JPH08136523A - 液体クロマトグラフ用検出器 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 蛍光検出と化学発光検出の両者を単一の液体
クロマトグラフ用検出器で行えるようにすること。 【構成】 蛍光検出を行う場合には、励起用光源１１か
ら出射された光は第１の分光器１２，ビームスプリッタ
１３を介して第１のフローセル１５に照射される。これ
により発生する蛍光は、第２の分光器１８を介して第１
の光検知器１９で受光され、信号処理装置２２に送られ
る。ビームスプリッタで分離された励起光の一部は、励
起光モニタ１４で受光され信号処理装置に与えられ、そ
こで所定の補正処理が行われ補正後の蛍光信号が出力さ
れる。化学発光検出を行う場合には、図（Ｂ）のよう
に、第２のフローセル１６に交換し、シャッタ２７を開
きフローセル内の試料の化学反応に基づき発光する光を
第２の光検知器２５で受光し、信号処理装置に送り、所
定の信号処理を経て化学発光信号が出力される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、液体クロマトグラフ用
検出器に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】液体クロマトグラフ用検出器の一例とし
て蛍光検出器や化学発光検出器等がある。そして、蛍光
検出器は、蛍光物質からなる試料に励起光を照射するこ
とにより発生する蛍光を検出するようになっている。ま
た、化学発光検出器は、化学反応により生成され励起状
態になっている物質が基底状態に遷移する時に放射され
る光を検出するようになっている。この化学発光検出器
は、蛍光検出器に比し感度が１００倍以上も高く、ま
た、励起光を照射する必要がないので、装置の構成が簡
単であり、最近では生体成分の分析用として注目されて
いる。

【０００３】上記した蛍光分析法も化学発光分析法も共
に試料からの微弱な発光を検出する点で共通する。そし
て、蛍光検出器には光電子増倍管等の微弱な化学発光を
検出するに必要な機構が備わっており、係る蛍光検出器
を使用して化学発光を測定すること、すなわち、蛍光検
出器と化学発光検出器の両方の機能を備えた光検出器の
開発が試みられている。

【０００４】従来の蛍光検出器の構成としては、例えば
図７に示すものがある。同図に示すように、励起用光源
１から出射された光を励起光用の第１の分光器２にて各
波長毎に分散させて所望の励起光をビームスプリッタ３
に照射させ、そこにおいて一部を反射させて励起光モニ
タ４にて受光し、励起光の光強度を検出する。また、励
起光の大部分はビームスプリッタ３を透過してフローセ
ル５に照射される。フローセル５は、両端開口された直
方体状の筒体からなり、例えば石英ガラスなどで形成さ
れる。そのフローセル５の内部に形成される流路内に試
料を流通させ、その流路を流れる試料に励起光を照射さ
せる。すると、試料から四方に向かって蛍光が発生す
る。

【０００５】前記蛍光のうち、励起光の光路と直交する
方向の光を集光レンズ６を介して分光器７内に入射さ
せ、分光器７内の回折格子７ａにて分散さて所定の波長
の光を選択して、光電子増倍管からなる光検知器８へ受
光させる。

【０００６】上記励起光モニタ４並びに光検知器８で受
光された光は、それぞれプリアンプ９ａ，９ｂにて増幅
されて信号処理装置１０へ送られる。信号処理装置１０
では、励起光を基準として検出した蛍光成分（光強度）
を求めることにより、励起光及びまたは光源の変動の影
響をなくし、正確な測定を可能としている。

【０００７】一方、係る蛍光検出器を化学発光検出器と
して使用する場合には、フローセル５内に化学反応によ
り発光する試料を供給する。この時、励起光用光源１は
オフにし、試料に励起光を照射させない。すると上記し
た原理によってフローセル５内の試料が発光するため、
その光を集光レンズ６を介して分光器７内に入射させる
とともに光検知器８へ受光させる。

【０００８】この時、上記化学反応により発光した光も
回折格子７ａで分散されるが、光検知器８への受光量を
大きくするために分散されない０次光を光検知器８へ受
光させるようにする。そして、その受光した光をプリア
ンプ９ｂにて増幅し信号処理装置１０へ送る。なお、励
起光は使用しないため、励起光モニタ４からの信号をカ
ットする。係る構成をとることにより、蛍光検出器の構
成をそのまま用いて化学発光を測定することができる。

【０００９】しかしながら、係る構成では、以下に示す
理由により化学発光の測定感度が専用の化学発光検出器
の１／１００〜１／１０００程度と低く、実用的でな
い。すなわち、化学反応により生じる光の光強度の方が
蛍光の光強度よりも小さい。そのため、専用の化学発光
検出器に用いられる光検知器である光電子増倍管は、高
感度で大型のものである。従って、蛍光検出器用に合わ
せた光電子増倍管では検出感度が低い。

【００１０】また、分光器７内の回折格子７ａにより光
が分散されるため、１次光以上の光は検出に使用され
ず、無駄になり光の有効利用が図れない。従って、もと
もと発光量が少ない上にさらにその一部のみしか測定に
使用しないため、受光量が少なくなり、感度が低下す
る。

【００１１】蛍光検出用のフローセル５は四角筒状であ
りセル内部の試料の拡散を小さくするために、小さく形
成している。この大きさのまま化学発光用のセルとして
も使用すると、光強度が不足する。仮に、蛍光測定時の
試料の拡散を無視して相似的に大きくしたセルを、化学
発光用のセルとして使用すると以下の問題を生じる。

【００１２】(1) 反応液と試料との混合が不充分になり
化学発光量が減少する。(2) 高価となる。(3) 発光部が
大きくなるので、光学系も明るくする必要が出て、装置
も大型化する。

【００１３】本発明は、上記した背景に鑑みてなされた
もので、その目的とするところは、上記した問題を解決
し、実用に耐え得る感度で化学発光と蛍光検出の両者を
測定することができ、しかも装置全体も大型化しない液
体クロマトグラフ用検出器を提供することにある。

【００１４】

【課題を解決するための手段】上記した目的を達成する
ために、本発明に係る液体クロマトグラフ用検出器で
は、検出器本体の同一箇所に対して蛍光検出用の第１の
フローセルと、化学発光検出用の第２のフローセルの一
方を着脱自在に装着可能とし、前記検出器本体内には、
前記フローセルの設置箇所に対して励起光を照射する励
起光照射手段と、前記第１のフローセルを装着した際
に、前記励起光の照射にともない発生する蛍光を波長毎
に分散する分光手段と、前記分光手段の出射側に配置さ
れ、前記分光手段から出射される蛍光を受光する第１の
光検知手段と、前記第２のフローセルを装着した際に、
そのフローセル内の試料の化学反応に基づき発光する光
を受光する第２の光検知手段と、前記一方の光検知手段
からの検出信号を受け、所定の信号処理を行い蛍光出力
信号または化学発光出力信号を出力する信号処理手段
と、蛍光測定の際に前記第２の光検知手段に光が受光す
るのを抑制する保護手段とから構成した。

【００１５】また、別の解決手段としては、検出器本体
の同一箇所に対して蛍光検出用の第１のフローセルと、
化学発光検出用の第２のフローセルの一方を着脱自在に
装着可能とし、前記検出器本体内には、前記フローセル
の設置箇所に対して励起光を照射する励起光照射手段
と、前記第１のフローセルを装着した際に、前記励起光
の照射にともない発生する蛍光を波長毎に分散する分光
手段と、光検知手段と、前記光検知手段の受光面の位置
を変えるように前記光検知手段を移動させる移動手段
と、前記光検知手段からの検出信号を受け、所定の信号
処理を行い蛍光出力信号または化学発光出力信号を出力
する信号処理手段と、蛍光測定の際に前記第２の光検知
手段に光が受光するのを抑制する保護手段とを備え、前
記移動手段は、前記受光面が、前記分光手段の出射側に
対向して前記分光手段から出射される蛍光を受光する第
１の位置と、前記第２のフローセルを装着した際にその
フローセル内の試料の化学反応に基づき発光する光を受
光できる第２の位置に移動可能としてもよい。

【００１６】上記いずれかの装置において、好ましくは
前記励起光の一部を取り出す光分離手段と、その光分離
手段により取り出された励起光を検出する励起光検出手
段とをさらに備え、前記信号処理装置にて蛍光出力信号
を求める際に、前記励起光検出手段により検出された励
起光信号と、前記第１の光検知手段により検出された蛍
光信号に基づいて所定の演算処理を行うように構成する
ことである。

【００１７】さらに別の解決手段としては、検出器本体
の同一箇所に対して蛍光検出用の第１のフローセルと、
化学発光検出用の第２のフローセルの一方を着脱自在に
装着可能とし、前記検出器本体内には、前記フローセル
の設置箇所に対して励起光を照射する励起光照射手段
と、前記第１のフローセルを装着した際に、前記励起光
の照射にともない発生する蛍光を波長毎に分散する分光
手段と、前記分光手段の出射側に配置され、前記分光手
段から出射される蛍光を受光する第１の光検知手段と、
前記第２のフローセルを装着した際に、そのフローセル
内の試料の化学反応に基づき発光する光を受光する第２
の光検知手段と、蛍光測定の際に前記第２の光検知手段
の受光面の前に位置し励起光の光強度を低下させて受光
させる減光手段と、前記一方の光検知手段からの検出信
号を受け、所定の信号処理を行い蛍光出力信号または化
学発光出力信号を出力する信号処理手段とを備え、前記
蛍光測定の際には前記第２の光検知手段により検出され
た励起光信号と、前記第１の光検知手段により検出され
た蛍光信号に基づいて所定の演算処理を行うようにし、
化学発光測定の際には、前記減光手段を移動させて前記
試料の化学反応に基づき発光する光が前記減光手段を介
することなく第２の光検知手段に受光されるように構成
してもよい。

【００１８】そして、上記した各種の構成を前提とし、
装着されたフローセルの種類を検出するフローセル検出
手段と、そのフローセル検出手段の検出結果に基づい
て、前記保護手段の移動，前記移動手段の駆動，前記減
光手段の移動または前記励起光照射手段の作動の少なく
とも１つを制御するようにするとなお良い。

【００１９】

【作用】請求項１，２，４の発明では、蛍光検出器とし
て使用する場合には、第１のフローセルを装着するとと
もに、そのフローセル内に蛍光試料を供給する。また、
保護手段または減光手段を第２の光検知手段の受光面の
前に配置する。この状態で励起光照射手段を作動させて
フローセル内の蛍光試料に励起光を照射させる。する
と、蛍光試料は励起されて蛍光を発する。その発生した
蛍光を分光手段を介して第１の光検知手段で受光され、
蛍光信号として信号処理手段に送る。

【００２０】請求項３に記載の発明では、この時同時に
光分離手段により励起光の一部は励起光検出手段により
検出され励起光モニタ信号として信号処理手段に送る。
また、請求項４の発明では、減光手段を介して減光され
た励起光が第２の光検知手段で検知され、励起光モニタ
信号として信号処理手段に送る。そして、信号処理手段
では、励起光の変動を補正すべく、例えば蛍光信号を励
起光モニタ信号で割る割り算処理等の所定の演算処理が
なされ、その結果が補正後の蛍光信号として出力され
る。

【００２１】なお、第２の光検知器の受光面には、保護
手段により光の侵入を遮断するか減光手段により光強度
が抑えられて受光されるため、劣化が抑制される。

【００２２】一方、化学発光検出器として使用する場合
には、化学発光用の第２のフローセルを検出器本体に装
着するとともに、そのフローセル内に化学反応により発
光する試料を供給する。また、保護手段または減光手段
を第２の光検知手段の受光面の前から外す。なお、励起
光照射手段は作動させない。すると、試料は化学反応に
より発光し、その発光した光を第２の光検知手段で受光
し、信号処理手段に送る。信号処理手段では、上記した
蛍光測定モード時には行われていた励起光の変動補正等
は行われず、与えられた信号に基づく化学発光信号を出
力する。

【００２３】請求項２の発明では、光検知手段を共通化
したため、測定モードに合わせて移動手段を作動させ、
光検知手段を第１の位置または第２の位置に位置させ、
蛍光または化学反応に基づく光を検出する。

【００２４】請求項５の発明では、フローセル検出手段
により、装着されたフローセルの種類、すなわち、蛍光
測定用か化学発光測定用かを判断し、その検出結果に基
づいて、必要な処理を自動的に行う。

【００２５】

【実施例】以下本発明に係る液体クロマトグラフ用検出
器について添付図面を参照にして詳述する。図１は本発
明の第１実施例を示している。同図に示すように、励起
用光源１１から出射される励起光を第１の分光器１２に
入射させ、そこにおいて各波長毎に分散される。分散さ
れた励起光は、第１の分光器１２から出射されてビーム
スプリッタ１３に照射されて一部が反射されて励起光モ
ニタ１４に受光される。また、ビームスプリッタ１３に
照射された励起光の大部分は、そのまま透過してフロー
セルに照射されるように配置される。

【００２６】フローセルは、検出器本体に対して着脱自
在となり、本実施例では蛍光検出を行う場合には図２に
示す第１のフローセル１５を装着し、化学発光検出を行
う場合には図３に示す第２のフローセル１６を装着する
ようになる。尚各図は模式的に示している。

【００２７】第１，第２のフローセル１５，１６は、と
もに帯状の取付板１５ａ，１６ａの上下両端近傍に流入
口，流出口を配置し、各流入口，流出口の外側には外部
配管との接続を図るための継手１５ｂ，１６ｂを装着し
ている。また、流入口，流出口の内側には、流入管１５
ｃ，１６ｃ，並びに流出管１５ｄ，１６ｄの一端を接続
する。これら流入管１５ｃ，流出管１５ｄの他端間に、
蛍光検出用のセル本体１５ｅを装着する。また、流入管
１６ｃ，流出管１６ｄの他端間に、化学発光検出用のセ
ル本体１６ｅを装着する。

【００２８】セル本体１５ｅは、同図（Ｂ）に示すよう
に両端開口された矩形状の筒体に形成され、石英ガラス
等を用いて製造される。セル本体１６ｅは、光を透過す
る材料で形成された長尺のチューブを渦巻き状に形成さ
れ、その中心部で流入管１６ｃと接続され、最外周端で
流出管１６ｄと接続される。さらに、同図（Ｂ）に示す
ように、セル本体１６ｅの裏面側には平面鏡１６ｆが配
置され、セル本体１６ｅ内の試料から発光した光を、平
面鏡１６ｆで反射させて前方（図１では右側）に出射さ
れるようにする。また、セル本体１６ｅの前面には透明
な窓板１６ｇが装着され、その窓板１６ｇと平面鏡１６
ｆとの間でセル本体１６ｅを挟持し、渦巻き状態を保持
するようにしている。なお、係る化学蛍光用の第２のフ
ローセル１６としては、例えば実開平１−６４０５４号
に開示されたものを用いることができる。

【００２９】一方、ビームスプリッタ１３とフローセル
１５を結ぶ光路に直交する方向には、集光レンズ１７，
第２の分光器１８が配置されている。これにより、励起
光がセル本体１５ｅ内の蛍光試料に照射されることによ
り、その蛍光試料から四方に向けて発生する蛍光のうち
励起光と直交方向に発生する蛍光が、集光レンズ１７を
介して第２の分光器１８内に入射される。

【００３０】第２の分光器１８では、図１に示すよう
に、入射スリット１８ａを介して入射されてきた蛍光を
回折格子１８ｂで各波長毎に分散する。その分散した光
の一部を出射スリット１８ｃを介して第１の光検知器１
９に受光させる。

【００３１】第１の光検知器１９は、蛍光検出に充分な
感度の光電子増倍管を用いて構成される。光検知器１９
の出力はプリアンプ２０に送られ、スイッチ２１を介し
て信号処理装置２２に与えられる。また、上記した励起
光モニタ１４の出力もプリアンプ２３を介して信号処理
装置２２に与えられる。

【００３２】信号処理装置２２では、励起光モニタ２３
で検出した励起光と、第１の光検知器１９で検出した蛍
光とを比較するとともに所定の処理を行い、セル本体１
５ｅ内を流れる試料の分析が行われる。なお、具体的な
信号処理の機能は、従来の専用の蛍光検出器のものと同
様であるため、その詳細な説明を省略する。上記した構
成のうち、図３に示す第２のフローセル１６以外の構成
が蛍光検出器側の機構である。

【００３３】一方、化学発光検出器側の機構は、以下の
ようになっている。まず、第１のフローセル１５に替え
て第２のフローセル１６を検出器本体に装着する。この
時、上記した窓板１６ｇが、上記した励起光の入射側と
反対側である図１中右側に向くように装着する。

【００３４】第２のフローセル１６を装着した際に、渦
巻き状のセル本体１６ｅに対向するように第２の光検知
器２５を近接配置する。この時、第２の光検知器２５の
受光面の大きさは、セル本体１６ｅと同じか或いは大き
いヘッドオンタイプのものを使用し、その受光面をセル
本体１６ｅと平行で、両者の中心が一致するように配置
する。また第２の光検知器２５は、第１の光検知器１９
に対して高感度でしかも受光面の大きな光電子増倍管を
用いて構成する。これにより、第１のフローセル１５の
セル本体１５ｅに比べて発光面積の大きな第２のフロー
セル１６のセル本体１６ｅから発光される光を無駄なく
受光することができる。よって従来の方法の数百倍の集
光効率を実現させることができて、微弱な発光も検出で
き、化学発光検出器としても充分な感度を有する蛍光検
出器が可能になる。

【００３５】この第２の光検知器１６の出力は、プリア
ンプ２６，スイッチ２１を介して信号処理装置２２に送
られる。そして、この信号処理装置２２では、通常の化
学反応検出器と同様の所定の信号処理がなされ、試料の
分析が行われる。但し、励起光モニタ１４に接続された
プリアンプ２３からの入力信号はカットする。なお具体
的な信号処理の機能は、従来の専用の化学発光検出器の
ものと同様であるため、その詳細な説明を省略する。

【００３６】さらに本例では、フローセル１５，１６の
設置位置と第２の光検知器２５との間に、シャッタ２７
を配置する。このシャッタ２７は、ソレノイド２８によ
り開閉するようになり、本例では、ソレノイド２８とし
て電磁式のロータリソレノイドを用い、その出力軸２８
ａにシャッタ２７の一端を装着する。これにより、シャ
ッタ２７は、出力軸２８ａを中心に正逆回転し、化学発
光検出器として使用する場合にはシャッタ２７が開いて
第２のフローセル１６から出射される光を第２の光検知
器２５で受光可能とし、蛍光検出器として使用する場合
にはシャッタ２７が閉じて光強度の強い励起光が第２の
光検知器２５に照射されるのを抑制する。これにより、
不使用時に第２の光検知器２５に光が侵入して劣化する
のが防止される。なお、シャッタ２７の移動方向は、上
記した回転に限ることなく平行移動するようにしても良
い。そして、移動させる機構もソレノイドに限ることな
くモータやその他の駆動機構を用いることができ、さら
には手動により移動させるようにしても良い。

【００３７】また、本例では上記各フローセル１５，１
６の装着口の内側近傍に、マイクロスイッチ３０が配置
されているとともに、図１（Ｂ）に示すように、化学発
光用の第２のフローセル１６の取付板１６ａ内側には、
ピン１６ｈを取り付けている。そして、第２のフローセ
ル１６を装置本体に装着すると、そのピン１６ｈの先端
がマイクロスイッチ３０を押し、スイッチがオンになる
ように調整されている。

【００３８】すなわち、マイクロスイッチ３０がオンに
なると、化学発光用の第２のフローセル１６が装着され
ていることを意味するので、そのオン信号に基づいて測
定装置は化学発光用の検出器に切り替わる。具体的に
は、上記したスイッチ２１の接点が切り替わり、この切
り替えにともない信号処理装置２２には化学発光用の第
２の光検知器２５からの出力が与えられる。また、信号
処理装置２２では、オン信号を受けてどちらからの信号
が入力されるのかを判断し、所望の処理を行うようにな
る。一方、マイクロスイッチ３０がオフの時には上記と
は逆の作用をする。なお、このように自動的に切り替え
るのではなく、操作者がマニュアル操作により切り替え
処理を行うようにしてももちろんよい。

【００３９】次に、上記した実施例の作用について説明
する。まず、蛍光検出器として使用する場合には、第１
のフローセル１５を装着する。すると、マイクロスイッ
チ３０はオフのままであるので、スイッチ２１は第１の
光検知器１９が接続されるプリアンプ２０側の接点に閉
じている。さらにシャッタ２７も閉じて第２の光検知器
２５の受光面を遮蔽する。そしてセル本体１５ｅ内に蛍
光試料を連続して供給する。

【００４０】この状態で、励起用光源１１を作動させて
励起光を出射させる。その励起光は第１の分光器１２に
より各波長に分散され、分散された励起光は第１のフロ
ーセル１５の内の蛍光用セル中の蛍光試料に照射され、
それを励起する。これにより発生した蛍光は集光用レン
ズ１７、入射スリット１８ａを経過して第２の分光器１
８中の回折格子１８ｂにより分散される。そして各波長
毎に分散された蛍光は第１の光検知器１９によって検出
されてプリアンプ２０に送られ、蛍光信号として信号処
理装置２１に送られる。

【００４１】一方、ビームスプリッタ１３により分割さ
れた励起光の一部は励起光モニタ１４により電気信号に
変換され、プリアンプ２３を経て励起光モニタ信号とし
て信号処理装置２２に送られる。

【００４２】信号処理装置２２の中では、励起光の変動
を補正すべく、蛍光信号を励起光モニタ信号で割る割り
算処理が行われ、その結果が補正後の蛍光信号として出
力される。

【００４３】一方、化学発光検出器として使用する場合
には、化学発光用の第２のフローセル１６を装置に挿入
する。すると、第２のフローセルに付随するピン１６ｈ
によってマイクロスイッチ３０が押され、蛍光測定モー
ドから化学発光測定モードに切り替わる。

【００４４】すなわち、スイッチ２１が切り替わること
により、プリアンプ２０と信号処理装置２２との接続は
カットされ、プリアンプ２６と信号処理装置２２とが接
続される。

【００４５】また、電源を入れても励起光用光源１１は
点灯せず、第２のフローセル１６に励起光が到達するこ
とはない。さらに、ソレノイド２８が作動してシャッタ
２７が開き、第２のフローセル２５の受光面が開放され
る。

【００４６】この状態で、第２のフローセル１６のセル
本体１６ｅ内に試料を供給すると、化学反応により所定
の光を発光する。するとその光は、第２の光検知器２５
により検出される。この時、発光する光の光強度は微弱
であるが、上記したように集光効率よく検出されるた
め、測定に十分な光強度が得られる。

【００４７】第２の光検知器２５で検出された信号は、
プリアンプ２６を介して信号処理装置２２に送られる。
信号処理装置２２では、上記した蛍光測定モード時には
行われていた励起光の変動補正のための励起光モニタ信
号による蛍光信号の割り算処理は行われず、プリアンプ
２６のからの信号に基づく化学発光信号として出力され
る。

【００４８】そして、本実施例では、第２のフローセル
１６として、渦巻き状のセル本体１６ｅを使用したた
め、フローセルの容量を増加させることなく発光面を大
きくとることができ、強い発光を得ることができる。第
２の光検知器２５の受光面に合わせてセル本体１６ｅの
径を調整することにより、効率良く発光を光検知器に導
くことができる。さらに、セル本体１６ｅは流路が曲げ
られているので、流れに対して垂直方向に攪拌効果が生
じる。これにより移動相と反応液との混合が促進され、
反応が加速される。

【００４９】このように、１つの装置で実用的な検出感
度の蛍光検出器と化学発光用検出器を構成することがで
きるため、以下に示す測定が可能となる。すなわち、蛍
光測定終了後測定系に若干の変更を加えるだけ、すなわ
ち、フローセルの交換を行うことにより化学発光測定を
行うことができる。またその逆も同様に行える。そし
て、具体的な使用態様としては、尿中カテコールアミン
を、エチレンジアミンを蛍光試薬とする蛍光分析法によ
り測定する。測定終了後、測定系に反応系流路を付け加
え、血中カテコールアミンを化学発光分析法で分析す
る。

【００５０】また、蛍光分析法により目的物質を測定し
たところ、目的の検出感度が得られない場合、この目的
物質が化学発光反応に適していれば、測定系に若干の変
更を加えるだけで化学発光分析法により検出限界を向上
させ測定可能とするとができる。そして、具体的な使用
態様としては、化学物質ジピリダモールを蛍光分析法に
より測定したが目的とする感度が得られない場合、過シ
ュウ酸エステルと過酸化水素とを反応試薬とする化学発
光分析法により測定することにより検出限界を向上させ
ることができる。

【００５１】図４は、上記した第１実施例に示す装置の
実機の配置レイアウトを示している。同図に示すよう
に、この例では第１の分光器は、光路を変更する平面鏡
１２ａと回折格子１２ｂと、所定の光を集光してビーム
スプリッタ１３に照射するための凹面鏡１２ｃとから構
成される。すなわち、図省略の励起用光源からの励起光
は平面鏡１２ａによって反射され励起側凹面回折格子１
２ｂに達し、これにより各波長に分散される。分散され
た励起光は励起側集光鏡である凹面鏡１２ｃによって集
光され、蛍光用の第１のフローセル１５中の蛍光試料に
照射され励起するようになる。

【００５２】また、第１のフローセル１５から出射され
る蛍光を集光する集光レンズ１７の替わりに凹面鏡１
７′を用いている。さらに、その凹面鏡１７′を介して
集光された蛍光は、平面鏡３１を介して回折格子１８ｂ
に照射されるようになっている。このように、平面鏡を
用いて光路を変更したり、凹面鏡１７′を用いたのは、
各部品を効率よく配置し、小型化を図るためである。そ
して、化学発光用の第２の光検知器２５の設置位置は、
従来の専用の蛍光検出器においてもデッドスペースとな
っていた部分である。したがって、無駄な空間を利用し
て化学発光検出を行うための各部品を配置することによ
り、装置全体の寸法形状は、専用の蛍光検出器のものと
同一となる。そして、筐体等を共通して使用することが
できる。

【００５３】図５は本発明の第２実施例を示している。
本実施例では、上記した第１実施例を基本とし、蛍光検
出用と化学発光検出用の光検知器を共通化している。具
体的には、光検知器３５を移動手段たるターンテーブル
３６の上に設置し、水平平面内で正逆回転するようにな
っている。また、光検知器３５を共通化したため、使用
する光電子増倍管としては、化学反応検出器用に合わせ
た高感度のものを用いている。

【００５４】この光検知器３５の出力は、プリアンプ３
７を介して信号処理装置２２に入力するようしている。
さらに、フローセル１５，１６設置側と、光検出器３５
との間には、仕切り壁３８を設けるとともに、その仕切
り壁３８に形成された窓孔３８ａを塞ぐようにしてシャ
ッタ２７が設置される。

【００５５】シャッタ２７は、図示省略するソレノイド
等の駆動源により上記した第１実施例と同様に開閉する
ようになっている。そして、リミットスイッチ３０のオ
ン／オフに基づいてターンテーブル３６が所定方向に所
定角度回転し、また、シャッタ２７が開閉するようにな
る。さらに、信号処理装置２２に対しても係るオン／オ
フ信号が送られ、現在どちらの検知器として機能してい
るかを伝えるようになっている。それにともない、信号
処理装置２２で、プリアンプ２３からの信号の使用の有
無を判断し、プリアンプ３７から与えられる信号に対し
て所定の信号処理を行うようになる。なお、その他の構
成は、上記した第１実施例と同様であるため、同一符合
を付しその詳細な説明を省略する。

【００５６】次に、上記実施例の作用について説明す
る。まず、蛍光検出器として使用する場合には、同図
（Ａ）に示すように、ターンテーブル３６を作動させて
光検知器３５の受光面３５ａを第２の分光器１８の出射
スリット１８ｃに対向させる。なお、図中符合Ｐは回転
中心である。すると、回折格子１８ｂで分散された蛍光
が出射スリット１８ｃを介して光検知器３５に入射さ
れ、その光強度が検出される。そして、その検出信号が
プリアンプ３７を介して信号処理部２２に伝えられる。
また、第１の分光器１２から出力される励起光の一部が
励起用モニタ１４で検出され、プリアンプ２３を介して
信号処理装置２２に送られる。

【００５７】そして、信号処理装置２２では、プリアン
プ３７から与えられる補正前の蛍光信号をプリアンプ２
３から与えられる励起光モニタ信号で割る割り算処理が
行われ、その結果が補正後の蛍光信号として出力され
る。なお、フローセル１５に照射された励起光は、その
まま透過して直進するが、その光路上にはシャッタ２７
が設置されているため、光検知器３５に入射することは
ない。

【００５８】一方、化学発光検出器として使用する場合
には、同図（Ｂ）に示すように、化学発光用の第２のフ
ローセル１６を装置に挿入する。すると、第２のフロー
セルに付随するピン１６ｈによってマイクロスイッチ３
０が押され、蛍光測定モードから化学発光測定モードに
切り替わる。

【００５９】これにともない、電源を入れても励起光用
光源１１は点灯せず、第２のフローセル１６に励起光が
到達することはない。またターンテーブル３６が回転し
て光検知器３５の受光面３５ａが第２のフローセル１６
に対向するようになる。また、シャッタ２７が開く。こ
れにより、第２のフローセル１６内の試料が化学反応し
て発光した光は、仕切り壁３８の窓孔３８ａを通過して
光検知器３５に受光される。

【００６０】光検知器３５で検出された信号は、プリア
ンプ３７を介して信号処理装置２２に送られる。信号処
理装置２２では、プリアンプ２３から与えられる信号は
無効とし、上記プリアンプ２７のからの信号にのみ基づ
いて化学発光信号が生成され、出力される。

【００６１】本実施例では、蛍光検出用と化学発光検出
用の２つの光検知器を用意する必要がなく、装置の小型
化・単純化が可能となり操作性の向上及びコストの低減
が図れる。なおその他の構成並びに作用効果は上記した
第１実施例のものと同様であるため、その説明を省略す
る。

【００６２】図６は本発明の第３実施例を示している。
同図に示すように、本実施例では、第１実施例を基本と
し、蛍光検出器では必須の構成であった専用の励起光モ
ニタを省略し、第１実施例では蛍光検出を行っていると
きに使用していなかった第２の光検知器を励起光モニタ
として利用するようにしている。

【００６３】すなわち、第１実施例と同様に、蛍光検出
用の第１の光検知器１９と、化学発光検出用の第２の光
検知器２５とをそれぞれ所定の位置に設置する。そし
て、各検知器１９，２５で使用する光電子増倍管の性能
は、第１実施例と同様に、それぞに適したものを用い
る。

【００６４】ここで本実施例では、第１実施例と相違し
て、ビームスプリッタ，励起光モニタ並びにそれに接続
されるプリアンプを省略する。さらにシャッタ２７に替
えて減光器３９をソレノイド２８に装着し、開閉するよ
うにしている。そして、同図（Ａ）に示すように、蛍光
検出器として使用する場合には、減光器３９で第２の光
検知器２５の受光面を覆うようにする。すると、第１の
フローセル１５を透過した励起光が、減光器３９を通過
させることにより、その光強度が一定量弱められた状態
で第２の光検知器２５に受光され、励起光モニタとして
利用可能となっている。なお、その他の構成は、上記し
た第１，第２実施例と同様であるため、同一符合を付し
その詳細な説明を省略する。

【００６５】次に、上記実施例の作用について説明す
る。まず、蛍光検出器として使用する場合には、同図
（Ａ）に示すように、第１のフローセル１５を装着す
る。するとリミットスイッチ３０はオフのままであるの
で、減光器３９は第２の光検知器２５の受光面を覆い、
また励起用光源１１からは励起光が出射可能となる。さ
らに信号処理装置２２側では、現在蛍光検出器として機
能としていると認識する。

【００６６】この状態で励起用光源１１から励起光が出
射されると、第１の分光器１２で各波長毎に分散され、
その分散された励起光がそのまま第１のフローセル１５
のセル本体１５ｅ内の蛍光試料に照射される。すると、
蛍光試料から発生される蛍光は、上記した第１実施例と
同様の原理に従い信号処理装置２２に与えられる。

【００６７】一方、励起光はそのまま透過して直進する
が、本例ではその光路上に減光器３９，第２の光検知器
２５が配置されているため、減光器３９は一定量減光さ
れた後に第２の光検知器２５で受光される。また、蛍光
試料から発生する蛍光は、四方に向けて出射されるた
め、その一部は減光器３９を介して第２の光検知器２５
に受光される。しかし、その光強度は励起光の光強度に
比べて極めて小さいため無視できる。

【００６８】したがって、第２の光検知器２５で受光さ
れた光は、励起光に対応するので、その第２の光検知器
２５は第１実施例における励起光モニタとしての機能を
有する。したがって、第２の光検知器２５の出力は、第
１実施例における励起光モニタからの出力に相当する。
よって、信号処理装置２２では、プリアンプ２６から与
えられる信号を励起光モニタ信号とし、励起光の変動を
補正すべく、プリアンプ２０から与えられる蛍光信号を
上記励起光モニタ信号で割ることにより、補正後の蛍光
信号を求め、それを出力する。

【００６９】一方、化学発光検出器として使用する場合
には、化学発光用の第２のフローセル１６を装置に挿入
する。すると、第２のフローセルに付随するピン１６ｈ
によってマイクロスイッチ３０が押され、蛍光測定モー
ドから化学発光測定モードに切り替わる。すなわち、ソ
レノイド２８が作動して、第２の光検知器２５の受光面
を覆っていた減光器２７が外れる。したがって、同図
（Ｂ）のように構成され、上記した第１実施例の動作原
理と同様の原理により、化学発光の検出が行われる。

【００７０】本実施例では、専用の励起光モニタが不要
となるので、装置の小型化・単純化が可能となり操作性
の向上及びコストの低減が図れる。なおその他の構成並
びに作用効果は上記した第１実施例のものと同様である
ため、その説明を省略する。

【００７１】

【発明の効果】以上のように、本発明に係る液体クロマ
トグラフ用検出器では、フローセルを着脱自在にしたた
め、蛍光検出測定と化学発光測定に合わせてそれぞれ適
切なフローセルを用いることができる。また、光検知手
段も化学発光に合わせたものを使用することができる。
さらにフローセルと各光検知手段の配置も適切になる。
従って、１つの測定器でもって、実用に耐え得る感度で
化学発光と蛍光検出の両者を測定することができる。し
かも装置全体も大型化しない。

【００７２】請求項２の発明では、光検知手段を共有す
ることができるので、構成が簡略化されより小型化を図
る可能性が高まる。請求項４の発明では、補正用の励起
光検出手段（請求項３）を別途設ける必要がないので、
構成が簡略化されより小型化を図る可能性が高まる。部
品点数の削減に伴うコストの低減も図れる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の第１実施例を示す図である。

【図２】蛍光検出用の第１のフローセルの概略構成を示
す模式図である。

【図３】化学発光検出用の第２のフローセルの概略構成
を示す図である。

【図４】第１実施例の構成を実機に配置した状態を示す
平面図である。

【図５】本発明の第２実施例を示す図である。

【図６】本発明の第３実施例を示す図である。

【図７】従来の蛍光検出器を示す図である。

【符号の説明】

１１ 励起光用光源（励起光照射手段） １２ 第１の分光器（励起光照射手段） １３ ビームスプリッタ（光分離手段） １４ 励起光モニタ（励起光検出手段） １５ 第１のフローセル １６ 第２のフローセル １７ 集光レンズ １８ 第２の分光器（分光手段） １９ 第１の光検知器 ２２ 信号処理装置 ２５ 第２の光検知器 ２７ シャッタ（保護手段） ２８ ソレノイド（保護手段） ３０ マイクロスイッチ（フローセル検出手段） ３５ 光検知器 ３６ ターンテーブル（移動手段） ３９ 減光器

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 30/78 (72)発明者 橋本 茂徳 東京都八王子市石川町2967番地の５ 日本 分光株式会社内

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 検出器本体の同一箇所に対して蛍光検出
   用の第１のフローセルと、化学発光検出用の第２のフロ
   ーセルの一方を着脱自在に装着可能とし、 前記検出器本体内には、前記フローセルの設置箇所に対
   して励起光を照射する励起光照射手段と、 前記第１のフローセルを装着した際に、前記励起光の照
   射にともない発生する蛍光を波長毎に分散する分光手段
   と、 前記分光手段の出射側に配置され、前記分光手段から出
   射される蛍光を受光する第１の光検知手段と、 前記第２のフローセルを装着した際に、そのフローセル
   内の試料の化学反応に基づき発光する光を受光する第２
   の光検知手段と、 前記一方の光検知手段からの検出信号を受け、所定の信
   号処理を行い蛍光出力信号または化学発光出力信号を出
   力する信号処理手段と、 蛍光測定の際に前記第２の光検知手段に光が受光するの
   を抑制する保護手段とを備えた液体クロマトグラフ用検
   出器。
2. 【請求項２】 検出器本体の同一箇所に対して蛍光検出
   用の第１のフローセルと、化学発光検出用の第２のフロ
   ーセルの一方を着脱自在に装着可能とし、 前記検出器本体内には、前記フローセルの設置箇所に対
   して励起光を照射する励起光照射手段と、 前記第１のフローセルを装着した際に、前記励起光の照
   射にともない発生する蛍光を波長毎に分散する分光手段
   と、 光検知手段と、 前記光検知手段の受光面の位置を変えるように前記光検
   知手段を移動させる移動手段と、 前記光検知手段からの検出信号を受け、所定の信号処理
   を行い蛍光出力信号または化学発光出力信号を出力する
   信号処理手段と、 蛍光測定の際に前記第２の光検知手段に光が受光するの
   を抑制する保護手段とを備え、 前記移動手段は、前記受光面が、前記分光手段の出射側
   に対向して前記分光手段から出射される蛍光を受光する
   第１の位置と、前記第２の光検知手段を装着した際にそ
   のフローセル内の試料の化学反応に基づき発光する光を
   受光できる第２の位置に移動可能とした液体クロマトグ
   ラフ用検出器。
3. 【請求項３】 前記励起光の一部を取り出す光分離手段
   と、 その光分離手段により取り出された励起光を検出する励
   起光検出手段とをさらに備え、 前記信号処理装置にて蛍光出力信号を求める際に、前記
   励起光検出手段により検出された励起光信号と、前記第
   １の光検知手段により検出された蛍光信号に基づいて所
   定の演算処理を行うようにした請求項１または２に記載
   の液体クロマトグラフ用検出器。
4. 【請求項４】 検出器本体の同一箇所に対して蛍光検出
   用の第１のフローセルと、化学発光検出用の第２のフロ
   ーセルの一方を着脱自在に装着可能とし、 前記検出器本体内には、前記フローセルの設置箇所に対
   して励起光を照射する励起光照射手段と、 前記第１のフローセルを装着した際に、前記励起光の照
   射にともない発生する蛍光を波長毎に分散する分光手段
   と、 前記分光手段の出射側に配置され、前記分光手段から出
   射される蛍光を受光する第１の光検知手段と、 前記第２のフローセルを装着した際に、そのフローセル
   内の試料の化学反応に基づき発光する光を受光する第２
   の光検知手段と、 蛍光測定の際に前記第２の光検知手段の受光面の前に位
   置し励起光の光強度を低下させて受光させる減光手段
   と、 前記一方の光検知手段からの検出信号を受け、所定の信
   号処理を行い蛍光出力信号または化学発光出力信号を出
   力する信号処理手段とを備え、 前記蛍光測定の際には前記第２の光検知手段により検出
   された励起光信号と、前記第１の光検知手段により検出
   された蛍光信号に基づいて所定の演算処理を行うように
   し、 化学発光測定の際には、前記減光手段を移動させて前記
   試料の化学反応に基づき発光する光が前記減光手段を介
   することなく第２のフローセルに受光されるように構成
   した液体クロマトグラフ用検出器。
5. 【請求項５】 装着されたフローセルの種類を検出する
   フローセル検出手段と、 そのフローセル検出手段の検出結果に基づいて、前記保
   護手段の移動，前記移動手段の駆動，前記減光手段の移
   動または前記励起光照射手段の作動の少なくとも１つを
   制御するようにした請求項１〜４のいずれか１項に記載
   の液体クロマトグラフ用検出器。