JPH08169841A - 血小板増多促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 血小板を効果的に増多することのできる血小
板増多促進剤を提供する。 【構成】 血小板を効果的に増多することのできる有効
成分としてインターフェロン−γおよび血小板増多作用
を有する生理活性物質を含有する血小板増多促進剤を構
成とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、血小板増多促進剤、と
りわけ、有効成分としてインターフェロン−γ（以下、
「ＩＦＮ−γ」と略称する。）および血小板増多作用を
有する生理活性物質（以下、単に「生理活性物質」と略
称することもある。）を含有するヒトを含む哺乳動物の
血小板増多促進剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】血小板は哺乳動物の血液中に存在し、例
えばヒトの場合、直径２〜３μｍの無核の細胞で、血液
１ｍｍ³当たり約１５万〜４０万個存在し、巨核球前駆
細胞が増殖して巨核球に分化し、成熟した後、その胞体
から放出される。その寿命は約１１日である。この血小
板は、傷害された血管内皮細胞に接触し、そこで粘着、
凝集反応を起こし、止血作用を発揮する。

【０００３】正常なヒトの血液中に存在する血小板の数
は、前記範囲に保たれているが、骨髄に於ける血小板産
生能の低下、末梢での血小板の利用ないし崩壊の亢進に
より、また、血小板の分布異常などによってその数が減
少することがある。血小板が減少する原因としては、骨
髄異形成症候群、白血病、骨髄への癌転移、骨髄腫、ホ
ジキン氏病、リンパ肉腫、骨髄繊維病、骨髄硬化症、肥
大性骨関節症、大理石骨病などの骨髄を直接傷害する疾
患、更にバンチ症候群、細網肉腫、梅毒および脾腫をと
もなう悪性腫瘍などの脾臓を傷害する疾患などが挙げら
れる。木村郁郎と高橋功が『トキシコロジー・フォーラ
ム』、第１１巻、第２号、第１１２〜１２１頁（１９８
８年）に於いて報告しているように、悪性腫瘍の治療と
して用いられる放射線療法や化学療法により骨髄障害が
誘起され、血小板の減少が引き起こされることを報告し
ている。

【０００４】血小板の減少は、生体の止血機能低下を意
味し、皮膚の点状出血、鼻血、口腔粘膜出血、尿路出血
あるいは性器出血などを誘起し、時として、消化管内出
血や頭蓋内出血などを誘起する。また、血小板の減少
は、その原因となる疾患や悪性腫瘍の治療および予後に
も悪影響を与える。

【０００５】従来から、血小板減少の治療方法として成
分輸血や自己または非自己骨髄移植などが行われてきた
が、成分輸血は、血小板の寿命が他の血液成分に比べて
短いこと、また自己または非自己骨髄移植は、移植され
た骨髄の定着が容易でないことから何れも根本的な治療
方法とは言い難い。

【０００６】近年、血小板数変動と関連があるとされる
巨核球の分化・成熟に、インターロイキン−３（以下、
「ＩＬ−３」と略称する。）、インターロイキン−６
（以下、「ＩＬ−６」と略称する。）、顆粒球コロニー
刺激因子（以下、「Ｇ−ＣＳＦ」と略称する。）、顆粒
球貪食細胞コロニー刺激因子（以下、「ＧＭ−ＣＳＦ」
と略称する。）、幹細胞増殖因子（以下、「ＳＣＦ」と
略称する。）、およびエリスロポイエチン（以下、「Ｅ
ＰＯ」と略称する。）などの生理活性物質が関与してい
ることがイン・ビトロの系で確認されている（ロナルド
・ホフマン、『ブラッド』、第７４巻、第４号、第１，
１９６〜１，２１２頁（１９８９年）；エリック・エム
・マズール、『エクスペリメンタル・ヘマトロジー』、
第１５巻、第３４０〜３５０頁（１９８７年）；および
ハバ・アブラハム、『ステム・セルズ』、第１１巻、第
４９９〜５１０頁（１９９３年））。

【０００７】ある種の生理活性物質を哺乳動物に投与し
て、直接的に巨核球を増殖刺激したり、分化誘導刺激し
て、血小板産生能を高める試みがなされてはいるが、満
足な成果を上げるには至っていない。それは、使用した
生理活性物質の増殖、分化誘導刺激能が低かったり、ま
た、イン・ビトロでの巨核球の増殖あるいは分化誘導
が、イン・ビボでの血小板増多と必ずしも結びつかなか
ったからである。

【０００８】一般に、生理活性物質は、巨核球の増殖刺
激作用や分化誘導刺激作用と共に、血液細胞前駆体の増
殖作用、つまり、好中球、リンパ球、赤血球および脾臓
中の肥満細胞増殖作用を有していることが知られ（オガ
ワ マキオ、『ブラッド』、第８１巻、第１１号、第
２，８４４〜２，８５３頁（１９９３年））、巨核球特
異的であるとは言えない。例えば、ＩＬ−６は、血液細
胞全般の成熟を誘導し（キシモト タダミツ、『ブラッ
ド』、第７４巻、第１号、第１〜１０頁（１９８９
年））、ＥＰＯは赤血球の成熟を誘導することが知られ
ている（エル・カンズ等、『アメリカン・ジャーナル・
オブ・クリニカル・オンコロジー』、第１４巻、サプリ
メント１、第Ｓ２７〜３３頁（１９９１年）および元吉
和夫、『日本臨床』、第５０巻、第８号、１，９６７〜
１，９７２頁（１９９２年））。

【０００９】更に、最近、生理活性物質である血小板増
殖因子（トロンボポイエチン（以下、「ＴＰＯ」と略称
する。））が単離され、ＴＰＯに血小板増多作用がある
ことが報告されたが、その詳細な作用機構は依然不明の
ままである（フレデリック・ジェイ・デ・サウベイジ
等、『ネイチャー』、第３６９巻、第５３３〜５３８頁
（１９９４年）；フランソワ・ヴェンドリング等、『ネ
イチャー』、第３６９巻、第５７１〜５７４頁（１９９
４年）；シー・ロック等、『ネイチャー』、第３６９
巻、第５６５〜５６８頁（１９９４年）；およびティー
・ディー・バートレイ等、『セル』、第７７巻、第１，
１１７〜１，１２４頁（１９９４年））。斯る状況下、
ヒトを含む哺乳動物に見られる血小板減少を効果的に予
防および／または治療することのできる安全な血小板増
多促進剤が希求されている。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、血小
板を効果的に増多することのできる血小板増多促進剤を
提供することにある。

【００１１】

【課題を解決するための手段】本発明は、前記課題を有
効成分としてＩＦＮ−γおよび血小板増多作用を有する
生理活性物質を含有する血小板増多促進剤により解決す
るものである。

【００１２】本発明者等は、各種疾患により誘起される
血小板減少症や、悪性腫瘍などの疾患を治療するために
行われる放射線療法や化学療法などによって誘起される
血小板減少症を予防および／または治療するための薬剤
について研究を続けてきた。より具体的には、血小板増
多作用を有する生理活性物質に着目し、その作用を有効
に発揮し、増強する方法について検討した。

【００１３】その結果、抗腫瘍作用、抗ウイルス作用お
よび免疫作用を有することが知られているＩＦＮ−γ
を、血小板増多作用を有する生理活性物質と共に哺乳動
物に投与したとき、顕著な血小板増多作用が誘起される
ことを見い出した。

【００１４】通常、ＩＦＮ−γ自体は血小板増多作用を
示さないばかりか、逆に、血小板減少作用を示すもので
あるが、血小板増多作用を有する生理活性物質と併用し
たとき、当該生理活性物質がそれ単独では血小板増多作
用を示さないような低投与量に於いても、当該生理活性
物質の作用を増強し、顕著な血小板増多作用を誘導する
ことを新規に見い出した。即ち、少量の生理活性物質と
少量のＩＦＮ−γにより効果的に血小板増多作用を発揮
できるのである。これは、ＩＦＮ−γまたは血小板増多
作用を有する生理活性物質などの大量投与が、副作用を
惹起するという問題を有している点からも優れた効果と
いえる。

【００１５】本発明の血小板増多促進剤が有効成分とし
て含有するＩＦＮ−γとしては、例えば、ＩＦＮ−γ産
生能を有するヒトまたは哺乳動物の白血球や培養株化細
胞から産生される天然型ＩＦＮ−γ、および、前記白血
球や特定の培養株化細胞由来のＩＦＮ−γをコードする
遺伝子を、組換えＤＮＡ技術により動物細胞や大腸菌な
どの微生物に組み込んで得られる組換え型ＩＦＮ−γな
どを使用することができる。本発明に於いては、比活性
１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質以上にまで高度に精製され
た高純度ＩＦＮ−γは言うに及ばず、所期の目的を達成
し得る限り、医薬として許容し得る程度の不純物を含む
粗なＩＦＮ−γも使用可能である。また、必要に応じ
て、２種以上のＩＦＮ−γ混合物を用いてもよい。ま
た、ＩＦＮ−γには種特異性があること、また抗原性の
点からも、ヒトに使用する場合にはヒト由来のＩＦＮ−
γを、ヒト以外の動物に使用する場合にはその動物と同
じ種に由来するＩＦＮ−γを用いるのが望ましい。

【００１６】本発明で使用する血小板増多作用を有する
生理活性物質としては、ＩＬ−３、ＩＬ−６、Ｇ−ＣＳ
Ｆ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＴＰＯ、貪食細胞コロニー
刺激因子（以下、「Ｍ−ＣＳＦ」と略称する。）および
エリスロポイエチン（以下、「ＥＰＯ」と略称する。）
を使用することができる。これら生理活性物質は、その
物質によっても異なるが、一般的には、比活性１×１０
⁷単位／ｍｇ蛋白質以上にまで高度に精製された高純度
生理活性物質のみならず、所期の目的が達成できる限
り、医薬として許容し得る程度の不純物を含む粗な天然
型および遺伝子組換え型ヒトおよびヒト以外の哺乳動物
由来の生理活性物質の何れをも使用することができる。
必要に応じて、それらの２種以上の生理活性物質を併用
することもできる。また、前記生理活性物質の中には種
特異性を有するものもあること、また抗原性の点から
も、ヒトに使用することを意図する場合にはヒト由来の
ものを、ヒト以外の哺乳動物に使用することを意図する
場合には、その哺乳動物と同じ種に由来するものを用い
るのが望ましい。

【００１７】更に、本発明の血小板増多促進剤は、その
有効成分であるＩＦＮ−γと生理活性物質に加えて、医
薬として許容し得る増量剤、賦形剤、安定化剤およびｐ
Ｈ調節剤などの１種または２種以上を適宜配合してもよ
い。

【００１８】前記安定化剤とは、ＩＦＮ−γおよび／ま
たは血小板増多作用を有する生理活性物質の安定化剤を
意味し、例えば、グルコース、ガラクトース、キシロー
ス、フラクトース、スクロース、マルトース、トレハロ
ース、ネオトレハロース、ソルビトール、マンニトー
ル、マルチトール、ラクチトール、ラクトスクロース、
マルトオリゴ糖、多糖類、サイクロデキストリン、ヒド
ロキシエチル澱粉、デキストリンおよびデキストランな
どの糖類、グルクロン酸ナトリウム、リン酸塩および金
属塩などの塩類、血清アルブミン、ゼラチン、アミノ酸
および非イオン界面活性剤などの１種または２種以上を
使用することができる。前記安定化剤の配合割合は特に
限定されないが、非イオン界面活性剤を除き、通常０．
０１〜５０ｗ／ｗ％、より好ましくは、１〜５０ｗ／ｗ
％である。非イオン界面活性剤の配合割合は、ＩＦＮ−
γおよび生理活性物質を含有する溶液１ｍｌ当たり１μ
ｇ〜１ｍｇ、より好ましくは１０μｇ〜１ｍｇが望まし
い。前記安定化剤を前記割合で添加した場合は、ＩＦＮ
−γおよび生理活性物質の活性は、４℃の条件下で、通
常、６カ月以上の長期に亙って安定に保たれる。

【００１９】本発明の血小板増多促進剤の有効成分であ
るＩＦＮ−γの配合量は、血小板増多作用を有する生理
活性物質の作用を増強し得る量であり、通常、血小板増
多促進剤ｇ当たり、ＩＦＮ−γを約０．１〜１０⁹単位
配合するのが望ましい。また、生理活性物質は、同じく
ｇ当たり約１０〜１０¹⁰単位配合するのが望ましい。本
発明の血小板増多促進剤の形状は、液状、ペースト状、
粉状、固状などの経口または非経口投与可能な形状が選
ばれる。とりわけ、非経口的に投与可能な剤形が望まし
い。本発明の血小板増多促進剤を液状およびペースト状
とする場合には、ＩＦＮ−γおよび生理活性物質が失活
しないｐＨ、つまり、ｐＨ約４〜９、望ましくは、ｐＨ
６〜８に調整する。本発明の血小板増多促進剤はその形
状、形態に拘わらず、４℃以下の冷暗所で保存するのが
活性を安定に保つ上で望ましい。

【００２０】次に、本発明の血小板増多促進剤の投与方
法について説明するに、ヒトを含む哺乳動物に対し、Ｉ
ＦＮ−γを１×１０乃至１×１０⁷単位／ｋｇ／日、望
ましくは、１×１０乃至１×１０⁵単位／ｋｇ／日、よ
り望ましくは、１×１０乃至１×１０³単位／ｋｇ／
日、および生理活性物質を１×１０²乃至１×１０⁸単位
／ｋｇ／日、望ましくは、１×１０²乃至１×１０⁶単位
／ｋｇ／日、より望ましくは、１×１０²乃至１×１０⁴
単位／ｋｇ／日、一日に１回乃至数回または連続的に、
経口的または非経口的に投与すればよい。経口投与する
場合には、液剤、ペースト剤、錠剤、顆粒剤、粉剤、カ
プセルおよびパップ剤などの剤形が、非経口投与として
は、筋注、静注、皮下投与、腹腔内投与あるいは浸透圧
ポンプ投与などに適した液状または固状の剤形が選ばれ
る。投与期間は特に限定されず、投与量、患者および患
畜の症状に応じて適宜設定すればよい。

【００２１】以下、本発明を実験例と実施例により詳細
に説明する。

【００２２】

【実験例１ 血小板増多作用】

【００２３】

【実験例１−１ 血小板減少症モデルマウスの作製】生
後７週齢のＢＤＦ１雌マウス（体重約２０ｇ）に対し
て、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）に溶解した５
−フルオロウラシル（５−ＦＵ）を、マウス体重ｋｇ当
たり２５０ｍｇ腹腔内に１回投与して、血小板減少症モ
デルマウスを作成した。５−ＦＵ投与後、１４日目まで
一日一回、ユノペット（日本ベクトン−ディキンソン社
製）を用いて眼底採血を行い、顕微鏡下で血小板数を計
数し、血液中の血小板数変動を調べた。対照として、５
−ＦＵ非投与マウスを用いた。その結果を図１に示す。

【００２４】図１から明らかなように、マウスに５−Ｆ
Ｕを投与することにより、血小板減少症モデルマウスを
容易に作製することができる。尚、この実験系では、５
−ＦＵを投与したマウスの血小板は、徐々に減少した
後、徐々に増加し、５−ＦＵ投与前の血小板数以上にま
で増加するが、その後、徐々に減少し、正常値に戻ると
いう経過を辿る。

【００２５】

【実験例１−２ 血小板減少症モデルマウ
スに影響を及ぼさない血小板増多作用を有する生理活性
物質の投与量の決定】実験例１−１で作成した血小板減
少症モデルマウスに所定量の血小板増多作用を有する生
理活性物質を連続的に投与するために、常法により浸透
圧ポンプ１００７Ｄ型（アルゼット社製、米国）をマウ
スの皮下に埋設し、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．
４）に溶解した生理活性物質を０．５μｌ／時間の割合
で連続的に皮下に放出させた。血小板増多作用を有する
生理活性物質としては、比活性２×１０⁷単位／ｍｇ蛋
白質の遺伝子組換えマウスＩＬ−３（ゼンザイム社製、
米国）を、１×１０³単位／ｋｇ／日および１×１０⁵単
位／ｋｇ／日の割合で血小板減少症モデルマウスに投与
し、血小板数変動を調べた。対照として、ＩＬ−３不含
のリン酸緩衝生理食塩水を血小板減少症モデルマウスに
投与した。その結果、ＩＬ−３を１×１０⁵単位／ｋｇ
／日投与した場合、血小板増多が認められたのに対し、
１×１０³単位／ｋｇ／日投与した場合には、血小板増
多は認められなかった。その結果を図２に示す。

【００２６】図２の結果から、血小板減少症モデルマウ
スに対して血小板増多を示さないＩＬ−３単独での投与
量は、１×１０³単位／ｋｇ／日と決定した。

【００２７】

【実験例１−３ ＩＦＮ−γ単独投与による血小板数変
動に及ぼす影響】実験例１−１で作成した血小板減少症
モデルマウスに、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）
に溶解した比活性約１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有す
る遺伝子組換え型マウスＩＦＮ−γ（ゼンザイム社製、
米国）を２．５、２．５×１０および２．５×１０²単
位／ｋｇ／日の投与量で、実験１−２と同様にして浸透
圧ポンプを用いてマウスに投与し、ＩＦＮ−γの血小板
数変動に及ぼす影響について調べた。対照として、ＩＦ
Ｎ−γ不含のリン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）を血
小板減少症モデルマウスに投与した。結果は、図３に示
した。

【００２８】図３から明らかなように、ＩＦＮ−γは血
小板減少症モデルマウスに対して血小板減少症を促進す
ることが判明した。つまり、ＩＦＮ−γ自体には血小板
増多作用はなく、それ単独で投与した場合は、逆に血小
板減少作用を示すものである。

【００２９】

【実験例１−４ ＩＦＮ−γと血小板増多作用を有する
生理活性物質との併用投与】実験例１−１で作成した血
小板減少症モデルマウスに、各種濃度のＩＦＮ−γおよ
び血小板増多作用を有する生理活性物質を溶解したリン
酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）を実験例１−２の方法
により投与した。ＩＦＮ−γは、比活性約１×１０⁷単
位／ｍｇ蛋白質を有する遺伝子組換え型マウスＩＦＮ−
γ（ゼンザイム社製、米国）を、血小板増多作用を有す
る生理活性物質としては、比活性２×１０⁷単位／ｍｇ
蛋白質の遺伝子組換えマウスＩＬ−３（ゼンザイム社
製、米国）を用いた。ＩＦＮ−γとＩＬ−３の投与量は
表１に示したとおりである。対照として、浸透圧ポンプ
を埋設した血小板減少症モデルマウスに、ＩＦＮ−γお
よびＩＬ−３不含のリン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．
４）を、前記同様に血小板減少症モデルマウスに投与し
た。結果は、図４に示した。

【００３０】

【表１】

【００３１】図４の結果から明らかなように、ＩＦＮ−
γとＩＬ−３を投与した実験Ｎｏ．５（ＩＦＮ−γ：
２．５×１０単位／ｋｇ／日、ＩＬ−３：１×１０³単
位／ｋｇ／日）と実験Ｎｏ．６（ＩＦＮ−γ：２．５×
１０²単位／ｋｇ／日、ＩＬ−３：１×１０³単位／ｋｇ
／日）のマウスに於いては、５−ＦＵ投与後７日目から
血小板増多が認められ、８日目以降、顕著な血小板増多
が認められた。また、実験Ｎｏ．２と３のマウスに於い
ては、実験１−３の結果と同様、濃度依存的にＩＦＮ−
γによる血小板減少作用が見られた。また、本実験結果
には、５−ＦＵ投与後１４日目以降のデータは示してい
ないが、本発明の血小板増多促進剤を投与したマウス
は、実験Ｎｏ．１の対照マウスと比べ、より短期間にそ
の血小板数が正常値に戻る傾向にあった。

【００３２】また、具体的な数値は示さないが、前記実
験例と同様にして、血小板減少症モデルマウスに対し
て、各種天然型または遺伝子組換え型マウス由来のＩＦ
Ｎ−γと血小板増多作用を有するＩＬ−６、Ｇ−ＣＳ
Ｆ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＥＰＯまたは
ＴＰＯとを適宜組み合わせて試験をしたところ、前記実
験結果と同様、５−ＦＵ投与後８日目以降に顕著な血小
板増多を認めた。

【００３３】これらの結果から、ＩＦＮ−γ自体は血小
板減少を誘導するにも拘わらず、血小板増多作用を有す
る生理活性物質と併用したとき、その生理活性物質の作
用を著しく増強することが判明した。

【００３４】

【実験例３ ＩＦＮ−γと血小板増多作用を有する生理
活性物質の配合量の決定】

【００３５】

【実験例３−１ ＩＦＮ−γの最少有効投与量の決定】
実験例１−１に示す血小板減少症モデルマウスを用い
て、実験例１−２で述べた方法により、比活性２×１０
⁷単位／ｍｇ蛋白質の遺伝子組換えマウスＩＬ−３（ゼ
ンザイム社製、米国）を１×１０³単位／ｋｇ／日、お
よび比活性約１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有する遺伝
子組換え型マウスＩＦＮ−γ（ゼンザイム社製、米国）
を１×１０^-1〜１×１０³単位／ｋｇ／日の投与量で、
血小板減少症モデルマウスに投与し、血小板数変動を観
察した。その結果、それ単独では血小板増多を誘導しな
いＩＬ−３投与量においても、１×１０単位／ｋｇ／日
以上のＩＦＮ−γを併用した場合には、統計学的に有為
な血小板増多が認められた。この結果から、ＩＦＮ−γ
の最少有効投与量は１×１０単位／ｋｇ／日と決定し
た。

【００３６】

【実験例３−２ 血小板増多作用を有する生理活性物質
の最少有効投与量の決定】実験例１−１に示す血小板減
少症モデルマウスを用いて、実験例１−２で述べた方法
により、比活性２×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質の遺伝子組
換えマウスＩＬ−３（ゼンザイム社製、米国）を１×１
０〜１×１０⁴単位／ｋｇ／日、および比活性約１×１
０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有する遺伝子組換え型マウスＩ
ＦＮ−γ（ゼンザイム社製、米国）を１×１０⁵単位／
ｋｇ／日の投与量でマウスに投与し、血小板数変動を観
察した。その結果、ＩＬ−３を１×１０²単位／ｋｇ／
日以上マウスに投与した場合にのみ統計学的に有為な血
小板増多が認められたことから、ＩＦＮ−γと併用した
ときのＩＬ−３の最少有効投与量は１×１０²単位／ｋ
ｇ／日と決定した。この投与量は、実験例１−２および
実験例１−４の結果と比較すると、ＩＬ−３単独投与で
血小板増多作用を示すために必要とされる最少投与量の
１／１０以下の量である。

【００３７】また、具体的な数値は示さないが、前記実
験と同様にして、血小板減少症モデルマウスに対して、
各種天然型または遺伝子組換え型マウスＩＦＮ−γと血
小板増多作用を有するＩＬ−６、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳ
Ｆ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＥＰＯまたはＴＰＯとを適
宜組み合わせて実験したところ、前記実験結果と同様の
結果を得た。

【００３８】

【実験例４ 急性毒性試験】７週齢のｄｄ系マウス（体
重約３０ｇ）に対し、比活性１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白
質を有する天然型ヒトＩＦＮ−γ（株式会社林原生物学
研究所製）および比活性２×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質の
遺伝子組換えヒトＩＬ−３（ゼンザイム社製、米国）
を、それぞれ１×１０⁸単位／ｋｇマウス体重の投与量
で、皮下および静脈に投与したところ、死亡例は認めら
れなかった。また同様に、マウスに対して遺伝子組換え
型ヒトまたはヒト以外の哺乳動物由来のＩＦＮ−γとＩ
Ｌ−６、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＳＣ
Ｆ、ＥＰＯまたはＴＰＯとを適宜組み合わせて投与試験
をしたところ、前記実験結果と同様、死亡例は認められ
なかった。したがって、本発明の血小板増多促進剤は極
めて安全な薬剤であると言える。

【００３９】

【実施例１】比活性約１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有
する天然型ヒトＩＦＮ−γ（株式会社林原生物化学研究
所製）と、比活性約２×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有す
る遺伝子組換え型ヒトＩＬ−３（ゼンザイム社製、米
国）とを、ｍｌ当たりそれぞれ２×１０²単位および２
×１０³単位となるように注射用生理食塩水に溶解して
血小板増多促進剤を得た。

【００４０】本品は、骨髄異形成症候群、白血病、骨髄
への癌転移、骨髄腫、ホジキン氏病、リンパ肉腫、骨髄
繊維病、骨髄硬化症、肥大性骨関節症、大理石骨病、バ
ンチ症候群、細網肉腫、梅毒あるいは悪性腫瘍などによ
って誘起される血小板減少症、および、悪性腫瘍の治療
として用いられる放射線療法や化学療法の副作用として
誘起される血小板減少を予防および／または治療するた
めの点滴用血小板増多促進剤として使用できる。また、
本品は、腎不全患者の血小板増多促進剤としても有利に
使用できる。

【００４１】

【実施例２】比活性約１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質を有
する天然型ヒトＩＦＮ−γ（日本ケミカルリサーチ株式
会社製）と、比活性１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質の遺伝
子組換え型ヒトＧＭ−ＣＳＦ（セルバ社製、独国）と
を、ｍｌ当たりそれぞれ１×１０³単位および１×１０⁴
単位となるように注射用生理食塩水に溶解し、濾過滅菌
し、凍結乾燥して粉末状の注射用血小板増多促進剤を得
た。

【００４２】本品は、用時、注射用蒸留水に溶解して使
用する。本品は、骨髄異形成症候群、白血病、骨髄への
癌転移、骨髄腫、ホジキン氏病、リンパ肉腫、骨髄繊維
病、骨髄硬化症、肥大性骨関節症、大理石骨病、バンチ
症候群、細網肉腫、梅毒あるいは悪性腫瘍などによって
引き起こされる血小板減少症、および、悪性腫瘍の治療
として用いられる放射線療法や化学療法の副作用として
誘起される血小板減少を予防および／または治療するた
めの注射用血小板増多促進剤として使用できる。

【００４３】

【実施例３】ヒト血清アルブミンを１００μｇ／ｍｌ含
有する１０ｗ／ｖ％マルトース液１００ｍｌ（ｐＨ７．
０）に、比活性約１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質を有する
遺伝子組換え型ヒトＩＦＮ−γ（日本ケミカルリサーチ
株式会社製）、比活性約１×１０⁵単位／ｍｇ蛋白質を
有する遺伝子組換え型ヒトＳＣＦ（ゼンザイム社製、米
国）、および比活性約２×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有
する遺伝子組換え型ヒトＩＬ−３（ゼンザイム社製、米
国）とを、ｍｌ当たりそれぞれ５×１０⁴単位、３×１
０⁵単位および５×１０⁵単位となるように溶解して液状
の血小板増多促進剤を得た。

【００４４】本品は、４℃保存下で６カ月以上に亙って
有効成分のヒトＩＦＮ−γ、ＳＣＦおよびＩＬ−３の活
性が安定に保たれた。本品は、各種疾患および放射線療
法や化学療法の副作用として誘起される血小板減少を予
防および／または治療するための血小板増多促進剤とし
て有利に使用できる。

【００４５】

【実施例４】ゼラチンを２００μｇ／ｍｌ含有する１０
ｗ／ｖ％スクロース液１００ｍｌ（ｐＨ７．０）に、比
活性約１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質を有するヒト遺伝子
組換え型ＩＦＮ−γ（日本ケミカルリサーチ株式会社
製）と、天然型ヒトＥＰＯ（チャイナ・ニューテック・
ディベロプメント・アンド・トレード社製、中国）とを
ｍｌ当たりそれぞれ２×１０²単位および２×１０⁶単位
となるように溶解して、筋注用血小板増多促進剤を得
た。

【００４６】本品は、４℃保存下で６カ月以上に亙って
ヒトＩＦＮ−γおよびＥＰＯの活性が安定に保たれた。
本品は、各種疾患および放射線療法や化学療法の副作用
として誘起される血小板減少を予防および／または治療
するための血小板増多促進剤として有利に使用できる。

【００４７】

【実施例５】比活性約１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質を有
する遺伝子組換え型ヒトＩＦＮ−γ（日本ケミカルリサ
ーチ株式会社製）と、高純度遺伝子組換え型ヒトＧ−Ｃ
ＳＦ（三共株式会社製）を常法に従って澱粉とマンニト
ールとを混合して打錠し、ヒトＩＦＮ−γおよびＧ−Ｃ
ＳＦを製品１錠（２００ｍｇ）当たりそれぞれ３×１０
³単位および１×１０⁴単位となるように配合して錠剤を
得た。

【００４８】本品は、ヒトの血小板減少症を予防および
／または治療するための血小板増多促進剤として有利に
使用できる。

【００４９】

【実施例６】比活性約１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質を有
する天然型ヒトＩＦＮ−γ（日本ケミカルリサーチ株式
会社製）、比活性１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質の遺伝子
組換え型ヒトＧＭ−ＣＳＦ（セルバ社製、独国）および
無水結晶マルトース（商品名「ファイントース」、株式
会社林原生物化学研究所製）とを混合後、常法に従って
打錠し、製品１錠（１００ｍｇ）当たりヒトＩＦＮ−γ
を１×１０⁴単位およびヒトＧＭ−ＣＳＦを１×１０⁵単
位含有する錠剤を得た。

【００５０】本品は、ヒトの血小板減少症を予防および
／または治療するための血小板増多促進剤として有利に
使用できる。

【００５１】

【実施例７】比活性約１×１０⁶単位／ｍｇ蛋白質を有
する遺伝子組換え型ヒトＩＦＮ−γ（日本ケミカルリサ
ーチ株式会社製）、および遺伝子組換え型ヒトＩＬ−６
（オーストラル・バイオロジカルズ社製、米国）を、最
終製品ｇ当たりそれぞれ５０単位および３×１０⁴単位
となるように、常法に従って澱粉とトレハロースとを混
合して、粉末状の血小板増多促進剤を得た。

【００５２】本品は、室温保存下においても６カ月以上
に亙ってヒトＩＦＮ−γおよびＩＬ−６の活性が安定に
保たれた。本品は、各種疾患および放射線療法や化学療
法の副作用として誘起される血小板減少を予防および／
または治療するための血小板増多促進剤として有利に使
用できる。

【００５３】

【実施例８】比活性約１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有
する遺伝子組換え型マウスＩＦＮ−γ（ゼンザイム社
製、米国）および比活性１×１０⁵単位／ｍｇ蛋白質を
有する遺伝子組換え型マウスＳＣＦを、ｍｌ当たりそれ
ぞれ５０単位および５×１０⁴単位となるように溶解し
て、液状の血小板増多促進剤を得た。

【００５４】

【実施例９】比活性約１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を有
する遺伝子組換え型マウスＩＦＮ−γ（ゼンザイム社
製、米国）および比活性１×１０⁵単位／ｍｇ蛋白質を
有する遺伝子組換え型マウスＳＣＦを、ｍｌ当たりそれ
ぞれ１×１０⁷単位および３×１０⁵単位となるように生
理食塩水に溶解して、液状の血小板増多促進剤を得た。

【００５５】本品は、マウスの血小板減少症を予防およ
び／または治療するための血小板増多促進剤として有利
に使用できる。

【００５６】

【実施例１０】比活性約１×１０⁷単位／ｍｇ蛋白質を
有する遺伝子組換え型マウスＩＦＮ−γ（ゼンザイム社
製、米国）、遺伝子組換えマウスＴＰＯ、および遺伝子
組換え型マウスＩＬ−３（ゼンザイム社製、米国）を、
最終製品ｇ当たりそれぞれ１×１０⁶単位、２×１０⁶単
位および１×１０⁶単位となるように、常法に従って澱
粉とトレハロースとを混合後、粉末状の血小板増多促進
剤を得た。

【００５７】本品は、マウスの血小板減少症を予防およ
び／または治療するための血小板増多促進剤として有利
に使用できる。

【００５８】

【発明の効果】本発明は、ＩＦＮ−γと血小板増多作用
を有する生理活性物質とを同時にヒトを含む哺乳動物に
投与すると、生理活性物質の血小板増多作用がＩＦＮ−
γにより著しく増強されるとの新規な知見に基づくもの
である。本発明の血小板増多促進剤は、有効成分として
ＩＦＮ−γおよび生理活性物質を含有し、各種疾患およ
び放射線療法や化学療法の副作用として誘起される血小
板減少症を効果的に予防および／または治療することが
できる。

【００５９】本発明は、斯くも顕著な作用効果を奏する
意義ある発明であり、斯界に貢献すること誠に多大な発
明である。

【図面の簡単な説明】

【図１】５−ＦＵにより誘導された血小板減少症モデル
マウスの血小板数変動を示すグラフである。

【図２】５−ＦＵにより誘導された血小板減少症モデル
マウスに対するＩＬ−３の血小板増多作用を示すグラフ
である。

【図３】５−ＦＵにより誘導された血小板減少症モデル
マウスに対するＩＦＮ−γの血小板数変動に及ぼす影響
を示すグラフである。

【図４】５−ＦＵにより誘導された血小板減少症モデル
マウスに対するＩＦＮ−γおよびＩＬ−３の血小板増多
作用を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 38/22 47/02 Ｊ 47/16 Ｊ 47/26 Ｊ 47/36 Ｊ 47/42 Ｊ Ａ６１Ｋ 37/24 37/66 ＡＣＡ Ｈ

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 有効成分としてインターフェロン−γお
   よび血小板増多作用を有する生理活性物質を含有する血
   小板増多促進剤。
2. 【請求項２】 インターフェロン−γが、天然型または
   遺伝子組換え型インターフェロン−γである請求項１に
   記載の血小板増多促進剤。
3. 【請求項３】 血小板増多作用を有する生理活性物質
   が、インターロイキン−３、インターロイキン−６、顆
   粒球コロニー刺激因子、貪食細胞コロニー刺激因子、顆
   粒球貪食細胞コロニー刺激因子、幹細胞増殖因子、トロ
   ンボポイエチンおよびエリスロポイエチンから選ばれる
   １種または２種以上の物質である請求項１または２に記
   載の血小板増多促進剤。
4. 【請求項４】 血小板増多作用を有する生理活性物質の
   配合量が、それ単独では血小板増多作用を示さない量で
   ある請求項１、２または３に記載の血小板増多促進剤。
5. 【請求項５】 インターフェロン−γおよび／または血
   小板増多作用を有する生理活性物質の安定化剤として、
   １種または２種以上の糖類、塩類、アミノ酸、血清アル
   ブミン、ゼラチン、非イオン界面活性剤、グルクロン
   酸、デキストランおよびヒドロキシエチル澱粉、並びに
   これらの組み合わせを含有する請求項１、２、３または
   ４に記載の血小板増多促進剤。
6. 【請求項６】 インターフェロン−γがｇ当たり約０．
   １〜１０⁹単位、および血小板増多作用を有する生理活
   性物質がｇ当たり１０〜１０⁹単位配合されていること
   を特徴とする請求項１、２、３、４または５に記載の血
   小板増多促進剤。
7. 【請求項７】 血小板増多促進剤が、経口または非経口
   的に投与可能な剤形である請求項１、２、３、４、５ま
   たは６に記載の血小板増多促進剤。