他方において、他の反応剤は、遊離のまたは活性化されたカルボキシル基および保護されたアミノ基を有している。カップリング後、中間体、例えばクロマトグラフィーにより精製しそしてそれから選択的にＮ−脱保護させて、さらに他のＮ−保護されたそして遊離または活性化されたアミノ酸残基の添加を可能にする。この操作は、必要なアミノ酸連鎖が完了するまでつづけられる。例えば使用することのできるカルボン酸活性化置換分は、対称または混合無水物または活性化されたエステル、例えばｐ−ニトロフェニルエステル、2,4,5− トリクロロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル(OBt )、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミジルエステル(OSu)またはペンタフルオロフェニルエステル(OPFP)を包含する。遊離アミノ基およびカルボキシル基のカップリングは、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)を使用して行うことができる。例えば使用することのできる他のカップリング剤は、Ｎ−エトキシカルボニル−２−エトキシ−1,2−ジヒドロキノリン(EEDQ)である。一般に、有利には適当な溶剤系、例えばテトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、塩化メチレンまたはこれらの溶剤の混合物中で、低温度、例えば−20℃〜周囲温度でカップリング反応を行うことが有利である。固相樹脂支持体上で合成を実施することがより有利である。クロロメチル化ポリスチレン（ジビニルベンゼン１％で架橋結合した）が、支持体の一つの有用な型である。この場合においては、合成は、例えば支持体にＮ−保護されたリジンをカップリングさせることによって、Ｃ−末端において出発する。多数の適当な固相技術がEric Atherton，Christopher J．LoganおよびRobert C．Sheppard，J．Chem．Soc．Perkin I、538〜546(1981):James P．Tam，Foe S ．TjoengおよびR．B.Merrifield，J．Amer．Chem．Soc．102，6117〜27(1980)； James P．Tam，RichardD．DimarchiおよびR．B．Merrifield，Int．J．Peptide Protein Res 16，412〜25(1980)；Manfred MutterおよびDieter Bellof，Helvet ica Chimica Acta 67，2009〜16(1984)によって記載されている。カップリング反応を溶液中で遂行することもできる。アミノ酸に対する保護基の広範囲の選定が知られておりそして Academic Press，New YorkおよびLondon，1965および1966；PettitG．R.，Synth etic Peptides，Vols．1-4，Van Nostrand，Reinhold，New York 1970，1971，1 975および1976；Houben-Weyl，Methodender Organischen Chemie，Synthese Vo n Peptiden，Band 15，Glorg Thieme Verlag Stuttgart，NY，1983；The Peptid es，Analysis，Synthesis，biology 1-7，Ed：Erhard Gross，Johannes Meienho fer，Academic Press，NY，San Fransisco，London；Solid Phase Pepーtide，Sy nthesis 2nd ed.，John M．Stewart，Janis D．Young，Pierce Chemical Compan yにおいて例示されている。すなわち例えば、使用し得るアミン保護基は、カルボベンゾキシ(Z-)、ｔ−ブトキシカルボニル(Boc)、４−メトキシ-2,3,6-トリメチルベンゼンスルホニル(N tr-)および９−フルオレニルメトキシカルボニル(Fmoc-)を包含する。ペプチドをＣ−末端から構成する場合は、アミノ保護基が、添加されるそれぞれの新規な残基のα− アミノ基上に存在しそして次のカップリング工程に先立って選択的に除去されることが必要である。固相系においては、このような一時的なアミン保護に対する一つの有用な基は、Fmoc基でありそしてこの基は、有機溶剤中でピペリジンで処理することにより選択的に除去することができる。溶液中における合成においては、Boc-が好ましい保護基でありそしてこの基は、普通の方法で導入しそして除去することができる。アミノ酸またはペプチドは、しばしば、有機溶剤中における溶解性を改善するために、例えばFmocの添加による保護に先立って、シリル化されることが必要である。シリル化およびFmoc保護反応は、以下の通り要約される。例えば使用することのできるカルボキシル保護基は、容易に開裂できるエステル基、例えばベンジル(-OBzl)、ｐ−ニトロベンジル(-ONB)またはｔ−ブチル(-t OBu)ならびに固体支持体上のカップリング例えばポリスチレンに結合したメチル基を包含する。チオール保護基は、ｐ−メトキシベンジル(Mob)、トリチル(Trt) およびアセトアミドメチル(Acm)を包含する。上述した参照文献に詳述されているような広い範囲の他の基が存在しそして上述した方法におけるすべてのこのような基の使用が本発明の範囲に包含されることは理解されるべきである。アミン−およびカルボキシル−保護基を除去するための広範囲の操作が存在する。しかしながら、使用される合成戦略し両立しなければならない。側鎖保護基は、次のカップリング工程に先立って一時的なα−アミノ保護基を除去するために使用される条件に対して安定でなければならない。 Bocのようなアミン保護基およびtOBuのようなカルボキシル保護基は、酸処理、例えばトリフルオロ酢酸による酸処理によって、同時に除去することができる。Trtのようなチオール保護基は、沃素のような酸化剤を使用して、選択的に除去することができる。システイン含有ペプチドは、チオール保護基を包含するすべての保護基を最後の合成工程として除去するようにして、参考書に記載されている方法により合成することができる。以下の実施例は、説明のためにのみ記載するものである。実施例１ (S,S)−2,7−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（Ｅ） −オクト−４−エン−1,8−二酸(dioic acid) (a)1,4−ビス((2R,5S)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル− ５−ピラジニル）−（Ｅ）−ブト−２−エン −78℃のTHF(100ml)中の(2R)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−イソプロピルピラジン（5.53g，30ミリモル）の撹拌溶液に、ヘキサン中のブチルリチウムの1.55Ｍ溶液（19.62ml，31ミリモル）を、注入器により加えそして撹拌を−78 ℃で１時間つづけた。それから、THF(20ml)中の（Ｅ）−1,4−ジブロモブト−２ −エン（3.21g，15ミリモル）の溶液を、加えそして撹拌を一夜つづけた。溶剤を減圧下で除去しそして残留物をジエチルエーテルに溶解しそして水で抽出した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、エーテルで蒸発しそして残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（１／４の酢酸エチル／ヘキサン；シリカゲル）により精製した。収量4.73g(75％)。淡黄色の液体。¹ H NMR(CDCl₃)：δ 0.67(d,6H)，1.04(d,6H)，2.1-2.4(m,2H)，2.48(dd,4H)，3. 67(s,6H)，3.68(s,6H)，3.93(dd,2H)，4.03(dd,2H)，5.35(dd,2H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ 16.52，19.07，31.65，37.09，52.16，52.23，55.62，60.6 0，127.50 C₂₂H₃₅N₄O₄(420) 計算値：Ｃ 62.86 Ｈ：8.57 Ｎ：13.33 実測値：Ｃ 62.65 Ｈ：8.62 Ｎ：12.91 (b)(S,S)−2,7−ジアミノ−（Ｅ）−オクト−４−エン−1,8−二酸ジメチルエステル 1,4−ビス((2R,5S)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル− ５−ピラジニル）−（Ｅ）−ブト−２−エン（4.02g，9.9ミリモル）および0.5 Ｎ HCl（40ml，20ミリモル）の混合物に、ジオキサン40mlを加えそしてこの溶液を、周囲温度で４時間撹拌した。次に、それを、ジエチルエーテルで抽出しそしてpH９に達するまで、水性アンモニアを水溶液に加えた。それから、水性相を、クロロホルムで抽出しそして有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶剤を除去した後、バリンメチルエステルを30〜40℃（0.04ミリバール）でbulb-to-bulb 蒸留により除去した。蒸留しなかった標記化合物を、さらに精製することなしに使用した。収量1.92g(84.3％)。黄色の油。¹ H NMR(CDCl₃)：δ 1.70(s,4H)，2.20-2.60(m,4H)，3.51(dd,2H)，3.69(s,6H)， 5.46(dd,2H)^l3 C NMR(CDCl₃)：δ 37.99，52.00，54.11，128.84，175.32 (c)(S,S)−2,7−ジアミノ−（Ｅ）−オクト−４−エン−1,8−二酸ジ塩酸塩 (S,S)−2,7−ジアミノ−（Ｅ）−オクト−４−エン−1,8−二酸ジメチルエステル（1.65g,7.17ミリモル）を、６Ｎ HCI（10ml，60ミリモル）と一緒に２時間還流下で加熱した。それから、溶剤を蒸発し、残留物を、水(10ml)に溶解しそしてエタノール(100ml)を加えた。白色の結晶を濾去しそして40℃で真空中で乾燥した。収量1.32g (67％)。白色の結晶。¹ H NMR(D₂O)：δ 2.53(dd,4H)，3.93(dd,2H)，5.49(dd,2H)¹³ C NMR(D₂O)：δ 33.57，53.07，128.49，171.49 C₈H₁₆N₂O₄Cl₂(275) 計算値：Ｃ 34.91 Ｈ 5.81 Ｎ 10.18 Ｃｌ 25.78 実測値：Ｃ 36.58 Ｈ 5.80 Ｎ 9.70 Ｃｌ 26.01 FAB-MSシグナル、m/z 465.3(11)，203.2(100)，157.1(19)，130.1(7)，93.0(18) ，73.9(13) (d)(S,S)−2,7−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（Ｅ）−オクト−４−エン−1,8−二酸酸塩酸塩、(S,S)−2,7−ジアミノ−Ｅ−オクト−４−エン−1,8−二酸ジ塩酸塩（1.59g，5.8ミリモル）を、ヘキサメチルジシラザン(20ml)に懸濁しそしてトリメチルシリルクロライド１mlを加えた。それから、この懸濁液を、一夜還流した。溶剤を、減圧下で除去しそして残留物を無水の塩化メチレンに溶解した。この溶液を、０℃に冷却しそして塩化メチレン中の９−フルオレニルメチルクロロホルメート（3.10g，12ミリモル）の溶液を加えた。この溶液を１時間撹拌し、それから冷却浴を除去した。次の朝、溶剤を蒸発しそして残留物をＴ肝に溶解した。それから、混合物を１Ｎ水性HClで反応中止(quench)しそして溶液を２時間撹拌した。有機溶剤を除去しそして水相をクロロホルムで抽出した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥しそして蒸発した。残留物を、塩化メチレンに溶解しそしてエーテルで沈殿させた。収量2.50g(67％)。白色の結晶。¹ H NMR(DMSO)：δ 2.2-2.4(s,4H)，3.6(s,2H)，3.9-4.5(m,8H)，5.55(s,2H)，7. 2-8.1(m,16H)¹³ C NMR(DMSO)：δ 33.98，46.56，53.93，65.49，119.66，124.81，126.61，12 7.17，127.98 140.19，143.28，155.43，172.59 C₃₈H₃₄N₂O₈(646) 計算値：Ｃ 70.59 Ｈ 5.26 Ｎ 4.33 実測値：Ｃ 70.17 Ｈ 5.58 Ｎ 4.08 FAB-MSシグナル、m/z 661.3(3)，647.4(3)，191.2(17)，179.2(100)，165.1(18) ，78.9(31) 実施例２ (S,S)−2,7−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ−（Ｚ）− オクト−４−エン−1,8−二酸 (a)1,4−ビス((2R,5S)−２，５−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−５−ビラジニル）−（Ｚ）−ブト−２−エン (2R)−（−）−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピルピラジン（1.3ml，6.4ミリモル）を、乾燥THF(20ml)に溶解しそして−78℃に冷却した。B uLi（ヘキサン中1.6Ｍ，3.9ml，6.4ミリモル）を滴加しそして溶液を、30分撹拌した。シス−1,4−ジクロロ−２−ブテン（0.32ml，３ミリモル）を、乾燥THF(1 0ml)に溶解しそして−78℃で１バッチで加えた。反応混合物を、N₂雰囲気下で一夜撹拌した。反応を塩化アンモニウム(3ml)で中止しそして蒸発した。残留物を、ジエチルエーテルで抽出しそして有機相を水で２回洗浄した。それから、それをMgSO₄上で乾燥しそして蒸発した。精製を、シリカゲル（ヘプタン：EtOAc／２：１）上で実施した。収量0.81g(60％)。明るい黄色の油。 TLC（ヘプタン：EtOAc／２：１）：Rf＝0.39 HPLC（50〜100％MeOH，10分）：Rf＝6.75分¹ H NMR(CDCl₃)：δ 0.66(d,6H)，1.02(d,6H)，2.55(m,2H)，2.66(m,4H)，3.66(s ,6H)，3.70(s,6H)，3.90(t,2H)，4.01(m,2H)，5.39(t,2H) (b)(S,S)−2,7−ジアミノ−（Ｚ）−オクト−４−エン−1,8−二酸ジメチルエステル 1,4−ビス((2R,5S)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル− ５−ピラジニル）−（Ｚ）−ブト−２−エン（0.58g，1.23ミリモル）を、ジオキサン(8ml)に溶解しそして0.25Ｍ HCl（8ml，2.5ミリモル）を加えそして周囲温度で一夜撹拌した。TLC（MeCN：MeOH：H₂O／４：１：１）。溶液を、ジエチルエーテルで抽出しそして水性相を蒸発した。残留物を小量の水に溶解しそしてアンモニア水溶液を、pH９に達するまで加えた。水性相をジエチルエーテルで２回抽出しそして有機相をMgSO₄上で乾燥しそして蒸発した。収量0.6g。黄色の油。 (c)(S,S)−2,7−ジアミノ−（Ｚ）−オクト−４−エン−1,8−二酸ジ塩酸塩 (S,S)−2,7−ジアミノ−（Ｚ）−オクト−４−エン−１，８−二酸ジメチルエステル（0.6g，1.3ミリモル）および濃塩酸(1ml)の混合物に、ジオキサン(10ml) を加えそして溶液を２時間還流しそしてそれから蒸発した。収量0.6g。白色の固体。¹ H NMR(D₂O)：δ 0.88(2d,6H)，2.15(m,1H)，2.57(2d,4H)，3.68(m,1H)，3.86(m ,2H)，5.51(m,2H) (d)(S,S)−2,7−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（Ｚ）−オクト−４−エン−1,8−二酸工程(c)から得られた酸塩酸塩（0.6g，2.2ミリモル）を、ヘキサメチルジシラザン(12ml)およびトリメチルシリルクロライド(12ml)に懸濁した。この懸濁液を、窒素下で一夜還流した。過剰のHMDSおよびTMS-Clを真空中で留去した。残留物を乾燥塩化メチルに溶解しそして０℃に冷却した。乾燥塩化メチル中のフルオレニルメチルクロロホルメート（712mg，2.8ミリモル）の溶液を加え、混合物を２時間撹拌しそしてそれから蒸発した。残留物をTHFに溶解し、１Ｍ HClで反応を中止しそして２時間撹拌した。有機溶剤を除去しそして水性相をクロロホルムで抽出した。有機層を、MgSO₄上で乾燥しそして蒸発した。精製を、シリカ（ヘプタン：EtOAc：AcOH ／３：６：１）上で実施した。 HPLC（0.1％のTFA中40〜70％のMeCN，10分）：Rt=4.75分¹ H NMR(CDCl₃)：δ 2.4-2.7(s,4H)，3.7(s,2H)，4.0-4.5(m,8H)，5.5(s,2H)，7. 1-7.8(m,16H) 実施例３ (S,S)−2,7−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−オクト −４−イン−1,8−二酸 (a)1,4−ビス((2R,5S)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル− ５−ピラジニル）−ブト−２−イン (2R)−（−）−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピルピラジン 2.76g（15ミリモル）を、乾燥THF100mlに溶解しそして−78℃に冷却し、それから1.6Ｍ BuLi溶液9.5ml（15ミリモル）を、撹拌しながら滴加した。１時間後に、1,4−ジクロロ−2,3−ブチン0.92g（7.5ミリモル）を、徐々に導入した。１時間後の反応混合物のTLCおよびガスクロマトグラフィー(GC)は、実質的な量の未反応の2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピルピラジンおよびモノアルキル化生成物を示す。反応を、一夜つづけそして徐々に周囲温度に到達させた。THFを、減圧下で蒸発除去しそして残留物を、エーテルと水との間に分配した。水相を、エーテルで２回抽出し、乾燥(MgSO₄)しそして蒸発した。反応混合物をKugelrohr蒸留して純粋な生成物2.3g(77％)を得た。¹ H NMR(CDCl₃)：δ 4.03(m,4H,ring H'S)，3.68(m,12H,4×OCH3)，2.63(br.AB q ,4H,2×CH₂)，2.27(m,2H,2×CH(CH₃)₂)，1.05(d，J=6.8Hz,6H,2×CH₃)，0.64(d, J=6.8Hz，6H,2×CH₃)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ 163.9，161.0，77.4，60.6(60.68)，54.6(54.2)，52.3，52 .2．31.6(31.20)，25.5(25.6)，19.3(19.5)，16.7(16.9) MS(CI)419(M⁺＋,55)，403(4)，391(7)，279(15)，236(17)，183(44)，167(34)， 149(100)，141(41)，113(44) (b)(S,S)−2,7−ジアミノ−オクト−４−イン−1,8−二酸ジメチルエステル工程(a)からの生成物に、H₂O／MeOH中の0.25Ｍ HClを与えるように、1.0Ｍ HCl 20mlおよびMeOH 60mlを加えた。反応混合物を、周囲温度で一夜撹拌しそして出発物質が残らないことが判明した後に、すべての溶剤を除去した。残留物を水に溶解し、エーテルで抽出しそして水相を濃NH₄OHで中和してpH８にした。溶液を、エーテルで洗浄しそしてすべての生成物がEtOAc相によりとられるまで、E tOAcで数回抽出した。それから、これを乾燥し、溶剤を除去しそしてKugelrohr 蒸留により混合物からバリンメチルエステルを分離して、標記のメチルエステル化合物0.97g(78％)を得た。¹ H NMR(D₂O)：δ 4.0(m,2H,HC-α)，3.6(d,6H,2×OCH₃)，2.6(m,4H,2×CH₂)¹³ C NMR(D₂O)：δ 171，81.6，61.6，56.6，20.5 (c)(S,S)−2,7−ジアミノ−オクト−４−イン−1,8−二酸工程(b)からの生成物を溶解するのに十分な量のMeOHおよび６ＭHCl 20mlを、混合しそして周囲温度で一夜撹拌した。１：１：１：１のnBuOH：EtOAc：MeOH： H₂O混合物およびニンヒドリンスプレーを使用したTLCは、メチルエステルの存在を示す。すべてのメチルエステルが加水分解されるまで、反応混合物を60℃で24 時間還流した。溶液を蒸発乾固し、残留物を、高真空下で乾燥しそしてさらに精製することなしに使用した。¹³ C NMR(D₂O)：δ 172.3，81.1，55.0，24.3 (d)(S,S)−2,7−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−オクト−４−イン−1,8−二酸 HMDS 50mlおよびTMSCl 1mlを、上記からの生成物に加えそして混合物を、窒素下において、約24時間後に透明な溶液が得られるまで、120℃で還流した。それから、過剰のHMDSを留去しそして得られた生成物を、乾燥CH₂Cl₂ 50mlに溶解しそして０℃に冷却した。乾燥CH₂Cl₂ 20mlに溶解したFMOC-Cl ３ｇを、撹拌しながら、徐々に加えそして反応混合物を一夜放置した。溶剤を減圧下で除去しそして生成物を、飽和NaHCO₃水溶液とエーテルとの間に分配して、未反応のFMOC-Cl および他のFMOC分解生成物を除去した。水溶液を、０℃に冷却しそして２Ｍ HCl で酸性にしてpH３となしそして生成物を５回までEtOAcで抽出し、それから洗浄し、乾燥しそして蒸発した。CHCl₃：MeOH／96：４を使用してクロマトグラフィー処理して、標記化合物2.35g(66％)を得た。TLCは、これが純粋であることを示すけれども、逆相HPLCは、殆んど主な生成物のピークと一致した不純物の存在を示す。0.1％のTFAを有する40％のMeCNにおける生成物を、溶離剤としてH₂O中の0 .1％TFAそれからMeCN中の0.1％TFAを使用して、ベックマンODS C-18カラムを使用し分取用HPLCにより精製した。¹ H NMR(DMSO)：δ 7.9(d,J=7.3Hz,4H,arom.H)，7.7(d,J=7Hz,4H,arom.H)，7.3(d 三重線,J=7.2Hz,8H,arom.H)，4.26(m,8H,OCH₂,2×CH)，2.5(m,4H,CH₂)¹³ C NMR(DMSO)：δ 170.4，154.5，142.5，139.4，126.5，125.9，124.2，119.0 ，77.6，65.5，53.0，46.5，21.7 実施例４ (S,S)−2,4−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（Ｅ） −ペンタン−1,5−二酸 (a)1,1−ジ((2R,5S)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−５ −ピラジニル）−（Ｅ）−メタン −７８℃のTHF(100ml)中の(2R)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−イソプロピルピラジン（5.53g，30ミリモル）の撹拌溶液に、ヘキサン中のブチルリチウムの1.55Ｍ溶液（19.62ml，31ミリモル）を、注入器により加えそして撹拌を−7 8℃で１時間つづけた。それから、THF(20ml)中の（Ｅ）−ブロモクロロメタン（ 15ミリモル）の溶液を加えそして撹拌を一夜つづけた。溶剤を減圧下で除去しそして残留物を、ジエチルエーテルに溶解しそして水で抽出した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、エーテルを蒸発しそして残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（１／４の酢酸エチル／ヘキサン、シリカゲル）により精製した。 (b)(S,S)−2,4−ジアミノ−（Ｅ）−ペンタン−1,5−二酸ジメチルエステル 1,1−ジ((2R,5S)−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−５−ピラジニル）−（Ｅ）−メタン（4.02g，9.9ミリモル）および0. 5Ｎ HCl（40ml，20ミリモル）の混合物に、ジオキサン40mlを加えそして溶液を、周囲温度で４時間撹拌した。それから、それをジエチルエーテルで抽出しそして水性アンモニアを、水溶液に、pH９に達するまで加えた。水性相を、それから、クロロホルムで抽出しそして有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶剤の除去後、バリンメチルエステルを30〜40℃（0.04ミリバール）におけるbulb-to- bulb蒸留により除去した。蒸留しない標記化合物は、さらに精製することなしに使用した。 (c)(S,S)−2,4−ジアミノ−（Ｅ）−ペンタン−1,5−二酸ジ塩酸塩 (S,S)−2,4−ジアミノ−（Ｅ）−ペンタン−1,5−二酸ジメチルエステル（1.6 5g，7.17ミリモル）を、６Ｎ HCl（10ml，60ミリモル）と一緒に２時間還流下で加熱した。それから、溶剤を蒸発し、残留物を、水(10ml)に溶解しそしてエタノール(100ml)を加えた。白色の結晶を濾去しそして40℃で真空乾燥した。 (d)(S,S)−2,4−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−（Ｅ）−ペンタン−1,5−二酸酸塩酸塩、(S,S)−２，４−ジアミノ−（Ｅ）−ペンタン−1,5−二酸ジ塩酸塩（1.59g，5.8ミリモル）を、ヘキサメチルジシラザン(20ml)に懸濁しそしてトリメチルシリルクロライド1mlを加えた。それから、この懸濁液を一夜還流した。溶剤を減圧下で除去しそして残留物を、無水の塩化メチレンに溶解した。この溶液を、０℃に冷却しそして塩化メチレン中の９−フルオレニルメチルクロロホルメート(3.10g，12ミリモル）の溶液を加えた。この溶液を、１時間撹拌し、その後冷却浴を除去した。次の朝、溶剤を蒸発しそして残留物をTHFに溶解する。それから、混合物を、１Ｎ水性HClで反応中止しそして溶液を２時間撹拌した。有機溶剤を除去しそして水相をクロロホルムで抽出する。有機層を、硫酸マグネシウム上で乾燥しそして蒸発する。残留物を、塩化メチレンに溶解しそしてエーテルで沈殿させる。実施例５ (S,S)−2,9−ジアミノデカン二酸 (a)1,6−ビス〔(2R,5S)−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−2,5−ジヒドロ −５−ピラジニル〕ヘキサン（Ｒ）−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピルピラジン（4.12 g，22.4ミリモル）を、無水のTHFに溶解しそして溶液を−78℃に冷却した。ヘキサン中のBuLiの溶液（22.4ミリモル，14.0ml）を加えた。−78℃で30分後に、TH F中の1,6−ジブロモヘキサンの溶液（2.73g，11.2ミリモル）を滴加しそして溶液を一夜周囲温度にした。燐酸塩緩衝液（pH＝７）による加水分解後に、混合物をジエルチエーテルで抽出しそして有機層を水および食塩水で洗浄した。乾燥(M gSO₄)後、溶剤を蒸発しそして残留物をフラッシュクロマトグラフィー（９／１のヘキサン／酢酸エチル）により精製した。収量：2.57g(51％)。¹ H NMR(CDCl₃)：δ 0.67(d,6H)，1.04(d,6H)，1.10-1.30(m,8H)，1.60-1.85(m,4 H)，2.15-2.35(m,2H)，3.66(s,6H)，3.67(s,6H)，3.91(dd,2H)，3.95-4.05(m,2H )¹³ C NMR(CDCl₃)：δ 16.54，19.08，24.44，29.46，31.63，34.15，52.27，52.2 8，55.47，60.68，163.41，163.96 FAB-MSシグナル、m/z 451.2(80)，407.2(33)，141.0(100) C₂₄H₄₂N₄O₄(450) (b)(S,S)−２，９−ジアミノデカン二酸ジメチルジオキサン40ml中の1,6−ビス〔(2R,5S)−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−2,5−ジヒドロ−５−ピラジニル〕−ヘキサン（2.57g，5.71ミリモル）の溶液および水36ml中のHCl 22.8ミリモル(1.90ml)を、周囲温度で６時間撹拌し、溶剤を除去しそして溶液をジエチルエーテルで抽出した。アンモニア水溶液を、pH ９に達するまで加えそして溶液を、クロロホルムで抽出した。有機層を乾燥(MgS O₄)した。バリンメチルエステルを真空（0.03トール，周囲温度）下で蒸発した。収量：1.48g(100％)。¹ H NMR(CDCl₃)：δ 1.20-1.70(m,16H)，3.36(dd,2H)，3.65(s,6H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ 25.40，29.06，34.77，51.76，54.30，176.51 (c)(S,S)−２，９−ジアミノデカン二酸・2HCl (S,S)−2,9−ジアミノデカン二酸ジメチル（1.40g，5.38ミリモル）を、６Ｎ HCl（40ml，240ミリモル）に溶解しそしてN₂下60℃で12時間撹拌した。溶剤を蒸発し、残留物をEtOHに溶解しそしてジエルチエーテルの添加により結晶化させる。結晶を濾去した。収量：0.700g(42.7％)。白色の結晶。¹ H NMR(D₂O)：δ 1.07-1.37(m,8H)，1.60-1.90(m,4H)，3.85(m,2H)¹³ C NMR(D₂O)：δ 23.81，27.65，29.61，53.09，172.55 FAB-MSシグナル、m/z 439.3(15)，340.3(100)，233.2(11) C₁₀H₂₂N₂Cl₂O₄(450) 計算値：Ｎ 9.18 実測値：Ｎ 9.13 (d)(S,S)−2,9−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−デカン二酸 (S,S)−2,6−ジアミノデカン二酸ジ塩酸塩（0.50g，1.64ミリモル）を、HMDS およびTMSClに懸濁しそして窒素下で一夜還流した。溶剤を除去し、残留物を、無水のCH₂Cl₂に溶解した。溶液を、０℃に冷却しそしてCH₂Cl₂中のFmocCl（1.69 g，6.56ミリモル）の溶液を加えた。溶液を一夜撹拌し、溶剤を除去しそして残留物をTHFに溶解した。0.5M HCl ５mlの添加後、混合物を２時間撹拌し、クロロホルムで抽出しそして乾燥(MgSO₄)した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（４／６／１のヘプタン／酢酸エチル／酢酸）により精製した。収量0.580g (52.5％)。¹ H(DMSO)：δ 1.00-1.44(m,8H)，1.44-1.80(m,4H)，3.90(s,2H)，4.13-4.43(m,4 H)，7.25-8.05(m,16H)¹³ C(DMSO)：δ 21.29，25.63，28.62，31.08，46.86，54.17，65.70，120.25，1 25.44，127.20，127.77，140.86，143.96，144.04，156.21，174.28 FAB-MSシグナル、m/z 699.5(6)，677.4(2)，603.6(4)，409.3(4)，339.3(4)，17 9.1(55)，72.9(100) 実施例６ (S,S)−2,8−ジアミノノナン二酸 (a)1,5−ビス〔(2R,5S)−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−2,5−ジヒドロ −５−ピラジニル〕−ペンタン THF(68ml)中の（Ｒ）−2,5−ジヒドロ−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピルピラジン（3.68g，20ミリモル）の溶液に、ヘキサン中のn-BuLiの1.6Ｍ溶液（12.8ml，20.4ミリモル）を滴加（10分）しそして撹拌を −78℃で１時間つづけた。それから、THF(13.2ml)中の1,5−ジブロモペンタン（ 2.3g，10ミリモル）の溶液を滴加しそして混合物周囲温度に一夜放置した。反応をNaHCO₃ 50mlの添加により中止しそして混合物を、エーテル(50ml)および水(2 0ml)でうすめた。分離後、水性層をエーテル(50ml)で２回抽出しそして合した有機相を乾燥(MgSO₄)し、濾過し、濃縮しそしてフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル＝12：１）により精製した。収量3.68g（8.4 3ミリモル，84.3％）。¹ H NMR(3000MHz，CDCl₃)：δ 4.02(q,2H,J=2.1Hz)，3.92(t,2H,J=3.3Hz)，3.68( s,12H)，2.28(d sept,2H,J=3.3,6.8Hz)，1.71(m,4H)，1.21(m,6H），1.05(d,6H, J=6.8)，0.68(d,6H,J=6.8)¹³ C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ 163.89，163.31，60.62，55.40，52.22，52.19，34 .02，34.56，29.31，24.33，19.01，16.48 FAB-MS m/z 437(M＋1) C₂₃H₄₀N₄O₄(436.59) 計算値：Ｃ 63.28 Ｈ 9.23 Ｎ 12.83 実測値：Ｃ 62.95 Ｈ 9.01 Ｎ 12.91 (b)(S,S)−2,8−ジアミノノナン二酸ジメチル 1,5−ビス〔(1S,4R)−3,6−ジメトキシ−２−イソプロピル−2,5−ジヒドロピラジニル〕−ペンタン（2.8g，6.4ミリモル）を、ジオキサン(51.2ml)および0.5 Ｍ HCl(51.2ml)に溶解しそして周囲温度で４時間撹拌した。この混合物を、ジエチルエーテル(100ml)で洗浄し、水中の25％アンモニアの添加によりpH９となしそして急速にCHCl₃(3×75ml)で抽出した。有機層をMgSO₄で乾燥し、濾過しそして濃縮した。メチルバリネートを、Kugelrohr蒸留（25〜50℃，0.01トール）により除去して、1.505g（0.11ミリモル，95.5％）を得た。¹ H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ 3.71(s,6H)，3.43(t,2H,J=6.0Hz)，1.70(m,2H)，1. 57-1.34(m,8H)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ 176.40，54.33，51.86，34.79，29.08，25.42 (c)(S,S)−2,8−ジアミノノナン二酸工程(b)からのエステルを、N₂下６Ｍ HCl(7.2ml)中で２時間還流下で加熱した。揮発性化合物を蒸発した。残留物を水(5ml)に溶解し、エタノール(20ml)を加えそしてエーテルを徐々に加えて白色の結晶性の沈殿を生ぜしめた。この混合物を、冷却器中で12時間保持し、濾過し、エーテルで洗浄しそして真空下で乾燥した。収量1.37g（4.71ミリモル，77.4％）。¹ H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ 3.74(m,2H)，1.80-1.63(m,4H)，1.38-1.15(m,6H)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ 173.35，53.62，29.71，27.65，23.65FAB-MS m/z(M⁺ −72) C₉H₂₀N₂O₄(291.17) 計算値：Ｃ 37.13 Ｈ 6.92 実測値：Ｃ 37.90 Ｈ 7.21 (d)(S,S)−2,8−ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−ノナン二酸 TMSCl（260mg，2.4ミリモル）およびHMDS(3.5ml)中の(S,S)-2,8−ジアミノノナン二酸（291mg，１ミリモル）の懸濁液を、N₂下で一夜還流した。周囲温度に冷却した後、揮発性部分を除去（50℃まで，0.01トール）し、残留物をCH₂Cl₂(6.6ml)に溶解し、０℃に冷却しそしてCH2Cl2(6.6ml)中のFmocCl（905mg，3.5ミリモル）を滴加した。混合物を、一夜周囲温度にする。溶剤を蒸発しそして残留物をTHF(7.5ml)に溶解しそして１Ｍ HCl(7.5ml)を加えた。この混合物を、周囲温度で４時間撹拌した。それから、クロロホルム(50ml) および食塩水(40ml)を加えそして相を分離した。水性層をCHCl₃(50ml)で２回抽出した。合した有機層を乾燥(MgSO₄)し、濃縮しそしてフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ヘキサン：酢酸エチル：酢酸＝50：50：５）により精製した。生成物含有フラクションを濃縮しそして凍結乾燥して収量615mg（0.928ミリモル，92.8％）を得た。¹ H NMR(300MHz,d₆-DMSO)：δ 7.86(d,4H,J=7.2Hz),7.70(d,4H,J=7.5Hz)，7.41-7 .27(m,8H)，4.24(m,6H)，3.86(q,2H,J=4.5Hz)，1.62(m,4H)，1.24(m,6H)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ 174.40，172.39，156.30，144.31，144.22，141.10 ，129.31，127.99，127.68，127.44，125.67，121.77，120.46，65.91，54.66， 47.12，31.40，28.68，25.57，21.53 FAB-MS m/z 663(M⁺＋1) C₃₉H₃₈N₂O₈(662.73) 計算値：Ｃ 70.68 Ｈ 5.78 Ｎ 4.23 実測値：Ｃ 71.2 Ｈ 5.62 Ｎ 4.07 実施例７ 2,3−ジアミノコハク酸 (a)2,3−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸アルコール(200ml)中のメソ−2,3−ジブロモコハク酸（27.6g，0.100モル）の機械的に撹拌した溶液に、周囲温度で、ベンジルアミン（85g，0.80モル）を徐々に加えた。添加完了後に、混合物を一夜還流した。塩の重質の沈殿が出現した。混合物を50℃に冷却しそして濃塩酸を、pHが４〜５になるまで加えた。沈殿を濾去し水およびアルコールで数回洗浄しそして乾燥した。収量24.5g(75％)。¹ H NMR(300MHz,D₂O/NaOD)：δ 3.08(2H,s)，3.30(2H,d,J=13Hz)，3.55(2H,d,J=1 3Hz)，7.2(10H,m)¹³ C NMR(75MHz,D20/NaOD)：δ 50.9，64.7，127.1，128.5(br)，139.2，179.0 (b)メソ−2,3−ジアミノコハク酸メソ−2,3−ビス（ベンジルアミノ）コハク酸（9.5g，0.029モル）を、氷酢酸 (50ml)および濃塩酸(50ml)の混合物に溶解した。水素化分解を、触媒として10％パラジウム炭素(1.0g)を使用して、周囲温度で行った。NMRが未反応の出発物質がもはや存在しないことを示すまで、反応をつづけた。水(100m1)を加えそして触媒を濾過により除去した。濾液を濃縮（回転蒸発器）しそして残留物を希水性水酸化ナトリウムに溶解した。ｐＨを、氷酢酸の添加によって約５に調節した。結晶を濾去しそして洗浄した。収量3.8g（88％）。白色の固体。¹ H NMR(300MHz,D₂O/NaOD)：δ3.21(s)¹³ C NMR(75MHz,D₂O/NaOD)： δ 60.3, 180.0 C₄H₈N₂O₄ 計算値：Ｃ 32.44 Ｈ 5.44 Ｎ 18.91 実測値：Ｃ 31.51 Ｈ 5.41 Ｎ 18.32 (c)メソ−2,3−ビス（トリメチルシリルアミノ）コハク酸ジ（トリメチルシリル）エステル反応は窒素下で行った。ヘキサメチルジシラザン（10ml）およびトリメチルクロロシラン(1ml)中のメソ−2,3−ジアミノコハク酸(296mg, 2.00ミリモル）の懸濁液を、100℃で一夜撹拌して透明な溶液を得た。過剰のシリル化試薬を、減圧下で留去した。固体の白色の残留物を、直接アシル化反応に使用した。¹ H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ0.03(18H,s)，0.28(18Hs)，3.5(2H、m)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)： δ−0.3，0.03，60.9，174.1 (d) メソ−2,3−ビス〔(９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ〕−コハク酸反応は、窒素下で行った。工程(ｃ)で製造したシリル化ジアミノコハク酸を、乾燥ジクロロメタン(10ml)に溶解しそして０℃に冷却した。乾燥ジクロロメタン (4ml)中の９−フルオレニルメチルクロロホルメート(1.14g，4.4ミリモル）の溶液を加えた。反応混合物を、一夜撹拌しそしてそれから濃縮した。残留物をTHF( 10ml)に溶解しそして水(約１ml)を加えた。混合物を10分撹拌しそしてそれから濃縮した。生成物を酢酸エチルで抽出し、この溶液を水で洗浄し、乾燥(MgSO₄) しそして濾過した。ヘキサンを加えそして沈殿を濾去しそしてヘキサンで洗浄した。最後に、生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１：３：１のヘキサン／酢酸エチル／酢酸）によって精製した。収量0.85g(72％)。白色の結晶。¹ H NMR(300MHz,DMSO-d₆)：δ4.1-4.3(6H,m)，4.5(2H,d)，7.2-7.4 (12H,m)，7.6-7.7(4H,m)，7.8-7.9(4H,m)¹³ C NMR(75MHz,DMSO-d₆)：δ47.0，56.1，66.5，120.5，125.9，127.5，128.0， 141.0，144.1，156.4，171.1 FAB-MSシグナル、m/z 637.2(3)，631.1(5)，615.2(21)，593.2(2)，435.1(9)，3 26.3(15)，179.1(100) (e)ラセミ-2,3 -ビス〔(９-フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ〕-コハク酸無水物無水酢酸中のメソ-2,3-ビス〔(９-フルオレニルメトキシカルボニル)-アミノ〕コハク酸(150mg，0.25ミリモル)の懸濁液を、すべての物質が溶解するまで（１〜２分）、120℃で撹拌した。過剰の無水酢酸を真空中で除去した。粗製生成物を、さらに精製することなしに、ペプチド合成に使用した。¹ H NMR(300MHz,DMSO-d₆): δ4.25(2H,t)，4.39(4H,d)，4.80(2H,d)，7.2-7.4(8H ,m)，7.66(4H,d)，7.88(4H,d), 8.30(2H,d)¹³ C NMR(75MHz,DMSO-d₆): δ46.8，55.6，66.9，120.6，125.5，127.5，128.1， 141.1，143.9，156.4，168.2 実施例８ (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｅ-オクト-４-エン二酸 (a)1,4-ビス〔(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-５-ピラジニル〕-Ｅ-ブト-２-エン (2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピルピラジン(5.53g，30ミリモル)を、無水のTHF肝に溶解しそして溶液を、−78℃に冷却した。ヘキサン中の BuLiの溶液(19.62ml，31.0ミリモル)を加えた。−78℃で60分後に、THF肝30ml中のＥ-1,4-ジブロモブト-２-エン(3.21g，15ミリモル)の溶液を、滴加しそして溶液を一夜周囲温度にした。燐酸塩緩衝液(pH７)で加水分解した後、混合物をジエチルエーテルで抽出しそして有機層を水および食塩水で洗浄した。乾燥(MgSO₄) 後、溶剤を蒸発しそして残留物をフラッシュクロマトグラフィー（４／１のヘキサン／酢酸エチル）により精製した。収量：4.73g(75％)。¹ H NMR(CDCl₃):δ0.67(d,6H），1.04(d,6H)，2.1-2.4(m,2H),2.48(dd,4H)，3.67 (s,6H)，3.68(s,6H)，3.93(dd,2H），4.03(dd,2H)，5.35(dd,2H)¹³ C-(CDCl₃): δ16.52，19.07，31.61，37.09，52.16，52.23,55.62，60.60，1 28.50 C₂₂H₃₆N₄O₄(420) 計算値：Ｃ 62.86 Ｈ 8.57 実測値：Ｃ 62.65 Ｈ 8.62 (b) (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｅ-オクト-４-エン二酸ジメチルジオキサン40ml中の1,4-ビス〔(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピル-2,5 -ジヒドロ-５-ピラジニル〕-Ｅ-ブト-２-エン(4.02g，9.9ミリモル)の溶液および水38ml中のHCl 20.0ミリモル(1.67ml)を、周囲温度で４時間撹拌し、そして溶液をジエチルエーテルで抽出した。アンモニア水溶液を、pH９に達するまで加えそして溶液をクロロホルムで抽出した。有機層を乾燥(MgSO₄)した。バリンメチルエステルを真空下(0.04トール，周囲温度)で蒸留した。収量1.92g(84.3％)¹ H-(CDCl₃): δ1.70(s,4H），2.20-2.60(m,4H)，3.51(dd,2H),3.69(s,6H)，5.46 (dd,2H)¹³ C-(CDCl₃):δ37.99，52.00，54.11，128.84，175.32 (c) (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｅ-オクト-４-エン二酸・２HCl (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｅ-オクト-４-エン二酸ジメチル(1.65g, 7.17ミリモル) を、6N HCl(10ml, 60ミリモル)に溶解しそしてN₂下で２時間還流した。溶剤を蒸発しそして残留物を水10mlに溶解しそしてEtOH(100m1)の添加により結晶化させた。結晶を濾去した。収量1.32g(67％)。¹ H NMR(D₂O）：δ2.53(dd,4H)，3.97(dd,2H)，5.52(dd,2H)¹³ C-(D₂O)： δ33.57，53.07，128.85，171.49 FAB-MSシグナル、m/z 405.3(11)，203.2(100)，157.1(19)，130.1(7)，93.0(18) ，73.9(13) C₈H₁₆N₂O₄Cl₂(275) 計算値：Ｃ 34.91 Ｈ 5.81 Ｎ 10.18 Cl 25.78 実測値：Ｃ 36.58 Ｈ５.80 Ｎ 9.70 Cl 26.01 (d) (S,S)-2,7-ビス（９-フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）-Ｅ-オクト-４-エン二酸 (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｅ-オクト-４-エン二酸ジ塩酸塩(1.59g，5.8ミリモル)を、HMDS(20ml)およびTMSClに懸濁しそして一夜還流した。溶剤を除去しそして残留物を無水のジクロロメタンに溶解した。この溶液を０℃に冷却しそしてジクロロメタン中のFmocCl (3.10g，12ミリモル)の溶液を加えた。この溶液を、この温度で１時間撹拌しそして周囲温度で一夜撹拌した。溶剤を蒸発しそして残留物を THFに溶解した。１Ｎの水性HClの添加後、溶液を２時間撹拌し、クロロホルムで抽出しそして乾燥(MgSO₄)した。残留物をジクロロメタンに溶解しそしてジエチルエーテルの添加によって結晶化させた。収量2.50g(66.8％)。¹ H-(DMSO): δ 2.2-2.4(s,4H)，3.6(s,2H), 3.9-4.5(m,8H)，5.55(s,2H)，7.2-8 .1(m,16H)¹³ C-(DMSO): δ33.98，46.56，53.93，65.49，119.66，124.81，126.61，127.17 ，127.98，140.19，143.28，155.43，172.59 C₃₈N₃₄N₂O₈(646) 計算値：Ｃ 70.59 Ｎ 5.26 Ｎ 4.33 実測値：Ｃ 70.17 Ｎ 5.58 Ｎ 4.08 FAB-MSシグナル、m/z 661.3(3)，647.4(3)，191.2(17)，179.2(100)，165.1(18) ，78.9(31) 実施例９ (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-エン二酸 (a)1,4-ビス〔(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-５-ピラジニル〕-Ｚ-ブト-２-エン (2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピルピラジン(7.3g，39.2ミリモル)を、無水のTHFに溶解しそして溶液を−78℃に冷却した。ヘキサン中のBu Liの溶液(24.50ml，39.2ミリモル)の溶液を加えた。−78℃で15分後に、1,3-ジメチル-２-イミダゾリンジオン16.9ml(156ミリモル)を加えそして５分後に、THF 10ml中のＺ-1,4-ジクロロブト-２-エン(2.45g，19.6ミリモル)の溶液を滴加しそしてその溶液を６時間撹拌しそして−20℃に一夜保持した。燐酸塩緩衝液(pH＝７)で加水分解した後、混合物をジエルチエーテルで抽出しそして有機層を水および食塩水で洗浄した。乾燥(MgSO₄)後、溶剤を蒸発しそして残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（９／１のヘキサン／酢酸エチル）により精製した。収量：710mg(10.2％)。¹ H NMR(CDCl₃): δ0.67(d,6H)，1.03(d,6H)，2.25(m,2H)，2.55(m,4H)，3.66(s, 6H)，3.68(s,6H)，3.91(dd,2H)，4.07(m,2H)，5.38(dd,2H)¹³ C NMR(CDCl₃): δ16.50，19.01，31.57，32.01，52.22，52.31，55.46，60.67 ，127，30，163.19，163.66 (b) (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-エン二酸ジメチルジオキサン30ml中の1,4-ビス〔(1S,4R)-3,6-ジメトキシ-４-イソプロピル-2,5 -ジヒドロピラジニル〕-Ｚ -ブト-２-エン(0.23g，0.55ミリモル)の溶液および水10ml中のHCl2.2ミリモル(0.183ml)を、周囲温度で12時間撹拌し、そして溶液をジエチルエーテルで抽出した。アンモニア水溶液を、pH９に達するまで加えそして溶液をクロロホルムで抽出した。有機層を乾燥(MgSO₄)した。バリンメチルエステルを留去(0.02トール，周囲温度)した。収量：0.127g(85％)。¹ HNMR(CDCl₃): δ1.54(s,4H)，2.3-2.6(m,4H)，3.52(dd,2H),3.71(s,6H)，5.54( m,2H)¹³ C NMR(CDCl₃): δ32.55，52.02，54.17，127.94，175.67 (c)(S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-エン二酸・２HCl メタノール0.7ml中の(S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-エン二酸ジメチル(0. 108g，0.47ミリモル)の溶液に、水中のLiOHの２Ｎ溶液(1.41ミリモル，0.71ml) を加えた。溶液を周囲温度で一夜撹拌しそしてそれから１Ｎ HClの滴加によって酸性にした。結晶を濾去した。収量：50mg(38.7％)。¹ H NMR(D₂O): δ2.58(m,4H)，3.99(m,2H)，5.51(m,2H)¹³ C NMR(D₂O):δ27.59，52.20，126.84，171.10 (d)(S,S)-2,7-ビス（９-フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）-Ｚ-オクト-４-エン二酸 (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-エン二酸(0.050g，0.25ミリモル)およびNa₂ CO₃(0.21g，20.0ミリモル）を、水3mlおよびジオキサン２mlに溶解した。溶液を０℃に冷却しそしてジオキサン1ml中のFmocCl(0.26g，1.0ミリモル)の溶液を加えた。混合物を、０℃で３時間撹拌しそして一夜周囲温度にした。ジエチルエーテルによる抽出後、それを塩酸の添加により酸性にした。溶液をクロロホルムで抽出しそしてアミノ酸を、クロロホルム／ヘキサンから結晶化させた。化合物を、さらにフラッシュクロマトグラフィー（９／１のクロロホルム／酢酸）により精製した。収量:90.0mg(55.9％)。¹ H NMR(DMSO)： δ2.12-2.64(m,4H)，3.88(s,2H)，4.04-4.37(m,6H)，5.42(s,2H )，7.02(s,2H），7.20-8.00(m，16H)¹³ C NMR(DMSO): δ29.77，46.88，55.53，65.66，120.23，125.43，127.23，127 .74，129.08，140.84，144.11，155.59，174.10 FAB-MSシグナル、m/z 676.2(2)，587.5(5)，447.4(10)，419.3(45)，391.3(100) ，363.3(38)，261.2(45)，233.2(29) 実施例10 (S,S)-2,7-ジアミノ-オクト-４-イン二酸 (a) 1,4-ビス((2R,5S)-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-５-ピラジニル)ブト-２-イン THF(48ml)中の(2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピルピラジン( 4.605g，25ミリモル)および1,3-ジメチル-２-イミダゾリジオン(11.4g，102ミリモル)の溶液に、1.6Ｍ n-BuLi(16ml，25.5ミリモル)を滴加した。１時間後に、THF(8ml)中の1,4-ジクロロ-２-ブチン(1.54g，12.5ミリモル)の溶液を滴加した。混合物を、一夜周囲温度にしそして１Ｍ燐酸塩緩衝液(pH７)で反応停止した。混合物をジエチルエーテル(150ml)および水(40ml)でうすめそして層を分離した。水性層を、エーテル(２ ×150ml)で２回抽出しそして合した有機層を乾燥(MgSO₄)し、濾過し、濃縮しそしてフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ヘキサン：エーテル＝７：１）により精製した。収量3.325g(7.94ミリモル，63.6％)。¹ H-NMR(300MHz,CDCl₃): δ4.05-3.99(m,4H)，3.68(s,6H)，3.67(s,6H)，2.70(dd ,2H,J=14.1,3.0Hz)，2.57(dd,2H,J=14.1,3.0Hz)，2.26(d sept,2H,J=6.9,3.0Hz) ，1.05(d,6H,J=6.9Hz)，0.64(d,6H,J=6.9Hz)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃):δ164.56，161.53，77.52，60.51，54.46，52.34，52.22 ，31.43，25.26，19.07，16.40 FAB-MS m/z 419(M⁺＋１) C₂₂H₃₄N₄O₄(418.53) 計算値：Ｃ 63.14 Ｈ 8.19 Ｎ 13.39 実測値：Ｃ 63.27 Ｈ 8.12 Ｎ 13.54 (b) (S,S)-2,7-ジアミノ-オクト-４-イン二酸ジメチル 1,4-ビス((2R,5S)-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-５-ピラジニル)-ブト-２-イン(920mg，2.2ミリモル)を、ジオキサン(18ml)および0.5Ｍ H Cl(18ml)に溶解しそして周囲温度で12時間撹拌した。この混合物を、ジエチルエーテル(30ml)で洗浄し、水性層を水中に25％アンモニアの添加によりpH ９となしそして急速にCHCl₃(３×75ml)で抽出した。有機層をMgSO₄で乾燥し、濾過しそして濃縮した。バリンメチルエステルを、Kugelrohr蒸留(25〜50℃，0.01 トール)により除去した。収量486mg(2.13ミリモル，96.8％）。黄色の油。¹ H NMR(300MHz,CDCl₃): δ3.74(s,6H)，3.59(t,2H,J=5.4Hz)，2.60(d,4H,J=5.4H z)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃): δ174.46，78.31，53.31，52.22，25.15 (c) (S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-イン二酸・２HCl (S,S)-2,7-ジアミノ-オクト-４-イン二酸ジメチル(450mg，1.97ミリモル)を、 N₂下６Ｍ HCl(7.2ml)中で50〜60℃で12時間加熱した。揮発性化合物を蒸発（回転蒸発器，水浴40℃）した。残留物を水(1ml)に溶解し、エタノール(20ml)を加えそしてエーテルを徐々に添加して白色の結晶性の沈殿を生ぜしめた。この混合物を、冷蔵庫中で12時間保持し、濾過し、エーテルで洗浄しそして真空下で乾燥した。収量399mg(1.46ミリモル，74.2％)。¹ H NMR(300MHz，D₂O/DCl): δ4.18(t,2H,J=4.8Hz)，2.85(m,AA'X，4H)¹³ C NMR(75MHz，D₂O/DCl)： δ172.62，79.88，53.75，22.60 FAB-MS m/z 201(M⁺−72) (d)(S,S)-2,7-ビス（９-フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）-オクト- ４-イン二酸ジオキサン中の(S,S)-2,7-ジアミノ-Ｚ-オクト-４-イン二酸・２HCl(400mg，1 .46ミリモル)の溶液および１Ｍ Na₂CO₃溶液（10.22ml，10.22ミリモル）を、０ ℃に冷却しそしてジオキサン４ml中のFmocCl （1.14g, 4.39ミリモル）の溶液を加えた。この混合物を、０℃で１時間撹拌しそして一夜周囲温度にした。ジエチルエーテル(２×5 0ml)による抽出後、水性層を希HClの添加により酸性にした。溶液をクロロホルム(３×50ml)で抽出し、乾燥(MgSO₄)し、そして濃縮する。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ヘキサン：酢酸エチル：酢酸＝10：10：１）により精製した。収量376mg(0.58ミリモル，39％)。¹ H NMR(300MHz，DMSO): δ7.87(d,4H,J=7.5Hz)，7.73(d,4H,J=7.5Hz)，7.41(t, 4H,J=7.5Hz)，7.33(t,4H,J=7.5Hz)，4.26(m,8H)，2.52(m,4H)¹³ C(DMSO): δ170.43，154.62，152.58，142.32，139.47，126.22，125.94，124 .35，119.12，77.68，65.45，53.08，46.57，21.77 FAB-MS m/z 645(M⁺＋１) C₃₈H₃₂N₂O₈(644.67) 計算値：Ｃ 70.80 Ｈ 5.00 Ｎ 4.35 実測値：Ｃ 69.20 Ｈ 5.34 Ｎ 4.13 実施例11 (2S,4R,5R,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (a)(2R,3R)-1,4-ビス((2R,5S)-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピル-2,5-ジヒドロ- ５-ピラジニル)-2,3-ジヒドロキシ-2,3-0,0-イソプロピリデンーブタン (2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-２-イソプロピルピラジン(7.36g,40ミリモル)を、無水のTHFに溶解しそして溶液を−78℃に冷却した。ヘキサン中のBuLi の溶液(40.0ミリモル，25ml)を加えた。−78℃で20分後に、THF 10ml中の(2R,3R )-1,4-ジブロモ-2,3-ジヒドロキシ-2,3-Ｏ-イソプロピリデン-ブタン（3.78g，13.1ミリモル）の溶液を滴加しそして溶液を４℃で36時間保持した。燐酸塩緩衝液（pH７）による加水分解後に、混合物をジエチルエーテルで抽出しそして有機層を、水および食塩水で洗浄した。乾燥(MgSO₄)後、溶剤を蒸発しそして残留物を、アセトニトリルからの反復結晶化により精製した。収量：3.70g（57％）。 1H NMR(CDCl₃)δ0.68(d,6H)，1.03(d,6H)，1.34(s,6H),1.95-2.15(m,4H)，2.24( m,2H)，3.65(s,6H)，3.67(s,6H)，3.94(m,2H)，4.04(m,2H)，4.11(m,2H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ16.91，19.05，27.39，31.73，38.32，52.27，52.36，52.70 ，60.60，77.89，108.19，163.66，163.70 FAB-MSシグナル、m/z 495.4(100) C₂₅H₄₂N₄O(494) 計算値：Ｃ 60.71 Ｈ 8.56 Ｎ 11.33 実測値：Ｃ 60.76 Ｈ 8.32 Ｎ 11.36 (b)(2S,4R,5R,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸ジメチル (2R,3R)-1,4-ビス((2R,5S)-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-5- ピラジニル）-2,3-ジヒドロキシ-2,3-0,0-イソプロピリデンブタン（1.22q，2.4 7ミリモル）を、ジオキサン10mlおよびMeOH 20mlに溶解した。水10ml中のHCl 9. 88ミリモルの溶液を加えそして溶液を周囲温度で一夜撹拌した。溶剤を除去し、残留物を水に溶解しそしてジエチルエーテルで抽出した。水性層に、アンモニアを、pH9に達するまで加えそしてそれをクロロホルムで抽出した。乾燥(MgS0₄)後、溶剤を除去しそしてバリンメチルエステルを留去（30〜40℃，0.04トール）した。収量：0.67q（89.3％）。¹ H NMR(CDCl₃)：δ1.34(s,6H)，1.64(brs,4H)，1.72-1.84(m,2H)，1.99-2.08(m, 2H)，3.65(m,2H)，3.71(s,6H)，3.80(m,2H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ27.17，37.54，52.04，52.74，78.78，108.99，175.51 (c)(2S,4R,5R,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (2S,4R,5R,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸ジメチル（0.62q，2.04ミリモル）を、ジオキサン2.5mlに溶解しそして水中の２Ｎ LiOH溶液2.1ml（4.1ミリモル）を加えそして溶液をアルゴン下で一夜撹拌した。TLCは、標記化合物の定量的形成を示す。粗製の反応溶液を、次の工程に使用した。 (d)(2S,4R,5R,7S)-2,7-ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (2S,4R,5R,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0−イソプロピリデンオクタン二酸の粗製溶液（2.04ミリモル）を、０℃に冷却しそしてジオキサン10 mlおよび１Ｎ NaOH溶液10ml（10ミリモル）を加えた。それから、FmocCl 2.07q （8.0ミリモル）を小量ずつ加えそして混合物を０℃で５時間および周囲温度で一夜撹拌した。混合物を、ジエチルエーテルで抽出しそしてKHSO₄の添加により酸性にした。CHCl₃で抽出した後、有機層を乾燥(MgSO₄)しそして溶剤を除去した。過剰の未反応のFmocClをアセトン／MeOHにおけるシリカゲル濾過により除去しそして残留物をCHCl₃／EtOEtからの沈殿により精製した。収量：0.49g（33.6％）。¹ H NMR(DMSO/D₂O)：δ1.20(s,6H)，1.73(m,2H)，1.99(m,2H)，3.87(m,2H)，4.14 -4.24(m,6H)，7.23-7.82(m,16H)¹³ C NMR(DMSO)：δ27.78，36.21，47.27，53.75，66.19，78.82，107.89，120.6 7，125.81，127.76，128.32，141.24，144.39，156.12，175.96 FAB-MSシグナル、m/z 563.2(2)，179.1(100) C₄₁H₄₀N₂O_l0(720) 計算値：Ｎ 3.89 実測値：Ｎ 3.81 実施例12 (2S,4S,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (a) (2S,3S)-1,4-ビス（(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-2,5-ジヒドロ -5-ピラジニル）-2,3-ジヒドロキシ-2,3-0,0-イソプロピリデン-ブタン (2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピルピラジン（9.59g，52.1ミリモル）を、無水のTHFに溶解しそして溶液を−78℃に冷却した。ヘキサン中のB uLiの溶液（52ミリモル，32.5ml）を加えた。−78℃で60分後に、THF 10ml中の( 2S,3S)-1,4-ジブロモ-2,3-ジヒドロキシ-2,3-0,0-イソプロピリデン-ブタン（6. 0g，20.83ミリモル）の溶液を滴加しそして溶液を一夜周囲温度にしそしてさらに24時間撹拌した。燐酸塩緩衝液（pH７）で加水分解した後、混合物をジエチルエーテルで抽出し、そして有機層を、水および食塩水で洗浄した。乾燥(MgS0₄)後、溶剤を蒸発しそして残留物をMeCN からの反復結晶化により精製した。収量：3.43g（33.3％）。¹ H NMR(CDCl₃)：δ0.70(d,6H)，1.03(d,6H)，1.44(s,6H)，2.15-2.30(m,4H)，3. 66(s,6H)，3.69(s,6H)，3.92(m,2H)，4.04(m,2H)，4.09-4.20(m,4H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ16.78，19.11，27.67，31.88，38.38，52.37，52.44，52.83 ，60.84，77.65，108.57，163.15，163.88 FAB-MSシグナル、m/s 495.4(53)，253.2(40)，197.2(58)，141.1(100) C₂₅H₄₂N₄O(494) 計算値：Ｃ 60.71 Ｈ 8.56 Ｎ 11.33 実測値：Ｃ 60.89 Ｈ 8.42 Ｎ 11.45 (b)(2S,4S,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸ジメチル (2S,3S)-1,4-ビス（(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-5 -ピラジニル）-2,3-ジヒドロキシ-0,0-イソプロピリデンブタン（2.5g,5.06ミリモル）を、ジオキサン40mlに溶解した。水40ml中のHCl 20.0ミリモルの溶液を加えそして溶液を、周囲温度で一夜撹拌した。溶剤を除去し、残留物を水に溶解しそしてジエチルエーテルで抽出した。水性層にアンモニアをpH９に達するまで加えそしてそれをクロロホルムで抽出した。乾燥(MgS0₄)後、溶剤を除去しそしてバリンメチルエステルを留去（30〜40℃，0.04トール）した。収量：1.507g（98 .0％）。¹ H NMR(CDCl₃)：δ1.32(s,6H)，1.53(br s,4H)，1.60-1.68(m,2H)， 1.85-1.94(m,2H)，3.63(m,2H)，3.67(s,6H)，3.80(m,2H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ27.25，37.20，51.96，52.74，77.58，108.80，176.10 (c)(2S,4S,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデン- オクタン二酸 (2S,4S,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-イソプロピリデンオクタン二酸ジメチル（1.51g,4.96ミリモル）を、ジオキサン5mlに溶解しそして水中の２Ｎ LiOH溶液4.95ml（9.91ミリモル）を加えそして溶液をアルゴン下で一夜撹拌した。TLCは、(2S,4S,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸の定量的形成を示す。粗製の反応溶液を次の工程に使用した。 (d)(2S,4S,5S,7S)-2,7-ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (2S,4S,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸の粗製溶液（4.96ミリモル）を、０℃に冷却しそしてＩＮ NaOH溶液1 6ml（16ミリモル）を加えた。それから、ジオキサン16m1中のFmocCl 3.89g（15. 0ミリモル）の溶液を小量ずつ加えそして混合物を、周囲温度で90分撹拌した。溶液を、KHSO₄の添加により酸性にした。CHCl₃で抽出した後、有機層を乾燥(MgS O₄)しそして溶剤を除去した。残留物の一部分を、フラッシュクロマトグラフィー（５／５／１のヘキサン／酢酸エチル／酢酸）により精製した。収量： 1.69g （46％）。¹ H NMR(DMSO/D₂O)：δ1.23(s,6H)，1.7-2.0(m,4H)，3.62(m,2H)， 4.02(m,2H)，4.1-4.35(m,6H)，7.2-7.9(m,16H)¹³ C NMR(DMSO)：δ 27.94，34.59，47.39，52.29，66.45，77.49，109.13，120. 90，125.91，127.9７，128.59，141.44，144.44，157.02，174.75 FAB-MSシグナル、m/z 743.3(28)，563.2(58)，505.2(72) C₄₁H₄₀N₂O_l0(720) 計算値：Ｎ 3.89 実測値：Ｎ 4.09 実施例13 (2S,4R,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5−イソプロピリデンオクタン二酸 (a) (2R,3S)-1,4-ビス〔(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-2,5-ジヒドロ -5-ピラジニル〕-2,3-ジヒドロキシ-2,3-0,0-イソプロピリデン−ブタン (2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピルピラジン（6.08ｇ，33.0 ミリモル）を、無水のTHFに溶解しそして溶液を−78℃に冷却した。ヘキサン中のBuLiの溶液（33.0ミリモル，20.6ml）を加えた。−78℃で45分後に、THF 10ml 中の(2R,3S)-1,4-ジブロモ-2,3-ジヒドロキシ-2,3-Ｏ−イソプロピリデン−ブタン（4.52g，15.70ミリモル）の溶液を滴加しそして溶液を一夜周囲温度にしそしてさらに24時間撹拌した。燐酸塩緩衝液（pH７）で加水分解した後、混合物をジエチルエーテルで抽出しそして有機層を水および食塩水で洗浄した。乾燥(MgSO₄ )後、溶剤を蒸発しそして残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（９／１のヘキサン／酢酸エチル）により精製した。収量：0.77g (10.0％）。¹ H NMR(CDCl₃)：δ0.68(m,6H)，1.03(m,6H)，1.32(s,3H），1.45(s,3H)，1.30-1 .55(m,1H)，1.85-2.30(m,5H)，3.62(s,3H)，3.66(s,3H，3.68(s,6H)，3.92(m,2H )，4.06-4.26(m,3H)，4.45(m,1H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ16.62，16.77，19.04，19.08，26.20，28.49，31.71，31.91 ，33.69，35.07，52.21，52.27，52.32，52.35，52.40，52.98，60.58，60.80， 74.31，74.66，107.16，163.03，163.40，163.91，164.30 (b)(2S,4R,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸ジメチル (2R,3S)-1,4-ビス（(2R,5S)-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-2,5-ジヒドロ-5 -ピラジニル）-2,3-ジヒドロキシ-2,3-0,0-イソプロピリデン−ブタン（0.77g,1 .55ミリモル）を、ジオキサン12mlに溶解した。水12ml中のHC1 6.0ミリモルの溶液を加えそして溶液を、周囲温度で５時間撹拌した。アンモニアを、pH９に達するまで加えそして溶液をクロロホルムで抽出した。乾燥(MgSO₄)後、溶剤を除去しそしてバリンメチルエステルを留出（30〜40℃，0.05トール）した。収量：0. 36g（77％）。¹ H NMR(CDCl₃)：δ1.30(s,3H)，1.41(s,3H)，1.40-1.48(m,1H)，1.72(s,4H)，1. 75-2.00(m,3H)，3.60-3.67(m,2H)，3.70(s,4H)，4.20-4.40(m,2H)¹³ C NMR(CDCl₃)：δ25.81，28.26，34.69，34.89，51.55，52.00，52.02，52.66 ，74.26，75.20，108.23，175.43，176.51 (c)(2S,4R,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (2S,4R,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-イソプロピリデンオクタン二酸ジメチル（0.36g，1.19ミリモル）を、ジオキサン５m lに溶解しそして水中の２Ｎ Li0H溶液1.19ml（2.38ミリモル）を加えそして溶液をアルゴン下で一夜撹拌した。TLCは、(2S,4R,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸の定量的形成を示した。粗製反応溶液を、次の工程に使用した。 (d)(2S,4R,5S,7S)-2,7-ビス（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸 (2S,4R,5S,7S)-2,7-ジアミノ-4,5-ジヒドロキシ-4,5-0,0-イソプロピリデンオクタン二酸の粗製溶液（1.19ミリモル）を、０℃に冷却しそしてＩＮ NaHCO₃溶液4.0ml（4.0ミリモル）を加えた。それから、ジオキサン４ml中のFmocCl 1.03g （4.0ミリモル）の溶液を少量ずつ加えそして混合物を周囲温度で60分撹拌した。溶液をKHSO₄の添加によって酸性にした。CHCl₃による抽出後、有機層を乾燥(M gSO₄)しそして溶剤を除去した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（５／５／１のヘキサン／酢酸エチル／酢酸）により精製した。収量：0.566g（66％）。¹ H NMR(DMSO,D₂O)：δ1.16(s,3H)，1.30(s,3H)，1.50-2.05(m,4H)，3.80-4.40(m ,8H)，7.15-8.0(m,16H)¹³ C NMR(DMSO,D₂O)：δ26.63，29.05，31.50，31.94，47.43，51.52,52．19,66. 50，74.10，75.10，108.36，120.88，125.93，127.98，128.60，141.48，144.39 ，144.76，156.82，157.12，174.11，175.11 実施例14 (S,S)-2,6-ジアミノ-4-オキサヘプタン二酸 (a)ビス〔(2R,5S)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-5-ピラジニル〕メチルエーテルヘキサン中のブチルリチウム（1.6M,6.25ml,10.0ミリモル）を、−78℃の乾燥 THF(8ml)中の(2R)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピルピラジン（1.8 4g，10.0ミリモル）の溶液に加えた。混合物を、15分撹拌した。乾燥THF(2ml)中のビス（クロロメチル）エーテル（0.67g，5.0ミリモル）の溶液を加えた。反応混合物を、一夜周囲温度に到達させた。溶剤を蒸発しそして残留物をジエチルエーテルにとった。このエーテル溶液を水で洗浄し、乾燥(MgSO₄)しそして蒸発した。生成物を、クロマトグラフィー（シリカゲル，２：１のヘキサン／酢酸エチル）により精製した。収量：0.65g（32％）。黄色の油。¹ H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ0.63(6H,d)，1.05(6Hd)，2.25(2Hm)，3.58(2Hdd)，3. 63(6Hs)，3.64(6H,s)，3.76(2Hdd)，3.83(2Ht)，3.98(6Hm)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ16.4，19.1，30.1，52.1，52.2，56.9，60.3，72.5， 161.0，165.0 (b) (S,S)-2,6-ジアミノ-4-オキサヘプタン二酸ジメチルビス〔(2R,5S)-2,5-ジヒドロ-3,6-ジメトキシ-2-イソプロピル-5-ピラジニル〕メチルエーテル（0.65g，1.49ミリモル）を、メタノール（５ml）に溶解しそして0.25Ｍ塩酸（23.8ml，5.96ミリモル）を加えた。混合物を、周囲温度で一夜撹拌した。この水／メタノール溶液を、ジエチルエーテルで抽出した。それから、pHをアンモニアの添加により10に調節しそしてＤ-バリンメチルエステルをエーテル中に抽出した。水の大部分を蒸発した。残留物を、さらに精製することなしに、次の工程に使用した。 1H NMR(300MHz,DMSO-D₆)：δ3.72(6H,s)，3.85(4H,m)，4.23(2Ht)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ52.8，53.2，68.9，168.4 (c) (S,S)-2,6-ジアミノ-4-オキサヘプタン二酸・2HCl 上記工程からのジメチルエステルを、６Ｍ塩酸（５ml）中で３時間還流した。溶液を蒸発しそして凍結乾燥した。収量：白色の固体420mg。¹ H NMR(300MHz,D₂O)：δ3.87(2H,dd,J=10.8Hz,J=3.2Hz)，3.95(2Hdd,J=10.8Hz,J =4.6Hz)，4.13(2H,dd,J=3.2および4.6Hz)¹³ C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ53.4，68.4，170.3 (d)(S,S)-2,6-ビス〔（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノ〕-4-オキサヘプタン二酸反応は、窒素下で実施した。ヘキサメチルジシラザン(10ml)およびクロロトリメチルシラン(1ml)中の(S,S)-2,6-ジアミノ-4-オキサヘプタン二酸ジ塩酸塩（20 0mg，0.75ミリモル）の懸濁液を、120℃で３時間加熱して透明な溶液を得た。過剰のシリル化剤を真空中で除去しそして残留物を、ジクロロメタン(5ml）に溶解した。この溶液を０℃に冷却しそして乾燥ジクロロメタン(2ml)中の９-フルオレニルクロロホルメート（425mg，1.65ミリモル）の溶液を加えた。混合物を、２時間撹拌しそしてそれから蒸発した。残留物を、THF(5ml)にとりそして0.1Ｍ塩酸１mlを加えた。混合物を、15分撹拌しそしてそれから蒸発した。残留物を、酢酸エチルにとった。有機層を水で洗浄し、乾燥(MgSO₄)しそして蒸発した。生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカ，85：10：５のクロロホルム／メタノール／酢酸）により精製した。収量：310mg（65％）。白色の固体。¹ H NMR(300MHz,DMSO-d₆)：δ3.7(4Hm)，4.1(2Hm)，4.25(6Hm)，7.2-7.4(I0Hm)， 7.7(4Hd)，7.8(4Hd) 実施例15 (S,S)-2,7-ジアミノ-4-アザオクタン二酸 (a)(S,S)-2,7-ビス（第３ブチルオキシカルボニルアミノ）-4-アザオクタン二酸アセトニトリル(50ml)中の(S)-4-アミノ-2-第３ブチルオキシカルボニルアミノ酪酸（1.03g,4.70ミリモル）の溶液を、アセトニトリル(50ml)および脱ガスしたＨ₂O(50ml)中の(S)-Boc-セリン-β-ラクトン（0.80g，4.27ミリモル）の溶液に加えた。pHを、撹拌下１Ｍ NaHCO₃の滴加により、5.5に維持した。混合物を周囲温度で５日間撹拌した。pHをNaHCO₃の添加により調節しそして反応をTLCにより監視した。溶剤を留去し、残留物を、酢酸を加えてpH５にしたクロロホルム (5ml)とともにすりつぶした。このクロロホルム溶液を蒸発しそして生成物を、シリカゲル上のクロマトグラフィー処理（２：１のCHCl₃：MeOH）後に単離した。収量：0.92g（53％）。白色の固体。¹ H NMR(DMSO-d6,300MHz)：δ7.33(d,J=6.3Hz,1H)，6.27(d,J=5.7Hz,1H)，4.42(d ,J=7.5Hz,1H)，4.15(dd,J=10.5Hz，J₂=3.9Hz,1H)，4.01(d,J=6.3Hz,1H)，3.87(b r s,1H)，2.78(br s,1H)，1.78-2.21(m,4H)，1.36および1.35(2s,18H)¹³ C NMR(DMSO-d₆，75.43MHz)：δ174.95，155.74，155.25，79.58， 78.22，78.04，62.97，56.42，56.00，51.17，48.99，38.14，28.62，28.46 C₁₇H₃₁N₃O₈(405.45) (b)(S,S)-2,7-ビス（第３ブチルオキシカルボニルアミノ）-4-（ベンジルオキシカルボニル）-4-アザオクタン二酸１Ｍ NaHCO₃（5.9ml，5.92ミリモル）およびベンジルオキシカルボニルクロライド（0.5g，0.42ml，2.96ミリモル）を、０℃のジオキサン(40ml)およびH₂O(30 ml)中の(S,S)-2,7-ビス（第３ブチルオキシカルボニルアミノ）-4-アザオクタン二酸（0.6g，1.48ミリモル）の溶液に加えた。混合物を、０℃で３時間および周囲温度で６時間撹拌し、蒸発し、残留物をクロロホルム(5ml)およびpH５にする酢酸とともにすりつぶした。このクロロホルム溶液を蒸発しそしてシリカゲル上のクロマトグラフィー処理（４：１のCHCl₃：MeOH）後に、生成物を単離した。収量：0.39g（50％）。白色の固体。¹ H NMR(DMSO-d₆,300MHz)：δ7.21-7.37(m,5H)，7.18(d,J=7.8Hz,1H)，6.23(d,J= 6.3Hz,1H)，4.98(s,2H)，4.43(dd,J=10.8Hz,J=3.3Hz,1H)，4.09(dd,J=10.2Hz,J= 6.3Hz,1H)，3.88-4.02(m,2H)，3.01(d,J=5.7Hz,2H)，1.74-1.88(m,1H)，1.59-1. 72(m,1H)，1.35および1.33(2d,18H)¹³ C NMR(DMSO-d₆，75.43MHz)：δ177.42，177.38，161.20，160.63，160.16，14 2.20，133.48，132.91，132.78，83.55，83.14，70.76，70.40，59.39，56.44， 53.61，42.30，36.01，33.28 C₂₅H₃₇N₃O₁₀(539.58) (c)(S,S)-2,7-ジアミノ-4-ベンジルオキシカルボニル-4- アザオクタン二酸 (S,S)-2,7-ビス（第３ブチルオキシカルボニルアミノ）-4-ベンジルオキシカルボニル-4-アザオクタン二酸（0.29g，0.37ミリモル）を、TFA(10ml)に溶解し、溶液を周囲温度で２時間撹拌しそしてTFAを留去して標記化合物を得た。この化合物は、さらに精製することなしに、次の工程に使用した。 (d)(S,S)-ベンジルオキシカルボニル-2,7-ビス（９−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）-4-アザオクタン二酸 (S,S)-2,7-ジアミノ-4-ベンジルオキシカルボニル-4-アザオクタン二酸（0.2g ，0.37ミリモル）を、ジオキサン(10ml)およびH₂O(10ml)に溶解し、９−フルオレニルメチルクロロホルメート（0.29g，1.11ミリモル）および１Ｍ NaHCO₃（2. 96ml，2.96ミリモル）を、０℃で撹拌しながら加え、撹拌を周囲温度で10時間つづけそして溶剤を蒸発した。残留する固体を、pHを酢酸の添加によってpH５に保持しながら、クロロホルム(5ml)とともにすりつぶした。次に溶液を蒸発しそしてシリカゲル上のクロマトグラフィー処理（１０：１０：１のAcOEt：ヘキサン：AcOH）後に、生成物を単離した。収量：0.1g（35％）。白色の固体。¹ H NMR(DMSO-d₆，300MHz)：δ7.21-7.44，7.61-7.91(m,22H)，6.88(d,J=6.3Hz,1 H)，4.96(s,2H)，4.56(dd,J=10.8Hz,J=3.3Hz,1H)，3.94-4.28(m,8H)，3.08(d,J= 5.7Hz,2H），I.86-1.98(m,IH)，1.69-1.82(m,1H)¹³ C NMR(DMSO-d₆,75.43MHz)：δ172.98，172.49，156.49，156.04，144.32，144 .24，144.17，142.97，141.07，139.81，137.82，137.55，129.30，128.66，128 .06，127.99，127.66，127.46， 125.68，121.75，120.39，110.06，66.22，65.60，55.26，52.20，47.08，47.04 ，36.63，37.74 C₄₅H₄₁N₃O₁₀(783.83)ペプチドの固相合成固相ペプチド合成は、実質的に、フルオレニルメトキシカルボニル(Fmoc)-ポリアミド戦略の原理によって実施した（AthertonおよびSheppard，Solid phase peptide synthesis: a procticalapproach ．Oxford：IRL Press at Oxford Univ ersity Press，1989）。商業的に入手できる合成樹脂を使用した。手動式または半-自動装置(Labortec Peptide Synthesizer 5P 650)を使用するバッチ合成に対して、これらは、酸不安定な結合剤（Wang，J．Am．Chem．Soc．95，1328〜1333 ，1973）または酸過不安定な結合剤（Merger等，Tetrahedron Letters 29，4005 〜4008，1988）を有するポリスチレンである。またはペプチドはLKB Biolynx 41 70 Automated Peptide Synthesizerを使用して、流れ樹脂上で完全に自動式な装置において組み立てられる（Atherton等，J．Chem．Soc．Chem．Commun．1151〜 2，1981）。既に保護された所望のＣ-末端Fmoc-アミノ酸基を含有している合成樹脂を購入した。連鎖伸長は、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)／１-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)による活性化（KoenigおよびGeiger，Chem．Be r ．103，2034〜2040，1970）を使用してまたはカップリング試薬PyBOP（Coste等，Tetrahedron Lett.，31，205〜208，1990）を使用して、側鎖が保護されたFmo c-アミノ酸ペンタフルオロフェニルエステルをもって達成することができた。リジン側鎖アミノ基は、t-ブチルオキシカルボニル官能基により保護し、グルタミン酸およびアスパラギン酸の側鎖カルボキシル基は、t-ブチルエステルで保護した。所望のＮ-脱保護されたＣ-末端基を有する合成樹脂を、DCCおよびHOBtの助けによって、Fmoc-保護されたジアミノジカルボン酸の半当量でアシル化した。反応の完了後、過剰の試薬を、洗浄除去した。それから、ペプチジル樹脂は、遊離のまま残っている可能性のあるカルボキシル基を固定するために、DCC／HOBtでさらに一度処理した。この工程後、樹脂をメタノールで洗浄して樹脂-結合したアミノ基と結合することのできないカルボキシル基を失活させた。最後に、過剰のアミノ基をアセチル化によってキャップした。それから、ペプチド合成を通常通りつづけた。所望の順序の固相組み立てを完了した後に、適当な掃去化学物質（King等，In t．J．Peptide Protein Res.，36，255〜268，1990）を加えたトリフルオロ酢酸を使用して、ペプチドを合成樹脂から開裂し、同時的に側鎖の脱保護を行う。蒸発後、ペプチドをジエチルエーテルによる沈殿および乾燥により単離する。精製は、分取用の逆相高性能液休クロマトグラフィーによって行われる。実施例16 ペプチド合成：（pGlu-Glu-Asp)₂-(E)-DHs(Lys)₂ このペプチドは、Labortec Peptide Synthesizerを使用して合成した。Fmoc-L ys(Boc)-Sasrin重合体（1.0g，0.6ミリミル：BachemA.G．；置換0.6ミリミル／ｇ）を、100mlの反応フラスコに充填した。DMF(20ml)中のFmoc-DHs(150mg，0.23 ミリミル）、DCC(290mg， 1.4ミリミル）およびHOBt(211mg，1.4ミリモル）を重合体に加えそして反応を９時間進行させた。さらに、DCC（1.4ミリモル）およびHOBt（1.4ミリモル）を加えそして反応をさらに２時間進行させた。それから重合体を、CH₂Cl₂、CH₂Cl₂中の30％MeOHおよびDMFで洗浄した。重合体上の遊離アミノ基は、DMF中の10％AC₂O を使用してアセチル化した（１時間にわたり３×；Kaiser試験陰性）。残りの合成を、Fmoc-Asp(OtBu)-Opfp（1.33g，2.3ミリモル）、Fmoc-Glu(OtBu )-Opfp（1.35g，2.3ミリモル）およびpGlu-ペンタクロロフェニルエステル（0.8 6g，2.3ミリモル）を使用して標準プロトコールにより実施した。HOBt（350mg， 2.3ミリモル）を、それぞれのカップリング工程において加えて反応を１時間進行させた。カップリングの完了は、陰性のKaiser試験により確められる。Fmoc- アミノ酸とのカップリング後、重合体をDMFで洗浄し、保護基をDMF中の20％ピペリジンにより開裂しそして重合体を再びDMFで洗浄した。最終のカップリング後、重合体をMeOH／CH₂Cl₂およびCH₂Cl₂で洗浄した。乾燥した重合体−ペプチドの重量は１ｇであった。ペプチドを、１：１のTFA：CH₂Cl₂によって重合体から開裂し、溶液を凍結乾燥し、残留物を水に溶解し、濾過(0.45μ)しそして濾液を凍結乾燥した。収量430mg。さらに精製のために、この生成物100mgを水(0.5ml)に溶解しそして2.1×15cmのBeckman Ultrasphere ODSおよび溶液Ａ：H₂O中の0.1％ TFA、溶液Ｂ：40：60のMeCN：H₂O中の0.1％TFAを使用して、分取用HPLCにうけしめた。勾配はＢ０〜15％、120分、流速５ml／分である。凍結乾燥後、純粋（＞95％）なペプチド19mgが得られた。FAB-MS：〔Ｍ＋Ｈ〕 1169.3。 HOBt＝ヒドロキシベンゾトリアゾール Pfp＝ペンタフルオロフェニル Fmoc＝９−フルオレニルメトキシカルボニル Boc＝ｔ−ブトキシカルボニル DCC＝ジシクロヘキシルカルボジイミド (E)-DHs＝(S,S)-2,7−ジアミノ−（Ｅ）−オクト-4-エン-1,8-二酸

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９４年７月１９日【補正内容】請求の範囲１．それぞれのペプチドの相当する位置における非−末端アミノ酸のＣα−原子において、炭素−炭素結合によりまたは２価の架橋基-A-により一緒に結合した２個の単一鎖の血液調節性ペプチドからなるペプチド化合物。上記ペプチド化合物において -A-は、Ｃ_1-6炭素鎖であり、そして (i)(a) １個または２個以上の基-R^Aまたは-OR^A（式中、Ａは独立して水素原子またはモノ−またはポリヒドロキシル化されていてもよいＣ_1-6−アルキル、Ｃ₁ _-6 −アルカノイルまたはＣ_1-6−アルコキシアルキル基を示す）によって置換されておりそして（または） (b)１個または２個以上の二重または三重炭素−炭素結合により中断されておりそして（または） (c)１個または２個以上の基-Z-〔式中、それぞれの-Z-は、独立して、-O-、-C O-または-NR^B（式中、それぞれのR^Bは独立して水素原子またはＣ_1-6アルキルまたはＣ_6-10アリール基である）であり、または、１個または２個以上の置換分または不飽和の炭素−炭素結合が-A-中に存在する場合は、-Z-はまた-S-であってもよい〕により中断されており、または (ii) (CH₂)y（式中、ｙは、１、５または６である）であり、そして天然のα−側鎖は、上記のＣα原子には存在しない。２．架橋基-A-が、不飽和である請求項１記載のペプチド化合物。３．架橋基-A-がから選択されたものである請求項２項記載のペプチド化合物。４．架橋基-A-が (E)−ブテン-2-エニレン (Z)−ブテン-2-エニレンブテン-2-イニレンメチレンｎ−ペンチレンおよびｎ−ヘキシレンから選択されたものである請求項３項記載のペプチド化合物。５．単一鎖の血液調節性ペプチドが、式Ｉ R^a-R^b-R^C-R^d-(R^e)n-R^f （Ｉ）を有するものである請求項１〜４項の何れかの項記載のペプチド化合物。上記式において、 R^aは、を示し、 R^bは、を示し、 R^Cは、を示し、 R^dは、を示し、 R^eは、を示し、 R^fは、を示し、ｎおよびｍは、独立して、０または１を示し、Ｐ、ｑおよびｒは独立して、１または２を示し、ｓは３または４を示し、 R¹およびR²は、両方水素原子であるか、または、一緒になってオキソ基を示し、 R³およびR⁴は、両方水素原子であるか、または一緒になって炭素−炭素結合を示し、 R⁵は、水素またはアシル基であり、 R⁶およびR⁷は、独立してヒドロキシ基またはアミノ基、好ましくはヒドロキシ基を示し、 R⁸は水素；Ｃ_2-6アルキル基；Ｃ_7-20アルアルキル基（これは１個または２個以上のヒドロキシ、アミノまたはメトキシ置換分を有していてもよい）；または代謝的に不安定なＳ−保護基を示し、 R⁹は水素またはメチル基を示し、そして R¹⁰はヒドロキシまたはアミノ基、アミノ酸グルタミンの基またはＮ−末端グルタミン単位を有するペプチドの基を示す。６．式Ｉのペプチド鎖において、ｎが０を示す請求項５記載のペプチド化合物。７．式Ｉのペプチド鎖において、ｍが０を示す請求項５または６記載のペプチド化合物。８．架橋基-A-が、式Ｉのアミノ酸R^dのＣα原子に結合している請求項５〜７の何れかの項記載のペプチド化合物。９．式II （式中、-A-は請求項１において定義した通りでありそしてR^a、R^bR^C、R^e、R^fおよびｎは請求項５において定義した通りである）の請求項５〜８の何れかの項記載のペプチド化合物。 10．式（式中、-A-は、請求項１において定義した通りである）の請求項１〜９の何れかの項記載のペプチド化合物。 11．医薬用担体または賦形剤と一緒にした請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物からなる医薬組成物。 12．細胞分裂を刺激するために使用される請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物。 13．骨髄造血または骨髄の再生を刺激するために使用される請求項１〜10の何れかの項記載のぺプチド化合物。 14．細胞分裂を刺激する医薬を製造するための請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物。 15．骨髄造血または骨髄の再生を刺激する医薬の製造における請求項14記載の使用。 16．細胞分裂を刺激するための請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の使用。 17．骨髄造血または骨髄の再生を剌激するための請求項16記載の使用。 18．請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の有効量を患者に投与することからなる患者の細胞分裂を刺激する方法。 19．骨髄造血または骨髄の細胞の分裂を剌激する請求項18記載の方法。 20．部分的にまたは完全に保護された誘導体を脱保護することからなる請求項１〜10の何れかの項記載のぺプチド化合物の製法。 21．(a)ビスーラクチムエーテルを金属化し次にアルキル化してビスーラクチムジペプチドエーテルを形成し、 (b)工程(a)のビス−ラクチムジペプチドエーテルを加水分解して架橋されたα，α′−ジアミノ酸を形成し、 (c)ペプチド鎖中の残りのアミノ酸を導入しそして (d)保護された基を脱保護することからなる請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の製法。 22．式（式中、-A-は請求項１において定義した通りである）の架橋されたα，α′− ジアミノ酸。 23．式（式中、-A-は請求項１において定義した通りである）のビス−ラクチムジペプチドエーテル。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０７Ｄ 241/18 8615−4Ｃ (31)優先権主張番号９２１１６７６．３ (32)優先日 1992年６月２日 (33)優先権主張国イギリス（ＧＢ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ (72)発明者ソールバツケン，マグネノールウエー国エン―0455 オスロ．フアイエスガーテ８ (72)発明者アグネル，エーリクノールウエー国エン―1187 オスロ．スヴアーネヴエアイエン 19ベー (72)発明者ランゲ，マイノルフノールウエー国エン―0451 オスロ．ウツレヴオルスヴエアイエン 102ベー―エー

Claims

【特許請求の範囲】１．それぞれのペプチドの相当する位置における非−末端アミノ酸のＣα−原子おいて、炭素−炭素結合によりまたは２価の架橋基-A-により一緒に結合した２個の単一鎖の血液調節性ペプチドからなるペプチド化合物。上記ペプチド化合物において -A-は、C_1-6炭素鎖であり、そして（ｉ）(a)１個または２個以上の基-R^A、-OR^A、-SR^A、-NR^AR^Aまたは-COOR^A（式中、Ａは独立して水素原子またはモノ−またはポリヒドロキシル化されていてもよいC_1-6−アルキル、C_1-6−アルカノイルまたはC_1-6−アルコキシアルキル基を示す）によってまたは１個または２個以上のハロゲン原子、例えば弗素、塩素、臭素または沃素により置換されておりそして（または） (b)１個または２個以上の二重または三重炭素−炭素結合により中断されておりそして（または） (c)１個または２個以上の基-Z-〔式中、それぞれの-Z-は、独独立して水素原子またはC_1-6アルキルまたはC_6-10アリール基である）であり、または、１個または２個以上の置換分または不飽和の炭素−炭素結合が-A-中に存在する場合は、-Z-はまた-S-であってもよい〕により中断されており、または（ii） (CH₂)_y（式中、ｙは、１、５または６である）であり、そして天然のα−側鎖は、上記のＣα原子には存在しない。２．架橋基-A-が、不飽和である請求項１記載のペプチド化合物。３．架橋基-A-がから選択されたものである請求項２項記載のペプチド化合物。４．架橋基-A-が (E)−ブテン−２−エニレン (Z)−ブテン−２−エニレンブテン−２−イニレンメチレンｎ−ペンチレンおよびｎ−ヘキシレンから選択されたものである請求項３項記載のペプチド化合物。５．単一鎖の血液調節性ペプチドが、式Ｉ R^a-R^b-R^C-R^d-(R^e)_n-R^f （Ｉ）を有するものである請求項１〜４項の何れかの項記載のペプチド化合物。上記式において、 R^aは、を示し、 R^bは、を示し、 R^Cは、を示し、 R^dは、を示し、 R^eは、を示し、 R^fは、を示し、ｎおよびｍは、独立して、０または１を示し、ｐ、ｑおよびｒは独立して、１または２を示し、ｓは３または４を示し、 R¹およびR²は、両方水素原子であるか、または、一緒になってオキソ基を示し、 R³およびR⁴は、両方水素原子であるか、または一緒になって炭素−炭素結合を示し、 R⁵は、水素またはアシル基であり、 R⁶およびR⁷は、独立してヒドロキシ基またはアミノ基、好ましくはヒドロキシ基を示し、 R⁸は水素；C_2-6アルキル基；C_7-20アルアルキル基（これは１個または２個以上のヒドロキシ、アミノまたはメトキシ置換分を有していてもよい）；または代謝的に不安定なＳ−保護基を示し、 R⁹は水素またはメチル基を示し、そして R¹⁰はヒドロキシまたはアミノ基、アミノ酸グルタミンの基またはＮ−末端グルタミン単位を有するペプチドの基を示す。６．式Ｉのペプチド鎖において、ｎが０を示す請求項５記載のペプチド化合物。７．式Ｉのペプチド鎖において、ｍが０を示す請求項５または６記載のペプチド化合物。８．架橋基-A-が、式Ｉのアミノ酸R^dのＣα原子に結合している請求項５〜７の何れかの項記載のペプチド化合物。９．式II （式中、-A-は請求項１において定義した通りでありそしてR^a、R^bR^c、R^e、R^fおよびｎは請求項５において定義した通りである）の請求項５〜８の何れかの項記載のペプチド化合物。 10．式（式中、-A-は、請求項１において定義した通りである）の請求項１〜９の何れかの項記載のペプチド化合物。 11．医薬用担体または賦形剤と一緒にした請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物からなる医薬組成物。 12．細胞分裂を剌激するために使用される請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物。 13．骨髄造血または骨髄の再生を剌激するために使用される請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物。 14．細胞分裂を刺激する医薬を製造するための請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物。 15．骨髄造血または骨髄の再生を刺激する医薬の製造における請求項14記載の使用。 16．細胞分裂を剌激するための請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の使用。 17．骨髄造血または骨髄の再生を刺激するための請求項16記載の使用。 18．請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の有効量を患者に投与することからなる患者の細胞分裂を剌激する方法。 19．骨髄造血または骨髄の細胞の分裂を剌激する請求項18記載の方法。 20．部分的にまたは完全に保護された誘導体を脱保護することからなる請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の製法。 21．(a)ビス−ラクチムエーテルを金属化し次にアルキル化してビス−ラクチムジペプチドエーテルを形成し、 (b)工程(a)のビス−ラクチムジペプチドエーテルを加水分解して架橋されたα ，α′−ジアミノ酸を形成し、 (c)ペプチド鎖中の残りのアミノ酸を導入しそして (d)保護された基を脱保護することからなる請求項１〜10の何れかの項記載のペプチド化合物の製法。 22．式（式中、-A-は請求項１において定義した通りである）の架橋されたα，α′− ジアミノ酸。 23．式（式中、-A-は請求項１において定義した通りである）のビス−ラクチムジペプチドエーテル。