JPH07503239A - ヒスタミン誘導体を免疫調節剤として免疫療法で用いる方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ヒスタミン誘導体を免疫調節剤として免疫療法で用いる方法発明の分野 本発明は、一般に、哺乳動物の免疫系を調節する方法に関するものであり、より 詳細には、ヒスタミン誘導体を含んでいる組成物を用いて免疫系を調節する方法 に関する。

発明の背景 哺乳動物における免疫応答過程に関する理解レベルが向上して来たと共に、特定 の分子が免疫調節（ｉｍｍｕｎｅ　ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ）で重大な役割を果し ているとの認識が深まってきている。不幸なことには、細胞混合物内に存在して いる単一種の細胞型に対して上記分子が示す効果に関しては、一般に非特異的で ある。効果に特異的か或は細胞に特異的な作動薬に対する重大な必要性が存在し ている。

ヒスタミンは、哺乳動物における免疫応答過程で重大な役割を果していることが 示されている小型分子である。しかしながら、ヒスタミンのためのレセプタを有 する数多くの細胞に対してそれらが示す効果が偏在的であることから、それを免 疫療法で用いることの可能性が制限されている。組織に特異的であるか或は効果 に特異的であるヒスタミン誘導体が得られたならば、これは、免疫調節でヒスタ ミンが果す役割を決定するに有意な補助となると共に、価値有る免疫療法をもた らすことになるであろう。

ヒスタミンは、哺乳動物における免疫応答モデル、特に遅延型過敏症およびＴと Ｂ細胞機能モデルを実質的に調節し得る。ヒスタミンは、抗原に対して異なる段 階の応答が生じている間に合成され、直接的もしくは間接的に、抗原に対してさ らなる応答を示す。炎症および免疫応答が生じている間、組織内に存在している ヒスタミン濃度によって数多くのリンパ系細胞の機能が修飾され得る。これらの 効果は多大であり得るが、その作動薬が効果に特異的でないか或は細胞に特異的 でない場合、細胞混合物内に存在している単一種の細胞型に対する直接的な効果 は決定され得ない。ヒスタミンのためのレセプタを有する全ての細胞に対して作 動薬が示す効果が偏在的であることから、ヒスタミンを全ての免疫療法で用いる ことが制限されている。Ｋｈａｎ他ｒｃ１ｉｎ　Ｉｍｍｕｎ。

１、Ｒｅｖ、（１９８５）　４　：　１、Ｍｅ１ｍｏｎ他ｒＡｍ、　Ｊ、　Ｍｅ ｄ、Ｊ　（１９８１）７１　：１００およびＲｏｃｌｉｎ他ｒｃｅｌｌＩｍｍｕ ｎｏ１．Ｊ　（１９７８）３７：１６２゜ヒスタミンは、カテコールアミン類、 プロスタグランジン類およびいくつかのペプチド類、例えばブラジキニンおよび 恐らくはリンフ才力イン類などと同様、オータコイドである。オータコイド類は 、それらがそれらの局所的作用部位で作り出されそして種々の組織内で作り出さ れ得る点で、ホルモン類とは異なっている。オータコイド類は炎症の仲介で重要 な役割を果している。炎症が生じている間、蛋白質変性、局所的ｐＨの低下、「 新規ペプチド類」の放出およびリソンーム酵素の放出などを含む特定の出来事が 生じ得る。このような出来事は、これらの新規産物に対してその免疫系が過剰に 働くべきでない背景を作り出す。しかしながら、炎症により免疫原が作り出され る可能性が存在しているにも拘らず、その炎症過程は、通常、ひどく異常な免疫 応答を伴わないか或はそのような異常応答が後で生じることはない。オータコイ ド類がこのような応答をどうにかして調節していると見られる。

オータコイド類は、種々の免疫段階の間、ナチュラルサプレッサー細胞、Ｔ細胞 サブセットおよびＢ細胞に影響を与えている。オータコイド類のためのレセプタ は、免疫機能を実行する細胞上に非ランダム的に分布している（作動薬に関する 数および親和力において）。前駆体Ｂ細胞はヒスタミンおよびカテコールアミン のレセプタを有していていないと見られる一方、抗体を産生ずるＢ細胞はそれを 有していると見られる。

Ｔサプレッサー（Ｔ、）細胞は、Ｔヘルパー（Ｔ、）およびＴ細胞溶解（Ｔ、） 細胞がヒスタミンに対して示すＣＡＭＰ応答を調節している。

マイトジェンは、上記細胞がヒスタミンに対して示す応答性を変化させる。ヒス タミンに応答するある種のリンパ球は、それらの上にＨｌおよびＨ２両方のレセ プタを有している一方、他のものはＨ２レセプタのみを有している。ある種のリ ンパ球において、これらのＨ７しでブタは、Ｈ１作動（ａｇｏｎｉｓｍ）に対す る応答を修飾していると見られ、他のものに関しては、このような相互作用は全 く存在していない。ある種の細胞における生物学的応答は阻害性であり（例えば Ｂ細胞からの抗体放出低下：リンフ才力イン放出の阻害またはＴエフェクター細 胞による標的細胞溶解の阻害、並びにマスト細胞からのヒスタミン放出の阻害） 、そして他のものにおける応答は免疫機能を増強する（例えばナチュラルサプレ ッサーによる抑制の増強、並びにＴ、細胞またはＴヘルパー（Ｔｈ）細胞増殖） 。これらのオータコイド類は、免疫応答において選択された初期出来事を増強す ると見られる（例えばサプレッサー機能が増強する）一方、後期段階の免疫表現 型発現（例えばリンフ才力イン類または抗体の放出）を阻害していると見られる 。

新生児期のマウスまたは照射したマウスの膵臓内には、天然に存在しているサプ レッサー細胞が現れるが、これは、免疫寛容誘導で鍵となる役割を果している可 能性がある。５ｔｒｏｂｅｒ他ｒＡｎｎ、Ｒｅｖ。

Ｉｍｍｕｎｏｌ、（１９８４）２：２１９：Ｈｅｒｔｅｌ−Ｗｕｌｆｆ他ｒＪ、 　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　（１９８４）　１３３：２７９１：０ｋａｄａ他ｒＪ、Ｅ ｘｐｔ、Ｍｅｄ、（１９８２）１５６：５２２および０ｋａｄａ他ｒＪ、Ｉｍｍ ｕｎｏｌ、Ｊ　（１９８２）１２９：１８９２参照。

これらの細胞は、それらの表面表現型の意味でＮＫ細胞に関係しているが、機能 の点では異なっている。これらのナチュラルサプレッサー細胞が現れるのは、リ ンパ系組織が成熟している初期段階の短期間であるが、全体的リンパ系照射によ り成熟体内に誘発され得る。これらの細胞は、同種異系反応性（ａｌｌｏｒｅａ ｃｔｉｖｅ）免疫応答を示す抗原特異的細胞溶解アームを阻害すると言ったユニ ークな特徴を有しているが、抗原特異的抑制性アームに関しては無傷のまま残す 。このようにして、ナチュラルサプレッサー（ｎａｔｕｒａｌ　５ｕｐｐｒｅｓ ｓｏｒ）（ＮＳ）細胞の調節環境における同種異系反応により、抗原に特異的な サプレッサー細胞が多数生じ、これが今度はインビボにおける寛容性を維持して いる。従って、ナチュラルサプレッサー細胞は、同種異系骨髄キメラにおける移 植片に対する宿主および宿主に対する移植片の間が不健全な状態になるのを防止 するに重要な役割を果している可能性があると共に、新生児期のマウスおよび全 体的リンパ系照射（ｔｏｔａｌｌｙｍｐｈｏｉｄ　１ｒｒａｄｉａｔｅｄ）（Ｔ ＬＩ）マウスにおける免疫寛容性で重要な役割を果している可能性がある。

ヒスタミンは、ヒトＴ、細胞を活性化し、そしてインビトロにおいてマウスのＮ Ｓ細胞が示す抑制能力を増強する。Ｋｈａｎ他ｒＪ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、（１９８ ５）１３４：４１００および５ａｎｓｏｎｉ他「ＪＣｌｉｎ、Ｉｎｖｅｓｔ、（ １９８５）７６：６５０参照。ヒスタミンで両方のヒトＴ、細胞（Ｌｅｕ２．． ９．３）を前処理すると、フイトヘマグルチン誘発Ｔ、細胞増殖およびアメリカ やまごぼうマイトジェン誘発Ｂ細胞分化の両方が阻害された。これらの効果をＨ ２レセプタが仲介していた。ナチュラルサプレッサー機能の増強はＨルセブタに よるものである。組織培養で長期間に渡りナチュラルサプレッサー細胞を繁殖お よびクローン化させることができ、そしてこれらはインビトロおよびインビボモ デル両方において、混合白血球反応の非特異的な抑制をもたらし得る。

従って、免疫調節および免疫療法でほとんどか或は全く全身的効果を示さないヒ スタミン誘導体を用いた方法が得られたならば、これは有利本発明は、ヒスタミ ン誘導体を免疫調節剤（ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕ　１ａｔｏｒｓ）として免疫療法 （ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔ　ｊｃｓ）で用いる方法を提供するものであ る。本発明の１つの態様において、少なくとも１種のヒスタミンレセプタに結合 特異性を示す少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでいる組成物の有効量を 哺乳動物に投与し、そしてそれと協力させて、任意に、予め決めた抗原またはそ れの免疫原性部分を投与することを含む、哺乳動物の免疫系による抗原特異的抗 体応答の少なくとも一部を阻害する方法を提供する。

本発明はまた、少なくとも１種のヒスタミンレセプタに結合特異性を示す少なく とも１種のヒスタミン誘導体と、薬学的に許容される担体または希釈剤を含んで いる組成物の治療学的有効量を個体に投与することによって、個体における特定 な抗原に対する敏感性を治療する方法も提供する。この態様の１つの変法におい て、その個体が敏感性を示す、予め決めた抗原またはそれの免疫原性部分と協力 させて、このヒスタミン誘導体を投与する。別の変法において、その個体が敏感 性を示し得る、予め決めた抗原、例えば蛋白質アレルゲンまたは自己抗原などか ら誘導されるＴ細胞刺激活性を示すペプチドと協力させて、このヒスタミン誘導 体を個体に投与する。更に別の変法において、その個体が敏感性を示し得る、予 め決めた抗原またはそれの免疫原性部分、およびそれと同じ予め決めた抗原から 誘導されるＴ細胞刺激活性を示すペプチドの両方と協力させて、このヒスタミン 誘導体を個体に投与する。

図の簡単な説明 図１ａ−ｃは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理する１日前（日−１）か或はＦｅ１ｄｌ抗原処理して２ 日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図１ａ）または５０ｍｇ／ｋｇの化合物ｌ （図１ｂ）または１００ｍｇ／ｋｇｃＤ化合物１（図１ｃ）で処理したマウス６ 匹から成る３グループにおける抗Ｆｅ１　ｄ　Ｉ　ＩｇＧ抗体応答を示している 。

図２ａ−ｃは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理する１日前（日−１）か或はＦｅ１ｄｌ抗原処理して２ 日後（日干２）に食塩水（ＰＢＳ）（図２ａ）または５０ｍｇ／ｋｇの化合物１ （図２ｂ）または１００ｍｇ／ｋｇの化合物１（図２ｃ）で処理したマウス６匹 から成る３グループにおける抗Ｆｅｌ　ｄ　ＩのＩｇＥ抗体応答を示している。

図３ａ−ｂは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理する１日前（日−１）が或はＦｅ１ｄｌ抗原処理して２ 日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図３ａ）または５０ｍｇ／ｋｇの化合物１ （図３ｂ）で処理したマウス６匹から成る２グループにおけるＩｇＧ抗Ｆｅｌ　 ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図４ａ−ｂは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理する１日前（日−１）が或はＦｅ１ｄｌ抗原処理して２ 日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図４２）または５０ｍｇ／ｋｇの化合物１ （図４ｂ）で処理したマウス６匹から成る２グループにおけるＩｇＥ抗Ｆｅｌ　 ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図５ａ−ｄは、ＥＬＩＳＡアンセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理する１日前（日−１）か或はＦｅ１ｄｌ抗原処理して２ 日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図５ａ）または５Ｑｍｇ／ｋｇの化合物１ （図５ｂ）または５ｍｇ／ｋｇの化合物１（図５ｃ）またはＱ、５ｍｇ／ｋｇの 化合物１（図５ｄ）で処理したマウス６匹から成る４グループにおけるＩｇＧ抗 Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図６ａ−ｄは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理する１日前（日−１）か或はＦｅ１ｄｌ抗原処理して２ 日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図６８）または５０ｍｇ／ｋｇの化合物１ （図６ｂ）または５ｍｇ／ｋｇの化合物ｌ（図６ｃンまたはＱ、５ｍｇ／ｋｇの 化合物１（図６ｄ）Ｔ処理したマウス６匹から成る４グループにおけるＴｇＥ抗 Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗に応答を示している。

図７ａ−ｂは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で２°（抗原の第二補助）処理する１日前（日−１）か或は２ °Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗原処理して２日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（、図７ａ ）または５０ｍｇ／ｋｇの化合物１（図７ｂ）で処理した前感作（ｐ　ｒ　ｅ− ｐ　ｒ　ｉｍｅｄ）マウス６匹から成る２グループにおけるＩｇＧ抗Ｆｅｌ　ｄ 　ｌ抗体応答を示している。

□　図８ａ−ｂは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは 、Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗原で２°処理する１日前（日−１）か或は２゜Ｆｅ１ｄｌ抗 原処理して２日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図８ａ）または５０ｍｇ／ｋ ｇの化合物１（図８ｂ）で処理した前感作マウス６匹から成る２グループにおけ るＩｇＥ抗Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図９ａ−ｄは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、Ｆ ｅｌ　ｄ　ｌ抗原で２°処理する１日前（日−１）が或は２゜Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗 原処理して２日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図９ａ）または５０ｍｇ／ｋ ｇの化合物１（図９ｂ）または７５ｍｇ／ｋｇの化合物１（図９ｃ）または１０ ０ｍｇ／ｋｇの化合物１（図９ｄ）で処理した前感作マウス６匹から成る４グル ープにおけるＩｇＧ抗ＦｅＩｄＩ抗体応答を示している。

図１０ａ−ｄは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、 Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗原で２°処理する１日前（臼−１）が或は２゜Ｆｅｌ　ｄ　ｌ 抗原処理して２日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図１０ａ）または５０ｍｇ ／ｋｇの化合物１（図１０ｂ）または７５ｍｇ／ｋｇの化合物１（図１０Ｃ）ま たは１００ｍｇ／ｋｇの化合物１（図１０ｄ）で処理した前感作マウス６匹から 成る４グループにおけるＩｇＥ抗Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図１１は、化合物１を１００ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇまたは５０ｍｇ／ｋｇ の投薬量で受けさせたマウスにおけるＩｇＧが食塩水対照グループに比較して何 らかの変化を生じたか否かを決定する目的で、図９で考察したマウス６匹から成 る４グループに対して行った、全１ｇＧアッセイの結果を示すグラフ表示である 。

図］２ａ−ｃは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、 オボアルブミン抗原で処理する１日前（日−１）か或はオボアルブミン抗原処理 して２日後（日＋２）に食塩水（ＰＢＳ）（図１２ａ）または５０ｍｇ／ｋｇの 化合物ｌ（図１２ｂ）または１００ｍｇ／ｋｇの化合物ｌ（図１２０）で処理し たマウス６匹から成る３グループにおけるＩｇＧ抗Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗体応答を示 している。

図１３ａ−ｂは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、 ０日月にＦｅｌ　ｄ　ｌ抗原で処理しそして（日−４）−（日＋４）に１０ｍｇ ／ｋｇの化合物１で皮下（ｓ、ｃ、　）　（図１３ａ）または腹こう内（ｉ、ｐ 、　）　（図１３ｂ）処理したマウス６匹から成る６グル一プ全体におけるＩｇ Ｇ抗Ｆｅｌ　ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図１４は、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフ表示であり、これは、１０ｍ ｇ／ｋｇのＦｅｌ　ｄ　ｌ抗原で０日月に処理した時の、図１３に示した実験に おけるマウス６匹から成る食塩対照グループ（グループ７）のＩｇＧ抗Ｆｅｌ　 ｄ　ｌ抗体応答を示している。

図１５は、ＥＬＩＳＡアッセイを示すグラフ表示であり、これは、３５ｍｇ／ｋ ｇの化合物１または化合物３または食塩水（ＰＢＳ）対照で日−１および日２に 皮下（Ｓ　Ｃ）処理しモして０日月にフロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）の 中に入っている１００μｇのｈ−Ｍｂで処理した後、２１日目にフロインド不完 全アジュバント（ＩＦＡ）の中に入っている１００μｇのｈ−Ｍｂで処理したマ ウスにおけるＩｇＧ抗ｈ−Ｍｂ抗体応答を示している。３３日目にマウスの採血 を行い、その血清をｈ−Ｍｂ特異的ＩｇＧに関して評価した。５匹のマウスから 得られる平均抗体結合を示す。

図１６は、ＥＬＩＳＡアッセイを示すグラフ表示であり、これは、３５ｍｇ／ｋ ｇの化合物１または化合物３または食塩水（ＰＢＳ）対照で日−１および日２に 皮下（Ｓ　Ｃ）処理しそしてＯ日月にフロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）の 中に入っている１００８ｇのｈ−Ｍｂで処理しＬ後、２１日目にフロインド不完 全アジュバント（ＩＦＡ）の甲に入っている１００μｇのｈ−Ｍｂで処理したマ ウスにおけるＩｇＧ抗ｈ−Ｍｂ抗体応答を示している。３３日目にマウスの採血 を行い、その血清をｈ−Ｍｂ特異的１ｇＧ２ａに関して評価した。５匹のマウス から得られる平均抗体結合を示す。

図１７は、ＥＬＩＳＡアッセイを示すグラフ表示であり、これは、３５ｍｇ／ｋ ｇの化合物１または化合物３または食塩水ＣＰＢＳ）対照で日−１および日２に 皮下（ＳＣ）処理しそしてＯ日月にフロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）の中 に入っている１００μｇのｈ−Ｍｂで処理した後、２１日目にフロインド不完全 アジュバント（ＩＦＡ）の中に入っている１００μｇのｈ−Ｍｂで処理したマウ スにおけるＩｇＧ抗ｈ−Ｍｂ抗体応答を示している。３３日目にマウスの採血を 行い、その血清をｈ−Ｍｂ特異的１ｇＧ２ｂに関して評価した。５匹のマウスか ら得られる平均抗体結合を示す。

図１８は、ｈ−Ｍｂ特異的Ｔ細胞増殖に対する化合物１および化合物３の効果を 示すアッセイのグラフ表示であり、３匹のマウスに３５ｍｇ／ｋｇで与えるか或 はＰＢＳを与え（日−２および日−１日目に静脈内注射した対照）、モして０日 目に１００μｇのｈ−Ｍｂ／ＣＦＡを皮下注射することによってこのマウスの感 作を行った。７日目にリンパ節をプールして収穫したリンパ節Ｔ細胞の増殖を示 す。

図１９は、ＮＯＤマウスにおける糖尿病罹病率に関する、化合物１のみ、化合物 ３のみ、或は化合物１と化合物３を一緒に用いた時の効果を示すグラフ表示であ り、生存９００日目よび９１１日目マウス１０匹を、３５ｍｇ／ｋｇの化合物１ のみ、化合物３のみ、化合物１と化合物３と一緒、或は食塩水（ＰＢＳ）で皮下 処理した。血清グルコースレベルにより糖尿病罹病率を測定した。

図２０は、ＮＯＤマウスにおける糖尿病罹病率に関する、化合物１のみ、化合物 ３のみ、或は化合物１と化合物３を一緒に用いた時の効果を示すグラフ表示であ り、示す各データ点において、生存７６６日目マウス１０匹を、３５ｍｇ／ｋｇ の化合物１のみ、化合物３のみ、化合物１と化合物３と一緒、或は食塩水（Ｐ　 Ｂ　Ｓ）で皮下処理した。血清グルコースレベルにより糖尿病罹病率を測定した 。

図２１は、３５ｍｇ／ｋｇの化合物１または化合物３またはＰＢＳ（対照）で０ 日目および２日目に皮下処理しそして０日目に１００μｇのｈ−Ｍｂ／ＣＦＡで 処理したマウスが示す１ｇＭ応答に関する、化合物１または化合物３の効果を示 すグラフ表示であり、７日目にマウスの採血を行い、その血清をｈ−Ｍｂ特異的 ＩｇＭに関して評価した。５匹のマウスから得られる平均抗体結合を示す。

発明の詳細な記述 本発明は、哺乳動物の免疫系による抗原特異的抗体応答の少なくとも一部を阻害 する方法を提供するものであり、この方法は、少なくとも１種のヒスタミンレセ プタに結合特異性を示す少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでなる組成物 の有効量を哺乳動物に投与することを含んでいる。本明細書で用いるヒスタミン 誘導体は、脂肪族、例えばアルキルまたはアラルキル（脂肪族鎖に了り−ル基が 結合している）で誘導化することによってヒスタミン側鎖の第一級アミンを修飾 したヒスタミン類を包含しており、ここで、この脂肪族鎖は、種々の長さを有す る分枝を有しているか或は分枝していなくてもよく、これには、オキソカルボニ ル、例えばケト、ノン−オキソ−カルボニル基、例えばカルボキサミドまたはへ テロ原子などが含まれていてもよい。これらの修飾したヒスタミン作動薬を担体 分子、例えばアミノ酸、ポリペプチド類、蛋白質またはそれらの誘導体などに連 結させることによって、それらのさらなる修飾を行ってもよい。

一般に、ヒスタミン内の第一級アミンを誘導化して、炭素数が１から３の分枝、 好適にはメチル、特にアミノ基に対してα位のメチルを０から１個：ノン−オキ ソ−カルボニル基を０がら２個：このノン−オキソ−カルボニルの酸素以外のへ テロ原子をＯがら４個、アリールもしくは置換アリール基を０から１個〔好適に は、この置換基は、そのヒスタミン連結鎖に対してパラ位に位置しているメチル またはトリフルオロメチルである〕　そして共有結合しているアミノ酸、ポリペ プチド、蛋白質またはそれらの誘導体をＯから１個：有する種々の長さの側鎖を 生じさせることによって、ヒスタミン誘導体およびそれらの薬学的に許容される 塩類を生じさせる。

具体的には、本発明の方法で投与するヒスタミン誘導体は、式％式％） ［式中、 Ｈｉｓ−ＮＨは、ヒスタミニル残基を意図しており、ここでこのＮＨ＜−１側鎖 アミノ（２−（４’−イミダゾリニル）エチルアミノ）であり、 ｎは、この鎮内のメチレン基の数を示しており、通常Ｏから１０゜より通常には ２から６、好適には２から５であり、Ｘは、カルボニル、メチレンまたはアルキ リデン、即ち−ＣＨＲ−であり、ここでＲは、炭素数が１から３のアルキル鎮、 好適にはメチルであり、 Ｙは、末端基であるメチルまたはアミド、即ち−ＣＯＮＨ２（ここで、Ｚは水素 であるか、或は好適にはＺは有機基であり、それによってＮｌ換されているアミ ドを生じ、ここで、このＮ置換基は、アルキル基、特に直鎖、即ち−（ＣＨ２） 、、ＣＨ３であり、ここで、ｍは通常０から１０、より通常には２から６、好適 には２から５である）　アリールまたは置換アリール基、即ちｐｈｌは、フェニ レン、特にバラーフェニレンであり、Ｄは水素、メチルまたはへテロ原子置換メ チル、好適にはハロメチル、より詳細にはトリフルオロメチルであり、そしてこ のＤ基はその鎖に対してパラ位にある）：或はアミノ酸、ポリペプチド、蛋白質 またはそれらの誘導体であり、 Ａは、生理学的に許容される対イオン、例えば酢酸塩、塩化物、硫酸塩、燐酸塩 など、好適には塩化物であり、そしてｂは、この環内に見られる追加的プロトン 類および対イオン類の数（例えば中和で利用され得る塩基性アミン類の数）を示 しており、通常Ｏから２、好適には１から２であるが、但しここで、Ｙがアミノ 酸、ポリペプチド、蛋白質またはそれらの誘導体である場合、ｂは、Ｙが導入す る何らかの追加的電荷を部分的もしくは全体的に中和する目的で２よりも大きく てもよいことを条件とするコ で表される。更に、ＹがメチルでありモしてＸがカルボニルであるか或はＲがメ チルである時、ｎは４以外である。

特に興味の持たれるヒスタミン誘導体には、式。

Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ’−（ＣＨ２）ｎ’−ＣＯＮＨ２゜Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ’−（Ｃ Ｈ２）ｎ”−ＣＨ３［式中、 Ｈｉｓ−ＮＨは、ヒスタミニル残基であり、ここでこのＮＨは側鎖アミノであり 、 Ｘ′は、Ｃｏ５ＣＨ２またはＣＨＣＨ，であり、ｐｈｌは、フェニレン、特にパ ラーフェニレンでアリ、Ｄは、メチルまたはトリフルオロメチルであり、Ｅは、 天然に存在している何らかの（特に遺伝的にコード化された）アミノ酸残基側鎖 である、即ちＥは、Ｈ（この場合のアミノ酸はグリシンである）であるか或はグ リシンのアルファー炭素に結合しているアミノ酸の側鎖（この場合のアミノ酸は グリシン以外のアミノ酸である）であり、 Ｇは、０ＨＳＮＨｚまたはＮＨＣＨ３であり、Ｚ′は、これが結合している窒素 と一緒になって、ポリ（アミノ酸）であり、 ｎ′は、２から５の整数、通常３から５の整数であり、ｎ′は、２から３の整数 であり、 ｐ′は、１から８の整数である］ で表される化合物が含まれる。

より詳細には、興味の持たれる個々のヒスタミン誘導体は、構造：Ｈｉ　ｓ　− ＮＨ−Ｑ　（ＨＡ）ｂ の範囲内に入り、ここで、 Ａおよびｂは、上に定義したのと同じであり、そしてＱを、下記。

−ＣＯ”（ＣＨ２）３−Ｃｏ−ＮＨ−ｐ石−ＣＨ３−ＣＨ２−（ＣＨ２）４−Ｃ Ｈ３ −ＣＨ２−（ＣＨ２）３−Ｃｏ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−Ｃｏ−（ＣＨ２）２− Ｃｏ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３（ＣＨ２）２−Ｃｏ−ＮＨ−ｐｈｉ− ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）１−Ｃｏ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３ −（ＣＨ２）２−Ｃｏ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）３−Ｃ ｏ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）４−Ｃｏ−Ｎ）（−ｐ石− ＣＨ５−ＣＨＣＨ５（ＣＨ２）５−Ｃｏ−ＮＨ−ｐ石−ＣＨ５−ＣＨＣＨ５（Ｃ Ｈ２）３−Ｃｏ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）４−Ｃｏ−Ｎ Ｈ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）４−Ｃｏ−ＮＨ−（ＣＨ２）３− ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）３−Ｃｏ（ＢＯＣ）（）１−Ｎ（Ｈ）１−０− Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨＣＨ３として定義し、そしてここで、 ＢＯＣは、ｔ−プチルオキシカルボニルブロッキング基である。

これらのヒスタミン誘導体は、当該技術分野でよく知られている操作に従う種々 の方法で合成され得る。上記ヒスタミン誘導体の合成に関する考察を、米国特許 第４．９９６．２２１号（引用することによって本明細書に組み入れられる）の 中に見ることができる。混合無水物、カルボンイミドまたはハロゲン化アリール 方法により、ヒスタミンと適当なカルボン酸から、それらのアノル化された誘導 体を製造することができる。

ハロゲン化物または疑似ハロゲン化物化合物、例えばブロモ、クロロ、トンルな どを用いた置換反応によるか、或は好適には、ナトリウムシアノボロハイドライ ドまたは同様な試薬の存在下でアルデヒドを用いたヒスタミンの還元アミン化を 行うことによって、分枝していないアルキル化誘導体を合成することができる。

適当なメチルケトン誘導体を用いたヒスタミンの還元アミノ化によるか、或はハ ロゲン化物または疑似ハロゲン化物置換（除去よりも置換を優先する条件を用い ）によって、分枝しているアルキル化誘導体を製造することができる。これらは 可能な合成ルートであるが、本主題発明の化合物の製造ではまた、当該技術分野 でよく知られている他の方法も考えられる。

これらのヒスタミン誘導体は、通常の精製技術、例えば晶析など、或はクロマト グラフィー技術、例えばカラムクロマトグラフィー、高性能液クロ、予備薄層ク ロマトグラフィーなどによって精製され得る。

本主題発明は、ポリ（アミノ酸）分子が有するアミノ酸に対する連結基を通して ヒスタミンが連結していて接合体を特定しているところの、ヒスタミンの誘導体 を包含していると理解する。このヒスタミン誘導体は、ポリペプチド類、蛋白質 、糖蛋白質またはそれらの誘導体（これらは全てポリ（アミノ酸）の中に含まれ る）の如き担体に連結していてもよい。

これらの接合体は、種々の機能、即ち該ヒスタミン誘導体が示す生理学的特徴を 変化させる機能、免疫原として働かせる機能、細胞特異的結合を与える機能など を果し得る。この接合体の目的に応じて、追加的官能基、置換基などを加えるこ とにより、該ヒスタミン誘導体が示す性質を多少変化させることができる。特に 、免疫原がらの抗体産生に関しては、１つの基を別の基に変えることができ、例 えばメチルまたはトリフルオロメチルをカルボキシルで置換することができる。

また、免疫原の場合・ヒスタミンまたは中間体状態で、このヒスタミン誘導体の 末端の置換を行うのが望ましい可能性がある。

幅広い種類の官能基を通してこれらの接合体を結合させることによって、アミド 、メチレンアミン、チオエーテル、ジスルフィド、スルホンアミド、ア゛人アミ ジンなどを生じさせてもよい。選択する特別な官能基は、この接合体の目的、合 成の容易さ、その連結官能基の安定性、その物理化学に対するその連結基の影響 などに依存している・本発明の接合体は、大部分が下記の式：％式％ ［式中、 これらの記号に関しては全て上で定義したが、但し水素・メチルまたはトリフル オロメチル基を、Ｔに対する結合または連結基であるＷで置き換えてもよ（、 ここで、Ｔは、アミノ酸誘導体またはポリ（アミノ酸）であり、そしてｄは、Ｔ 当たりのヒスタミン誘導体数であり、通常平均で１から５０、より通常には１か ら２０、しばしば１から１０の範囲であり、 Ｗは、水素以外の原子を少なくとも１個有する結合または連結基であり、そして これは、例えば過ヨウ素酸塩で開裂させた糖またハ他のアルデヒドの還元アミノ 化によるメチレン、ノンーオキソ−カルボニル、チオ、アルキレン−ノン−オキ ソ−カルボニルアルキレン、アルキレンチア（ａｌｋｙｌｅｎｅｔｈｉａ）、ア リーレン−ノン−オキソ−カルボニル、アリールアゾなどであってもよいが、こ の特定の連結基は、本明細書に記述することを除き決定的でなく、 Ｔは、アミノ酸であるか、或は約２から２０００、通常的２から１０００個のア ミノ酸残基を有するポリ（アミノ酸）であり、これはまた糖類または脂質を含ん でいてもよく、そしてこれは、抗体を生じさせるための担体、例えばウソ血清ア ルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン、β−グロビンなど、通常少なく とも約１００個のアミノ酸を有するポリ（アミノ酸）であってもよいか、或は部 位特異的結合のための、ホルモン、リンフ才力イン１成長因子などであってもよ い］ で表される。

この連結基には、生理学的条件下の加水分解的開裂に耐性を示すか或は敏感性を 示す連結が与えられていてもよい。

このヒスタミン誘導体および担体に結合させる官能性を、これらの２つの間に適 切な化学結合を生じさせることを可能にする様式で互いを補足するように選択す る。従って、この担体がアミン官能基、例えばリジンまたはｐ−アミノフェニル アラニン側鎖を含んでいる場合、そのヒスタミン誘導体の官能基はカルボン酸、 スルホン酸などであってもよい。

担体当たりのヒスタミン誘導体の数は、１であるか或は１よりも大きい如何なる 数であってもよい。担体分子当たりのヒスタミン誘導体の数は、その担体内に存 在している適当な官能基の数、並びにその達成反応を行っている間に用いる化学 量論に依存している。

合成ルートは当該技術分野でよく知られている。１つの方法は、その伸長させた アミン側鎖が適切な官能基を有しているか或はヒスタミン上の他の位置に適切な 官能基が存在している、適当なヒスタミン誘導体を製造することを伴っている。

次に、１種以上の官能化したヒスタミン誘導体を、今度は、その担体が有する適 当な側鎖に連成させる。また、１つの合成方法は、ヒスタミンに反応性を示すさ らなる官能基を含んでいる誘導体基原子団を直接その担体の側鎖に連成させるこ とによる、その担体の初期修飾を伴っていてもよい。次に、例えば還元アミノ化 反応で接合体を生じさせることによって、その得られる担体誘導体を直接ヒスタ ミンに連成させる。

哺乳動物の免疫系による抗原特異的抗体応答の少なくとも一部を阻害する方法で 上記ヒスタミン誘導体が有効性を示すことを見い出した。特に、少なくとも１種 のヒスタミンレセプタに結合特異性を示す少なくとも１種のヒスタミン誘導体を 有効量で投与すると、ＩｇＧおよび／またはＩｇＥ抗体の産生が阻害されること を見い出した。ＩｇＭ抗体の産生が阻害されないのは明らかである。この阻害は 、ヒスタミン誘導体の用量に依存しており、数カ月間持続し得るものであり、こ のヒスタミン誘導体を繰り返して投与することでそれを長引かせることが可能で あり、そして更に、既に確立されている抗原に対する応答を逆転させることも可 能である。本発明の少なくとも１種のヒスタミン誘導体を投与すると、哺乳動物 の免疫系による抗原特異的抗体応答の阻害がもたらされ、ここでは、ＩｇＥ抗体 産生の少なくとも約３０％が阻害されそして／またはＩｇＧ抗体産生の少なくと も６０％が阻害され、より好適にはこのＩｇＧ抗体産生の阻害は約１００％に及 ぶ。好適には、ＩｇＥ抗体の産生およびＩｇＧ抗体の産生両方が本質的に阻害さ れる（即ち、ＩｇＥ産生は少なくとも約３０％阻害され、そしてＩｇＧ産生は少 なくとも約６０％阻害される）。

少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでいる組成物を哺乳動物に投与する様 式は、当該技術分野でよく知られている方法に従って幅広く変化する。好適には 、生理学的に適切であるか或は薬学的に許容される担体と一緒にこの組成物を投 与する。この担体は、当該技術分野で知られている如き生理学的に許容される如 何なる緩衝液であってもよく、これには、これに限定されるものではないが、燐 酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）が含まれる。適切な投与方法には、これに限定される ものではないが、経口、非経口、皮下注射などが含まれる。好適な投与ルートは 皮下である。少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでいる組成物の薬学的に 有効な濃度および投薬量は、その目的、宿主、そして用いる特別な誘導体に応じ て幅広（変化する。濃度は、１０−１Ｍ未満、好適には１０−３Ｍ以下で変化し 得る。上記組成物の適切な１回の薬学的有効投薬量は、体重１ｋｇ当たり約０． ５ｍｇから約１００ｍｇの範囲である。好適な範囲は、約１ｍｇ／ｋｇから５０ ｍｇ／ｋｇ、好適には約１から２０ｍｇ／ｋｇ、より好適には約１から１’Ｏｍ ｇ／ｋｇである。薬学的に有効な適切な１日の全投薬量は、約１ｍｇ／ｋｇから １００ｍｇ／ｋｇの範囲である。

本発明はまた、予め決めた抗原に敏感性を示す哺乳動物（即ちこの哺乳動物は、 その予め決めた抗原に対する抗体を産生じている）の免疫系による、予め決めた 抗原、例えば蛋白質アレルゲンまたは自己抗原に対する抗原特異的抗体応答の少 なくとも一部を阻害する方法も提供する。

この態様に従い、少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでいる組成物の有効 量を、予め決めた抗原またはそれの免疫原性部分（即ち免疫応答を引き出し得る 抗原部分）に敏感性を示す哺乳動物に投与する。少なくとも１種のヒスタミン誘 導体を投与することにより、この哺乳動物の免疫系による上記予め決めた抗原に 対する抗体のさらなる産生が少なくとも部分的に阻害される。

上記態様の１つの変法において、予め決めた抗原またはそれの免疫原性部分を、 本発明のヒスタミン誘導体と協力させて、その予め決めた抗原またはそれの免疫 原性部分に敏感性を示す哺乳動物に投与することにより、その予め決めた抗原ま たはそれの免疫原性部分に対する抗原特異的抗体応答を特異的に阻害する（即ち その予め決めた抗原またはそれの免疫原性部分に特異的反応性を示す抗体のさら なる産生を少なくとも部分的に阻害する）。この予め決めた抗原またはそれの免 疫原性部分は、少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでいる組成物と同時に か或は逐次的に、その哺乳動物に投与され得る。本発明で用いる抗原には、これ に限定されるものではないが、蛋白質アレルゲン類、自己抗原、或は免疫応答を 引き出し得る、どちらかの抗原の少なくとも免疫原性部分が含まれる。

本発明の別の態様は、蛋白質アレルゲンまたは自己抗原の如き抗原に対する敏感 性を治療する方法を提供するものである。この方法に従い、蛋白質アレルゲンま たは他の佐原から誘導した、Ｔ細胞刺激活性を示すペプチドを、本発明のヒスタ ミン誘導体と協力させて、このペプチドを誘導した蛋白質アレルゲンまたは自己 抗原に敏感性を示す個体に投与する。本明細書では、Ｔ細胞増殖、リンフ才力イ ン分泌および／またはＴ細胞アレルギー／寛容化（ｔｏｌｅｒｉｚａｔｉｏｎ） の誘発としてＴ細胞刺激活性を定義する。蛋白質アレルゲンまたは他の抗原に敏 感性を示す個体から得たＴ細胞を、この蛋白質アレルゲンまたは他の抗原から誘 導したペプチドと一緒に培養した後、このペプチドに応答したそのＴ細胞による 増殖が存在しているか否かを決定することによって、上記Ｔ細胞刺激活性を試験 することができる。

蛋白質アレルゲンまたは他の抗原に対する敏感性を治療する方法で有効なペプチ ド類は、Ｔ細胞刺激活性、好適にはヒトＴ細胞刺激活性を示し、従って、蛋白質 アレルゲンまたは他の蛋白質抗原が有する少なくとも１種のＴ細胞エピトープを 含んでいる。好適なペプチド類は、Ｔ細胞エピトープを少なくとも２個含んでい る（例えば、このペプチドは、少なくとも約８個のアミノ酸残基、好適には少な くとも１５個のアミノ酸残基を含んでいる）。蛋白質アレルゲンから誘導される ペプチド類は、好適には、免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）に結合しないか、或はＩ ｇＥに結合したとしても、そのペプチドを誘導した蛋白質アレルゲンがＩｇＥに 結合するよりも本質的に低い度合である。

Ｔ細胞のエピトープは、蛋白質アレルゲンまたは他の蛋白質抗原に対する免疫応 答の開始および永続に関与していると考えられ、これは、それぞれ、アレルギー または他の病気の臨床的症状の一因になっている。

これらのＴ細胞エピトープは、抗原提示細胞の表面上の適当なＨＬＡ分子に結合 してそれに関連したＴ細胞並集団（ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔ　ｉ。

ｎ）を刺激することにより、Ｔヘルパー細胞のレベルにおいて、初期の出来事の 引金になると考えられる。これらの出来事により、Ｔ細胞増殖、リンフ才力イン 分泌、局所的炎症反応、その部位への追加的免疫細胞の漸増、並びに抗体産生を もたらすＢ細胞カスケードの活性化などがもたらされる。これらの抗体の１つの イソタイプであるＩｇＥは、アレルギー症状の発現にとって基本的に重要であり 、そしてそれの産生は、そのカスケードの出来事における初期段階でその分泌さ れるリンフ才力イン類が示す性質により、Ｔヘルパー細胞のレベルにおいて影響 を受ける。

Ｔ細胞のエピトープは、Ｔ細胞レセプタによる認識の基本要素であるか或は最小 単位であり、ここで、このエピトープは、レセプタ認識に必須なアミノ酸を含ん でおり、そしてこの蛋白質が有するアミノ酸配列内で隣接および／または非隣接 であ７てもよい。Ｔ細胞エピトープ類のアミノ酸配列に類似しておりそして蛋白 質アレルゲンに対するアレルギ一応答を修飾するアミノ酸配列は、本発明の範囲 内である。

これらのペプチド類を投与すると、これらは、Ｔ細胞並集団がその蛋白質アレル ゲンまたは他の抗原に応答性を示さないようになりそしてこのように暴露された 時の免疫応答刺激に参加しないように、適当なＴ細胞並集団を寛容にする（ｔｏ ｌｅｒｉｚｅ）か或はアネルギーにする（ａｎｅｒｇｉｚｅ）可能性がある。加 うるに、蛋白質アレルゲンに関する少な（とも１種のＴ細胞エピトープを含んで いるペプチドを投与すると、天然に存在している蛋白質アレルゲンまたはそれの 一部に暴露された時と比較して、リンフ才力イン分泌プロファイルが修飾され得 る（例えばＩＬ−４の減少および／または！Ｌ−２の増加がもたらされる）。更 に、このペプチドへの暴露は、そのアレルゲンに対する応答に通常参加している Ｔ細胞並集団に影響を与える結果として、これらのＴ細胞を、そのアレルゲンに 通常暴露される部位（類）（例えば鼻粘膜、皮膚および肺）から遠ざけて、その ペプチドを治療学的に投与した部位に向かわせる可能性がある。このようなＴ細 胞並集団の再分布により、そのアレルゲンに通常！露される部位でその通常の免 疫応答を刺激する、その個体の免疫系が示す能力が、改善されるか或は低下し、 その結果として、アレルギー症状の低下がもたらされる。

蛋白質アレルゲンからペプチド類を誘導する時、これらは、蛋白質アレルゲンが 有するＴ細胞エピトープを少なくとも１個、好適には少なくとも２個含んでいる 可能性があり、この蛋白質アレルゲンは、例えばダーマトファゴイデス（Ｄｅｒ ｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ）属の蛋白質アレルゲン；フエリス（Ｆｅｌｉｓ） 属の蛋白質アレルゲン：アムブロンア（Ａｍｂ　ｒｏ　ｓ　ｉ　ａ）属の蛋白質 アレルゲン、ロリウム（Ｌｏｌｉｕｍ）属の蛋白質アレルゲン：クリプトメリア （Ｃｒｙｐ　ｔｏｍｅ　ｒ　１ａ）ＫＩＥの蛋白質アレルゲン、アルテルナリア （Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属の蛋白質アレルゲン、アルダ−（Ａｌｄｅｒ）漠の 蛋白質アレルゲン：ベッラ（Ｂｅｔｕｌａ）属の蛋白質アレルゲン：クエルクス （Ｑｕｅｒｃｕｓ）属の蛋白質アレルゲン、オレア（Ｏｌｅａ）Ｉｉｉｉの蛋白 質アレルゲン、アルテミシア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）属の蛋白質アレルゲン：プ ランタゴ（Ｐｌａｎｔａｇｏ）属の蛋白質アレルゲン：パリエタリア（Ｐａｒｉ ｅｔａｒｉａ）Ｉｊｉの蛋白質アレルゲン：カニン（Ｃａｎｉｎｅ）属の蛋白質 アレルゲン、ブラテラ（Ｂ　Ｉ　ａ　ｔ　ｔ　ｅ　Ｉ　Ｉ　ａ）　ｊｉｉの蛋白 質アレルゲンニアビス（Ａｐｉｓ）ＩＩの蛋白質アレルゲン；およびペリブラネ タ（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａ）属の蛋白質アレルゲン、から成る群から選択され る蛋白質アレルゲンである。好適なペプチド類は、Ｄｅｒ　ｐ　Ｉ；Ｄｅｒ　ｐ 　ＩＩ：Ｄｅｒ　ｆ　Ｉ；Ｄｅｒ　ｆ　ＩＩ；Ａｍｂ　ａ　１．１；Ａｍｂ　ａ 　１．２；Ａｍｂ　ａ　１．３；Ａｍｂ　ａ　１．４：Ａｍｂ　ａ　ＩＩ；Ｌｏ ｌ　ｐ　Ｉ；Ｌｏｌ　ｐＩＸ；Ｃｒｙ　ｊ　Ｉ；Ｃｒｙ　ｊ　ＩＩおよびＦｅｌ 　ｄ　ｌから成る群から選択される蛋白質アレルゲンから誘導される。

本発明の方法で有効なペプチド類は、抗原特異的免疫応答の増強または減退が望 まれている、蛋白質アレルゲン以外の蛋白質抗原からも誘導され得る。例えば、 自己免疫病の病因に関与している公知自己抗原のヒトＴ細胞刺激活性を示すペプ チド類か、或は公知自己抗原の少なくとも１つのＴ細胞エピトープを含んでいる ペプチド類を投与することによって、その自己抗原に対する抗体応答を低くし、 その効力を阻害し、モして／または免疫複合関連副作用を低くすることができる 。この自己抗原が示すＴ細胞反応性を維持する目的で、標準的Ｔ細胞生物学技術 を用いて、ヒトＴｉ［ｌＦ刺激活性を示す自己抗原から誘導したペプチド類を限 定してもよいか、或は望ましくは、繊細なマツピングにより正確な子細胞エピト ープ類を特定し、そして少なくとも１つのＴ細胞エピトープを含んでいるペプチ ドを作り出してもよい。治療方法における免疫療法剤として用いるには、Ｔ細胞 を刺激するがその自己抗原が示す望まれない特性を有していないペプチド類（例 えば、この自己抗原に敏感性を示す個体の実質的割合が、自己抗体に結合しない ）を選択する。本発明の方法で有効な自己抗原には、糖尿病におけるインシュリ ン、グルタミン酸デカルボキシラーゼ（６４Ｋ）　、ＰＭ−１およびカルボキシ ペプチダーゼ、多発性硬化症におけるミニリン塩基性蛋白質：胎児赤芽球症にお けるｒｈファクター：重症筋無力症におけるアセチルコリンレセプタ：Ｇｒａｖ ｅｓ病における甲状腺レセプタ；Ｇｏｏｄ　Ｐａ５ｔｕｒｅ症候群における基底 膜蛋白質：並びに甲状腺炎における甲状腺蛋白質などが含まれる。

本発明はまた、蛋白質アレルゲンまたは自己抗原の如き抗原に対する個体の敏感 性を治療する方法を提供するものであり、これは、ヒスタミン誘導体と治療学的 に許容される担体または希釈剤を含んでいる治療組成物の治療学的有効量をその 抗原に敏感性を示す個体に投与することによるものである。本発明に従い、上記 治療組成物を個体に投与することにより、投与して１５０日に及んで、抗原特異 的抗体応答の少なくとも一部を阻害する。年に少なくとも一度、好適には年に４ 回に及んで、上記組成物を個体に投与する。

それと同時か或はそれの後、任意に、その抗原またはそれの免疫原性部分をその 個体に投与することにより、その抗原またはそれの免疫原性部分に対してその個 体が示す抗原特異的免疫応答を特異的に阻害する。

加うるに、この抗原から誘導した、Ｔ細胞刺激活性を示すペプチドをその個体に 投与することにより、その抗原に対してその個体を脱感作する。

好適には、このペプチドはその抗原が有する少なくとも１つのＴ細胞エピトープ を含んでいる。このペプチドを誘導したアレルゲンまたは他の蛋白質抗原に敏感 性を示す個体に上記ペプチド類を、その個体がそのアレルゲンまたは他の抗原に 対して示す敏感性を低くするに有効な投薬量で有効な期間に渡って投与する。

Ｔ細胞刺激活性を示すペプチド類は、生理学的に許容される賦形剤を含んでいる 治療組成物の形態で投与され得る。例えば、このペプチドは、適宜、適当な希釈 剤、担体および／またはアジュバントと組み合わせて投与され得る。薬学的に許 容される希釈剤には、食塩水および緩衝水溶液が含まれる。薬学的に許容される 担体には、ポリエチレングリコール（Ｗｉｅ他ｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　 Ａｒｃｈｉｖｅｓ　ｏｆＡｌｌｅｒｇｙ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｉｍｍｕｎ ｏｌｏｇｙＪ、６４　：　８４−９９　（１９８１）およびリポソーム（Ｓｔｒ ｅｊａｎ他ｒＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＮｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙＪ、７］ ２７　（１９８４））などが含まれる。薬学的に許容されるアジュバントにはみ ょうばんが含まれる。上記組成物は、一般に、注射、経口投与（例えばカプセル の形態）、吸入、経皮投与または直腸投与などで投与される。

以下に示す非制限実施例を用いて本発明の詳細な説明を行う。

ネコが居るい（つかの家庭から集めた家埃サンプルを用いて、Ｆｅ１ｄｌを単離 して精製した。セファロース４Ｂにモノクローナル抗体ｌＧ９または６Ｆ９を連 成し、そしてこれを、公開されたプロトコルに従う精製で用いた。Ｃａｐｍａｎ 、Ｍ、Ｄ、他ｒＪ、Ｉｍｍｕｎｏｌ。

ｇｙＪ、１４０　（３）＋　８１２−８１８　（１９８８）。この精製したＦｅ ｌ　ｄ　ｌ蛋白質を、４ＮのＮａＣ１と一緒に、フェニル−セファロースカラム （Ｐｈａｒｍａｃｉａ）上に置いた後、２ＭおよびＩＭのＮａＣｌで溶離させる ことによって、それの脱色を行った。その２Ｍおよび１Ｍ塩溶離液を蒸留水に対 して透析することによって、脱色したＦｅｌ　ｄ　ｌ蛋白質を回収した後、凍結 乾燥した。代替脱色方法は、その家埃抽出液を、そのアフィニティー精製を行う に先立って５ｅｐｈａｃｒｙｌ　２００カラム（Ｐｈ　ａ　ｒｍａ　ｃ　ｉ　ａ ）に通す方法である・アフィニティー精製したＦｅｌ　ｄ　Ｉのみょうばん沈澱 ５ＱｍＬの円錐管の中に、１０ｍＬの１０％硫酸アルミニウムカリウム（Ｂａｎ ｃｏＳＦｏｒｔ　ＷｏｒｔｈＳＴＸ）を入れる。渦巻き撹拌シナがら、０．２５ ＮのＮａＯＨを２２．３ｍＬ滴下する。＝ａで１０分間インキュベートする。１ ０００ｇで１０分間遠心分離する。その上澄み液を除去して廃棄する。そのペレ ットに蒸留水を５０ｍＬ加えて、そのＡＩ（○Ｈ）３の再懸濁を行う。１０００ ｇで１０分間遠心分離する。

１ｍｇのＡＩ（○Ｈ）ｓは、約５０−２００μｇのＦｅｌ　ｄ　ｌ蛋白質と結合 する。２００μｇ／ｍＬのＦｅｌ　ｄ　ｌ蛋白質と１ｍＬのＡＩ（○Ｈ）ｓとを 一緒にする。従って、５ｍＬの燐酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）の中に１ｍｇのＦｅ ｌ　ｄ　ｌ蛋白質を希釈したものと、５ｍＬのＡＩ（○Ｈ）３とを一緒にする。

室温で３０分間インキュベートする。このサンプルをエソペンドルフ管に分け、 エピフユージ（ｅｐｐｉｆｕｇｅ）（１５，０００ｒｐｍ）内で１０分間高速回 転させる。抗原の存在に関してその上澄み液を試験することができるように、こ の上澄み液を試験管に移すことにより、抗原が結合を生じたことを確かめる。

そのベレットを所望体積のＰＢＳ内に再懸濁させて、マウスに注射する。

（Ｅｄ　ＨａｒｌｏｗおよびＤａｖｅ　Ｌａｎｅ著ｒＡｎ　ｔ　ｉ　ｂｏｄ　ｉ ｅｓ：　Ａ　Ｌａ、ｂｏｒａｔｏｒｙ　ＭａｎｕａｌＪ　（１９８８）、Ｃｏａ ｓｔａｒ　ＥＩＡプレート（＃　３５９０）に、ＰＢＳ中１μｇ／ｍＬのＦｅｌ 　ｄ　ｌをウェル１個当たり５０μＬ用い４℃で一部コートする。プレートを１ ｘＰＢＳで洗浄する（３回繰り返す）。ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ　（ＰＢＳ−Ｔ）中 １％のＢＳＡ　（本質的にグロブリンが入っていない）を、ウェル１個当たり１ ００μＬ用い、室温で１時間ブロックする。（ＰＢＳ−Ｔ）内で希釈した試験血 清を、ウェル１個当たり１００μし、室温で１時間加える。プレートを１ｘＰＢ Ｓ−Ｔで３回洗浄する。ＰＢＳ−Ｔ内で１１５０００希釈したヤギ抗マウスＩｇ Ｇを、ウェル１個当たり１００μＬ１室温で１時間加える。プレートを１ｘＰＢ Ｓ−Ｔで３回洗浄する。ＰＢＳ−Ｔ内で１／１０，０００希釈したストレプトア ビジン−ＨＲＰを、ウェル１個当たり１００μＬ１室温で３０分間加える。プレ ートを１ｘＰＢＳ−Ｔで３回洗浄する。ＴＭＢ基質を用いて、ＫＰＬから展開す る。ＩＭの燐酸で反応を停止する。ＥＬＩＳＡ読み取り機上で、ＯＤ４５０ｎｍ における読み取りを行う。

抗Ｆｅｌ　ｄ　Ｔ　ＩｇＥのＥＬ　Ｉ　ＳＡＣｏｒｎｉｎｇ　ＥＬＩＳＡプレー トに、ＰＢＳ中１０ｍｇ／ｍＬのＦｅｌ　ｄ　Ｉをウェル１個当たり５０μＬ用 い４℃で一部コートする。

プレートを１ｘＰＢＳで３回洗浄する。ＰＢＳ中０．０５％のゼラチンを１００ μｌ／ウェル用い３７℃で１時間プレートをブロックする。ＰＢＳ−Ｔで３回プ レートを洗浄する。ＰＢＳ−Ｔで希釈した試験血清を１００μＬ加え、３７℃で １時間インキュベートする。ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄する。ＰＢＳ−Ｔ内で１’／ ２０００希釈したビオチン標識Ｅｍ９５を、各ウェル当たり１００μＬ加えた後 、室温で１時間インキュベートする。Ｆ）ＢＳ’−Ｔで３回洗浄する。ＰＢＳ’ −Ｔ内で１７５０００希釈した、ビオチン標識ヤギ抗マウスＩ　ｇＥ　（Ｈ＆Ｌ ）を、各ウェル当たり１００１ＩＬ加えた後、室温で１時間インキュベートする 。ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄する。ＰＢＳ−Ｔ内で１／１０．０００希釈したストレ ブトアビジン−ＨＲＰを、各ウェル当たり１００μＬ加えた後、室温で１／２時 間インキュベートする。ＰＢＳ−Ｔで３回洗浄する。ＴＭＢペルオキシダーゼ基 質を用いて、ＫＰＬから展開する。ＩＭの燐酸で反応を停止する。ＥＬＩＳＡ読 み取り機上で、ＯＤ４５０ｎｍにおける読み取りこの実験では、Ｆｅｌ　ｄ　Ｉ に対するインビボ免疫応答に関して、２つの異なる用量で用いた、下記の式 ％式％ で表されるヒスタミン誘導体（同族体としても認識する）が示す効果を分析した 。我々は、Ｂａ１ｂ／ｃマウス（平均体重２５グラム）がＦｅ１ｄｌに対して良 好なＩｇＧ応答を示すことから、この実験ではこのマウスを用いることを選択し た。マウスのグループに、抗原処理する１日前（日−１）および抗原処理して２ 日後（日＋２）の２回、化合物１の腹こう肉処理を行った。化合物１の用量は、 １００μＬのＰＢＳの中に入れた、１００ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇまたは食 塩水対照であった。０日月、３つのグループのマウスに、１０μｇのＦｅｌ　ｄ 　Ｉみょうばん（上に記述した如く入手した）を腹こう内注射した。

これらの３つのグループのマウスに関する感作および採血スケジュールは下記の 通りである。

上に記述した一次免疫化後、１６応答に関しては２１日後にマウスの採血を行っ た。このマウスにブースター処理し、そしてその後１４日後に、２°応答に関し てそのマウスの採血を行い、そして再び１４日後、抗原注射を介在させることな く２°Ｂ応答に関する採血を行った。このマウスの５″Ｂに関する採血を行うま で、このようなブースター処理スケジュール（即ち２°、２°Ｂ、３°、３°Ｂ ）を繰り返した。このマウスにブースター処理を行う毎に、化合物１の日−１と 日＋２用量を受けさせ、モして０日月に、１０μｇのＦｅｌ　ｄ　Ｉみょうばん を注射した。

Ｆｅｌ　ｄ　ｌに対するＩｇＧおよびＩｇＥ抗体応答に関して、上述した如きＥ ＬＩＳＡで全ての血清を試験した。

日−１および日＋２に化合物１を１００ｍｇ／ｋｇ受けさせたマウスでは、毒性 がいくらか見られた。このグループでは、６匹のマウスの中で２匹が死亡した。

図１および２に示すように、１００ｍｇ／ｋｇの化合物１で免疫化したマウスは 、食塩水対照マウス（ここでは、Ｆｅｌ　ｄに対して有意なＩｇＧ応答と平均的 なＩｇＥ応答が存在していた）に比較して、Ｆｅ１ｄｌに対するＩｇＧもしくは ＩｇＥ応答を全く示さなかった。５０ｍｇ／ｋｇで化合物１を受けさせたマウス が示すＦｅｌ　ｄ　ｌに対するＩｇＧおよびＩｇＥ応答は、食塩水対照マウスに 比較して低かった。

表１ 実施例２ 感作番号３７ 感作番号３４で得られる結果により、抗原を用いた各ブースター処理で化合物１ を用いた処理を行うと、そのマウスにおけるＦｅｌ　ｄ　１特異的抗体の低下が もたらされることが示された。この実験では、抗原を用いた初期注射で化合物１ を単一用量で投与した。−次感作でのみ、抗原免疫化を行う１日前と抗原免疫化 して２日後に、１００μＬのＰＢＳの中に入っている化合物１を５０ｍｇ／ｋｇ か或は食塩水をマウスのグループに与えた。この免疫化および採血スケジュール は感作番号３４と同じであったが、ここでは、その次のブースター処理において 、０日月に１０μｇのＦｅｌ　ｄ　Ｉみょうばんを与えるのみで、その薬剤の投 与は行わなかった。

図３に示すように、１°において５０ｍｇ／ｋｇの化合物１で免疫化したマウス が示すＦｅｌ　ｄ　Ｉに対するＩｇＧ応答は、食塩水対照グループに比較して非 常に良好であった。化合物１で処理したグループでは明らかにＦｅｌ　ｄ　Ｉ応 答に対する反応が遅れていた。ＩｇＥに特異的なＦｅｌ　ｄ　Ｉ応答に関しては 、これらの２つのグループ内で有意な差が見られなかった（図４）。

表２ 実施例３ 感作番号３８ この実験では、より少ない用量で化合物１を３グループのマウスに投与した。マ ウスのグループに、抗原処理する１日前（日−１）および抗原処理して２日後（ 日＋２）の２回、化合物１の腹こう肉処理を行った。

化合物１の用量は、１００μＬのＰＢＳの中に入れた、５０ｍｇ／ｋｇ。

５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇまたは食塩水対照であった。０８目、４つのグ ループのマウスに、１０μｇのＦｅｌ　ｄ　Ｉみょうばんを腹こう内注射した。

この免疫化および採血スケジュールは感作番号３４に記述した如くであった。

図５は、化合物１を５０ｍｇ／ｋｇ与えたマウスが示すＩｇＧに特異的なＦｅｌ 　ｄ　ｌ応答は、食塩水対照に比較して低下していた。化合物１を５ｍｇ／ｋｇ または０．５ｍｇ／ｋｇ与えたグループでは、ＩｇＧに特異的なＦｅｌ　ｄ　ｌ 応答に関して、食塩水対照に比較して有意な差が存在していなかった。図６に示 すように、全てのグループにおいて、Ｆｅｌ　ｄ　ｌに対するＩｇＥ応答は明ら かに低かった。

表３ 実施例４ 感作番号４０ 既に感作したマウスのグループが示すＦｅｌ　ｄ　ｌ応答を阻害する試みにおい て、２つのグループのマウスを１０μｇのＦｅｌ　ｄ　ｌみょうばんで前感作し た後、免疫化して２１日後に採血を行った。次の補助注射（２°）で、これらの ２つのグループのマウスに、抗原免疫化する１日前（日−１）および抗原免疫化 して２日後（日＋２）　、５０ｍｇ／ｋｇの化合物１または食塩水を腹こう内で 与えた。抗原免疫化を、１０μｇＦｅｌ　ｄ　ｌみょうばんを用い腹こう内で０ ８目に行った。

２週間後、マウスの採血を行った後、更に２週間で（ブースター処理なし）再び 採血を行った。次に、感作番号３４に記述した如きスケジュールの免疫化各々に おいて、１０μｇのＦｅｌ　ｄ　Ｉみょうばんのみを用いて、これらの２つのグ ループのマウスのブースター処理を行った。

図７および８により、２°ブースター処理でのみ薬剤を受けさせたマウスが示す 、ＩｇＧとＩｇＨに特異的なＦｅｌ　ｄ　ｌ応答は、２°でのみ食塩水を受けさ せたマウスよりもずっと低いことが示されている。

化合物１の１用量を与える前のマウスは、Ｆｅｌ　ｄ　ｌに高い応答を示さない ように見える。従って、このＦｅｌ　ｄ　ｌに特異的な応答が低下したか或は感 作番号３７に示す如＜ＩｇＧ　Ｆｅｌ　ｄ　ｌ応答が低下して遅れたか否かは、 明らかでない。

表４ 実施例５ 感作番号４１ ７５ｍｇ／ｋｇで受けさせたマウスのグループを加えて、感作番号３４を繰り返 した。従って、マウスのグループに、抗原処理する１日前（日−１）および抗原 処理して２日後（日＋２）の２回、化合物１の腹こう肉処理を行った。化合物１ の用量は、１００μＬのＰＢＳの中に入れた、１００ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋ ｇ、５０ｍｇ／ｋｇまたは食塩水対照であった。０８目、４つのグループのマウ スに、１０μｇのＦｅ１ｄｌみょうばんを腹こう内注射した。これらの４つのグ ループのマウスに関する感作および採血スケジュールは感作番号３４に記述した 如くであった。

図９および１０に示すように、１００ｍｇ／ｋｇの化合物１で免疫化しこマウス は、食塩水対照マウス（ここでは、Ｆｅｌ　ｄ　ｌに対してかなりのＩｇＧ応答 と平均的なＩｇＥ応答が存在していた）に比較して、Ｆｅｌ　ｄ　ｌに対するＩ ｇＧもしくはＩｇＥ応答を全く示さない。

７５ｍｇ／ｋｇお、Ｊ：び５０ｍｇ／ｋｇで化合物１を受けさせたマウスが示す Ｆｅｌ　ｄ　Ｉに対するＩｇＧ応答は、食塩水対照マウスに比較して低かった。

薬剤で処理したグループと食塩水対照グループとの間にＩｇＧ量の差が有るか否 かを測定する目的で、全１ｇＧアッセイ（図１１）を実施した。初期採血では、 １００ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇで受けさせたマウスと 食塩水対照グループとの間には全１ｇＧに全（変化がなかった。Ｆ’ｅｌ　ｄ　 ｌは、免疫グロブリンレベルの上昇をもたらすマイトジェン汚染物を含んでいる 。このマイトジェンの影響は、明らかに、本ヒスタミン同族体によって低下して いる。

表６ 日＋２　１００ｍｇ／ｋｇの化合物１ 日＋２　７５ｍｇ／ｋｇの化合物１ 日＋２　５０ｍｇ／ｋｇの化合物１ 実施例７ 感作番号４２ 抗原としてオボアルブミンを用いる以外は感作番号３４に記述した如き感作およ び採血スケジュールを実施した。マウスのグループに、抗原処理する１日前（日 −１）および抗原処理して２日後（日＋２）の２回、化合物１の履口う自処理を 行った。化合物１の用量は、１００μＬのＰＢＳの中に入れた、１００ｍｇ／ｋ ｇ、５０ｍｇ／ｋｇまたは食塩水対照であった。０８目、３つのグループのマウ スに、５０μｇのオボアルブミンみょうばんを腹こう内注射した。

図１２に示すように、１００ｍｇ／ｋｇの化合物１で免疫化したマウスは、食塩 水対照マウス（ここでは、オボアルブミンに対してかなりのＩｇＧ応答が存在し ていた）に比較して、オボアルブミンに対するＩｇＧ応答が低い。５０ｍｇ／ｋ ｇで化合物１を受けさせたマウスが示すオボアルブミンに対するＩｇＧ応答は、 食塩水対照グループと同様であり、このことは、抗体応答が低下しないことを示 している。オボアルブミンに対するＩｇＥ応答は、明らかに、３つのグループ全 てにおいて同様である（図１２）。

表７ 日＋２　１００ｍｇ／ｋｇの化合物１ 日＋２　５０ｍｇ／ｋｇの化合物１ 日＋２　ＰＢＳ対照 実施例８ 感作番号４５ 以下の実験は、応答に差があるか否かを確認する目的で、化合物１を腹こう内（ ｉ、ｐ、　）および皮下（ｓ、ｃ、　）投与して比較を行った。

また、２日のみでなく３−９日間に渡り、小用量で化合物１を数回与えた。以下 の表は、マウスのグループおよびそれらの免疫化スケジュールである。

表８ ＋４ 図１３および１４は、１０ｍｇ／ｋｇで化合物１を９日間ｓｃ、投与したグルー プ（全体で９０ｍｇ／ｋｇ）が示すＦｅｌ　ｄ　Ｉに対する抗体応答は、食塩水 対照および１０ｍｇ／ｋｇで化合物１を９日間ｌ。

ｐ、与えたグループに比較して低下したことを示している。

実施例９ 種々の用量で化合物１を用いそして種々の投与ルートで化合物１を与えて、多数 の異なる感作を行った。我々の試験では、高い用量の時、化合物１が示す若干の 毒性を確認した。全体で２００ｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ。

の用量で受けさせたマウス１８匹中６匹（３３％）に毒性が見られた。

また、全体で９Ｑｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ、の用量（連続して９日間１０ｍｇ／ｋｇ 　ｉ、ｐ、　）で受けさせた７９２６匹中２匹（３３％）に毒性が見られた。全 体で１００ｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ、の用量で与えたマウスでは、ずっと低い度合で あるが３６匹中２匹（５，５％）が死亡したようである。また、全体で５０ｍｇ ／ｋｇ　ｉ、ｐ、の用量（連続して５日間１０ｍｇ／ｋｇ）を受けさせた後、マ ウス６匹中１匹（１６７％）が死亡した。化合物１をＳ、Ｃ，で与えたマウスは 全て死亡しなかった。

従って、本ヒスタミン誘導体と許容担体を皮下投与する方が好適な投与ルートで あると見られるが、しかしながら、毒性を低くする如何なる投与方法もまた好適 である。

表９ １００　ｍｇ／ｋｇ　日−１と日＋２　２００ｍｇ／ｋｇ　ｉ、　ｐ、　６　／ 　１８１００＋ｕｇ／ｋｇ　０日目　１００ｍｇ／ｋｇ　ｉ、　ｐ、　Ｏ／　６ ７５ｍｇ／ｋｇ　日−１と日＋２　１５０ｍｇ／ｋｇ　ｉ、　ｐ、　Ｏ／　１８ ５０　ｍｇ／ｋｇ　日−１と日＋２　１００ｍｇ／ｋｇ　ｉ、　ｐ、　２　／　 ３６５０ｍｇ／ｋｇ　０日目　５０ｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ、　Ｏ／６３０ｍｇ／ｋ ｇ　日−１，０、＋１　９０ｍｇ／ｋｇ　ｓ、ｃ、　Ｏ／６３０■／ｋｇ　日− ｔ、ｏ−＋ｔ　’１０ｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ、　Ｏ／６５　ｍｇ／ｋｇ　日−１と 日＋２　１０ｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ、　Ｏ／６０．５ｍｇ／ｋｇ　日−１と日＋２ 　１ｍｇ／ｋｇ　ｉ、ｐ、　０／６実施例１０ Ｃｈａｐｍａｎ他が記述した如く、家埃抽出液力１ら未変性のＦｅ１ｄＴ蛋白質 を精製しＩこ。簡単に記述すると、家の埃（多数のネコ力（居る家庭で用いられ ている真空容器から）をＰＢＳで抽出した後、凍結乾燥し、水中に再溶解させた 。この抽出液を、抗Ｆｅｌ　ｄ　ｌモノクローナル抗体を連成させたカラム（） １イブリド−マロＦ９およびＩＧ４は両方共、Ｍ、Ｃｈａｐｍａｎ提供のもので あった）にかけた。このＦｅ１ｄＩを、１００ｍＭのグリシン（ｐＨ２，５）で そのカラムから溶離させた後、それの中和を行った。

直接結合ＥＬＩＳＡ このＩｇＧアッセイでは、Ｉｍｍｕｌｏｎ　２　（Ｄｙｎａｔｅｃｂ。

Ｃｈａｎｔ　ｉ　１１ｙ、ＶＡ）の９６個ウェルプレートを、ウェル１個当たり ５０μＬで、ＰＢＳ中２ｊｇ／ｍＬのＦｅｌ　ｄ　Ｉと一緒に４°Ｃで一部イン キユベートすることにより、そのプレートのコーティングを行った。これらのウ ェルをＰＢＳ中０．５％のゼラチンと一緒に３７℃で１時間インキュベートした 。ＰＢＳ−Ｔ　（ＩＸＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ　２０）でプレートを３回 洗浄した。血清をＰＢＳ−Ｔで希釈した。室温で１時間インキュベートしそして ＰＢＳ−Ｔで洗浄した後、ビオチニル化したヤギ抗マウスＩｇＧ　（Ｓｏｕｔｈ ｅｒｎ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ、Ｂｉｒｍｉｎｇ ｈａｍＳＡＬ）と−緒にインキュベートすることにより、その結合したマウス抗 体の検出を行った。西洋わさびペルオキシダーゼ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅ ｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ）ｌこ接合させたストレプトアビジン を加えることで、抗原に結合したビオチニル化抗体−複合体の検出を行った。供 給された指示に従ってＴＭＢペルオキシダーゼ基質（Ｄｉｒｋｅｇａａｒｄ　ａ ｎｄ　Ｐｅｒｒｙ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）を用い、そして得られる Ｏ、Ｄ、（４５０ｎｍ）値を、ＥＬＩ　ＳＡ読み取り装置（Ｂｉｏ−Ｔｅｋモデ ル＃３１０、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）を用いて測定した。その血清タイターを 、陽性対照の２５％により決定する。

イソタイプに特異的なポリクローナル試薬を用いて同様に、Ｈ−ＭｂのＥＬＩ　 ＳＡを実施する。ビオチニル化したＥＭ９５−１、即ちマウスＩｇＥに特異的な ラットモノクローナル抗体を用いる以外は同様にして、抗原に結合するＩｇＥの 検出を行った。ＩｇＥのＥＬ　Ｉ　ＳＡにおける付加シグナル増幅段階として、 ビオチニル化したヤギ抗う・ソトＩｇＧ（Ｄｉｒｋｅｇａａｒｄ　ａｎｄ　Ｐｅ ｒｒｙ）を用いた。抗マウスＩｇＭを用いる以外は同様に、抗原に結合するＩｇ Ｍの検出を行った。

増殖アッセイのための培養条件 抗原チャレンジして７日後の動物から、鼠径部、大動脈傍およびひかがみのリン パ節を取り出した。これらの器官由来の細胞を、ガラス製ペスタル（ｐｅｓｔａ ｌ）を用いてステンレス鋼製メツシュに通すこと番二よって、それらの懸濁を行 った。これらの細胞を培養するに先立って、ＲＰＭＩ　１６４０内で２回、１％ のＦＣＳで洗浄した。全ての細胞を、１０％のＦｅ３　（＃Ｆ４８８４、Ｓｉｇ ｍａ、Ｓｔ、Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）　、１００Ｕ／ｍＬのベニ／リン０１１０μｇ ／ｍＬのストレプトマイノン、１０ｍＭのグルタミンおよび５Ｘ１０−’Ｍの２ −ＭＥと一緒１こ、ＲＰＭｌ　１６４０の中に入っている３７℃の５％ＣＯ２中 で培養した０９６個ウェルのプレートに備わっている０、２ｍＬのウェルの中で 、細胞を４ＸＩＯ’個の細胞／ｍＬで三重に培養した。７日目におけるトリチウ ム化チミジン取り込みにより、増殖を測定した。

最近の研究により、ヘルパーＴ細胞サブセットは異なる抗体イソタイプを増加さ せる能力を有していることが示された。マウスのＴＨ，細胞は明らかにＩ　ｇＧ ！の産生を刺激する一方、ＴＨ２細胞はＩｇＧ、とＩｇＥの産生を刺激する。ヘ ルパーＴ細胞機能を示す異なる集団に対して、ヒスタミンの同族体が特異的効果 を示し得るか否かを示す実験を行う。

ウマミオグロブリン（Ｈ−Ｍｂ）に対して抗体応答を示す能力に関して、２つの 異なるヒスタミン同族体（化合物１および化合物３）を比較した。

化合物１の式に関しては以前に実施例１で示した。化合物３０式は下記の通りで ある・ Ｈｉ　Ｓ　ＮＨ（ＣＬ）ｓ　Ｃ０ＮＨｐｈ　１−ＣＦｓＯ日目と日月目に薬剤処 理して抗原感作を行った後７日目に、Ｈ−Ｍｂに特異的なＩｇＭ応答を評価した （図２１）。このＨｆＭｂ感作に対する応答で作り出される抗原特異的１ｇＭに 対して、３５ｍｇ／ｋｇのヒスタミン同族体が示す効果は、検出できる程でなか った。

別のグループのマウスを、日（−１）と２日目に３５ｍｇ／ｋｇのヒスタミン同 族体で処理した。これらのマウスに、０日目と２１日目にＨ−Ｍｂを受けさせた 。これらのマウスから得られる血清（３３日目）をＨ−Ｍｂ特異的１ｇＧに関し て評価した。図１５は、Ｈ−Ｍｂに特異的なＩｇＧの産生を阻害する能力を化合 物１と化合物３が有していることを示している。同じ血液を、Ｈ−Ｍｂ特特異的 １ｇＧ２びＩｇＧ２ｂ（図１７）に関して評価した。化合物３は明らかにＨ−Ｍ ｂｂ異的ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ２ｂを低くする。このことは、化合物３活性の 標的はＴＨＩ経路部分である可能性があることを意味している。

それとは対照的に、化合物１はＨ−Ｍｂ特特異的１ｇＧ２２ｂに効果を示さない 。化合物１で処理した後見られるＩｇＧの低下は、ＩｇＧ１に対する効果を反映 しているものである可能性がある。実施例１−６で考察したように、Ｆｅｌ　ｄ 　Ｉに対するＩｇＧおよびＩｇＥ応答を低くする能力を化合物１が有しているこ とは、その標的がＴＨ７経路であり得ることを示唆している。

Ｔ細胞増殖に対するヒスタミン同族体の効果これらのヒスタミン同族体のための レセプタは、その免疫応答に関与している大部分の細胞上に存在している。化合 物１および化合物３が示す作用の標的を明らかにする実験を実施した。マウスを Ｍｂで感作した後、日（−２）および（−１）に薬剤（ｉｖ）処理した。排液（ ｄｒａｉｎｉｎｇ）リンパ節を収穫して、抗原に特異的な増殖を測定した（図１ ８）。このマウスを化合物３で処理することにより、抗原に特異的なＴ細胞増殖 が低下する。このデータは、特異的Ｔ細胞活性化の刺激を化合物３が行うことを 意味している。このことは明らかに化合物３が示す抗体イソタイプ効果と一致し ている。このＴＨ，活性は、インビトロにおける大部分のＴ細胞増殖の一因にな っている。

インシュリン依存真性糖尿病（ＩＤＤＭまたはＩ型真性糖尿病）は自己免疫病で あり、すい臓のランゲルハンス島の中に存在しているインツユリン産生ベータ細 胞がリンパ球依存炎症で墳れることを伴っている。

このすい臓の細胞が壊れることに関して、Ｔリンパ球が関与しており、そして自 己抗体産生は、ＩＤＤＭの炎症病変であるインスリン炎が発病することに関連し ている。マウス株（非肥満糖尿病マウスーーＮＯＤマウス）は、ヒトにおけるＩ 型糖尿病に極めて近い種類のすい臓病変を発病する。ＮＯＤマウスで効力を示す 免疫抑制剤を用いた数多くの実験で、Ｉ型糖尿病に敏感な人々における免疫抑制 値が予測された。不幸なことには、敏感性を示す患者における夏型病を処理する 目的で利用できる免疫抑制剤は、効力を示すものであっても、それらを与えてい る期間のみである。これらの薬剤は、恐らくは抗ＣＤ４モノクローナル抗体を除 き、長期間に渡り連続的に投与するには毒性が高すぎる。

以下に示す実験は、高血糖症の進行およびインスリン炎の発病に対して示す化合 物１および３の効果に焦点を当てたものである。これらの実験では下記の事項に 焦点を当てる。１．薬剤または薬剤組み合わせを短期間（２回の服用）用いるこ とで高血糖症が始まるのが変化するか否か、そして死亡が生じるか否か；２１週 毎の間隔で長期間薬剤を投与すると、短期間よりも決定的にＩＤＤＭの開始を変 化させるか否か：そして３゜薬剤を２回間欠的に投与する時、すい臓の炎症病変 の開始またはひどさが遅れるか或は変化するか否か。このオータコイド（ヒスタ ミン同族体）が示す免疫抑制効果はこの病気過程に影響を与え得ると考えられる 、と言うのは、化合物３は、抗原に対して生じるＴ細胞増殖を阻害し得るからで ある。従つて、これはＴ細胞仲介細胞溶解出来事を制限する能力を有しているに ちがいない。

化合物１．３または１と３を用いて短期間処理した時の効果を、１０匹のメスＮ ＯＤマウスから成るグループで試験した。化合物１または３の蓄積用量を７０ｍ ｇ／ｋｇにしそして化合物１と３を一緒にした用量が１４０ｍｇ／ｋｇになるよ うに、２日連続して薬剤を投与した（皮下で３５ｍｇ／ｋｇ与えた）。９０日目 と９１日目に薬剤を与えた（図１９）。高血糖症発現の抑制は、化合物３または １と３で処理したグループで最も顕著であった。化合物１と３が示す明らかな効 果はこれらの２つの薬剤が示す付加Ｈ２効果によるものであることは、極めて可 能性の高いことである。

ＮＯＤマウスにおける高血糖症発病に対して示す、ヒスタミン同族体を用いた長 期治療の効果を、１グループ当たり１０匹のマウスから成るグループで試験した 。上で用いたのと同じ用量で、これらの薬剤を化合物１または３或は１と３とし て皮下投与した。薬剤または対照処理を７６日目に開始し、そして１４日後に同 じ用量／ｋｇで繰り返し、そして１週間の間隔で繰り返した。図２０は、化合物 １と３で処理したグループでは１４０４０日目ぶまで全く病気が見られないこと を示しても洩る。

要約として、ヒスタミン同族体は効力のある免疫抑制剤であり、そしてそれらの 各々は、効力を示す異なる免疫ｖＲ節機構を有して（、ｚることを、実施例１− １１は示している。化合物１はＴ細胞依存１ｇＥＳ　ＩｇＧ１（Ｔ　ｇＭ、Ｉ　 ｇＧ２ａまたはＩ　ｇＧ２ｂでなく）抗体応岑を抑制する。

種々の抗原応答において、化合物３はＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ２ｂ応 答を抑制するが、ＩｇＭ応答の抑制は行わない。ＩｇＥに対して化合物３が示す 効果を調べる。化合物３のみが明らかに、試験した用量において、特異的抗原に 対して生じるＴ細胞増殖を直接的に抑制している。抗体産生の抑制は伝達性を示 し、そしてこれはまた、この抗原に対する応答が確立された後でも見られ得る。

ヒスタミン同族体は、ヒトＩＤＤＭのマウスモデルでも同様な免疫抑制効果を示 す。同族体で処理すると、ＮＯＤマウスにおける高血糖症およびインスリン炎の 開始が遅れる。化合物１と３を用しλた処理では、今までに測定されなかった程 の多大な効果がもたらされたが、化合物１のみではそれが生じなかったことから 、これらの結果は次のことを示している：ＮＯＤマウスに対する効果ではＨｌと Ｈ２レセプタの効果が必要とされそしてそれらが協力的であり得るか、或はこれ らの２種の薬剤が個別に貢献する付加Ｈ２効果によって、単に明らかな協力が存 在していること；ＨｌまたはＨ２遮断薬が示す用量依存性および遮断効果を調べ ることで、これらの実験がうまく働く薬学的機構が決定されること；これらのオ ータコイドが働く細胞機構はそのイソタイプに対する効果の選択性で決定されな いこと、モしてＴ細胞増殖の動向は化合物３の標的がＴＨ，細胞である可能性が あることを示唆していること。

本発明の好適な態様を言及して本発明を記述してきたが、他の態様も同じ結果を 達成し得る。本分野の技術者に本発明の変形および修飾形が明らかになると思わ れ、本発明の真の精神および範囲内に入る上記修飾形および相当物の全てを添付 請求の範囲内に包含させることを意図している。

日数 日数 日数 動物番号 動物番号 動物番号 ム　５０ム　１００ム今１５０　ム２００　ム２５０　３００１．１ 動物番号 動物番号 日数 日数 −−「１− 日数 日数 動物番号 動物番号 動物番号 動物番号 日数 Ｆｉｇ、　７ａ 日数 Ｆｉｇ、　７ｂ 動物番号 動物番号 日数 Ｆｉｇ　９ａ ム　＾　５０ム　】００ム　ム１５０　２００１　ｌ　Ｉ　＋１ 日数 Ｆｉｇ　９ｂ 日数 日数 動物番号 動物番号 ｒ；、、１＾に 動物番号 動物番号 ｄ−１とｄ＋２ 日数 日数 日数 日数 動物番号 動物番号 動物番号 Ｆｉｇ、　１４ 血清の希釈率 血清の希釈率 血清の希釈率 Ｈ−Ｍｂ濃度　ｔｕＭＩ 十対照（食塩水） 子化合物１ 日数 °（グリコースが＞　４００ｍｇ／ｄｌのマウス数／グループ内の全マウス数） Ｘ１００÷対照（食塩水） ÷化合物１ 日数 −（グリコースが＞４００ｆｆｉｇ／ｄｉのマウス数／グループ内の全マウス数 ）Ｘ１００血清の希釈率 補正書の写しく翻訳文）提出口　（特許法第１８４条の８）平成６年７月１９日 １

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．少なくとも１種のヒスタミンレセプタに結合特異性を示す少なくとも１種の ヒスタミン誘導体を含んでなる組成物の有効量を哺乳動物に投与することを含む 、哺乳動物の免疫系による抗原特異的抗体応答の少なくとも一部を阻害する方法 において、上記ヒスタミン誘導体は、２から１０個の炭素原子を有する脂肪族鎖 を有する置換基でヒスタミン分子の側鎖アミンが１置換されていることによって 特徴づけられ、ここで、この鎖のアルファー炭素はメチレンであるか、またはオ キソでか或は１から３個の炭素原子を有するアルキルで置換されており、上記鎖 は、水素またはカルボキサミドで停止しており、そしてここで、このカルボキサ ミドの窒素は、１から６個の炭素原子を有するアルキル、トリルまたはトリフル オロメチルフェニルで置換されているが、但し、上記鎖が水素で停止している場 合、その鎖長は５または６個の原子であることを条件とする方法。 ２．少なくとも１種のヒスタミンレセプタに結合特異性を示す少なくとも１種の ヒスタミン誘導体を含んでいる組成物の有効量を哺乳動物に投与することを含む 、哺乳動物の免疫系による抗原特異的抗体応答の少なくとも一部を阻害する方法 において、上記ヒスタミン誘導体が、式：Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ−（ＣＨ２）ｎＹ． （ＨＡ）ｂ式中、 Ｘは、ＣＯまたはＣＨＲであり、ここで、Ｒは１から３個の炭素原子を有するア ルキル基であり、 ｎは、２から６の整数であり、 Ｙは、ＣＨ３またはＣＯＮＨＺであり、ここで、ＺはＨ：（ＣＨ２）ｍＣＨ３（ ここで、ｍは１から４である）；置換されているフェニル（ここで、この置換基 はメチルまたはトリフルオロメチルである）であり、 Ａは、生理学的に許容される対イオンであり、そしてｂは、０から２の整数であ る］ で表される方法。 ３．ヒスタミンレセブタに結合特異性を示す少なくとも１種のヒスタミン誘導体 を含んでいる組成物の有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物の免疫 系による抗原特異的抗体応答の少なくとも一部を阻害する方法において、上記ヒ スタミン誘導体が、式：Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ１−（ＣＨ２）ｎ１−ｐｈｉ−Ｄ．（ ＨＡ）ｂ［式中、 ｎ′は、２から５であり、 Ｘ′は、ＣＯ、ＣＨ２またはＣＨＣＨ３であり、Ｄは、メチルまたはトリフルオ ロメチルであり、ｐｈｉは、フェニレンであり、 Ａは、生理学的に許容される対イオンであり、そしてｂ′は、１から２の整数で ある］ で表される方法。 ４．上記ヒスタミン誘導体が、 Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｑ．（ＨＡ）ｂ ［式中、 Ａは、生理学的に許容される対イオン、例えば酢酸塩、塩化物、硫酸塩、燐酸塩 など、好適には塩化物であり、ｂは、この塩内に見られる追加的プロトン類およ び対イオンの数（例えば中和で利用され得る塩基性アミン類の数）を示しており 、そして通常０から２、好適には１から２であり、そしてＱは、 −ＣＯ−（ＣＨ２）３−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−ＣＨ２−（ＣＨ２）４− ＣＨ３ −ＣＨ２−（ＣＨ２）３−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈＩｉ−ＣＨ３−ＣＯ−（ＣＨ２）２ −ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）２−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈ ｉ−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）１−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣ Ｈ３−（ＣＨ２）２−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）３ −ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）４−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈ ｉ−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）５−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＨ３−ＣＨＣ Ｈ３−（ＣＨ２）３−ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）４ −ＣＯ−ＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）３−ＣＯ−ＮＨ−（Ｃ Ｈ２）３−ＣＨ３−ＣＨＣＨ３−（ＣＨ２）３−ＣＯ（ＢＯＣ）０−１−Ｎ（Ｈ ）１−Ｏ−ｐｈｃ−Ｇｌｙ−ＮＨＣＨ３として定義され、ここで、 ＢＯＣは、ｔ−ブチルオキシカルボニルブロッキング基である］から成る群から 選択される請求の範囲１の方法。 ５．上記ヒスタミン誘導体が ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）４−ＣＯＮＨ−ｐｈＩｉ−ＣＦ３または ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−ＣＯＮＨ−ｐｈｉ−ＣＦ３を含んでいる請求の 範囲１の方法。 ６．哺乳動物の免疫系によるＩｇＥ抗体の産生を少なくとも約３０％阻害する請 求の範囲１の方法。 ７．哺乳動物の免疫系によるＩｇＧ抗体の産生を少なくとも約６０％阻害する請 求の範囲１の方法。 ８．哺乳動物の免疫系によるＩｇＧおよびＩｇＥ抗体の産生を本質的に阻害する 請求の範囲１の方法。 ９．抗原またはそれの免疫原性部分を哺乳動物に投与して上記抗原もしくはそれ の上記免疫原性部分に対する抗原特異的抗体応答を特異的に阻害する段階を更に 含む請求の範囲１の方法。 １０．該組成物が上記少なくとも１種のヒスタミン誘媒体を１０−３Ｍ以下の濃 度で含んでいる請求の範囲１の方法。 １１．該組成物が上記少なくとも１種のヒスタミン誘導体を１０−３Ｍ以下の濃 度で含んでいる請求の範囲９の方法。 １２．該組成物が、該哺乳動物に投与する上記少なくとも１種のヒスタミン誘導 体を１０ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で含んでいる請求の範囲１の方法。 １３．該組成物を皮下投与する請求の範囲１の方法。 １４．該組成物を皮下投与する請求の範囲９の方法。 １５．少なくとも１種のヒスタミンレセブタに結合特異性を示す少なくとも１種 のヒスタミン誘導体を含んでなる組成物の有効量を哺乳動物に投与することを含 む、予め決めた抗原に対して敏感性を示しそして上記予め決めた抗原に対する抗 体を産生している哺乳動物の免疫系による予め決めた抗原に対する抗原特異的抗 体応答の少なくとも一部を阻害する方法において、上記ヒスタミン誘導体は、２ から１０個の炭素原子を有する脂肪族鎖を有する置換基でヒスタミン分子の側鎖 アミンが１置換されていることによって特徴づけられ、ここで、この鎖のアルフ ァー炭素はメチレンであるか、またはオキソでか或は１から３個の炭素原子を有 するアルキルで置換されており、上記鎖は、水素またはカルボキサミドで停止し ており、そしてここで、このカルボキサミドの窒素は、１から６個の炭素原子を 有するアルキル、トリルまたはトリフルオロメチルフェニルで置換されているが 、但し、上記鎖が水素で停止している場合、その鎖長は５または６個の原子であ ることを条件とし、そしてここで更に、上記予め決めた抗原に対する抗体の産生 を少なくとも部分的に阻害する方法。 １６．少なくとも１種のヒスタミン誘導体を含んでいる上記組成物を、上記予め 決めた抗原に対する抗体の産生を本質的に阻害するに有効な量で投与する請求の 範囲１５の方法。 １７．上記予め決めた抗原またはそれの免疫原性部分を上記哺乳動物に投与して 上記予め決めた抗原もしくはそれの上記免疫原性部分に対する抗原特異的抗体応 答を特異的に阻害する段階を更に含む請求の範囲１５の方法。 １８．該予め決めた抗原が蛋白質アレルゲンである請求の範囲１５の方法。 １９．該予め決めた抗原が蛋白質アレルゲンである請求の範囲１７の方法。 ２０．上記蛋白質アレルゲンから誘導されるペプチドを上記哺乳動物に投与する 段階を更に含んでおり、ここで、上記ペプチドが上記蛋白質アレルゲンの少なく とも１つのＴ細胞エピトープを含んでなる請求の範囲１９の方法。 ２１．該予め決めた抗原が蛋白質アレルゲンであり、そして上記蛋白質アレルゲ ンから誘導されるペプチドを上記哺乳動物に投与する段階を更に含んでおり、こ こで、上記ペプチドが上記蛋白質アレルゲンの少なくとも１つのＴ細胞エピトー プを含んでなる請求の範囲１５の方法。 ２２．少なくとも１種のヒスタミンレセプタに結合特異性を示す少なくとも１種 のヒスタミン誘導体と薬学的に許容される担体または希釈剤を含んでなる治療組 成物の治療学的有効量を個体に投与することを含む、個体における抗原に対する 敏感性を治療する方法において、上記ヒスタミン誘導体は、２から１０個の炭素 原子を有する脂肪族鎖を有する置換基でヒスタミン分子め側鎖アミンが１置換さ れていることによって特徴づけられ、ここで、この鎖のアルファ−炭素はメチレ ンであるか、またはオキソでか或は１から３個の炭素原子を有するアルキルで置 換されており、上記鎖は、水素またはカルボキサミドで停止しており、そしてこ こで、このカルボキサミドの窒素は、１から６個の炭素原子を有するアルキル、 トリルまたはトリフルオロメチルフェニルで置換されているが、但し、上記鎖が 水素で停止している場合、その鎖長は５または６個の原子であることを条件とす る方法。 ２３．該治療組成物を少なくとも１年に一度投与する請求の範囲２２の方法。 ２４．該治療組成物を少なくとも１年に４回に及んで投与する請求の範囲２３の 方法。 ２５．上記抗原またはそれの免疫原性部分を上記個体に投与して上記抗原もしく はそれの上記免疫原性部分に対する抗原特異的抗体応答を特異的に阻害する段階 を更に含む請求の範囲２２の方法。 ２６．該抗原が自己抗原である請求の範囲２２の方法。 ２７．該抗原が自己抗原である請求の範囲２５の方法。 ２８．少なくとも１種のヒスタミンレセブタに結合特異性を示す少なくとも１種 のヒスタミン誘導体と薬学的に許容される担体または希釈剤を含んでいる治療組 成物の治療学的有効量を個体に投与することを含む、個体における蛋白質アレル ゲンに対する敏感性を治療する方法において、上記ヒスタミン誘導体は、２から １０個の炭素原子を有する脂肪族鎖を有する置換基でヒスタミン分子の側鎖アミ ンが１置換されていることによって特徴づけられ、ここで、この鎖のアルファ− 炭素はメチレンであるか、またはオキソでか或は１から３個の炭素原子を有する アルキルで置換されており、上記鎖は、水素またはカルボキサミドで停止してお り、そしてここで、このカルボキサミドの窒素は、１から６個の炭素原子を有す るアルキル、トリルまたはトリフルオロメチルフェニルで置瑛されているが、但 し、上記鎖が水素で停止している場合、その鎖長は５または６個の原子であるこ とを条件とする方法。 ２９．該蛋白質アレルゲンまたはそれの免疫原性部分を上記個体に投与して上記 アレルゲンもしくはそれの上記免疫原性部分に対するアレルゲン特異的抗体応答 を特異的に阻害する段階を更に含む請求の範囲２８の方法。 ３０．上記蛋白質アレルゲンから誘導されるペプチドを上記個体に投与する段階 を更に含んでおり、ここで、上記ペプチドが上記蛋白質アレルゲンの少なくとも １つのＴ細胞エビトープを含んでいる請求の範囲２８の方法。 ３１．上記蛋白質アレルゲンから誘導されるペプチドを上記個体に投与する段階 を更に含んでおり、ここで、上記ペプチドが上記蛋白質アレルゲンの少なくとも １つのＴ細胞エピトープを含んでいる請求の範囲２９の方法。 ３２．上記蛋白質アレルゲンから誘導されるペプチドを上記個体に投与する段階 を更に含んでおり、ここで、上記ペプチドが上記蛋白質アレルゲンの少なくとも ２つのＴ細胞エピトープを含んでいる請求の範囲３０の方法。 ３３．上記蛋白質アレルゲンから誘導されるペプチドを上記個体に投与する段階 を更に含んでおり、ここで、上記ペプチドが上記蛋白質アレルゲンの少なくとも ２つのＴ細胞エピトープを含んでいる請求の範囲３１の方法。 ３４．該蛋白質アレルゲンが、ダーマトファゴイデス属の蛋白質アレルゲン；フ ェリス属の蛋白質アレルゲン；アムブロシア属の蛋白質アレルゲン；ロリウム属 の蛋白質アレルゲン；クリブトメリア属の蛋白質アレルゲン；アルテルナリア属 の蛋白質アレルゲン；アルダー属の蛋白質アレルゲン；ベツラ属の蛋白質アレル ゲン；クエルクス属の蛋白質アレルゲン；オレア属の蛋白質アレルゲン；アルテ ミシア属の蛋白質アレルゲン；プランタゴ属の蛋白質アレルゲン；バリエタリア 属の蛋白質アレルゲン；カニン属の蛋白質アレルゲン；ブラテラ属の蛋白質アレ ルゲン；アピス属の蛋白質アレルゲン；およびペリプラネタ属の蛋白質アレルゲ ン；から成る群から選択される請求の範囲３０の方法。 ３５．該蛋白質アレルゲンが、Ｄｅｒ　ｐ　Ｉ；Ｄｅｒ　ｐ　ＩＩ；Ｄｅｒ　ｆ 　Ｉ：Ｄｅｒ　ｆ　Ｉｌ：Ａｍｂ　ａ　Ｉ．１：Ａｍｂ　ａ１．２：Ａｍｂ　ａ 　１．３：Ａｍｂ　ａ　１．４：Ａｍｂ　ａＩｌ：Ｌｏｌ　ｐ　Ｉ：Ｌｏｌ　ｐ 　ＩＸ：Ｃｒｙ　ｉ　Ｉ：Ｃｒｙｊ　ＩＩおよびＦｅｌ　ｄ　Ｉから成る群から 選択される請求の範囲３０の方法。 ３６．１）少なくとも１種のヒスタミンレセプタに結合特異性を示す少なくとも １種のヒスタミン誘導体を含んでなる組成物を哺乳動物に投与し、そして ２）抗原またはそれの免疫原性部分を該哺乳動物に投与して上記抗原またはそれ の免疫原性部分に対する抗原特異的抗体応答を阻害する、 段階を含む、哺乳動物の免疫系による抗原特異的抗体応答の少なくとも一部を阻 害する方法において、 上記ヒスタミン誘導体は、２から１０個の炭素原子を有する脂肪族鎖を有する置 換基でヒスタミン分子の側鎖アミンが１置換されていることによって特徴づけら れ、ここで、この鎖のアルファ−炭素はメチレンであるか、またはオキソでか或 は１から３個の炭素原子を有するアルキルで置換されており、上記鎖は、水素ま たはカルボキサミドで停止しており、そしてここで、このカルボキサミドの窒素 は、１から６個の炭素原子を有するアルキル、トリルまたはトリフルオロメチル フェニルで置換されているが、但し、上記鎖が水素で停止している場合、その鎖 長は５または６個の原子であることを条件とする方法。 ３７．上記自己抗原から誘導されるペプチドを上記個体に投与する段階を更に含 んでおり、ここで、上記ペプチドが上記自己抗原の少なくとも１つのＴ細胞エピ トープを含んでなる請求の範囲２６の方法。 ３８．該予め決めた抗原が自己抗原であり、そして上記自己抗原の少なくとも１ つのＴ細胞エピトープを更に含んでいる請求の範囲２２の方法。