JPH0712777A - ミクロカラム分離技術における試料導入を制御するための方法及びその方法を使用するサンプリング装置 - Google Patents
ミクロカラム分離技術における試料導入を制御するための方法及びその方法を使用するサンプリング装置Info
- Publication number
- JPH0712777A JPH0712777A JP6101977A JP10197794A JPH0712777A JP H0712777 A JPH0712777 A JP H0712777A JP 6101977 A JP6101977 A JP 6101977A JP 10197794 A JP10197794 A JP 10197794A JP H0712777 A JPH0712777 A JP H0712777A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- channel
- sample
- discharge
- supply
- electrolyte
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/24—Extraction; Separation; Purification by electrochemical means
- C07K1/26—Electrophoresis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44743—Introducing samples
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44756—Apparatus specially adapted therefor
- G01N27/44791—Microapparatus
Abstract
提供 【構成】試料が、電解質液チャネル(12)と試料の供給(1
3)と排出(14)のチャネルからなるサンプリング装置(3)
中へプラグとして注入される、キャピラリ電気泳動にお
ける試料導入方法及びその方法を使用する装置。供給(1
3)と排出(14)のチャネルは、各々の供給口(15)と排出口
(16)で電解質液チャネル(12)中に放流する。口(15)と口
(16)の間の距離は、幾何学的に試料体積(17)を規定す
る。電解質液チャネル(12)中への試料プラグの注入は、
試料の最も低い電気泳動可動性を持つ成分が試料体積内
に含有されているのに充分に長い程度に少なくともわた
る時限にわたり供給(13)と排出(14)のチャネルにわたっ
て電界を設けることにより、動電的に実施される。供給
(13)と排出(14)のチャネルの、電解質緩衝液に関する流
れ抵抗は、電解質液チャネル(12)のその流れ抵抗より少
なくとも約5%低い。
Description
縮された試料がキャピラリチャネルシステムを通過して
送られ、そして異なる電気泳動可動性を持つ成分からな
る上記試料がサンプリング装置中へ試料プラグとして注
入され、そのサンプリング装置は少なくとも電解質緩衝
液のためのチャネルと上記試料のための供給チャネルと
排出チャネルからなり、上記電解質チャネルと、上記試
料のための供給チャネルと排出チャネルは互いに交わ
り、そして上記供給チャネルと排出チャネルの各々は上
記電解質チャネルに対して傾斜しておりそしてその各々
の供給口と排出口で上記電解質チャネル中に開口してお
り、上記供給口と上記排出口との間の距離は試料体積を
幾何学的に決めている、ミクロカラム分離技術、特にキ
ャピラリ電気泳動(CE)における試料導入を制御する
ための方法に関する。
ルと、試料のための供給チャネルと排出チャネルと試料
を上記体積中に動電的に注入するための手段からなるサ
ンプリング装置であって、供給チャネルと排出チャネル
の各々は各々の供給口と排出口において上記電解質チャ
ネル中に開口し、それらの口は試料体積が幾何学的に規
定されるように互いに関して配置され、上記供給チャネ
ルと排出チャネルの各々は上記チャネルピースの縦方向
の伸長線に対して傾いているサンプリング装置に関す
る。
ラム分離技術、特にキャピラリ電気泳動は、センサー又
は化学分析システムの部分として使用される非常に興味
のある分離技術になった。これのための主たる理由は、
分離技術としての方法の高い効率である。キャピラリ電
気泳動において通常使用されるサンプリング法は:注入
ブロック内への、隔膜を介してのシリンジを使用する試
料の注入、試料ループを使用する場合と使用しない場合
の注入バルブの使用、そして試料リザーバ中へのキャピ
ラリ管の一端の浸漬:それにより試料は重力流れによ
り、過圧又は減圧により、又は電気浸透及び/又は電気
移動により導入される。
2-622 には、試料バルブ法はキャピラリ電気泳動のため
の最も適したサンプリング法であると記述されている
が、試料の注入の無バルブ装置も記述されている。記載
されている装置は、電極室とサンプリング装置の間を連
続している鋳型キャピラリブロックからなる。電極室で
電解質溶液は電極と接触している。キャピラリ管には評
価エレクトロニクスと接続している測定電極がある。サ
ンプリング装置は、キャピラリ管に対して垂直に伸長し
ている二つのフィーダと接続しているキャピラリ管の拡
張部分からなる。キャピラリ管の縦方向の伸長に沿った
二つのフィーダの互いのオフセット配置は、サンプリン
グ装置がダブルT型のキャピラリ構造を持つようになっ
ている。
内に導入される。注入体積は、キャピラリ管に沿って離
れて二つのフィーダが配置されている距離により幾何学
的に規定される。キャピラリ管中の電解質溶液と試料の
移送は、キャピラリ管に沿って各々の電極の間に適用さ
れている電界により実施される。ダブルT型サンプリン
グ装置の長所は、注入バルブを使用しても得られる長所
であるが、希釈試料イオン種の濃縮効果である。しか
し、フィーダにわたる電界グラジエントが存在しないと
いうものの、試料が既にサンプリング位置を離れている
時にフィーダからの試料成分がキャピラリ管中に拡散す
るかも知れないということがあり得る。無制御にキャピ
ラリ管に入る試料成分の量は、各々の試料成分の拡散係
数と可動性による。かくして、検出器においては、注入
した試料液体の多少拡大プラグが到着するだけでなく、
電解質と電界における各々の成分の拡散係数と可動性に
よっては、試料液体の各々のプラグの前後又は間の電解
質が試料成分の予測できない量で「汚染」される。検出
器に到達するこれらの試料成分の予測できない量は、決
して好ましいものではなく、検出シグナルの高ノイズの
原因になり、その結果検出限界を顕著に減少せしめる。
1932頁にはキャピラリ電気泳動装置が記載されておりそ
してその装置では、キャピラリの一端を試料リサーバ中
に浸漬しそしてキャピラリの両方の末端を通過する電圧
を適用して、試料を動電的に注入する。電界では試料
は、動電的に移送されそしてキャピラリ電気泳動装置の
チャネルシステム中へT−ジャンクションにおいて注入
される。しかしながら、この方法は試料成分の電気泳動
可動性における違いに由来する実際の試料のバイアスを
誘導する。かくして、導入された試料は、原試料と同じ
組成を持たないことが頻繁にある。更に、導入された試
料の量が判らないことが非常に頻繁にあるので、内部標
準を定量分析のために使用しなければならない。
離分技術における、そして更に特定するとキャピラリ電
気泳動(CE)における試料導入を制御するための方
法;そして上述の従来技術の欠点を克服するサンプリン
グ装置を提供することである。試料の体積は幾何学的に
規定されなければならない。注入された試料組成は、リ
ザーバ中の試料の原組成と異なっていてはいけない。キ
ャピラリ管中への試料液体の制御できない導入は顕著に
減少されるべきだろう。仮にキャピラリ管中への試料液
体の望ましくない漏れを全体として回避できないなら
ば、少なくともそれが予測できそして制御できる状態で
のみ起こるという準備がされていなければならない。
ば Sensors and Actuators B, 10(1993)107-116に記載
されているような微小分析概念を容易に実現できるべき
でもある。そこには、水性溶媒の、チャネルと動電的ポ
ンプの間の溶媒流の無バルブスイッチングを使用する、
シリコン基体上に集積された多重流系の概念が記載され
ている。同様な概念は、例えば、Analytical Chemistr
y,Vol.64,No.17,1992年,9月1 日号,1926-1932頁に記載
されている。キャピラリ電気泳動を基礎にした上述の微
小化した化学分析システムは、キャピラリ電気泳動を基
礎にした上述の微小化化学分析システムは、平面のガラ
ス基体中にミクロ機械加工された、複雑な多重キャピラ
リチャネルからなる。溶媒と試料の移送は、動電効果
(電気浸透及び/又は電気泳動)に由来して起こる。
方法によって特徴付けられる方法の段階からなる、キャ
ピラリ電気泳動におけるサンプル導入を制御するための
方法により解決される:電解液緩衝液と多少濃縮された
試料がキャピラリチャネルシステムを通過して送られ、
そして異なる電気泳動可動性を持つ成分からなる上記試
料がサンプリング装置中へ試料プラグとして注入され、
そのサンプリング装置は少なくとも電解質緩衝液のため
のチャネルと上記試料のための供給チャネルと排出チャ
ネルからなり、上記電解質チャネルと、上記試料のため
の供給チャネルと排出チャネルは互いに交わり、そして
上記供給チャネルと排出チャネルの各々は上記電解質チ
ャネルに対して傾斜しておりそしてその各々の供給口と
排出口で上記電解質チャネル中に開口しており、上記供
給口と上記排出口との間の距離は試料体積を幾何学的に
決めている、ミクロカラム分離技術、特にキャピラリ電
気泳動(CE)における試料導入を制御するための方法
であって;上記試料の最も低い電気泳動可動性を持つ最
も遅い成分が上記幾何学的に規定される体積内に含有さ
れているのに充分に長い程度に少なくともわたる時限に
わたり上記試料供給チャネルと排出チャネルにわたり電
界を設けることにより、上記試料プラグの電解質チャネ
ル中への注入が動電的に実施されることを特徴とする方
法。
特にキャピラリ電気泳動(CE)において試料を導入す
るための方法が提供され、そしてその方法では電解質緩
衝液と多少濃縮された試料をキャピラリチャネルシステ
ムを通過して移送する。試料は、少なくとも電解質緩衝
液のためのチャネルと試料のための供給チャネルと排出
チャネルからなるサンプリング装置中へ試料プラグとし
て注入される。電解質緩衝液のためのチャネルと試料の
ための供給チャネルと排出チャネルは互いに交わる。試
料のための供給チャネルと排出チャネルは各々、それぞ
れの供給口と排出口で開口する。供給口と排出口の間の
距離は、幾何学的に試料体積を規定する。供給チャネル
と排出チャネルの各々は電解質チャネルに対して傾斜し
ている。電解質チャネル中への試料プラグの注入は、上
記試料の最も低い電気泳動可動性を持つ最も遅い成分が
上記幾何学的に規定される体積内に含有されているのに
充分に長い程度に少なくともわたる時限にわたり上記試
料供給チャネルと排出チャネルにわたり電界を設けるこ
とにより、動電的に実施される。この方法により、注入
された試料プラグの組成は実際の試料組成を反映するこ
とになる。
の直後、電解質緩衝液が供給チャネル中と排出チャネル
中に、各々の供給口と排出口において一定時限にわたり
進入するようにし、そしてその一定時限は少なくとも、
試料プラグ内の最も遅い成分の供給口から検出器への移
動時間の量になる。かくして試料を各々の供給チャネル
と排出チャネル中に押し戻しそして実質的に試料が、供
給口と排出口を通過して送られる電解質緩衝液中へ制御
できないで拡散するのを防止する。更にその方法は、電
解質緩衝液内の試料組成を制御することを可能にする。
下記の装置により解決される:電解質緩衝液のためのチ
ャネルと、試料のための供給チャネルと排出チャネルと
試料を上記体積中に動電的に注入するための手段からな
るサンプリング装置であって、供給チャネルと排出チャ
ネルの各々は各々の供給口と排出口において上記電解質
チャネル中に開口し、それらの口は試料体積が幾何学的
に規定されるように互いに関して配置され、上記供給チ
ャネルと排出チャネルの各々は上記チャネルピースの縦
方向の伸長線に対して傾いているサンプリング装置にお
いて;その上記供給チャネルと上記排出チャネルの各々
が、上記電解質緩衝液に関して流れるための抵抗を持
ち、それは上記電解質チャネルの流れるための各々の抵
抗より約5%少ない流れるための抵抗を持つことを特徴
とするサンプリング装置。
ルと、試料のための供給チャネルと排出チャネルからな
り、その供給チャネルと排出チャネルの各々は各々の供
給口と排出口において上記電解質チャネル中に開口す
る。それらの口は試料体積が幾何学的に規定されるよう
に互いに関して配置される。供給チャネルと排出チャネ
ルの各々は電解質チャネルの縦方向の伸長線に対して傾
いている。試料体積中に試料を動電的に注入するための
手段がそこに提供される。上記電解質緩衝液に関しての
上記供給チャネルと上記排出チャネルの流れるための抵
抗は電解質チャネルの流れるための各々の抵抗より少な
くとも約5%少ない。
る。図1と図2には、ミクロカラム分離装置、さらに特
定すると電気泳動分離装置の実施態様が図示されてい
る。それは基部1と蓋部2からなる。基部1は、ガラ
ス、単結晶シリコン又は他の半導体製造で既知の材料、
又は適当なポリマー材料から製造されていてよい。蓋部
2は好ましくはガラスから製造されている。基部1は、
その表面中にエッチングされた、ミクロ機械加工された
又は他の方法によって設けられたチャネルシステム4か
らなる。半導体製造から知られている技術が、基部1の
表面中にチャネルシステムを作製するのに適用されるの
が好ましい。蓋部2は、チャネルシステム4と連結して
いるスルーホールR、S、D、Wを備えておりそしてキ
ャピラリ管の末端を収容しそして保持するために適応さ
せてある。蓋部2は、チャネルシステムを通過して流れ
る試料の光検出システム、例えば蛍光検出システム、又
は吸光検出システム、又は屈折率変化検出システムの部
分である光導波管のためのいろいろなポートも備えてい
る。それらポートはサンプリング装置3の後のチャネル
システム4に沿って分布しており、装置3で試料が電解
質緩衝液中に導入されかくしてチャネルシステム4に沿
った異なる位置での測定を可能にする。
は、電界により実施されるのが好ましい。そしてその電
界は、電解質緩衝液のためのリザーバ(reservor)Rと廃
物レセプタクル(receptacle)W各々の電極の間と、試料
のための各々の供給源Sと排出レセプタクルDに備えた
電極の間の電位を切り替えることにより発生させられ
る。
ング装置が拡大して図示してある。それは図1のフロー
インジェクション分析システムの部分であり、そのシス
テムは動電的原理に基づいており、試料の電気泳動分析
を可能にする。サンプリング装置3はキャピラリチャネ
ルシステム4の集積部分でありそしてリザーバRと検出
器5ないし8の後にある廃物レセプタクルWと、そして
分析されるべき試料のための供給レセプタクルSと排出
レセプタクルDと接続している。図3と4では、説明し
易くするために、リザーバRとレセプタクルW、SとD
を図示せず、単に矢印により象徴的に示し、同時にその
矢印はチャネルシステム4における液流の方向を示して
いる。
施態様例が示されている。それはチャネルピース22か
らなり、その一端は電解質緩衝液のためのリザーバRと
接続し、そして他方の縦方向の延長方向では試料の電気
泳動分離が行われるキャピラリチャネルと接続しそして
それは検出器に至り最後に廃物レセプタクルWに至って
いる。サンプリング装置は試料のための供給レセプタク
ルSと接続する供給チャネル23と、排出レセプタクル
Dに至る排出チャネル24に接続している。供給チャネ
ル23と排出チャネル24はチャネルピース2の縦伸長
方向に対して傾斜しており,好ましくはそれらはチャネ
ルピースと一緒になってダブルT構造を形成するように
大体垂直に配置されている。供給チャネルSと排出チャ
ネルDの各々は供給口25と排出口26の各々でチャネ
ルピース中22中に開口している。図3によると、供給
口25と排出口26は、試料体積27が後記で更に詳細
に説明されるように幾何学的に規定されるように、チャ
ネルピース22において縦方向に互いに間隔をおいて配
置されている。排出チャネル24は、そのチャネル25
と排出チャネル26が互いに反対位置に配置されるよう
に、供給チャネル23の縦方向内に直接配置されていて
もよいと理解されるべきである。その場合には、サンプ
リング装置のチャネルは、ダブルT構造を形成しない
が、普通の十字構造で配置されている。
衝液と試料には電界が適用され、その結果、電解質緩衝
液のためのリザーバRと廃物レセプタクルW、及び試料
のための供給源レセプタクルSと排出レセプタクルD各
々において異なる電圧が生じる。例えば、陽電圧をリザ
ーバRにそして陰電圧を廃物レセプタクルWに適用する
と、電解質緩衝液は動電的にリザーバRからキャピラリ
チャネルシステムを通過して廃物レセプタクルWへ移送
される。チャネルピース22中に試料を導入するため
に、例えば、試料のための供給源レセプタクルSは陽電
圧に維持されそして排出レセプタクルDは陰電圧に維持
される。得られた電界では、試料は供給源レセプタクル
Sから排出レセプタクルDへ動電的に移送される。図3
では流れ方向は、矢印S、VとDにより示される。この
方法により、一方の末端上では供給口25により他方の
末端上では排出口26により限定される、チャネルピー
ス22の部分27は、試料で充填される。かくして、サ
ンプリング装置3のチャネルピース22のサンプルを充
填した部分27は、動電的に注入した試料プラグの体積
を規定し、それは図3中ではハッチングにより示されて
いる。換言すれば、試料プラグの体積27は、間隔をお
いた供給口25と排出口26により幾何学的に限定され
る。チャネルピース22と供給チャネル23と排出チャ
ネル24が通常の十字を形成するように、供給口25と
排出口26が対立して位置している上述の場合、交差の
寸法と体積が試料体積を決定する。かくして、その場合
は試料体積はチャネル22、23と24の各々の断面積
のみにより規定される。
R中の実際の試料組成を反映することを保証するために
供給チャネル23と排出チャネル24にわたる電界は、
幾何学的に規定された試料体積27が充填されそして最
も低い電気泳動可動性を持つ試料成分を含有するのに充
分な時限に少なくともわたって維持される。この最小時
限tmin は、等式 tmin =d/μi ・Eにより与えら
れる。この等式では、dは供給口と排出口が間隔をおい
ている距離を表し;μi (その成分iについては後記で
更に詳しく説明する。)は試料の最も遅い成分iの全可
動性であり;Eは電圧差に由来する供給口25と排出口
26を横断する電界強度を表す。
1に電解質緩衝液がリザーバRから廃物レセプタクルW
へ移送されるように、リザーバRと廃物レセプタクルW
の間に電界が設定される。化学分析システムのチャネル
システムが電解質緩衝液により充填された後、チャネル
ピース22中への試料の注入を開始する。その目的のた
めに、試料が供給源レセプタクルSから供給チャネル2
3を通過し、チャネルピース22を介して排出チャネル
24中に、次いで排出レセプタクルD上に動電的に移送
されるように、電界が供給源レセプタクルSと排出レセ
プタクルSの間に設定される。試料が注入されている間
は、リザーバRと廃物レセプタクルWの間の電界のスイ
ッチは切られているか、又は電位は試料が上述の経路だ
けに沿って移送されるように選択されると理解される。
供給口25と排出口26の間の試料体積27が試料で充
填されることを保証するように選択された注入時限の
後、供給源レセプタクルSと排出レセプタクルRの間の
電界のスイッチは切断される。同時にリザーバRと廃物
レセプタクルWの間の電界は、試料体積27中に包含さ
れる試料が検出器と廃物レセプタクルWの方向に移送さ
れるように再び活動化される。試料がチャネルシステム
を移送されている間に、それは電界中で電気泳動的に分
離される。
通過して移送されている間の、試料成分の電解質緩衝液
中への漏れと拡散の問題は、電界が供給源レセプタクル
Sと排出レセプタクルDの間に適用されていないとして
も、一定時間(この一定時間は少なくとも、試料プラグ
内の最も遅い成分iの供給口25から各々の検出器への
移動時間ti の量になる。) にわたり供給口25と排出
口26の各々において電解質緩衝液を供給チャネル23
と排出チャネル24中へ進行させることを可能にするこ
とにより解決される。かくして、試料は供給チャネル2
3と排出チャネル24中へ押し返されそして供給口25
と排出口26を通過して移送される電解質緩衝液中への
制御できない拡散を実質的に防止できる。
離長Lと、試料の最も遅い成分iの全可動性μi とその
経路Lにそって作用する電界強度E’の積の商として定
義され、そしてそれは式 Ti =L/(μi ・E’)に
より与えられる。この等式において分離長L(図1を参
照)は、試料成分iが供給口25と各々の活動化した検
出器5−8の間を移動する距離であり、成分の全可動性
μi は、成分の電気泳動可動性μi,epと試料全体の電気
浸透可動性μeoの和である。検出が実施される時限は試
料の最も遅い成分の移動時間と比較すると非常に短いの
で無視できる。
ャネル24中へ進行させるためには、図3に図示したサ
ンプリング装置の実施態様例では、供給源レセプタクル
Sと排出レセプタクルDの電圧はスイッチオンされ、そ
の電界は電解質緩衝液のためのリザーバRにおける電圧
とは異なり、かくして適当な大きさの電圧差が設定され
る。電解質緩衝液が陽電圧から陰電圧へ移送される場合
は、供給源レセプタクルSと排出レセプタクルDにおけ
る電位は、リザーバRにおける陽電圧に関して陰が選択
される。陰電圧から陽電圧への電解質の移送の場合は、
供給源レセプタクルSと排出レセプタクルDの電位は、
リザーバRに関して陽が選択される。
出レセプタクルDの間の電位差は、得られた電界が少な
くとも約0.1V/cmの量になる電界強度を持つよう
に選択される。
ャネル14中に進行させることができる別の試みは図4
に図示されている。図示したサンプリング装置3の構造
は、基本的には図4中のそれに該当する。それは2本の
サイドチャネル13,14を持つチャネルピース12か
らなる。サイドチャネルは、約5°ないし約175°に
なる角度でチャネルピース12の縦方向の伸長線に関し
て傾斜しているが、しかし、好ましくはチャネルピース
12に関して大体垂直に配置されている。サイドチャネ
ルは、供給口15と排出口16の各々でチャネルピース
中に開口する供給チャネル13と排出チャネル14であ
る。好ましくは供給口15と排出口16はチャネルピー
スで互いに間隔をおいて配置されておりそして試料体積
17を限定する。それらが互いに間隔を置いている距離
は、典型的には約0μmないし約3cm、最も好ましく
は0μmないし約3mmであり、その場合値0は供給口
と排出口が互いに対立して配置されていることを示す。
チャネルピース12は、電解質緩衝液のためのリザーバ
Rと廃物レセプタクルWと連結している。供給チャネル
13は試料のための供給源レセプタクルSと連結してお
り、一方排出チャネル14は排出レセプタクルDと連結
している。
ステムの部分であって基本的には図3に図示したサンプ
リング装置と同様に機能する。しかし、電解質緩衝液が
供給チャネル13と排出チャネル14中に進行できるよ
うに、これら二つのチャネルの抵抗を減少させることが
できる。特に供給チャネル13と排出チャネル14の各
々は、電解質緩衝液に関して、電解質チャネル12の流
れるための抵抗より約5%低い流れるための抵抗を持
つ。驚くべきことに、供給チャネル13と排出チャネル
14の流れるための抵抗の減少は、試料成分が供給口1
5と排出口16の各々を通過して移送されている時に、
その試料成分の電解質緩衝液中への漏れと拡散の増加を
招かない。その代わりに、適用した電界が電解質緩衝液
のチャネル13と14中への対流を起こすはずがない時
ですら、サイドチャネル13と14の流れるための抵抗
の減少はその対流を起こす。かくして、試料成分の漏れ
と拡散は顕著に減少し、検出されたシグナルのノイズは
減少する。その結果、検出限界である分析システムの感
度は増加する。供給チャネル13と排出チャネル14の
流れるための抵抗は、それら各々のチャネルの長さを減
少させることにより又はそれら各々の巾wを拡大させる
ことにより減少させることができる。供給チャネル13
と排出チャネル14の流れるための抵抗の減少を、供給
口15と排出口16の巾pより少なくとも約2倍大きい
巾をそれらチャネルに与えることにより実施するのが好
ましい。そのようにすると供給チャネル13と排出チャ
ネル14の各々はほぼビンの形をしていて、ビンの頸が
供給口15又は排出口16になる。
4が直接チャネルピース12中に注いで、それらの末端
(この末端はチャネルピース12に直ぐ隣接してい
る。)が各々の供給口15と排出口16になっていて、
そこからチャネルが各々の中間ピース13′と14′に
わたってチャネルの口巾pからチャネルの最終口巾wへ
次第に増加し、供給口15と排出口16も縦方向延長l
を持つようになっていることも可能である。これらの縦
方向延長lは、少なくとも供給口15と排出口16各々
の巾pに該当する。供給口15と排出口16の巾pが縦
方向延長lに沿って一定であると、有利である。好まし
い実施態様では、供給口15と排出口16の巾pが、そ
れらがチャネルピース12の巾bに大体該当するように
選択される。
ルシステムの深さに該当すべきである。)と供給チャネ
ル13と排出チャネル14の深さは典型的には約0.1
μmないし約100μmである。ビンの頸様の供給口1
5と排出口16の深さはほぼそれらチャネルの深さに該
当する。
析チップの部分である実施態様例を参考にして説明し
た。それは、キャピラリ管から製造される電気泳動化学
分析の部分である、キャピラリ管の配置でもあり得る
が、サンプリング装置はガラス、半導体材料、又は適当
なポリマー中に設定されているキャピラリチャネルシス
テム中へ組み込まれる。供給チャネルと排出チャネルと
各々の供給口と排出口からなるチャネルシステムは、平
面状の基体中にエッチング又はミクロ機械加工又は注型
(ポリマー基体の場合)、又は他の方法で設置されるの
が有利である。その製造のために最も適当なものは、半
導体製造又はミクロ機械素子でよく確立された技術であ
る。
注入でもって注入した試料の体積を幾何学的に規定する
構造上の組み合わせは、試料体積の制御を信頼できるも
のにしそして試料体積内に含有される試料の組成がリザ
ーバ中の試料の原組成を反映することを保証できるよう
にする。本発明に従う、方法とサンプリング装置の別の
改良は、試料成分の電解質緩衝液中への無制御の漏れと
拡散の顕著な減少を可能にする。かくして、依然として
起きている電解質緩衝液中の試料の濃縮は試料の原濃度
の3%以下に止まる。この方法により、検出された電気
泳動シグナルのノイズは減少しそして検出限界は増加す
る。
を重ねたミクロカラム分離装置の蓋の上からの線図
図
の拡大図
Claims (18)
- 【請求項1】 電解液緩衝液と多少濃縮された試料がキ
ャピラリチャネルシステムを通過して送られ、そして異
なる電気泳動可動性を持つ成分からなる上記試料がサン
プリング装置中へ試料プラグとして注入され、そのサン
プリング装置は少なくとも電解質緩衝液のためのチャネ
ルと上記試料のための供給チャネルと排出チャネルから
なり、上記電解質チャネルと、上記試料のための供給チ
ャネルと排出チャネルは互いに交わり、そして上記供給
チャネルと排出チャネルの各々は上記電解質チャネルに
対して傾斜しておりそしてその各々の供給口と排出口で
上記電解質チャネル中に放流しており、上記供給口と上
記排出口との間の距離は試料体積を幾何学的に決めてい
る、ミクロカラム分離技術、特にキャピラリ電気泳動
(CE)における試料導入を制御するための方法であっ
て;上記試料の最も低い電気泳動可動性を持つ最も遅い
成分が上記幾何学的に定義される体積内に含有されてい
るのに充分に長い程度に少なくともわたる時限にわたり
上記試料供給チャネルと排出チャネルにわたり電界を設
けることにより、上記試料プラグの電解質チャネル中へ
の注入が動電的に実施されることを特徴とする方法。 - 【請求項2】 上記時限が、式tmin =d/(μi ・
E)(式中、dは上記供給口と排出口の間の距離を表
し、μi は上記の最も遅い成分の全動電的可動性であり
そしてEは供給源チャネルと排出チャネル間にわたる電
界強度を表す。)により定義される時間に少なくとも相
当する請求項1記載の方法。 - 【請求項3】 上記電解質緩衝液と上記試料が動電的に
送られ、そして更に上記試料プラグの注入の後直ちに上
記電解質緩衝液が上記供給チャネル中と上記排出チャネ
ル中に、上記各々の供給口と排出口において一定時限に
わたり進入するようにし、そしてその一定時限は少なく
とも、試料プラグ内の最も遅い成分の供給口から検出器
への移動時間になり、かくして上記試料を上記の各々の
供給チャネルと排出チャネル中に押し戻しそして上記試
料が、上記供給口と排出口を通過して送られる上記電解
質緩衝液中へ制御できないで拡散するのを実質的に防止
する請求項1又は2記載の方法。 - 【請求項4】 上記時限内に上記試料供給チャネルと排
出チャネル内の上記試料が電圧を受け、それは上記電解
質緩衝液のためのリザーバにおける電圧とは異なり、か
くして上記電解質緩衝液が上記供給チャネル内と上記排
出チャネル内へ進入できるように電圧を設定してある請
求項3記載の方法。 - 【請求項5】 上記電圧の差異が、形成された電界強度
が少なくとも0.1V/cmになるように選択してある
請求項4記載の方法。 - 【請求項6】 上記電解質緩衝液が、上記供給チャネル
と排出チャネル内を流れるための抵抗を減らすことによ
り、上記供給チャネルと排出チャネル内へ進入できるよ
うにしてある請求項3記載の方法。 - 【請求項7】 上記供給チャネルと排出チャネルの長さ
を減らすか又は各々の巾を増やすかすることのいずれか
により、流れるための上記抵抗を減少する請求項6記載
の方法。 - 【請求項8】 上記供給口と排出口より少なくとも約2
倍大きい巾を上記供給チャネルと排出チャネルの各々に
与えることにより、上記供給チャネルと排出チャネルの
流れるための抵抗を減少する請求項7記載の方法。 - 【請求項9】 上記供給チャネルと排出チャネルの上記
供給口と排出口が、少なくとも上記供給口と排出口の約
上記巾に該当する縦方向の伸長度を持ち、そしてその上
記巾が上記供給口と排出口の伸長に沿って大体一定に保
たれている請求項9記載の方法。 - 【請求項10】 上記供給口と排出口の上記巾が、それ
らが上記チャネルピースの巾に大体該当するように選択
されている請求項9記載の方法。 - 【請求項11】 上記供給チャネルと排出チャネルを各
々の口部と共に持つキャピラリチャネルの上記システム
が、ガラス、又は半導体材料、又は適当なポリマー、又
は同様のものから造られた平面状の基体中に、エッチン
グ又はミクロ機械加工又は他の方法で設置してある前記
の請求項いずれかに記載の方法。 - 【請求項12】 電解質緩衝液のためのチャネル(1
2;22)と、試料のための供給チャネル(13;2
3)と排出チャネル(14;24)と試料を上記体積中
に動電的に注入するための手段からなるサンプリング装
置であって、供給チャネル(13;23)と排出チャネ
ル(14;24)の各々は各々の供給口(15;25)
と排出口(16;26)において上記電解質チャネル
(12;22)中に開口し、それらの口〔(15;2
5)と(16;26)〕は試料体積(17;27)が幾
何学的に規定されるように互いに関して配置され、上記
供給チャネル(13;23)と排出チャネル(14;2
4)の各々は上記チャネルピース(12;22)の縦方
向の伸長線に対して傾いているサンプリング装置におい
て;その上記供給源チャネル(13;23)と上記排出
チャネル(14;24)の各々が、上記電解質緩衝液に
関して流れるための抵抗を持ち、それは上記電解質チャ
ネル(13;23)の流れるための各々の抵抗より約5
%少ない流れるための抵抗を持つことを特徴とするサン
プリング装置。 - 【請求項13】 上記供給チャネル(13;23)と排
出チャネル(14;24)の各々が、上記供給口(1
5;25)と排出口(16;26)の巾より少なくとも
約2倍大きい巾を持つ請求項12記載のサンプリング装
置。 - 【請求項14】 供給チャネル(13;23)と排出チ
ャネル(14;24)各々の上記供給口(15;25)
と排出口(16;26)が、上記供給口(15;25)
と排出口(14;24)の少なくとも上記巾(p)に大
体該当する縦方向の伸長長(l)を持ち、そしてその上
記巾(w)が上記供給口(15;25)と排出口(1
6;26)の伸長線に沿って大体一定である請求項13
記載のサンプリング装置。 - 【請求項15】 上記供給口(15;25)と排出口
(16;26)の上記巾(p)が、上記チャネルピース
(12;22)の巾(b)に大体該当する請求項14記
載のサンプリング装置。 - 【請求項16】 チャネルが約0.1μmないし約10
0μmの深さを持つ請求項15記載のサンプリング装
置。 - 【請求項17】 上記供給口(15;25)と上記排出
口(16;26)が約0μmないし約3cm、好ましく
は0μmないし3mmまでの距離で互いに離れて配置し
てある請求項12ないし16のいずれかに記載のサンプ
リング装置。 - 【請求項18】 上記供給チャネル(13;23)と上
記排出チャネル(14;24)各々が、それぞれが約5
°ないし約175°、好ましくは約90°になる角度で
上記チャネルピース(12;22)の上記縦方向の伸長
線に関して傾斜しておりそして更に上記供給チャネル
(13;23)と上記排出チャネル(14;24)が互
いに大体平行に伸長している請求項12ないし17記載
のサンプリング装置。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP93810272A EP0620432B1 (en) | 1993-04-15 | 1993-04-15 | Method for controlling sample introduction in microcolumn separation techniques and sampling device |
DE93810272.0 | 1993-04-15 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0712777A true JPH0712777A (ja) | 1995-01-17 |
JP3656165B2 JP3656165B2 (ja) | 2005-06-08 |
Family
ID=8214951
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP10197794A Expired - Lifetime JP3656165B2 (ja) | 1993-04-15 | 1994-04-15 | ミクロカラム分離技術における試料導入を制御するための方法及びその方法を使用するサンプリング装置 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (10) | US6280589B1 (ja) |
EP (2) | EP1296134B1 (ja) |
JP (1) | JP3656165B2 (ja) |
DE (1) | DE69333601T2 (ja) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000008453A1 (fr) * | 1998-08-06 | 2000-02-17 | Hitachi, Ltd. | Chargeuse d'echantillons, source d'ions et analyseur de masse avec lesquels on utilise la chargeuse |
WO2000014527A1 (fr) * | 1998-09-02 | 2000-03-16 | Sankyo Company, Limited | Systeme d'electrophorese |
JP2002370198A (ja) * | 2001-06-12 | 2002-12-24 | Techno Quartz Kk | マイクロチャンネル構造体およびその製造方法 |
JP2003534532A (ja) * | 2000-02-11 | 2003-11-18 | アクララ バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | サンプル注入器を備えるマイクロ流体デバイスおよび方法 |
JP2005274512A (ja) * | 2004-03-26 | 2005-10-06 | Aida Eng Ltd | 電気泳動用マイクロチップ |
Families Citing this family (153)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6176962B1 (en) | 1990-02-28 | 2001-01-23 | Aclara Biosciences, Inc. | Methods for fabricating enclosed microchannel structures |
EP1296134B1 (en) * | 1993-04-15 | 2013-05-29 | Bayer Intellectual Property GmbH | Sampling device and its use for controlling sample introduction in microcolumn separation techniques |
US6001229A (en) * | 1994-08-01 | 1999-12-14 | Lockheed Martin Energy Systems, Inc. | Apparatus and method for performing microfluidic manipulations for chemical analysis |
US5630924A (en) | 1995-04-20 | 1997-05-20 | Perseptive Biosystems, Inc. | Compositions, methods and apparatus for ultrafast electroseparation analysis |
EP0909385B1 (en) * | 1996-06-28 | 2008-09-10 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method of transporting fluid samples within a microfluidic channel |
US6110343A (en) | 1996-10-04 | 2000-08-29 | Lockheed Martin Energy Research Corporation | Material transport method and apparatus |
US6447727B1 (en) * | 1996-11-19 | 2002-09-10 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic systems |
US5954931A (en) * | 1997-01-24 | 1999-09-21 | Motorola, Inc. | Electrophoresis apparatus and method involving parallel channels |
US6056859A (en) * | 1997-02-12 | 2000-05-02 | Lockheed Martin Energy Research Corporation | Method and apparatus for staining immobilized nucleic acids |
EP0972082A4 (en) * | 1997-04-04 | 2007-04-25 | Caliper Life Sciences Inc | BIOCHEMICAL ANALYZERS OPERATING IN CLOSED LOOP |
AU727083B2 (en) * | 1997-04-25 | 2000-11-30 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries |
AU747505B2 (en) * | 1997-04-25 | 2002-05-16 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries |
US5976336A (en) * | 1997-04-25 | 1999-11-02 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries |
WO1998049344A1 (en) | 1997-04-28 | 1998-11-05 | Lockheed Martin Energy Research Corporation | Method and apparatus for analyzing nucleic acids |
US6090251A (en) | 1997-06-06 | 2000-07-18 | Caliper Technologies, Inc. | Microfabricated structures for facilitating fluid introduction into microfluidic devices |
US5900130A (en) * | 1997-06-18 | 1999-05-04 | Alcara Biosciences, Inc. | Method for sample injection in microchannel device |
US6685809B1 (en) | 1999-02-04 | 2004-02-03 | Ut-Battelle, Llc | Methods for forming small-volume electrical contacts and material manipulations with fluidic microchannels |
DE19815882A1 (de) * | 1998-04-08 | 1999-10-14 | Fuhr Guenther | Verfahren und Vorrichtung zur Manipulierung von Mikropartikeln in Fluidströmungen |
US6306590B1 (en) * | 1998-06-08 | 2001-10-23 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic matrix localization apparatus and methods |
US6062261A (en) * | 1998-12-16 | 2000-05-16 | Lockheed Martin Energy Research Corporation | MicrofluIdic circuit designs for performing electrokinetic manipulations that reduce the number of voltage sources and fluid reservoirs |
CA2371767C (en) * | 1999-02-18 | 2007-05-08 | Toyo Kohan Co., Ltd. | Micro-chip for chemical reaction |
EP1163052B1 (en) | 1999-02-23 | 2010-06-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Manipulation of microparticles in microfluidic systems |
US6322683B1 (en) * | 1999-04-14 | 2001-11-27 | Caliper Technologies Corp. | Alignment of multicomponent microfabricated structures |
US6270641B1 (en) * | 1999-04-26 | 2001-08-07 | Sandia Corporation | Method and apparatus for reducing sample dispersion in turns and junctions of microchannel systems |
DE19949538C2 (de) * | 1999-10-14 | 2001-08-23 | Karlsruhe Forschzent | Mikrokapillare und Verfahren zu deren Herstellung |
US6432290B1 (en) | 1999-11-26 | 2002-08-13 | The Governors Of The University Of Alberta | Apparatus and method for trapping bead based reagents within microfluidic analysis systems |
CA2290731A1 (en) * | 1999-11-26 | 2001-05-26 | D. Jed Harrison | Apparatus and method for trapping bead based reagents within microfluidic analysis system |
US6790328B2 (en) | 2000-01-12 | 2004-09-14 | Ut-Battelle, Llc | Microfluidic device and method for focusing, segmenting, and dispensing of a fluid stream |
US20040108207A1 (en) * | 2000-02-11 | 2004-06-10 | Aclara Biosciences, Inc. | Injection and separation system and method employing transient isotachophoretic stacking |
US6685813B2 (en) | 2000-02-11 | 2004-02-03 | Aclara Biosciences, Inc. | Tandem isotachophoresis/zone electrophoresis method and system |
WO2001061335A2 (en) * | 2000-02-17 | 2001-08-23 | Evotec Oai Ag | Method and device for bias-free electrokinetic sample introduction and separation |
US6733645B1 (en) | 2000-04-18 | 2004-05-11 | Caliper Technologies Corp. | Total analyte quantitation |
DE10041853C1 (de) * | 2000-08-25 | 2002-02-28 | Gmd Gmbh | Konfigurierbares Mikroreaktornetzwerk |
EP1334347A1 (en) * | 2000-09-15 | 2003-08-13 | California Institute Of Technology | Microfabricated crossflow devices and methods |
US6939451B2 (en) | 2000-09-19 | 2005-09-06 | Aclara Biosciences, Inc. | Microfluidic chip having integrated electrodes |
US20020112959A1 (en) * | 2000-10-04 | 2002-08-22 | Qifeng Xue | Unbiased sample injection for microfluidic applications |
US20050011761A1 (en) * | 2000-10-31 | 2005-01-20 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic methods, devices and systems for in situ material concentration |
US20030057092A1 (en) * | 2000-10-31 | 2003-03-27 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic methods, devices and systems for in situ material concentration |
US6681788B2 (en) | 2001-01-29 | 2004-01-27 | Caliper Technologies Corp. | Non-mechanical valves for fluidic systems |
WO2002070118A2 (en) * | 2001-02-09 | 2002-09-12 | Microchem Solutions | Apparatus and method for small-volume fluid manipulation and transportation |
US20020168780A1 (en) * | 2001-02-09 | 2002-11-14 | Shaorong Liu | Method and apparatus for sample injection in microfabricated devices |
US7670559B2 (en) * | 2001-02-15 | 2010-03-02 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic systems with enhanced detection systems |
DE60234572D1 (de) * | 2001-02-15 | 2010-01-14 | Caliper Life Sciences Inc | Mikrofluidische systeme mit verbesserten detektionssystemen |
US7867776B2 (en) * | 2001-03-02 | 2011-01-11 | Caliper Life Sciences, Inc. | Priming module for microfluidic chips |
US7150999B1 (en) | 2001-03-09 | 2006-12-19 | Califer Life Sciences, Inc. | Process for filling microfluidic channels |
US7723123B1 (en) * | 2001-06-05 | 2010-05-25 | Caliper Life Sciences, Inc. | Western blot by incorporating an affinity purification zone |
US20020187564A1 (en) * | 2001-06-08 | 2002-12-12 | Caliper Technologies Corp. | Microfluidic library analysis |
US6977163B1 (en) | 2001-06-13 | 2005-12-20 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for performing multiple reactions by interfacial mixing |
ATE465811T1 (de) * | 2001-07-13 | 2010-05-15 | Caliper Life Sciences Inc | Methode zur trennung von komponenten eines gemisches |
US7060171B1 (en) | 2001-07-31 | 2006-06-13 | Caliper Life Sciences, Inc. | Methods and systems for reducing background signal in assays |
US6803568B2 (en) * | 2001-09-19 | 2004-10-12 | Predicant Biosciences, Inc. | Multi-channel microfluidic chip for electrospray ionization |
WO2003038424A1 (en) * | 2001-11-02 | 2003-05-08 | Imperial College Innovations Limited | Capillary electrophoresis microchip, system and method |
US7247274B1 (en) | 2001-11-13 | 2007-07-24 | Caliper Technologies Corp. | Prevention of precipitate blockage in microfluidic channels |
US7105810B2 (en) * | 2001-12-21 | 2006-09-12 | Cornell Research Foundation, Inc. | Electrospray emitter for microfluidic channel |
CA2477702A1 (en) * | 2002-03-05 | 2003-09-18 | Caliper Life Sciences, Inc. | Mixed mode microfluidic systems abstract of the disclosure |
US7419784B2 (en) * | 2002-04-02 | 2008-09-02 | Dubrow Robert S | Methods, systems and apparatus for separation and isolation of one or more sample components of a sample biological material |
US20030217923A1 (en) * | 2002-05-24 | 2003-11-27 | Harrison D. Jed | Apparatus and method for trapping bead based reagents within microfluidic analysis systems |
US7161356B1 (en) | 2002-06-05 | 2007-01-09 | Caliper Life Sciences, Inc. | Voltage/current testing equipment for microfluidic devices |
US20050238506A1 (en) * | 2002-06-21 | 2005-10-27 | The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. | Electromagnetically-actuated microfluidic flow regulators and related applications |
US7867193B2 (en) * | 2004-01-29 | 2011-01-11 | The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. | Drug delivery apparatus |
JP3866183B2 (ja) * | 2002-11-01 | 2007-01-10 | Asti株式会社 | バイオチップ |
US7024921B2 (en) * | 2002-11-06 | 2006-04-11 | Sutton Stephen P | Capillary devices for determination of surface characteristics and contact angles and methods for using same |
WO2004061085A2 (en) | 2002-12-30 | 2004-07-22 | The Regents Of The University Of California | Methods and apparatus for pathogen detection and analysis |
SE0300454D0 (sv) * | 2003-02-19 | 2003-02-19 | Aamic Ab | Nozzles for electrospray ionization and methods of fabricating them |
US7007710B2 (en) * | 2003-04-21 | 2006-03-07 | Predicant Biosciences, Inc. | Microfluidic devices and methods |
US7425700B2 (en) * | 2003-05-22 | 2008-09-16 | Stults John T | Systems and methods for discovery and analysis of markers |
US20040236603A1 (en) * | 2003-05-22 | 2004-11-25 | Biospect, Inc. | System of analyzing complex mixtures of biological and other fluids to identify biological state information |
US20040259269A1 (en) * | 2003-06-20 | 2004-12-23 | Groton Biosystems | Method for detection of molecular species in a crude sample using capillary electrophoresis |
US7169599B2 (en) * | 2003-06-20 | 2007-01-30 | Groton Biosystems, Llc | Fluid interface for bioprocessor systems |
US7341652B2 (en) * | 2003-06-20 | 2008-03-11 | Groton Biosytems, Llc | Stationary capillary electrophoresis system |
US20040260414A1 (en) * | 2003-06-20 | 2004-12-23 | Groton Biosystems, Llc | Method and apparatus for operating an automated biomolecular preparation system |
US7601545B2 (en) * | 2003-06-20 | 2009-10-13 | Groton Biosystems, Llc | Automated macromolecule sample preparation system |
US7537807B2 (en) | 2003-09-26 | 2009-05-26 | Cornell University | Scanned source oriented nanofiber formation |
US7867194B2 (en) | 2004-01-29 | 2011-01-11 | The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. | Drug delivery apparatus |
US20050244973A1 (en) * | 2004-04-29 | 2005-11-03 | Predicant Biosciences, Inc. | Biological patterns for diagnosis and treatment of cancer |
US7799553B2 (en) * | 2004-06-01 | 2010-09-21 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated integrated DNA analysis system |
US20060022130A1 (en) * | 2004-07-29 | 2006-02-02 | Predicant Biosciences, Inc., A Delaware Corporation | Microfluidic devices and methods with integrated electrical contact |
EP1789437A4 (en) * | 2004-07-30 | 2008-11-05 | Sinai School Medicine | INHIBITORS OF NPC1L1 AND NPC1L1 AND METHODS OF USE THEREOF |
US7211184B2 (en) * | 2004-08-04 | 2007-05-01 | Ast Management Inc. | Capillary electrophoresis devices |
CN102759466A (zh) | 2004-09-15 | 2012-10-31 | 英特基因有限公司 | 微流体装置 |
US20060060769A1 (en) * | 2004-09-21 | 2006-03-23 | Predicant Biosciences, Inc. | Electrospray apparatus with an integrated electrode |
US7591883B2 (en) * | 2004-09-27 | 2009-09-22 | Cornell Research Foundation, Inc. | Microfiber supported nanofiber membrane |
US7968287B2 (en) | 2004-10-08 | 2011-06-28 | Medical Research Council Harvard University | In vitro evolution in microfluidic systems |
WO2006098700A1 (en) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Nanyang Technological University | Microfluidic sensor for interfacial tension measurement and method for measuring interfacial tension |
US20070017812A1 (en) * | 2005-03-30 | 2007-01-25 | Luc Bousse | Optimized Sample Injection Structures in Microfluidic Separations |
US8206974B2 (en) | 2005-05-19 | 2012-06-26 | Netbio, Inc. | Ruggedized apparatus for analysis of nucleic acid and proteins |
ES2301284B1 (es) * | 2005-07-15 | 2009-05-20 | Consejo Superior Inveti. Cientificas | Dispositivo y procedimiento de mejora para el analisis cuantitativo en electroforesis capilar. |
US20100064780A1 (en) * | 2005-07-27 | 2010-03-18 | Howard A Stone | Pressure Determination In Microfludic Systems |
EP1754536B1 (en) * | 2005-08-16 | 2008-12-24 | Agilent Technologies, Inc. | Fluid injection system |
US7749365B2 (en) * | 2006-02-01 | 2010-07-06 | IntegenX, Inc. | Optimized sample injection structures in microfluidic separations |
EP1979079A4 (en) | 2006-02-03 | 2012-11-28 | Integenx Inc | MICROFLUIDIC DEVICES |
US7766033B2 (en) * | 2006-03-22 | 2010-08-03 | The Regents Of The University Of California | Multiplexed latching valves for microfluidic devices and processors |
CN102599875B (zh) * | 2006-03-22 | 2015-03-11 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 医疗器械系统 |
US9074242B2 (en) | 2010-02-12 | 2015-07-07 | Raindance Technologies, Inc. | Digital analyte analysis |
US7846314B2 (en) * | 2006-05-11 | 2010-12-07 | Agilent Technologies , Inc | Handling a plurality of samples |
EP2530168B1 (en) | 2006-05-11 | 2015-09-16 | Raindance Technologies, Inc. | Microfluidic Devices |
DE102006033871A1 (de) * | 2006-07-21 | 2008-01-24 | Patent-Treuhand-Gesellschaft für elektrische Glühlampen mbH | Entladungslampe mit Zündhilfselement |
US8841116B2 (en) * | 2006-10-25 | 2014-09-23 | The Regents Of The University Of California | Inline-injection microdevice and microfabricated integrated DNA analysis system using same |
WO2008086893A1 (en) | 2007-01-17 | 2008-07-24 | Agilent Technologies, Inc. | Microfluidic chip with lateral opening for fluid introduction |
WO2008094672A2 (en) * | 2007-01-31 | 2008-08-07 | Charles Stark Draper Laboratory, Inc. | Membrane-based fluid control in microfluidic devices |
WO2008115626A2 (en) | 2007-02-05 | 2008-09-25 | Microchip Biotechnologies, Inc. | Microfluidic and nanofluidic devices, systems, and applications |
US8772046B2 (en) | 2007-02-06 | 2014-07-08 | Brandeis University | Manipulation of fluids and reactions in microfluidic systems |
AU2008236691B2 (en) | 2007-04-04 | 2014-08-07 | Ande Corporation | Integrated nucleic acid analysis |
US8592221B2 (en) | 2007-04-19 | 2013-11-26 | Brandeis University | Manipulation of fluids, fluid components and reactions in microfluidic systems |
JP5559967B2 (ja) * | 2007-04-27 | 2014-07-23 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 電気泳動チップ、電気泳動装置およびキャピラリー電気泳動法による試料の分析方法 |
US9410924B2 (en) * | 2007-05-18 | 2016-08-09 | Ce-Mate B.V. | Test chip with plug for measuring the concentration of an analyte in a liquid, housing for test chip and socket for plug |
WO2009015296A1 (en) | 2007-07-24 | 2009-01-29 | The Regents Of The University Of California | Microfabricated dropley generator |
EP2031382B1 (en) * | 2007-08-29 | 2010-12-29 | Agilent Technologies, Inc. | On-chip analysis of covalently labelled sample species |
EP2011573B1 (en) | 2007-11-05 | 2010-07-21 | Agilent Technologies, Inc. | Freezing a microfluidic chip |
US7740747B2 (en) * | 2007-12-28 | 2010-06-22 | General Electric Company | Injection method for microfluidic chips |
WO2009108260A2 (en) | 2008-01-22 | 2009-09-03 | Microchip Biotechnologies, Inc. | Universal sample preparation system and use in an integrated analysis system |
US20090250347A1 (en) * | 2008-04-03 | 2009-10-08 | Protea Biosciences, Inc. | Microfluidic devices & processes for electrokinetic transport |
US20110023976A1 (en) * | 2008-04-03 | 2011-02-03 | Agilent Technologies, Inc. | Fluidic device with planar coupling member |
US20090250345A1 (en) * | 2008-04-03 | 2009-10-08 | Protea Biosciences, Inc. | Microfluidic electroelution devices & processes |
US20100047122A1 (en) * | 2008-06-25 | 2010-02-25 | Groton Biosystems, Llc | System and method for automated sterile sampling of fluid from a vessel |
US20100043883A1 (en) * | 2008-06-25 | 2010-02-25 | Groton Biosystems, Llc | System and method for automated sterile sampling of fluid from a vessel |
EP4047367A1 (en) | 2008-07-18 | 2022-08-24 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Method for detecting target analytes with droplet libraries |
WO2010077322A1 (en) | 2008-12-31 | 2010-07-08 | Microchip Biotechnologies, Inc. | Instrument with microfluidic chip |
US8709356B2 (en) * | 2009-04-10 | 2014-04-29 | Canon U.S. Life Sciences, Inc. | Systems and methods for minimization or elimination of diffusion effects in a microfluidic system |
CN102459565A (zh) | 2009-06-02 | 2012-05-16 | 尹特根埃克斯有限公司 | 具有隔膜阀的流控设备 |
KR20120031218A (ko) | 2009-06-05 | 2012-03-30 | 인터젠엑스 인크. | 만능 샘플 제조 시스템 및 집적 분석 시스템에서의 사용 |
JP2012529908A (ja) | 2009-06-15 | 2012-11-29 | ネットバイオ・インコーポレーテッド | 法医学的dnaの定量化のための改善された方法 |
WO2010151776A2 (en) | 2009-06-26 | 2010-12-29 | President And Fellows Of Harvard College | Fluid injection |
US8584703B2 (en) | 2009-12-01 | 2013-11-19 | Integenx Inc. | Device with diaphragm valve |
JP5551092B2 (ja) * | 2010-01-19 | 2014-07-16 | アークレイ株式会社 | 電気泳動を用いた試料の分析方法及びその利用 |
US9399797B2 (en) | 2010-02-12 | 2016-07-26 | Raindance Technologies, Inc. | Digital analyte analysis |
WO2011106098A2 (en) | 2010-02-25 | 2011-09-01 | Advanced Microlabs, Llc | Microfluidic interface for a microchip |
US8512538B2 (en) | 2010-05-28 | 2013-08-20 | Integenx Inc. | Capillary electrophoresis device |
EP2606154B1 (en) | 2010-08-20 | 2019-09-25 | Integenx Inc. | Integrated analysis system |
US8763642B2 (en) | 2010-08-20 | 2014-07-01 | Integenx Inc. | Microfluidic devices with mechanically-sealed diaphragm valves |
WO2012030921A2 (en) * | 2010-08-31 | 2012-03-08 | Canon U.S. Life Sciences, Inc. | Method, devices, and systems for fluid mixing and chip interface |
US8277659B2 (en) * | 2010-09-23 | 2012-10-02 | Battelle Memorial Institute | Microchip capillary electrophoresis absent electrokinetic injection |
JP6162047B2 (ja) | 2011-02-02 | 2017-07-12 | ザ チャールズ スターク ドレイパー ラボラトリー インク | 薬物送達装置 |
EP3412778A1 (en) | 2011-02-11 | 2018-12-12 | Raindance Technologies, Inc. | Methods for forming mixed droplets |
WO2012112804A1 (en) | 2011-02-18 | 2012-08-23 | Raindance Technoligies, Inc. | Compositions and methods for molecular labeling |
WO2012167142A2 (en) | 2011-06-02 | 2012-12-06 | Raindance Technolgies, Inc. | Enzyme quantification |
US8658430B2 (en) | 2011-07-20 | 2014-02-25 | Raindance Technologies, Inc. | Manipulating droplet size |
US10865440B2 (en) | 2011-10-21 | 2020-12-15 | IntegenX, Inc. | Sample preparation, processing and analysis systems |
US20150136604A1 (en) | 2011-10-21 | 2015-05-21 | Integenx Inc. | Sample preparation, processing and analysis systems |
US9103502B2 (en) * | 2012-04-19 | 2015-08-11 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method and device for controlled laminar flow patterning within a channel |
JP6047352B2 (ja) * | 2012-09-20 | 2016-12-21 | 株式会社エンプラス | 流体取扱装置 |
US11901041B2 (en) | 2013-10-04 | 2024-02-13 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Digital analysis of nucleic acid modification |
CN110560187B (zh) | 2013-11-18 | 2022-01-11 | 尹特根埃克斯有限公司 | 用于样本分析的卡盒和仪器 |
JP6684214B2 (ja) * | 2013-12-09 | 2020-04-22 | テキサス テック ユニヴァーシティー システムTexas Tech University System | 流体の高スループット分析のためのスマートフォンベースの多重化粘度計 |
US9944977B2 (en) | 2013-12-12 | 2018-04-17 | Raindance Technologies, Inc. | Distinguishing rare variations in a nucleic acid sequence from a sample |
WO2015167990A1 (en) * | 2014-04-29 | 2015-11-05 | Battelle Memorial Institute | Microfluidic sample injector absent electrokinetic injection |
WO2015179098A1 (en) | 2014-05-21 | 2015-11-26 | Integenx Inc. | Fluidic cartridge with valve mechanism |
CA2963005A1 (en) * | 2014-10-01 | 2016-04-07 | University Of Tasmania | Extraction and concentration device |
EP3552690A1 (en) | 2014-10-22 | 2019-10-16 | IntegenX Inc. | Systems and methods for sample preparation, processing and analysis |
US10564121B2 (en) * | 2015-11-26 | 2020-02-18 | Vladislav Dolnik | Device and method for separation and analysis of trace and ultra-trace ionogenic compounds by isotachophoresis and zone electrophoresis on chip |
US10564122B1 (en) * | 2016-10-21 | 2020-02-18 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Electrophoretic soil nutrient sensor for agriculture |
CN114651058B (zh) | 2019-08-05 | 2023-07-28 | 禧尔公司 | 用于样品制备、数据生成和蛋白质冠分析的系统和方法 |
GB2598113A (en) | 2020-08-18 | 2022-02-23 | Agilent Technologies Inc | Fluidically coupling with elastic structure deformable by sealing element |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5164598A (en) | 1985-08-05 | 1992-11-17 | Biotrack | Capillary flow device |
US5144139A (en) | 1985-08-05 | 1992-09-01 | Biotrack, Inc. | Capillary flow device |
US4963498A (en) | 1985-08-05 | 1990-10-16 | Biotrack | Capillary flow device |
GB2191110B (en) | 1986-06-06 | 1989-12-06 | Plessey Co Plc | Chromatographic separation device |
US4908112A (en) * | 1988-06-16 | 1990-03-13 | E. I. Du Pont De Nemours & Co. | Silicon semiconductor wafer for analyzing micronic biological samples |
US5298134A (en) | 1988-08-24 | 1994-03-29 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Capillary device |
EP0356160A3 (en) | 1988-08-24 | 1991-09-11 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Capillary device |
EP0376611A3 (en) | 1988-12-30 | 1992-07-22 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Electrophoretic system |
US4941958A (en) * | 1989-03-08 | 1990-07-17 | Westinghouse Electric Corp. | Device and method for detecting ionic components in solution |
US5750015A (en) | 1990-02-28 | 1998-05-12 | Soane Biosciences | Method and device for moving molecules by the application of a plurality of electrical fields |
SE470347B (sv) | 1990-05-10 | 1994-01-31 | Pharmacia Lkb Biotech | Mikrostruktur för vätskeflödessystem och förfarande för tillverkning av ett sådant system |
DE59105165D1 (de) | 1990-11-01 | 1995-05-18 | Ciba Geigy Ag | Vorrichtung zur Aufbereitung oder Vorbereitung von flüssigen Proben für eine chemische Analyse. |
EP0497077B1 (de) | 1991-01-28 | 1996-07-17 | Ciba-Geigy Ag | Vorrichtung zur Vorbereitung von Proben insbesondere für Analysezwecke |
DE59108591D1 (de) | 1991-12-06 | 1997-04-10 | Ciba Geigy Ag | Elektrophoretische Trennvorrichtung und elektrophoretisches Trennverfahren |
US5639423A (en) | 1992-08-31 | 1997-06-17 | The Regents Of The University Of Calfornia | Microfabricated reactor |
US5288463A (en) | 1992-10-23 | 1994-02-22 | Eastman Kodak Company | Positive flow control in an unvented container |
JPH06265447A (ja) | 1993-03-16 | 1994-09-22 | Hitachi Ltd | 微量反応装置およびこれを使用する微量成分測定装置 |
EP1296134B1 (en) | 1993-04-15 | 2013-05-29 | Bayer Intellectual Property GmbH | Sampling device and its use for controlling sample introduction in microcolumn separation techniques |
DE59410283D1 (de) | 1993-11-11 | 2003-06-18 | Aclara Biosciences Inc | Vorrichtung und Verfahren zur elektrophoretischen Trennung von fluiden Substanzgemischen |
US6001229A (en) | 1994-08-01 | 1999-12-14 | Lockheed Martin Energy Systems, Inc. | Apparatus and method for performing microfluidic manipulations for chemical analysis |
AU727083B2 (en) * | 1997-04-25 | 2000-11-30 | Caliper Life Sciences, Inc. | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries |
US6322683B1 (en) | 1999-04-14 | 2001-11-27 | Caliper Technologies Corp. | Alignment of multicomponent microfabricated structures |
-
1993
- 1993-04-15 EP EP02028452.7A patent/EP1296134B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-15 DE DE69333601T patent/DE69333601T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-04-15 EP EP93810272A patent/EP0620432B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-04-12 US US08/226,605 patent/US6280589B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-04-15 JP JP10197794A patent/JP3656165B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-09-08 US US09/657,772 patent/US6423198B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-12-13 US US09/737,120 patent/US6706164B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-12-22 US US09/747,754 patent/US6699377B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-12-22 US US09/747,767 patent/US6699378B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-01-31 US US09/775,021 patent/US6491804B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-09 US US09/780,230 patent/US6960286B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-02-09 US US09/780,849 patent/US6730202B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-11-28 US US09/995,554 patent/US20020036140A1/en not_active Abandoned
-
2005
- 2005-12-21 US US11/316,414 patent/US7691245B2/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000008453A1 (fr) * | 1998-08-06 | 2000-02-17 | Hitachi, Ltd. | Chargeuse d'echantillons, source d'ions et analyseur de masse avec lesquels on utilise la chargeuse |
WO2000014527A1 (fr) * | 1998-09-02 | 2000-03-16 | Sankyo Company, Limited | Systeme d'electrophorese |
JP2003534532A (ja) * | 2000-02-11 | 2003-11-18 | アクララ バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | サンプル注入器を備えるマイクロ流体デバイスおよび方法 |
JP2008209407A (ja) * | 2000-02-11 | 2008-09-11 | Aclara Biosciences Inc | サンプル注入器を備えるマイクロ流体デバイスおよび方法 |
JP4753517B2 (ja) * | 2000-02-11 | 2011-08-24 | アクララ バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | サンプル注入器を備えるマイクロ流体デバイスおよび方法 |
JP2002370198A (ja) * | 2001-06-12 | 2002-12-24 | Techno Quartz Kk | マイクロチャンネル構造体およびその製造方法 |
JP2005274512A (ja) * | 2004-03-26 | 2005-10-06 | Aida Eng Ltd | 電気泳動用マイクロチップ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20020036140A1 (en) | 2002-03-28 |
EP0620432B1 (en) | 2004-08-25 |
DE69333601T2 (de) | 2005-09-15 |
US6699377B2 (en) | 2004-03-02 |
DE69333601D1 (de) | 2004-09-30 |
US20010025793A1 (en) | 2001-10-04 |
EP1296134A3 (en) | 2003-12-03 |
US20010004964A1 (en) | 2001-06-28 |
JP3656165B2 (ja) | 2005-06-08 |
US20020027075A1 (en) | 2002-03-07 |
US20010004963A1 (en) | 2001-06-28 |
EP1296134B1 (en) | 2013-05-29 |
US6706164B2 (en) | 2004-03-16 |
US20010023824A1 (en) | 2001-09-27 |
US6423198B1 (en) | 2002-07-23 |
EP1296134A2 (en) | 2003-03-26 |
US6699378B2 (en) | 2004-03-02 |
US6730202B2 (en) | 2004-05-04 |
US6491804B2 (en) | 2002-12-10 |
US6280589B1 (en) | 2001-08-28 |
US20010008213A1 (en) | 2001-07-19 |
US20060272945A1 (en) | 2006-12-07 |
EP0620432A1 (en) | 1994-10-19 |
US7691245B2 (en) | 2010-04-06 |
US6960286B2 (en) | 2005-11-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH0712777A (ja) | ミクロカラム分離技術における試料導入を制御するための方法及びその方法を使用するサンプリング装置 | |
KR100351531B1 (ko) | 기하형상이 개선된 채널을 채용하는 미소 유체 장치 | |
JP4753517B2 (ja) | サンプル注入器を備えるマイクロ流体デバイスおよび方法 | |
US6159353A (en) | Capillary electrophoretic separation system | |
US5958203A (en) | Electropipettor and compensation means for electrophoretic bias | |
US7033474B1 (en) | Microfluidic devices incorporating improved channel geometries | |
JP2003508749A (ja) | 流体力学的サンプル注入を行なう自動並列細管ゾーン電気泳動分析システム | |
US20020130044A1 (en) | Mechanical control of fluids in micro-analytical devices | |
US20060042948A1 (en) | Microfluidic electrophoresis chip having flow-retarding structure | |
Gai et al. | Injection by hydrostatic pressure in conjunction with electrokinetic force on a microfluidic chip | |
US20070261961A1 (en) | Handling a plurality of samples | |
Lee et al. | Pressure-driven sample injection with quantitative liquid dispensing for on-chip electrophoresis | |
US7740748B2 (en) | Electrophoresis system and method | |
US8377277B2 (en) | System and method for performing microfluidic manipulation | |
US20070039823A1 (en) | Fluid injection system | |
US6994778B2 (en) | Microfluidic device and analyzing method using the same | |
JP2005090995A (ja) | 試料注入方法及びシステム | |
KR0177013B1 (ko) | 시료의 분리와 분취를 동시에 수행할 수 있는 전기영동 장치 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20040128 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20040427 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20040623 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20040921 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20050113 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20050202 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20050223 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080318 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090318 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100318 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100318 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100318 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100318 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100318 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110318 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110318 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110318 Year of fee payment: 6 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110318 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120318 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130318 Year of fee payment: 8 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130318 Year of fee payment: 8 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130318 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140318 Year of fee payment: 9 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |