JPH07236478A - マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼとその製造方法並びに用途 - Google Patents

マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼとその製造方法並びに用途

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JPH07236478A
JPH07236478A JP6054371A JP5437194A JPH07236478A JP H07236478 A JPH07236478 A JP H07236478A JP 6054371 A JP6054371 A JP 6054371A JP 5437194 A JP5437194 A JP 5437194A JP H07236478 A JPH07236478 A JP H07236478A
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 澱粉から多量のマルトヘキサオース及びマル
トヘプタオースを生成する新規アミラーゼとその製造方
法並びに用途を提供する。 【構成】 本発明は、澱粉から主としてマルトヘキサオ
ース及びマルトヘプタオースを生成する作用を有し、か
つ、マルトヘキサオース以下の低分子オリゴ糖には実質
的に分解作用を有さないことを特徴とする微生物由来の
マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラー
ゼ、それを産生する微生物、この微生物からの該アミラ
ーゼの製造、澱粉質に該アミラーゼを作用させて得られ
る糖質並びにこの糖質を含有せしめた組成物を主な構成
とする。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規マルトヘキサオー
ス・マルトヘプタオース生成アミラーゼとその製造方法
並びに用途に関し、更に詳細には、澱粉から主にマルト
ヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成するマルト
ヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼとそ
の製造方法、それを産生する微生物、並びに、このマル
トヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼを
用いて製造されるマルトヘキサオース及び／又はマルト
ヘプタオース含有糖質、又は、これを水素添加して得ら
れるマルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイト
ール含有糖質、更には、これらを含有せしめた組成物に
関する。
【０００２】
【従来の技術】澱粉に特定のアミラーゼを作用させるこ
とによって、マルトース、マルトテトラオースなどの特
定のマルトオリゴ糖を特異的に生成せしめる方法は、工
業的規模で実施されており、食品、医薬品などの組成物
に広く利用されている。
【０００３】近年、マルトオリゴ糖の中でも比較的分子
量の高い糖質が低甘味で消化吸収され易いという理由か
ら、マルトヘキサオース、マルトヘプタオースなどのマ
ルトオリゴ糖を多量に含む糖質が望まれている。
【０００４】澱粉からマルトヘキサオースを多く生成す
るアミラーゼとしては、微生物起源の酵素がいくつか知
られているが、マルトヘプタオース以上のマルトオリゴ
糖を特異的に生成するアミラーゼは知られていない。
【０００５】澱粉から主にマルトヘキサオースを生成す
るアミラーゼは、その作用性から大きくふたつに分類さ
れ、ひとつは、澱粉糖鎖の非還元性末端から順次マルト
ヘキサオースを切り出していくエキソ型のマルトヘキサ
オース生成アミラーゼ、すなわちマルトヘキサオヒドロ
ラーゼ（ＥＣ３．２．１．９８）、もうひとつは、澱粉
糖鎖の内部にも作用して、マルトヘキサオースを比較的
多く生成するエンド型マルトヘキサオース生成アミラー
ゼ、いわゆるエンド型α−アミラーゼ（ＥＣ３．２．
１．１）である。
【０００６】エキソ型マルトヘキサオースアミラーゼに
ついては、貝沼等が、『フェブス・レターズ（ＦＥＢＳ
Ｌｅｔｔｅｒｓ）』、第２６巻、第２８１乃至２８５
頁（１９７２年）に、アエロバクター アエロゲネス
（Ａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）が菌体
内に産生することを報告しているが、この酵素は至適温
度、安定温度が低く、工業的に利用する上で耐熱性が不
十分である。
【０００７】エンド型マルトヘキサオース生成アミラー
ゼについては、ゼイ・エフ・ケネディ（Ｊ．Ｆ．Ｋｅｎ
ｎｅｄｙ）等が、『スターチ（Ｓｔａｒｃｈ）』、第３
１巻、第２３５乃至２４１頁（１９７９年）に、バチラ
ス サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｕｔｉｌｉ
ｓ）が産生することを報告し、また、高崎が、『アグリ
カルチュラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー
（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉ
ｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）』、第４６巻、第１５３
９乃至１５４７頁（１９８２年）に、バチラス サーキ
ュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）Ｇ
−６が産生することを報告し、また、谷口等が、『澱粉
科学』、第２９巻、第１０７乃至１１６頁（１９８２
年）に、バチラス サーキュランス Ｆ−２が産生する
ことを報告し、更に、林等が、『アグリカルチュラル・
アンド・バイオロジカル・ケミストリー』、第５２巻、
第４４３乃至４４８頁（１９８８年）に、バチラス・ス
ピーシーズ Ｈ−１６７が産生することを報告してい
る。これらのうち、バチラス サーキュランス Ｇ−
６、バチラス サーキュランス Ｆ−２、及びバチラス
・スピーシーズ Ｈ−１６７由来のアミラーゼは、澱粉
からマルトヘキサオースを最大約２５乃至３０ｗ／ｗ％
（以下、本明細書では、特にことわらない限り、ｗ／ｗ
％を％と略称する。）生成するが、マルトヘプタオース
を全く生成せず、しかも、反応が進むにつれ、生成した
マルトヘキサオースをマルトース及びマルトテトラオー
スに分解することが知られている。
【０００８】一方、バチラス サブチリス由来のアミラ
ーゼは、生成したマルトヘキサオースの分解を示さない
ものの、澱粉からのマルトヘキサオースの生成率は最大
でも約２５％止まりである。更には、これら微生物由来
の酵素は、実際、澱粉の糖化条件においてマルトヘキサ
オース含量はあまり高くならず低分子オリゴ糖が多くな
ることに加えて、微生物からの産生量が低いことなどの
理由から、現実に、これら微生物の産生するアミラーゼ
を用いたマルトヘキサオース高含有糖質の工業的製造は
行われていない。
【０００９】一方、麦芽から調製された精製α−アミラ
ーゼは、澱粉への作用において、反応初期には主にマル
トヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成すること
が、『アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカル・
ケミストリー』、第４２巻、第２５９乃至２６７頁（１
９７８年）に記載されている。しかしながら、その反応
が進むにつれ、マルトヘキサオース及びマルトヘプタオ
ースはさらにマルトース、マルトテトラオースなどの低
分子オリゴ糖にほぼ完全に分解されることも同時に記載
されており、したがって、澱粉から主としてマルトヘキ
サオース及びマルトヘプタオースを含有する糖化物を製
造することはできなかった。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、澱粉からマ
ルトヘキサオース及びマルトヘプタオースを高含量に生
成し、生成したマルトヘキサオース及びマルトヘプタオ
ースをほとんど分解しないアミラーゼと該アミラーゼを
利用したマルトヘキサオース及び／又はマルトヘプタオ
ース含有糖質の製造方法並びにその用途を提供すること
である。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記課題
を解決するために澱粉からマルトヘキサオース及びマル
トヘプタオースを生成する新規なアミラーゼを求めて、
その酵素を産生する微生物を広く検索した。その結果、
山梨県駒ヶ岳付近の土壌から分離したアルカリゲネス
（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属に属する新規微生物アル
カリゲネス ラタス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｌａｔ
ｕｓ）Ｄ２２７１が澱粉からマルトヘキサオース及びマ
ルトヘプタオースを高含量に生成する新規アミラーゼ
（本明細書では、本アミラーゼを「マルトヘキサオース
・マルトヘプタオース生成アミラーゼ」と略称すること
がある。）を産生することを見いだし、本酵素を澱粉質
に作用させ得られるマルトヘキサオース及び／又はマル
トヘプタオース含有糖質の製造方法を確立し、併せて、
これら糖質を含有せしめた飲食物、化粧品、医薬品、成
形物などの組成物を確立して本発明を完成した。
【００１２】以下、本発明の新規微生物アルカリゲネス
ラタス Ｄ２２７１の同定試験結果を示す。なお、同
定試験は、『微生物の分類と同定』（長谷川武治編、学
会出版センター、１９８５年）に準拠して行った。
【００１３】
【Ａ 細胞形態】
（１）ポテト・デキストロース寒天培養、２７℃：０．
７乃至１．３×１．３乃至２．４μｍの桿菌。単独、希
に対をなし、連鎖した細胞も観察される。周鞭毛による
運動性あり。無胞子。非抗酸性。グラム陰性。ポリ−β
−ヒドロキシブチレートを蓄積する。 （２）酵母エキス・麦芽エキス寒天培養、３７℃：培養
１日の細胞の大きさは、０．５乃至１．０×１．３乃至
２．４μｍ、培養３日で０．５乃至１．０×１．０乃至
２．５μｍ。単独。
【００１４】
【Ｂ 培養的性質】
（１）ポテト・デキストロース寒天平板培養、３７℃ 形状 ：円形 大きさは１日で約１ｍ
ｍ。４日で３乃至４ｍｍ。 周縁 ：全縁 隆起 ：臍状 光沢 ：鈍光 表面 ：しわ状 色調 ：不透明、白〜黄土色 （２）酵母エキス・麦芽エキス寒天平板培養、３７℃ 形状 ：円形 大きさは４日で約３乃
至５ｍｍ 周縁 ：全縁 隆起 ：半レンズ状 光沢 ：湿光 表面 ：平滑 色調 ：白〜クリーム色 （３）ポテト・デキストロース寒天斜面培養、３７℃ 生育度 ：良好 形状 ：糸状 （４）酵母エキス・麦芽エキスゼラチン穿刺培養、３７
℃：液化
【００１５】
【Ｃ 生理学的性質】
（１）硝酸塩の還元性 ：陽性（コハク酸培地） （２）脱窒反応 ：陰性 （３）メチルレッド試験 ：陰性 （４）ＶＰ試験 ：陰性 （５）インドールの生成 ：陰性 （６）硫化水素の生成 ：陰性 （７）澱粉の加水分解 ：陽性 （８）クエン酸の利用 ：陰性 （９）無機窒素源の利用 ：アンモニウム塩及び硝
酸塩ともに利用できる。 （１０）色素の生成 ：陰性 （１１）ウレアーゼ ：陽性 （１２）オキシダーゼ ：陽性 （１３）カタラーゼ ：陽性 （１４）生育の範囲 ：ｐＨ５乃至８、温度
１０乃至４１℃。 （１５）酸素に対する態度 ：好気性 （１６）炭素源の利用と酸生成の有無 利用性 酸生成能 Ｄ−グルコース 利用する 陰性 Ｄ−ガラクトース 利用する 陰性 Ｄ−マンノース 利用する 陰性 Ｄ−フラクトース 利用する 陰性 Ｌ−アラビノース 利用する 陰性 Ｄ−キシロース 利用する 陰性 Ｌ−ラムノース 利用する 陰性 マルトース 利用する 陰性 スクロース 利用する 陰性 ラクトース 利用する 陰性 トレハロース 利用する 陰性 ラフィノース 利用する 陰性 マンニトール 利用しない 陰性 デキストリン 利用する 陰性 ズルチトール 利用しない 陰性 （１７）アミノ酸の脱炭酸試験 ：Ｌ−リジン、Ｌ−ア
ルギニン、オルニチン、いずれに対しても陰性。 （１８）ＤＮａｓｅ ：陰性 （１９）３−ケトラクトースの生成：陰性 （２０）ＤＮＡのＧ−Ｃ含量 ：６７％
【００１６】以上の菌学的性質に基づいて、『バージー
ズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオ
ロジー 第１巻（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏ
ｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ
Ｖｏｌｕｍｅ １）』、（１９８４年）を参考にして公
知菌との異同を検討した。その結果、本菌は、アルカリ
ゲネス ラタスに属する菌株であることが判明した
【００１７】これらの結果から、本発明者等は、本微生
物をアルカリゲネス ラタス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ
ｌａｔｕｓ）Ｄ２２７１と命名し、平成６年２月２３
日付けで、茨城県つくば市東１丁目１番３号にある通商
産業省工業技術院生命工学工業技術研究所、特許微生物
寄託センターに寄託し、『受託番号、ＦＥＲＭ ＢＰ−
４５７８』として受託された。
【００１８】本発明では、上記菌のみならずアルカリゲ
ネス ラタスに属し、マルトヘキサオース・マルトヘプ
タオース生成アミラーゼ産生能を有する他の菌株やこれ
らの変異株なども使用することができる。
【００１９】本発明の微生物の培養に用いる培地は、本
微生物が生育でき、本発明の酵素を産生するものであれ
ばよく、合成培地及び天然培地のいずれでもよい。炭素
源としては、本菌株が資化できる物であればよく、例え
ば、マルトース、デキストリン、澱粉などの糖類、糖
蜜、及び酵母エキスなどの糖含有物などの天然物なども
使用することができる。培地におけるこれらの炭素源の
濃度は炭素源の種類により適宜選択される。例えば、培
養液の澱粉の濃度は、２０重量％以下が望ましく、菌の
生育及び増殖からは、通常、５％以下が好ましい。窒素
源としては、例えば、アンモニウム塩、硝酸塩などの無
機窒素化合物及び、例えば、尿素、コーン・スティープ
・リカー、カゼイン、ペプトン、酵母エキス、肉エキス
などの有機窒素含有物が用いられる。また、無機成分と
しては、例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリ
ウム塩、ナトリウム塩、リン酸塩、マンガン塩、亜鉛
塩、鉄塩、銅塩、モリブデン塩、コバルト塩などが必要
に応じて適宜用いられる。
【００２０】培養は、通常、温度１０乃至４０℃、好ま
しくは２５乃至３７℃、ｐＨ５乃至８、好ましくはｐＨ
６乃至７．５から選ばれる条件で、好気的に行われる。
培養時間は本微生物が増殖し得る時間であればよく、好
ましくは１０乃至１００時間である。また、培養液の溶
存酸素濃度には特に制限はないが、通常は、０．５乃至
２０ｐｐｍが好ましい。そのために、通気量を調節した
り、攪拌したり、酸素を使用したり、また、培養槽内の
圧力を高めるなどの手段が採用される。また、培養方式
は、回分培養又は連続培養のいずれでもよい。
【００２１】このようにして、微生物を培養した後、得
られる培養物から本発明の酵素を採取する。本酵素活性
は、培養物の菌体外培養液に認められ、菌体外培養液を
粗酵素として採取すればよく、また、培養物全体を粗酵
素として用いることもできる。菌体外培養液と菌体との
分離には通常の固液分離手段が採用される。例えば、培
養物そのものをそのまま遠心分離する手段、培養物に濾
過助剤を加えたり、あるいは、プレコートすることによ
り濾過分離する手段、平膜、中空糸膜などを用いる膜濾
過分離する手段などを適用し得る。菌体外培養液をその
まま粗酵素液として用いることもできるが、好ましくは
通常の手段で濃縮する。例えば、硫安塩析法、アセトン
及びアルコール沈殿法、平膜、中空糸膜などを用いる膜
濃縮法などが採用される。
【００２２】更に、菌体外培養液及びその濃縮物は、通
常の手段で固定化することもできる。例えば、イオン交
換体への結合法、樹脂及び膜などとの共有結合・吸着
法、高分子物質を用いた包括法などが採用される。
【００２３】粗酵素はそのまま用いてもよいが、通常の
手段によって精製することもできる。一例として、菌体
外培養液を硫安塩析して濃縮した粗酵素標品を透析後、
ＤＥＡＥ−トヨパール樹脂を用いた陰イオン交換カラム
クロマトグラフィー、続いて、ブチルトヨパール樹脂を
用いた疎水カラムクロマトグラフィー、フェニル スー
パーローズ ＨＲ５／５樹脂を用いた疎水カラムクロマ
トグラフィーにて電気泳動的に単一な酵素を得ることが
できる。
【００２４】このようにして得られる本発明のマルトヘ
キサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼは、下
記の理化学的性質を有する。 （１） 作用 澱粉に作用して、主としてマルトヘキサオース、マルト
ヘプタオースを生成する。マルトヘキサオース以下の低
分子オリゴ糖を実質的に分解せず、マルトヘプタオース
にも作用しにくい。 （２） 分子量 ＳＤＳ−ゲル電気泳動法で、４３，０００±３，０００
ダルトン （３） 等電点 アンフォライン含有電気泳動法で、７．６±０．５ （４） 至適ｐＨ 約５．０（カルシウムイオン存在下） （５） 至適温度 ７０℃付近（カルシウムイオン存在下） （６） ｐＨ安定性 約４．５乃至１０．５（カルシウムイオン存在下） （７） 温度安定性 ６０℃付近まで安定（カルシウムイオン存在下） （８） 活性促進、安定化 カルシウムイオンによって活性促進及び安定化される。 （９） 阻害 銅イオン、鉛イオン、亜鉛イオン、水銀イオン、又はＥ
ＤＴＡで阻害を受ける。
【００２５】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプ
タオース生成アミラーゼの活性は次のようにして測定す
る。基質として可溶性澱粉０．３ｗ／ｖ％（２０ｍＭ酢
酸緩衝液、ｐＨ５．５、１ｍＭＣａＣｌ2を含む）５ｍ
ｌに酵素液０．２ｍｌを加え、４０℃で１０分間反応さ
せた後、反応液０．５ｍｌを０．０２Ｎ硫酸水溶液１５
ｍｌに加えて反応を停止させる。この反応停止液に０．
１Ｎヨウ素溶液０．２ｍｌを添加、攪拌し、２５℃に１
５分放置した後、６６０ｎｍにおける吸光度を測定す
る。酵素活性１単位は、４０℃、１０分の反応で可溶性
澱粉１５ｍｇのヨウ素呈色を完全に消失させる酵素量と
する。
【００２６】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプ
タオース生成アミラーゼを利用してマルトヘキサオース
及び／又はマルトヘプタオース含有糖質を製造するに際
しては、工業的には、澱粉、アミロペクチン、アミロー
ス、澱粉加水分解物などの澱粉質を基質として反応させ
るのが好ましい。
【００２７】また、必要ならば、澱粉質含有飲食物の製
造に際して、マルトヘキサオース・マルトヘプタオース
生成アミラーゼを作用させ、飲食物にマルトヘキサオー
ス及び／又はマルトヘプタオースを含有せしめ、澱粉質
の老化を防止し、飲食物の日持ちを延長することもでき
る。
【００２８】一般的には、５乃至４５％程度の澱粉質溶
液に、望ましくは、これに塩化カルシウムなどのカルシ
ウム塩を濃度０．５乃至５０ｍＭ程度共存させた溶液
に、本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプタオース
生成アミラーゼを澱粉質グラム当たり約０．５乃至２０
単位の割合で加え、ｐＨ３乃至８、反応温度４０乃至９
０℃で１乃至１００時間反応させる。
【００２９】また、反応物中のマルトヘキサオース及び
マルトヘプタオース含量をできるだけ高めるためには、
澱粉質の酸又はα−アミラーゼによる液化の程度をでき
るだけ低く、ＤＥ１０未満、好ましくはＤＥ５未満にと
どめたものに、マルトヘキサオース・マルトヘプタオー
ス生成アミラーゼを作用させるのが好ましい。
【００３０】また、反応に際して、マルトヘキサオース
・マルトヘプタオース生成アミラーゼとともに、他の澱
粉質関連酵素、例えば、シクロマルトデキストリングル
カノトランスフェラーゼ（ＥＣ２．４．１．１９）、α
−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）、β−アミラーゼ
（ＥＣ３．２．１．２）、グルコアミラーゼ（ＥＣ３．
２．１．３）、α−グルコシダーゼ（ＥＣ３．２．１．
２０）、プルラナーゼ（ＥＣ３．２．１．４１）、イソ
アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．６８）、マルトテトラオ
ース生成アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．６０）などを併
用して、得られるマルトヘキサオース及びマルトヘプタ
オース含有糖質の組成を変えたり、マルトヘキサオース
及びマルトヘプタオース含量を高めたりすることも随意
である。
【００３１】とりわけ、澱粉質にマルトヘキサオース・
マルトヘプタオース生成アミラーゼとプルラナーゼ、イ
ソアミラーゼなどの澱粉枝切酵素とを併用してマルトヘ
キサオース及びマルトヘプタオース生成率を高めること
は有利に実施できる。このようにして得られるマルトヘ
キサオース及びマルトヘプタオースの合計含量が固形物
当たり３０乃至５０％程度のマルトヘキサオース及びマ
ルトヘプタオース含有糖質を原料として、夾雑する糖
類、デキストリンなどを分離し、マルトヘキサオース及
び／又はマルトヘプタオースを採取することも有利に実
施できる。
【００３２】分離法としては、例えば、特開昭４８−４
６４７号公報に記載される半透膜の利用、特開昭４９−
１０２８５４号公報に記載される有機沈澱剤の利用、特
開昭５９−１４８７９４号公報に記載される塩型強酸性
カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーの
利用などが適宜選択され、必要ならば、純度９０％以上
のマルトヘキサオース高含有糖質、又は、マルトヘプタ
オース高含有糖質を採取することも可能である。とりわ
け、塩型強酸性カチオン交換樹脂を用いる方法により、
夾雑糖質を分離除去して、マルトヘキサオース高含有液
及び／又はマルトヘプタオース高含有液を採取する方法
は、工業的規模で有利に実施することができる。この
際、公知の固定床方式、移動床方式、疑似移動床方式の
いずれを採用することも随意である。
【００３３】酵素反応液又は夾雑糖質を分離した液は、
常法により、瀘過、遠心分離などして不溶物を除去した
後、活性炭による脱色、Ｈ型、ＯＨ型イオン交換樹脂に
よる脱塩などの精製工程を経た後、濃縮し、シラップ状
製品にする。必要ならば、更に、噴霧乾燥などの方法で
乾燥して粉末状製品にすることも随意である。
【００３４】このようにして得られる本発明のマルトヘ
キサオース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質は、
通常、マルトヘキサオース及び／又はマルトヘプタオー
スを固形物当たり３０％以上、更には４０％以上含有し
ており、この粉末品は、その含量の程度によっても多少
変動するものの、実質的に難吸湿性であり、固結せず、
流動性良好であるので取扱い容易であり、その包装、輸
送、貯蔵などの管理に要する物的、人的経費が大幅に削
減できる。
【００３５】また、この粉末品は、実質的に難吸湿性粉
末で、耐熱性が高く、安定性も良いので、従来きわめて
困難とされていた粉末混合甘味料、即席ジュース、即席
スープ、顆粒、錠剤などの賦形剤、増量剤、粉末基剤な
どとして、更には、小麦粉、コーングリッツ、澱粉など
粉類の一部又は全量に置き換えて、例えば、プリンミッ
クス、ホットケーキミックス、製菓材料、製パン材料、
シリアル材料などに利用することも有利に実施できる。
更に、マルトヘキサオース及び／又はマルトヘプタオー
ス含有糖質を還元して、化学的により安定なマルトヘキ
サイトール及び／又はマルトヘプタイトール含有糖質を
製造する事も有利に実施できる。
【００３６】例えば、マルトヘキサオース及びマルトヘ
プタオース含有糖質を、濃度約４０乃至６０％水溶液に
し、オートクレーブに入れ、触媒としてラネーニッケル
を約８乃至１０％添加し、攪拌しながら温度を９０乃至
１４０℃に上げ、水素圧を２０乃至１５０ｋｇ／ｃｍ2
に上げて水素添加を完了させた後、ラネーニッケルを除
去し、次いで、マルトヘキサオース及びマルトヘプタオ
ース含有糖質製造の場合と同様に、脱色、脱塩して精製
し、濃縮してシラップ状製品とするか、更に噴霧乾燥な
どにより乾燥して粉末状製品とする。
【００３７】このようにして得られるマルトヘキサイト
ール及びマルトヘプタイトール含有糖質には、通常、マ
ルトヘキサイトール及びマルトヘプタイトールを固形物
当たり３０％以上含有する。このようにして得られるマ
ルトヘキサイトール及びマルトヘプタイトール含有糖質
を原料として、マルトヘキサオース及びマルトヘプタオ
ースの場合と同様に、分画法などにより、夾雑糖質を分
離し、更に高純度のマルトヘキサイトール及び／又はマ
ルトヘプタイトールを採取することも有利に実施でき
る。
【００３８】以上述べた方法で製造されるマルトヘキサ
オース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質又はマル
トヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイトール含有
糖質は、低甘味の甘味剤として、また、ホディー付与
剤、粘度調節剤、保湿剤、照付与剤、保香剤、結晶防止
剤、キャンディーのダレ防止剤、澱粉老化防止剤などと
して、さらには、栄養補給用剤として広く飲食物、嗜好
物、飼料、化粧品、医薬品、成形物など、更には、生活
用品、農林水産用品、試薬、化学工業用品などの各種組
成物に有利に利用される。
【００３９】マルトヘキサオース及び／又はマルトヘプ
タオース含有糖質又はマルトヘキサイトール及び／又は
マルトヘプタイトール含有糖質は、低甘味ながら、その
まま甘味付けのための調味料として使用することができ
るが、必要ならば、例えば、粉飴、ブドウ糖、マルトー
ス、蔗糖、異性化糖、蜂蜜、メイプルシュガー、ソルビ
トール、マルチトール、ラクチトール、ジヒドロカルコ
ン、ステビオシド、α−グリコシルステビオシド、レバ
ウディオシド、グリチルリチン、Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニンメチルエステル、サッカリン、グリ
シン、アラニンなどのような他の甘味料の一種又は二種
以上の適量と混合して使用してもよく、また必要なら
ば、デキストリン、澱粉、乳糖などと混合して使用する
こともできる。
【００４０】また、マルトヘキサオース及び／又はマル
トヘプタオース含有糖質又はマルトヘキサイトール及び
／又はマルトヘプタイトール含有糖質の呈味は、酸味、
塩から味、渋味、旨味、苦味などの他の呈味を有する各
種物質とよく調和し、耐酸性、耐熱性も大きいので、一
般の飲食物の甘味付け、呈味改良に、また品質改良など
に有利に利用できる。
【００４１】例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味
噌、もろみ、ひしお、ふりかけ、マヨネーズ、ドレッシ
ング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素、天つゆ、
麺つゆ、ソース、ケチャップ、たくあん漬の素、白菜漬
の素、焼肉のタレ、カレールウ、シチューの素、スープ
の素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テー
ブルシュガー、コーヒーシュガーなど各種調味料として
有利に使用できる。また、例えば、せんべい、あられ、
おこし、餅類、まんじゅう、ういろう、あん類、羊羮、
水羊羮、錦玉、ゼリー、カステラ、飴玉などの各種和菓
子、パン、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、
プリン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュー
クリーム、ワッフル、スポンジケーキ、ドーナツ、チョ
コレート、チューインガム、キャラメル、キャンデーな
どの洋菓子、アイスクリーム、シャーベット、などの氷
菓、果実のシロップ漬、氷蜜などのシロップ類、フラワ
ーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト、
スプレッドなどのペースト類、ジャム、マーマレード、
シロップ漬、糖果などの果実、野菜の加工食品類、福神
漬、べったら漬、千枚漬、らっきょう漬などの漬物類、
ハム、ソーセージなどの畜肉製品類、魚肉ハム、魚肉ソ
ーセージ、かまぼこ、ちくわ、天ぷらなどの魚肉製品、
ウニ、イカの塩辛、酢こんぶ、さきするめ、ふぐみりん
干しなどの各種珍味類、のり、山菜、するめ、小魚、貝
などで製造されるつくだ煮類、煮豆、ポテトサラダ、こ
んぶ巻などの惣菜食品、乳製品、魚肉、畜肉、果実、野
菜のビン詰、缶詰類、清酒、合成酒、リキュール、洋酒
などの酒類、紅茶、コーヒー、ココア、ジュース、炭酸
飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料などの清涼飲料水、プリン
ミックス、ホットケーキミックス、即席しるこ、即席ス
ープなどの即席食品、更には、離乳食、治療食、ドリン
ク剤などの各種飲食物への甘味付けに、呈味改良に、ま
た、物性改良などに有利に利用できる。
【００４２】また、家畜、家禽、魚などの飼育動物のた
めに飼料、餌料などの嗜好性を向上させる目的で使用す
ることもできる。その他、タバコ、練歯磨、口紅、リッ
プクリーム、内服液、錠剤、トローチ、肝油ドロップ、
口中清涼剤、口中香剤、うがい剤など各種固形物、ペー
スト状、液状などで嗜好物、化粧品、医薬品などの各種
組成物への甘味剤として、又は呈味改良剤、矯味剤とし
て、更には、品質改良剤として有利に利用できる。
【００４３】品質改良剤、安定剤としては、有効成分、
活性などを失い易い各種生理活性物質又はこれを含む健
康食品、医薬品などに有利に適応できる。例えば、イン
ターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフ
ェロン−γ、ツモア・ネクロシス・ファクター−α、ツ
モア・ネクロシス・ファクター−β、マクロファージ遊
走阻止因子、コロニー刺激因子、トランスファーファク
ター、インターロイキン２などのリンホカイン含有液、
インシュリン、成長ホルモン、プロラクチン、エリトロ
ポエチン、卵細胞刺激ホルモン、胎盤ホルモンなどのホ
ルモン含有液、ＢＣＧワクチン、日本脳炎ワクチン、は
しかワクチン、ポリオ生ワクチン、痘苗、破傷風トキソ
イド、ハブ抗毒素、ヒト免疫グロブリンなどの生物製剤
含有液、ペニシリン、エリスロマイシン、クロラムフェ
ニコール、テトラサイクリン、ストレプトマイシン、硫
酸カナマイシンなどの抗生物質含有液、チアミン、リボ
フラビン、Ｌ−アスコルビン酸、肝油、カロチノイド、
エルゴステロール、トコフェロール、などのビタミン含
有液、リパーゼ、エステラーゼ、ウロキナーゼ、プロテ
アーゼ、β−アミラーゼ、イソアミラーゼ、グルカナー
ゼ、ラクターゼなどの酵素含有液、薬用人参エキス、ス
ッポンエキス、クロレラエキス、アロエエキス、プロポ
リスエキスなどのエキス類、ウイルス、乳酸菌、酵母な
どの生菌、ロイヤルゼリーなどの各種生理活性物質も、
その有効成分、活性を失うことなく、安定で高品質の健
康食品や医薬品などを容易に製造できる。
【００４４】以上述べたように、本発明でいう組成物
は、経口的又は非経口的に利用する飲食物、化粧品、医
薬品のみならず、それ以外にも、例えば、生活用品、農
林水産用品、試薬、化学工業用品など広範な用途を有す
る。
【００４５】また、これら組成物に、本発明のマルトヘ
キサオース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質又は
マルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイトール
含有糖質を含有せしめる方法は、その製品が完成するま
での工程で含有せしめればよく、例えば、混和、溶解、
浸漬、浸透、散布、塗布、噴霧、注入、固化などの公知
の方法が適宜選ばれる。その含有せしめる量は、組成物
によっても異なるが、一般的には、マルトヘキサオー
ス、マルトヘプタオース、マルトヘキサイトール又はマ
ルトヘプタイトールとして、０．１％以上、望ましくは
０．５％以上の量が好適である。次に実験により本発明
をさらに具体的に説明する。
【００４６】
【実験１ 酵素の生産】可溶性澱粉２．０ｗ／ｖ％、ペ
プトン０．５ｗ／ｖ％、酵母エキス０．１ｗ／ｖ％、リ
ン酸二カリウム０．１ｗ／ｖ％、リン酸一ナトリウム・
２水塩０．０６ｗ／ｖ％、硫酸マグネシウム・７水塩
０．０５ｗ／ｖ％、炭酸カルシウム０．５ｗ／ｖ％、及
び水からなる液体培地を、５００ｍｌ容三角フラスコに
１００ｍｌずつ入れ、オートクレーブで１２１℃、１５
分間滅菌し、冷却して、アルカリゲネス ラタス Ｄ２
２７１（ＦＥＲＭ ＢＰ−４５７８）を接種し、３７
℃、２００ｒｐｍで２０時間回転振盪培養したものを種
培養とした。
【００４７】容量３０ｌのファーメンターに種培養の場
合と同組成の培地を約２０ｌ入れて、加熱滅菌、冷却し
て温度３７℃とした後、種培養液１ｖ／ｖ％を接種し、
温度３７℃で、約２４時間通気攪拌培養した。培養液約
１９ｌを遠心分離して、培養液上清約１８ｌを得た。培
養液上清のマルトヘキサオース・マルトヘプタオース生
成アミラーゼの活性は、５８単位／ｍｌであった。
【００４８】
【実験２ 酵素の精製】実験１で得た培養液上清をＵＦ
膜濃縮し、マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生
成アミラーゼをｍｌ当たり約１，２００単位有する濃縮
酵素液約８００ｍｌを回収した。得られた濃縮酵素液の
うち３００ｍｌを５ｍＭ塩化カルシウムを含む１０ｍＭ
トリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）に対して２４時間透
析し、遠心分離して不溶物を除いた。その透析液上清
（４００ｍｌ）を、ＤＥＡＥ−トヨパールゲル ６５０
ゲル（東ソー株式会社製）を用いたイオン交換カラムク
ロマトグラフィー（ゲル量１００ｍｌ）を行った。
【００４９】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプ
タオース生成アミラーゼはＤＥＡＥ−トヨパールゲルに
吸着せず、素通り画分にその活性が検出された。酵素活
性画分を回収した後、０．５Ｍ硫安を含む同緩衝液に対
して透析し、その透析液を遠心分離して不溶物を除き、
次に、ブチルトヨパール ６５０ゲル（東ソー株式会社
製）を用いた疎水カラムクロマトグラフィー（ゲル量１
００ｍｌ）を行った。吸着したマルトヘキサオース・マ
ルトヘプタオース生成アミラーゼを硫安０．５Ｍから０
Ｍのリニアグラジエントによりカラムより溶出させ、酵
素活性画分を回収した。続いて、フェニル スーパーロ
ーズ ＨＲ５／５（スウエーデン国、ファルマシア・エ
ルケイビー社製）を用いた疎水カラムクロマトグラフィ
ー（ゲル量１０ｍｌ）を行い、溶出した酵素活性画分を
回収した。
【００５０】以上の精製手段により得られた精製酵素標
品の酵素活性の回収率は、培養液上清のそれに対して約
２５％であった。また、精製酵素標品の比活性は蛋白質
ｍｇ当たり１，８６０単位であった。なお、蛋白質はロ
ーリー法にしたがって牛血清アルブミンを標準にして定
量した。精製した酵素標品を７．５ｗ／ｖ％濃度ポリア
クリルアミドを含むゲル電気泳動により酵素標品の純度
を検定したところ、蛋白バンドは単一で純度の高い標品
であった。
【００５１】
【実験３ 酵素の性質】実験２の方法で得たマルトヘキ
サオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼ標品をＳ
ＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ゲル濃度１
０ｗ／ｖ％）に供し、同時に泳動した分子量マーカー
（日本バイオ・ラドラボラトリーズ株式会社製）と比較
して本酵素の分子量を測定したところ、分子量４３，０
００±３，０００ダルトンであった。精製マルトヘキサ
オース・マルトヘプタオース生成アミラーゼを２ｗ／ｖ
％アンフォライン（スウェーデン国、ファルマシア・エ
ルケイビー社製）含有等電点ポリアクリルアミドゲル電
気泳動法に供し、泳動後、蛋白バンド及びゲルのｐＨを
測定して本酵素の等電点を求めたところ、等電点は７．
６±０．５であった。
【００５２】本酵素活性に及ぼす温度、ｐＨの影響を５
ｍＭ塩化カルシウム存在下で、活性測定方法に準じて調
べた。結果を図１（温度の影響）、図２（ｐＨの影響）
に示した。酵素の至適温度は７０℃付近、至適ｐＨは約
５．０であった。本酵素の熱安定性は、酵素溶液（５ｍ
Ｍ塩化カルシウムを含む２０ｍＭ酢酸緩衝液、ｐＨ６．
０）を各温度に１時間保持し、水冷した後、残存する酵
素活性を測定することにより求めた。また、ｐＨ安定性
は、本酵素を５ｍＭ塩化カルシウムを含む各ｐＨの２０
ｍＭ緩衝液中で４０℃、１時間保持した後、ｐＨを６に
調整し、残存する酵素活性を測定することにより求め
た。それぞれの結果を図３（熱安定性）、図４（ｐＨ安
定性）に示した。本酵素の熱安定性は６０℃付近までで
あり、ｐＨ安定性は約４．５乃至１０．５であった。な
お、カルシウムイオンを酵素液及び基質溶液から除いた
条件では、ほとんど澱粉分解活性を示さず、カルシウム
イオンに対する依存度が顕著に高いアミラーゼであっ
た。また、本酵素活性は、１ｍＭ銅イオン、鉛イオン、
亜鉛イオン、水銀イオン、又は１０ｍＭＥＤＴＡで阻害
された。
【００５３】
【実験４ 澱粉への作用】最終濃度２ｗ／ｖ％の可溶性
澱粉（５ｍＭ塩化カルシウムを含む２０ｍＭ酢酸緩衝
液、ｐＨ５．５）に、温度４０℃にて、実験２の方法で
得た精製マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成
アミラーゼを澱粉グラム当たり５０単位加えて反応さ
せ、経時的に反応液を採取し、１００℃で、１０分間加
熱して酵素を失活させた。この酵素反応液を用いて、加
水分解率、青価、糖組成を分析した。
【００５４】加水分解率は、反応液の全糖量をアントロ
ン硫酸法で、還元糖量をソモギー・ネルソン法でグルコ
ース換算で定量し、全糖量に対する還元糖量の割合とし
て求めた。青価は、反応液０．１ｍｌを０．０５Ｎ硫酸
水溶液１５ｍｌに加え攪拌後、０．１Ｎヨウ素溶液０．
２ｍｌを加えて発色させ、６６０ｎｍにおける吸光度を
ヨウ素呈色度として測定し、０時間のヨウ素呈色度に対
する各時間のヨウ素呈色度の百分率で求めた。
【００５５】また、糖組成は反応液を脱塩処理した後、
高速液体クロマトグラフィー（以下、ＨＰＬＣと略称す
る。）にて分析した。ＨＰＬＣの装置はＣＣＰＤシステ
ム（東ソー株式会社製）、分析カラムはＭＣＩ ＧＥＬ
ＣＫ０４ＳＳ（１０ｍｍφ×２００ｍｍ，三菱化成株
式会社製）、溶離液は水を流速０．２ｍｌ／ｍｉｎで、
検出は示差屈折計で行った。それらの結果を表１、及び
表２に示す。
【００５６】
【表１】
【００５７】
【表２】
【００５８】表１の結果に示されるように、澱粉の加水
分解率の増加に比較して、ヨウ素呈色度の減少が大きい
こと、また、その反応初期から、微量ながらマルトー
ス、マルトトリオースなどの低分子オリゴ糖が確認され
ることからエンド型アミラーゼであり、更に、反応生成
物のアノマー型を旋光度法にて調べた結果、α型であっ
たことから、本発明の澱粉分解酵素は、エンド型のα−
アミラーゼであることが判明した。
【００５９】また、表２の結果から明らかなように、反
応初期からマルトヘキサオース及びマルトヘプタオース
を他のオリゴ糖よりも多く生成し、反応とともにこれら
の成分は増加し、さらに反応時間を長くしてもマルトヘ
キサオース及びマルトヘプタオースの含量は減少しなか
ったことから、本発明の澱粉分解酵素は、澱粉から本質
的にマルトヘキサオースとマルトヘプタオースを生成す
る新規なマルトヘキサオース、マルトヘプタオース生成
タイプのα−アミラーゼであることが判明した。澱粉か
らのマルトヘキサオースとマルトヘプタオースの生成率
は合計で約４５％であった。
【００６０】
【実験５ 基質特異性】最終濃度２ｗ／ｖ％のアミロー
ス、アミロペクチン、グリコーゲン、α−シクロデキス
トリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキスト
リン、プルラン、デキストラン、グルコース、マルトー
ス、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペ
ンタオース、マルトヘキサオース、あるいはマルトヘプ
タオースに、実験２の方法で得た精製マルトヘキサオー
ス・マルトヘプタオース生成アミラーゼを基質固形物グ
ラム当たり５０単位ずつ加え、５ｍＭ塩化カルシウム存
在下、４０℃、ｐＨ５．５で２時間作用させた。酵素反
応前後の反応液をキーゼルゲル６０（メルク社製；アル
ミプレート，２０×２０ｃｍ）を用いた薄層クロマトグ
ラフィー（以下、ＴＬＣと略称する。）にかけ、それぞ
れの糖質に対する酵素作用の有無を確認した。ＴＬＣは
展開溶媒に１−ブタノール：ピリジン：水＝６：４：１
（容積比）を用い、室温で１回展開した。発色は２０ｖ
／ｖ％硫酸−メタノール溶液を噴霧し、１１０℃で約１
０分間加熱して行った。
【００６１】その結果、アミロース、アミロペクチン、
グリコーゲンに作用して、可溶性澱粉を基質とした場合
と同様に、主としてマルトヘキサオース、マルトヘプタ
オースを生成し、α−シクロデキストリン、β−シクロ
デキストリン、γ−シクロデキストリン、プルラン、デ
キストラン、グルコース、マルトース、マルトトリオー
ス、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルト
ヘキサオースには作用せず、マルトヘプタオースから
は、僅かにグルコースとマルトヘキサオースを分解物と
して生成していたが、きわめて作用しにくいものである
ことが判明した。
【００６２】
【実験６ 急性毒性試験】マウスを使用して、実施例Ａ
−７の方法で製造した粉末状マルトヘキサオース高含有
糖質、粉末状マルトヘプタオース高含有糖質、実施例Ａ
−８の方法で製造したシラップ状マルトヘキサイトール
高含有糖質及びシラップ状マルトヘプタイトール高含有
糖質をそれぞれに経口投与して急性毒性テストを行っ
た。その結果、マルトヘキサオース、マルトヘプタオー
ス、マルトヘキサイトール及びマルトヘプタイトールは
いずれも低毒性の物質で、投与可能な最大投与量におい
ても死亡例は認められなかった。したがって、正確な値
はいえないが、そのＬＤ５０値は、いずれも５０ｇ／ｋ
ｇ以上であった。
【００６３】以下、本発明の実施例を述べる。実施例Ａ
でマルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラ
ーゼとそれを用いたマルトヘキサオース及び／又はマル
トヘプタオース含有糖質、又は、マルトヘキサイトール
及び／又はマルトヘプタイトール含有糖質の製造方法に
ついて述べ、実施例Ｂで該糖質を含有せしめた組成物に
ついて説明する。
【００６４】
【実施例Ａ−１】アルカリゲネス ラタス Ｄ２２７１
（ＦＥＲＭ ＢＰ−４５７８）を、培養温度を３０℃と
した以外は、実験１と同じ培地組成で、実験１の方法に
準じてファーメンターで約３０時間、通気攪拌培養し
た。この培養液上清のマルトヘキサオース・マルトヘプ
タオース生成アミラーゼの活性は、培養液ｍｌ当たり６
６単位であった。培養液をＭＦ膜濾過し、その透過液を
ＵＦ膜濃縮して、もとの培養液の活性に対して、約８２
％の収率で、マルトヘキサオース・マルトヘプタオース
生成アミラーゼをｍｌ当たり約１，３００単位有する濃
縮酵素液を得た。
【００６５】
【実施例Ａ−２】５％馬鈴薯澱粉乳（ｐＨ５．５）を加
熱糊化させ、これを７０℃に冷却して濃度０．０２％に
なるように塩化カルシウムを加え、実施例Ａ−１で調製
したマルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミ
ラーゼを澱粉グラム当たり２単位の割合になるように添
加し、液化、糖化反応を２０時間行った。その反応液を
オートクレーブ（１２０℃）で２０分間加熱し、酵素を
失活させた後、冷却し、常法にしたがって活性炭で脱色
・濾過し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩し
て精製し、更に濃縮して濃度約７５％のシラップを原料
固形物当たり収率約９５％で得た。本品は、固形物当た
りマルトヘキサオース２４．２％、マルトヘプタオース
を１７．７％含有しており、また、その甘味度は砂糖の
それの約１５％であった。本品は、低甘味剤として、ま
たボディー付与剤、粘度調節剤、保湿剤、照付与剤、接
着剤、保香剤、結晶防止剤、キャンディーのダレ防止剤
などとして広く飲食物、化粧品、医薬品、成形物など各
種組成物に有利に利用できる。
【００６６】
【実施例Ａ−３】１０％馬鈴薯澱粉乳（ｐＨ４．５）を
加熱糊化させた後、温度５０℃に冷却し、これにイソア
ミラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製）を澱粉グラ
ム当たり１０００単位の割合になるよう加え、２０時間
反応させた。その反応液をｐＨ５．２に調整し、オート
クレーブ（１２０℃）を１０分間行い、次いで、７０℃
に冷却して、これに濃度０．０２％になるように塩化カ
ルシウムを加え、実施例Ａ−１で調製したマルトヘキサ
オース・マルトヘプタオース生成アミラーゼを澱粉グラ
ム当たり５単位の割合になるように添加し、液化、糖化
反応を８時間行った。その反応液をオートクレーブ（１
２０℃）で２０分間加熱した後、冷却し、実施例Ａ−２
と同様に精製濃縮し、濃度７５％のシラップを原料固形
物当たり収率約９３％で得た。本品の糖組成は、グルコ
ース重合度５以下の少糖類４０．３％、マルトヘキサオ
ース２７．３％、マルトヘプタオース１９．２％、及び
グルコース重合度８以上のデキストリン１３．２％であ
った。本品は、低甘味、低糖度甘味剤などとして実施例
Ａ−２の場合と同様に広く飲食物、化粧品、医薬品、成
形物など各種組成物に有利に利用できる。
【００６７】
【実施例Ａ−４】３３％のとうもろこし澱粉乳に最終濃
度０．１重量％となるように炭酸カルシウムを加えた
後、ｐＨ６．０に調整し、これにα−アミラーゼ（ノボ
社製、商品名ターマミール６０Ｌ）を澱粉グラム当たり
０．２重量％になるよう加え、９５℃で１５分間反応さ
せた。その反応液をオートクレーブ（１２０℃）を３０
分間行った後、５０℃に冷却し、これにイソアミラーゼ
（株式会社林原生物化学研究所製）を澱粉グラム当たり
５００単位及び実施例Ａ−１で調製したマルトヘキサオ
ース・マルトヘプタオース生成アミラーゼを澱粉グラム
当たり１．８単位の割合になるように加え、４０時間反
応させた。本反応液を、実施例Ａ−２と同様に加熱、冷
却した後、精製濃縮し、噴霧乾燥して水分２％未満の粉
末状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース含有糖
質を原料固形物当たり収率約９０で得た。本品の糖組成
は、グルコース重合度５以下の少糖類３８．８％、マル
トヘキサオース２６．７％、マルトヘプタオース１５．
７％、及びグルコース重合度８以上のデキストリン１
８．８％であった。本品は、低甘味、低糖度甘味剤など
として実施例Ａ−２の場合と同様に広く飲食物、化粧
品、医薬品、成形物など各種組成物に有利に利用でき
る。
【００６８】
【実施例Ａ−５】実施例Ａ−３の方法で得たマルトヘキ
サオース及びマルトヘプタオース含有糖質を強酸性カチ
オン交換樹脂を用いたカラムクロマトグラフィーで分画
し、マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース含量を
高めた。実施例Ａ−３の方法で製造したマルトヘキサオ
ース及びマルトヘプタオース含有糖質を、濃度５５％に
して原糖液とした。樹脂は、アルカリ金属型強酸性カチ
オン交換樹脂（三菱化成工業株式会社製、商品名ダイヤ
イオンＳＫ １０４ Ｋ+型、架橋度４％）を使用し、
内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４
本を連結して、樹脂層全長を２０ｍとした。カラム内温
度を６０℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対して７ｖ／
ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１２の流速で
流して分画し、マルトヘキサオース３５％あるいはマル
トヘプタオース２５％以上のマルトヘキサオース及びマ
ルトヘプタオース高含有画分を採取し、実施例Ａ−２と
同様に精製し、濃縮して、濃度７５％のシラップ状マル
トヘキサオース及びマルトヘプタオース含有糖質を原糖
液固形物当たり約５０％の収率で得た。本品はマルトヘ
キサオースを固形物当たり約４５％、マルトヘプタオー
スを同じく約３１％含有しており、また、その甘味度は
砂糖のそれの１０％未満であった。本品は、低甘味、低
糖度甘味剤などとして、実施例Ａ−２の場合と同様に広
く飲食物、化粧品、医薬品、成形物など各種組成物に有
利に利用できる。
【００６９】
【実施例Ａ−６】実施例Ａ−５の方法で得たシラップ状
マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース高含有糖質
を更に噴霧乾燥して、水分約２％未満の粉末状マルトヘ
キサオース及びマルトヘプタオース高含有物を原料シラ
ップ固形物当たり約９８％の収率で得た。本品は、低甘
味、低糖度甘味剤などとして、実施例Ａ−２の場合と同
様に広く飲食物、化粧品、医薬品、成形物など各種組成
物に有利に利用できる。
【００７０】
【実施例Ａ−７】実施例Ａ−５の方法で製造したマルト
ヘキサオース及びマルトヘプタオース高含有糖質を濃度
５０％にして原糖液とした。樹脂は、アルカリ金属型強
酸性カチオン交換樹脂（三菱化成工業株式会社製、商品
名ダイヤイオンＳＫ １０４ Ｋ+型、架橋度４％）を
使用し、実施例Ａ−５と同様にカラムに充填した。カラ
ム内温度を６０℃に維持しつつ、原糖液を樹脂に対して
５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１０の
流速で流して分画し、マルトヘキサオース８０％以上の
高含有画分及びマルトヘプタオース７０％以上の高含有
画分をそれぞれ採取し、次いで、実施例Ａ−２と同様に
精製し、濃縮し、噴霧乾燥して、水分約２％未満の粉末
状マルトヘキサオース高含有糖質及び粉末状マルトヘプ
タオース高含有糖質を原糖液固形物当たりそれぞれ収率
約３０％及び２０％で得た。このようにして得られた粉
末状マルトヘキサオース高含有糖質及び粉末状マルトヘ
プタオース高含有糖質の純度はそれぞれ約８９％、約８
１％で、その甘味度は砂糖のそれの１０％未満であっ
た。本品は、低甘味、低糖度甘味剤などとして、実施例
Ａ−２の場合と同様に広く飲食物、化粧品、医薬品、成
形物など各種組成物に有利に利用できる。
【００７１】
【実施例Ａ−８】実施例Ａ−３の方法で製造したシラッ
プ状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース含有糖
質を濃度５０％にし、オートクレーブに入れ、触媒とし
てラネーニッケル１０％を添加し、攪拌しながら温度を
９０乃至１２５℃に上げ、水素圧を２０乃至１００ｋｇ
／ｃｍ2に上げて水素化を完了させた。次いでラネーニ
ッケルを除去した後、実施例Ａ−２と同様に精製し、濃
縮して、水分２５％のマルトヘキサイトール及びマルト
ヘプタイトール含有糖質を原料シラップ固形物当たり約
９０％の収率で得た。本品は、マルトヘキサイトールを
固形物当たり約２７％、マルトヘプタイトールを同じく
約１９％含有しており、また、その甘味度は砂糖のそれ
の約２０％であった。本品は、低甘味、非還元性甘味剤
として、また、ボディー付与剤、粘度調節剤、保湿剤、
照付与剤、接着剤、保香剤、結晶防止剤、キャンディー
のダレ防止剤などとして広く飲食物に利用される。
【００７２】
【実施例Ａ−９】実施例Ａ−５の方法で製造したマルト
ヘキサオース及びマルトヘプタオース高含有糖質を実施
例Ａ−８の方法で水素添加し、精製、濃縮し得られるマ
ルトヘキサイトール及びマルトヘプタイトール高含有糖
質を濃度５０％にして原糖液とした。この糖液を実施例
Ａ−７の方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂を用い
るカラムクロマトグラフィーにかけ、マルトヘキサイト
ール８０％以上の高含有画分及びマルトヘプタイトール
７０％以上の高含有画分をそれぞれ採取し、次いで、実
施例Ａ−２と同様に精製し、濃縮し、濃度約７５％のシ
ラップ状マルトヘキサイトール高含有糖質及びシラップ
状マルトヘプタイトール高含有糖質を原糖液固形物当た
りそれぞれ収率約３０％及び２０％で得た。このように
して得られたシラップ状マルトヘキサイトール高含有糖
質及びシラップ状マルトヘプタイトール高含有糖質の純
度はそれぞれ約９０％、約８２％で、その甘味度は砂糖
のそれの１０％未満であった。本品は、低甘味、低糖度
甘味剤などとして、実施例Ａ−２の場合と同様に広く飲
食物、化粧品、医薬品、成形物など各種組成物に有利に
利用できる。
【００７３】
【実施例Ｂ−１ 甘味料】実施例Ａ−２の方法で得たシ
ラップ状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース含
有糖質１重量部にα−グリコシルステビオシド（東洋精
糖株式会社製、商品名α−Ｇスィート）０．０２重量部
を均一に混合して得たシラップ状甘味料は、甘味の質が
すぐれ、砂糖の約２倍の甘味を有し、カロリーは甘味度
当たり砂糖の約２分の１となる。したがって、本甘味料
は、低カロリー甘味料として、カロリーの摂取を制限し
ている人、例えば、肥満者、糖尿病者などのための低カ
ロリー飲食物などに対する甘味付けに好適である。ま
た、本甘味料は、虫歯誘発菌によって酸の生成も少な
く、不溶性グルカンの生成も少ないことにより、虫歯を
抑制する飲食物などの甘味付けにも好適である。
【００７４】
【実施例Ｂ−２ カスタードクリーム】コーンスターチ
５００重量部、実施例Ａ−６の方法で得た粉末状マルト
ヘキサオース及びマルトヘプタオース高含有糖質４００
重量部、マルトース５００重量部及び食塩５重量部を、
篩を通して充分に混合し、鶏卵１，４００重量部を加え
て攪拌し、これに沸騰した牛乳５，０００重量部を徐々
に加え、更にこれをとろ火にかけて、攪拌を続け、コー
ンスターチが完全に完全に糊化して全体が半透明になっ
たとき火を止め、これを冷却して少量のバニラ香料を加
えることによりカスタードクリームを製造した。本品
は、なめらかで光沢を有し、甘味が強すぎず美味であ
る。
【００７５】
【実施例Ｂ−３ ういろう】米粉９０重量部にコーンス
ターチ２０重量部、砂糖２０重量部、抹茶粉末１重量
部、実施例Ａ−８の方法で得たシラップ状マルトヘキサ
イトール及びマルトヘプタイトール含有糖質９０重量部
及び水の適量を加えて混練した後、これを容器に入れて
６０分間蒸して抹茶ういろうを製造した。本品は、照
り、口当たりも良好で、風味もよかった。また、澱粉の
老化も抑制され、長時間安定であった。
【００７６】
【実施例Ｂ−４ ハードキャンディー】実施例Ａ−３の
方法で得たシラップ状マルトヘキサオース及びマルトヘ
プタオース含有糖質７０重量部に砂糖９０重量部を混合
溶解し、減圧下で水分約２％未満になるまで加熱濃縮し
て、これにクエン酸０．１５重量部及び少量のレモン香
料と着色料とを混和し、次いで、常法にしたがって成形
し、ハードキャンディーを製造した。本品は、吸湿性少
なく、ダレを起こしにくい歯切れのよいハードキャンデ
ィーである。
【００７８】
【実施例Ｂ−５ べったら漬】実施例Ａ−２の方法で得
たシラップ状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオー
ス含有糖質１重量部、マルトース３重量部、甘草製剤
０．０５重量部、リンゴ酸０．００８重量部、グルタミ
ン酸ナトリウム０．０７重量部、ソルビン酸カリウム
０．０３重量部及びプルラン０．２重量部を均一に混合
してべったら漬の素を製造した。大根３０ｋｇを常法に
したがって食塩により下漬けし、次いで砂糖で中漬けし
たものを、本べったら漬の素４ｋｇで調製した調味液に
漬けて、べったら漬を製造した。本品は、色艶、香気共
に良好で、適度の甘味を有し歯切れもよかった。
【００７９】
【実施例Ｂ−６ 経管栄養剤】実施例Ａ−４の方法で得
た粉末状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース含
有糖質２０重量部、グリシン１．１重量部、グルタミン
酸ナトリウム１重量部、乳酸カルシウム０．４重量部、
炭酸マグネシウム０．１重量部、チアミン０．０１重量
部及びリボフラビン０．０１重量部からなる配合物を調
製する。この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小
包に充填し、ヒートシールして製品を得た。本品は、１
袋分を約３３乃至５００ｍｌの水に溶解して栄養補給液
とし、経管方法により、鼻腔、胃腸などへ投与して使用
する。本品は、ヒトのみならず、家畜などへの非経口的
栄養補給液としても有利に利用できる。
【００８０】
【実施例Ｂ−７ 経管栄養剤】実施例Ａ−６の方法で得
た粉末状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース高
含有糖質８０重量部、乾燥卵黄１９０重量部、脱脂粉乳
２０９重量部、塩化ナトリウム４．４重量部塩化カリウ
ム１．８５重量部、硫酸マグネシウム４重量部、チアミ
ン０．０１重量部、アスコルビン酸ナトリウム０．１重
量部、ビタミンＥアセテート０．６重量部及びニコチン
酸アミド０．０４重量部からなる配合物を調製する。こ
の配合物２５ｇずつをラミネートアルミ製小包に充填
し、ヒートシールして製品を得た。本品は、１袋分を約
１５０乃至３００ｍｌの水に溶解して栄養補給液とし、
経管方法により、鼻腔、食道、胃などへ投与して使用す
る。
【００８１】
【実施例Ｂ−８ 錠剤】アスピリン５０重量部に、マル
トース１０重量部、コーンスターチ４重量部及び実施例
Ａ−６の方法で得た粉末マルトヘキサオース及びマルト
ヘプタオース高含有糖質４重量部を均一に混合した後、
直径１２ｍｍ、２０Ｒ杵を用いて１錠６８０ｍｇ、錠剤
の厚さ５．２５ｍｍ、硬度８ｋｇ±１ｋｇで打錠した。
本品は、適度の甘味を有する飲み易い錠剤である。
【００８２】
【実施例Ｂ−９ 乳液】ポリオキシエチレンベヘニルエ
ーテル０．５重量部、テトラオレイン酸ポリオキシエチ
レンソルビトール１重量部、親油型モノステアリン酸グ
リセリン１重量部、ベヘニルアルコール０．５重量部、
アボガド油１重量部、実施例Ａ−９の方法で得たシラッ
プ状マルトヘキサイトール高含有糖質３．５重量部、α
−グリコシルルチン１重量部、ビタミンＥ及び防腐剤の
適量を、常法にしたがって加熱溶解し、これに１，３−
ブチレングリコール５重量部、カルボキシビニルポリマ
ー０．１重量部及び精製水８５．３重量部を加え、ホモ
ゲナイザーにかけて乳化し、乳液を製造した。本品は、
保湿性ある乳液で、日焼け止め、色白剤などとして有利
に利用できる。
【００８３】
【実施例Ｂ−１０ スキンクリーム】モノステアリン酸
ポリオキシエチレングリコール２重量部、自己乳化型モ
ノステアリン酸グリセリン５重量部、α−グリコシルル
チン２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン
酸グリセリル１０重量部、実施例Ａ−７の方法で得た粉
末状マルトヘキサオース高含有糖質４重量部及び防腐剤
の適量を、常法にしたがって加熱溶解し、これに１，３
−ブチレングリコール５重量部、及び精製水６６重量部
を加え、ホモゲナイザーにかけて乳化し、更に、香料の
適量を加えて攪拌混合し、クリームを製造した。本品
は、伸びの良いクリームで、日焼け止め、美肌剤、色白
剤などとして有利に利用できる。
【００８４】
【実施例Ｂ−１１ 練歯磨】第二リン酸カルシウム４５
重量部、ラウリル硫酸ナトリウム１．５重量部、グリセ
リン２５重量部、ポリオキシエチレンソルビタンラウレ
ート０．５重量部、実施例Ａ−５の方法で得たシラップ
状マルトヘキサオース及びマルトヘプタオース高含有糖
質１５重量部、サッカリン０．０２重量部及び防腐剤
０．０５重量部を水１３重量部と混合して練歯磨を得
た。本品は、光沢、洗浄力も良好で、練歯磨として好適
である。
【００８５】
【実施例Ｂ−１２ 肥料杭】配合肥料（Ｎ＝１４％、Ｐ
2Ｏ5＝８％、Ｋ2Ｏ＝１２％）、プルラン、実施例Ａ−
３の方法で得たマルトヘキサオース及びマルトヘプタオ
ース含有糖質、硫酸カルシウム及び水の割合を重量でそ
れぞれ７０、５、５、１５及び５として充分混合した
後、押出機（Ｌ／Ｄ＝２０、圧縮比＝１．８、ダイスの
口径＝３０ｍｍ）で８０℃に加熱して肥料杭を製造し
た。本品は、肥料用容器が不要で取扱い容易であり、全
層施肥に適した強度を有し、更に配合割合を変えること
により肥料成分の溶出速度を調節できる。必要ならば、
この肥料杭に植物ホルモン、農業用薬剤及び土壌改良剤
等の混合も容易である。
【００８６】
【発明の効果】上記から明らかなように、本発明のマル
トヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼ
は、至適温度、安定温度における温度が高く、また、至
適ｐＨ、安定ｐＨにおけるｐＨ域が広く、更に産生微生
物からの酵素生産量も高く、澱粉質からのマルトヘキサ
オース及び／又はマルトヘプタオース高含有糖質及びマ
ルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイトール高
含有糖質の製造に有利に利用しうることが判明し、その
工業的意義はきわめて大きい。
【００８７】更に、このようにして製造されるマルトヘ
キサオース及び／又はマルトヘプタオース高含有糖質及
び、それを水素添加して得られるマルトヘキサイトール
及び／又はマルトヘプタイトール高含有糖質は、低甘味
性の甘味剤として、またボディー付与剤、粘度調節剤、
保湿剤、照付与剤などとして、さらには、栄養補給用剤
などとして広く飲食物、化粧品、医薬品、成形物など各
種組成物に供しうることも大きな特徴である。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
ース生成アミラーゼの酵素活性に及ぼす温度の影響を示
す図である。
【図２】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
ース生成アミラーゼの酵素活性に及ぼすｐＨの影響を示
す図である。
【図３】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
ース生成アミラーゼの安定性に及ぼす温度の影響を示す
図である。
【図４】本発明のマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
ース生成アミラーゼの安定性に及ぼすｐＨの影響を示す
図である。

Claims (19)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 澱粉から主としてマルトヘキサオース及
    びマルトヘプタオースを生成する作用を有し、かつ、マ
    ルトヘキサオース以下の低分子オリゴ糖には実質的に分
    解作用を有さないマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
    ース生成アミラーゼ。
  2. 【請求項２】 マルトヘキサオース・マルトヘプタオー
    ス生成アミラーゼが微生物由来の酵素であることを特徴
    とする請求項１記載のマルトヘキサオース・マルトヘプ
    タオース生成アミラーゼ。
  3. 【請求項３】 下記の理化学的性質を有するマルトヘキ
    サオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼ。 （１） 作用 澱粉に作用して、主としてマルトヘキサオース及びマル
    トヘプタオースを生成する。マルトヘキサオース以下の
    低分子オリゴ糖を実質的に分解せず、マルトヘプタオー
    スにも作用しにくい。 （２） 分子量 ＳＤＳ−ゲル電気泳動法で、４３，０００±３，０００
    ダルトン （３） 等電点 アンフォライン含有電気泳動法で、７．６±０．５ （４） 至適ｐＨ 約５．０（カルシウムイオン存在下） （５） 至適温度 ７０℃付近（カルシウムイオン存在下） （６） ｐＨ安定性 約４．５乃至１０．５（カルシウムイオン存在下） （７） 温度安定性 ６０℃付近まで安定（カルシウムイオン存在下）
  4. 【請求項４】 澱粉から主としてマルトヘキサオース及
    びマルトヘプタオースを生成する作用を有し、かつ、マ
    ルトヘキサオース以下の低分子オリゴ糖には実質的に分
    解作用を有さないマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
    ース生成アミラーゼ産生能を有する微生物を栄養培地に
    培養し、培養物から該マルトヘキサオース・マルトヘプ
    タオース生成アミラーゼを採取することを特徴とするマ
    ルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミラーゼ
    の製造方法。
  5. 【請求項５】 マルトヘキサオース・マルトヘプタオー
    ス生成アミラーゼ産生能を有する微生物がアルカリゲネ
    ス属に属する微生物であることを特徴とする請求項４記
    載のマルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミ
    ラーゼの製造方法。
  6. 【請求項６】 澱粉から主としてマルトヘキサオース及
    びマルトヘプタオースを生成する作用を有し、かつ、マ
    ルトヘキサオース以下の低分子オリゴ糖には実質的に分
    解作用を有さないマルトヘキサオース・マルトヘプタオ
    ース生成アミラーゼ産生能を有する微生物アルカリゲネ
    ス ラタス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｌａｔｕｓ）Ｄ２
    ２７１（工業技術院生命工学工業技術研究所、受託番号
    ＦＥＲＭ ＢＰ−４５７８）。
  7. 【請求項７】 澱粉質に対し、澱粉から主としてマルト
    ヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成する作用を
    有し、かつ、マルトヘキサオース以下の低分子オリゴ糖
    には実質的に分解作用を有さないマルトヘキサオース・
    マルトヘプタオース生成アミラーゼを作用させるか、又
    は該マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミ
    ラーゼとともに澱粉枝切酵素を作用させ得られるマルト
    ヘキサオース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質を
    採取することを特徴とするマルトヘキサオース及び／又
    はマルトヘプタオース含有糖質の製造方法。
  8. 【請求項８】 マルトヘキサオース・マルトヘプタオー
    ス生成アミラーゼが、微生物由来のマルトヘキサオース
    ・マルトヘプタオース生成アミラーゼであることを特徴
    とする請求項７記載のマルトヘキサオース及び／又はマ
    ルトヘプタオース含有糖質の製造方法。
  9. 【請求項９】 澱粉質に対し、澱粉から主としてマルト
    ヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成する作用を
    有し、かつ、マルトヘキサオース以下の低分子オリゴ糖
    には実質的に分解作用を有さないマルトヘキサオース・
    マルトヘプタオース生成アミラーゼを作用させるか、又
    は該マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成アミ
    ラーゼとともに澱粉枝切酵素を作用させ、次いで夾雑糖
    質を分離して得られるマルトヘキサオース及び／又はマ
    ルトヘプタオース高含有糖質を採取することを特徴とす
    る請求項７又は８記載のマルトヘキサオース及び／又は
    マルトヘプタオース含有糖質の製造方法。
  10. 【請求項１０】 夾雑糖質を分離する方法が、強酸性カ
    チオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーであ
    ることを特徴とする請求項９記載のマルトヘキサオース
    及び／又はマルトヘプタオース含有糖質の製造方法。
  11. 【請求項１１】 澱粉質に対し、澱粉から主としてマル
    トヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成する作用
    を有し、かつ、マルトヘキサオース以下の低分子オリゴ
    糖には実質的に分解作用を有さないマルトヘキサオース
    ・マルトヘプタオース生成アミラーゼを作用させるか、
    又は該マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成ア
    ミラーゼとともに澱粉枝切酵素を作用させ得られるマル
    トヘキサオース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質
    を水素添加してマルトヘキサイトール及び／又はマルト
    ヘプタイトール含有糖質とし、これを採取することを特
    徴とするマルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプタ
    イトール含有糖質の製造方法。
  12. 【請求項１２】 マルトヘキサオース・マルトヘプタオ
    ース生成アミラーゼが、微生物由来のマルトヘキサオー
    ス・マルトヘプタオース生成アミラーゼであることを特
    徴とする請求項１１記載のマルトヘキサイトール及び／
    又はマルトヘプタイトール含有糖質の製造方法。
  13. 【請求項１３】 澱粉質に対し、澱粉から主としてマル
    トヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成する作用
    を有し、かつ、マルトヘキサオース以下の低分子オリゴ
    糖には実質的に分解作用を有さないマルトヘキサオース
    ・マルトヘプタオース生成アミラーゼを作用させるか、
    又は該マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成ア
    ミラーゼとともに澱粉枝切酵素を作用させ得られるマル
    トヘキサオース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質
    を水素添加してマルトヘキサイトール及び／又はマルト
    ヘプタイトール含有糖質とし、次いで夾雑糖質を分離し
    て得られるマルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプ
    タイトール高含有糖質を採取することを特徴とする請求
    項１１又は１２記載のマルトヘキサイトール及び／又は
    マルトヘプタイトール含有糖質の製造方法。
  14. 【請求項１４】 夾雑糖質を分離する方法が、強酸性カ
    チオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーであ
    ることを特徴とする請求項１３記載のマルトヘキサイト
    ール及び／又はマルトヘプタイトール含有糖質の製造方
    法。
  15. 【請求項１５】 澱粉質に対し、澱粉から主としてマル
    トヘキサオース及びマルトヘプタオースを生成する作用
    を有し、かつ、マルトヘキサオース以下の低分子オリゴ
    糖には実質的に分解作用を有さないマルトヘキサオース
    ・マルトヘプタオース生成アミラーゼを作用させるか、
    又は該マルトヘキサオース・マルトヘプタオース生成ア
    ミラーゼとともに澱粉枝切酵素を作用させ得られるマル
    トヘキサオース及び／又はマルトヘプタオース含有糖
    質、又はこれを水素添加して得られるマルトヘキサイト
    ール及び／又はマルトヘプタイトール含有糖質を含有せ
    しめた組成物。
  16. 【請求項１６】 マルトヘキサオース・マルトヘプタオ
    ース生成アミラーゼが、微生物由来のマルトヘキサオー
    ス・マルトヘプタオース生成アミラーゼであることを特
    徴とする請求項１５記載のマルトヘキサオース及び／又
    はマルトヘプタオース含有糖質、又はこれを水素添加し
    て得られるマルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプ
    タイトール含有糖質を含有せしめた組成物。
  17. 【請求項１７】 マルトヘキサオース及び／又はマルト
    ヘプタオース、又は、マルトヘキサイトール及び／又は
    マルトヘプタイトールが、夾雑糖質を分離して得られた
    マルトヘキサオース及び／又はマルトヘプタオース、又
    は、マルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイト
    ール高含有糖質であることを特徴とする請求項１５又は
    １６記載のマルトヘキサオース及び／又はマルトヘプタ
    オース含有糖質、又はこれを水素添加して得られるマル
    トヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイトール含有
    糖質を含有せしめた組成物。
  18. 【請求項１８】 マルトヘキサオース及び／又はマルト
    ヘプタオース含有糖質、又は、マルトヘキサイトール及
    び／又はマルトヘプタイトール含有糖質をマルトヘキサ
    オース、マルトヘプタオース、マルトヘキサイトール又
    はマルトヘプタイトールとして０．１ｗ／ｗ％以上含有
    せしめた請求項１５、１６又は１７記載のマルトヘキサ
    オース及び／又はマルトヘプタオース含有糖質、又はこ
    れを水素添加して得られるマルトヘキサイトール及び／
    又はマルトヘプタイトール含有糖質を含有せしめた組成
    物。
  19. 【請求項１９】 組成物が、飲食物、化粧品、医薬品又
    は成形物であることを特徴とする請求項１５、１６、１
    ７又は１８記載のマルトヘキサオース及び／又はマルト
    ヘプタオース含有糖質、又はこれを水素添加して得られ
    るマルトヘキサイトール及び／又はマルトヘプタイトー
    ル含有糖質を含有せしめた組成物。
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