JPH07101984A - ペプチド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 血小板凝集阻害活性があり、循環器系疾患
治療薬としての有用性が期待できるペプチド誘導体を提
供する。 【構成】 式（Ｉ）： Ｘ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−（Ａｓｎ）ｎ−ＮＨ_２ （Ｉ） （式中、Ｘはホルミル基、アセチル基、置換もしくは無
置換の炭素数４以上のアルキルカルボニル基、置換もし
くは無置換のアラルキルカルボニル基、置換もしくは無
置換のアリールカルボニル基、分岐していてもよいヒド
ロキシプロピオニル基、β−アラニン残基、α−もしく
はβ−アミノイソ酪酸残基またはイソセリン残基を示
し、ｎは０または１を示す）で表されるペプチド誘導体
およびその酸付加塩。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、血小板凝集を阻害する
ペプチド誘導体に関する。さらに詳しくは、新規なトロ
ンビンレセプター拮抗ペプチド誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】トロンビンは、血液の凝固系に関与し、
最終段階においてフィブリノーゲンをフィブリンに変
え、血液を凝固させる。その他にも血小板凝集作用、血
管平滑筋細胞増殖作用、血管内皮細胞増殖作用をもつこ
とが知られている。血液の凝固系においては、トロンビ
ンの役割が詳細に研究され、血液凝固のカスケードも明
らかにされている。

【０００３】一方、トロンビンの血小板凝集作用、血管
平滑筋細胞増殖作用、血管内皮細胞増殖作用の発現機構
については、不明であった。ところが最近になって、ト
ロンビンによって活性化されるレセプターの構造が、Ｄ
ａｍｉ細胞からとられたｍＲＮＡに対するｃＤＮＡの解
析から明らかになった（Ｃｅｌｌ，６４（１９９１）
ｐ．１０５７−１０６８）。また、血小板に対するトロ
ンビンの作用についても明らかになった（Ｎａｔｕｒ
ｅ，３５３（１９９１）ｐ．６７４−６７７）。それに
よると、トロンビンによって活性化されるレセプター
は、トロンビンレセプターと呼ばれるいわゆるＧ蛋白共
役レセプターであり、トロンビンは、トロンビンレセプ
ターの血小板細胞膜の外側に出ているポリペプチド部分
のＮ末端側の１ヶ所を切断する。その切断によって新し
く生じたＮ末端部分のペプチドがレセプター自身に結合
し、シグナルトランスダクションが起こることが明らか
にされた。

【０００４】また、その後の研究によって、このＮ末端
部分に相当するアミノ酸１４ヶからなるペプチド Ｓｅ
ｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ
−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−
Ｐｈｅ（アミノ酸はすべてＬ型である）でもトロンビン
レセプターの活性化が起こることが開示された。さら
に、例えば、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ
−Ａｓｎ−ＮＨ_２、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−
Ａｒｇ−ＮＨ_２（アミノ酸はすべてＬ型である）など、
アミノ酸１４ヶからＣ末端側を欠いたペプチドほどその
レセプター活性能が増加することが明らかとなった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】心筋梗塞、脳梗塞、肺
梗塞、末梢動脈閉塞性疾患などの病態は、血管内にでき
た血栓が血流を阻害し、その末梢組織にダメージを与え
ることが主因であると考えられており、その予防と治療
のために血小板凝集阻害薬、トロンビン阻害薬、血栓溶
解薬などが使用されているが、いずれも出血傾向に陥る
ことが問題となっている。トロンビン阻害薬として用い
られるヒルジンやアルガトロバンなどはトロンビンが有
する酵素活性を阻害するものであるが、トロンビンの受
容体に直接作用し、トロンビンの血小板凝集作用を抑制
する薬剤であれば、トロンビンの凝固作用には影響せ
ず、出血傾向には陥りにくいことが期待される。

【０００６】また、トロンビンは同じタイプの受容体を
介して血管平滑筋細胞を増殖させ、血管内皮細胞の機能
を修飾することが知られており、その拮抗剤は各種循環
器系疾患、例えば心筋梗塞、狭心症、脳梗塞、肺梗塞、
末梢動脈閉塞、術後血栓などの血栓形成に基づく疾患に
対して有効である医薬品として期待できる。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明は、血小板凝集阻
害活性があり、循環器系疾患治療薬としての有用性が期
待できるペプチド誘導体を提供するものである。すなわ
ち、本発明は式（Ｉ）： Ｘ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−（Ａｓｎ）_ｎ−ＮＨ_２ （Ｉ） （式中、Ｘはホルミル基、アセチル基、置換もしくは無
置換の炭素数４以上のアルキルカルボニル基、置換もし
くは無置換のアラルキルカルボニル基、置換もしくは無
置換のアリールカルボニル基、分岐していてもよいヒド
ロキシプロピオニル基、β−アラニン残基、α−もしく
はβ−アミノイソ酪酸残基またはイソセリン残基を示
し、ｎは０または１を示す）で表されるペプチド誘導体
およびその酸付加塩を提供するものである。

【０００８】以下、本発明について具体的に説明する
が、本明細書において、特に標記のないアミノ酸はＬ−
型であり、略記号は試薬類を含め下に示される略記号を
用いた。 Ａｌａ：アラニン β−Ａｌａ：β−アラニン α−Ａｉｂ：α−アミノイソ酪酸 Ａｒｇ：アルギニン Ａｓｎ：アスパラギン Ｌｅｕ：ロイシン Ｐｈｅ：フェニルアラニン Ｓｅｒ：セリン Ｉｓｅ：イソセリン Ｔｈｒ：トレオニン Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリ
ス（ジメチルアミノ）−フォスフォニウムヘキサフルオ
ロフォスフェート ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル ＨＯＢｔ：Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン Ｐｍｃ：２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−
６−スルホニル ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸 ＴＭＳＢｒ：トリメチルシリルブロマイド Ｔｒｔ：トリチル

【０００９】本発明のペプチド誘導体は、血小板凝集阻
害活性があり、循環器系疾患治療薬としての有用性が期
待できる。本発明化合物（Ｉ）において、置換もしくは
無置換の炭素数４以上のアルキルカルボニル基として
は、例えば、水酸基、アミノ基、カルボキシル基、低級
アルコキシカルボニル基、ホルミル基、低級脂肪族アシ
ル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基またはシ
アノ基で置換されていてもよい直鎖ないしは分岐鎖のア
ルキル基からなる炭素数４〜１０のアルキルカルボニル
基が挙げられ、好ましくは、ブチリル基、イソブチリル
基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、３−
ヒドロキシイソブチリル基、２−メチル−ラクトイル基
などが挙げられる。

【００１０】置換もしくは無置換のアラルキルカルボニ
ル基としては、例えば、水酸基、アミノ基、カルボキシ
ル基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミル基、低級
脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトロ
基またはシアノ基で置換されていてもよいアラルキルカ
ルボニル基が挙げられ、好ましくは、フェニルアセチル
基、ブロモフェニルアセチル基、クロロフェニルアセチ
ル基、フルオロフェニルアセチル基などが挙げられる。

【００１１】置換もしくは無置換のアリールカルボニル
基としては、例えば、水酸基、アミノ基、カルボキシル
基、低級アルキル基、低級アルコキシカルボニル基、ホ
ルミル基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲ
ン原子、ニトロ基またはシアノ基で置換されていてもよ
いアリールカルボニル基が挙げられ、好ましくは、ベン
ゾイル基、ブロモベンゾイル基、クロロベンゾイル基、
フルオロベンゾイル基、ニトロベンゾイル基、トルオイ
ル基、ナフトイル基、フルオロナフトイル基などが挙げ
られる。

【００１２】分岐していてもよいヒドロキシプロピオニ
ル基としては、例えば、ラクトイル基、３−ヒドロキシ
プロピオニル基、グリセロイル基が好ましい。

【００１３】本発明のペプチド誘導体（Ｉａ）： Ｘ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２ （Ｉａ） においては、基Ｘが、β−アラニン残基、α−アミノイ
ソ酪酸残基、β−アミノイソ酪酸残基、イソセリン残
基、ホルミル基、アセチル基、ブチリル基、イソブチリ
ル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、３
−ヒドロキシイソブチリル基、ラクトイル基、３−ヒド
ロキシプロピオニル基、グリセロイル基、２−メチルラ
クトイル基、フェニルアセチル基、４−ブロモフェニル
アセチル基、４−クロロフェニルアセチル基、４−フル
オロフェニルアセチル基、ベンゾイル基、４−ブロモベ
ンゾイル基、４−クロロベンゾイル基、４−フルオロベ
ンゾイル基、２−ニトロベンゾイル基、３−ニトロベン
ゾイル基、４−ニトロベンゾイル基、１−ナフトイル
基、２−ナフトイル基、４−フルオロ−１−ナフトイル
基を示すものが特に好ましい。

【００１４】また、本発明のペプチド誘導体（Ｉｂ）： Ｘ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＮＨ_２ （Ｉｂ） においては、基Ｘが、β−アラニン残基、α−アミノイ
ソ酪酸残基、β−アミノイソ酪酸残基、イソセリン残
基、ホルミル基、アセチル基、ブチリル基、イソブチリ
ル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、３
−ヒドロキシイソブチリル基、ラクトイル基、３−ヒド
ロキシプロピオニル基、グリセロイル基、２−メチルラ
クトイル基、フェニルアセチル基、４−ブロモフェニル
アセチル基、４−クロロフェニルアセチル基、４−フル
オロフェニルアセチル基、ベンゾイル基、４−ブロモベ
ンゾイル基、４−クロロベンゾイル基、４−フルオロベ
ンゾイル基、２−ニトロベンゾイル基、３−ニトロベン
ゾイル基、４−ニトロベンゾイル基、１−ナフトイル
基、２−ナフトイル基、４−フルオロ−１−ナフトイル
基を示すものが特に好ましい。

【００１５】本発明のペプチド誘導体は、標準的なペプ
チド合成法によって製造できる。例えば、一般的な総書
として「生化学実験講座１，タンパク質の化学ＩＶ，第
ＩＩ部，ｐ．２０７〜４９５」（東京化学同人）、「ペ
プチド合成の基礎と実験・泉屋信夫他共著」（丸善）、
「続医薬品の開発，１４，ペプチド合成・編集岡田芳
男，木曾良明」（廣川書店）などがある。出発原料であ
るＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａ
ｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂およびＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅ
ｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹脂は、前記
した一般的方法によって合成できる。

【００１６】本発明のペプチド誘導体は、これら樹脂に
結合した各ペプチドに、前記式（Ｉ）の基Ｘを導入して
得られる。基Ｘの導入には、カルボン酸無水物、カルボ
キシル基をもつ化合物、酸ハロゲン化物またはβ−プロ
ピオラクトンを用いて行えばよい。基Ｘの導入法として
は、例えば、カルボン酸無水物を作用させる方法、ＤＣ
ＣおよびＨＯＢｔの存在下でカルボキシル基をもつ化合
物を作用させるＤＣＣ／ＨＯＢｔ法、ＢＯＰ試薬および
ＤＩＥＡの存在下でカルボキシル基をもつ化合物を作用
させる方法、酸ハロゲン化物を作用させる方法またはβ
−プロピオラクトンを作用させる方法が挙げられる。

【００１７】基Ｘの導入に用いるカルボン酸無水物と
は、ギ酸無水物、酢酸無水物、水酸基が保護された乳酸
無水物、水酸基が保護されたグリセリン酸無水物、置換
もしくは無置換の直鎖ないしは分岐鎖のアルキル基から
なる炭素数４〜１０のアルキルカルボン酸の無水物、置
換もしくは無置換のアラルキルカルボン酸の無水物、置
換もしくは無置換のアリールカルボン酸の無水物であ
る。

【００１８】置換もしくは無置換の直鎖ないしは分岐鎖
のアルキル基からなる炭素数４〜１０のアルキルカルボ
ン酸の無水物としては、例えば水酸基、アミノ基、カル
ボキシル基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミル
基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原
子、ニトロ基またはシアノ基で置換されていてもよい酪
酸、イソ酪酸、吉草酸、イソ吉草酸、ピバル酸などの無
水物が挙げられ、好ましくは、酪酸、イソ酪酸、吉草
酸、イソ吉草酸、ピバル酸、水酸基が保護された３−ヒ
ドロキシイソ酪酸、水酸基が保護された２−メチル乳酸
などの無水物が挙げられる。

【００１９】置換もしくは無置換のアラルキルカルボン
酸の無水物としては、例えば水酸基、アミノ基、カルボ
キシル基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミル基、
低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニ
トロ基またはシアノ基で置換されていてもよいフェニル
酢酸の無水物が挙げられ、好ましくは、フェニル酢酸、
ブロモフェニル酢酸、クロロフェニル酢酸、フルオロフ
ェニル酢酸などの無水物が挙げられる。

【００２０】置換もしくは無置換のアリールカルボン酸
の無水物としては、例えば水酸基、アミノ基、カルボキ
シル基、低級アルキル基、低級アルコキシカルボニル
基、ホルミル基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、
ハロゲン原子、ニトロ基またはシアノ基で置換されてい
てもよい安息香酸、ナフトエ酸の無水物が挙げられ、好
ましくは、安息香酸、ブロモ安息香酸、クロロ安息香
酸、フルオロ安息香酸、ニトロ安息香酸、メチル安息香
酸、ナフトエ酸、フルオロナフトエ酸などの無水物が挙
げられる。

【００２１】基Ｘの導入に用いるカルボキシル基をもつ
化合物とは、アミノ基が保護されたβ−アラニン、α−
アミノイソ酪酸、β−アミノイソ酪酸、イソセリン、ま
たは、ギ酸、酢酸、乳酸、水酸基が保護された３−ヒド
ロキシプロピオン酸、グリセリン酸、置換もしくは無置
換の直鎖ないしは分岐鎖のアルキル基からなる炭素数４
〜１０のアルキルカルボン酸、置換もしくは無置換のア
ラルキルカルボン酸、置換もしくは無置換のアリールカ
ルボン酸である。アミノ基の保護基としては、Ｆｍｏ
ｃ、Ｂｏｃなど保護基として通常使用される化合物が用
いられる。

【００２２】置換もしくは無置換の直鎖ないしは分岐鎖
のアルキル基からなる炭素数４〜１０のアルキルカルボ
ン酸としては、例えば水酸基、アミノ基、カルボキシル
基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミル基、低級脂
肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基
またはシアノ基で置換されていてもよい酪酸、イソ酪
酸、吉草酸、イソ吉草酸、ピバル酸などが挙げられ、好
ましくは、酪酸、イソ酪酸、吉草酸、イソ吉草酸、ピバ
ル酸、３−ヒドロキシイソ酪酸、２−メチル乳酸などが
挙げられる。

【００２３】置換もしくは無置換のアラルキルカルボン
酸としては、例えば水酸基、アミノ基、カルボキシル
基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミル基、低級脂
肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基
またはシアノ基で置換されていてもよいフェニル酢酸が
挙げられ、好ましくは、フェニル酢酸、ブロモフェニル
酢酸、クロロフェニル酢酸、フルオロフェニル酢酸など
が挙げられる。

【００２４】置換もしくは無置換のアリールカルボン酸
としては、例えば水酸基、アミノ基、カルボキシル基、
低級アルキル基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミ
ル基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原
子、ニトロ基またはシアノ基で置換されていてもよい安
息香酸、ナフトエ酸が挙げられ、好ましくは、安息香
酸、ブロモ安息香酸、クロロ安息香酸、フルオロ安息香
酸、ニトロ安息香酸、メチル安息香酸、ナフトエ酸、フ
ルオロナフトエ酸などが挙げられる。

【００２５】基Ｘの導入に用いる酸ハロゲン化物とは、
ギ酸ハロゲン化物、酢酸ハロゲン化物、水酸基が保護さ
れた乳酸ハロゲン化物、水酸基が保護された３−ヒドロ
キシプロピオン酸ハロゲン化物、水酸基が保護されたグ
リセリン酸ハロゲン化物、置換もしくは無置換の直鎖な
いしは分岐鎖のアルキル基からなる炭素数４〜１０のア
ルキルカルボン酸のハロゲン化物、置換もしくは無置換
のアラルキルカルボン酸のハロゲン化物、置換もしくは
無置換のアリールカルボン酸のハロゲン化物である。

【００２６】置換もしくは無置換の直鎖ないしは分岐鎖
のアルキル基からなる炭素数４〜１０のアルキルカルボ
ン酸のハロゲン化物としては、例えば水酸基、アミノ
基、カルボキシル基、低級アルコキシカルボニル基、ホ
ルミル基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲ
ン原子、ニトロ基またはシアノ基で置換されていてもよ
い酪酸、イソ酪酸、吉草酸、イソ吉草酸、ピバル酸など
のハロゲン化物が挙げられ、好ましくは、ブチリルクロ
ライド、イソブチリルクロライド、バレリルクロライ
ド、イソバレリルクロライド、ピバロイルクロライドな
どが挙げられる。

【００２７】置換もしくは無置換のアラルキルカルボン
酸のハロゲン化物としては、例えば水酸基、アミノ基、
カルボキシル基、低級アルコキシカルボニル基、ホルミ
ル基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ基、ハロゲン原
子、ニトロ基またはシアノ基で置換されていてもよいフ
ェニル酢酸のハロゲン化物が挙げられ、好ましくは、４
−クロロフェニルアセチルクロライド、４−ブロモフェ
ニルアセチルクロライド、４−フルオロフェニルアセチ
ルクロライドなどが挙げられる。

【００２８】置換もしくは無置換のアリールカルボン酸
のハロゲン化物としては、例えば水酸基、アミノ基、カ
ルボキシル基、低級アルキル基、低級アルコキシカルボ
ニル基、ホルミル基、低級脂肪族アシル基、アルコキシ
基、ハロゲン原子、ニトロ基またはシアノ基で置換され
ていてもよい安息香酸、ナフトエ酸のハロゲン化物が挙
げられ、好ましくは、４−ブロモベンゾイルクロライ
ド、４−クロロベンゾイルクロライド、４−フルオロベ
ンゾイルクロライド、２−ニトロベンゾイルクロライ
ド、３−ニトロベンゾイルクロライド、４−ニトロベン
ゾイルクロライド、１−ナフトイルクロライド、２−ナ
フトイルクロライド、４−フルオロ−１−ナフトイルク
ロライドなどが挙げられる。

【００２９】Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐ
ｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂またはＨ−Ｐ
ｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹
脂にカルボン酸無水物を作用させる反応は、ＣＨ_２Ｃｌ
_２、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドンなどの溶媒中、前記
した樹脂に結合したペプチドに対して、カルボン酸無水
物１００モル％〜８００モル％、好ましくは、２００モ
ル％〜４００モル％であり、反応温度は通常１０℃〜２
８℃、好ましくは、１５℃〜２８℃の範囲であり、反応
は２時間〜７２時間、好ましくは、２時間〜４８時間行
なわれる。

【００３０】Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐ
ｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂またはＨ−Ｐ
ｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹
脂にＤＣＣおよびＨＯＢｔの存在下でカルボキシル基を
もつ化合物を作用させる反応は、ジメチルホルムアミ
ド、Ｎ−メチルピロリドンなどの溶媒中、前記した樹脂
に結合したペプチドに対して、カルボキシル基をもつ化
合物１００モル％〜８００モル％、好ましくは、２００
モル％〜４００モル％で、ＤＣＣ １００モル％〜８０
０モル％、好ましくは、２００モル％〜４００モル％
で、ＨＯＢｔ １００モル％〜８００モル％、好ましく
は、２００モル％〜４００モル％であり、反応温度は通
常１０℃〜２８℃、好ましくは、１５℃〜２８℃の範囲
であり、反応は２時間〜７２時間、好ましくは、２時間
〜４８時間行なわれる。

【００３１】Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐ
ｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂またはＨ−Ｐ
ｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹
脂にＢＯＰ試薬およびＤＩＥＡの存在下でカルボキシル
基をもつ化合物を作用させる反応は、ジメチルホルムア
ミド、Ｎ−メチルピロリドンなどの溶媒中、前記した樹
脂に結合したペプチドに対して、カルボキシル基をもつ
化合物１００モル％〜８００モル％、好ましくは、２０
０モル％〜４００モル％で、ＢＯＰ試薬１００モル％〜
８００モル％、好ましくは、２００モル％〜４００モル
％であり、ＤＩＥＡ １００モル％〜８００モル％、好
ましくは、２００モル％〜４００モル％であり、反応温
度は通常１０℃〜２８℃、好ましくは、１５℃〜２８℃
の範囲であり、反応は２時間〜７２時間、好ましくは、
２時間〜４８時間行なわれる。

【００３２】Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐ
ｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂またはＨ−Ｐ
ｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹
脂に酸ハロゲン化物を作用させる反応は、ＣＨ_２Ｃ
ｌ_２、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドンなどの溶媒中、前
記した樹脂に結合したペプチドに対して、酸ハロゲン化
物１００モル％〜４００モル％、好ましくは、１００モ
ル％〜２００モル％であり、反応温度は通常１０℃〜２
８℃、好ましくは、１５℃〜２８℃の範囲であり、反応
は２時間〜７２時間、好ましくは、２時間〜４８時間行
なわれる。

【００３３】Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐ
ｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂またはＨ−Ｐ
ｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹
脂にβ−プロピオラクトンを作用させる反応は、ＣＨ_２
Ｃｌ_２、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドンなどの溶媒中、
前記した樹脂に結合したペプチドに対して、β−プロピ
オラクトン １００モル％〜８００モル％、好ましく
は、１００モル％〜４００モル％であり、反応温度は通
常１０℃〜２８℃、好ましくは、１５℃〜２８℃の範囲
であり、反応は２４時間〜７２時間、好ましくは、４８
時間〜７２時間行なわれる。

【００３４】得られたペプチド誘導体は、通常、チオア
ニソール：エタンジチオール：ｍ−クレゾール：ＴＦ
Ａ：ＴＭＳＢｒの混合溶液中で撹拌して脱保護した後、
樹脂を除去して溶液を濃縮し、エーテルを加えることに
より沈澱として得られる。得られた粗ペプチドを水また
は３０％酢酸水溶液に溶解後、逆相ＯＤＳカラムに負荷
して１％のＴＦＡを含むＣＨ_３ＣＮ溶液のＣＨ_３ＣＮ濃
度を６％から６０％まで変化させるグラジエント溶出で
精製される。

【００３５】本発明のペプチド誘導体の純度検定は、分
析用高速液体クロマトグラフィー（分析用ＨＰＬＣ）で
行い、各ペプチド誘導体の構造は、ＦＡＢ−マススペク
トロメーター（ＦＡＢ−ＭＳ）で確認した。本発明のペ
プチド誘導体は、高速液体クロマトグラフ上で９７％以
上の純度を示し、各々のペプチド誘導体のＦＡＢ−ＭＳ
のデータも理論値と一致した。また、各ペプチド誘導体
の分析用ＨＰＬＣにおける保持時間（Ｒｔ）を実施例中
に示した。 分析用ＨＰＬＣの条件 機器：島津ＬＣ−６Ａ システム カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ａ−３０２ ＯＤＳ ４．
６φ×１５０ｍｍ 展開溶媒：８％ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡから８０％
ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡまでの３０分間リニアグラ
ジエント

【００３６】

【実施例】以下に実施例により本発明をさらに詳細に説
明するが、本発明はこの実施例に限定されるものではな
い。

【００３７】参考例１：Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−
Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ樹脂の
構築 ペプチドシンセサイザー４３０Ａ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂ
ｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて、Ｆｍｏｃ型固相法
によりペプチド−Ｒｉｎｋ樹脂を構築した。即ち、Ｒｉ
ｎｋ樹脂 ５９６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）より、ＤＣ
Ｃ／ＨＯＢｔ／ＮＭＰ法によって、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ
（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｏ
Ｈ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｏ
Ｈ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨを順次縮合し、最後のサイ
クルでＦｍｏｃ基を脱保護するプログラムで標記樹脂を
構築した。

【００３８】参考例２：Ｈ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−
Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹脂の構築 ペプチドシンセサイザー４３０Ａ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂ
ｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて、Ｆｍｏｃ型固相法
によりペプチド−Ｒｉｎｋ樹脂を構築した。即ち、Ｒｉ
ｎｋ樹脂 ６７６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）より、ＤＣ
Ｃ／ＨＯＢｔ／ＮＭＰ法によって、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ
（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ
−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨを順次縮合
し、最後のサイクルでＦｍｏｃ基を脱保護するプログラ
ムで標記樹脂を構築した。

【００３９】実施例１：Ｈ−β−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｅ
ｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・２ＴＦＡ（１）
の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ３８７ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、Ｆｍｏｃ−β−Ａｌａ−ＯＨ １５６
ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ ６８ｍｇ（０．５
ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ １０３ｍｇ （０．５ｍｍｏｌ）
を加えて、２日間振盪した。得られた樹脂をＤＭＦ、Ｃ
Ｈ_２Ｃｌ_２で洗浄後、１０％ピペラジン／ＤＭＦ溶液
１０ｍｌを加え、２０分間振盪した。さらに、樹脂をＤ
ＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄後、乾燥した。得られた樹脂
３８０ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をチオアニソール
１．１７ｍｌ、エタンジチオール ０．５８５ｍｌ、ｍ
−クレゾール ０．２ｍｌ、ＴＦＡ ７．４８ｍｌ、Ｔ
ＭＳＢｒ １．３５ｍｌの混合溶液中で撹拌して脱保護
した後、樹脂を除去して、溶液を濃縮した。濃縮液にエ
ーテルを加え、ペプチドを沈澱させた。得られた粗ペプ
チドを水に溶解し、ＹＭＣパックドカラム ＯＤＳ−５
（２０φ×２５０ｍｍ）に負荷し、精製した（緩衝液Ａ
は０．１％ＴＦＡ、緩衝液Ｂは０．１％ＴＦＡを含む６
０％ＣＨ_３ＣＮ、流速は１０ｍｌ／ｍｉｎ、グラジエン
トはＣＨ_３ＣＮ濃度を６％から６０％まで６０分間で変
化させた）。目的ペプチドを含む画分を凍結乾燥し、標
記ペプチド誘導体（１） ９５．３ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７３２［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１２．１４ｍｉｎ

【００４０】実施例２：Ｈ−α−Ａｉｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅ
ｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・２ＴＦＡ（２）
の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４３５ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、Ｂｏｃ−α−Ａｉｂ−ＯＨ ２０４ｍ
ｇ（１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ １３６ｍｇ（１ｍｍｏ
ｌ）、ＤＣＣ ２０６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を加え、２日
間振盪した。得られた樹脂をＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、Ｍ
ｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施例１と同様に脱保護、
精製を行い、標記ペプチド誘導体（２） ６３．４ｍｇ
を得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７４６［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１２．２４ｍｉｎ

【００４１】実施例３：Ｈ−ＤＬ−Ｉｓｅ−Ｐｈｅ−Ｌ
ｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・２ＴＦＡ
（３）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ９１４ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ １
０ｍｌに懸濁し、Ｆｍｏｃ−ＤＬ−Ｉｓｅ−ＯＨ ４０
９ｍｇ（１．２５ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬 ５５３ｍｇ
（１．２５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ ２１８μｌ（１．２
５ｍｍｏｌ）を加え、７日間振盪した。得られた樹脂を
濾過し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＭｅＯＨで洗浄後、１
０％ピペラジン／ＤＭＦ溶液中で２０分間振盪し、ＤＭ
Ｆ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＭｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施
例１と同様に脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体
（３） ５４．４ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７４８［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１１．９３ｍｉｎ

【００４２】実施例４：ＨＣＯ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅ
ｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・ＴＦＡ（４）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４３５ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、ギ酸 ３８μｌ（１ｍｍｏｌ）、ＤＣ
Ｃ ２０６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、ピリジン ８２μｌ
（１ｍｍｏｌ）を加え、２日間振盪した。得られた樹脂
を濾過し、ＤＭＦ、ＭｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施
例１と同様に脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体
（４） ３３．０ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：６８９［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１４．１５ｍｉｎ

【００４３】実施例５：ＣＨ_３ＣＯ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・ＴＦＡ（５） の合
成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４３５ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、無水酢酸 ４７μｌ（０．５ｍｍｏ
ｌ）、ピリジン４１μｌ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、１
日間振盪した。得られた樹脂を濾過し、ＤＭＦ、ＣＨ_２
Ｃｌ_２で洗浄後、乾燥した。実施例１と同様に脱保護、
精製を行い、標記ペプチド誘導体（５） ８０．０ｍｇ
を得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７０３［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１４．７０ｍｉｎ

【００４４】実施例６：ｎ−ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−
Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・Ｔ
ＦＡ（６）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４０４ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、（ｎ−ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ）_２Ｏ
８２μｌ（０．５ｍｍｏｌ）、ピリジン ４１μｌ
（０．５ｍｍｏｌ）を加え、２日間振盪した。得られた
樹脂を濾過し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄後、乾燥し
た。実施例１と同様に脱保護、精製を行い、標記ペプチ
ド誘導体（６） ８４．４ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７３１［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１６．９０ｍｉｎ

【００４５】実施例７：（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＯ−Ｐｈｅ
−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・ＴＦＡ
（７）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４０４ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、［（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＯ］_２Ｏ ８２
μｌ（０．５ｍｍｏｌ）、ピリジン ４１μｌ（０．５
ｍｍｏｌ）を加え、１日間振盪した。得られた樹脂を濾
過し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄後、乾燥した。実施
例１と同様に脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体
（７） ９２．８ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７３１［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１６．９２ｍｉｎ

【００４６】実施例８：（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＯ−Ｐｈｅ
−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＮＨ_２・ＴＦＡ（８）の合
成 参考例２の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｒｉｎｋ樹脂 ４４５ｍｇ
（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ ７ｍｌに懸濁し、
［（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＯ］_２Ｏ ８３μｌ（０．５ｍｍ
ｏｌ）、ピリジン４１μｌ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、
３時間振盪した。得られた樹脂を濾過し、ＤＭＦ、ＣＨ
_２Ｃｌ_２、ＭｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施例１と同
様に脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体（８）
５８．０ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：６１７［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１７．５６ｍｉｎ

【００４７】実施例９：（ＣＨ_３）_３ＣＣＯ−Ｐｈｅ−
Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・ＴＦＡ
（９）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４３５ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、（ＣＨ_３）_３ＣＣＯＯＨ ５１ｍｇ
（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ ６８ｍｇ（０．５ｍｍ
ｏｌ）、ＤＣＣ １０３ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）を加
え、１日間振盪した。得られた樹脂を濾過し、ＤＭＦ、
ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＭｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施例１
と同様に脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体
（９） ６０．０ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７４５［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１８．２６ｍｉｎ

【００４８】実施例１０：ＨＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−Ｐｈ
ｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・ＴＦＡ
（１０）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４１５ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
５ｍｌに懸濁し、β−プロピオラクトン ６３μｌ（１
ｍｍｏｌ）を加え２日間振盪した。得られた樹脂を濾過
し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄後、乾燥した。実施例
１と同様に脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体
（１０）２６．０ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７３３［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１１．６２ｍｉｎ

【００４９】実施例１１：Ｌ−Ｌａｃｔｏｖｌ−Ｐｈｅ
−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・ＴＦＡ
（１１）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４５８ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ ７
ｍｌに懸濁し、（＋）−Ｌ−乳酸 ９０ｍｇ（１ｍｍｏ
ｌ）、ＢＯＰ試薬 ４４２ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、ＤＩＥ
Ａ ２７４μｌ（１．５７５ｍｍｏｌ）を加え、５時間
振盪した。得られた樹脂を濾過し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ
_２、ＭｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施例１と同様に脱
保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体（１１） ６
４．８ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７３３［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１４．３７ｍｉｎ

【００５０】実施例１２：Ｂｅｎｚｏｖｌ−Ｐｈｅ−Ｌ
ｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ _２・ＴＦＡ（１
２）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ４０８ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、安息香酸 ６１ｍｇ（０．５ｍｍｏ
ｌ）、ＨＯＢｔ６８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ
１０３ｍｇ （０．５ｍｍｏｌ）を加え、１日間振盪し
た。得られた樹脂をＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＭｅＯＨで
洗浄後、乾燥した。実施例１と同様に脱保護、精製を行
い、標記ペプチド誘導体（１２）２１．０ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７６５［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１８．２３ｍｉｎ

【００５１】実施例１３：Ｐｈｅｎｖｌａｃｅｔｖｌ−
Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２・Ｔ
ＦＡ（１３）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ３２７ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
７ｍｌに懸濁し、フェニル酢酸 ６８ｍｇ（０．５ｍｍ
ｏｌ）、ＨＯＢｔ ６８ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、ＤＣ
Ｃ １０３ｍｇ （０．５ｍｍｏｌ）を加え、１日間振
盪した。得られた樹脂を濾過し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃ
ｌ_２、ＭｅＯＨで洗浄後、乾燥した。実施例１と同様に
脱保護、精製を行い、標記ペプチド誘導体（１３） ４
１．０ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：７７９［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１８．５８ｍｉｎ

【００５２】実施例１４：ｐ−Ｂｒｏｍｏｂｅｎｚｏｖ
ｌ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２
・ＴＦＡ（１４）の合成 参考例１の方法を用いて構築したＨ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−
Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎ
ｋ樹脂 ３６２ｍｇ（０．１２５ｍｍｏｌ）を４−ブロ
モベンゾイルクロライド ３３０ｍｇ（１．５０ｍｍｏ
ｌ）でパラブロモベンゾイル化後、得られた樹脂を濾過
し、ＤＭＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄後、乾燥した。実施例
１と同様に脱保護、精製を行い、標題ペプチド誘導体
（１４）５５ｍｇを得た。 ＦＡＢ−ＭＳ：８４３、８４５［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｒｔ：１９．５７ｍｉｎ

【００５３】試験例 血小板凝集反応の測定 合成したペプチド誘導体について、血小板凝集反応の測
定を行い、その結果を第１表に示した（表中、血小板凝
集活性をＥＣ_５０で、血小板凝集阻害活性をＩＣ_５０で
示した）。

【００５４】

【表１】

【００５５】（方法）健常人血液を使用した。採血は、
シリコンコーティングした３．１３％クエン酸ナトリウ
ムを１／１０容量含む真空採血管で行った。血液を遠心
分離（１２０×ｇ、２０分間）することにより多血小板
血漿（ＰＲＰ）を調製した。トロンビンレセプターアゴ
ニストペプチド；Ｈ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ
−Ａｒｇ−Ａｓｎ−ＮＨ_２（最終濃度１μＭまたは２μ
Ｍ）を血小板凝集惹起薬として用い、Ｂｏｒｎの比濁法
により血小板凝集反応を測定した。被験薬は蒸留水また
はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して用い
た。被験薬が水溶性の場合は、ＰＲＰに塩化カルシウム
を添加（最終濃度１ｍＭ）した溶液２１０μｌに、被験
薬を２０μｌ添加し、５分後に凝集惹起薬溶液を２０μ
ｌ添加して血小板凝集反応を測定した（総量２５０μ
ｌ）。被験薬が脂溶性の場合は、ＰＲＰに塩化カルシウ
ムを添加（最終濃度１ｍＭ）した溶液２２８μｌに、被
験薬を２μｌ添加し、５分後に凝集惹起薬溶液を２０μ
ｌ添加して血小板凝集反応を測定した（総量２５０μ
ｌ）。

【００５６】

【発明の効果】本発明のペプチド誘導体は、血小板凝集
阻害活性があり、循環器系疾患治療薬としての有用性が
期待できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 14/705 8318−4Ｈ // Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＢＮ ＡＣＢ

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（Ｉ）： Ｘ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−（Ａｓｎ）_ｎ−ＮＨ_２ （Ｉ） （式中、Ｘはホルミル基、アセチル基、置換もしくは無
   置換の炭素数４以上のアルキルカルボニル基、置換もし
   くは無置換のアラルキルカルボニル基、置換もしくは無
   置換のアリールカルボニル基、分岐していてもよいヒド
   ロキシプロピオニル基、β−アラニン残基、α−もしく
   はβ−アミノイソ酪酸残基またはイソセリン残基を示
   し、ｎは０または１を示す）で表されるペプチド誘導体
   およびその酸付加塩。