JPH08271504A - アスコルビン酸影響回避の方法及び組成物 - Google Patents
アスコルビン酸影響回避の方法及び組成物Info
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- JPH08271504A JPH08271504A JP10990095A JP10990095A JPH08271504A JP H08271504 A JPH08271504 A JP H08271504A JP 10990095 A JP10990095 A JP 10990095A JP 10990095 A JP10990095 A JP 10990095A JP H08271504 A JPH08271504 A JP H08271504A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 レドックス反応を利用して体液中の物質を測
定する際に、体液中に含まれるアスコルビン酸が測定値
へ与える影響を少なくし、高濃度のアスコルビン酸存在
下でも確実な測定を行うこと。 【構成】 通常使用されるアスコルビン酸酸化剤（ヨウ
素酸塩、過酸化ハロゲン、Ｃｕ２＋，Ｆｅ３＋など）に
加えて、補助剤として水素結合におけるプロトン受容基
を２個以上有する化合物（リン酸化合物，クエン酸化合
物，ほう酸化合物等）を添加する。
定する際に、体液中に含まれるアスコルビン酸が測定値
へ与える影響を少なくし、高濃度のアスコルビン酸存在
下でも確実な測定を行うこと。 【構成】 通常使用されるアスコルビン酸酸化剤（ヨウ
素酸塩、過酸化ハロゲン、Ｃｕ２＋，Ｆｅ３＋など）に
加えて、補助剤として水素結合におけるプロトン受容基
を２個以上有する化合物（リン酸化合物，クエン酸化合
物，ほう酸化合物等）を添加する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、酸化還元反応（以下、
レドックス反応と呼称する場合もある）を利用して体液
中の物質を測定する際に、体液中に含まれるアスコルビ
ン酸（以下、ＡｓＡと略する）が測定値に与える影響を
少なくする方法と、それに用いる組成物に関する。
レドックス反応と呼称する場合もある）を利用して体液
中の物質を測定する際に、体液中に含まれるアスコルビ
ン酸（以下、ＡｓＡと略する）が測定値に与える影響を
少なくする方法と、それに用いる組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】ＡｓＡは、食物中に天然に存在するビタ
ミンであり、人体にとって必要不可欠のものであるが、
人の体内では生合成されないため、野菜や果物から摂取
している。
ミンであり、人体にとって必要不可欠のものであるが、
人の体内では生合成されないため、野菜や果物から摂取
している。
【０００３】ＡｓＡが欠乏すると壊血病になるために、
それを予防するために、一日に５０〜６０ｍｇ摂取する
ことが望ましいとされている。しかし、今日の健康ブー
ムによる大量摂取や、抗生物質・風邪薬などの医薬品中
に処方されたり、ＡｓＡの強い還元力により食物の酸化
を防止する目的の添加物として食物に添加されることが
多く、一般の人々は、必要以上に過剰摂取しがちであ
る。
それを予防するために、一日に５０〜６０ｍｇ摂取する
ことが望ましいとされている。しかし、今日の健康ブー
ムによる大量摂取や、抗生物質・風邪薬などの医薬品中
に処方されたり、ＡｓＡの強い還元力により食物の酸化
を防止する目的の添加物として食物に添加されることが
多く、一般の人々は、必要以上に過剰摂取しがちであ
る。
【０００４】ＡｓＡの過剰摂取に対しては、人体には無
害であるが、摂取した分だけ血液や尿中のＡｓＡ濃度が
高まるため、レドックス反応を利用する体外診断薬によ
る測定に対して妨害要因となり、結果的に誤判定とな
る。特に、人体にとって不必要な余剰分は尿中へ排泄さ
れるため、尿中成分を測定する際には尿中のＡｓＡには
注意を要する。
害であるが、摂取した分だけ血液や尿中のＡｓＡ濃度が
高まるため、レドックス反応を利用する体外診断薬によ
る測定に対して妨害要因となり、結果的に誤判定とな
る。特に、人体にとって不必要な余剰分は尿中へ排泄さ
れるため、尿中成分を測定する際には尿中のＡｓＡには
注意を要する。
【０００５】尿や血液などを測定する試験系において、
ＡｓＡによる反応妨害を除去するための各種の方法が数
多く報告されている。それらのほとんどは、目的物質の
反応が進む以前にＡｓＡを酸化することによりデヒドロ
アスコルビン酸に変化させてＡｓＡの還元力を低下させ
るものである。
ＡｓＡによる反応妨害を除去するための各種の方法が数
多く報告されている。それらのほとんどは、目的物質の
反応が進む以前にＡｓＡを酸化することによりデヒドロ
アスコルビン酸に変化させてＡｓＡの還元力を低下させ
るものである。
【０００６】例えば、ダニンガー（Ｄａｎｎｉｎｇｅ
ｒ）らが報告したＡｓＡ酸化酵素によるＡｓＡの除去が
ある（特公昭５６−３９１９８）。しかし、この方法
は、ＡｓＡ酸化酵素の安定性，温度影響，高濃度のＡｓ
Ａ試料対策に対しては問題がある。この他、鉄，コバル
ト，セレン，銅，水銀，ニッケル等の有機錯体などによ
りＡｓＡを酸化させるものが報告されている（特公平１
−４１２２３、特公昭６３−６７１３９、特公昭６３−
３９８７１）。しかしこれらも、高濃度にＡｓＡを含有
する試料に対しては効果が薄い。
ｒ）らが報告したＡｓＡ酸化酵素によるＡｓＡの除去が
ある（特公昭５６−３９１９８）。しかし、この方法
は、ＡｓＡ酸化酵素の安定性，温度影響，高濃度のＡｓ
Ａ試料対策に対しては問題がある。この他、鉄，コバル
ト，セレン，銅，水銀，ニッケル等の有機錯体などによ
りＡｓＡを酸化させるものが報告されている（特公平１
−４１２２３、特公昭６３−６７１３９、特公昭６３−
３９８７１）。しかしこれらも、高濃度にＡｓＡを含有
する試料に対しては効果が薄い。
【０００７】さらに、ヨウ素酸塩などの過酸化物による
方法は、ケーファー（Ｋｏｅｖｅｒ）らによって報告さ
れている（特公平２−４８６１）。これは比較的効果は
あるものの、やはり高濃度にＡｓＡを含有する試料に対
しては効果が不十分である。
方法は、ケーファー（Ｋｏｅｖｅｒ）らによって報告さ
れている（特公平２−４８６１）。これは比較的効果は
あるものの、やはり高濃度にＡｓＡを含有する試料に対
しては効果が不十分である。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、Ａｓ
Ａの影響を回避するための従来の方法である『ＡｓＡを
酸化させて除去する方法』の効果を向上させることであ
る。それに伴って、従来のままでは十分な効果を得られ
ない高濃度ＡｓＡに対しても、その効果を上げることに
より測定対象物を満足に測定することもまた、本発明の
目的である。
Ａの影響を回避するための従来の方法である『ＡｓＡを
酸化させて除去する方法』の効果を向上させることであ
る。それに伴って、従来のままでは十分な効果を得られ
ない高濃度ＡｓＡに対しても、その効果を上げることに
より測定対象物を満足に測定することもまた、本発明の
目的である。
【０００９】
【課題を解決するための手段】上記課題は、レドックス
反応を利用した体液中の成分測定において、試料中のＡ
ｓＡの影響を回避するために通常使用されるＡｓＡ酸化
剤（ヨウ素酸塩、過酸化ハロゲン、Ｃｕ２＋，Ｆｅ３＋
など）の補助剤として、水素結合におけるプロトン受容
基を２個以上有する化合物を添加すれば解決できる。
反応を利用した体液中の成分測定において、試料中のＡ
ｓＡの影響を回避するために通常使用されるＡｓＡ酸化
剤（ヨウ素酸塩、過酸化ハロゲン、Ｃｕ２＋，Ｆｅ３＋
など）の補助剤として、水素結合におけるプロトン受容
基を２個以上有する化合物を添加すれば解決できる。
【００１０】すなわち本発明は、ＡｓＡ酸化剤の効果を
向上させるための補助剤と、その補助剤を添加すること
を特徴とするＡｓＡ影響回避の方法である。
向上させるための補助剤と、その補助剤を添加すること
を特徴とするＡｓＡ影響回避の方法である。
【００１１】それらの補助剤となる物質（以下ＡｓＡ耐
性補助剤と呼称することもある）は、リン酸化合物，ク
エン酸化合物，ほう酸化合物のような、水素結合におけ
るプロトン受容基を２個以上もつ物質である。その水素
結合におけるプロトン受容基の好ましい例は、水酸基
（−ＯＨ）か又はカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）である。
性補助剤と呼称することもある）は、リン酸化合物，ク
エン酸化合物，ほう酸化合物のような、水素結合におけ
るプロトン受容基を２個以上もつ物質である。その水素
結合におけるプロトン受容基の好ましい例は、水酸基
（−ＯＨ）か又はカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）である。
【００１２】これら補助剤は、ＡｓＡ影響を回避させる
ために単独で添加しても、ＡｓＡを回避する効果は得ら
れない。しかし、本発明者らは、ＡｓＡを酸化させるに
適当な酸化還元電位をもつヨウ素酸のようなＡｓＡ対策
用の酸化剤中へこれらを適当量添加することにより、効
果を上げることを発見した。
ために単独で添加しても、ＡｓＡを回避する効果は得ら
れない。しかし、本発明者らは、ＡｓＡを酸化させるに
適当な酸化還元電位をもつヨウ素酸のようなＡｓＡ対策
用の酸化剤中へこれらを適当量添加することにより、効
果を上げることを発見した。
【００１３】つまり、グルコース，潜血，コレステロー
ル，トリグリセライド，トランスアミナーゼ，尿酸，乳
酸脱水素酵素，クレアチンホスホキナーゼ等を定量する
際に、測定の誤差を与えやすいＡｓＡの影響を少なくす
ることができる。本発明は、低濃度・中濃度のＡｓＡの
影響は言うに及ばず、非常に高濃度（一般的には、１０
０ｍｇ／ｄｌ以上とされている）のＡｓＡにも影響を受
けない。
ル，トリグリセライド，トランスアミナーゼ，尿酸，乳
酸脱水素酵素，クレアチンホスホキナーゼ等を定量する
際に、測定の誤差を与えやすいＡｓＡの影響を少なくす
ることができる。本発明は、低濃度・中濃度のＡｓＡの
影響は言うに及ばず、非常に高濃度（一般的には、１０
０ｍｇ／ｄｌ以上とされている）のＡｓＡにも影響を受
けない。
【００１４】これらの効果の理由について、原因は明確
にされてはいないものの、次のような作用が考えられ
る。
にされてはいないものの、次のような作用が考えられ
る。
【００１５】試料測定においては、脱酸素を目的に、Ａ
ｓＡの還元力と発色剤（たとえばクロモーゲン）との反
応が競合的に進む。ＡｓＡの酸化は一般的に発色剤の酸
化より速いために、発色剤の発色阻害として試験系に出
現する。よって、ＡｓＡの酸化よりも酸化反応の速い発
色剤を使うことがひとつの方策だが、ＡｓＡほど酸化速
度の速い発色剤は少ない上に、目標とする耐性も得られ
なかった。
ｓＡの還元力と発色剤（たとえばクロモーゲン）との反
応が競合的に進む。ＡｓＡの酸化は一般的に発色剤の酸
化より速いために、発色剤の発色阻害として試験系に出
現する。よって、ＡｓＡの酸化よりも酸化反応の速い発
色剤を使うことがひとつの方策だが、ＡｓＡほど酸化速
度の速い発色剤は少ない上に、目標とする耐性も得られ
なかった。
【００１６】ＡｓＡは水に溶かす際、３位のＯＨ基のＨ
＋がはずれて水溶液となり、水溶液が酸性を示すことが
知られている。このとき、２位のＯＨ基からはＨ＋を放
出しない。一方、還元作用に関与する原因は、２位のＨ
＋放出による（図３を参照のこと）（ＦＯＯＤＳ ＆
ＦＯＯＤ ＩＮＧＲＥＤＩＥＮＴＳ ＪＯＵＲＮＡＬＮ
ｏ．１５８−１９９３，３０−４１）。ここで、本発明
の補助剤となる物質の種類の検討を行った際、種類によ
りＡｓＡの影響度合いの変わるものがあった。たとえば
リン酸化合物を添加した場合、ＡｓＡの影響度合が大き
く減少することを見い出した。本発明は、その発見をさ
らに追求して完成されたものである。
＋がはずれて水溶液となり、水溶液が酸性を示すことが
知られている。このとき、２位のＯＨ基からはＨ＋を放
出しない。一方、還元作用に関与する原因は、２位のＨ
＋放出による（図３を参照のこと）（ＦＯＯＤＳ ＆
ＦＯＯＤ ＩＮＧＲＥＤＩＥＮＴＳ ＪＯＵＲＮＡＬＮ
ｏ．１５８−１９９３，３０−４１）。ここで、本発明
の補助剤となる物質の種類の検討を行った際、種類によ
りＡｓＡの影響度合いの変わるものがあった。たとえば
リン酸化合物を添加した場合、ＡｓＡの影響度合が大き
く減少することを見い出した。本発明は、その発見をさ
らに追求して完成されたものである。
【００１７】原因としては、リン酸化合物のようにＯＨ
基を二個以上持っており、構造的に立体障害もなく、そ
の二個のＯＨ基間の間隔と、ＡｓＡの２，３位のＯＨ基
間の間隔が近い物質が、水溶液中でＡｓＡの２，３位の
ＯＨ基の間に弱い水素結合をするためと考えられた。リ
ン酸化合物であれば、Ｐのまわりの二つの「＝０」がプ
ロトン受容基となる。水素結合については、水の沸点が
分子量に比べ異常に高いことで示されるように、Ｈ−Ｏ
の分子間や、Ｈ−Ｎの分子間や，−Ｏ−Ｈとπ電子間で
起こる弱い結合である。
基を二個以上持っており、構造的に立体障害もなく、そ
の二個のＯＨ基間の間隔と、ＡｓＡの２，３位のＯＨ基
間の間隔が近い物質が、水溶液中でＡｓＡの２，３位の
ＯＨ基の間に弱い水素結合をするためと考えられた。リ
ン酸化合物であれば、Ｐのまわりの二つの「＝０」がプ
ロトン受容基となる。水素結合については、水の沸点が
分子量に比べ異常に高いことで示されるように、Ｈ−Ｏ
の分子間や、Ｈ−Ｎの分子間や，−Ｏ−Ｈとπ電子間で
起こる弱い結合である。
【００１８】本発明は、上記発見に係わる物質を、Ａｓ
Ａ耐性補助剤へ応用したものである。つまり、試薬系に
ＡｓＡ耐性補助剤として、特定の緩衝液を加えておけ
ば、ＡｓＡの混入した試料が入ってきた際、まずＡｓＡ
と耐性補助剤が弱い水素結合をし、そのために本来Ａｓ
Ａがもっている還元作用が一時的に遅れ、この間に目的
とする主なる反応が進む。
Ａ耐性補助剤へ応用したものである。つまり、試薬系に
ＡｓＡ耐性補助剤として、特定の緩衝液を加えておけ
ば、ＡｓＡの混入した試料が入ってきた際、まずＡｓＡ
と耐性補助剤が弱い水素結合をし、そのために本来Ａｓ
Ａがもっている還元作用が一時的に遅れ、この間に目的
とする主なる反応が進む。
【００１９】なお、耐性補助剤として例をあげたもの
は、殆どが溶液状態で強い緩衝能を有していることか
ら、緩衝剤の形として反応系へ添加・導入すればよい。
しかし、これら緩衝剤は多量に試薬中に処方すると、反
応速度を遅くしてしまうことから得策ではない。そこ
で、緩衝剤としては、少量で緩衝作用の強いＧｏｏｄ’
ｓ緩衝液を用いることが望ましい。
は、殆どが溶液状態で強い緩衝能を有していることか
ら、緩衝剤の形として反応系へ添加・導入すればよい。
しかし、これら緩衝剤は多量に試薬中に処方すると、反
応速度を遅くしてしまうことから得策ではない。そこ
で、緩衝剤としては、少量で緩衝作用の強いＧｏｏｄ’
ｓ緩衝液を用いることが望ましい。
【００２０】本発明は、液系でも乾式でも作動する。グ
ルコース測定を例に挙げれば、グルコースオキシダーゼ
とペルオキシダーゼが関連する反応系では、溶液中で同
様の方法を試みても、効果は一応あるものの、顕著な効
果は現れない。これは、上記反応系では、反応途中に酸
素が必要な過程があるためである。つまり溶液状態では
酸素供給源が少ないために目的の反応（水素結合）が微
妙に遅くなり、結果的にＡｓＡと脱酸素競合反応に打ち
勝つことができないことによる。よって、反応系に酸素
が必要な系に限っては、本発明の方法及び組成物は、酸
素が十分に供給される乾式試薬（いわゆるドライアッセ
イ）で特に有効である。もちろん、反応系に酸素を必要
としない反応、或いはごく少量の酸素でよい反応（グル
コース測定を例にとれば、ＡＴＰとグルコース６リン酸
デヒドロゲナーゼを使用する反応系）については、液系
でも乾式でも問わない。
ルコース測定を例に挙げれば、グルコースオキシダーゼ
とペルオキシダーゼが関連する反応系では、溶液中で同
様の方法を試みても、効果は一応あるものの、顕著な効
果は現れない。これは、上記反応系では、反応途中に酸
素が必要な過程があるためである。つまり溶液状態では
酸素供給源が少ないために目的の反応（水素結合）が微
妙に遅くなり、結果的にＡｓＡと脱酸素競合反応に打ち
勝つことができないことによる。よって、反応系に酸素
が必要な系に限っては、本発明の方法及び組成物は、酸
素が十分に供給される乾式試薬（いわゆるドライアッセ
イ）で特に有効である。もちろん、反応系に酸素を必要
としない反応、或いはごく少量の酸素でよい反応（グル
コース測定を例にとれば、ＡＴＰとグルコース６リン酸
デヒドロゲナーゼを使用する反応系）については、液系
でも乾式でも問わない。
【００２１】
【実施例】以下に、本発明による組成物を乾式試薬へ加
工した際の実験例を示すが、本発明はこれに限定される
ものではない。
工した際の実験例を示すが、本発明はこれに限定される
ものではない。
【００２２】尿中グルコース量を測定する試験系（グル
コースオキシダーゼとペルオキシダーゼが関連）を組
み、以下のような処方で試薬を調製し濾紙に含浸させて
試験片とし、評価した。評価は、比較例にＡｓＡ耐性補
助剤を添加しないものを作製し、実施例１〜３において
３種のＡｓＡ耐性補助剤を添加したものを作製し、比較
評価した。図１と２に比較のグラフを示す。
コースオキシダーゼとペルオキシダーゼが関連）を組
み、以下のような処方で試薬を調製し濾紙に含浸させて
試験片とし、評価した。評価は、比較例にＡｓＡ耐性補
助剤を添加しないものを作製し、実施例１〜３において
３種のＡｓＡ耐性補助剤を添加したものを作製し、比較
評価した。図１と２に比較のグラフを示す。
【００２３】
【比較例】 ●ＡｓＡ耐性補助剤を添加しない場合 （試薬Ａの処方） ０．２Ｍ−ＡＤＡ（※），ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ６．０） １００ｍｌ ヨウ素酸ナトリウム ３００ｍｇ １−ナフトール−３，６−ジ スルホン酸２ナトリウム ２．０ｇ ペルオキシダーゼ（ＰＯＤと略） ４万 Ｕ グルコースオキシダーゼ（ＧＯＤと略） １６万 Ｕ ※注：Ｎ−（２−Ａｃｅｔａｍｉｄｏ）−２−ａｍｉｎｏｅｔｈａｎｅ ｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄの略称であり、Ｇｏｏｄ’Ｓ緩衝液の一種。以下同 じ。 （試薬Ｂの処方） エタノール １００ｍｌ ４−アミノアンチピリン ２．０ｇ 酢酸タリウム（※） １．０ｇ ※注：酢酸タリウムは、ＡｓＡを処理した際に発生するＩ２対策として 添加する。 ●作製方法 ｉ）原反作製 まず、試薬Ａを３０×２０ｃｍワットマン濾紙３ＭＭＣ
ｈｒに含浸させた後、すばやく５０℃の乾燥炉（相対湿
度；ＲＨ５％）に入れ、微風で１５分間乾燥させた。次
に、乾燥の終わった濾紙に試薬Ｂを含浸させ、さらに同
条件で１０分間乾燥させた。 ｉｉ）試験片への加工 乾燥の終わった上記原反の片面に両面テープを貼り付
け、５ｍｍ幅に裁断し５ｍｍ幅の短冊を得た。これを、
厚さ１８８μｍの白色ＰＥＴフィルムの先端に貼り付
け、さらに、５ｍｍ幅に裁断した。こうして５ｍｍ×７
０ｍｍのＰＥＴフィルムの先端に５ｍｍ×５ｍｍの試験
片がついたものを作製した。 ｉｉｉ）測定 グルコース濃度が１００，５００ｍｇ／ｄｌの水溶液溶
液に、ＡｓＡを０，２０，５０，１００，２００ｍｇ／
ｄｌの各濃度となるように添加したものを用意し、作製
した試験片へ８μｌ点着後の発色を測定した。測定は、
色差計Σ９０（日本電色製）を用い、測定は、点着後１
分後の反射率を、４００ｎｍから７００ｎｍの波長まで
求めた。比較するデータは、５６０ｎｍにおける波長を
用いて比較した。 ｉｖ）測定結果；表１に示す。（単位；反射率（％））
ｈｒに含浸させた後、すばやく５０℃の乾燥炉（相対湿
度；ＲＨ５％）に入れ、微風で１５分間乾燥させた。次
に、乾燥の終わった濾紙に試薬Ｂを含浸させ、さらに同
条件で１０分間乾燥させた。 ｉｉ）試験片への加工 乾燥の終わった上記原反の片面に両面テープを貼り付
け、５ｍｍ幅に裁断し５ｍｍ幅の短冊を得た。これを、
厚さ１８８μｍの白色ＰＥＴフィルムの先端に貼り付
け、さらに、５ｍｍ幅に裁断した。こうして５ｍｍ×７
０ｍｍのＰＥＴフィルムの先端に５ｍｍ×５ｍｍの試験
片がついたものを作製した。 ｉｉｉ）測定 グルコース濃度が１００，５００ｍｇ／ｄｌの水溶液溶
液に、ＡｓＡを０，２０，５０，１００，２００ｍｇ／
ｄｌの各濃度となるように添加したものを用意し、作製
した試験片へ８μｌ点着後の発色を測定した。測定は、
色差計Σ９０（日本電色製）を用い、測定は、点着後１
分後の反射率を、４００ｎｍから７００ｎｍの波長まで
求めた。比較するデータは、５６０ｎｍにおける波長を
用いて比較した。 ｉｖ）測定結果；表１に示す。（単位；反射率（％））
【表１】
【００２４】
【実施例１】 ●ＡｓＡ耐性補助剤を添加した場合（リン酸化合物を使用） （試薬Ａの処方） ０．２Ｍ−ＡＤＡ，０．１Ｍ−リン酸塩，ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ６．０） １００ｍｌ ヨウ素酸ナトリウム ３００ｍｇ １−ナフトール−３，６−ジ スルホン酸２ナトリウム ２．０ｇ ＰＯＤ ４万 Ｕ ＧＯＤ １６万 Ｕ （試薬Ｂの処方は、比較例と同じ） ｉ）原反作製 ； 比較例と同じ ｉｉ）試験片への加工 ； 比較例と同じ ｉｉｉ）測定 ； 比較例と同じ ｉｖ）測定結果；表２に示す。（単位；反射率（％））
【表２】
【００２５】
【実施例２】 ●ＡｓＡ耐性補助剤を添加した場合（クエン酸化合物を使用） （試薬Ａの処方） ０．２Ｍ−ＡＤＡ，０．１Ｍ−クエン酸，ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ６．０） １００ｍｌ ヨウ素酸ナトリウム ３００ｍｇ １−ナフトール−３，６−ジ スルホン酸２ナトリウム ２．０ｇ ＰＯＤ ４万 Ｕ ＧＯＤ １６万 Ｕ （試薬Ｂの処方は、比較例１と同じ） ｉ）原反作製 ； 比較例と同じ ｉｉ）試験片への加工 ； 比較例と同じ ｉｉｉ）測定 ； 比較例と同じ ｉｖ）測定結果；表３に示す。（単位；反射率（％））
【表３】
【００２６】
【実施例３】 ●ＡｓＡ耐性補助剤を添加した場合（ほう酸化合物を使用） （試薬Ａの処方） ０．２Ｍ−ＡＤＡ，０．１Ｍ−ほう酸，ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ６．０） １００ｍｌ ヨウ素酸ナトリウム ３００ｍｇ １−ナフトール−３，６−ジスルホン酸２ナトリウム ２．０ｇ ＰＯＤ ４万 Ｕ ＧＯＤ １６万 Ｕ （試薬Ｂの処方は、比較例と同じ） ｉ）原反作製 ； 比較例と同じ ｉｉ）試験片への加工 ； 比較例と同じ ｉｉｉ）測定 ； 比較例と同じ ｉｖ）測定結果；表４に示す。（単位；反射率（％））
【表４】
【００２７】以上の実施例の結果では、各グルコース濃
度（１００，５００ｍｇ／ｄｌ）においてＡｓＡ濃度が
変化した際の反射率の変化を示している。反射率が低い
ほど、発色剤が正常に発色することを示す。ＡｓＡの影
響を受けない理想的な状態では、ＡｓＡの濃度が高くな
っても反射率の変化はない。しかし、実際にはＡｓＡの
還元力により、濃度が高くなると試験片の反射率が順次
高くなって現れる。比較例においては本発明による処理
を施していないため、グルコース濃度が１００ｍｇ／ｄ
ｌの溶液でＡｓＡ濃度が１００ｍｇ／ｄｌ以上になると
発色をしないことが判る。一方実施例１〜３において
は、耐性補助剤を添加しているため、グルコース濃度１
００ｍｇ／ｄｌの溶液でＡｓＡ濃度が２００ｍｇ／ｄｌ
以上でも反射率が低く、発色剤が正常に発色しているこ
とが判る。図１，２に比較例と実施例１〜３までを同時
に示すが、比較例に比べて実施例１〜３の耐性補助剤の
追加効果が現れていることが判る。
度（１００，５００ｍｇ／ｄｌ）においてＡｓＡ濃度が
変化した際の反射率の変化を示している。反射率が低い
ほど、発色剤が正常に発色することを示す。ＡｓＡの影
響を受けない理想的な状態では、ＡｓＡの濃度が高くな
っても反射率の変化はない。しかし、実際にはＡｓＡの
還元力により、濃度が高くなると試験片の反射率が順次
高くなって現れる。比較例においては本発明による処理
を施していないため、グルコース濃度が１００ｍｇ／ｄ
ｌの溶液でＡｓＡ濃度が１００ｍｇ／ｄｌ以上になると
発色をしないことが判る。一方実施例１〜３において
は、耐性補助剤を添加しているため、グルコース濃度１
００ｍｇ／ｄｌの溶液でＡｓＡ濃度が２００ｍｇ／ｄｌ
以上でも反射率が低く、発色剤が正常に発色しているこ
とが判る。図１，２に比較例と実施例１〜３までを同時
に示すが、比較例に比べて実施例１〜３の耐性補助剤の
追加効果が現れていることが判る。
【００２８】
【発明の効果】本発明の補助剤を用いると、従来の酸化
剤を用いてＡｓＡの妨害を回避する方法の効果を上げる
ことができ、酸化剤のみでは十分に除去できなかった高
濃度ＡｓＡの妨害に対しても、確実な測定を行うことが
できる。
剤を用いてＡｓＡの妨害を回避する方法の効果を上げる
ことができ、酸化剤のみでは十分に除去できなかった高
濃度ＡｓＡの妨害に対しても、確実な測定を行うことが
できる。
【００２９】
図１は、比較例と実施例１〜３において、グルコース濃
度１００ｍｇ／ｄｌの溶液に関してアスコルビン酸の影
響を示すグラフである。図２は、比較例と実施例１〜３
において、グルコース濃度５００ｍｇ／ｄｌの溶液に関
してアスコルビン酸の影響を示すグラフである。図３
は、アスコルビン酸がデヒドロアスコルビン酸に変化す
る際の模式図である。
度１００ｍｇ／ｄｌの溶液に関してアスコルビン酸の影
響を示すグラフである。図２は、比較例と実施例１〜３
において、グルコース濃度５００ｍｇ／ｄｌの溶液に関
してアスコルビン酸の影響を示すグラフである。図３
は、アスコルビン酸がデヒドロアスコルビン酸に変化す
る際の模式図である。
Claims (6)
- 【請求項１】 酸化還元反応を利用した体液中の成分測
定において、試料中のアスコルビン酸の影響を回避する
ために通常使用されるアスコルビン酸酸化剤（ヨウ素酸
塩、過酸化ハロゲン、Ｃｕ２＋，Ｆｅ３＋など）の補助
剤として、水素結合におけるプロトン受容基を２個以上
有する化合物を添加することを特徴とする、アスコルビ
ン酸影響回避の方法。 - 【請求項２】 前記補助剤において、水素結合における
プロトン受容基が水酸基か又はカルボニル基である、特
許請求の範囲第１項に記載の方法。 - 【請求項３】 前記補助剤が、リン酸化合物，ほう酸化
合物，クエン酸化合物，リンゴ酸化合物，酒石酸化合
物，シュウ酸化合物から選ばれる１種または２種以上の
組み合わせよりなる、特許請求の範囲第１又は２項に記
載の方法。 - 【請求項４】 酸化還元反応を利用した体液中の成分測
定において、試料中のＡｓＡの影響を回避するために通
常使用されるアスコルビン酸酸化剤（ヨウ素酸塩、過酸
化ハロゲン、Ｃｕ２＋，Ｆｅ３＋など）の補助剤であっ
て、水素結合におけるプロトン受容基を２個以上有する
化合物であることを特徴とする、アスコルビン酸影響回
避のための組成物。 - 【請求項５】 水素結合におけるプロトン受容基が水酸
基か又はカルボニル基である、特許請求の範囲第４項に
記載の組成物。 - 【請求項６】 前記補助剤が、リン酸化合物，ほう酸化
合物，クエン酸化合物，リンゴ酸化合物，酒石酸化合
物，シュウ酸化合物カラ選ばれる１種または２種以上の
組み合わせよりなる、特許請求の範囲第４又は５項に記
載の組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10990095A JP3574937B2 (ja) | 1995-03-30 | 1995-03-30 | アスコルビン酸影響回避の方法及び組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10990095A JP3574937B2 (ja) | 1995-03-30 | 1995-03-30 | アスコルビン酸影響回避の方法及び組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08271504A true JPH08271504A (ja) | 1996-10-18 |
| JP3574937B2 JP3574937B2 (ja) | 2004-10-06 |
Family
ID=14522013
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10990095A Expired - Lifetime JP3574937B2 (ja) | 1995-03-30 | 1995-03-30 | アスコルビン酸影響回避の方法及び組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3574937B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013118743A1 (ja) | 2012-02-09 | 2013-08-15 | 協和メデックス株式会社 | アスコルビン酸の影響抑制方法 |
-
1995
- 1995-03-30 JP JP10990095A patent/JP3574937B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013118743A1 (ja) | 2012-02-09 | 2013-08-15 | 協和メデックス株式会社 | アスコルビン酸の影響抑制方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3574937B2 (ja) | 2004-10-06 |
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