JPH07501798A

JPH07501798A - プリオンタンパク質のフラグメント

Info

Publication number: JPH07501798A
Application number: JP5509594A
Authority: JP
Inventors: フィッシュリー，ロバート　ヴィンセント; ロブソン，バリー; ミー，ロジャー　ポウル
Original assignee: プロチュース　モレキュラー　デザイン　リミテッド
Priority date: 1991-12-03
Filing date: 1992-12-03
Publication date: 1995-02-23
Anticipated expiration: 2024-03-04
Also published as: DK0616613T3; WO1993011155A1; EP0616613B1; NZ246059A; ATE177754T1; US20030199013A1; DE69228701D1; ES2128362T3; AU3089292A; CA2124953A1; US6379905B1; GR3029740T3; EP0616613A1; US5773572A; DE69228701T2; AU675053B2; CA2124953C; US7777011B2; JP4233604B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】プリオンタンパク質のフラグメント本発明は、合成ポリペプチドに関する。さらに詳しくは、本発明は、海綿様脳症の分子病理学に関連すると考えられるタンパク質の特定領域の三次元構造および／または静電表面および／または他の物理的、化学的および構造的特性と等しいか、或いは類似する合成ポリペプチドに関する。本発明は、ヒト、ウシおよびヒツジの海綿様脳症に関する免疫学的診断剤、ワクチン、並びに他の医薬、獣医薬または科学的物質を設計するのに特に重要である。

海綿様脳症は、一群の変質神経性疾患である。ヒツジ（スクラピーとして知られている）、畜牛（ＢＳＥ）およびヒト（クロイッフェルドーヤコブ病（ＣＪＤ）およびクル）を含む数多くの種において、症例が見出されている（参考資料、Ｔａｙｌｏｒ、　ｏ、Ｍ、　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｒｅｃｏｒｄ　１２５．４１３−４１５（１９８９＋）。同様の状況は、野性ミンクの集団および捕獲されたクーズー（レイヨウの一種）およびトラにも見出されている。ＢＳＥは、実験室的条件下でマウスおよびブタに感染しうることが種々報告されている。感染性物質による種の障壁がこのように交叉することは、ヒトへの感染が発生しつるという懸念の増大を招いている。

これらの疾患は、４〜５年の緩慢な潜伏期間によって特徴付けられ、その後、攻撃性と協調性の欠如とを含む精神状態の進行性変性の臨床的症候が現れる。死体解剖は、神経細胞の破壊による脳組織中の空胞化の特徴的パターンと、異常なタンパク質繊維の沈渣とを現する。

ヒツジに見出される疾患（スクラビー）の形態は長年知られていたが、海綿様脳症は、牧場におけるＢＳＥの発生に続いて、この１０年間で顕著になってきた。

英国におけるＢＳＨの発生率は、この期間に、著しく増大しており、この疾患がヒトに感染する可能性に関する公衆の懸念は、牛肉市場における暴落を導いている。従って、獣医学的および経済的理由の両者から、感染を検出するための診断剤および感染を防止するためのワクチンが緊急に必要とされている。

スクラビーの原因物質および他の動物におけるその等漬物質は、いわゆる“プリオン（ｐｒｉｏｎ＋”であり、これはタンパク質のみからなり、核酸を含まない感染性粒子である。従来のウィルスの場合には後者の存在が必要である。スクラピーにおいて、一つの特別なタンパク質（ブリオンタンパク質、ＰｒＰ”と呼ぶ）は、感染性を伴って精製されることが見出されており、実験室的条件下で、ハムスターのような坤の動物からの脳細胞培養物中でスクラピ一様状懸を生じさせることができる。ＰｒＰ”は、スクラビーに感染したヒツジの脳組織中に沈渣した特徴的タンパク質繊維の唯−知られた成分である。ここで用いられるＰｒＰ’ −なる用語は、ヒツジにおいて同定される特殊なプリオンタンパク質のみならず、以下に述べるような構造的変性を受けるとみられる他の多くの種において見出される相同タンパク質をも指すものと解釈するべきである。ＰｒＰ″′”なる用語は、ｐｒｐｏｌに対する正常な細胞等漬物質について用いられる。

スクラピー物質ＰｒＰ′ｃに対する特殊な診断剤あるいは合成ワクチンの研究において、それが天然形態のタンパク質ＰｒＰ　’　と殆ど同じであることが大きな問題である。このタンパク質の本質的機能はまだ理解されていないが、異なった種からの相同タンパク質問で一次構造が極めて強く保存されることは、それが生体内で必須の構造的または機能的役割を有することを示唆している。

プリオンの形態が天然タンパク質と殆ど同一であるにもかかわらず、我々は、少なくとも一つの抗原性特性、例えばエピトープ部位を含む合成ペプチド構造物を演鐸した。そしてこれら合成ペプチドは、診断剤およびワクチンの製造に使用できよう。

免疫系のＢ細胞およびＴ細胞の応答は、タンパク質全体の包括的認識によって明示されるのではなく、むしろエピトープ部位として知られているタンパク質表面の小さい領域の認識によって明示される。このような部位は、ペプチド鎖の連続部分（ｓｅｃｔｉｏｎｌまたは不連続部分によって形成することができ、この場合、ペプチド鎖の分離された部分は、鎖の折り畳みのため、タンパク質表面で結びつけられる。合成ペプチドワクチンを製造する目的の一つは、特別なエピトープの構造を模倣することであり、これにより、メモリーＢ細胞の生成に導く一次免疫応答を引き起こし、このメモリーＢ細胞は、次に親タンパク質に曝されたときに抗体を分泌し、従って、二次感染に対して大いに増強された応答を生じるであろう。細胞毒性Ｔ細胞の感作（ｐｒｉｍｉｎｇ＋を介して、特別な抗原に対して更に強力に応答するようにした同様のメカニズムも起こる。

しかしながら、核酸配列よりはむしろタンパク質プリオンの分子構造がプリオンにおける感染性を有すると信じられているので、ワクチン製造の伝統的方法をこの疾患に適用するには問題がある。ウィルス性ワクチン製造の常法は、エピトープ部位を保存しつつ感染性を破壊するために、何らかの手法でウィルスを不活性化することを含む。熱処理あるいは培養によるウィルスの連続継代などの技術が用いられるが、これらのアプローチでは、タンパク質の変性を起こすような条件にしないかぎり、プリオンの感染力の減少につながらない。もし条件がプリオンタンパク質を不活性化するのに充分に厳しいものであれば、タンパク質の変性が起こり、全てのエピトープ部位が失われる。従って、従来の経路により、抗原性であるが非感染性のブリオンタンパク質を得る試みには、大きな問題がある。例えば、ヒツジにおけるスクラビー物質は、化学的または物理的不活性化に対して特に耐性であることが知られている（Ｈｏｄｇｓｏｎ、　Ｊ、　Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　８゜９９０　（１９９０１）。

一つの態様において、我々の発明は、ブリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチドを提供する。ブリオンタンパク質は、海綿様脳症に罹患した哺乳動物の神経組織内にのみ存在する形態のものが好ましい。

我々は、上記のタイプのブリオンタンパク質が６つの重要な領域（Ａ〜Ｆという）、並びに２つの関連したフレームシフトペプチド配列、即ち１）　＋ｌ　（Ｆｓａ）の核酸暗号化配列フレームシフトを受けた領域Ｅ中の繰り返し部分、および２）　−１（ＦＳｂ）の核酸暗号化配列フレームシフトを受けた領域Ｅ中の繰り返し部分を有することを見出した。

領域Ａについて、我々の発明は、一般式（１）で表される合成ペプチド配列を提供する。

Ｘ−（Ｒ，−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｒ２１−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｌａ−ＡＸ　ａ−Ｒ，−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｖａｌ　−Ｖａｌ−ＧＬｙ−ＧＩＹ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌ”ｌ−ＴＹｒ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−ＧＩＹ−５ｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅセー５ｅｒ−（Ａｒｑ−Ｐｒｏ＝Ｒ，−へ）−ｙ（Ｉ）ここで、Ｒ，はＭｅｔＳＬｅｕおよびＰｈｅから選択されるアミノ酸残基であり、Ｒ３はＭｅｔまたはＶａｌであり；Ｒ１はＡｌａであるか、または存在せず；Ｒ１およびＲ６は独立して、Ｌｅｕ　、　ＩｌｅおよびＭｅｔから選択されるアミノ酸残基であり、括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており＋ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

例えば、配列のＮ−末端の残基が、ｌｌＲ１−”またはＨｉｓ−Ｒｓ−”または ”Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｒ，−”またはＲ１−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−ＲＩ−”として存在しうることは明かであろう。同様に、Ｃ−末端の好ましい残基は、”−Ａｒｇ” または”−Ａｒｇ−Ｐｒｏ”または−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｒ＊″または−Ａｒｇ− Ｐｒｏ−Ｒｔ　−Ｒｓ″とじて存在している。

好ましくは％Ｒ１は、もし存在する場合にはＭｅｔであり、Ｒ１はＡｌａであり、Ｒ５は、もし存在する場合にはＩｌｅである。また、もしＲ２がＭｅｔである場合には、Ｒ４は、もし存在するならばＩｌｅである。

下記に、各々ウシとヒツジ、およびヒトのブリオンタンパク質に関連する式Ｉの好ましい配列（Ｓｅｑ、　工、Ｄ、　Ｎｏｔ　１および１ｌｉｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　２）を示す。

Ｓａｑ、工、０．　Ｎｏ：　ＩＸ−（Ｍｅｔ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ　）　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｖａｌ　−Ｖａ　１−ｃｌｙ−Ｇｌｙ− Ｌ＋ｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｌａ　−Ｍｅｔ−５ｅｒ−（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−工１ｅ）−Ｙ；Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　２Ｘ−（Ｍｅｔ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｍｅｔ）−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｌａ− Ａｌａ−Ａｌａ−ＧＬｙ−八ｌａ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＭｅセーＬｅｕ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｌａ−ＭｅセーＳｅｒ−（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−１１ｅ−工１ｅ）−Ｙ。

式！で表される特に好ましい配列は１．下記のＳｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　５１である。

Ｌｙｓ　−Ｈｉｓ−Ｍａｔ−Ａｌａ−Ｇｌ　ｙ−Ａ　ｌ　ａ　−Ａｌａ−Ａｌ　ａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＭｅセーＬｅｕ−Ｇｌｙ−８ａｒ−Ａｌａ−ＭｅセーＳｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ。

当然のことながら、我々の発明は上記式Ｉで表される配列の重要なサブフラグメントを包含し、好ましいサブフラグメントは、下記のものである。

ｉ）　Ｘ−（Ｈｉｓ−Ｒ２−Ａｌａ−Ｇｌｙ）−Ａｌａ−ＡＬａ−Ａｌａ−Ｒ， −Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）　− ＹｉｉＩ　Ｘ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌａｕ−Ｇｌｙ）−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ −Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ−（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｒ， −Ｒ，）　−Ｙここで、Ｒ，、Ｒ，、Ｒ，、Ｒｓ　、ＸおよびＹは、式！で規定したとおりであり、括弧内の残基は、式Ｉの場合と同様に存在しても存在しなくてもよい。

上記のことから明かなように、ウシおよびヒツジの両者に関連する好ましいサブフラグメントは、下記のものである。

Ｓｅｑ、　Ｉ−Ｄ、　Ｎｏ：　３ｉ）　Ｘ−（Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｙｌ−八１ａ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−（Ｇｌｙ−Ｌａｕ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ）　−Ｙ　：Ｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：　４ｉｉ）　（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ−（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌａｕ−１１ｅ）−Ｙ。

同様に、ヒトの好ましいサブフラグメントは、下記のものである。

Ｓｅｑ、ニーＤ、Ｎｏ：　５Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　６ｉｉ）　Ｘ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙｌ　−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ −Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｌａ−Ｍａｔ−５ｅｒ−（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−工１ｅ−工１ｅ）−％ｌ。

領域Ｂについて、我々の発明は、一般式■で表される合成ペプチド配列を提供する。

Ｘ−（Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ）−＾ｒｑ−ＰｒＱ−Ｒ＆−Ｒ，−Ｈ１Ｓ−ＰＭ−Ｇｌｙ−Ｒ６−Ａｓｐ−Ｒ，−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｑ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｒ，−Ａｒｇ−（Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ）−Ｙ（ｎ）ここで、Ｒ４およびＲ，は、式■の場合と同様であり；Ｒ６はＡｓｎまたはＳｅｒであり；Ｒ２は’ｒｙｒまたは’ｒｒｐであり；Ｒ＠　ｊｔ　ＨｉｓＳＴｙｒおよびＡｓｎがら選択されるアミノ酸残基でありｉ括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないが、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

好ましくは、式■で表される配列において、Ｒ−はＩＩｓであり、ＲＴはＴｙｒであり、Ｒ，はＨｉｓまたはＴｙｒである。下記に、各々ウシ、ヒツジおよびヒトのブリオンタンパク質に関連する式■の好ましい配列を示す。

Ｓａｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　７Ｘ−（Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅし一５ｅｔ）　−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−工１ｅ −Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−５ａｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ −Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｘ　− （Ｓｅｒ−Ａｌａ　−Ｍａｔ−５ｅｒ　ｌ　−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｉ　１ｅ−Ｈ１ｓ−Ｐｈｅ　−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａｓｎ　−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−八ｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−（Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ）　−Ｙ　：Ｓａｑ＋工、Ｄ、　Ｎｏ＝　９Ｘ−（Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ　）　−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｉ　ｌ　ｅ− Ｉ　ｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｈａ−Ｇｌｙ−５ａｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ −Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇ　ｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ　−Ａｒｇ−（Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ）−Ｙ。

特に好ましい配列は、下記のものから選択される。

ｓａｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：　４２ｓａｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−ｓｅｒ−ｘｒｑ−Ｐｒｏ−Ｌ＋ｅｕ−工１ｅ−Ｈｉｓ −Ｐｈｅ−ｃｌｙ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ −Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　；Ｓｅｑ、ニーＤ、Ｎｏ：　４コＳｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ＝Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌａｕ−工１ｅ−Ｈｉｓ− Ｐｈｅ−Ｇｌｙ　−５ｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ −Ｔ’ｙｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ。

再び、我々の発明は、式■で表される配列の重要なサブフラグメントを包含することが明らかであり、好ましい一般的サブフラグメントは、下記の配列を有する。

Ｘ　−（５ａｒ−Ａｌ　ａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ　）　−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｒ，−Ｒ，−Ｈｉ　ｓ　−Ｐｈｅ　−Ｇ　１ｙ−Ｒ６−Ａｓｐ−Ｒ，−Ｇｌｕ−Ａｓｐ− Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−（Ａｒｑ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ　）　−Ｙここで、Ｒ１〜Ｒ？、ＸおよびＹは、式■で規定したとおりであり、括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよい。好ましくは、Ｒ３は工１ｅであり、Ｒ７はＴｙｒである。ウシ、ヒツジおよびヒトに関連する好ましいサブフラグメントは、各々下記のものであることがわかる。

Ｓｅｑ＋工、Ｄ−Ｎｏ：　１０Ｘ−（５ｅｒ−Ａ　ｌ　ａ−Ｍｅｔ−５ｅ　ｒ　）　−Ａｒｑ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ −Ｉ　ｌ　ｅ−Ｈｉｓ　−Ｐｈｅ−Ｇ　１ｙ−５ｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ −Ａｓｐ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−（Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ）　− Ｙ　：Ｓｅｑ、工、０−　Ｎｏ：　１１Ｘ−（Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−９ｅｒ）　−Ａｒｑ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−工１ｅ −Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−（ＪＩＹ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−（Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ）　−Ｙ　：Ｓａｑ、ニーＤ、　Ｎｏ：　１２Ｘ−（Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−５ｅｒ）　−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−工１ｅ−工１ａ −Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−八ｒｑ −Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−（Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍａｔ）−Ｙ。

領域Ｃについて、我々の発明は、一般式■で表される合成ペプチド配列を提供する。

Ｘ−（Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｒ，−Ａｒｇ）−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−八ｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｒ，−Ａｓｐ−Ｒ，。−Ｔｙｒ−Ｒ，、−人５ｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈａ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−（Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ）−Ｙ（エエエ）ここで、Ｒ１はＨｉｓＳＴｙｒおよびＡｓｎから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ，はＶａｌまたはＭｅｔであり；Ｒ１゜はＧｉｎ、　ＧｌｕおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ１１はＳｅｒまたはＡｓｎであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

好ましくは、式■で表される配列において、Ｒ１はＨｉｓまたはＴｙｒであり、ＲＩＩはＳｅｒである。下記に、各々ウシ、ヒツジおよびヒトのプリオンタンパク質に関連する弐■の好ましい配列を示す。

Ｓｅｑ＋ニーＤ、　Ｎｏ：　１３Ｘ−（Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−八ｒｑ）−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ− Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−八ｒｇ−Ｐ！”ｏ−Ｖａ　１−Ａｓｐ−Ｇｌ　ｎ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ａｓ　ｎ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ａｓ　ｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａ　ｌ　 −Ｈｉｓ　−（Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎｌ−Ｙ：Ｓｅｑ、工、０−　Ｎｏ：　１４Ｘ　−（Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ−Ａｒｑ　ｌ　−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓ　ｎ− Ｇ１　ｎ　−Ｖａ　ｌ　−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａ　１−Ａｓｐ −Ａｒｑ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ　−Ｈｉｓ　−（Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ）　−Ｙ　；Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　１５ｘ−（ｘｓｎ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ）−Ｔｙｒ−ｐｒｏ−八ｓｎ−Ｇｌｎ− Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ− ５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ−Ａｓｎ−八５ｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−５ｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ＝　４４Ａｓｎ−Ｍｅｔ、−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｔｙ　ｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇ　ｌ　ｎ− Ｖａ　ｌ　−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａ　１−人ｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−ＡＳｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ；Ｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：　４５Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ−Ｖａｌ− Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−八ｒｇ−Ｐｒｏ−ａｌ−Ａｓｐ−Ｇｌ　ｎ−Ｔｙｒ−５ｅｒ− Ａｓｎ　−Ｇ　ｌ　ｎ　−Ａ　５ｎ−Ａ　ｓ　ｎ−Ｐｈｅ−Ｖａ　１−Ｈ１ｓ− Ｇｌｙ−Ｃｙｓ。

式■で表される配列の重要なサブフラグメントは、本発明の一部を形成し、好ましいサブフラグメントは、次の配列を有する。

Ｘ　−（Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓ　ｎ　）　−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｖａ　ｌ　− Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｒ，−Ａｓｐ　−Ｒ，。−Ｔｙｒ−Ｒ，、− Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−（Ａｓｐ−Ｃｙｓ −Ｖａｌ−Ａｓｎ）　−Ｙ。

ラン、ヒツジおよびヒトに関連する好ましいサブフラグメントは、各々下記のものである。

Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　１６Ｘ−（Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ）−Ｇｉｎ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ− 八ｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ− Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−ｆＡｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ）　−Ｙ　：Ｓｅｑ、１．Ｄ、Ｎｏ：　ｌｉＸ　−（Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ　ｌ　−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｖａ　ｌ　−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｖａ　ｌ　−Ａｓｐ　−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−（Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ）−Ｙ；Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　１ＢＸ−（Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎｌ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ− Ａｒｑ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−八５ｐ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ− Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−（Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ）−Ｙ。

領域りについて、我々の発明は、一般式■で表される合成ペプチド配列を提供する。

Ｘ−（Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｒ，２−Ｒ，、−Ａｒｑ）　−Ｒ，、−Ｒ，、−５ｅｔ −Ｒ，６−Ｒ，、−Ｒ，、−Ｌｅｕ−Ｐｈａ−５ｅｒ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ −Ｖａｌ、−Ｘｌｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−５ｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−工１ｅ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｒ，，−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｙ（工Ｖ）ここで、Ｒ１１はＡｌ１ｐまたはＧｌｎ　テあり；ＲｌｓはＧｌｙであるか、または存在せず；Ｒ１４はＧｌｙまたはＡｒｇであり；ＲＩＢはＡｌａまたはＳｉｒであり；ＲｌｓはＳｅｒであるか、または存在せず；Ｒ１７はＡｌａＳＴｈｒ　、　ＭｅｔおよびＶａｌがら選択されるアミノ酸残基であり５Ｒ１１はＶａｌまたは工１ｅであり；ＲＩＩはＩｌｅまたはＭｅｔであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しておりｉＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

好ましくは、式■で表される配列において、ＲＨはＧｉｎであり、Ｒ１２は存在せず、Ｒ１１はＧｌｙであり、Ｒ１１は存在せず、Ｒ１ｆｆはＶａｌまたはＭｅｔであり、Ｒ１，は工１ｅ　Ｔある。

ウシとヒツジ、およびヒトのプリオンタンパク質に関連する式■の好ましい配列は、下記のものである。

Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ：　１９Ｌａｕ−工１ｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｙ；Ｓａｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＝　２０Ｘ７（Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｉｎ−八ｒｇ）−Ｇｌｙ−５ｅｒ−５ｅｒ−Ｍａｔ− Ｖａｌ−Ｌａｕ−Ｐｈｅ−５ｅｒ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−工１　ｅ　−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ　−Ｉ　１　＠−５ｌ！！ｒ−Ｐｈｅ−Ｌａｕ−工１ｅ−Ｐｈ　ｔヘーｕ−工１ｅ−Ｖａｌ−ＧＩＹ−Ｙ。

明かに、本発明はその範囲内に、式■で表される配列の重要なサブフラグメントを包含するものと認められるであろう。好ましい一般的サブフラグメントは、次の配列を有する。

Ｘ−（−Ｒ，、−Ｒ，、−５ｅ　ｒ−Ｒ，６−Ｒ、、ｌ　−Ｒ，、−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−５ｅ　ｒ−ｓｅ　ｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａ　ｌ−１１ｅ−（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−工１ｅ−５ｅｒ）　−Ｙここで、Ｒ１４〜Ｒ１，、ＸおよびＹは、式■で規定したとおりであり、括弧内の１つ以上の残基は、式■の場合と同様に、存在しても存在しなくてもよい。

上記のサブフラグメントにおいて、Ｒ１，はＧｌｙであり、Ｒ１，は存在せず、Ｒ１？はＶａｌまたはＭｅｔであることが好ましい。下記に、各々ウシとヒツジ、およびヒトに関連する好ましいサブフラグメントを示す。

Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　２１Ｘ−（Ｇｌｙ−Ａｌａ−５ｅｒ−Ｖａｌ）工１ｅ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−５ｅｒ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ　−工１ｅ−４Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−工１ｅ−５ｅｒｌ　−Ｙ　：Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　２２Ｘ−（ＧＩＹ−５ｅｒ−５ｅ　ｒ−Ｍｅｔ　）　−Ｖａ　ｌ−Ｌｅｕ　−Ｐｈｅ −５ｅｒ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ　−工ｌｅ−（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−１１ｅ−５ｅｒ）−Ｙ。

我々の発明は、領域Ｅについて、一般式Ｖａ、ＶｂおよびＶｃで表される３つの合成ペプチド配列を提供する。

Ｘ　−（Ｐｒｏ−ＧＩＹ−ＧＩＹ−Ｒ２゜）　−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−５ａｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ　−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−（Ｇｌｙ−Ｒ２，−Ｒ２□−Ｔｒｐ）−Ｙ　（Ｖａ）；Ｘ−（ＧＩＹ−ＧＬＹ−Ｒ２，−Ｒ２，、−Ｔｒｐ　ｌ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｒ２３−Ｔｒｐ（Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ）−Ｙ　（Ｖｂ）；Ｘ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）　−Ｇｌｙ− Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｒ２４−Ｒ２，−Ｈｌｓ−Ｒ２６−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ− Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｒ２，−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｒ２，− 〜−Ｌｙｓ（−Ｈｉｓ−Ｒ３ｏ−Ａｌａ−Ｇｌｙ）　−Ｙ　（Ｖｃｌここで、Ｒ２゜、Ｒ２いＲｏおよびＲ１４は各々独立して、Ｇｌｙであるか、または存在せず；ＲｏはＧｌｙまたはＴｈｒであり；ＬｓはＴｈｒまたはＳｅｒてあり；Ｒ１，はＧｌｙ、　ＳｅｒおよびＡｓｎから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ１１およびＲ１，は各々独立して、ＡｓｎまたはＳｅｒであり；ＲｏはＭｅセ、ＬｅｕおよびＰｈｅから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ１゜はＶａｌまたはＭｅｔでありｉ括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基か存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

上記した式Ｖａ−Ｖｃについて、好ましくは、Ｒ□はＧｌｙであり、Ｒ１３は存在せず、ＩＬｓはＧｌｙまたはＳｅｒであり、ＲａｔはＳｅｔであり、Ｒ２，はＡｓｎであり、ＲｈはＭｅｔである。

式Ｖａ−Ｖｃで表されるウシのプリオンタンパク質の好ましい配列は、下記のものである。

Ｓａｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：　２］Ｘ−（Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ　）　−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｇ１　ｙ −５ａｒ−Ｐｒｏ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）−Ｙ：Ｓａｑ、工、０．Ｎｏ：　２４Ｘ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）　−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ −Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ）−Ｙ；ｓｅｑ、工＋Ｄ、　Ｎｏ＝　２５Ｘ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）　−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ −Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−５ｅｒ −Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｍａｔ−Ｌｙｓ（−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｙ）−Ｙ。

ヒツジのプリオンタンパク質に関連する式Ｖａ−Ｖｃの好ましい配列は、下記のものである。

Ｓａｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　２６Ｘ−（Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ）−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−５ｅｒ−八ｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇ　１ｎ−Ｇ　１ｙ−５ｅ　ｒ−Ｐｒｏ−Ｇ　１ｙ−Ｇｌ　ｙ−Ａｓｎ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ　−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐｌ　−Ｙ　；ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　２７Ｘ−（Ｇ　１ｙ−Ｇｌｙ−Ｇ　１ｙ−Ｔｒｐ　）　−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ− Ｈｉ　ｓ−Ｇ　１ｙ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−（Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ− Ｈｉｓ）　−Ｙ　；Ｓｅｑ、　１．Ｄ−ｔＪｏ：　２８Ｘ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−ｃｌｙ−Ｔｒｐ）　−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ −５ｅｒ−Ｈｉｓ−５ｅｒ　−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ　−Ｌｙｓ　−Ｐｒｏ−５ｅｔ−Ｌｙｓ　−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ　−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ　（−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＧＬｙ）−Ｙ。

ヒトのプリオンタンパク質に関連する式Ｖａ−Ｖｃの好ましい配列は、下記のものである。

Ｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ＝　２９Ｘ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−八ｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）−Ｙ：ｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：　：１ＯＸ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ）−Ｙ：Ｓｅｑ、■、Ｄ、Ｎｏ：　コＩＸ−（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−５ｅｒ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ− ５ｅｔ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（−Ｈｉｓ −Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｇｌｙ）−Ｙ。

式Ｖａ−Ｖｃの特に好ましい配列は、次のものである。

Ｓａｑ＋工、Ｄ、　Ｎｏ＝　４９ＧＬｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｒｑ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−ＧＬｙ−Ｇｌｙ− Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− ＣＹＳ　；Ｓａｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　４ＧＧｌｙ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−Ｈ１ｓ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｔｒｐ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｇｌ　ｎ−Ｐｒｏ−Ｈ１ｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌ凵| Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ：　ａｎｄＳｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　４’７Ｇ　１ｙ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｇ　１ｙ−５ｅｒ−Ｈｉｓ−５ｅｒ−Ｇｉｎ５−５ｅｒ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−５ｅｔ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−１ｓ−Ｖａ　ｌ　−Ｇ　１ｙ−Ｃｙｓ。

我々は、領域Ｅに対応する核酸配列において、式ｖｂの繰り返し配列が＋１または−１の何れかのフレームシフトを受け得ることに注目した。このようなフレームシフトは、プリオンタンパク質の領域Ｅ内で変化した配列を引き起こし、そして我々の発明は、領域Ｅ内の１つの繰り返しが、式■で示される−１のフレームシフトを受けている配列を有する合成ペプチドを提供する。

Ｘ−（Ｒ１，−Ｒ，−Ｔｒｐ−Ｒ１，ｌ　−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｒ３，− Ｒ，、−Ｒ１６−Ｔｒｐ−Ｒ，。

（Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｒ，、）　−Ｙ（Ｖ工）ここで、Ｒ１１およびＲ１は各々独立して、ＡｌａまたはＴｈｒであり；ＲｏおよびＲｉｍは各々独立して、Ｓｅｒ、　ＰｆＯおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ□、およびＲＩ７は各々独立して、ＴｒｐまたはＡｒＣｌであり；Ｒ１４およびＲ３，は各々独立して、Ａｌａ　、　Ｓｅｒ　５ＰｒｏおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基であり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

ウシにおける領域Ｅに関するーｌフレームシフトについて、ＲＥはＡｌａであり、Ｒｏ、ＲＩいＲｉｍおよびＲ８８は各々独立して、ＳｅｔまたハＰｒ。

であり、Ｒ１１およびＲＩ７はＡｒｇであり、Ｒ□はＡｌａであることが好ましい。

ヒツジの領域Ｅにおける一１フレームシフトに関する好ましい配列は、ウシについて示した配列と幾つかの点で異なり、ヒツジの好ましい配列において、Ｒ１いＲｌｔ、Ｒ３３、Ｒｘｓ、Ｒ１，およびＲ１７は、上記式■で述べた定義に対応し、Ｒ１１およびＲ１１は各々独立して、Ｓｅｒ　５ＰｒｏおよびＴｈｒから選択される。

式■の好ましいヒトの配列において、Ｒ１１％Ｒ３４、ＬｓおよびＲ５，は各々Ａｌａであり、ＲｌｔおよびＲ１１は各々独立して、ＳｅｒまたはＰｒｏであり、ＲｌｔおよびＲ２７は両方ともＴｒｐである。

上記のように、フレームシフトは、領域Ｅの繰り返し部分において◆ｌであってよく、これは異なったアミノ酸配列を生じさせる。従って、我々の発明は、領域Ｅの繰り返しにおいて、＋１のフレームシフトに関連する下記式■で表される合成ポリペプチドを提供する。

Ｘ−（Ｒ３，−Ｒ，。−ＭｅセーＲ，）−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｒ，−Ｒ６，−Ｒ４，−Ｍｇｔ−Ｒ，−（Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｒ，６）　−Ｙ（ＶＩ工）ここで、Ｒ１１およびＲＢは各々独立して、ＳｅｒまたはＡｓｎであり；Ｒ４，およびＲ４１は各々独立して、ｐｒｏ　、　ＬｅｕおよびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基であり＋Ｒ４１およびＲ４，は各々独立して、ＶａｌまたはＧｌｕであり、ＲｓｔおよびＲ４，は各々独立して、Ｖａｌ　、Ａｌａ　、　ＡｓｐおよびＧｌｙから選択されたものであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基である。

式■で表される好ましいウシの配列は、各々がＳｅｔであるＲ１．およびＲ４Ｓと、各々が独立して、ＶａｌまたはＡｌａであるＲ４！およびＲ１，と、ｐｒｏまたはＩａｅｕであるＲ４４とを含み、他のＲ基は、式■で規定したとおりである。

ヒツジに関連する式■の好ましい配列は、ＲｌｔおよびＲ４１が各々独立して、Ｖａｌ　、ＡｌａおよびＡｓｐから選択される以外は、一般式■で示されるものと同一である。

式■で表される好ましいヒトの配列について、ＲｉｍおよびＲ１はＳｅｒであり、Ｒ４，およびＲ４ｓは各々独立して、ｐｒｏまたはＬｅｕであり、Ｒａ１およびＲ４ＳはＶａｌであり、Ｒ４２およびＲ□は各々独立して、八ｓｐまたはＧＩＹである。

我々の発明はまた、領域Ｆに関連し、かつ一般式■ａまた］よ■ｂを有する合成ペプチド配列を提供する。

Ｘ”’　（ＡＳｎ−Ｐｈｅ−ＶａＬ−Ｈｉｓｌ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−工１ｅ−Ｔｈｒ−Ｒ，−Ｌｙｓ　−Ｒ，、−ＨｌＳ−Ｔｈｒ−Ｖａ　ｌ−Ｒ，、−Ｔ？ｌ　ｒ−Ｔｈ　ｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇ　１ｕ−ＡＳｎ　− Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−（Ｔｈｒ−八５ｐ−Ｒ１゜−Ｉ、ｙｓ）−Ｙ（ＶＩエエａ）Ｘ−（Ｍｅｔ−Ｃｙｓ−Ｒ，、−丁？＋ｒ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｒ，−Ｒ，−Ｇｌｕ−５ｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−ＴＹｒ−ＴＹｒ−Ｒ，、−Ｒ，、−Ａｒｑ−（Ｒｓ＆−Ｒ，、−５ｅｒ−ＲＳ、−Ｒ，９）　−Ｙ（Ｖエエより）ココテ、Ｒ４７ｆ！　ＩｌｅまたはＶａｌでありｉＲａｍおよびＲ１は各々独立して、ＧｉｎまたはＧｌｕであり１Ｒ４１はＶａｌまたはＴｈｒであり２ＲｓｏはＶａｌまたは工１ｅでありダＲ１１はＩｌｅ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基であり；ＲｕはＧｉｎまたはＧｌｕであり；ＲｏはＡｒｑまたはＬＹＳであり；Ｒｓａは八ｓｐまｔこはＱｌｎでありｉＲ□はＧｌｙであるか、または存在せず；Ｒ３，はＧｌｙまたはＡｒｑであり；ＲｅｖはＡｌａまたはｓｅｔであり；ＲｓｓはＳｅｒであるか、または存在せず；ＲｓｓはＡｌａ、　Ｔｈｒ　、　ＭｅｔおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基であり７括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のベプチ白こ順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上、例えば３つの追加のアミノ酸残基である。

式■ａにおいて、Ｒ４１は’ｒｈｒであることが好ましく、式■ｂにお（１て、Ｒｓ＋　ＩＬ　Ｉｌｅ　テアリ、ＲｈはＡｒｇであり、Ｒ，４１１Ｇｉｎであり、Ｒ５５ｌｔ存在せず、ＲｓａはＧｌ’／であり、Ｒ８７は八１ａであり、Ｒ＊＊＋１存在しｔ；（Ｓことが好ましい。

式■ａおよび■ｂで表される最も好ましいウシ、ヒ゛ソジおよびヒトの配列を、以下にその順に示す。

Ｇｌｕ−阻５−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−（Ｔｈｒ−Ａｓｐ−工１ｅ− Ｌｙｓ）　−Ｙウシ（■ａ）およびｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：　３コＸ−（Ｍｅｔ−Ｃｙｓ−Ｉ　１ｅ−Ｔｈｒ　ｌ　−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｒｑ−Ｇｌｕ−５ｅｒ−Ｇｉｎ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−八ｒｇ−（Ｇｌｙ−Ａｌａ−５ｅｒ−ＶａＬ）−Ｙウノ（■ｂ）：Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　３４ｘ−（八５ｎ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｈｉｓｌ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ− 工１ｅ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｈ１ｓ−Ｔｈｒ−Ｖａ　ｌ　− Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈ　ｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌ　ｙ−Ｇｌ　ｕ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−ｆｈｒ−ＧＬｕ−（Ｔｈｒ−Ａｓｐ−１１ｅ−Ｌｙｓ）−Ｙヒツジ（■ａ）およびｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：コ５Ｘ−（Ｍａｔ−ａｙｓ−１１ｅ−Ｔｈｒ　ｌ　−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−５ｅｒ−Ｇｉｎ−Ａｌａ　−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−八ｒｑ−（Ｇｌｙ−Ａｌａ−５ａｒ−Ｖａｌ）−Ｙヒツジ（■ｂ）。

Ｓｅｑ、工、Ｄ、Ｎｏ：コ６ヒト（■ａ）およびＳｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：］７Ｘ−（Ｍｅｔ−Ｃｙｓ−工１ｅ−Ｔｈｒｌ　−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ −Ｇｌｕ−５ａｒ−Ｇｉｎ−Ａｌａ　−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ＝Ａｒｇ−（Ｇｌｙ−５ｅｒ−５ｅｒ−Ｍｅｔ　）　−’１ヒト（■ｂ）。

式■ａおよび■ｂで表される特に好ましい配列は、下記のものから選択される。

Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　５０Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｉ　１ｅ−Ｔｈｒ　・Ｖａ　１−Ｌｙｓ−Ｇｉｎ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｖａ　１−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ− Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　；Ｓｅｑ、　工、Ｄ、　Ｎｏ：　４８ＣｙＳ−工１ｅ−Ｔｈｒ−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−５ｅｒ− Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ。

上記式Ｉ〜■ｂのいずれかで表され、ＸおよびＹが存在しない合成ポリペプチドは、勿論、例えば抗体の製造等に有用であろう。しかしながら、ＸまたはＹが存在する場合には、これらはどの様な長さであってもよいか、好ましくはアミノ酸２０個未満、より好ましくは１０個未満、例えば３〜６個である。勿論、式１〜 ■ｂのいずれかで表される配列は、ＸおよびＹが、抗原性配列（例えば球状タンパク質上の露出ループの一部である）を有するタンパク質の主要部分であるタンパク質を構成してもよいことか認められよう。

ＸまたはＹが存在する場合には、これらは比較的短い配列、典型的には１〜３個の残基の長さであることが好ましい。大抵の場合には、Ｘが好ましくは欠如しており、Ｙが１個または２個の残基の長さ、例えば−ｃｙｓまたは−Ｇｌｙ−Ｃｙｓである。

本明細書において、全ての配列は、標準工、Ｕ、Ｐ、Ａ、Ｃ命名法の以下の３文字コード略語・　Ｇｌｙ−グリシン、Ａｌａ−アラニン、Ｖａｌ−バリン、Ｌｅｕ−ロイシン、ｌ１ｅ−イソロイシン、５ｅｒ−セリン、Ｔｈｒ−）レオニン、Ａ８ｐ−アスパラギン酸、Ｇｌｕ−グルタミン酸、Ａｓｎ−アスパラギン、Ｇｌｎ−グルタミン、Ｌｙｓ−リジン、Ｈｉｓ−ヒスチジン、Ａｒｇ−アルギニン、Ｐｈｅ−フェニルアラニン、Ｔｙｒ−チロシン、’ｒｒｐ−トリプトファン、ＣｙＳ−システィン、Ｍｅｔ−メチオニンおよびＰｒｏ−プロリン、を用いて述べられている。

本発明に係るポリペプチドは、広範な生物において産生されるプリオンタンパク質類と交差反応可能な抗体を生成させるのに用いることができる。

本発明に係るポリペプチドの配座的特性、極在的特性および静電的特性は、幾つかの、あるいは多数の生物からのブリオンタンパク質と交差反応する抗体の産生を高い確率で誘発するようなものであり、幾つかの変異体ポリペプチドをより大きなポリペプチド内に組み込むことから、更なる利益を得ることができる。このようなポリペプチドは、以下の式（■）：〔Ｌａ−Ｆ］ａ−’　Ｉ、−ｃｌ、− Ｌ、ｅ（工Ｘ）（式中、ＦおよびＧは、各々独立して、式１〜■ｂのいずれかで表されるポリペプチドまたはサブフラグメントであってよく、Ｌは結合配列であり、ａｓｂおよびＣは、各々独立して、０またはｌであり、ｍおよびｎは各々正の数、例えば１−１０である）で表すことができる。Ｌは、好ましくは短く、ポリペプチド鎖の配座的に自由な部分、例えば、（Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋３８１　Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、　（Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３９）　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ| Ｐｒｏまたはｔｓｅｑ、■、Ｄ、　Ｎｏ：　４０）　Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｌａ− Ｇｌｙ−８ｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ等であるが、これらに限定されるものではない。各々の繰り返し部分が、所望により、本発明に係るポリペプチドの異なる変異体を持ち得ることは、明らかである。

Ｃ−末端のあるものはＮ−末端に対応すること、個々には式Ｖａが式■ｂに、式Ｖｃが式■に、式Ｉが式■に、式■が式■に、式■が式■ａに、そして式■ｂが式■に対応することは、注目すべきことである。式■で表されるより大きなポリペプチドを製造する際に、この対応関係を利用することができる。Ｘ部分およびＹ部分の各々と一緒になった結合配列は省略することができ、括弧内の残基は、対応する領域が重複するが、または幾つかのあるいは全ての重複残基が省略されるように選択することができる。

後者の場合には、１つのポリペプチドのＣ−末端が、他のポリペプチドのＮ−末端と合体することがわかる。

式■で定義されるような多価の抗原決定基類似体は、本質的に同一な抗原決定基類似体の変異体が、１つのポリペプチド鎖内で繰り返されるプソイドホモポリバレントと称されるものであってもよく、および／または異なる抗原決定基が１つのポリペプチド鎖内に含まれているヘテロポリバレントと称されるものであってもよい。加えて、式■〜■ｂの何れがで表される１つの抗原決定基類似体の同一変異体の複製を複数含む単純なホモポリバレントポリペプチド免疫原もまた、効果的であると考えられ、本発明の範囲に包含される。

抗原的に重要なサブフラグメントおよび／または抗原的に重要な変異体が、親ペプチドの全般的形態および機能を保持していれば、これらのものは何れも本発明の範囲内に包含されると理解されるべきである。特に、特定残基の何れかが、匹敵する配座的特性および／または物理的特性を有する残基により置換されたもの、例えば稀少アミノ酸残基類似体（ただし天然に存在する：例えばＤ−立体異性体）または合成アミノ酸残基類似体により置換されたものが、本発明に包含される。例えば、１つの残基が、以下に示す同一セット内で他の残基により置換されたものは、本発明の範囲内である：セットｌ　−Ａｌａ　１Ｖａｌ、Ｌｅｕ、工１ｅ　、　Ｐｈｅ　、　Ｔｙｒ　５ＴｒｐおよびＭｅｔ　；セット２−　Ｓｅｒ　５Ｔｈｒ　、　ＡｓｎおよびＧｉｎ　７セツト３−ＡｓｐおよびＧｌｕ；セット４−　Ｌｙｇ　、　ＨｉｇおよびＡｒｇ；セット５−　ＡｓｎおよびＡｓｐ＋セット５−ＧｌｕおよびＧｉｎ；セット７−Ｇｌｙ　、　Ａｌａ　、　Ｐｒｏ　、ＳｉｒおよびＴｈｒ。

全てのアミノ酸タイプのＤ−立体異性体、例えばＤ−Ｐｈｅ　、　Ｄ−ＴｙｒおよびＤ−Ｔｒｐは置換されていてもよい。

本発明の好ましい態様において、ＸおよびＹは、もし存在する場合は、各々独立して、Ｔ細胞エピトープとして作用する能力を有するタンパク質配列のセグメントを１個または２個以上含んでいてもよい。例えば、一般式１−２−３−４　（式中、ｌはＧＩＹまたは荷電アミノ酸（例えばＬｙｓ、Ｈｉｓ　、　Ａｒｇ　、　ＡｓｐまたはＧｌｕ）であり、２は疎水性アミノ酸（例えば、工ｌｅ　、　Ｌｅｕ　、　Ｖａｌ　、Ｍｅｔ　、　Ｔｙｒ　、　ｐｈｅ　、　ＴｒｐまたはＡｌａ）であり、３は疎水性アミノ酸（上述したとおり）または無荷電極性アミノ酸（例えば、Ａｓｎ　％Ｓｅｒ　、　Ｔｈｒ　５Ｐｒｏ　、　ＧｉｎまたはＧｌｙｌであり、４は極性アミノ酸（例えばＬｙｓ　、　Ａｒｇ　１Ｈｉｓ　、　Ｇｌｕ　５Ａｓｐ　、　Ａｓｎ　、　Ｇｉｎ　５Ｓｅｒ　１ＴｈｒまたはＰｒｏｌである）のアミノ酸配列のセグメントは、少なくとも幾つかの場合に、Ｔ細胞エピトープとして作用するようである（Ｒｏｔｈｂａｒｄ、　Ｊ、Ｂ、　ｒｔＴａｙｌｏｒ、　Ｗ、Ｒ，（１９８８１Ａ　５ｅｑｕｅｎｃｅ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｉｎ　ｃｏｍｍｏｎ　ｔｏ　Ｔ−ｃｅｌｌｅｐｉｔｏｐｅｓ、　Ｔｈｅ　ＥＭＢＯＪｏｕｒｎａｌ　７（１１＋　９３−１００参照）。同様に、セグメントは、配列１’　−２’　−３°−４°　−５°　（式中、ｌｏは前述した１と同様であり、２°は２と、３°および４°は３と、かっ５゛は４と各々同様である）であり得る（同書参照）。両方の形態は本発明の範囲内に包含され、そして１個または２個以上のＴ−細胞エピトーブス（好ましくは５個未満）であり、このエピトープは前記で定義したタイプのものでも他の構造のものであってもよく、あるいは任意の長さまたは組成、好ましくは５個未満のアミノ酸残基の長さであり、例えばＧｌｙ、　Ａｌａ　、　Ｐｒｏ　、Ａｓｎ　、　Ｔｈｒおよびｓｅｒから選ばれた残基、または非−α−アミノ酸のような多官能性リンカ−を含むスペーサセグメントによって隔てられても良い。Ｃ−末端またはＮ−末端のリンカ−は完全なタンパク質を表すことが可能であり、従って、担体タンパク質への結合の必要性がないようにする。

本発明の範囲にはまた、式Ｉ〜■ｂで表され、式中のＸまたはＹが”レトロ−逆位（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）”アミノ酸、即ち、アミノ酸に対応する官能性基を有する２官能性アミンであるか、あるいはこれを含むポリペプチドの誘導体も包含される。例えば、本発明に従い、かつレトロ−逆位アミノ酸を含有する類似体は、下記式：（式中、Ｒは任意の官能性基、例えばグリシン側鎖であり、Ａ１およびＡ２は各々好ましくは、本明細書で定義した類似体（必ずしも同一でなくてもよい）の１つであってそのＮ−末端またはＣ−末端によって結合したもののコピーである）の構造を存しつる。先に論じたように、所望により、Ｔ−細胞エピトープが含まれていてもよい。

ペプチドのレトロ−逆位修飾は、１佃または数個のペプチド結合を逆転して、元の分子よりも酵素分解に対する耐性か優れた類似体を生成させ、かつ中程度ないし大きな免疫原性物質のためにエピトープを高濃度で含有している分岐した免疫原性物質を生成させる便利な経路を提供することを含む。生物学的に活性な短鎖ペプチドのレトロ−逆位類似体の大規模な溶液合成において、これらの化合物を使用することは、大いに可能である。

本発明のペプチドは、標準的ペプチド合成技術により、例えば標準の９−フルオレニルメトキンカルボニル（Ｆ−Ｍｏｃ）化学（例えばＡｔｈｅｒｔＯｎｌＥ、　ａｎｄ　５ｈｅｐｐａｒｄ、　Ｒ，Ｃ，（１９８５１Ｊ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　Ｃｈｅｍ、　Ｃｏｍｍ、　１６５参照）、または標準的ブチルオキシカーボネート　（Ｔ−Ｂｏｃｌ化学を用いて合成することができるが、５ｈｅｐｐａｒｄ　ｅｔ　ａｌによって開発されたフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃｌ　／第３級ブチルシステムが、より最近になって、益々広く応用されるようになってきたことが注目される（　５ｈｅｐｐａｒｄ。

Ｒ，Ｃ，１９８６５ｃｉｅｎｃｅ　ＴＯｏｌＳ、　Ｔｈｅ　ｒｌＪ（Ｂ　Ｊｏｕｒｎａｌ　３３．９　）　。構造の正確さおよび純度のレベル（これは通常は８５％を超える）は、注意深く検討すべきであり、もし存在する場合には、内部ジスルフィド橋の配置の正確さに注目されるべきである。この目的のために、例えば、高速液体クロマトグラフィーを含む種々のクロマトグラフィー分析、およびラマン分光法を含む分光分析を採用できる。

本発明のポリペプチドは、任意の従来法、前記のようなマニュアルまたは自動化ペプチド合成技術を用いて直接に、あるいはＲＮＡ合成もしくはＤＮＡ合成、または分子生物学および遺伝子工学の従来技術により間接的に、合成しうるちのと理解すべきである。このような技術を用いて、他のポリペプチド配列中に挿入された１個または２個以上のポリペプチドを含有するハイブリッドタンパク質を製造することができる。

従って、本発明のもう一つの態様は、本発明に係る少なくとも１つの合成ポリペプチドをコード化するＤＮＡ分子を提供し、この分子は、微生物細胞または哺乳動物細胞内で復製可能な好適な発現ベクター中に挿入されていることが好ましい。このＤＮＡは、より長い生成物のＤＮＡ配列の一部であってもよく、例えばポリペプチドは、これらが遺伝子工学によって挿入されている他のタンパク質の部分として発現されてもよい。このような技術についての一つの実用的な手引は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、　Ｊ、、　Ｆｒ１ｔｓｃｈ、　Ｅ、Ｆ。

ａｎｄ　Ｍａｎｉａｔｉｓ、　Ｔ、によるＭｏ１ｅｃｕｌａｒ　ｃｌｏｎｉｎｇ＋　ａ　１ａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｍａｎｕａｌ”（第２版、１９８９）である。

類似体である挿入用レトロ−逆位アミノ酸誘導体は、組み換えＤＮＡシステムを用いて直接に作成することはできないことに注目すべきである。

しかしながら、基礎的な類似体を作成することができ、次いでこれらのものを精製し、そして標準的なペプチド／有機化学を用いてレトロ−逆位アミノ酸に化学的に結合することができる。ポリアミド型樹脂上でレトロ−逆位ペプチドを固相合成するための実用的かつ好都合な新規な手順が、最近記載された［Ｇａｚｅｒｒｏ、　Ｈ，、Ｐｉｎｏｒｉ、　Ｍ、　＆　Ｖｅｒｄｉｎｉ、　Ａ、Ｓ、　（１９９０１，Ａｎｅｗ　ｇｅｎｅｒａｌ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　５ｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ　ｐｅｐｔｉｄｅｓ、Ｉｎ″Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ　ｉｎ　５ｏｌｉｄ　ＰｈａｓｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓＩｌ、　Ｅｄ、　Ｒｏｇｅｒ　Ｅｐｔｏｎ、　５ＰＣＣｆＵＫ）　Ｌｔｄ、　Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｎ、　［１）（］。

ポポリペブチは、任意に、ポリペプチドそれら自体中の化学基を介して、またはＣ−末端またはＮ−末端の何れかで付加された追加のアミノ酸を介して、担体分子に結合されていてもよく、この担体分子は、ポリペプチドをその免疫学的機能にとって最適にするために、１個または２個以上の追加のアミノ酸によってポリペプチドから隔てられていてもよく、またはこれら追加のアミノ酸によって取り囲まれていてもよい。多（の結合が好適であり、例えばＴｙｒ、　ＣｙｓおよびＬｙｓ残基の側鎖の使用が含まれる。好適な担体としては、例えばツベルクリン（ＰＰＤ）の精製タンパク誘導体、破傷風変性毒素（ＴＴ）、コレラ毒素およびそのＢサブユニット、オボアルブミン、ウソ血清アルブミン（ＢｓＡ　ｌ、大豆トリプシン阻害物質（ＳＴ工）、ムラミルジペプチドＣＭＤＰＩおよびその類似体、ジフテリア毒素（ＤＰＴ）、鍵穴カサガイ　１ｅｙｈｏｌｅ　ｌｉｍｐｅｔ＋ヘモシアニン（ＫＬＨＩ　およびブラウンのりボタンバク質等が挙げられるが、他の好適な担体は、当業者に容易に明らかであろう。例えば、複抗原性ペプチドは、例えばヘプタリジル等の反応性アミン末端を有するポリリジルコアを含むものであってよい。本発明に係るポリペプチド抗原は、アミノ末端と反応させるかまたはアミノ末端上で合成することができ、そして異なるペプチド抗原を同じコアまたは担体と反応させることができる。例えば、本発明に係るポリペプチドのための担体としてＰＰＤを用いる場合には、ポリペプチド−ＰＰＤ結合体のレシピエンドが、例えば以前のＢＣＧワクチン接種のために、既にツベルクリン感受性であるならば、より高い力価の抗体を得ることができる。ヒトのワクチンの場合には、英国および他の多くの国において、市民は、ＢＣＧワクチン接種を決まりきって受けるので、大いにＰＰＤ感受性である。従って、ＰＰＤは、これらの国において使用するのに好ましい担体である。

ポリペプチドを担体に結合させる様式は、結合すべき物質の性質に依存するであろう。例えば、担体中のりジン残基を、Ｎ−γ−マレイミドブチリルオキシーサクンンイミドで処理することにより、ポリペプチド中のＣ−末端または他のシスティン残基に結合させることができる　（Ｋｉｔａｇａｗａ、　Ｔ。

＆　Ａｃｋａｗａ、　Ｔ、　（１９７６１Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　７９．２３３１゜あるいは、担体中のりジン残基を、イソブチルクロロホルメートを用いて、ペプチド中のグルタミン酸残基またはアスパラギン酸残基に結合させることができる（Ｔｈｏｒｅｌｌ　。

Ｊ、工、Ｄｅ　ＬａｒＳＯｎ＋　Ｓ、Ｍ、ＬＬ９７８１　ＲａｄＬＯｌｍｍｕｎＯａＧｇａｙａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ＋　Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、　ｐ、２８８１　、他の結合反応および試薬は、文献に記載されている。

ポリペプチドは、単独でまたは担体分子に結合して、従来のアジュノ（ント（例えば水酸化アルミニウムまたはフロイントの完全または不完全アジュバント）および／または他の免疫増強剤と共にまたはこれら無しで、任意の経路（例えば非経口、鼻内、経口、直腸内、膣内）により投与することができる。本発明は、例えばリボゾーム　ｆＡｌｌｉｓｏｎ、　Ａ、Ｃ，＆Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ、　Ｇ、　＋１９７４）　Ｎａｔｕｒｅ　（Ｌｏｎｄｏｎ）　２５２．２５２）を含むか、または乳酸とグリコール酸との共重合体から製造された生体分解可能なマイクロカプセル（Ｇｒｅｓ８ｅｒ、　Ｊ、　Ｄ、　ａｎｄ　５ａｎｄｅｒｓｏｎ、　Ｊ、　Ｅ、　（１９８４）　ｉｎ　＠Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅ１ｔａａｓｅ　Ｓｙｓｔｅｍｓ”　ＰＰ　１２７−１３８．　Ｅｄ、　Ｄ、　Ｌ。

Ｗｉｓｅ　ｌを含む皮下インブラントまたはデボ−剤のような徐放性形態の本発明に係るポリペプチドの製剤を包含する。

本発明に係るポリペプチドは、単独でまたは適切な担体分子に結合して、次のものとして使用することができる：（ａ）　例えば患者または動物からの血清のアッセイにおけるリガンドとして；ｆｂ）　予防に使用するためのペプチドワクチン：（ｃｌ　例えばポリペプチドに対して生成した抗体の結合レベルを調べる際の質コントロール剤として；（ｄｌ　適正な動物の免疫によるモノクローナル抗体またはポリクローナル抗体の産生のための抗原性物質として、これらの抗体は、（１）プリオンタンパク質の科学的研究のため、（ｉｉ）例えば免疫組織化学的試薬の一部としての鯰断剤として、（ｉｉｉｌ脳障害の処置剤として、または他の剤と組み合わせて、動物または患者を受動免疫するために、（ｉｖ）　他の物質（このような他の物質は、共有結合しているか、あるいは例えばこのような物質を含有し、かつ任意の抗原性ポリペプチドに対して生成した抗体を組み込んでいるリボゾーム内などで会合している）を、プリオンタンパク質を含む領域に集中させる手段として、およびｆＶ）抗−イディオタイプ抗体を生成するための免疫原として使用するため；このような抗−イディオタイプ抗体はまた、本発明の一部を形成する。本発明は、本ポリペプチドに対して生成した抗体の遺伝子工学的に処理した形態またはサブ成分、特にＶ、領域、並びに文献に記載された技術を用いて、他の動物内で本ポリペプチドに対して最初に生成した抗体のヒツジ化形聾、ウシ化形態またはヒト化形態の前記のような遺伝子工学的処理形態またはサブ成分のため：および（ｅ）　プリオンタンパク質のヒト細胞または動物細胞への結合を置換するか、またはタンパク質のインビボでの３次元的構築を妨害することによる、脳障害の処置：並びにプリオンタンパク質のインビートロでの科学的研究の補助のために提供される。

プリオンタンパク質またはプリオンタンパク質に対して生成した抗体の検出および診断に関し、当業者には、この分野で公知の種々の免疫アッセイ技術、特にサンドイッチアッセイ、競合的アッセイ、非競合的アッセイ、直接および間接の標識の使用等が判明しているであろう。

本発明の更なる態様は、本発明に係る少なくとも１つの合成ポリペプチドを含む、プリオンタンパク質またはプリオンタンパク質に対して生成した抗体を検出するためのキットを提供する。

ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体、このような抗体のヒト化形！！！（例えばＴｈｏｍｐｓｏｎ　Ｋ、　Ｍ、　ｅｔ　ａｌ　（１９［１６）工ｎｖｎｕｎｏｌｏｇｙ　５８．１５７（６０参照）、単一ドメイン抗体（例えばＷａｒｄ、　Ｅ、　Ｓ、、　Ｇｕｓｓｏｗ、　Ｄ、。

Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ、　Ａ、　Ｄ、、　Ｊｏｎｅｓ、　Ｐ、　ａｎｄ　Ｗｉｎｔｅｒ、　Ｇ、　（１９８９１Ｎａｔｕｒｅ　３４１゜５４４−５４６参照）、および血液−脳障壁を越えるかもしれず、本発明に係る合成ポリペプチドと特異的に結合する抗体の製造は、従来の手段により行なうことができ、このような抗体は、本発明の一部を形成するものと考えられる。本発明に係る抗体は、特に、哺乳動物の組織または体液のサンプルを、本明細書に記載した抗体のある量と共にインキュベートし、そして前記のサンプルと前記の抗体との間で交叉反応が起きるかどうかを測定し、そして所望により、この交叉反応が起きる程度および／または速度を測定することからなる、哺乳動物の脳障害の診断方法に使用される。

前記の抗体の少なくとも１つを含む診断キットもまた、本発明の一部を形成する。

本発明のもう一つの態様は、哺乳動物の脳障害の治療または予防および／または哺乳動物の免疫系の刺激および／またはプリオンタンパク質の細胞結合または凝集のブロッキングに使用するための合成ポリペプチド、並びにこのような用途に適する医薬を製造するための合成ポリペプチドを提供する。また、活性成分として、本明細書に記載のポリペプチドまたはポリペプチド−担体結合体の少なくとも１つを、１種または２種以上の製剤上許容されるアジュバント、担体および／または賦形剤と一緒に含有する製剤組成物も包含される。これらの組成物は、経口投与、直腸内投与、鼻内投与または特に非経口投与（中枢神経系内投与を含む）のために処方することができる。

本発明は更に、前記で定義したポリペプチドのある量を、単独でまたは脳障害を処置するための他の薬剤と組み合わせて投与することからなる、哺乳動物の脳障害を治療または予防する方法および／または哺乳動物の免疫系を刺激する方法および／またはプリオンタンパク質の細胞結合または凝集をブロッキングする方法を提供する。

ＰｒＰｃが正常検体に認められ、ＰｒＰｃおよびＰｒＰｌｃの両者は罹患検体に認められるので、天然のｐｒｐ’とＰｒＰ”とを識別することは、著しく望ましい。我々は、本発明に係るペプチド配列、好ましくは領域Ａ、ＢおよびＣに関連する配列、およびこれらの重要なサブフラグメントを、天然ＰｒＰｃと感染ＰｒＰｓｃ　とを識別するのに使用できることを見出した。また、これらのペプチド配列およびサブフラグメントに対して生成した抗体、並びにこのようなペプチド配列およびサブフラグメントをコードするヌクレオチド配列も、ＰｒＰｅとＰｒＰａｃとを識別するのに使用することができる。

従って、本発明は、サンプルを、本発明に係るペプチド配列、好ましくは領域Ａ、ＢおよびＣに関連する配列およびこれらの重要なサブフラグメント、これらの配列およびサブフラグメントに対して生成した抗体から選ばれた物質と接触させ、そしてＰｒＰａｃの存在または不在を決定することからなる、ＰｒＰｃとＰｒＰｓｃとを識別する方法を提供する。

ある場合には、サンプルの前処理により、例えば酵素、例えばプロテイナーゼにで前消化するか、または強アルカリ、例えば６Ｍグアニジン塩酸塩で変性させるか、またはこのような処理を組み合わせることにより、識別を増強することができる。

試験される検体に関連するペプチド配列、抗体およびヌクレオチド配列、例えばウシのためのウシの配列または抗体、ヒツジのためのヒツジの配列および抗体の使用が好ましいであろう。

（ｉ）２種類以上の担体分子に結合させた所定の類似体、および／または（１１）同じ担体分子に結合させた２種類以上の類似体を含有するカクテルで免疫することが有利な場合がある。更に、任意のペプチド類似体、それらの結合体およびそれらのカクテルを、好適なアジュバント系または放出系にて投与することができ、そして２つ以上のアジュバント系または放出系を組み合わせて、いわゆる　 ”スーパーカクテル”を形成できる。好ましいアジュバントおよび放出系としては、水酸化アルミニウム（ａｌｕｍ）、リボゾーム類、ミセル類、ニオシーム類、ｒｓｃｏＭｓ、ブラウンのりボタンバク質、および微生物による動物ワクチンの全細胞または成分が挙げられる。

実施例ＩＣ−末ｗＩＹの延長部が、本発明によるＧｌｙ−Ｃｙｓである式■の好ましいウシの形態（Ｓｅｑ、　ｒ、Ｄ、　ＮＯ＋　４１）　Ａｌａ−Ｍｓｔ−５ｅｒ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−工１ｅ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌ　ｙ−５ｅ　ｒ−Ａｓｐ −Ｔｙｒ−Ｇ　ｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−`ｒｇ− ａｌｙ−Ｃｙｓ　（Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　７に関連）は、標準的な固相ＦＩＩＩＯＣ方法を用いて合成される。このペプチドをトリフルオロ酢酸の存在下で樹脂から切り離し、次いでゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィーおよび逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製する。このペプチドを、公知のへテロ−２官能性試薬であるＭＢＳ　（ｍ−マレイミド−ベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシサクンンイミドエステル）により、種々の担体に結合させる。

担体の例としては、Ｂ細胞エピトープに必要な免疫強化特性を与えることが示されているＫＬＨ、ＢＳＡおよび胃が挙げられる。

ペプチド担体結合物をフロイントの完全アジュバント中で乳濁化し、マウスに筋肉内投与する。続く追加免疫注射は、７０インドの不完全アジュバント中の液として与える。

確実な血清抗体応答を、ＢＳＡに結合した固定化抗原（式■）、試験される血清サンプルおよび酵素で標識した抗−マウス抗体を用いて、酵素免疫アッセイ　（ＥＬ工ＳＡＩ　により、免疫スケジュールの間中モニターする。

この実施例では、抗一式■抗体を産生させるのに最適なプロトコールを決定するために、担体、アジュバントおよびデリバリシステムの使用、および追加免疫注射を行う。

実施例２式■に対する抗体は、血清中、血清中の”細胞担体（ｃｅｌｌ　ｃａｒｒｉｅｒｓ　ｌ”中、および感染した動物種の組織バイオプシー中にブリオンタンパク質が存在するかどうかをアッセイするための診断試薬として用いられる。

抽出されたブリオンタンパク質の存在は、直接の酵素免疫アッセイ（ＥＬ工ＳＡＩによって、このタンパク質を固体基質上に固定化することにより検出することができる。　式■に対して生じさせたマウス抗血清と天然ブリオンタンパク質との反応は、酵素で標識した抗−マウス抗血清を用いて検出される。この反応は、好適な基質の添加および生じた色の光学密度の読み取りにより定量化される。

更に、組織バイオプシー中のブリオンタンパク質の免疫組織化学的診断は、抗一式■抗体とパラフィンワックス埋め込み組織または凍結組織との反応により行なうことができる。反応は、標準的な間接的免疫パーオキシダーゼ技術を用いて検出できる。

ペプチド［：　（Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　４２）Ｓｅｔ−Ａｌａ−Ｍｅｔ −５ｅｒ−Ａｒｑ−Ｐｒｏ−Ｌａｕ−工１ｅ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＡＳｎ −Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（式■の好ましｕｌｈｌリッジブフラグメント）ペプチドＢ　■＋　（ｓｅｑ、　工、ｏ、　Ｎｏ：　４３１Ｓｅｒ−Ａｌ　ａ　−Ｍｅｔ−５ａｒ−Ａｒｑ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｉ　１ｅ−Ｈ１ｓ−Ｐｈｅ−Ｇ　ｌ　ｙ−５ｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（式■の好ましいウシのサブフラグメント）ペプチドＩ［［：　（Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　４４）Ａｓｎ−ＭｅセーＴｙｒ−Ａｒｑ−Ｔｙ　ｒ　−Ｐｒｏ−Ａｓｎ　−Ｇ　ｉｎ　−Ｖａ　ｌ　−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｑ−Ｐｒｏ−Ｖａ　１| Ａｓｐ−Ａ　ｒｇ−Ｔｙｒ−５ｅ　ｒ−Ａｓ　ｎ　−Ｇ　１　ｎ−Ａｓ　ｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ　−Ｖａ　ｌ　−Ｈｉｓ　−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｃｙ■ （式■の好ましいヒツジの配列（ｐ８．　Ｉｎ　３Ｏ−３２）　）ペプチドＢＩ［Ｉ　ｎ　（Ｓｅｑ、　工、Ｄ、　Ｎｏ：　４５１八Ｓｎ−Ｍａｔ−Ｈｉｓ−Ａｒｑ−Ｔｙｒ−ｐｒｏ−ＡＳｎ−ｃＬｎ−ｖａＬ−’ｒｙｒ−Ｔｙｒ−八ｒｑ− Ｐｒｏ−へａｌ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−５ｅ　ｒ−Ａｓｎ−Ｇ　１ｎ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｖａ　１−Ｈｉｓ−ＧＩＹ−Ｃｙｓ（式■の好ましいウシの配列ｆｐ８．　ｉｎ　２６−２８）　）ペプチドＶ　ｂ　＋　（Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　４６）Ｇｌｙ−Ｇｌ　ｎ−Ｐｒｏ−Ｈ１ｓ−Ｇｌｙ−Ｇ、ｌ　ｙ −Ｇ　ｌ　ｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌ　ｙ−Ｇｌ　ｎ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇ　ｌ　ｙ−ｃｌ凵| Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｇｌ　ｎ−Ｐｒｏ−Ｈ１ｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｃｙｓ（式ｖｂの好ましいヒツジ／ウシの配列）ペプチドＶｃ二（Ｓｅｑ、　１．ｏ、　Ｎｏ：　４７１Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−ｃｌｙ− ｃｌｙ−５ｅｒ−Ｈｉｓ−５ｅｒ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−八５ｎ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ− Ｓａｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−八ｓｎ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（式ＶＣ＋７）好まい叱ツジの配列）ペプチド■ｂ＋　（Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　４８１Ｃｙｓ−工１ｅ−Ｔｈｒ −Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−５ｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｔｙｒ −Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ（式■ｂの好ましいヒツジ／ウシの配列）ペプチドＶ　ａ　：　ｆｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　４９１Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−ＧＬｙ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ＋八ｓｎへＡｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓペプチド■ａ　：　（Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　５０１■ａ上−ＡＳｎ＋上λｅ−’ｉ’ｎｒ−Ｖａｌ−Ｌ＋ｙＳ−Ｌｊｉｎ−ｎＬｓ−Ｌｌｌｒ−Ｖ＋ｍＡｊＡｌｌＬ　ＡＡＡＩＬ　１ａｉａ、−`ＩＡ＆Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（式■ａの好ましいヒツジの配列）ペプチドＩ　：　（Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　５１）Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｍｅｔ−Ａ　ｌａ　−Ｇ　１ｙ−Ａｌａ　−Ａｌ　ａ　−Ａｌａ　−Ａ　１ａ−Ｇｌｙ−Ａｌ　ａ−Ｖａ　ｌ　−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ　−Ｇ　ｌ　ｙ −Ｇ　ｌ　ｙ−Ｔｙｒ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ｇｌ　ｙ−５ｅｒ−Ａｌａ−Ｍｅｔ− ５ｅｒ−Ａｒｑ−Ｇｌｌ／−ＣｙＳ。

ペプチドＬＨ１ＢＩｒ、■、ＢＩ［［、Ｖａｓ　Ｖｂｓ　Ｖｃおよび■ａを、本発明によるＣ−末端延長により合成した。これらのペプチドを、トリフルオロ酢酸の存在下で樹脂から切り離し、次いで逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。全てのペプチドは、８５％以上の純度を有していた。

ペプチドのオボアルブミンへの結合ペプチドを、それらのＣ−末端（ペプチド■、ＢＩＩ、■、ＢＩ［［、ｖｂおよびＶＣ）、またはＮ−末端（ペプチド■ｂ）のＣｙｇ　残基を介して結合させた。ペプチドをジメチルスルホキシド＋ＤＭＳＯ＞に溶解して１０■／ｍｌの濃度にした。前活性化したオボアルブミン（Ｐｉｅｔｃｅ、　Ｉｍｊｅｃｔ　Ｋｉｔｌを蒸留水１　ｍｌ中に再懸濁し、等容量の前活性化オボアルブミンとペプチドとを混合し、この溶液を室温で３時間放置した。結合物を燐酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳＩに対して一昼夜透析して、ＤＭＳＯおよび未結合ペプチドを除去した。

Ｅｌｌｍａｎｎのアッセイを用いて遊離チオール含有量を測定し、モしてＳＤ！９−ＰＡＧＥ　（ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動）により結合物の分子量の増加をモニターすることにより、結合の程度を決定した。

ウサギ抗血清の産生２匹の雌性ニューシーラント白色ウサギ内で、それぞれのペプチド結合物に対して抗血清を生じさせた。各ウサギは、−次接種および追加免疫の両方のために、４０μ９に等しい量の結合物を投与された。各ウサギには、次のように注射した。

０日目：フロイントの完全アジュバント中の結合物（１；１　ｖ／ｖ）を筋肉内注射。

２１日目：フロイントの不完全アジュバント中の結合物（１＋ｉ　ｖ／ｖ）を筋肉内注射。

３１日目：結合物それ自体を腹腔内注射。

４１日目に動物から瀉血し、ＥＬ工ＳＡ　（コーティング抗体として遊離ペプチドを使用）により、血清を抗−ペプチド抗体についてアッセイした。これらの血清は、脳ホモジネートからのタンパク質を認識できるかどうかを調べるために、免疫プロットアッセイおよびドツトプロットアッセイにも使用した。

脳ホモジネートの調製スクラピー非感染脳物質は、検疫所のニューシーラントヒツジの群れから得られた。

スクラビー感染脳物質は、農業部から得られ、スクラピーに感染していることか組織病理学的に診断された。

ＢＳＥ感染脳物質は、政府農業部を介して得られ、ＢＳＥに感染していることが組織病理学的に診断された。

ＢＳＥ非感染物質は、私的ソースから得られた。

Ｈａ２７−３０は、高レベルのメクラビー感染性物質を含有することが示されている近交（ｉｎｂｒｅｄｌハムスタースクラビーモデルから得られた。これは、陽性コントロールとして用いられた。

感染脳および非感染脳の少量のサンプルを秤量し、２５　ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ　ｐＨ７，４（ホモジナイズ緩衝液）中の５ａｒｋｏｓｙｌの１０％（ｖ／ｖ）溶液中で、１０％ｆＷ／Ｖ）ホモジネートにした。このホモジネートを４℃で３０分間インキュベートし、次いで６０００　ｘ　９で３０分間遠心した。上澄み液を回収し、ＢＣＡタンパク質アッセイキット　（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いてタンパク質含有量を測定した。ホモジナイズ緩衝液でタンパク質濃度を３　ｍｇ／ｍｌに調整した。

５戸ト（酵素結合免疫ソーベントアッセイ）ＰＢＳ中の遊離タンパク質の８μＭ溶液を、コーティング抗原として用いた。各ウェルに抗原濃度が５０μｍになるように添加し、次いで３７°Ｃで１時間インキュベートして結合を生じさせることにより、マイクロタイタープレートをコーティングした。各ウェルを、Ｏ，ＯＳ％のＴｗｅｅｎ　２０を含有するＰＢＳ　３００μｍで２分間５回洗浄した。

洗浄後、０．３％のＴｗｅｅｎ２０および３％の脱脂乳を含有するＰＢＳと共に３７°Ｃで１時間インキュベートすることにより、プレートをブロックした。ＰＢＳ中で希釈した一次抗体（即ち、抗血清）５０μｍのアリコートを適切なウェルに加え、プレートを３７℃で１時間インキュベートした。プレートを前記のように洗浄し、次いでＰＢＳ中希釈率１ｉ１０００のホースラディ’７シユ（Ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈｌパーオキシダーゼ結合ブタ抗−ウサギ免疫結合ブタン（抗１ｑ／ＨＲ［））と共に３７°Ｃで１時間インキュベートした。プレートを洗浄し、各ウェルに５０μｍのＯＰＤ　（クエン酸塩緩衝液中の０−フェニレンジアミンジヒドロクロリド基質＋１０ｍｇ／ｎｎｌ　））を加え、硫酸の添加により反応を停止する前に、室温で１０分間反応を進行させた。各ウェルの吸光度を、ＥＬｒＳＡプレートリーダーを用いて４９２　ｎｍで測定した。背景の光学密度（ＯＤ）の読み取りの３倍以上の陽性の光学密度読み取りを与えた希釈率として、力価を記録した。背景は、抗原でコーティングされていないウェルからのＯＤ読み取りとみなした。

脳ホモジネート中のｐｒｐのドツトプロット検出前記のようにして調製した脳ホモジネートを、ＰＢＳ中で１０倍に希釈し、１００μｍのホモジネート（総タンパク質３０μ９含有）を、ＢＲＬ　９６ウエル真空マニホールドを用いて、ニトロセルロースフィルターに施した。フィルターを室温で１時間乾燥した。次いでフィルターを、ＴＢＳＴ　（１（ｌ　ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣＩ　ｐＨ７，４，１５０＋ｔｔＭ　ＮａＣ１，ｏ、ｏｓ　％　Ｔｗｅｅｎ　２０）で湿らせて、免疫プロットで説明したようにしてＰｒＰを検出するか、あるいはタンパク質サンプルを更に処理した。サンプルのこの更なる処理には、ＴＢＳＴ中のプロテイナーゼに１００μｇ／ｍｌを用いてフィルター上のタンパク質を室温で９０分間消化することが含まれていた。ＰＭＳＦ　（フェニルメチルスルホニルフルオリド）をＴＢＳＴ中の濃度が５ｍＭになるように加えて、プロテイナーゼＫを不活性化だ。タンパク質の消化後、５　ｍＭ　ＰＨ４；Ｆ含有６ＭグアニジンＨＣＩ中で１０分間フィルターをインキュベートすることにより、幾つかのサンプルを変性させた。−次抗体と共にインキュベートする前に、ＴＢＳＴで３回洗浄することにより、グアニジンを除去した。

免疫プロット　（ウェスタンプロット）前記のようにして調製した脳ホモジネートについて、標準的技術を用いて５ＤＳ−ＰＡＧＥを行なった。ゲル内のサンプルを、Ｔｏｗｂｉｎ　Ｂｕｆｆｅｒ　（２５ｍＭＴｒｉｓ、　１９０　ｍＭグリシンおよび０．１％５ｏｓ）を用いて、Ｂｉｏｒａａ　トランスプロットのニトロセルロース上に７０ｍＡにて一昼夜で移行させた。ニトロセルロースフィルターを、５％脱脂乳を用いて室温で３０分間ブロックした。ＴＢＳＴ中で希釈した一次抗体（即ち、抗血清）を、室温で３時間施し、フィルターをＴＢＳＴ中で１０分間３回洗浄し、ｌ：２０００　の希釈率で希釈したアルカリホスファターゼ −結合ブタ抗−ウサギ免疫グロブリンと共に、フィルターを室温で２時間インキュベートした。洗浄後、ＮＥＴ／ＢＣ工ｐにトロープルーテトラゾリウム；５− ブロモ−４−クロロ−３−インドリルホスフェート）基質ｆＢｏｅｒｉｎｇｅｒ　Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を用いてタンパク質バンドを検出した。

プチドに対する良好な抗体の力価が得られた。最高の力価を与えたペプチドは、ドツトプロットにおいても最良の結果を与えた。

２）ドツトプロットデータ：　非感染組織は、正常プリオンタンパク質（ＰｒＰｃ）のみを含むものと予想される。感染組織は、ＰｒＰの正常形態および罹患（ＰｒＰ”　）形態の両方を含むものと予想される。

ＰｒＰｃは、約３３〜３５　ｋＤの分子量を有する。ＰｒＰｌｅは、約２７〜３０　ｋＤの分子量を有し、ＰｒＰｃ形懇には存在しているＮ−末端セグメントが欠如している。これ以外は、ＰｒＰ”のアミノ酸配列はｐｒｐ　ｃの配列と全（同一である。ＰｒＰｌｅ　の最も重要な特徴は、多分、非特異タンパク質消化酵素の一つであるプロテイナーゼＫによる酵素分解に対する耐性である。

タンパク質サンプルをプロテイナーゼにで処理すると、どのＰｒＰ　’も完全に消化されるはずである。従って、ｐｒｐｃだけを含むサンプルでは、プロテイナーゼに処理後には、どの形態のＰｒＰも残らないだろう。しかし、ＰｒＰ　’およびＰｒＰｌｃを含むサンプル（即ち、罹患サンプル）では、処理後にＰｒＰ” が残るだろう。

ＰｒＰＡｅを認識する現在利用可能な抗体はあるが、これらの抗体は変性したタンパク質だけを認識する。従って、プロテイナーゼに処理後、ドツトプロット試験のサンプルを、変性剤としてのグアニジンＭＣＩで処理した結果、このような抗体を、ＰｒＰ”　の検出のために使用することができた。

そのデータを表■〜Ｖに示す。

ペプチド■：良好な力価。ドツトプロットは、何らかの識別が生じていることを示しているようである。陰性の結果は、ウェスタンプロットから得られた。

ペプチド■：適度の力価。プロテイナーゼにおよびグアニジンで処理したサンプル中には、非特異的な（恐らく、非タンパク質の）成分の認識があるかもしれない。陰性の結果は、ウェスタンプロットから得られた。

ペプチド■ｂ＝良好な力価。何らかの識別が生じているかもしれないようであるが、Ｖｂペプチドは実際に、ＰｒＰＡｅには欠如しているＮ−末端領域内で生しる。従って、プロティナーゼにおよびグアニジンで処理した感染性物質における認識があるとは予想されないだろう。しかし、一つの可能な説明は、感染性物質中に存在するＰｒＰｅが、プロティナーゼＫによって完全には消化されていないということである。陰性の結果は、ウェスタンプロットがら得られた。

ペプチドｖｃ＋優れた力価。これらの結果は、全く予想したとおりである。前記のように、ＰｒＰＡｅを認識する抗体は、一般にタンパク質をその変性した形態でのみ認識する。感染サンプルおよび非感染サンプル、並びにｐｒｐ′Ｃおよび／またはＰｒＰＣをそれらの１生得の（ｎａｔｉｖｅ）”　形態で含有するサンプルはまた、細胞内での天然タンパク質のターンオーバーによる種々の変性段階にある両方のＰｒＰ形態をも含有するであろう。この理由のため、抗体は三つの全ての未処理サンプルを検出するものと予想される。しかし、プロテイナーゼに処理はＰｒＰｃを消化し、部分的に変性されたＰｒＰ“は全てのサンプルにおいて抗体認識の低下を来すであろう（抗体が変性ＰｒＰだけを認識すると推定して）。グアニジンの添加は、最初にＰｒＰｓｅを含有していた物質中での抗体認識を回復させるはずである。ウェスタンプロットは、正しい分子量において予想したタンパク質バンドを示した。

ペプチド■ｂ：適度の力価。非特異的成分の認識があるかもしれない。陰性の結果は、ウェスタンプロットから得られた。

ペプチドＢＩ［＆ＢＩＩ＋力価は適度であり、未処理の正常ウシ脳物質および感染ウシ脳物質から、強い陽性の結果が生じる。

要約すると、全ての場合に、良好な抗−ペプチド力価が得られ、ウェスタンプロットはペプチドＶＣの場合にのみ良く機能し、このペプチドはまた最高の力価を与え、そしてドツトプロットは、ペプチドＶＣについて、ｐｒｐｃとＰｒＰｍｅ　との間に、ある識別が生じていることを示している。ペプチド■からのデータも、識別が生じていることを示唆している。

！−±：ヒツジのペプチド配列からの結果表　■：ヒツジのペプチド／−クエンスからの結果表　ｍ・ヒツジ／ウシのペプチドシークエンスからの結果表　Ｖ・ウシのベブチドンークエンスからの結果配列のリスト５１個の配列（１）　Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋　１の情報（ｉ＋　配列の特徴：（Ａ）長さ：　３１佃のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状ｆｉｉ）　分子の種類：　ペプチドｆｘｉ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　１Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　ＧＩＹ　Ｔｙｒ　Ｍａｔ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　ｓｅｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ工１ｅ＋２１　ｓｅｑ、　１．Ｄ、　ＮＯ＋　２の情報（１）　配列の特Ｗ１：（Ａｌ長さ＋　３１個のアミノ酸ＣＢ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（×１）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　２Ｍｅｔ　Ｌｙｓ　Ｈｉｓ　Ｍｅｔ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙｌ　５　１０　１５Ｌａｕ　ＧＩＹ　ＧＩＹ　Ｔｙｒ　Ｍｅｔ　Ｌｅｕ　ＧＩＹ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　ＭｅセＳｅｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ工１ｅ工１ｅ＋３）　Ｓｅｑ、　ｚ、Ｄ、　ＮＯｌ　３の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さｌ　１７個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（ｉｉ）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、！、Ｄ、　Ｎｏ＋　３Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｌａｕ　Ｇｌｙ（４１Ｓｅｑ、工＋Ｄ、　Ｎｏ＋　４の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　１７個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（↓１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　４Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｙｒ　Ｍｅｔ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕｌ　５　１０　１５ｉｅ＋５１　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　５の情報（１）　配列の特徴：（Ａｌ長さ＋　１７個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（０）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　工、０．　Ｎｏ＋　５Ｈｉｓ　Ｍｅｔ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　ＡＬａ　Ａｌａ　八ｌａ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　八ｌａ　Ｖａｌ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　にｌｙ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ（６１Ｓｅｑ、　Ｘ、ｏ、　Ｎｏ＝６の情報（１）　配列の特＠：（Ａｌ長さ＋　１７個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　６Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｌａｕ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｙｒ　Ｍｅｔ　Ｌｅｕ　（、ｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅ＝　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ工１ｅｌ　５　１０　１５１ｅ＋７）　Ｓｅｑ、！、Ｄ、　ＮＯｌ　７１７）情報（ｉ）　配列の特徴＝（Ａ）長さ：　２９領のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋　７（８１Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　８の情報（１）　配列の特徴：（Ａｌ長さ：　２９個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジｍ：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチドＴｘｉ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　８Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｉｌｅ　Ｈｉｓ　Ｐｈｅ　Ｇｌｙ　ＡＳｎ　Ａｓｐ　Ｔｙｒ　Ｇｌｕ　Ａｓｐｌ　５　１０　１５Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇ１ｎｆ９１　Ｓｅｑ、　Ｚ、Ｄ、　Ｎｏ＋　９の情報（ｉｌ　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２９個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（×１）　配列の記載；　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　９Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｈｉｓ　Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ（１０）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　１０の情報（１）　配列の特Ｗｋ：（Ａｌ長さ＝　２３個のアミノ酸ＣＢ＋種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類；　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　１０＋１１）　Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋　１１の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２３個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状Ｉｉｓ１　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載！　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ：　１１Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｉｌｅ　）Ｉｉｓ　Ｐｈｅ　Ｇｌｙ　Ａｓｎ　Ａｓｐ　Ｔｙｒ　Ｇｌｕ　Ａｓ■ ｌ　５　１０　１５Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　ＧＬｕ　ＡＳｎ　Ｍｅｔ（１２１Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　１２の情報（１）　配列の特Ｗｌ：（Ａｌ長さ：　２３個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジ−８線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ　）　配列の記載＋　ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　１２Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｉｌｅｌｉｓ　Ｈｉｓ　Ｐｈｅ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｔｙｒ　Ｇｌｕ　Ａｓｐｌ　５　、　１０　１５Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ（１３）　５ｅＣＪ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　１３の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａｌ長さ１　２９個のアミノ酸ＴＢＩ種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　１３Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｈｉｓ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ａｓｐ　ＧｉｎＴｙｒ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　Ａｓｎ＋１４１　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏｔ　１４の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２９個のアミノ酸ｆＢ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチドｆｘｉ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　１４Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ａｓｐ　Ａｒｇｌ　５　１０　１５Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　にｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　）Ｉｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　八５ｎＨ５）　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　ｉｓの情報（ｉｌ　配列の特徴：（Ａｌ長さ＝　２９個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類；　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋　１ｓＡｓｎ　Ｍｅｔ　Ｈｉｓ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｍｅｔ　Ａｓｐ　Ｇｌｕｌ　５　１０　１５Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　Ａｓｎ＋１６１　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　１６の情報〈１）　配列の特徴；ｆＡｌ長さ＝　２６個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（×１）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　１６Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｌｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ａｓｐ　Ｇｉｎ　Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　ＡｓｎＧｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　ＶａＬ　Ａｓｎ＋１７１　Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋１７の情報＋ｉ）　配列の特徴：（Ａｌ長さ＋　２６個のアミノ酸ｆＢ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ：　１７Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｌｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｓａｒ　Ａｓｎ１　５　Ｎｏ　１５Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　ＰｈｅＶａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　Ａｓｎ＋１８）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　１８の情報（１）　配列の特＠：ｆＡｌ長さ＝　２６個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジ−８線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、、ＮＯ：　１８Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｌｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｍｅｔ　Ａｓｐ　Ｇｌｕ　Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ａｓｈｌ　５　１０　１５Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　）ｌｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　ＡｓｎＴ１９）　Ｓｅｑ、　工、Ｄ、　Ｎｏ＋　１９の情報（１）　配列の特ｗ１：（Ａ）長さ：　２９個のアミノ酸ＣＢ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（ｉｉｌ　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　ｒ、Ｄ、　Ｎｏ＋　１９Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｑ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　Ｖａｌ　Ｉｌｅ　ＬｅｔＪ　ＰｈｅＳｅｒ　Ｓｅｒ　ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｖａｌｌ　５　１０　１５１１ｅ　Ｌｅｕ　Ｌａｕ　Ｉｌｅ　Ｓｅｒ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ　Ｉｌｅ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ工ｌｅ　Ｖａｌ　ＧＩＹ＋２０１　Ｓｅｑ、■、Ｄ、　Ｎｏ＋　２０の情報（ｉｌ　配列の特徴：（Ａｌ長さ＝　２９個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１工）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ　）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、工、Ｄ、、Ｎｏ＋　２０Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｍｅｔ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｐｈｅ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｖａｌｌ　Ｓ　１０　１５工ｌｅ　Ｌｅｕ　Ｌａｕ　Ｉｌｅ　ｓｅｒ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ　Ｉｌｅ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ　Ｉｌｅ　Ｖａｌ　Ｇｌｙｌ０　２５（２１１Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ：　２１の情報ｆｉｌ　配列の特徴器（Ａ）長さ＋　１７個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　ＮＯｊ　２１Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　ＶａｌＩｌｅ　Ｌｅｕ　Ｐｈｅ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　ｐｒｏ　Ｖａｌ　工１ｅ　Ｌｅｕ　Ｌａｕ　ｌ１ｅ（２２１Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　２２の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　１７個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　２２Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｍｅｔ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｐｈｅ　ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ｉｌｅ　ｔ、ｅｕ　Ｌｅｕ工１ｅｅｒ＋２３１　Ｓｅｑ、！、Ｄ、　Ｎｏ＋　２３の情報＋ｉ）　配列の特徴；情）長さ＋　３１個のアミノ酸ＴＢＩ種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　工、ｏ、　ＮＯ＋　２３Ｐｒｏ　ＧＬｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ｔｈｒ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙｌ　５　１０　１５Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ａｓｎ　Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ２０　２５　）Ｑ＋２４１　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　２４の情報（ｉｔ　配列の特徴：（Ａ）長さ＝　１６個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　ｒ、Ｄ、　Ｎｏ＋　２４Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓｌ　１０　１５＋２５）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　２５の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２８個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　２５Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｈｒ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ｐｒ。

Ｓｅｒ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｌｙｓ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｇｌｙｌ０２５（２６）　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　２６の情報（１）　配列の特徴：（Ａｌ長さ：　３１個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載；　Ｓｅｑ、　工、０．　Ｎｏ：　２６Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ｔｈｒ　ｃｌｙ　ｃｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙｌ５１０１５Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｇｌｒｖ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ（２７１Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋　２７の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａｌ長さ＋　１６個のアミノ酸（Ｂ１種類電　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（ｘｌ）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　２７Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓｌ　５　１０　１５ｆ２８１　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　２８の情報（１）　配列の特徴：ｆＡｌ長さ：　２８個のアミノ酸１Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（工１）　分子の種類：　ペプチド（×１）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ；　２ＢＳｅｒ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｌｙｓ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｇｌｙ（２９）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　２９の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　３１個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（ｉｉ）　分子の種類：　ペプチドｆｘｉｌ　配列の記載：　ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　２９＋３０１　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋３０の情報（１）　配列の特徴：＋Ａｌ長さ＋　１６個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジｍ：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　ＮＯ＋　３０Ｄｌｌ　Ｓεｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３１の情報（１）　配列の特徴：＋Ａ）長さ＝　２９個のアミノ酸（Ｂ１種類；　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（工ｌ）　分子の種類：　ペプチド（×１）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３１Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｈｒ　Ｈｉｓ　Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ｌｙｓｌ　５　１０　１５Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｌｙｓ　Ｈｉｓ　Ｍａｔ　Ａｈａ　ＧｌｙＢ３２）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３２の情報（１）　配列の特徴；（Ａ）長さ＝　３１個のアミノ酸ｆＢ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（エエ）　分子の種類：　ペプチド（×１）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３２ＡＳｎ　Ｐｈｅ　ＶａＬ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　ＡＳｎ工１ｅ　Ｔｈｒ　Ｖａｌ　Ｌｙｓ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｔｈｒ　Ｖａｌｌ　５　１０　１５Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｔｈｒ　Ｇｌｕ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｉｌｅ　Ｌｙｓ＋３３３　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３３の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ＋　２０個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジｍ：　線状（１ｉ１　分子の種類；　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　ｒ、Ｄ、　Ｎｏ！３３Ｍｅｔ　Ｃ”／Ｓ工１ｅ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｑ　Ｇｌｕ　Ｓｅｒ’Ｇｌｎ　Ａｌａ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｇｌ　５　１０　１５Ｇｌｙ　Ａｌａ　５ｅｒ　Ｖａｌ＋３４１　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　３４の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ＋　３１個のアミノ酸（Ｂ）種類；　アミノ酸（Ｄ）トポロジｍ：　線状（ｉｉ）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋３４　。

Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　Ａｓｎ工ｌｅ　Ｔｈｒ　Ｖａｋ　Ｌｙｓ　Ｇｉｎ　Ｈｉｓ　Ｔｈｒ　ＶａＬｌ　５　１０　１５Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｔｈｒ　Ｇｌｕ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｉｌｅ　Ｌｙｓ２０　２５　コＯ（３５）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　３５の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２０個のアミノ酸１Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１工）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　３５Ｍｅｔ　Ｃｙｓ工ｌｅ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｇ　Ｇｌｕ　Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　Ａｌａ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｇｌ　１０　１５ＧＬｙ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　Ｖａｌ＋３６１　Ｓｅｑ、　ｒ、Ｄ、　ＮＯ＋　３６の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ＋　３１個のアミノ酸（Ｂ）種類；　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　３６Ａｓｎ　Ｐｈｉ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｖａｌ　Ａｓｎ　Ｉｌｅ　Ｔｈｒ　Ｉｌｅ　Ｌｙｓ　Ｇｉｎ　Ｈｉｓ　Ｔｈｒ　Ｖａｌｌ　５　１０　１５Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｔｈｒ　Ｇｌｕτｈｒ　Ａｓｐ　Ｖａｌ　Ｌｙｓ＋３７）　ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　３７の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａ）長さ＝　２０個のアミノ酸＋Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー−線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載：　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　３７Ｍｅｔ　Ｃｙｓ　工ｌｅ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｔｙｒ　Ｇｌｕ　Ａｒｑ　にｌｕ　Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　八ｌａ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｌｎ　Ａｒｇｌ　５　１０　１５Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｍｅｔ＋３８１　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ：　３Ｂの情報（１）　配列の特徴：（Ａｌ長さ：　５個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載＋　ｓｅｑ、■、Ｄ、　ＮＯ＋　３８Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　（、ｌｙ　Ｇｌｙ　にｌｙ（４３）　Ｓａｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　４３の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａ）長さ＋　２１個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー；　線状（ｉｉｌ　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ　）　配列の記載＋　Ｓａｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　４３Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　Ｓｅｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　工１ｅ　Ｈｉｓ　Ｐｈｅ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｔｙｒ　Ｇｌｕ　Ａｓｐｌ　５　１０　１５ｋｒｑ　Ｔｙｒ　Ｔ’）ｌｒ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ（４４）　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　４４の情報（ｉ）　配列の特徴；（Ａ）長さ；　２７個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載ｌ５ｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　４４Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｑ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　八ｓｐ　Ａｒｇｌ　５　１０　１５Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ（４５１Ｓｅｑ、工、０．　Ｎｏ＋　４５の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ＝　２７個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　１．０．　Ｎｏ＋　４５Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｈｉｓ　Ａｒｇ　丁ｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ａｓｐ　Ｇ１ｎＴｙｒ　Ｓａｒ　Ａｓｎ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ（４６）　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ：　４６の情報（１）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２６個のアミノ酸（Ｂ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トボロンー：　線状（土工）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載＋　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　４６Ｇｕｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　）Ｉｉｓ　Ｇｌｙ　にｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒ■ ｌ　５　１０　１５Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ２リ　２５＋４７１　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ：　４７の情報（ｉｌ　配列の特Ｗ１：（Ａｌ長さ：　２４個のアミノ酸（８１種類；　アミノ酸（Ｄ）トポロジー；　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｉｌ　配列の記載＋　５ｅｑ、　Ｚ、Ｄ、　Ｎｏ＋　４７Ｇｌｙ　Ｇｌｒｉ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　５−ｖｒ　Ｈｉｓ　Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ｌ凾■ ｌ　１０　１５Ｔｈｒ　Ａｓｎ　Ｍｅｔ　Ｌｙｓ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ＋４８）　ｓｅｑ、　Ｘ、ｏ、　ＮＯ：　４８の情報（１）　配列の特徴：（Ａｌ長さ：　１５個のアミノ酸（Ｂ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジｍ：　線状（ｉｉｌ　分子の種類：　ペプチドｆｘｉｌ　配列の記載：　Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ＋　４８ｃｙｓ　ＩＩｓ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｑ　Ｇｌｕ　Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　Ａｌａ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｇｉｎ　Ａｒｇｌ　５　１０　１５＋４９１　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　４９の情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａｌ長さ＝　２８個のアミノ酸ｆｇ）種類；　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載ｒ　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　４９ｃｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ｔｈｒ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｐｒ。

Ｉ　Ｓ　１０　１５ｃｌｙ　Ｇｌｙ　Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　ＣｙｓＰｅｐｔｉｄｅ　Ｖエエエａ：　（Ｓｅｑ、　１．Ｄ、　Ｎｏ：　５０１（５０１Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ＋　ｓｏの情報（ｉ）　配列の特徴：（Ａ）長さ：　２３個のアミノ酸ｆＢ）種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジｍ：　線状ｆｉｉ）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載＋　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏ＋　５０Ｖａｌ　Ａｓｎ工ｌｅ　Ｔｈｒ　Ｖａｌ　Ｌｙｓ　Ｇｌｎ　Ｈｉｓ　Ｔｈｒ　Ｖａｌ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｇｌｙｌ　５　１０　１５Ｇｌｕ　Ａｓｎ　Ｐｈｅ　Ｔｈｒ　Ｇｌｕ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ（５１）　Ｓｅｑ、　Ｘ、Ｄ、　Ｎｏｒ　５Ｌの情報＋ｉ）　配列の特徴：（Ａｌ長さ：　２９個のアミノ酸ＣＢ１種類：　アミノ酸（Ｄ）トポロジー：　線状（１１）　分子の種類：　ペプチド（ｘｌ）　配列の記載：　Ｓｅｑ、工、Ｄ、　Ｎｏ：　５１Ｌｙｓ　Ｈｉｓ　Ｍｅｔ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ａｌａ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｌｅｕｌ　５　１０　１５Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｔｙｒ　Ｍｅｔ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｍｅｔ　Ｓｅｒ　Ａｒｑ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ。

国！５ｆｆｌ杏斡失フロントページの続き（５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，６識別記号　庁内整理番号ＧＯＩＮ　３３１５３　Ｄ　８３１０−２Ｊ（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、　ＩＴ、ＬＵ、〜丁Ｃ，ＮＬ、ＰＴ、ＳＥ）、　ＡＵ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＦＩ、ＨＵ、ＪＰ、ＭＮ、Ｎｏ、ＮＺ、ＲＯ，ＲＵ、ＵＡ、ＵＳＦＩ（７２）発明者　ロブソン、バリー英国　チェシャー　エステ−６５ニーニー　マーブル　ブリッジ　タウン　ストリート２２エージ　オールド　ベーカリ−（７２）発明者　ミー、ロジャー　ボウル英国　マンチェスター　エム２０９デイーゼツト　ライシントン　パーク　ゲートアベニュー　４

Claims

【特許請求の範囲】１．一般式Ｖａ、ＶｂおよびＶｃ：【配列があります】（Ｖａ）；【配列があります】（Ｖｂ）；【配列があります】（Ｖｃ）（式中、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２４は各々独立して、Ｇｌｙであるか、または存在せず；Ｒ２２はＧｌｙまたはＴｈｒであり；Ｒ２５はＴｈｒまたはＳｅｒであり；Ｒ２６はＧｌｙ、ＳｅｒおよびＡｓｎから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ２７およびＲ２８は各々独立して、ＡｓｎまたはＳｅｒであり；Ｒ２９はＭｅｔ、ＬｅｕおよびＰｈｅから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ３０はＶａｌまたはＭｅｔであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部分を有する合成ポリペプチド。２．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｋ．Ｎｏ：２３【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２４【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２５【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２６【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２７【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２８【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２９【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３０【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３１【配列があります】から選択される配列を含む、請求項１に記載の合成ポリペプチド。３．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４９【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４６【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４７【配列があります】から選択される、請求項１に記載の合成ポリペプチド。４．一般式（Ｉ）：【配列があります】（Ｉ）（式中、Ｒ１はＭｅｔ、ＬｅｕおよびＰｈｅから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ２はＭｅｔまたはＶａｌであり；Ｒ３はＡｌａであるか、または存在せず；Ｒ４およびＲ５は独立して、Ｌｅｕ、ＩｌｅおよびＭｅｔから選択されるアミノ酸残基であり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチド。５．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１【配列があります】Ｓｅｑ．ＩＤ．Ｎｏ：２【配列があります】から選択される配列を含む、請求項４に記載の合成ポリペプチド６．下記の配列：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：５１【配列があります】からなる、請求項４に記載の合成ポリペプチド。７．好ましくは下記のもの：ｉ）【配列があります】ｉｉ）【配列があります】（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ＸおよびＹは、式Ｉで規定したとおりであり、括弧内の残基は、式Ｉの場合と同様に、存在しても存在しなくてもよい）から選択される、請求項４に記載の配列の重要なサブフラグメント。８．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３ｉ）【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４ｉｉ）【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．ｄ．Ｎｏ：５ｉ）【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：６ｉｉ）【配列があります】から選択される、請求項７に記載のサブフラグメント９．一般式ＩＩ：【配列があります】（ＩＩ）（式中、Ｒ４およびＲ５は、式Ｉの場合と同じであり；Ｒ６はＡｓｎまたはＳｅｒであり；Ｒ７はＴｙｒまたはＴｒｐであり；Ｒ■はＨｉｓ、ＴｙｒおよびＡｓｎから選択されるアミノ酸残基であり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよくただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチド。１０．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：７【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：８【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：９【配列があります】から選択される配列を含む、請求項９に記載の合成ポリペプチド。１１．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４２【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４３【配列があります】から選択される、請求項９に記載の合成ポリペプチド。１２．好ましくは下記の配列：【配列があります】（式中、Ｒ４〜Ｒ７、ＸおよびＹは、式ＩＩで規定したとおりであり、括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよい）を含む、請求項９に記載の配列の重要なサブフラグメント。１３．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１０【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１１【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１２【配列があります】から選択される請求項１２に記載のサブフラグメント。１４．一般式ＩＩＩ：【配列があります】（ＩＩＩ）（式中、Ｒ８はＨｉｓ、ＴｙｒおよびＡｓｎから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ９はＶａｌまたはＭｅｔであり；Ｒ１０はＧｌｎ、ＧｌｕおよびＡｒｇから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ１１はＳｅｒまたはＡｓｎであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらはペプチドの残余に順次に結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチド。１５．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１３【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１４【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１５【配列があります】から選択される配列を含む請求項１４に記載の合成ポリペプチド。１６．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４４【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４５【配列があります】から選択される、請求項１５に記載の合成ポリペプチド。１７．好ましくは下記の配列：【配列があります】（式中、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、ＸおよびＹは、式（ＩＩＩ）で規定したとおりである）を含む請求項１４に記載の配列の重要なサブフラグメント。１８．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１６【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１７【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１８【配列があります】から選択される請求項１７に記載のサブフラグメント。１９．一般式ＩＶ：【配列があります】（ＩＶ）（式中、Ｒ１２はＡｓｐまたはＧｌｎであり；Ｒ１３はＧｌｙであるか、または存在せず；Ｒ１４はＧｌｙまたはＡｒｇであり；Ｒ１５はＡｌａまたはＳｅｒであり；Ｒ１６はＳｅｒであるか、または存在せず；Ｒ１７はＡｌａ、Ｔｈｒ、ＭｅｔおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ１８はＶａｌまたはＩｌｅであり；Ｒ１９はＩｌｅまたはＭｅｔであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらはペプチドの残余に順次に結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチド。２０．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：１９【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２０【配列があります】から選択される配列を含む請求項１９に記載の合成ポリペプチド。２１．好ましくは下記の配列：【配列があります】（式中、Ｒ１４〜Ｒ１８、ＸおよびＹは、式ＩＶで規定したとおりであり、括弧内の１つ以上の残基は、式ＩＶの場合と同様に、存在しても存在しなくてもよ）を含む、請求項１９に記載の配列の重要なサブフラグメント。２２．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２１【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：２２【配列があります】から選択される請求項２１に記載のサブフラグメント。２３．式ＶＩ：【配列があります】（ＶＩ）（式中、Ｒ３１およびＲ３５は各々独立して、ＡｌａまたはＴｈｒであり；Ｒ３２およびＲ３６は各々独立して、Ｓｅｒ、ＰｒｏおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ３３およびＲ３７は各々独立して、ＴｒｐまたはＡｒｇであり；Ｒ３４およびＲ３６は各々独立して、Ａｌａ、Ｓｅｒ、ＰｒｏおよびＴｈｒから選択されるアミノ酸残基であり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチド。２４．式ＶＩＩ：【配列があります】（ＶＩＩ）（式中、Ｒ３９およびＲ４３は各々独立して、ＳｅｒまたはＡｓｎであり；Ｒ４ ■およびＲ４４は各々独立して、Ｐｒｏ、ＬｅｕおよびＨｉｓから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ４１およびＲ４６は各々独立して、ＶａｌまたはＧｌｕであり、Ｒ４２およびＲ４■は各々独立して、Ｖａｌ、Ａｌａ、ＡｓｐおよびＧｌｙから選択されたものであり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、存在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンパク質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を有する、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を含む合成ポリペプチド。２５．式ＶＩＩＩａまたはＶＩＩＩｂ：【配列があります】（ＶＩＩＩａ）【配列があります】（ＶＩＩＩｂ）（式中、Ｒ４７はＩｌｅまたはＶａｌであり；Ｒ４６およびＲ５２は各々独立して、ＧｌｎまたはＧｌｕであり；Ｒ４■はＶａｌまたはＴｈｒであり；Ｒ５０はＶａｌまたはＩｌｅであり；Ｒ５１はＩｌｅ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基であり；Ｒ５２はＧｌｎまたはＧｌｕであり；Ｒ５３はＡｒｇまたはＬｙｓであり；Ｒ５４はＡｓｐまたはＧｌｎであり；Ｒ５５はＧｌｙであるか、または存在せず；Ｒ５６はＧｌｙまたはＡｒｇであり；Ｒ５７はＡｌａまたはＳｅｒであり；Ｒ５■はＳｅｒであるか、または存在せず；Ｒ５■はＡｌａ、Ｔｈｒ、ＭｅｔおよびＶａｌから選択されるアミノ酸残基であり；括弧内の１つ以上の残基は、存在しても存在しなくてもよく、ただし、これらの残基が存在する場合には、これらは残余のペプチドに順次結合しており；ＸおよびＹは各々独立して、仔在しないか、または独立して、１つ以上の追加のアミノ酸残基であり、ただし、存在する場合には、ＸまたはＹの何れも、天然プリオンタンパク質の配列の対応部分において、ＸおよびＹが結合する配列に隣接しているプリオンタンバグ質の抗原性特性の一部を提供せず、形成もしない）で表される配列を含む、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチド。２６．下記のもの：ＳｅｑＩ．Ｄ．Ｎｏ：３２【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３３【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３４【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３５【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３６【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：３７【配列があります】から選択される配列を含む、請求項２５に記載の合成ポリペプチド。２７．下記のもの：Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：５０【配列があります】Ｓｅｑ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ：４８【配列があります】から選択される請求項２５に記載の合成ポリペプチド。２８．一般式（ＩＸ）：［Ｌａ−Ｆ］ｍ［Ｌｂ−Ｇ］ｎ−Ｌｃ（ＩＸ）（式中、ＦおよびＧは、各々独立して、式Ｉ〜ＶＩＩＩｂのいずれかで表されるポリペプチドまたはサブフラグメントであってよく、Ｌは結合配列であり、ａ、ｂおよびｃは、各々独立して、０または１であり、ｍおよびｎは各々正の数である）で表される合成ポリペプチド。２９．請求項１〜２７のいずれかに記載の上記で定義したポリペプチド配列の抗原的に重要なサブフラグメントおよび／または抗原的に重要な変異体を含む、合成ポリペプチド。３０．更に、Ｔ−細胞エピトープを含む、前記請求項のいずれかに記載の合成ポリペプチド。３１．レトロ−逆位（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）アミノ酸を含有する、前記請求項のいずれかに記載の合成ポリペプチド。３２．担体に結合された、前記請求項のいずれかに記載の合成ポリペプチド。３３．請求項１〜３０のいずれかに記載の合成ポリペプチドの少なくとも１つをコードするＤＮＡ分子。３４．脳障害に対する予防を促進するのに有効な、請求項１〜３１のいずれかに記載の合成ポリペプチドの少なくとも１つを含むワクチン。３５．請求項１〜３１のいずれかに記載の合成ポリペプチドの少なくとも１つを含む、プリオンタンパク質またはプリオンタンパク質に対する抗体を検出するためのキット。３６．請求項１〜３２のいずれかに記載の合成ポリペプチドの少なくとも１つを、１種または２種以上の製剤上許容されるアジュバント、担体および／または賦形剤と一緒に、活性成分として含有する製剤組成物。３７．請求項１〜３２のいずれかに記載の合成ポリペプチドの、哺乳動物の脳障害の治療または予防および／またはプリオンタンパク質の細胞結合または凝集のブロッキングのための薬剤の製造への使用。３８．請求項１〜３２のいずれかに記載のポリペプチドのある量を、単独でまたは脳障害処置用の他の薬剤と組み合わせて投与することからなる、哺乳動物の脳障害を治療または予防し、および／または哺乳動物の免疫系を刺激し、および／またはプリオンタンパク質の細胞結合または凝集をブロッキングする方法。３９．サンプルを、請求項１〜３２のいずれかに記載のポリペプチドの少なくとも１つと共にインキュベートスすることからなる、プリオンタンパク質またはプリオンタンパク質に対する抗体またはそれらの抗原結合フラグメントを検出する方法。４０．サンプルを、請求項１〜３２のいずれかに記載のペプチド配列、好ましくは領域Ａ、ＢおよびＣに関連する配列およびこれらの重要なサブフラグメント、該配列およびサブフラグメントに対して生成した抗体から選ばれた物質と接触させ、そしてＰｒＰ３ｃの存在または不在を決定することからなる、ＰｒＰｃとＰｒＰ５ｃとを識別する方法。４１．請求項１〜３１のいずれかに記載の合成ポリペプチドに特異的に結合した抗体またはその抗原結合フラグメント。４２．請求項４１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する、プリオンタンパク質またはプリオンタンパク質に対する抗体を検出するためのキット。４３．請求項４１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを、１種または２種以上の製剤上許容される担体および／または賦形剤と一緒に、活性成分として含有する製剤組成物。４４．請求項４１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを投与することからなる、哺乳動物の脳障害を処置または治療する方法。４５．サンプルを、請求項４１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントと共にインキュベートすることからなる、プリオンタンパク質またはプリオンタンパク質に対する抗体を検出する方法。４６．請求項４１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントに対して生成した抗−イディオタイプ抗体。４７．自体公知の化学的術、生物学的技術または組み換え技術を用いて、残基を結合させ、そして請求項１〜３１のいずれかに記載のポリペプチドを単離する工程からなる、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチドの製造方法。４８．ヒト以外の哺乳動物を、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチドで免疫し、そして請求項４１に記載の抗体を単離することからなる、プリオンタンパク質の少なくとも１つの抗原性部位を有する合成ポリペプチドに特異的に結合する抗体の製造方法。