JPH0763387B2 - テイコプラニン‐様誘導体 - Google Patents
テイコプラニン‐様誘導体Info
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- JPH0763387B2 JPH0763387B2 JP63172849A JP17284988A JPH0763387B2 JP H0763387 B2 JPH0763387 B2 JP H0763387B2 JP 63172849 A JP63172849 A JP 63172849A JP 17284988 A JP17284988 A JP 17284988A JP H0763387 B2 JPH0763387 B2 JP H0763387B2
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- teicoplanin
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/006—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
- C07K9/008—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明の目的は式 式中、Ｒは６−メチルオクタノイル及びｎ−ノナノイル
である、 の抗生物質テイコプラニン−様誘導体、その酸及び塩基
による付加塩である。
である、 の抗生物質テイコプラニン−様誘導体、その酸及び塩基
による付加塩である。
更に本発明の目的は該抗生物質を得る方法である。
テイコプラニンは、同化可能な炭素、窒素及び無機塩源
を含む培養媒質中で菌株アクチノプラネス・テイコミセ
テイカス（Actinoplanes teichomyceticus nov.sp.）AT
CC31121を培養することによつて得られる抗生物質であ
る。
を含む培養媒質中で菌株アクチノプラネス・テイコミセ
テイカス（Actinoplanes teichomyceticus nov.sp.）AT
CC31121を培養することによつて得られる抗生物質であ
る。
上記の菌株から得られる主な生成物は、通常テイコプラ
ニンとして示される３種の生因子（A1、A2及びA3）の混
合物である（米国特許第4,239,751号）。
ニンとして示される３種の生因子（A1、A2及びA3）の混
合物である（米国特許第4,239,751号）。
発酵汁から回収した生成物の精製によつて得られ且つグ
ラム陽性細菌に起因する感染の処置において化学療法的
用途に適するごく最近のテイコプラニン調製物［ウイリ
アムス（H.H.Williams）等；ジヤーナル・オブ・ホスピ
タル・インフエクシヨン（Journal of Hospital Infect
ion）、７（補足Ａ）、101〜103（1986）］は大部分の
成分として、５種の構造的に類似した物質の複合体を含
み、このものは全体として通常テイコプラニン因子A2と
して示される。上記の５種の類似した関連物質は相次い
で単離され、複合体の単一成分として同定され、このも
のは最近、科学誌及び特許文献において「テイコプラニ
ンA2」または「テイコプラニン複合体」として表示され
ている。
ラム陽性細菌に起因する感染の処置において化学療法的
用途に適するごく最近のテイコプラニン調製物［ウイリ
アムス（H.H.Williams）等；ジヤーナル・オブ・ホスピ
タル・インフエクシヨン（Journal of Hospital Infect
ion）、７（補足Ａ）、101〜103（1986）］は大部分の
成分として、５種の構造的に類似した物質の複合体を含
み、このものは全体として通常テイコプラニン因子A2と
して示される。上記の５種の類似した関連物質は相次い
で単離され、複合体の単一成分として同定され、このも
のは最近、科学誌及び特許文献において「テイコプラニ
ンA2」または「テイコプラニン複合体」として表示され
ている。
テイコプラニン複合体の５種の大部分の成分（通常の名
称:TA2−１、TA2−２、TA2−３、TA2−４及びTA2−５）
は上記の一般式（Ｉ）によつて表わすことができる： 但し、Ｒはそれぞれ次のとおりである： TA2−１）:N−（Ｚ−４−デセノイル）； TA2−２）:N−（８−メチルノナノイル）； TA2−３）:N−デカノイル； TA2−４）:N−（８−メチルデカノイル）； TA2−５）;N−（９−メチルデカノイル）。
称:TA2−１、TA2−２、TA2−３、TA2−４及びTA2−５）
は上記の一般式（Ｉ）によつて表わすことができる： 但し、Ｒはそれぞれ次のとおりである： TA2−１）:N−（Ｚ−４−デセノイル）； TA2−２）:N−（８−メチルノナノイル）； TA2−３）:N−デカノイル； TA2−４）:N−（８−メチルデカノイル）； TA2−５）;N−（９−メチルデカノイル）。
テイコプラニン複合体におけるその個々の比は、ヨーロ
ツパ特許出願公告（E.P.A.publication）第204179号に
記載された如く、発酵条件及び発酵媒質に加える前駆物
質に従つて変えることができる。
ツパ特許出願公告（E.P.A.publication）第204179号に
記載された如く、発酵条件及び発酵媒質に加える前駆物
質に従つて変えることができる。
本発明の化合物はアクチノプラネス・テイコミセテイカ
ス菌株の発酵によつて得ることができる。殊に、社内コ
ードNo.A−184によつて特徴づけられるアクチノプラネ
ス・テイコミセテイカスの菌株は上記のテイコプラニン
−様誘導体の適当な生産菌である。該菌株の試料は、特
許方法の目的に対する微生物の寄託の国際的承認に関す
ブダペスト条約によつて定められた条件下で、ATCC［ア
メリカン・タイプ・カルチヤー・コレクシヨン（Americ
an Type Culture Collection、12301 Parklawn Drive、
Rockville、MD 20852 U.S.A.］に1987年７月21日に寄託
されており、このものはATCC No.53649で表示されてい
る。
ス菌株の発酵によつて得ることができる。殊に、社内コ
ードNo.A−184によつて特徴づけられるアクチノプラネ
ス・テイコミセテイカスの菌株は上記のテイコプラニン
−様誘導体の適当な生産菌である。該菌株の試料は、特
許方法の目的に対する微生物の寄託の国際的承認に関す
ブダペスト条約によつて定められた条件下で、ATCC［ア
メリカン・タイプ・カルチヤー・コレクシヨン（Americ
an Type Culture Collection、12301 Parklawn Drive、
Rockville、MD 20852 U.S.A.］に1987年７月21日に寄託
されており、このものはATCC No.53649で表示されてい
る。
ATCC No.53649によつて証明された上記の菌株は、Ｎ−
メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンで処理
して得られ、そしてテイコプラニン複合体の５種の大部
分の成分とは異なるテイコプラニン−様抗生物質の実質
的な量を生産し得るその能力に基づいて選ばれたテイコ
プラニン・テイコミセテイカスATCC31121の人工的突然
変位体である。
メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンで処理
して得られ、そしてテイコプラニン複合体の５種の大部
分の成分とは異なるテイコプラニン−様抗生物質の実質
的な量を生産し得るその能力に基づいて選ばれたテイコ
プラニン・テイコミセテイカスATCC31121の人工的突然
変位体である。
突然変位体Ａ−184は、米国特許第4,239,751号に記載さ
れた親菌株ATCC31121と同一の形態学的及び生理学的特
徴を示す。
れた親菌株ATCC31121と同一の形態学的及び生理学的特
徴を示す。
また本発明の抗生物質の少量を適当な発酵条件下で親菌
株アクチノプラネス・テイコミセテイカスATCC31121に
よつて生産することができるが、しかし、該微生物によ
つて生産せれたテイコプラニン複合体の大部分の成分の
かなり多量から本化合物の少量を単離することは困難で
あり、実験目的及び実際の量に適する規模で所望の化合
物を得るためには実用的でない。
株アクチノプラネス・テイコミセテイカスATCC31121に
よつて生産することができるが、しかし、該微生物によ
つて生産せれたテイコプラニン複合体の大部分の成分の
かなり多量から本化合物の少量を単離することは困難で
あり、実験目的及び実際の量に適する規模で所望の化合
物を得るためには実用的でない。
また突然変位体Ａ−184は本発明の新規化合物と共に、
テイコプラニン複合体の大部分の成分のある量を生産す
るが、しかし、発酵汁におけるその相対比は親菌株から
得られる比よりもかなり低い。従つて、突然変位体Ａ−
184の発酵汁から新規化合物の分離及び回収はより簡単
であり、新規のテイコプラニン−様誘導体の実質的な量
を得ることができる。
テイコプラニン複合体の大部分の成分のある量を生産す
るが、しかし、発酵汁におけるその相対比は親菌株から
得られる比よりもかなり低い。従つて、突然変位体Ａ−
184の発酵汁から新規化合物の分離及び回収はより簡単
であり、新規のテイコプラニン−様誘導体の実質的な量
を得ることができる。
本発明の化合物を製造するために、アクチノプラネス・
テイコミセテイカスを生産する菌株を、同化可能な炭
素、窒素及び無機塩源を含む水性培養媒質中にて好気性
条件下で発酵させる。
テイコミセテイカスを生産する菌株を、同化可能な炭
素、窒素及び無機塩源を含む水性培養媒質中にて好気性
条件下で発酵させる。
好ましい炭素源はグルコース、マンノース、ガラクトー
ス、澱粉、トウモロコシ粉等である。好ましい窒素源は
アンモニア、ナイトレート、大豆粉、ペプトン、肉エキ
ス、酵母エキス、トリプトン、アミノ酸、等である。培
養媒質に配合し得る無機塩の中には、ナトリウム、カリ
ウム、鉄、亜鉛、コバルト、マンガン、マグネシウム、
カルシウム、アンモニウム、クロライド、アイオダイ
ド、カルボネート、サルフエート、ホスフエート、ナイ
トレート等のイオンを生じ得る普通の可溶性塩がある。
ス、澱粉、トウモロコシ粉等である。好ましい窒素源は
アンモニア、ナイトレート、大豆粉、ペプトン、肉エキ
ス、酵母エキス、トリプトン、アミノ酸、等である。培
養媒質に配合し得る無機塩の中には、ナトリウム、カリ
ウム、鉄、亜鉛、コバルト、マンガン、マグネシウム、
カルシウム、アンモニウム、クロライド、アイオダイ
ド、カルボネート、サルフエート、ホスフエート、ナイ
トレート等のイオンを生じ得る普通の可溶性塩がある。
通常、抗生物質を生産する菌株をフラスコ中で予備培養
し、次に抗生物質の実質的な量を生産するために、この
培養液をびん発酵器に接種するために用いる。予備培養
に用いた媒質は多量発酵に用いる媒質と同一であること
ができるが、しかし、また他の媒質を用いることもでき
る。生産−菌株を20乃至40℃間、好ましくは26乃至32℃
間の温度で増殖させることができる。
し、次に抗生物質の実質的な量を生産するために、この
培養液をびん発酵器に接種するために用いる。予備培養
に用いた媒質は多量発酵に用いる媒質と同一であること
ができるが、しかし、また他の媒質を用いることもでき
る。生産−菌株を20乃至40℃間、好ましくは26乃至32℃
間の温度で増殖させることができる。
発酵中の、抗生物質生産を、例えば生物検査、TLCまた
はHPLC方によつて、抗生物質活性に対する汁または菌糸
体試料を試験することによつて監視することができる。
はHPLC方によつて、抗生物質活性に対する汁または菌糸
体試料を試験することによつて監視することができる。
試験細菌として、本発明の抗生物質に対して敏感な細
菌、例えば枯草菌（Bacillus subtills）及び黄色ブド
ウ球菌（S.aureus）を用いることができる。生物検査は
寒天プレート上で寒天拡散法によつて有利に行われる。
一般に、抗生物質活性の最大生産は接種後、２日乃至５
日間で起こる。
菌、例えば枯草菌（Bacillus subtills）及び黄色ブド
ウ球菌（S.aureus）を用いることができる。生物検査は
寒天プレート上で寒天拡散法によつて有利に行われる。
一般に、抗生物質活性の最大生産は接種後、２日乃至５
日間で起こる。
生産細菌の発酵汁から本発明の抗生物質の回収はそれ自
体公知の方法に従つて行われ、該方法には溶媒による抽
出、非溶媒の添加によるかまたは溶液のpH値の変化によ
る沈澱、分配クロマトグラフイー、逆相分配クロマトグ
ラフイー、イオン交換クロマトグラフイー、アフイニテ
イクロマトグラフイー等が含まれる。
体公知の方法に従つて行われ、該方法には溶媒による抽
出、非溶媒の添加によるかまたは溶液のpH値の変化によ
る沈澱、分配クロマトグラフイー、逆相分配クロマトグ
ラフイー、イオン交換クロマトグラフイー、アフイニテ
イクロマトグラフイー等が含まれる。
好ましい方法には固定化されたＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ニン上でアフイニテイクロマトグラフイー、続いて逆相
カラムクロマトグラフイーが含まれる。
ニン上でアフイニテイクロマトグラフイー、続いて逆相
カラムクロマトグラフイーが含まれる。
本回収法に適する固定化されたＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ニンマトリツクスはヨーロツパ特許出願公告明細書第12
2969号に記載されている。本方法における好ましいマト
リツクスは調節された細孔の交差結合したポリデキスト
ランでカツプリングしたＤ−アラニル−Ｄ−アラニンで
ある。
ニンマトリツクスはヨーロツパ特許出願公告明細書第12
2969号に記載されている。本方法における好ましいマト
リツクスは調節された細孔の交差結合したポリデキスト
ランでカツプリングしたＤ−アラニル−Ｄ−アラニンで
ある。
発酵汁を濾過後、または予備精製後、直接アフイニテイ
クロマトグラフイーにかけることができる。後者の方法
には、菌糸体に吸着した抗生物質を溶解するために、全
体の発酵塊を塩基性、好ましくはpH値９乃至11.5間に
し、次に濾過する方法が含まれる。透明な濾液をpH値７
乃至８間にし、次に固定化したＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ニン上で、カラムまたは回分式でアフイニテイクロマト
グラフイーにかける。
クロマトグラフイーにかけることができる。後者の方法
には、菌糸体に吸着した抗生物質を溶解するために、全
体の発酵塊を塩基性、好ましくはpH値９乃至11.5間に
し、次に濾過する方法が含まれる。透明な濾液をpH値７
乃至８間にし、次に固定化したＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ニン上で、カラムまたは回分式でアフイニテイクロマト
グラフイーにかける。
溶離は水性塩基によつてより塩基性pH値（好ましくは9.
0乃至11.0間）で行われる。この水性塩基はアンモニ
ア、揮発性アミン、アルカリ金属もしくはアルカリ土類
金属水酸化物または随時有極性有機溶媒、例えば有極性
の水−混和性溶媒の存在下における塩基性緩衝溶液であ
ることができる。フラクシヨンを捕集し、酸（有機酸ま
たは無機酸、好ましくはギ酸）で中和し、そして本発明
の化合物の処理可能な量を含むフラクシヨンを個別化す
るためにHPLCによつて試験する（「処理可能な量」なる
用語は、テイコプラニン複合体の大部分の成分と共に溶
離した溶液中に含まれる所望の化合物（複数）の量が普
通の分離及び精製法によつて目に見えるほどの量で単離
を可能にするために十分な量であることを意味するもの
とする）。通常、テイコプラニン及びテイコプラニン−
様生成物に関して、全HPLC面積において所望の化合物の
１つの少なくとも２％を含有する溶離されたフラクシヨ
ンは所望の化合物の「処理可能な量」を含むものとみな
す。実施例2.2.3の条件下で、Ｒが６−メチルオクタノ
イルである式Ｉの化合物（化合物Ａ）は19.93分の保持
時間（RT）値を有し、一方、Ｒがｎ−ノナノイルである
化合物（化合物Ｂ）は20.96分のRT値を有する。参照と
して、同一操作条件下で、TA2−２に対するRT値は24.71
分である。
0乃至11.0間）で行われる。この水性塩基はアンモニ
ア、揮発性アミン、アルカリ金属もしくはアルカリ土類
金属水酸化物または随時有極性有機溶媒、例えば有極性
の水−混和性溶媒の存在下における塩基性緩衝溶液であ
ることができる。フラクシヨンを捕集し、酸（有機酸ま
たは無機酸、好ましくはギ酸）で中和し、そして本発明
の化合物の処理可能な量を含むフラクシヨンを個別化す
るためにHPLCによつて試験する（「処理可能な量」なる
用語は、テイコプラニン複合体の大部分の成分と共に溶
離した溶液中に含まれる所望の化合物（複数）の量が普
通の分離及び精製法によつて目に見えるほどの量で単離
を可能にするために十分な量であることを意味するもの
とする）。通常、テイコプラニン及びテイコプラニン−
様生成物に関して、全HPLC面積において所望の化合物の
１つの少なくとも２％を含有する溶離されたフラクシヨ
ンは所望の化合物の「処理可能な量」を含むものとみな
す。実施例2.2.3の条件下で、Ｒが６−メチルオクタノ
イルである式Ｉの化合物（化合物Ａ）は19.93分の保持
時間（RT）値を有し、一方、Ｒがｎ−ノナノイルである
化合物（化合物Ｂ）は20.96分のRT値を有する。参照と
して、同一操作条件下で、TA2−２に対するRT値は24.71
分である。
所望の化合物の処理可能な量を含むフラクシヨンをプー
ルし、限外濾過によつて濃縮し、次に凍結乾燥する。
ルし、限外濾過によつて濃縮し、次に凍結乾燥する。
凍結乾燥による粗製の生成物を有極性の非プロトン性有
機溶媒に溶解し、次に移動相として有極性の非プロトン
性有機溶媒及び水性アンモニウム塩の勾配溶離混合物を
用いて、数回に分けて半分取HPLCにかける。
機溶媒に溶解し、次に移動相として有極性の非プロトン
性有機溶媒及び水性アンモニウム塩の勾配溶離混合物を
用いて、数回に分けて半分取HPLCにかける。
極性の非プロトン性有機溶媒の例は（C1〜C4）アルキ
ル、低級アルキルアミドまたはチオアミド、例えば好ま
しくはジメチルホルムアミドまたはジエチルホルムアミ
ドである。
ル、低級アルキルアミドまたはチオアミド、例えば好ま
しくはジメチルホルムアミドまたはジエチルホルムアミ
ドである。
アンモニウム塩の例はギ酸アンモニウム、酢酸アンモニ
ウム、ギ酸メチルアンモニウムであり；ギ酸アンモニウ
ムが好ましい。
ウム、ギ酸メチルアンモニウムであり；ギ酸アンモニウ
ムが好ましい。
この場合、固定相は好ましくはシラン化されたシリカゲ
ル、即ち、（C8〜C22）アルキル基で機能化したシリカ
ゲルである。
ル、即ち、（C8〜C22）アルキル基で機能化したシリカ
ゲルである。
好ましい移動相は0.02Mギ酸アンモニウム／アセトニト
リル95:5及び0.02Mギ酸アンモニウム／アセトニトリル2
5:75の混合物によつて表わされる。
リル95:5及び0.02Mギ酸アンモニウム／アセトニトリル2
5:75の混合物によつて表わされる。
分取HPLCにかけた各部分の溶離液から、それぞれ化合物
Ａ及びＢを大部分の生成物として（HPLC分析）含むフラ
クシヨンを単離し、そして他の部分のフラクシヨンと合
わせる。例えば典型的な操作においては、２種の溶液が
得られ、その最初の溶液はｎ−ノナノイル化合物の少量
（約1.5％）と共に６−メチルオクタノイル誘導体約80
％を含有し、一方、第二の溶液は６−メチルオクタノイ
ル化合物約６％と共にｎ−ノナノイル化合物約90％を含
有する。
Ａ及びＢを大部分の生成物として（HPLC分析）含むフラ
クシヨンを単離し、そして他の部分のフラクシヨンと合
わせる。例えば典型的な操作においては、２種の溶液が
得られ、その最初の溶液はｎ−ノナノイル化合物の少量
（約1.5％）と共に６−メチルオクタノイル誘導体約80
％を含有し、一方、第二の溶液は６−メチルオクタノイ
ル化合物約６％と共にｎ−ノナノイル化合物約90％を含
有する。
２種の溶液を減圧下で濃縮し、限外濾過し、次に凍結乾
燥し、２種の固体生成物が得られ、このものを更に半分
取HPLCにくり返しかけて精製し、式Ｉの純粋な化合物が
得られ、その特徴的なデータを実施例に示した。
燥し、２種の固体生成物が得られ、このものを更に半分
取HPLCにくり返しかけて精製し、式Ｉの純粋な化合物が
得られ、その特徴的なデータを実施例に示した。
すでに述べた如く、本発明の抗生物質は酸及び塩基性機
能を有し、普通の方法に従つて塩を生成させることがで
きる。
能を有し、普通の方法に従つて塩を生成させることがで
きる。
式Ｉの化合物の典型的且つ適当な酸付加塩には有機酸及
び無機酸の双方、例えば塩化水素酸、硫酸、リン酸、酢
酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、コハク酸、ク
エン酸、アスコルビン酸、乳酸、マレイン酸、フマル
酸、パルミチン酸、コール酸、パモイン酸、粘液酸、グ
ルタミン酸、シヨウノウ酸、グルタル酸、グリコール
酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サ
リチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソ
ルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸等との標準
反応によつて生成した塩が含まれる。
び無機酸の双方、例えば塩化水素酸、硫酸、リン酸、酢
酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、コハク酸、ク
エン酸、アスコルビン酸、乳酸、マレイン酸、フマル
酸、パルミチン酸、コール酸、パモイン酸、粘液酸、グ
ルタミン酸、シヨウノウ酸、グルタル酸、グリコール
酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サ
リチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソ
ルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸等との標準
反応によつて生成した塩が含まれる。
塩基の典型的な例は次のものである：アルカリ金属また
はアルカリ土類金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム及び水酸化カルシウム；アンモニア
及び有機アミン、即ち、脂肪族、脂環式または芳香族ア
ミン、例えばメチルアミン、ジメチルアミン、トリエチ
ルアミン、ジメチルアニリン及びピコリン。
はアルカリ土類金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム及び水酸化カルシウム；アンモニア
及び有機アミン、即ち、脂肪族、脂環式または芳香族ア
ミン、例えばメチルアミン、ジメチルアミン、トリエチ
ルアミン、ジメチルアニリン及びピコリン。
本発明の遊離アミノまたは非−塩化合物の対応する付加
塩への転化及びその逆、即ち、本発明の化合物の付加塩
の非−塩型への転化は通常の技術範囲内であり、そして
本発明に包含される。
塩への転化及びその逆、即ち、本発明の化合物の付加塩
の非−塩型への転化は通常の技術範囲内であり、そして
本発明に包含される。
例えば本発明の化合物を、その非−塩型を水性溶媒に溶
解し、そして選んだ酸または塩基のややモル過剰量を加
えることにより、対応する酸または塩基付加塩に転化す
ることができる。次に生ずる溶液または懸濁液を凍結乾
燥し、所望の塩を回収する。
解し、そして選んだ酸または塩基のややモル過剰量を加
えることにより、対応する酸または塩基付加塩に転化す
ることができる。次に生ずる溶液または懸濁液を凍結乾
燥し、所望の塩を回収する。
非−塩型が溶解する有機溶媒に目的の塩が不溶性である
場合、選んだ酸または塩基の化学量論的量またはややモ
ル過剰量の添加後、非−塩型の有機溶液から濾過によつ
て塩を回収する。
場合、選んだ酸または塩基の化学量論的量またはややモ
ル過剰量の添加後、非−塩型の有機溶液から濾過によつ
て塩を回収する。
非−塩型は水性溶媒に溶解した対応する酸または塩基塩
から、非−塩型を遊離させるために中和することによつ
て製造することができる。
から、非−塩型を遊離させるために中和することによつ
て製造することができる。
中和に続いて脱塩を必要とする場合、普通の脱塩法を用
いることができる。
いることができる。
例えばシラン化したシリカゲル、非官能化したポリスチ
レン、アクリル性及び調節された細孔径のポリデキスト
ラン樹脂（例えばSephadex LH20）におけるクロマトグ
ラフイーまたは活性炭を有利に用いることができる。望
まぬ塩を水溶液で溶離した後、水及び有極性または非極
性有機溶媒の混合物の直線勾配溶離法または段階勾配溶
離法を用いて、例えばアセトニトリル／水の50:50から
アセトニトリル約100％までを用いて所望の生成物を溶
離する。
レン、アクリル性及び調節された細孔径のポリデキスト
ラン樹脂（例えばSephadex LH20）におけるクロマトグ
ラフイーまたは活性炭を有利に用いることができる。望
まぬ塩を水溶液で溶離した後、水及び有極性または非極
性有機溶媒の混合物の直線勾配溶離法または段階勾配溶
離法を用いて、例えばアセトニトリル／水の50:50から
アセトニトリル約100％までを用いて所望の生成物を溶
離する。
当該分野において公知の如く、有利な精製法として、製
薬学的に許容し得る酸（塩基）または製薬学的に許容し
得ぬ酸（塩基）による塩生成法を用いることができる。
生成させ、そして単離した後、式Ｉの抗生物質の塩型を
対応する非−塩または製薬学的に許容し得る塩に添加す
ることができる。
薬学的に許容し得る酸（塩基）または製薬学的に許容し
得ぬ酸（塩基）による塩生成法を用いることができる。
生成させ、そして単離した後、式Ｉの抗生物質の塩型を
対応する非−塩または製薬学的に許容し得る塩に添加す
ることができる。
本発明のテイコプラニン−様化合物は多くの広い汎発性
感染に対して反応するグラム陽性バクテリアに対して活
性であり、従つて、本化合物は薬剤の製造に対して有用
である。しかしながら、本発明の化合物を動物生長促進
剤として、即ち、肉またはミルク生産動物の飼料量性を
増加させるために用いることができる。
感染に対して反応するグラム陽性バクテリアに対して活
性であり、従つて、本化合物は薬剤の製造に対して有用
である。しかしながら、本発明の化合物を動物生長促進
剤として、即ち、肉またはミルク生産動物の飼料量性を
増加させるために用いることができる。
本発明の化合物の抗バクテリア活性（antibacterial ac
tivity）を異なる細菌培養液について、標準希釈試験に
よつて試験管内で立証することができる。
tivity）を異なる細菌培養液について、標準希釈試験に
よつて試験管内で立証することができる。
MIC（最小抑制濃度）に対する培養媒質及び増殖条件は
次の通りである：ブドウ球菌（staphylococci）、大便
連鎖球菌）Strep.faecalis）及びグラム陰性パクテリア
［大腸菌（Escherichiacoli）］に対して、等感作試験
肉汁（Isosensitestbroth）［オキソイド（Oxoid）］、
24時間；他の連鎖球菌種に対して、トツド−ヘウイツト
（Todd−Hewitt）肉汁［デイフコ（Difco）］、24時
間；淋菌（Neisseria qonorrhoeae）に対して、GCベー
ス肉汁（Difco）＋１％イソビタレツクス（Isovitale
x）（BBL）、48時間、CO2に富んだ雰囲気；インフルエ
ンザ菌（Haemophilus influenzae）に対して、脳心臓肉
汁（Difco）＋１％補足（Supplement）Ｃ（Difco）、48
時間；接種物は肉汁希釈MIClml当り約104〜105集落−生
成単位であつた。
次の通りである：ブドウ球菌（staphylococci）、大便
連鎖球菌）Strep.faecalis）及びグラム陰性パクテリア
［大腸菌（Escherichiacoli）］に対して、等感作試験
肉汁（Isosensitestbroth）［オキソイド（Oxoid）］、
24時間；他の連鎖球菌種に対して、トツド−ヘウイツト
（Todd−Hewitt）肉汁［デイフコ（Difco）］、24時
間；淋菌（Neisseria qonorrhoeae）に対して、GCベー
ス肉汁（Difco）＋１％イソビタレツクス（Isovitale
x）（BBL）、48時間、CO2に富んだ雰囲気；インフルエ
ンザ菌（Haemophilus influenzae）に対して、脳心臓肉
汁（Difco）＋１％補足（Supplement）Ｃ（Difco）、48
時間；接種物は肉汁希釈MIClml当り約104〜105集落−生
成単位であつた。
いくつかの細菌に対する上記のテイコプラニン−様誘導
体の最小抑制濃度（MIC、μg/ml）を次の第Ｉ表に示
す。
体の最小抑制濃度（MIC、μg/ml）を次の第Ｉ表に示
す。
薬剤として用いる際、本発明のテイコプラニン−様誘導
体を、遊離化合物として、またはその製薬学的に許容し
得る塩の形態で、異なる径路によつて投与することがで
きる。一般に非経腸投与が好ましい径路である。
体を、遊離化合物として、またはその製薬学的に許容し
得る塩の形態で、異なる径路によつて投与することがで
きる。一般に非経腸投与が好ましい径路である。
この目的のために、本発明の化合物は好ましくは、普通
の担体を用いて、投与する製薬学的組成物に調製物化す
ることができる。
の担体を用いて、投与する製薬学的組成物に調製物化す
ることができる。
注射用組成物が好ましく、該組成物は油または水性賦形
剤中の懸濁液、溶液または乳液としての形態であること
ができ、補助剤、例えば懸濁液、安定剤及び／または分
散剤を含ませることができる。
剤中の懸濁液、溶液または乳液としての形態であること
ができ、補助剤、例えば懸濁液、安定剤及び／または分
散剤を含ませることができる。
また、活性成分は、適当な賦形剤、例えば無菌水をこれ
に加えて、使用時に再生するための粉末、形態であるこ
とができる。
に加えて、使用時に再生するための粉末、形態であるこ
とができる。
投与径路に応じて、本化合物を種々な投与形態に調製物
化することができる。
化することができる。
ある場合には、経口投与のために本発明の化合物を腸溶
皮投与形態に調製物化することが可能であり、該調製物
は当該分野において公知の如くして製造することができ
る［例えば「レミグトンズ・フアーマシユーテイカル・
サイエンシイーズ」（“Remington′s Pharmaceutical
Sciences"）、1614頁、第15版、マツク・パブリツシン
グ・カンパニイー（Mack Publishing Company）、East
on,pennsylvania,USA参照］。
皮投与形態に調製物化することが可能であり、該調製物
は当該分野において公知の如くして製造することができ
る［例えば「レミグトンズ・フアーマシユーテイカル・
サイエンシイーズ」（“Remington′s Pharmaceutical
Sciences"）、1614頁、第15版、マツク・パブリツシン
グ・カンパニイー（Mack Publishing Company）、East
on,pennsylvania,USA参照］。
腸管内で抗微生物物質の吸収が胃管を通して未変化で通
過することが殊に望ましい場合に、特に上記のことが可
能である。
過することが殊に望ましい場合に、特に上記のことが可
能である。
投与する活性物質の量は種々な因子、例えば処置する患
者の大きさ及び症状、投与経路及び回数、並びに含まれ
る薬剤に依存する。
者の大きさ及び症状、投与経路及び回数、並びに含まれ
る薬剤に依存する。
本発明の抗生物質及びその生理学的に許容し得る塩は一
般に患者の体重1kg当り約１乃至20mg間の１日当りの投
薬量で有効であり、場合によつては、１日当り１〜４回
に分けて投与する。
般に患者の体重1kg当り約１乃至20mg間の１日当りの投
薬量で有効であり、場合によつては、１日当り１〜４回
に分けて投与する。
殊に望ましい組成物は単位当り約50乃至2000mgを含有す
る投与単位として調製したものである。
る投与単位として調製したものである。
徐放性調製ものは当該分野において公知の如く、異なる
機構及び方法に基づいて製造することができる。
機構及び方法に基づいて製造することができる。
本発明のテイコプラニン−様抗生物質を含む徐放性調製
物を製造する好ましい方法には水性または油性媒質に懸
濁させた抗生物質の水不溶性型の使用が含まれる。
物を製造する好ましい方法には水性または油性媒質に懸
濁させた抗生物質の水不溶性型の使用が含まれる。
生長促進剤として使用するために、本発明の化合物を適
当な飼料として経口的に投与する。用いる正確な濃度
は、飼料の正常量を消費する場合、生長促進有効量にお
いて活性剤を与えるために必要な濃度である。
当な飼料として経口的に投与する。用いる正確な濃度
は、飼料の正常量を消費する場合、生長促進有効量にお
いて活性剤を与えるために必要な濃度である。
動物飼料に本発明の活性化合物の添加は、好ましくは活
性化合物の有効量を含む適当な飼料予備混合物を製造
し、この予備混合物を完全飼料に配合することによつて
行われる。
性化合物の有効量を含む適当な飼料予備混合物を製造
し、この予備混合物を完全飼料に配合することによつて
行われる。
また、活性成分を含む中間濃厚物または飼料補足物を司
郎に配合することができる。
郎に配合することができる。
かかる飼料予備混合物及び完全飼料を製造し、そして投
与し得る方法は参考図書に記載されており［例えば「ア
プライド・アニマル・ヌートリツシヨン」（“Applied
Animal Nutrition"）、ダブリユ・エイチ・フリードマ
ン・アンド・カンパニイー（W.H.Freedman and Co.）、
サンフランシスコ（S.Francisco）、USA、1969、または
「ライブストツク・フイーズ・アンド・フイーデイン
グ」（“Livestock Feeds and Feeding"）、オー・アン
ド・ビー・ブツクス（O and B Books）、カルバリス（C
orvallis）、オレゴン（Oregon）、USA、1977）］、そ
して、これを本明細書に参照として加える。
与し得る方法は参考図書に記載されており［例えば「ア
プライド・アニマル・ヌートリツシヨン」（“Applied
Animal Nutrition"）、ダブリユ・エイチ・フリードマ
ン・アンド・カンパニイー（W.H.Freedman and Co.）、
サンフランシスコ（S.Francisco）、USA、1969、または
「ライブストツク・フイーズ・アンド・フイーデイン
グ」（“Livestock Feeds and Feeding"）、オー・アン
ド・ビー・ブツクス（O and B Books）、カルバリス（C
orvallis）、オレゴン（Oregon）、USA、1977）］、そ
して、これを本明細書に参照として加える。
実施例１ アクチノプラネス・テイコミセテイカス突然変異体菌株
Ａ−184）（ATCC53649）の単離 1ml当り108〜109個の細胞を含むS/ビス培養汁中の微生
物菌株アクチノプラネス・テイコミセテイカスATCC3112
1の細胞懸濁液をリン酸塩剤（pH7.0）の存在下において
Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（100μg/ml）で60分間処理した。
Ａ−184）（ATCC53649）の単離 1ml当り108〜109個の細胞を含むS/ビス培養汁中の微生
物菌株アクチノプラネス・テイコミセテイカスATCC3112
1の細胞懸濁液をリン酸塩剤（pH7.0）の存在下において
Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン
（100μg/ml）で60分間処理した。
次に、懸濁液の試料0.1mlを新しいS/ビス培養媒質、 グルコース 10 g/ バクト・ペプトン・デイフコ ４ g/ バクト酵母エキス・デイフコ ４ g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ KH2PO4 ２ g/ K2HPO4 ４ g/ pH＝７、滅菌後 の10mlに再懸濁させ、そしてSM媒質、 グルコース 10 g/ バクト・ペプトン・デイフコ ４ g/ バクト酵母エキス・デイフコ ４ g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ KH2PO4 ２ g/ K2HPO4 ４ g/ 寒天デイフコ 20 g/ 滅菌:121℃で５分間 に異なる希釈率（生理学的溶液中10-3〜10-6）で塗布
し、20℃で13日間培養した。
し、20℃で13日間培養した。
得られた集落を無作為に取り出し、媒質Ｃ、 グルコース（ａ） ２ g/ 酵母エキス ５ g/ アスパラギン 1.5g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ CaCO3 ５ g/ NaCl 0.1g/ CaCl2・2H2O 0.1g/ 鉱質補足物（ｂ） 1 ml/ pH＝6.9、滅菌後 （ａ） グルコースを別個に滅菌した （ｂ） 鉱質補足組成物： ホウ酸 0.50g/ CuSO4・5H2O 0.40g/ KI 0.10g/ FeCl3・6H2O 0.20g/ MnSO4・H2O 0.40g/ FeSO4・7H2O 0.40g/ モリブデン酸アンモニウム 0.20g/ の100mlを含有する容量500mlのエルレンマイヤーフラス
コ中で発酵させた。
コ中で発酵させた。
次に培養汁を実施例２の方法に従つて、HPLCによつて分
析し、テイコプラニン複合体の５種の大部分の成分、個
とにRT値19.93及び20.96をそれぞれ示化合物から異なる
テイコプラニン−様化合物をこれらの培養液が生産した
ことを確認した。
析し、テイコプラニン複合体の５種の大部分の成分、個
とにRT値19.93及び20.96をそれぞれ示化合物から異なる
テイコプラニン−様化合物をこれらの培養液が生産した
ことを確認した。
該培養を選び、別に保持し、そして凍結した。
実施例２ Ｒが６−メチルオクタノイル（化合物Ａ）及びｎ−ノナ
ノイル（化合物Ｂ）である式Ｉの化合物の製造 2.1 発酵 2.1.1 培養質 S/ビス： グルコース 10 g/ バクト・ペプトン・デイフコ ４ g/ バクト酵母エキス・デイフコ ４ g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ KH2PO4 ２ g/ K2HPO4 ４ g/ pH＝７、滅菌後 媒質C: グルコース（ａ） ２ g/ 酵母エキス ５ g/ アスパラギン 1.5g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ CaCO3 ５ g/ NaCl 0.1g/ CaCl2・2H2O 0.1g/ 鉱質補足物（ｂ） 1 ml/ pH＝6.9、滅菌後 （ａ） グルコースを別個に滅菌した （ｂ） 鉱質補足組成物： ホウ酸 0.50g/ CuSO4・5H2O 0.40g/ KI 0.10g/ FeCl3・6H2O 0.20g/ MnSO4・H2O 0.40g/ FeSO4・7H2O 0.40g/ モリブデン酸アンモニウム 0.20g/ 2.1.2 発酵条件 菌株Ａ−184の凍結した保存培養液（2.5ml）を植物性媒
質（S/ビス）100mlを含有する容量500mlのエルレンマイ
ヤーフラスコに接種するために用いた。培養液を振盪機
によつて200rpm及びストローク5cmで、28℃にて48時間
培養した。
ノイル（化合物Ｂ）である式Ｉの化合物の製造 2.1 発酵 2.1.1 培養質 S/ビス： グルコース 10 g/ バクト・ペプトン・デイフコ ４ g/ バクト酵母エキス・デイフコ ４ g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ KH2PO4 ２ g/ K2HPO4 ４ g/ pH＝７、滅菌後 媒質C: グルコース（ａ） ２ g/ 酵母エキス ５ g/ アスパラギン 1.5g/ MgSO4・7H2O 0.5g/ CaCO3 ５ g/ NaCl 0.1g/ CaCl2・2H2O 0.1g/ 鉱質補足物（ｂ） 1 ml/ pH＝6.9、滅菌後 （ａ） グルコースを別個に滅菌した （ｂ） 鉱質補足組成物： ホウ酸 0.50g/ CuSO4・5H2O 0.40g/ KI 0.10g/ FeCl3・6H2O 0.20g/ MnSO4・H2O 0.40g/ FeSO4・7H2O 0.40g/ モリブデン酸アンモニウム 0.20g/ 2.1.2 発酵条件 菌株Ａ−184の凍結した保存培養液（2.5ml）を植物性媒
質（S/ビス）100mlを含有する容量500mlのエルレンマイ
ヤーフラスコに接種するために用いた。培養液を振盪機
によつて200rpm及びストローク5cmで、28℃にて48時間
培養した。
この培養液（400ml）を生産媒質（媒質Ｃ）を含有する
発酵器に接種するために用いた。びんを無菌の空気によ
つて流速2l／分で通気し、温度を28℃に保持しなが
ら、900rpmを攪拌した。
発酵器に接種するために用いた。びんを無菌の空気によ
つて流速2l／分で通気し、温度を28℃に保持しなが
ら、900rpmを攪拌した。
2.2 単離 2.2.1 回収 ４個の発酵器からの培養汁を接種して４日後に回収し、
2N NaOHの添加によつてpH11に調節した後、15分間攪拌
し、次に吸引濾過した。合液した濾過汁（14）のpHを
2.5N HClで7.5に調節した。セフアロース−アシル−Ｄ
−アラニル−Ｄ−アラニンアフイニテイ樹脂［コルテイ
（A.Corti）、カサニイ（G.Gassani）、Ｄ−アラニル−
Ｄ−アラニン−フガロースの合成及び特製（Synthesis
and characterization of D−alanyl−Ｄ−agarose）：
グリコペプチド抗生物質のアフイニテイクロマトグラフ
イーに対する新規の生物選択的吸着剤（a new bioselec
tive adsorbent for affinity chromatography of glyc
opeptide antibiotics）、アプライド・バイオケミスト
リイ・アンド・バイオテクノロジイ（Appl.Biochem.Bic
tec.）11、101−109（1985）］の適当な量（200ml）を
加え、４℃で一夜攪拌した。次に樹脂を吸尽した汁から
分離し、クロマトグラフイーカラムに入れた。カラムを
樹脂の５倍容量のトリス−HCl（Tris−HCl）緩衝剤（0.
05M、pH7.5）、次に同容量のトリス塩基溶液（0.05M）
で洗浄した。次にカラムをNH4OH水溶液（１％w/v）で溶
離し、200mlフラクシヨンを捕集し、分析用HPLCで調べ
た（2.2.3参照）。所望の抗生物質を含むフラクシヨン
（２〜６）を選び、プールし、ギ酸で中和した後、限外
濾過によつて70mlに濃縮した（2.2.2参照）。凍結乾燥
によつて粗製の生成物2.53gが得られた。この粗製の生
成物はHPLC分析により、テイコプラニン及びテイコプラ
ニン−様生成物に関して、全HPLC面積においてそれぞれ
約４％及び12％に対応する量で化合物Ａ及びＢの存在を
示した。次にこの粗製の生成物を半分取HPLCに付した
（2.3.1参照）。
2N NaOHの添加によつてpH11に調節した後、15分間攪拌
し、次に吸引濾過した。合液した濾過汁（14）のpHを
2.5N HClで7.5に調節した。セフアロース−アシル−Ｄ
−アラニル−Ｄ−アラニンアフイニテイ樹脂［コルテイ
（A.Corti）、カサニイ（G.Gassani）、Ｄ−アラニル−
Ｄ−アラニン−フガロースの合成及び特製（Synthesis
and characterization of D−alanyl−Ｄ−agarose）：
グリコペプチド抗生物質のアフイニテイクロマトグラフ
イーに対する新規の生物選択的吸着剤（a new bioselec
tive adsorbent for affinity chromatography of glyc
opeptide antibiotics）、アプライド・バイオケミスト
リイ・アンド・バイオテクノロジイ（Appl.Biochem.Bic
tec.）11、101−109（1985）］の適当な量（200ml）を
加え、４℃で一夜攪拌した。次に樹脂を吸尽した汁から
分離し、クロマトグラフイーカラムに入れた。カラムを
樹脂の５倍容量のトリス−HCl（Tris−HCl）緩衝剤（0.
05M、pH7.5）、次に同容量のトリス塩基溶液（0.05M）
で洗浄した。次にカラムをNH4OH水溶液（１％w/v）で溶
離し、200mlフラクシヨンを捕集し、分析用HPLCで調べ
た（2.2.3参照）。所望の抗生物質を含むフラクシヨン
（２〜６）を選び、プールし、ギ酸で中和した後、限外
濾過によつて70mlに濃縮した（2.2.2参照）。凍結乾燥
によつて粗製の生成物2.53gが得られた。この粗製の生
成物はHPLC分析により、テイコプラニン及びテイコプラ
ニン−様生成物に関して、全HPLC面積においてそれぞれ
約４％及び12％に対応する量で化合物Ａ及びＢの存在を
示した。次にこの粗製の生成物を半分取HPLCに付した
（2.3.1参照）。
2.2.2限外濾過 中和した溶離液を、1000ダルトンの名目上の分子量限界
（NMWL）を有するピイ・シイ・エイ・シイ・ペリコン
（PCAC Pellicon）限外濾過膜を備えた142mmハイ−フラ
ツクスＵ−Ｆセル・ミリポア（Hi−Flux U−F Cell Mil
lipore）装置で濃縮した。
（NMWL）を有するピイ・シイ・エイ・シイ・ペリコン
（PCAC Pellicon）限外濾過膜を備えた142mmハイ−フラ
ツクスＵ−Ｆセル・ミリポア（Hi−Flux U−F Cell Mil
lipore）装置で濃縮した。
2.2.3分析用HPLC 装置：ヒユーレツト・パツカード（Hewlett Packard）
液体クロマトグラフ、モデル1084B;UV検出器は254nmに
固定した。
液体クロマトグラフ、モデル1084B;UV検出器は254nmに
固定した。
カラム：エルバシル（Erbasil）C18 5μｍ、150×4.6mm
（Carlo Erba）。
（Carlo Erba）。
移動相： A:0.02M NaH2PO4/CH3CN（95:5） B:0.02M NaH2PO4/CH3CN（25:75） 勾配溶離 分 ％Ｂ 0 ８ 40 40 45 55 48 ８ 50 停止 流速:1.5ml/分 カラム圧:200気圧 注入容量:20μ 減衰:8 チヤート・スピード:0.5cm/分 基準：テイコプラニンA2複合体［ボルジ（A.Borghi）
等、ザ・ジヤーナル・オブ・アンテイビオテイクス（Th
e Journal of Antibiotics）、Vol.37、No.6、615〜620
頁（1984年６月）］を水に溶解し、1156.5μg/mlの濃度
の溶液を生成させた。
等、ザ・ジヤーナル・オブ・アンテイビオテイクス（Th
e Journal of Antibiotics）、Vol.37、No.6、615〜620
頁（1984年６月）］を水に溶解し、1156.5μg/mlの濃度
の溶液を生成させた。
これらの条件下で、化合物Ａは保持時間（RT）19.93分
を示し、一方、化合物ＢはRT20.96分を示した。
を示し、一方、化合物ＢはRT20.96分を示した。
2.3 精製及び特性 2.3.1 半分取HPLC 凍結乾燥により得られた粗製の生成物を300mgの部分標
本に再分し、ジメチルホルムアミド1mlに溶解し、これ
に水／アセトニトリルの混合物（1:1、v/v）1mlを加え
た。次に各部分を次の条件下で半分取HPLCに付した： 装置：ヒユーレツトパツカード液体クロマトグラム、モ
デル1084B;UV検出器は254nmに固定した。
本に再分し、ジメチルホルムアミド1mlに溶解し、これ
に水／アセトニトリルの混合物（1:1、v/v）1mlを加え
た。次に各部分を次の条件下で半分取HPLCに付した： 装置：ヒユーレツトパツカード液体クロマトグラム、モ
デル1084B;UV検出器は254nmに固定した。
カラム：リクロソルブ（Lichrocorb）RP−187μｍ、250
×10mm（Merck） 移動相： A:0.02M HCOONH4/CH3CN（95:5） B:0.02M HCOONH4/CH3CN（25:75） 勾配溶離： 分 ％Ｂ 0 25 18 25 22 65 29 65 30 25 31 停止 流速:4ml/分 カラム圧:130気圧 注入容量:200μ 減衰:1024 チヤート・スピード:0.5cm/分 RT値10.2（フラクシヨンNo.1）及び12.4分）（フラクシ
ヨンNo.2）にそれぞれピーク中心の心に対応する２つの
フラクシヨンを単離した。各注入による溶離液を合液
し、分析用HPLCでチエツクした（2.3.3参照）。
×10mm（Merck） 移動相： A:0.02M HCOONH4/CH3CN（95:5） B:0.02M HCOONH4/CH3CN（25:75） 勾配溶離： 分 ％Ｂ 0 25 18 25 22 65 29 65 30 25 31 停止 流速:4ml/分 カラム圧:130気圧 注入容量:200μ 減衰:1024 チヤート・スピード:0.5cm/分 RT値10.2（フラクシヨンNo.1）及び12.4分）（フラクシ
ヨンNo.2）にそれぞれピーク中心の心に対応する２つの
フラクシヨンを単離した。各注入による溶離液を合液
し、分析用HPLCでチエツクした（2.3.3参照）。
次の容量及び濃度を有する２種の溶液が得られた。
アセトニトリルの大部分を溶液１及び２から真空下で除
去し、次に限外濾過によつて濃縮し、凍結乾燥し、それ
ぞれの固体生成物を得た。
去し、次に限外濾過によつて濃縮し、凍結乾燥し、それ
ぞれの固体生成物を得た。
上記の半分取HPLCを、上記2.1.2に述べた同一の大きさ
の他の３個の発酵及び回収バツチから得られた粗製の凍
結乾燥体についてくり返し行った。
の他の３個の発酵及び回収バツチから得られた粗製の凍
結乾燥体についてくり返し行った。
次に各バツチの溶液１及び２から得られた固体生成物を
合わせ、上記同様の条件下で更に半分取HPLC操作に再び
付して精製した。それぞれ収量は化合物A35.2mg及び化
合物B28.9mgであり、このものをNMR分光学及び高速原子
緩衝法（FAB）によつて特性を明らかにした。
合わせ、上記同様の条件下で更に半分取HPLC操作に再び
付して精製した。それぞれ収量は化合物A35.2mg及び化
合物B28.9mgであり、このものをNMR分光学及び高速原子
緩衝法（FAB）によつて特性を明らかにした。
NMR及びFABスペクトルは、化合物Ａの構造式が側鎖とし
て６−メチルオクノイル部分を有するテイコプラニン
（式Ｉ、Ｒ＝６−メチルオクタノイル）の構造であるこ
と、そして化合物Ｂの構造式が側鎖にｎ−ノナノイルを
有するテイコプラニン（式Ｉ、Ｒ＝ｎ−ノナノイル）の
構造であることを明白に立証した。
て６−メチルオクノイル部分を有するテイコプラニン
（式Ｉ、Ｒ＝６−メチルオクタノイル）の構造であるこ
と、そして化合物Ｂの構造式が側鎖にｎ−ノナノイルを
有するテイコプラニン（式Ｉ、Ｒ＝ｎ−ノナノイル）の
構造であることを明白に立証した。
2.3.2 NMR分光学 装置はアレイ・プロセツサー（Array processor）、250
MHzでのマグネツト及びコンピユーター化されたコンソ
ール・アスペクト3000を有するブルーカー（Bruker）モ
デルAM−250である。基準としてトリメチルシランを用
い、25℃にてDMSO−d6溶液中でスペクトルを得た。
MHzでのマグネツト及びコンピユーター化されたコンソ
ール・アスペクト3000を有するブルーカー（Bruker）モ
デルAM−250である。基準としてトリメチルシランを用
い、25℃にてDMSO−d6溶液中でスペクトルを得た。
第１図及び第２図はそれぞれ化合物Ａ及びＢの1H−NMR
スペクトルを示す。
スペクトルを示す。
最も顕著なピークの帰属はテイコプラニンスペクトルの
比較に基づいて、そして２次元分光学、即ち1H同核相関
分光学に基づいて示される。化合物Ａ及び化合物Ｂのス
ペクトルは脂肪族鎖領域においてのみテイコプラニンA2
複合体成分と異なる。実際に、化合物Ａにおいて、２個
のメチル基がδ＝0.8ppm（Ｊ＝6.4Hz）でほとんど一致
してCH2−CH3部分による三重線及び（CH）−CH3部分に
よる二重線によつて示されることがわかる。加えて、４
個のCH2基が、スペクトル全体から推論されるように、
鎖中に存在する。
比較に基づいて、そして２次元分光学、即ち1H同核相関
分光学に基づいて示される。化合物Ａ及び化合物Ｂのス
ペクトルは脂肪族鎖領域においてのみテイコプラニンA2
複合体成分と異なる。実際に、化合物Ａにおいて、２個
のメチル基がδ＝0.8ppm（Ｊ＝6.4Hz）でほとんど一致
してCH2−CH3部分による三重線及び（CH）−CH3部分に
よる二重線によつて示されることがわかる。加えて、４
個のCH2基が、スペクトル全体から推論されるように、
鎖中に存在する。
化合物Ｂにおいては、鎖の末端メチル基がδ＝0.83ppm
（Ｊ＝6.5Hz）で（CH2）−CH3による三重線で示され
る。スペクトル全体によつて示される如く、鎖中に７個
のCH2基が存在する。
（Ｊ＝6.5Hz）で（CH2）−CH3による三重線で示され
る。スペクトル全体によつて示される如く、鎖中に７個
のCH2基が存在する。
2.3.3 高速原子衝撃−質量スペクトル 装置はマトリツクスとしてチオグリセリン：グリセリン
混合物（2:1、v/v）を用いるVG70/250である。衝撃ガ
ス;Xe;キネテイク・エネルギー６〜8KeV;加速電圧6KV。
正イオンスペクトルをm/z600〜2000から捕集した。
混合物（2:1、v/v）を用いるVG70/250である。衝撃ガ
ス;Xe;キネテイク・エネルギー６〜8KeV;加速電圧6KV。
正イオンスペクトルをm/z600〜2000から捕集した。
カチオン化された分子イオン（MH+またはMNa+）及びFAB
−MASによつて測定したマトリツクスとの付加物は、NMR
データと一致して、双方の化合物に対して分子量1863
（最低の同位元素組成）を示した。
−MASによつて測定したマトリツクスとの付加物は、NMR
データと一致して、双方の化合物に対して分子量1863
（最低の同位元素組成）を示した。
本発明の主なる特徴及び態様は以下のとおりである。
1.式 式中、Ｒは６−メチルオクタノイル及びｎ−ノナノイル
である、 のテイコプラニン−様誘導体或いはその酸または塩基に
よる付加塩。
である、 のテイコプラニン−様誘導体或いはその酸または塩基に
よる付加塩。
2.薬剤として使用するための上記１に記載の化合物。
3.動物生長因子としての上記１に記載の化合物の使用。
4.菌株アクチノプラネス・テイコミセテイカス（Actino
planes teichomyceticus）を好気性条件下で、同化可能
な炭素、窒素及び無機塩源を含む栄養媒質中にて20℃乃
至40℃間の温度で培養し、そしてクロマトグラフ的方法
によつて、濾過した発酵汁から粗製の分離物の他の成分
より２種以上の生成物を分離することからなる上記１に
記載の化合物の製造方法。
planes teichomyceticus）を好気性条件下で、同化可能
な炭素、窒素及び無機塩源を含む栄養媒質中にて20℃乃
至40℃間の温度で培養し、そしてクロマトグラフ的方法
によつて、濾過した発酵汁から粗製の分離物の他の成分
より２種以上の生成物を分離することからなる上記１に
記載の化合物の製造方法。
5.菌株アクチノプラネス・テイコミセテイカスがアクチ
ノプラネス・テイコミセテイカスATCC53649或いは上記
１に記載の化合物を産生し得る突然変異体または変種で
ある上記４に記載の如く方法。
ノプラネス・テイコミセテイカスATCC53649或いは上記
１に記載の化合物を産生し得る突然変異体または変種で
ある上記４に記載の如く方法。
6.濾過した発酵汁から組成の分離物を、該濾過した発酵
汁をpH値９乃至11間で固定したＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ニンアフイニテイマトリツクスと接触させ、上記１に記
載のテイコプラニン−様化合物の処理可能な量を含むフ
ラクシヨンを捕集し、プールしたフラクシヨンを限外濾
過によつて濃縮し、そして濃縮物を凍結乾燥することに
よつて得る上記４または５に記載の方法。
汁をpH値９乃至11間で固定したＤ−アラニル−Ｄ−アラ
ニンアフイニテイマトリツクスと接触させ、上記１に記
載のテイコプラニン−様化合物の処理可能な量を含むフ
ラクシヨンを捕集し、プールしたフラクシヨンを限外濾
過によつて濃縮し、そして濃縮物を凍結乾燥することに
よつて得る上記４または５に記載の方法。
7.濾過した発酵汁から組成の分離物他の成分より上記１
に記載の化合物の分離を、移動相として水性ギ酸アンモ
ニウム；アセトニトリル混合物の直線勾配混合物を用い
て、半分取HPLCによつて行う上記４〜６のいずれかに記
載の如き方法。
に記載の化合物の分離を、移動相として水性ギ酸アンモ
ニウム；アセトニトリル混合物の直線勾配混合物を用い
て、半分取HPLCによつて行う上記４〜６のいずれかに記
載の如き方法。
8.移動相として用いる混合物が0.02Mギ酸アンモニウム
／アセトニトル95:5及び0.02Mギ酸アンモニウム／アセ
トニトリル25:75である上記７に記載の如き方法。
／アセトニトル95:5及び0.02Mギ酸アンモニウム／アセ
トニトリル25:75である上記７に記載の如き方法。
9.アクチノプラネス・テイコミセテイカスATCC53649。
10.アクチノプラネス・テイコミセテイカスATCC53649の
菌株或いは回収し得る量において上記第１に記載の化合
物を生産し得る突然変異性または変種の生物学的に純粋
な培養体。
菌株或いは回収し得る量において上記第１に記載の化合
物を生産し得る突然変異性または変種の生物学的に純粋
な培養体。
11.抗生物質として用いる薬剤を製造するために上記１
に記載の化合物の使用。
に記載の化合物の使用。
12.上記１に記載の化合物を製薬学的に許容し得る担体
との混合物として含んでなる製薬学的組成物。
との混合物として含んでなる製薬学的組成物。
第１図は化合物Ａの1H−NMRスペクトルを示す。 第２図は化合物Ｂの1H−NMRスペクトルを示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:045）
Claims (2)
- 【請求項１】式 式中、Ｒは６−メチルオクタノイル及びｎ−ノナノイル
である、 のテイコプラニン−様誘導体或いはその酸または塩基に
よる付加塩。 - 【請求項２】アクチノプラネス・テイコミセテイカス
（Actinoplanes teichomyceticus）ATCC53649の菌株或
いは回収し得る量において特許請求の範囲第１項記載の
化合物を生産し得る突然変異体または変種の生物学的に
純粋な培養物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB878720980A GB8720980D0 (en) | 1987-09-07 | 1987-09-07 | Derivatives |
| GB8720980 | 1987-09-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6468393A JPS6468393A (en) | 1989-03-14 |
| JPH0763387B2 true JPH0763387B2 (ja) | 1995-07-12 |
Family
ID=10623385
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63172849A Expired - Lifetime JPH0763387B2 (ja) | 1987-09-07 | 1988-07-13 | テイコプラニン‐様誘導体 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5085990A (ja) |
| EP (1) | EP0306645B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0763387B2 (ja) |
| KR (1) | KR890005139A (ja) |
| AT (1) | ATE96845T1 (ja) |
| CA (1) | CA1337645C (ja) |
| DE (1) | DE3885394T2 (ja) |
| DK (1) | DK347788A (ja) |
| ES (1) | ES2059443T3 (ja) |
| GB (1) | GB8720980D0 (ja) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5135857A (en) * | 1987-07-03 | 1992-08-04 | Gruppo Lepetit S.P.A. | Process for the preparation of de-mannosyl teicoplanin derivatives |
| ES2084595T3 (es) * | 1988-12-27 | 1996-05-16 | Lepetit Spa | Procedimiento quimico mejorado para preparar el antibiotico l/17392 (desglucoteicoplanina) y sus sales. |
| US5167808A (en) * | 1990-08-16 | 1992-12-01 | S&K Products International, Inc. | Deionized water purification system |
| HUT63860A (en) * | 1990-12-05 | 1993-10-28 | Lepetit Spa | Process for producing 39-decarboxy-38-(hydroxymethyl) derivatives of teikoplanin antibiotics |
| DE69708293T2 (de) | 1996-04-23 | 2002-05-02 | Biosearch Italia Spa | Chemisches Verfahren zur Herstellung von Amidderivaten von A 40926 Antibiotikum |
| US5916873A (en) * | 1997-04-17 | 1999-06-29 | Eli Lilly And Company | Teicoplanin derivatives |
| DE19807972A1 (de) * | 1998-02-25 | 1999-08-26 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Lipopeptidantibiotika-Calciumsalze, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung |
| KR100459289B1 (ko) * | 2002-05-30 | 2004-12-03 | 이연제약주식회사 | 발효액으로부터 테이코플라닌ａ₂의 회수방법 |
| KR100476818B1 (ko) * | 2002-07-19 | 2005-03-17 | 종근당바이오 주식회사 | 테이코플라닌 에이 투 정제 방법 |
| US10316064B2 (en) * | 2014-01-28 | 2019-06-11 | Academia Sinica | Teicoplanin analogs and uses thereof |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1496386A (en) * | 1975-03-05 | 1977-12-30 | Lepetit Spa | Antibiotics |
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| FI73697C (fi) * | 1982-06-08 | 1987-11-09 | Lepetit Spa | Foerfarande foer framstaellning av individuella faktorer 1, 2, 3, 4 och 5 av teikomysin a2. |
| US4778846A (en) * | 1983-07-13 | 1988-10-18 | Smithkline Beckman Corporation | Affinity chromatography sorbent |
| GB8512795D0 (en) * | 1985-05-21 | 1985-06-26 | Lepetit Spa | Increasing ratio of components of teicoplanin a2 complex |
| US4694069A (en) * | 1985-09-30 | 1987-09-15 | Smithkline Beckman Corporation | Kibdelosporangium aridum SK&F-AAD-609 |
| GB8621911D0 (en) * | 1986-09-11 | 1986-10-15 | Lepetit Spa | Increasing ratio of components of anti-biotic complex |
-
1987
- 1987-09-07 GB GB878720980A patent/GB8720980D0/en active Pending
-
1988
- 1988-06-24 DK DK347788A patent/DK347788A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-06-27 DE DE88110194T patent/DE3885394T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-06-27 AT AT88110194T patent/ATE96845T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-06-27 EP EP88110194A patent/EP0306645B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-06-27 ES ES88110194T patent/ES2059443T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-07-13 JP JP63172849A patent/JPH0763387B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-07-14 CA CA000571966A patent/CA1337645C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-07-14 KR KR1019880008743A patent/KR890005139A/ko not_active Application Discontinuation
-
1991
- 1991-05-10 US US07/701,355 patent/US5085990A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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| EP0306645A3 (en) | 1990-07-04 |
| US5085990A (en) | 1992-02-04 |
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| CA1337645C (en) | 1995-11-28 |
| DE3885394D1 (de) | 1993-12-09 |
| DE3885394T2 (de) | 1994-03-24 |
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| ES2059443T3 (es) | 1994-11-16 |
| EP0306645B1 (en) | 1993-11-03 |
| JPS6468393A (en) | 1989-03-14 |
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