JPH08219994A

JPH08219994A - 蛍光光学機器用模擬サンプル

Info

Publication number: JPH08219994A
Application number: JP7052053A
Authority: JP
Inventors: Yoshitaka Ohashi; 祥高大橋
Original assignee: Nikon Corp
Current assignee: Nikon Corp
Priority date: 1995-02-17
Filing date: 1995-02-17
Publication date: 1996-08-30

Abstract

(57)【要約】【目的】保存が容易で褪色性がなく、且つ安全で廉価
な蛍光光学機器用模擬サンプルを提供する。【構成】無機顔料（蓄光顔料）含有膜３がスライドガ
ラス１とカバーガラス２との間に挿設されている。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、蛍光顕微鏡等の蛍光光
学機器に使用される模擬サンプルに関し、光学系の調整
等に用いて好適なものである。

【０００２】

【従来技術】蛍光顕微鏡や蛍光測定装置等の蛍光光学機
器では、蛍光観察あるいは蛍光測定を開始するに先立つ
検鏡準備作業として、サンプルのフォーカス合わせ、視
野絞りのフォーカス合わせやセンタリング、同焦点合わ
せや照明ムラをなくすための光学系の調整が不可欠であ
る。こうした光学系の調整等に、実際に観察または測定
を行う対象サンプルを使用すると、対象サンプルそのも
のを損傷させてしまうことがあった。そこで対象サンプ
ルと同じものを別に調整サンプルとして用意するか、あ
るいは対象サンプルの一部を調整用に使用することが行
われていた。しかしこのような調整のサンプルを使用し
ても、サンプルからの蛍光が調整中に褪色して弱くな
り、検鏡準備作業がはかどらないという問題があった。
特に蛍光測光を行う場合では、サンプルの所定の蛍光が
最も明るくなるように顕微鏡の光学系を調整したり、Ｓ
／Ｎのよい測光データを得るためにフォトメータに代表
される測光システムのレベル調整をしたりする一連の作
業が必要であるが、調整中に時間とともに褪色により測
光値が減少して、ベストの状態に調整するのが難しく、
経験と勘に頼らざるを得ないという問題があった。

【０００３】そのために、対象サンプルと同様に紫外線
の照射により可視光を発光する模擬サンプルが調整用の
サンプルとして使用される場合がある。従来の模擬サン
プルの例としては、プレパラートやシャーレ上に蛍光ビ
ーズを滴下したものや、プレパラートやシャーレ上に蛍
光色素、例えばクマリンCoumarinを滴下したものがあ
る。また、模擬サンプルの別の例としてはウランガラス
等の蛍光性を有するガラスを用いたものがある。ウラン
ガラスは励起波長域３４０ｎｍ〜３８０ｎｍの光でよく
励起され、緑色の蛍光を発するので、特にＦｕｒａ２
（励起光３４０ｎｍ及び３８０ｎｍ、蛍光５１０ｎｍ）
を使用するときの調整に好適であった。さらに模擬サン
プルの別例として蛍光性を有するリチウム活性セリウム
ガラスを用いたものもあった。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、蛍光ビ
ーズを用いた模擬サンプルは褪色性は少ないものの、検
鏡準備作業の都度作成するのが煩わしい上、保存条件が
厳しく取扱いが面倒であるという問題があった。また、
クマリン等の蛍光色素は褪色速度が大きい上に、蒸散速
度が大きく蛍光強度が安定しないという問題があった。
また、ウランガラスも褪色性はないものの市場にはほと
んど出回っておらず、入手が困難であるという問題があ
った。さらに、リチウム活性セリウムガラスは、励起波
長域が狭く、３８０ｎｍ付近の紫外線による励起が弱い
上に、高価であるという問題があった。

【０００５】本発明は上記の問題に鑑み、取扱いが容易
で褪色性がなく、入手が容易な蛍光光学機器用模擬サン
プルを提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】上記問題点の解決の為の
本発明は、紫外線である励起光の照射により可視光を発
光する無機物質を含むことを特徴とする蛍光光学機器用
模擬サンプルである。また、本発明の模擬サンプルは、
スライドガラスとカバーガラスとの間に前記無機物質を
含有するフィルムを挿設して形成することが好ましい。
さらに、本発明の模擬サンプルは、複数のカバーガラス
と１枚のスライドガラスとの間にそれぞれ異なる特性の
前記無機物質を含有したフィルムを挿設して形成するこ
とが好ましい。さらにまた本発明の模擬サンプルは、ス
ライドガラス等の板状部材表面に前記無機物質を含むフ
ィルムを貼付して形成することが好ましい。

【０００７】

【作用】本発明で使用する無機物質には、蛍光顔料、蓄
光顔料などが含まれる。蓄光顔料とは、太陽光、電灯
光、レーザ光等の光を吸収・蓄積し、光のエネルギーを
徐々に放出して発光する顔料である。この吸収・蓄積・
発光は反復して行うことができ、光に対して安定な物質
で、例えば顕微鏡使用環境では光による損傷が少ない。
また、蓄光顔料の励起には紫外線が有効である。蓄光顔
料の一例として主成分がＺｎＳ：Ｃｕからなるものは、
太陽光の下で白色または淡黄色の粉状乃至粒状物質で、
取り扱いが容易で褪色性がなく、入手も容易である。

【０００８】

【実施例】本発明の一実施例を図１から図３により説明
する。図１に示すように、本実施例の模擬サンプルはス
ライドガラス１とカバーガラス２との間に蓄光顔料含有
フィルム３を挿設したものである。蓄光顔料含有フィル
ム３は蓄光顔料（主成分がＺｎＳ：Ｃｕ）をエポキシ系
接着剤の媒体中にほぼ半々に混入攪拌して分散させ、ス
ライドガラス１とカバーガラス２との間で固化させたも
のである。蓄光顔料含有フィルム３の厚さは０．１ｍｍ
以下で、蓄光顔料と樹脂の混合比は（１：１０〜１：
１）程度が接合強度や輝度効率の上から適当である。ま
たエポキシ系接着剤は廉価であり、スライドガラス１と
カバーガラス２とを接着する作業は極めて容易であるか
ら、模擬サンプルとして廉価に製造可能である。ここで
使用した蓄光顔料の励起光分光特性は、図２に示すよう
に、３００ｎｍ以下から４３０ｎｍまで幅広い分布を示
し、そのピークは３５０ｎｍ付近にある。例えば通常の
蛍光顕微鏡の光学系の短波長側の透過可能波長は約３４
０ｎｍであるから、調整に必要な３４０〜４００ｎｍの
紫外線励起波長領域をほぼ覆われることになる。

【０００９】また発光分光特性は、図３に示すように、
４５０ｎｍから５８０ｎｍ付近まで幅広い分布を示し、
広範囲の可視光波長域が覆われている。なお、本実施例
で使用した蓄光顔料の場合、４００ｎｍ〜４５０ｎｍの
波長域の発光がほとんどなく、４５０ｎｍ〜４８０ｎｍ
の波長域の発光も弱いが、通常はロングパスのバリアフ
ィルタを使用するので何の支障もない。このような特性
を有した模擬サンプルは、例えば蛍光色素Ｆｕｒａ２に
より標識したサンプルの観察または測定のための光学系
の調整などに有効である。すなわち、蛍光色素Ｆｕｒａ
２の励起波長のピークは３４０ｎｍ及び３８０ｎｍにあ
り、蛍光波長のピークは５１０ｎｍであるから、３４０
ｎｍまたは３８０ｎｍに設定した励起光をその模擬サン
プルに照射すると、模擬サンプルは有効に励起される。

【００１０】また、蛍光顕微鏡で使用する多くの蛍光色
素は紫外線励起波長域が３４０ｎｍ〜３８０ｎｍの範囲
にあるから、本実施例による模擬サンプルは、蛍光色素
で標識されたサンプルを測定する際の調整に有効であ
る。なお、蓄光顔料の褪色速度は、蛍光顕微鏡の調整に
要する数分乃至１０分程度の時間内では全く問題になら
ない。

【００１１】次に本発明の第２の実施例を図４により説
明する。図４に示すように、本実施例の模擬サンプルは
１枚のスライドガラス１と２枚のカバーガラス２、２ａ
との間に、異なる励起・発光特性を有した蓄光顔料含有
フィルム３、３ａをそれぞれ挿設して形成したものであ
る。このようにすると、使用可能波長域の広い模擬サン
プルが作成できる。

【００１２】次に本発明の第３の実施例を図５により説
明する。図５に示すように、本実施例の模擬サンプルは
スライドガラス１の表面に蓄光顔料含有フィルム４を貼
付したものである。なお、本実施例の模擬サンプルは、
表面硬化性の樹脂に蓄光顔料を混合した後にスライドガ
ラス表面上でフィルム状に硬化させて形成してもよい
し、予めフィルムを形成してからスライドガラス表面に
貼付してもよい。このようにすると、ノーカバーグラス
対応の模擬サンプルが作成できる。

【００１３】次に本発明の第４の実施例を図６により説
明する。図６に示すように、本実施例の模擬サンプルは
ガラスブロック５表面に蛍光体顔料含有フィルムを貼付
したものである。ここで使用した蛍光体顔料は、ストロ
ンチウム化合物を主成分とする１〜２０μｍ程度の粒状
の無機顔料であり、紫外線の照射によって蛍光を発す
る。また、蛍光体顔料は廉価であり、ウランガラスのよ
うな放射性もない。また、蛍光体顔料含有フィルム６の
厚さは０．１ｍｍ以下で、蛍光体顔料と樹脂の混合比は
（１：１０〜１：１）程度が接合強度や輝度効率の上か
ら適当である。なお、本実施例の模擬サンプルは、表面
硬化性の樹脂に蛍光体顔料を混合した後にスライドガラ
ス表面上でフィルム状に硬化させて形成してもよいし、
予めフィルムを形成してからスライドガラス表面に貼付
してもよい。このようにすると、ノーカバーグラス対応
の模擬サンプルが作成できる。

【００１４】上記のストロンチウム化合物を主成分とし
た蛍光体顔料の励起光分光特性は、図７に示すように、
３４０ｎｍ〜４００ｎｍ付近までの幅広い分布を示して
いる。また、蛍光分光特性は、４２０ｎｍ〜４９０ｎｍ
付近までと比較的狭い分布になっているが、蛍光顕微鏡
などに使用される蛍光色素の蛍光波長域とほぼ一致して
いるので実用上問題とならない。このような特性を有し
た模擬サンプルは、例えば蛍光色素Ｉｎｄｏｌにより標
識したサンプルの観察や測定をするときの光学系の調整
などに有効である。すなわち、蛍光色素Ｉｎｄｏｌの励
起波長のピークは３６０ｎｍにあり、また観察や測定に
用いられる蛍光波長は４０５ｎｍ及び４８５ｎｍである
から、３６０ｎｍに設定した励起光を模擬サンプルに照
射すると、４５０ｎｍ付近にピークを有する蛍光が発せ
られる。なお、スロトンチウム化合物でない他の蛍光体
顔料、例えば亜鉛化合物を主成分とする蛍光体顔料を用
いた模擬サンプルを使用すると緑色の蛍光を発するの
で、緑色の蛍光を発する蛍光色素で標識したサンプルの
観察や測定に好適であり、イットリウム化合物を主成分
とする蛍光体顔料を用いて形成した模擬サンプルを使用
すると赤色の蛍光を発するから、赤色の蛍光を発する蛍
光色素で標識したサンプルの観察や測定に好適である。

【００１５】本発明の第５の実施例を図９により説明す
る。図９に示すように、本実施例の模擬サンプルは１枚
のスライドガラス１と２枚のスライドガラス２、２ａと
の間に蓄光顔料含有フィルム３と蛍光体顔料含有フィル
ム７とをそれぞれ挿設して形成したものである。このよ
うにすると、使用可能波長域の広い模擬サンプルが作成
できる。なお、蛍光体顔料を図１や図５の実施例のよう
に用いることも勿論可能である。

【００１６】本発明の第６の実施例を図１０により説明
する。図１０に示すように、本実施例の模擬サンプルは
蛍光体顔料を樹脂に封入した蛍光体顔料含有ブロックで
あり、これを培養液を満たしたシャーレ９に入れて使用
する。このようにすると、倒立顕微鏡向きの模擬サンプ
ルが作成できる。なお樹脂の代わりにガラスを用いても
よい。各実施例での模擬サンプルは、蛍光顕微鏡の他、
蛍光測定装置など蛍光を使用する光学装置に一般的に使
用可能であることはいうまでもない。

【００１７】

【発明の効果】以上のように本発明によれば、取扱いが
容易で褪色性がなく、且つ安全で廉価な模擬サンプルを
得ることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の第１実施例の斜視図である。

【図２】本発明の第１実施例に係る蓄光顔料の励起分光
特性曲線図である。

【図３】本発明の第１実施例に係る蓄光顔料の発光分布
特性曲線図である。

【図４】本発明の第２実施例の斜視図である。

【図５】本発明の第３実施例の斜視図である。

【図６】本発明の第４実施例の斜視図である。

【図７】本発明の第４実施例に係る蛍光体顔料の励起分
光特性曲線図である。

【図８】本発明の第４実施例に係る蛍光体顔料の発光分
布特性曲線図である。

【図９】本発明の第５実施例の斜視図である。

【図１０】本発明の第６実施例の断面図である。

【符号の説明】

１・・・・スライドガラス２、２ａ・・・・カバーガラス３、３ａ、４・・・・蓄光顔料含有フィルム５・・・・ガラスブロック６、７・・・・蛍光体顔料含有フィルム９・・・・シャーレ８・・・・蛍光体顔料含有ブロック

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】紫外線である励起光の照射により可視光を
発光する無機物質を含むことを特徴とする蛍光光学機器
用模擬サンプル。
【請求項２】スライドガラスとカバーガラスとの間に前
記無機物質を含有するフィルムを挿設して形成したこと
を特徴とする請求項１に記載の蛍光光学機器用模擬サン
プル。
【請求項３】複数のカバーガラスと１枚のスライドガラ
スとの間にそれぞれ異なる特性の前記無機物質を含有し
たフィルムを挿設して形成したことを特徴とする請求項
１に記載の蛍光光学機器用模擬サンプル。
【請求項４】板状部材表面に前記無機物質を含有するフ
ィルムを貼付して形成したことを特徴とする請求項１に
記載の蛍光光学機器用模擬サンプル。
【請求項５】前記板状部材はスライドガラスであること
を特徴とする請求項４に記載の蛍光光学機器用模擬サン
プル。