JPH07252166A - 徐放性製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 薬物の放出を任意に調節できる徐放性製剤を
提供する。 【構成】 水溶性高分子、油脂又はろう類、脂肪酸を担
体に含み、これに生理活性物質を配合してなる徐放性製
剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はセルロース骨格を有する
水溶性高分子、油脂又はろう類、脂肪酸を含む担体と生
理活性ペプチドを含む徐放性製剤に関する。そして、糖
類を更に加えることによつて徐放速度を速めることがで
きる製剤に関する。

【０００２】特にこの製剤を体内に埋め込むことによ
り、静脈内投与や局所投与等によつては治療効果の期待
できない病態に対し効果を示すことの出来る体内埋め込
み型の徐放性製剤、具体的には脳内埋め込み型の徐放性
製剤に関する。

【０００３】

【従来の技術】医薬品を生体内に投与した場合に、生体
内での医薬品の溶出を制御し、吸収を調節する徐放性製
剤は古くから検討されている。例えば薬物を種々の被膜
で被覆する方法、あるいは薬物をワックスまたは高分子
のマトリックス中に包含させる方法等が知られている。

【０００４】そして、脳内疾患治療における静脈内薬物
投与は血液脳関門により脳内への薬物の移行が妨げられ
ている。また、脳内への薬物直接投与法としては手術時
にカテーテルを留置して脳内に持続的に薬物を送る方法
があるが装置が高価である上に感染の危険性も大である
ので信頼性のある方法とは言い難い。

【０００５】また、クモ膜下出血後に起こる遅発性脳血
管攣縮では病態が遅れて発症する上に持続的であるため
薬物投与にカテーテルを挿入する方法や静脈内に継続投
与する方法が用いられている。しかしながら今だ確実な
治療効果を得る方法は開発されていないのが現状であ
る。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】このような状況におい
て、薬物放出開始時期とその放出期間が調整できる製
剤、例えば、投与後１日以上経過後薬物放出が開始さ
れ、しかも薬物放出が５日以上もの長期にわたつて持続
するような製剤は投与回数を減らす上で好ましいが、い
ままでは存在しなかつた。

【０００７】キチンおよび／またはキトサンとカルボキ
シビニルポリマーを利用した徐放性担体が提案されてい
るが、これは天然物を原料とするために、原料の調達の
確実性が欠ける難点がある。そしてその効果も投与後３
時間程であらわれ、しかも１日も持続しないため、効果
の調節には物足りないものである。

【０００８】上記の事情からわかるように、原料の入手
が確実で、簡単に調製できかつ十分な徐放性が得られ、
しかも放出開始時期を調節でき、しかも長期にわたつて
薬物を放出することのできる徐放性製剤の開発が望まれ
ていた。

【０００９】

【課題を解決するための手段】そこで本発明者らが鋭意
研究した結果、セルロース骨格を有する水溶性高分子、
油脂又はろう類と脂肪酸を含む担体を使用すると製剤の
徐放性が得られることがわかつた。更にはこれに糖類を
加えることにより、薬物放出速度をいかようにも（遅く
にも速くにも）調整でき、その上薬物の１０日以上にも
わたる持続放出が可能となることを見出し、本発明を完
成するに至つた。

【００１０】すなわち、本発明により、 １ セルロース骨格を有する水溶性高分子、油脂又はろ
う類と脂肪酸を含む担体に生理活性物質を含有させたこ
とを特徴とする徐放性製剤、 ２ 糖類を加えてなる１に記載の徐放性製剤、 ３ 生理活性物質が生理活性ペプチドである１又は２に
記載の徐放性製剤、 ４ 生理活性ペプチドがカルシトニン遺伝子関連ペプチ
ドである３に記載の徐放性製剤、 ５ 生理活性ペプチドがマキサディランである３に記載
の徐放性製剤、 ６ マキサディランが天然型マキサディランである５に
記載の徐放性製剤、 ７ マキサディランが修飾型マキサディランである５に
記載の徐放性製剤、 ８ セルロース骨格を有する水溶性高分子がヒドロキシ
プロピルセルロースである１ないし７のいずれか１項に
記載の徐放性製剤、 ９ 油脂が硬化油である１ないし８のいずれか１項に記
載の徐放性製剤、 １０ 脂肪酸がステアリン酸である１ないし９のいずれ
か１項に記載の徐放性製剤、 １１ 糖類がラクトースである２ないし１０に記載の徐
放性製剤、が提供される。

【００１１】本発明において用いられるセルロース骨格
を有する水溶性高分子とは、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセ
ルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメ
チルセルロース等である。それらのうちヒドロキシプロ
ピルセルロースが好ましい。そしてその配合量は制限的
ではなく、放出開始時間及び放出持続時間を考慮して定
められるが、一般的に、製剤の総重量に基づき、１０重
量％−９０重量％、好ましくは４０重量％−６０重量％
である。

【００１２】油脂又はろう類としては硬化油、カカオ
脂、牛脂、豚脂、蜜ロウ、カルウナバロウ、白ロウ等が
用いられる。それらのうち硬化油が好ましい。そしてそ
の配合量は制限的ではなく、これも放出開始時間及び放
出持続時間を考慮して定められるが、一般的に、製剤の
総重量に基づき、１重量％−３０重量％、好ましくは１
０重量％−２０重量％である。

【００１３】脂肪酸としてはステアリン酸、ラウリン
酸、ミリスチン酸、イソステアリン酸、パルミチン酸、
ベヘニン酸等の炭素数１２−２２飽和または不飽和のカ
ルボン酸が用いられる。それらのうちステアリン酸が好
ましい。そしてその配合量は制限的ではなく、これも放
出開始時間及び放出持続時間を考慮して定められ、一般
的に、製剤の総重量に基づき、１重量％−３０重量％、
好ましくは１０重量％−２０重量％である。

【００１４】生理活性物質としては、なんら制限されな
いが、例えば、アドレナリン、アブシジン酸、アルギニ
ンバソトシン、アンギオテンシノーゲン、アンギオテン
シン、アンギオテンシン１変換酵素、胃液抑制ポリペプ
チド、インシュリン、インシュリン様成長因子、Ｓ因
子、エリスロポエチン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホ
ルモン放出ホルモン、黄体ホルモン、オキシトシン、２
−オクチル−γ−ブロモアセトアセテート、オータコイ
ド、ガストリン、ガストリン分泌促進ペプチド、ガスト
ロン、活性型ビタミンＤ₃、カリジン、カルシトニン、
カルシトニン遺伝子関連ペプチド、キニノーゲン、胸腺
ホルモン、グルカゴン、グルココルチコイド、血管作用
性小腸ペプチド、血漿カリクレイン、血清因子、血糖上
昇ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン
放出ホルモン、甲状腺ホルモン、黒色素胞刺激ホルモ
ン、黒色素胞刺激ホルモン放出ホルモン、黒色素胞刺激
ホルモン放出抑制ホルモン、コルチコトロピン様中葉ペ
プチド、ウロキナーゼ、コレシストキニンオクタペプチ
ド、コレシストキニンテトラペプチド、コレシストキニ
ンバリアント、コレシストキニン−１２、コレシストキ
ニンパンクレオチミン、コレシストキニン、細胞増殖因
子、サブスタンスＰ、雌性ホルモン、脂肪動員ホルモ
ン、繊毛膜性生殖腺刺激ホルモン、神経成長因子、膵ポ
リペプチド、生殖巣刺激物質、生殖腺刺激ホルモン、成
長ホルモン、成長ホルモン放出因子、セクレチン、セル
レイン、セロトニン、腺維芽細胞成長因子、腺性カリク
レイン、ソマトスタチン、ソマトメジンＡ、Ｂ、体色黒
化・赤化ホルモン、胎盤性ラクトゲン、チモシン、チモ
ポイエチン、チログロブリン、トラウマチン酸、内皮細
胞成長因子、軟体動物性心臓興奮性神経ペプチド、ニユ
ーロテンシン、妊馬血清性生殖腺刺激ホルモン、脳ホル
モン、ノルアドレナリン、バソプレッシン、発情ホルモ
ン、ヒスタミン、表皮細胞成長因子、副甲状腺ホルモ
ン、副甲状腺刺激ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン放出
因子、副腎皮質ホルモン、ＰＡＣＡＰ、ブラジキニン、
ブラジキニン様ペプチド、プロインシュリン、プロオピ
オメラノコルチン、プロスタグランジン、プロＰＴＨ、
プロラクチン、プロラクチン放出ホルモン、プロラクチ
ン放出抑制ホルモン、フロリゲン、閉経婦人尿生殖腺刺
激ホルモン、ボンベジン、マキサディラン、ミネラルコ
ルチコイド、明順応ホルモン、メチオニルリジルブラジ
キニン、１−メチルアデニン、メラトニン、モチリン、
雄性ホルモン、利尿ホルモン、リポトロピン、レニン、
レラクシン、濾胞成熟ホルモン等が用いられる。

【００１５】その配合量は使用薬物と使用目的によりこ
となるが、一般的に、製剤の総重量に基づき、０.００
０１重量％−３０重量％である。

【００１６】上記例示化合物におけるマキサディラン
（Maxadilan）としては、E.A．Lernerらの Internation
al Patent Publication No.WO ９１／００２９３に記載
の血管拡張性のタンパク質、その類似体、あるいは活性
フラグメントを挙げることができる。本発明においては
これを天然型マキサディランと呼ぶ。

【００１７】また、他のマキサディランとしては修飾型
マキサディランを挙げることができる。この修飾型マキ
サディランとしてはスナバエ（Lutzomyia longipalpi
s）の唾液腺に由来する血管拡張作用を有するタンパク
質の活性部位のアミノ酸配列を含有しているタンパク質
及び／又はペプチドであり、例えば、E.A．Lerner らの
J．Biol．Chem.，２６７：１０６３（１９９２）に記載
されているようなＧＩＬ修飾型マキサディランが挙げら
れる。

【００１８】また、本発明に於いては、前記ＧＩＬ修飾
型マキサディランの他に、別のアミノ酸配列を天然型マ
キサディランのＮ末端に有する修飾型マキサディラン、
例えば、M．Tajima らの U．S．P．Application No.０
８／１０２７５７に記載されている血管拡張性のタンパ
ク質、その類似体あるいは活性フラグメントを挙げるこ
とができる。そのなかでも次の構造式で表されるアミノ
酸配列を有するものが特に好ましい。

【００１９】

【化１】

【００２０】前記構造式で表される修飾型マキサディラ
ンはＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ（Ｇ−Ｓ−Ｉ−
Ｌ）のアミノ酸配列を有するペプチドが天然マキサディ
ランのＮ末端に融合したものである。このような修飾型
マキサディランを本発明ではＧＳＩＬ修飾型マキサディ
ランと呼ぶ。天然型マキサディランのＮ末端のアミノ酸
配列はＣｙｓ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｔｈｒ（Ｃ−Ｄ−Ａ−
Ｔ）であるから、ＧＳＩＬ修飾型マキサディランのＮ末
端のアミノ酸配列はＧｌｙ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−
Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｔｈｒ（Ｇ−Ｓ−Ｉ−Ｌ−Ｃ
−Ｄ−Ａ−Ｔ）で表される。

【００２１】このようなＧＳＩＬ修飾型マキサディラン
は天然型マキサディランよりも高い生物学的活性を有
し、例えば皮膚紅斑反応におけるＧＳＩＬ修飾型マキサ
ディランの生物学的活性は少なくとも天然型マキサディ
ランの１０倍であることが確認されている。

【００２２】本発明において用いられる修飾型マキサデ
ィランは、化学的に合成することも可能であるが、遺伝
子組換え技術を適用することによつて得ることができ
る。その方法において目的とする修飾型マキサディラン
を直接遺伝子組換えによつて生産してもよいが、修飾型
マキサディランのＮ末端にある種のペプチド、例えばト
ロンビン切断部位を有するペプチドが融合した修飾型マ
キサディラン融合タンパク質を得、ついでトロンピン切
断することにより目的とする修飾型マキサディランを得
ることができる。

【００２３】糖類としてはシヨ糖、ラクトース、グルコ
ース、フラクトース、マルトース、デキストリン、トレ
ハロース、プルラン等が用いられる。これらのうちラク
トース、グルコースが好ましい。糖類の添加により徐放
速度が調整でき、多く配合すると放出速度が早まる。糖
類の配合量は制限的ではなく放出開始時間及び放出持続
時間を考慮して定められ、一般的に、製剤の総重量に基
づき、１重量％−４０重量％、好ましくは１０重量％−
３０重量％である。

【００２４】製剤化にあたつては、公知の製剤技術が適
用できる。そしてそのまま製剤化してもよいが、従来公
知の崩壊調整剤、安定剤、抗酸化剤、湿潤剤、結合剤、
滑沢剤等を加え、錠剤、丸剤、カプセル剤、液剤、軟骨
剤等に製剤化する。 かくして得られる生理活性物質含
有徐放性製剤は、体内、例えば、脳内に埋め込んでも使
用することができる画期的な製剤であるばかりか、従来
における経口投与、経腸投与、経皮投与等の方法にも用
いられる。しかも、この徐放性製剤は剤形を保ちながら
徐放するという特徴を有している。

【００２５】

【実施例】以下に実施例をあげて本発明をさらに詳細に
説明するが、本発明はこれらにより制限されるものでは
なく、当業者において行われる変法、改良法も本発明の
範囲内に含まれることを理解しなければならない。

【００２６】［実施例１］ 徐放性製剤の製造（Ｉ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに
０.４％カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）
溶液２.０ｇ（ＣＧＲＰ８ｍｇに相等）とラクトース２
０ｇを加えて混合し、これにヒドロキシプロピルセルロ
ース６０ｇを加える。これを十分混合した後、ＫＢｒ錠
剤成型機（１５０ｋｇ、１分）で直径１３ｍｍの平板錠
剤を製造した。

【００２７】［実施例２］ 徐放性製剤の製造（ＩＩ） ステアリン酸２０ｇ、硬化油２０ｇを混合し、これに
０.４％カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）
溶液２.５ｇ（ＣＧＲＰ１０ｍｇに相等）とラクトース
２０ｇを加えて混合し、これにヒドロキシプロピルセル
ロース４０ｇを加える。これを十分混合した後、コレク
ト（Correct）１９Ｋ錠剤成型機（KIKUSUICLEAN PRES
S）で加圧成型した（６ｍｍΦ×２ｍｍ）。

【００２８】［実施例３］ 徐放性製剤の製造（ＩＩ
Ｉ） パルミチン酸１５ｇ、ミツロウ１５ｇを混合し、これに
０.４％カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）
溶液２.０ｇ（ＣＧＲＰ８ｍｇに相等）を加えて混合
し、これにヒドロキシプロピルセルロース７０ｇを加え
る。これを十分混合した後、コレクト（Correct）１９
Ｋ錠剤成型機（KIKUSUI CLEAN PRESS）で加圧成型した
（６ｍｍΦ×２ｍｍ）。

【００２９】［実施例４］ 徐放性製剤の製造（ＩＶ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに
０.４％カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）
溶液２.０ｇ（ＣＧＲＰ８ｍｇに相等）とグルコース２
０ｇを加えて混合し、これにヒドロキシプロピルセルロ
ース６０ｇを加える。これに十分混合した後、コレクト
（Correct）１９Ｋ錠剤成型機（KIKUSUI CLEAN PRESS）
で加圧成型した（６ｍｍΦ×２ｍｍ）。

【００３０】［実施例５］ 薬物放出試験（Ｉ） ハルトマン液（ミドリ十字社製）５ｍｌを１５ｍｌ容チ
ューブに無菌的に入れる。その後、実施例１に得た錠剤
を同様に無菌的にいれ、３７℃、１２０ｒｐｍで振とう
する。１、２、３、７、１１、１４日目にサンプリング
して高速液体クロマトグラフイーにて定量することによ
り薬剤放出量を求めた。その結果を図１に示す。

【００３１】図中の番号は錠剤の崩壊状態を示し、その
意味するところは以下のとおりである。

【００３２】崩壊状態１：変化なし。

【００３３】２：２０％の膨潤が見られる。

【００３４】３：小さな亀裂がはいる。

【００３５】４：大きな亀裂がはいる。

【００３６】５：粉々になる。

【００３７】［実施例６］ 薬物放出試験（ＩＩ） 実施例２に得た製剤も同様にテストし、その結果を図２
に示す。図中の番号の意味は前記に同じである。

【００３８】［実施例７］ 薬物放出試験（ＩＩＩ） 実施例４に得た製剤も同様にテストし、その結果を図３
に示す。図中の番号の意味は前記に同じである。

【００３９】高速液体クロマトグラフィー条件は以下の
とおりである。

【００４０】検出器：ＵＶ ２１４ｎｍ 流速 ：１.５ｍｌ／ｍｉｎ 移動層： Ａ：０.１％ＴＦＡ Ｂ：０.０８５％ＴＦＡ／アセトニトリル Ｂの初濃度２０％で２０分間で６０％まで直線的に濃度
を変化させる。

【００４１】カラム：資生堂製 ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡ
Ｋ ＳＧ３００（６ｍｍ×３５ｍｍ） 装置 ：島津製作所 ＬＣ−６ＡＤ ［実施例８］ 徐放性製剤の製造（Ｖ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに
１.６％カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）
溶液２.５ｇ（ＣＧＲＰ４０ｍｇに相当）とラクトース
２０ｇを加えて混合し、これにヒドロキシプロピルセル
ロース６０ｇを加える。これを十分混合した後、コレク
ト（Correct）１９Ｋ錠剤成型機（KIKUSUICLEAN PRES
S）で加圧成型した（６ｍｇΦ×２ｍｍ）。

【００４２】［実施例９］ 徐放性製剤の製造（ＶＩ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに１
０％カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）溶液
２.５ｇ（ＣＧＲＰ２５０ｍｇに相当）とラクトース２
０ｇを加えて混合し、これにヒドロキシプロピルセルロ
ース６０ｇを加える。これを十分混合した後、コレクト
（Correct）１９Ｋ錠剤成型機（KIKUSUICLEAN PRESS）
で加圧成型した（６ｍｇΦ×２ｍｍ）。

【００４３】［実施例１０］ 薬物放出試験（ＩＶ） 実施例２に得た錠剤を用いて、以下に示す方法にてウサ
ギ３匹による薬物放出効果に関する in vivo テストを
行つた。その結果を図４に示す。

【００４４】［試験方法］ ＜錠剤の脳への埋め込み方法＞ペントバルビタール麻酔
後のウサギ（２.５〜３.０ｋｇ）をうつ伏せに固定し、
切開により後頭骨膜（硬膜）を暴露し、後頭骨をドリル
で削り、硬膜を更に広く暴露した。その後、硬膜、クモ
膜を８ｍｍ程度切開して、３匹の内２匹に実施例２の徐
放性製剤の錠剤を、１匹にプラセボの錠剤を埋め込み、
硬膜、筋肉、皮膚を縫合し、抗生物質を切開部位に適量
投与した。

【００４５】上記ウサギより下記採取方法にて毎日脳脊
髄液を採取し、下記測定方法にて脳脊髄液中のＣＧＲＰ
濃度（ｎＭ）を測定した。

【００４６】＜脳脊髄液採取法＞ペントバルビタール麻
酔後の上記ウサギをうつ伏せに固定し、切開により後頭
骨膜（硬膜）を暴露し、後頭骨膜を切開し、そこより脳
脊髄液を採取した。

【００４７】＜脳脊髄液中の生理活性物質濃度の測定方
法＞下記ラジオイムノアッセイ法により濃度を測定し
た。

【００４８】測定用チューブにラベル化合物［２−（
¹²⁵Ｉ-iodohistidyl¹⁰）CGRP］４０００ｃｐｍを入れ、
これとは別に合成ＣＧＲＰ（Bachem 社製）を標準物質
として１、２、５、１０、５０、１００、５００、１０
００ｆｍｏｌの標準溶液を１００μｌづつ作製した。テ
ストサンプル、標準溶液、水１００μｌの入つたチュー
ブに抗体（アマシヤム社製ＲＰＮ１８４１を２ｍｌに溶
かし、更に１２.５ｍｌに希釈したもの）を１００μｌ
と、分析用緩衝液［５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ
７.４）、０.３％ウシ血清アルブミン、１０ｍＭＥＤＴ
Ａ］６００μｌを入れ、チューブのカバーを閉じて４℃
にて５日間静置した。チューブにデキストラン／活性炭
溶液［５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７.４）、０.２
５％ゼラチン、１０ｍＭＥＤＴＡ］２５０μｌを加え、
即座に２０分間、２０００×ｇで遠心分離を行つた。沈
殿と上清の両方をγ−カウンターで２００秒間測定し、
標準物質溶液から得た標準曲線より脳脊髄液中の生理活
性物質（ＣＧＲＰ）の濃度を測定した。［実施例１１］
血管拡張試験（Ｉ） 実施例８及び実施例９に得た錠剤及び生理活性ペプチド
であるカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）を
含有しない錠剤（プラセボの錠剤）を用いて、以下に示
す方法にて血管拡張試験を行つた。その結果を実施例８
の錠剤については図５に、実施例９の錠剤については図
６に示す。

【００４９】［プラセボ錠剤の製造方法］カルシトニン
遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）をヒドロキシプロピル
セルロースに置換する以外は実施例８の徐放性製剤の製
造（Ｖ）及び実施例９の徐放性製剤の製造（ＶＩ）と同
様の方法にてプラセボ用の徐放性製剤を製造した。

【００５０】［血管拡張試験］ウサギは体重２.５〜３
ｋｇのものを実施例８の錠剤については８匹、実施例９
の錠剤については７匹を用いて以下の手順で実験を行つ
た。

【００５１】（１）ウサギ脳底動脈Ｘ線写真後、既知の
方法［I．Yamamoto et al.，J．Neurosrug，７６，９９
−１０５（１９９２）及び T．Asano et al，Br．J．Ph
armacol.，９８，１０９１−１１００（１９８９）］に
準じて、クモ膜下出血モデルを作製した。（Day ０） （２）２４時間後（Day １）、ペントバルビタールにて
麻酔し、後頭部を生中に沿つて後頭骨から第一頸椎まで
切開した。

【００５２】（３）後頭骨、第一頸椎、後頭骨膜につい
ている筋肉を静脈を傷つけないようにメスで注意深く剥
離した。

【００５３】（４）暴露した後頭骨を外科用ドリルにて
下部より２〜５ｍｍ程度削つた。

【００５４】（５）その後、後頭骨膜をメスにて８〜１
０ｍｍ程度切開した。

【００５５】（６）この部位より錠剤をピンセットにて
クモ膜下内に入れた。

【００５６】（７）錠剤挿入後、絹糸にて後頭骨膜を縫
合した。

【００５７】（８）縫合後に沿つて、アロンアルファ
（登録商標）で更に傷口を塞いだ。

【００５８】（９）その後、絹糸にて筋肉、皮膚を縫合
し、抗生物質を適量投与した。

【００５９】（１０）投与直後〜５日目（Day ６）まで
毎日血管撮影により血管径を評価した。

【００６０】［比較例１］ 薬物放出試験（Ｖ）及び血
管拡張試験（ＩＩ） 上記（１）に於ける既知の方法に準じた大槽穿刺法によ
つて、ウサギ１匹に比較例としてカルシトニン遺伝子関
連ペプチド（ＣＧＲＰ）水溶液を投与し、実施例１０と
同様の方法にて経時的に脳脊髄液中のカルシトニン遺伝
子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）濃度（ｎＭ）を経時的に測
定した。その結果を図７に示す。

【００６１】また、同じく上記（１）の既知の方法に準
じた大槽穿刺法によつてクモ膜下出血後明らかに脳底動
脈の攣縮が認められたウサギモデル（ＣＧＲＰ水溶液に
ついては２匹、蒸溜水については４匹）に、比較例とし
てカルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）水溶液
及び蒸溜水を投与し、実施例１１と同様の方法にて血管
径を評価した。結果を図８に示した。

【００６２】［実施例１２］ 徐放性製剤の製造（ＶＩ
Ｉ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに
０.６％の前記構造式にて表されるＧＳＩＬ修飾型マキ
サディラン溶液２.５ｇ（ＧＳＩＬ修飾型マキサディラ
ン１５ｍｇに相当）とラクトース２０ｇを加えて混合
し、これにヒドロキシプロピルセルロース６０ｇを加え
る。これを十分混合した後、コレクト（Correct）１９
Ｋ錠剤成型機（KIKUSUI CLEAN PRESS）で加圧成型し、
粉砕・混合して再び同成型機で加圧成型した（６ｍｍΦ
×２ｍｍ）。

【００６３】［実施例１３］ 徐放性製剤の製造（ＶＩ
ＩＩ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに
１.０％の前記構造式にて表されるＧＳＩＬ修飾型マキ
サディラン溶液２.５ｇ（ＧＳＩＬ修飾型マキサディラ
ン２５ｍｇに相等）とラクトース２０ｇを加えて混合
し、これにヒドロキシプロピルセルロース６０ｇを加え
る。これを十分混合した後、コレクト（Correct）１９
Ｋ錠剤成型機（KIKUSUI CLEAN PRESS）で加圧成型し、
粉砕・混合して再び同成型機で加圧成型した（６ｍｍΦ
×２ｍｍ）。

【００６４】［実施例１４］ 徐放性製剤の製造（Ｉ
Ｘ） ステアリン酸１０ｇ、硬化油１０ｇを混合し、これに１
０％の前記構造式にて表されるＧＳＩＬ修飾型マキサデ
ィラン溶液２.５ｇ（ＧＳＩＬ修飾型マキサディラン２
５０ｍｇに相等）とラクトース２０ｇを加えて混合し、
これにヒドロキシプロピルセルロース６０ｇを加える。
これを十分混合した後、コレクト（Correct）１９Ｋ錠
剤成型器（KIKUSUI CLEAN PRESS）で加圧成型し、粉砕
・混合して再び同成型機で加圧成型した（６ｍｍΦ×２
ｍｍ）。

【００６５】［実施例１５］ 徐放性製剤の製造（Ｘ） パルミチン酸１５ｇ、ミツロウ１５ｇを混合し、これに
０.４％の前記構造式にて表されるＧＳＩＬ修飾型マキ
サディラン溶液３.０ｇ（ＧＳＩＬ修飾型マキサディラ
ン１０ｍｇに相等）を加えて混合し、これにヒドロキシ
プロピルセルロース７０ｇを加える。これを十分混合し
た後、コレクト（Correct）１９Ｋ錠剤成型機（KIKUSUI
CLEAN PRESS）で加圧成型した（６ｍｍΦ×２ｍｍ）。

【００６６】［実施例１６］ 薬物放出試験（ＶＩ） 実施例１２に得た製剤を薬物放出試験（Ｉ）と同様の方
法にてテストし、その結果を図９に示す。図中の番号意
味は前記に同じである。

【００６７】［実施例１７］ 薬物放出試験（ＶＩＩ） 実施例１３に得た製剤を薬物放出試験（Ｉ）と同様の方
法にてテストし、その結果を図１０に示す。図中の番号
意味は前記に同じである。

【００６８】［実施例１８］ 薬物放出試験（ＶＩＩ
Ｉ） 実施例１４に得た製剤を薬物放出試験（Ｉ）と同様の方
法にてテストし、その結果を図１１に示す。図中の番号
意味は前記に同じである。

【００６９】［実施例１９］ 血管拡張試験（ＩＩＩ） 実施例１３に得た錠剤及び生理活性ペプチドである前記
構造式で表されるＧＳＩＬ修飾型マキサディランを含有
しない錠剤（プラセボ錠剤）を用いて、実施例１１に記
載の方法と同様にて血管拡張試験を行つた。その結果を
図１２に示す。なお、プラセボ錠剤はＧＳＩＬ修飾型マ
キサディランをヒドロキシプロピルセルロースに置換す
る以外は実施例１３と同様の方法にてプラセボ用の錠剤
を製造した。

【００７０】［実施例２０］ 薬物放出試験（ＩＸ） 実施例２に得た錠剤を用いて、以下に示す方法にて薬物
放出効果に関する invivo テストを行つた。尚、本薬物
放出試験においては、ウサギを３０匹（Normal，day
１，day２，day３，day４，day５用として各々５匹ず
つ）用いた。その結果を図１３に示す。

【００７１】［試験方法］ ＜錠剤の脳への埋め込み方法＞ペントバルビタール麻酔
後のウサギ（２.５〜３.０ｋｇ）をうつ伏せに固定し、
切開により後頭骨膜（硬膜）を暴露し、後頭骨をドリル
で削り、硬膜を更に広く暴露した。その後、硬膜、クモ
膜を８ｍｍ程度切開して、２５匹のウサギに実施例２の
徐放性製剤の錠剤を埋め込み、硬膜、筋肉、皮膚を縫合
し、抗生物質を切開部位に適量投与した。また、錠剤を
埋め込まないウサギを別に５匹用意した。

【００７２】上記の錠剤を埋め込んだウサギを用いて下
記採取方法にて、錠剤埋め込み後１日目（day１）、２
日目（day２）、３日目（day３）、４日目（day４）、
５日目（day５）に、それぞれの日につき各々ウサギ５
匹より、脳脊髄液（ＣＳＦ）を採取し、下記測定方法に
て脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＣＧＲＰ濃度（ｎＭ）を測定
した。また、錠剤を埋め込んでいないウサギ（Normal）
５匹についても、脳脊髄液（ＣＳＦ）を採取し、同様に
ＣＧＲＰ濃度を測定した。

【００７３】＜ウサギ脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＣＧＲＰ
濃度測定法＞ １．脳脊髄液（ＣＳＦ）採取日にペントバルビタール
（５０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔をかけた。

【００７４】２．麻酔後、あおむけにして気管を暴露し
挿管チューブを気管内に固定した。 ３．そのままの状態でアゴの下より血管に注意しながら
脳幹部に向かつて切開を進めた。

【００７５】４．硬膜に達したところで注意深く切開を
し、クモ膜を暴露した。

【００７６】５．血液が混入しないように２２Ｇの針を
クモ膜下腔内に刺し、脳底動脈付近の脳脊髄液（ＣＳ
Ｆ）を吸引し、採取した。

【００７７】６．採取後、即座に−２０℃で凍結し保存
した。

【００７８】７．保存サンプルを溶解後、実施例１０に
記載のラジオイムノアッセイと同様の方法にて、錠剤を
埋め込んでいないウサギ（Normal）をコントロールとし
てＣＧＲＰ濃度（ｎＭ）を測定した。

【００７９】［実施例２１］ 徐放性製剤（錠剤）の消
失効果試験（Ｉ） 実施例２に得た錠剤を用いて、以下に示す方法にて脳内
における徐放性製剤（錠剤）の消失効果に関する in vi
vo テストを行つた。尚、この試験においては、ウサギ
を１８匹（１日目、２日目、３日目、４日目、５日目、
１０日目、１ケ月目、３ケ月目、６ケ月目用として各々
２匹ずつ）用いた。結果を以下に示す。 ［試験方法］ ＜錠剤の脳への埋め込み方法＞ペントバルビタール麻酔
後のウサギ（２.５〜３.０ｋｇ）をうつ伏せに固定し、
切開により後頭骨膜（硬膜）を暴露し、後頭骨をドリル
で削り、硬膜を更に広く暴露した。その後、硬膜、クモ
膜を８ｍｍ程度切開して、１８匹のウサギに実施例２の
徐放性製剤の錠剤を埋め込み、硬膜、筋肉、皮膚を縫合
し、抗生物質を切開部位に適量投与した。

【００８０】＜測定方法及び評価基準＞上記ウサギを錠
剤埋め込み後１日目、２日目、３日目、４日目、５日
目、１０日目、１ケ月目、３ケ月目、６ケ月目に、それ
ぞれの日につき各々ウサギ２匹を、開頭手術により錠剤
を埋め込んだ位置を暴露し目視による観察を行つた。
尚、評価基準は以下の基準に従つた。

【００８１】− ：ほとんど消失していない。

【００８２】＋ ：錠剤の半分位が消失している。

【００８３】＋＋ ：錠剤のほとんどが消失している。

【００８４】＋＋＋：完全に錠剤が消失している。

【００８５】 ＜試験結果＞ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 錠剤を埋め込んだ日からの日数 錠剤の消失の評価 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ １日目 − ２日目 − ３日目 −〜＋ ４日目 ＋ ５日目 ＋ １０日目 ＋ １ケ月目 ＋＋ ３ケ月目 ＋＋＋ ６ケ月目 ＋＋＋ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ この徐放性製剤（錠剤）の消失効果試験を行つていた期
間に死亡したウサギは１匹も無かつた。

【００８６】

【発明の効果】本発明にかかるセルロース骨格を有する
水溶性高分子、油脂又はろう類、脂肪酸を有する担体に
生理活性物質を配合せしめた徐放性製剤、特に更に糖類
を加えた製剤は製造が容易で、放出開始時間と放出期間
が調整できる優れた徐放活性を有する。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１の製剤のＣＧＲＰの経時的検出％を示
す図である。

【図２】実施例２の製剤のＣＧＲＰの経時的検出％を示
す図である。

【図３】実施例４の製剤のＣＧＲＰの経時的検出％を示
す図である。

【図４】実施例２の製剤のＣＧＲＰの経時的検出ｎＭを
示す図である。

【図５】実施例８の製剤のＣＧＲＰの経時的血管拡張効
果％を示す図である。

【図６】実施例９の製剤のＣＧＲＰの経時的血管拡張効
果％を示す図である。

【図７】比較例１のＣＧＲＰ水溶液の経時的検出濃度ｎ
Ｍを示す図である。

【図８】比較例１のＣＧＲＰの水溶液の経時的血管拡張
効果％を示す図である。

【図９】実施例１２の製剤のＧＳＩＬ修飾型マキサディ
ランの経時的検出％を示す図である。

【図１０】実施例１３の製剤のＧＳＩＬ修飾型マキサデ
ィランの経時的検出％を示す図である。

【図１１】実施例１４の製剤のＧＳＩＬ修飾型マキサデ
ィランの経時的検出％を示す図である。

【図１２】実施例１３の製剤のＧＳＩＬ修飾型マキサデ
ィランの経時的血管拡張効果％を示す図である。

【図１３】実施例２０における、ＣＧＲＰ製剤を大槽内
に埋め込んだ後のＣＳＦ中におけるヒトα−ＣＧＲＰ濃
度の経時的変化を示すグラフである。矢印はＣＧＲＰ製
剤の埋め込み時を表わす。グラフ中ｎ ｍｏｌ／Ｌとし
て表示する平均値は各測定点でのｎ＝５に基づく。縦線
は標準偏差を表わす。０日目（day ０）に対する統計的
有意差は＃で示している（＃：Ｐ＜０.０５；＃＃：Ｐ
＜０.０１）。

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 セルロース骨格を有する水溶性高分子、
   油脂又はろう類と脂肪酸を含む担体に生理活性物質を含
   有させたことを特徴とする徐放性製剤。
2. 【請求項２】 糖類を加えてなる請求項１に記載の徐放
   性製剤。
3. 【請求項３】 生理活性物質が生理活性ペプチドである
   請求項１ないし２のいずれか１項に記載の徐放性製剤。
4. 【請求項４】 生理活性ペプチドがカルシトニン遺伝子
   関連ペプチドである請求項３に記載の徐放性製剤。
5. 【請求項５】 生理活性ペプチドがマキサディランであ
   る請求項３に記載の徐放性製剤。
6. 【請求項６】 マキサディランが天然型マキサディラン
   である請求項５に記載の徐放性製剤。
7. 【請求項７】 マキサディランが修飾型マキサディラン
   である請求項５に記載の徐放性製剤。
8. 【請求項８】 セルロース骨格を有する水溶性高分子が
   ヒドロキシプロピルセルロースである請求項１ないし７
   のいずれか１項に記載の徐放性製剤。
9. 【請求項９】 油脂が硬化油である請求項１ないし８の
   いずれか１項に記載の徐放性製剤。
10. 【請求項１０】 脂肪酸がステアリン酸である請求項１
    ないし９のいずれか１項に記載の徐放性製剤。
11. 【請求項１１】 糖類がラクトースである請求項２ない
    し１０のいずれか１項に記載の徐放性製剤。