JPH08500752A - 冷凍袋 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 血球保存用の冷凍袋（１０）は、溶接部（１５、１８）によって一緒に接合されて包含領域（１９）を構成する２枚の材料シ一ト（１１）から形成される。ポケット（２０）が包含領域（１９）に通じ、このポケットを構成する溶接部（１８）の中に入口ポート（１７）が存在する。入り口チューブ（２３）がポート（１７）に固定され、その入口チューブは、シート（１１）の包含領域（１９）を超える延長部によって形成されたポウチ（２１）の境界内に通常配置される。

Description

【発明の詳細な説明】冷凍袋 本発明は血液細胞の保存に使用する袋に関するものである。 輸血のために使用する血液は４°±２°の温度の冷蔵庫に通常保存される。こ の場合それの安全寿命は６週間より長くない。冷凍することによって潜在的には もっと長い保存寿命が得られるかもしれないが、不幸なことに献血者から得た冷 凍血液は赤血球が破壊されて、輸血には全く不適当になる。赤血球は、遠心分離 によって他の血液成分、血漿から分離した後に、凍結防止剤を混合してから冷凍 する。通常の凍結防止剤はグリセロールである。グリセロール自体は有毒である から、輸血のために使用する前に、凍結した血球から全てのグリセロールを除去 しなければならない。遠心分離および多数の洗浄段階を含めた必要な除去作業は 、熟練を要する時間のかかる作業であって、そのために活力のある血球が多数失 われる結果となる。 別の凍結防止剤はハイドロキシエチル澱粉（ＨＥＳ）である。これは広く使用 されている人工血漿増量剤であり、無毒である。この物質を用いて赤血球を保存 する方法について多くの研究が行われている。初期の研究は成功しなかった。と いうのは、凍 結後に回復される血液単位（血液単位とは標準供血量のことで、約４５０ｍｌで ある）中の溶血（赤血球破壊）レベルが、安全限界より高いことが判明したため である。解凍した時の溶血レべルが１％より高くなければ、単位血液が標準輸血 に対して安全であると通常考えられている。回復後の溶血レベルが許容限度以内 となる、ＨＥＳを凍結防止剤として使用し凍結によって赤血球を保存および回復 する方法が今は開発されており、特許出願ＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号に記載 されている。 ＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号の方法で使用される袋は厳しい基準を満たさな ければならない。凍結は液体窒素中で行われるが、赤血球細胞と凍結防止剤の混 合物の体積が変化することが避けられない。ＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号に記 載されているように、凍結中に凍結袋の厚さを調整することによってこの体積変 化に対処する方法が重要である。また、ＨＥＳの濃度が厳しい限度内であること 、および献血された血液を冷凍袋に移す作業を無菌的に行うことも重要である。 ＨＥＳを冷凍袋自体に貯蔵することが提案されている。しかし、袋を製作する のに適した材料が僅かに多孔性であって、それの内部のＨＥＳの濃度が変化する ことが認められている。変 化の性質は貯蔵場所の大気湿度に依存する。 また、血液を充たした後、たとえば、−１００°の零下の温度で貯蔵しなけれ ばならない袋は貯蔵に便利な形のものでなければならないことも重要である。更 に、解凍後に輸血目的のために血液を袋から無菌的に流れさせることが可能でな ければならない。それらの基準を満たす袋が特許出願ＰＣＴ／ＧＢ８８／００９ ４７号およびＰＣＴ／ＵＳ９１／００１９２号に記載されている。それらからの 取り出し方法は、袋に組み込まれている特殊なポートの針を差し込むものである 。この作業は技能を必要とし、看護要員によって通常は認識されない態様で血液 を提示し、また袋の絶対微生物学的完全性を損なう。 本発明によれば、冷凍袋は、溶接によって一緒に接合されて、底縁部と、２つ の側縁部と、入口縁部とを持つ包含領域を構成する２枚の材料シートを含み、入 口縁部には単一の入口ポートが存在する。 ポートは、入口縁部の少なくとも一部分によって部分的に規定され包含領域中 に通じるポケット中に配置することが好ましい。 材料シートは包含領域の限界を超えて伸長して開放ポウチを 形成することが好ましい。ポウチは包含領域の入口縁部と、包含領域の側縁部を 形成する溶接の伸長部と、シートの端部とによって形成される。 ポート上にチューブが配置され、たとえば、小さい金属カラーによってそれに 固定できる。チューブをポウチの境界内に置くために、チューブの形を予備成形 できる。 ポートは、袋の入口縁部の溶接前にその縁部内に配置されたインサートと一体 に形成することが好ましい。 袋の入口縁部中のポケットは、その縁部を側縁部に対して直角以外の角度で曲 げることによって形成できる。 本発明の別の態様によれば、赤血球を冷凍する方法は、 溶接によって一緒に接合されて、底縁部と、２つの側縁部と、入口縁部とを持 つ包含領域を構成する２枚の材料シートから形成され、包含領域中に通じるポケ ットの部分を入口縁部の少なくとも一部によって規定し、入口縁部のうち内部に インサートを有する部分がチューブに取りつけられるポートを有し、チューブが 、袋の範囲を超えるシートの伸長によって形成された開放ポウチ内部に配置され る前記冷凍袋を取るステップと、 遠心分離された赤血球の供給源にチューブを無菌結合して赤 血球を袋に送るステップと、 赤血球の供給源を切り離し、チューブをＨＥＳ源に無菌結合し、ＨＥＳを袋に 送るステップと、 袋を操作して、実際上できるだけ全ての空気をそれから追い出すステップと、 チューブを封じ、それからＨＥＳ供給源との結合を断つステップと、 袋の内容物を撹拌して血球とＨＥＳを完全に混合するステップと、 袋を冷凍フレーム内に置き、フレームと袋を液体窒素中に浸して内容物を冷凍 するステップと、 を含む。 冷凍作業中にポートの付近でチューブをクリップではさむことができる。 袋を液体窒素に浸す前に、ポウチを、たとえば、ローラによってまたはプレス で処理して空気をそれから押し出し、次いでそれの開放端部を封じる。この場合 、封じたポウチ内部にチューブが完全に含まれるような構造にする。 赤血球の相対的な割合、冷凍法、および凍っている血球を輸 血に適する形にする回復法、および作業のその他の詳細は、たとえば、ＰＣＴ／ ＧＢ９０／０１４０号に詳しく記載されており、したがって、ここではこれ以上 は説明しない。 輸血のために血液が準備されると、封じたポウチを破り、標準輸血装置にチュ ーブを通常のやり方で連結する。 ＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号の諸要件を満たすために、包含領域は約０．１ ０２平方メートルの面積を持つこと、および、少なくとも、側縁部と底縁部の間 の隅における溶接部が丸みを帯びていることが好ましい。 以下、添付の図面を参照して、本発明のいくつかの実施例を、例示的にのみ説 明することにする。 第１図は本発明の冷凍袋の平面図である。 第２図は第１図に示す冷凍袋の一部分の詳細図である。 第３図は第２図に示すインサートの４つの変形例の斜視図である。 第４図は使用中の袋の平面図である。 第５図、第６図および第７図は第１図に示す袋の別の設計の平面図である。 冷凍袋１０（第１図）は全体として１１で示される２枚の材 料シートから製作される。シートの底縁部１２と側縁部１３、１４が第１の溶接 部１５によって一緒に接合される。ポート１７が一体になっているインサート１ ６がシート１１の上部へ向かってシートの間に配置され、シート１１の１つの側 面１４で溶接部１５から（直角に対して）上方に曲げられた第２の溶接部１８に よって一緒に接合される。溶接部１８は入口縁部を構成し、溶接部１８を横切っ て通路が存在するように溶接部１８はインサート１６の上に位置し、それから下 方へ湾曲して、シート１１の側面１４において溶接部１５に出会う。このように して溶接部１５、１８は包含領域１９を構成する。包含領域はインサート１６と ポート１７を通る所以外は封じられ、溶接部１８との接合部において溶接部１５ と溶接部１８に対する法線によって形成されたポケット２０の上部へ向かってイ ンサート１６が配置される。 包含領域１９とポケット２０を超えるシート１１の部分によって開放ポウチ２ １が構成される。ポウチは溶接部１８と、溶接部１５の延長部と、シート１１の 端部２２とによって構成される。チューブ２３（第１図には示さないが、第２図 参照）がポート１７に取り付けられ、金属カラー２４によってそれに固 定される。 インサート１６の適当な形を第３図に示す。 使用時には（第４図）、袋１０を貯蔵場所から取り出して、この技術で周知の 遠心分離などの手段によって標準単位献血から得られた赤血球（それは軟膜をな くすことができる）を含んでいる血液袋２６から出ている供給チューブ２５に、 チューブ２３を無菌的に連結し、血球を包含領域１９に移す。それから供給チュ ーブ２５を切り離し、ＨＥＳ供給源２８から出ているチューブ２７を無菌結合に よってチューブ２３に連結する。ＨＥＳは包含領域１９に送られ、袋を操作して 全ての空気を包含領域１９から実際上できるだけ押し出す。それからチューブ２ ３を封じてチューブ２３と２７を分離する。それから袋１０を操作して赤血球と ＨＥＳを完全に混合する。 混合の後で、クリップ２９（第２図）を用いてポート１７の近くでチューブ２ ３をふさぎ、チューブ２３をポウチ２１の中に配置し、空気をポウチ２１から押 し出し（たとえば、プレスを使用して）、シート１１の上縁部２２を一緒に溶接 してポウチ２１を封じる。それから袋を冷凍フレームの中に入れ（この技術で周 知の手順であるので、ここでは説明しない）、その冷 凍フレームを液体窒素中に既知のやり方で浸して混合物を冷凍する。クリップ２ ９は、冷凍作業中に血球が包含領域１９からチューブ２３の中に流出するのを阻 止する助けとなる。ポウチ２１から空気を抜いて封じることは必要ではないが、 そうすると液体窒素がインサート１６とポート１７の領域に直接接近することが 阻止されて、インサート１６と溶接部１８の接合部に弱い部分があっても、窒素 が包含領域に入ることができないようになる。 混合物を凍結した後は、ＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号の方法に従って袋を貯 蔵する。 ＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号の方法の厳しい要件に合致させるために（すな わち、標準単位血液を冷凍する時に内容物の最適な厚さを管理する）、包含領域 の面積は約０．１０２平方メートルで、包含領域１９の隅における溶接部１５、 １８は湾曲している。包含領域１９の形は、ポケット２０は別にして、長方形、 ほとんど正方形が有利であり、適当な近似寸法は第１図に示す寸法である、すな わち、袋の全長が３９５ｍｍ、幅が３２５ｍｍ、ポケット２０の端部での、底縁 部１２における溶接部１８と溶接部１５の間の長さがそれぞれ３４０ｍｍ、 ３００ｍｍで、溶接部１５、１８の幅は４ｍｍ、溶接部１５はシート１１の縁部 １４、１３から６ｍｍ差し込まれ、隅の半径は４６ｍｍである。包含領域１９の 外の底縁部１２の隅には補強された吊り下げ孔３０が２つ設けられる。 貯蔵している血液が必要になると、その血液をＰＣＴ／ＧＢ９０／０１４０号 の方法に従って解凍し、チューブ２３を無菌連結器によって任意の標準輸血袋に 連結する。この解凍法は非常に簡単であるが、輸血を行う人にとってなじみのな い唯一の作業であり、輸血用の血液は医療・看護要員になじみの袋で供給される 。 血液の絶対微生物学的完全性は献血、保存、解凍、または冷凍袋１０からの移 し換えを行っている間に損われないので、 ａ）解凍直後に血液を輸血する必要がなければ、通常の血液銀行に血液をしば らく貯蔵できる、ｂ）血液の貯蔵寿命を延長するために最適な添加剤溶液を添加 できる、ｃ）必要があれば単位血液を洗浄できる、ｄ）自己または同種の血漿を 赤血球に無菌的に加えることができる、またｅ）冷凍袋１０から血液を取り出し た後で出口チューブ２３を区分して、その中に残っている血液について数多くの 交差試験を行うことが可能である。 袋のこの設計は、不正確な単位の輸血を防止するようにラべルを貼ることが容 易であって、ある単位血液の献血者を探すことができるようにし、またその他の ことができるようにする。献血が包含領域１９に移されている間に、１枚のシー ト１１のポウチ２１を形成している部分にラベルを貼って、不正確なラベル貼り の危険を最少にする。この部分のラベルは冷凍中に混合物からの熱の移動に影響 しない。 シート１１を単一層として説明してきたが、各シートを実際には多層にできる ことがわかるであろう。 本発明に使用するのに適当な材料はＫａｐｔｏｎ Ｆおよびテフロン（登録商 標）であるが、当業者には他の適当な材料も直ちに明らかになるであろう。多く のプラスチック材料が低温で求められる柔軟性と耐寒性を有する。たとえば、メ タライズド・プラスチックを使用できる。使用する材料に応じて、上記した２つ の溶接部１５、１８を用いるのではなくて、単一溶接法を用いて袋１０を製作す ることが可能なこともある。 上記寸法と厚さは例示にすぎず、変更できることもわかるであろう。 袋の別の実施例を第５図から第７図に示す。本発明の範囲内 である、上記着想のその他の実施例も当業者には直ちに明らかになるであろう。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９３年１０月１日 【補正内容】 【図１】 【図５】 【図２】 【図４】 【図３】 【図６】 【図７】 【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９４年７月１２日 【補正内容】 ポート上にチューブが配置され、たとえば、小さい金属カラにょってそれに固 定できる。チューブをポウチの境界内に置くために、チューブの形を予備成形で きる。 ポートは、袋の入口縁部の溶接前にその縁部内に配置されたインサートと一体 に形成することが好ましい。 袋の入口縁部中のポケットは、その縁部を側縁部に対して直角以外の角度で曲 げることによって形成できる。 ポウチを有する流体保存容器が米国特許第３５２０４７１号に記載されている 。この米国特許第３５２０４７１号においては、容器の一端部においてポウチの 内部に２つの流体収集管が配置され、容器の他端部においてポウチの内部に流体 放出管が配置される。 本発明の別の態様によれば、赤血球を冷凍する方法は、 溶接によって一緒に接合されて、底縁部と、２つの側縁部と、入口縁部とを持 つ包含領域を構成する２枚の材料シートから形成され、包含領域中に通じるポケ ットの部分を入口縁部の少なくとも一部によって規定し、入口縁部のうち内部に インサートを有する部分がチューブに取りつけられるポートを有し、チューブが 、袋の範囲を超えるシートの伸長によって形成された開 放ポウチ内部に配置される前記冷凍袋を取るステップと、 遠心分離された赤血球の供給源にチューブを無菌結合して赤血球を袋に送るス テップと、 赤血球の供給源を切り離し、チューブをＨＥＳ源に無菌結合し、ＨＥＳを袋に 送るステップと、 袋を操作して、実際上できるだけ全ての空気をそれから追い出すステップと、 チューブを封じ、それからＨＥＳ供給源との結合を断つステップと、 袋の内容物を撹拌して血球とＨＥＳを完全に混合するステップと、 袋を冷凍フレーム内に置き、フレームと袋を液体窒素中に浸して内容物を冷凍 するステップと、 を含む。 冷凍作業中にポートの付近でチューブをクリップではさむことができる。 袋を液体窒素に浸す前に、ポウチを、たとえば、ローラによってまたはプレス で処理して空気をそれから押し出し、次いでそれの開放端部を封じる。この場合 、封じたポウチ内部にチュ ーブが完全に含まれるような構造にする。 赤血球の相対的な割合、冷凍法、および凍っている血球を輸血に適する形にす る回復法、および作業のその他の詳細は、たとえば、ＷＯ ９０／０９１８４号 に詳しく記載されており、したがって、ここではこれ以上は説明しない。 輸血のために血液が準備されると、封じたポウチを破り、標準輸血装置にチュ ーブを通常のやり方で連結する。請求の範囲 １．溶接部（１５、１８）によって一緒に接合されて、底縁部（１２）と、２つ の側縁部（１３、１４）と、入口縁部（１８）とを持つ包含領域を規定する２枚 の材料シート（１１）を含む冷凍袋であって、入口縁部（１８）に単一の入口ポ ート（１７）が存在し、材料シート（１１）が包含領域（１９）の限界を超えて 伸長して開放ポウチ（２１）を形成し、該ポウチが包含領域の入口縁部（１８） と、包含領域の側縁部（１３、１４）を形成する溶接部（１５）の延長部と、シ ート（１１）の端部（２２）とによって規定されることを特徴とする冷凍袋。 ２．ポート（１７）が、入口縁部（１８）の少なくとも一部分によって部分的に 規定され包含領域（１９）中に通じるポケッ卜（２０）の中に配置されることを 特徴とする請求の範囲第１項に記載の冷凍袋。 ３．側縁部（１３、１４）に対して直角以外の角度で入口縁部（１８）を曲げる ことによってポケット（２０）を形成することを特徴とする請求の範囲第２項に 記載の冷凍袋。 ４．ポート（１７）上にチューブ（２３）が配置されることを 特徴とする請求の範囲第１項から第３項のいずれか一項に記載の冷凍袋。 ５．チューブ（２３）がポート（１７）に固定されることを特徴とする請求の範 囲第６項に記載の冷凍袋。 ６．チューブ（２３）が金属カラー（２４）によってポート（１７）に固定され ることを特徴とする請求の範囲第７項に記載の冷凍袋。 ７．ポート（１７）上に配置されているチューブ（２３）をポウチ（２１）の境 界内に置くために、チューブ（２３）が予備成形されることを特徴とする請求の 範囲第１項に記載の冷凍袋。 ８．ポート（１７）が、袋の入口縁部の溶接前にその縁部内に配置されるインサ ート（１６）と一体に形成されることを特徴とする請求の範囲第１項から第７項 のいずれか一項に記載の冷凍袋。 ９．包含領域（１９）とポケット（２０）の面積が約０．１０２平方メートルで あることを特徴とする請求の範囲第１項から第８項のいずれか一項に記載の冷凍 袋。 １０．縁部（１２、１３、１４、１８）の間の隅における溶接部（１５、１８） が湾曲していることを特徴とする請求の範囲 第１項から第９項のいずれか一項に記載の冷凍袋。 １１．溶接によって一緒に接合されて、底縁部（１２）と、２つの側縁部（１３ 、１４）と、入口縁部（１８）とを持つ包含領域を構成する２枚の材料シート（ １１）から形成され、包含領域中に通じるポケット（２０）の部分を入口縁部の 少なくとも一部によって規定し、入口縁部（１８）のうち内部にインサート（１ ６）を有する部分がチューブ（２３）に取りつけられたポート（１７）を有し、 チューブが、袋の範囲を超えるシート（１１）の伸長によって形成された開放ポ ウチ（２１）内部に配置される冷凍袋を取り出すステップと、 遠心分離されて、軟膜を除去した赤血球の供給源（２６）にチューブ（２３） を結合して赤血球を袋に移すステップと、 赤血球の供給源を切り離し、チューブをＨＥＳ源（２８）に無菌結合し、ＨＥ Ｓを袋に送るステップと、 袋を操作して、実際上できるだけ全ての空気をそれから追い出すステップと、 チューブ（２３）を封じ、同時にＨＥＳ供給源との結合を断つステップと、 袋の内容物を撹拌して血球とＨＥＳを完全に混合するステッ プと、 袋を冷凍フレーム内に置き、フレームと袋を液体窒素中に浸して内容物を冷凍 するステップと を含むことを特徴とする赤血球を冷凍する方法。 １２．袋を液体窒素に浸す前に、ポウチ（２１）を処理して空気をそれから押し 出し、それの開放端部（２２）を封じ、封じたポウチ内部にチューブ（２３）が 完全に収容されるような構造であることを特徴とする請求の範囲第１１項に記載 の赤血球を冷凍する方法。 １３．冷凍作業中にポート（１７）の付近でチューブ（２３）をクリップではさ むことを特徴とする請求の範囲第１１項または請求の範囲第１２項に記載の赤血 球を冷凍する方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，Ｊ Ｐ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ， ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ (72)発明者 ベル，スーザン・ヘレン イギリス国、ハンプシヤー・エス・オー・ １・５・エフ・エヌ、サザンプトン、シヤ ーリー、カールトン・ロード・８ (72)発明者 ゴーツ，ジヨセフ オランダ国、1189・ウエー・エヌ・ネス・ アー／デー・アムステル、デ・オウド・ビ シエール・49 (72)発明者 ヒルブリンク，ヒユベルタス・エドウアル ド オランダ国、7827・ベー・エル・エメン、 クーフメース・65

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．溶接部（１５、１８）によって一緒に接合されて、底縁部（１２）と、２つ の側縁部（１３、１４）と、入口縁部（１８）とを持つ包含領域を規定する２枚 の材料シート（１１）を含む冷凍袋であって、入口縁部（１８）に単一の入口ポ ート（１７）が存在することを特徴とする冷凍袋。 ２．ポート（１７）が、入口縁部（１８）の少なくとも一部分によって部分的に 規定され包含領域（１９）中に通じるポケット（２０）の中に配置されることを 特徴とする請求の範囲第１項に記載の冷凍袋。 ３．側縁部（１３、１４）に対して直角以外の角度で入口縁部（１８）を曲げる ことによってポケット（２０）を形成することを特徴とする請求の範囲第２項に 記載の冷凍袋。 ４．材料シート（１１）が包含領域（１９）の限界を超えて伸長して開放ポウチ （２１）を形成し、該ポウチが包含領域の入口縁部（１８）と、包含領域の側縁 部（１３、１４）を形成する溶接部（１５）の延長部と、シート（１１）の端部 （２２）とによって規定されることを特徴とする請求の範囲第１項から 第３項のいずれか一項に記載の冷凍袋。 ５．ポート（１７）上にチューブ（２３）が配置されることを特徴とする請求の 範囲第１項から第４項のいずれか一項に記載の冷凍袋。 ６．チューブ（２３）がポート（１７）に固定されることを特徴とする請求の範 囲第５項に記載の冷凍袋。 ７．チューブ（２３）が金属カラー（２４）によってポート（１７）に固定され ることを特徴とする請求の範囲第６項に記載の冷凍袋。 ８．ポート（１７）上に配置されているチューブ（２３）をポウチ（２１）の境 界内に置くために、チューブ（２３）が予備成形されることを特徴とする請求の 範囲第４項に記載の冷凍袋。 ９．ポート（１７）が、袋の入口縁部の溶接前にその縁部内に配置されるインサ ート（１６）と一体に形成されることを特徴とする請求の範囲第１項から第８項 のいずれか一項に記載の冷凍袋。 １０．包含領域（１９）とポケット（２０）の面積が約０．１０２平方メートル であることを特徴とする請求の範囲第１項から第９項のいずれか一項に記載の冷 凍袋。 １１．縁部（１２、１３、１４、１８）の間の隅における溶接部（１５、１８） が湾曲していることを特徴とする請求の範囲第１項から第１０項のいずれか一項 に記載の冷凍袋。 １２．溶接によって一緒に接合されて、底縁部と、２つの側縁部と、入口縁部と を持つ包含領域を構成する２枚の材料シートから形成され、包含領域中に通じる ポケットの部分を入口縁部の少なくとも一部によって規定し、入口縁部のうち内 部にインサートを有する部分がチューブに取りつけられたポートを有し、チュー ブが、袋の範囲を超えるシートの伸長によって形成された開放ポウチ内部に配置 される冷凍袋を取り出すステップと、 遠心分離されて、軟膜を除去した赤血球の供給源にチューブを結合して赤血球 を袋に移すステップと、 赤血球の供給源を切り離し、チューブをＨＥＳ源に無菌結合し、ＨＥＳを袋に 送るステップと、 袋を操作して、実際上できるだけ全ての空気をそれから追い出すステップと、 チューブを封じ、同時にＨＥＳ供給源との結合を断つステップと、 袋の内容物を撹拌して血球とＨＥＳを完全に混合するステッ プと、 袋を冷凍フレーム内に置き、フレームと袋を液体窒素中に浸して内容物を冷凍 するステップと を含むことを特徴とする赤血球を冷凍する方法。 冷凍作業中にポートの付近でチューブをクリップではさむことができる。 袋を液体窒素に浸す前に、ポウチを、たとえば、ローラによってまたはプレス で処理して空気をそれから押し出し、次いでそれの開放端部を封じる。この場合 、封じたポウチ内部にチューブが完全に含まれるような構造にする。