JPH0672895A - 免疫調節能を有する物質及び組成物 - Google Patents

免疫調節能を有する物質及び組成物

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JPH0672895A
JPH0672895A JP4126764A JP12676492A JPH0672895A JP H0672895 A JPH0672895 A JP H0672895A JP 4126764 A JP4126764 A JP 4126764A JP 12676492 A JP12676492 A JP 12676492A JP H0672895 A JPH0672895 A JP H0672895A
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cell
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 生体内にて、細胞溶解作用を受けることなく
免疫系全体を増強することができる新規な物質又は組成
物を提供すること。 【構成】 Ｔリンパ球上の異なる１価の抗原性エピト
ープに対してそれぞれ特異的な、Ｆｃ領域を欠く、複合
していない２価の結合性分子の２種又は３種以上の混合
物； Ｔ細胞上の抗原に対して特異的な複数の結合性分子が
結合されたポリマー主鎖又はマイクロビーズを有する分
子複合体； Ｔ細胞上の同一の抗原上の異なる１価の抗原性エピト
ープに非競合的に結合する複数の異なる結合性分子が結
合されたポリマー主鎖を含む分子複合体； Ｔ細胞上の同一の抗原上の異なる１価の抗原性エピト
ープに非競合的に結合する２種又は３種以上の異なる結
合性分子がその表面に結合されたリポソーム。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、Ｔリンパ球又はその部
分のポリクローナル的活性化、増殖及び／又はリンホカ
イン生産を包含することによる免疫系の調節のための免
疫複合体(immunoconjugate) 及び組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】ほとんどの免疫応答には、免疫系の多く
の成分が関与している。ガン化した細胞の排除に関わる
免疫機構は良く理解されてはいないが、免疫機構がより
活性化されると、腫瘍細胞はより効果的に排除されると
思われる。また、ウイルス及びウイルス感染細胞に対す
る免疫応答においては、体液性及び細胞性機構の両方が
関与することが知られている。従って、一般的に、種々
の癌又は感染症患者の治療のために、また、感染源と接
する人を感染から守るために、全体的な免疫系を増強す
ることが望ましい。
【０００３】免疫系の種々の分枝は、抗体、細胞障害性
Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、遅延型過敏症媒介Ｔ細胞（ＴTDH
細胞）、単球、マクロファージ、ナチュラルキラー（Ｎ
Ｋ）細胞、ＡＤＣＣ媒介Ｋ細胞及び顆粒球を包含する。
これらの種々の分枝の活性化には複雑な相互作用が関与
する。ヘルパーＴ細胞（Ｔh 細胞）は、中心的な調節的
役割を果たし、活性化及び増殖段階において多くの因子
がこれらの細胞及び他の細胞によって一定の統制がとれ
た態様で分泌される。リンホカイン及びサイトカインが
適当な時期に適当な比率で統制が取れた態様で生産され
ることは、免疫応答を最大化するために重要であると信
ずべき理由がある。
【０００４】免疫系を増強することは、例えば悪性腫瘍
のような多くの病的状態を治療するために望ましい。免
疫増強物質は、微生物の培養物、海洋性動物、ハーブ及
び植物のような天然原からスクリーニングされた物質並
びに多数の合成有機化合物からスクリーニングされた物
質を包含する。
【０００５】天然源からの物質の一例としてムラミルジ
ペプチドを挙げることができる。これはスタフィロコッ
カス属細菌の細胞壁から最小の構造として同定されたも
ので、免疫増強作用を有している。ムラミルジペプチド
の多くの類似体が合成されている。ムラミルジペプチド
及びその類似体はマクロファージ活性化物質で、腫瘍の
治療剤及びワクチンのアジュバントとして試験され開発
されている。
【０００６】天然源から分離された免疫増強剤の他の例
として、二本鎖ＲＮＡ及びミスマッチ二本鎖ＲＮＡ（ア
ンプリゲン(ampligen)とも呼ばれる）を挙げることがで
き、これらはインターフェロンの合成及び他の免疫機能
を誘起することができる。これらの物質はまた腫瘍及び
ＡＩＤＳのようなウイルス性疾患の治療のために試験さ
れている。
【０００７】免疫増強剤は、単独で患者に投与すること
もできるし、外科手術、放射線治療又は化学治療と併用
することもできる。免疫増強剤はまた、ウイルス感染症
の治療及びウイルスと接触した人が感染症に罹ることを
予防するためにも望ましい。免疫増強剤は、感染症又は
癌のための種々のワクチンのアジュバントとして有用で
あり得る。
【０００８】最近、組換えヒトリンホカイン及びサイト
カインが遺伝子工学により生産されている。多くのこの
ような組換え「生物応答変調剤」は種々の癌及び感染症
の治療のために試験されている。インターロイキン−２
（ＩＬ−２）、α−インターフェロン、γ−インターフ
ェロン、顆粒球−コロニー刺激因子及び顆粒球／単球−
コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ）のよう
な少数の組換え産物はある種の癌及び感染症に対しての
使用が多くの国で認められている。例えば、ＩＬ−２は
腎細胞癌の患者に対して、α−インターフェロンは毛細
胞癌又はＢ型肝炎患者に対して、Ｇ−ＣＳＦ及びＧＭ−
ＣＳＦは、失われた好中球を回復する目的のために化学
療法を受けている癌患者に対しての使用が認められてい
る。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】ＩＬ−２、ＩＬ−４及
びγ−インターフェロンのような個々の組換えリンホカ
インは、免疫系のある部分を増強させることができる
が、限られた免疫細胞のみを標的にして機能し、ある免
疫機能のみを増強することができ、免疫系全体を増強す
ることはできない。それらはまた、おそらく、生体内で
短期間そして限られた領域のみで機能する。また、患者
に注射されたサイトカイン及びリンホカインは、腎臓に
より速やかに排泄される。それらは、その所望の免疫効
果を達成するのに十分な時間リンパ系に十分な濃度で存
在はしないであろう。
【００１０】リンホカイン及びサイトカイン以外の、免
疫系増強効果が研究された物質は、そのほとんどが生体
投与に適しているが、Ｔ細胞を直接的に活性化するもの
ではない。例えば、ムラミルジペプチド及びその類似体
は、主としてマクロファージを活性化する。二本鎖ＲＮ
Ａ及びミスマッチ二本鎖ＲＮＡは、主として種々の細胞
によるインターフェロンの生産を誘起する。
【００１１】天然から誘導された少数のタンパク質が、
インビトロの細胞培養において、Ｔ細胞マイトジェンと
して知られており、Ｔ細胞活性の特徴づけ及び定量の研
究に用いられている。これらの物質は、炭水化物結合植
物タンパク質と定義される、植物凝集素Ａ（ＰＨＡ）、
コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）、小麦胚芽凝集素（ＷＧ
Ａ）及び他のレクチンを包含する。しかしながら、これ
らのＴ細胞分裂促進タンパク質は、インビトロの研究で
は非常に有用であるが、特異性が低く、従ってほとんど
全ての細胞型に結合する。これらは毒性があり、特異性
を欠くので、Ｔ細胞増強剤として生体内で用いるために
は有効ではない。
【００１２】リンパ球を活性化し、増殖させて、毒性物
質を投与することなく十分な治療効果をあげるために、
いくつかのグループが、Ｔリンパ球を患者から採取し、
一定期間最適の条件下でインビトロで培養してＴリンパ
球を活性化し、増殖し、これを再び同じ患者に注射して
戻すという方法を試みた。バイオロジカル・セラピー・
インスティチュート（テネシー州フランクリン）によっ
て用いられたこのいわゆるＩＬ−２／ＬＡＫ治療レジメ
ンにおいては、患者から血液を先ず抜き取り、単核細胞
を単離する。Rosenberg, S.A. ら、N. Eng. J. Med. 31
6:889 (1987)を参照。細胞は、組換えＩＬ−２を含む培
地中で数週間培養され、リンホカイン−活性化キラー細
胞（ＬＡＫ）を含む、活性化され、増殖されたＴ細胞
は、回収され、患者に注射される。
【００１３】オートリンパ球治療（ＡＬＴ）として知ら
れる、このＩＬ−２／ＬＡＫ治療の、より最近の修飾さ
れたバージョンがマサチューセッツ州ボストンのセルカ
ー・セラピーズにより開発された。Osband, M.E.ら、La
ncet 335:994(1990)参照。腎細胞癌患者からのリンパ球
は２回採取される。第１回目は、リンパ球はインビトロ
においてヒトＣＤ３抗原に特異的な抗体（抗ＣＤ３）で
刺激されてリンホカインを生産する。培養開始から数日
後、培養上清が回収され、細胞が捨てられる。第２回目
は、患者から採取されたリンパ球は、５日間、「同原」
のリンホカイン中で培養され、回収後、同一の患者に注
射される。
【００１４】インビトロにおけるリンパ球刺激及び増殖
を包含するこれらの方法は、治療された患者の一部にお
いて効果のある応答を達成することができると言われて
いる。これらの方法の主たる問題点は、これらの治療方
法が非常に冗長で、高価で、洗練された特殊な細胞培養
施設を必要とすることである。異なる患者からの細胞又
は培養物間のバリエーションのために、培養の監視が必
要である。また、リンパ球培養物は、至適条件下におい
ても、極めて生存力が乏しい。このことは、培養中に多
数の細胞が死滅するであろうことを意味する。多数の死
滅した細胞が患者に注射されると、細網内皮系（ＲＥ
Ｓ）に負担をかけ、腫瘍細胞を攻撃するその有効性を減
少させる。
【００１５】要するに、ＩＬ−２及びγ−インターフェ
ロン並びにＬＡＫ及びＡＬＴ治療法の臨床試験及び承認
されたルーチンの使用は、Ｔ細胞活性化及び増殖が、癌
又は感染症患者の一部で治療効果を発揮し得ることを示
している。一方、これらの治療の結果は、リンホカイン
治療がある欠陥を有し、ＬＡＫ及びＡＬＴ治療は実質的
な欠点を有することを示している。従って、これらの欠
陥が排除されるならば、効果的で容易に実行できる治療
が実現し得る。
【００１６】ヒトＴ細胞の表面上のＣＤ３（パンＴマー
カー）に特異的な多くのモノクローナル抗体（例えばモ
ノクローナル抗体ＯＫＴ３）は、インビトロにおいてヒ
トＴ細胞の極めて効果のあるマイトジェンとして知られ
ている。Van Wauwe, J.P. etal, 、J. Immunology 124:
2708(1980); Chang, T.W. et al, Leukocyte Typing:Hu
man Leukocyte Differentiation Antigens Detected by
Monoclonal Antibodies, Eds. Bernard, A. et al. (S
pring Verlag, New York, 1984)。ウシ胎児血清のみを
含み、ヒト血清を含まない（従ってＩｇＧを含まない）
培地中で、抗ＣＤ３モノクローナル抗体はＰＨＡやＣｏ
ｎＡよりもＴ細胞の増殖を誘起することにおいてはるか
に有効である。
【００１７】しかし、抗ＣＤ３抗体の細胞分裂促進効果
は、ＣＤ３抗原に対する特異的結合と抗体のＦｃ部分の
存在の両方、並びに単球及びマクロファージの存在を必
要とする。これらの結果の最も適当な説明としては、抗
ＣＤ３モノクローナル抗体のＦｃ領域は単球／マクロフ
ァージ上のＦｃレセプターに結合し、それによってＴ細
胞表面上のＣＤ３抗原を凝集させるということである。
ＣＤ３はＴ細胞抗原レセプターに付随しているので、Ｃ
Ｄ３の凝集はＴ細胞の活性化及び増殖のきっかけとな
る。
【００１８】この説明は、抗ヒトＣＤ３モノクローナル
抗体をセファロース４Ｂビーズに結合し、または培養ウ
ェルのプラスチック表面をこれで被覆すると、Ｔ細胞の
活性化及び増殖を誘起するために単球及びマクロファー
ジが不要となる実験により支持される。Wiliams, J.M.
et al., J. Immunol. 135:2249(1985)；Ceuppens, J.L.
& Baroja, M.L., J. Immunol. 137:1816(1986); Geppe
rt, T.D. & Lipsky P.E., J. Immunol. 138:1660(1987)
参照。これらの実験に基づき、固相抗ＣＤ３モノクロー
ナル抗体はＴ細胞表面上のＣＤ３抗原を凝集させること
により機能することが示唆された。
【００１９】しかしながら、抗ヒトＣＤ３抗体を生体に
注射すると、その結果はインビトロにおける結果と反対
になる。生体での使用が最初に承認されたモノクローナ
ル抗体であるＯＫＴ３モノクローナル抗体は、強力に免
疫抑制的であり、腎臓移植を受けた患者に対する免疫抑
制剤としての使用が承認されている。Ortho Multicente
r Group Study, N. Eng. J. Med. 313:337(1985)。ＯＫ
Ｔ３を注射すると、循環血液からＴ細胞が迅速に枯渇す
る。抗ＣＤ３抗体がこのＴ細胞の迅速な枯渇を引き起こ
すメカニズムはよくわかっていないが、最も適当な説明
としては、抗ＣＤ３抗体がＴ細胞のＡＤＣＣを引き起こ
すということである。すなわち、抗ＣＤ３抗体で被覆さ
れたＴ細胞が脾臓や肝臓を循環するので、これらの器官
中のＲＥＳの貪食細胞によってＴ細胞が溶解されるとい
うことである。Ｔ細胞の一部が補体に媒介される細胞溶
解又は他の細胞溶解メカニズムにより破壊されることも
可能である。
【００２０】ネズミ科動物のＣＤ３に対するハムスター
モノクローナル抗体を用いたマウスの生体実験におい
て、低投与量のＣＤ３が悪性進行性腫瘍の成長を妨げ、
致死的なセンダイウイルス感染からマウスを守ることが
できることが示された。Ellenhorn, J.D. et al., Scie
nce 242:569(1988); Kast, W.M. et al., J. Immunol.1
45:2254(1990)。マウスのＴ細胞がこのような抗ＣＤ３
抗体処理により活性化されることが示唆された。Hirsc
h, R. et al., J. Immunol., 142:737(1989) 。
【００２１】抗ＣＤ３抗体の生体投与を含む、ヒト及び
マウスにおける実験は、これら２つの種の間に実質的な
差異が存在することを示している。ヒトにおいては、静
脈内投与された少量の抗ＣＤ３抗体でさえ、免疫抑制的
で細胞溶解的である。また、インビトロにおけるＴ細胞
上の抗ＣＤ３抗体の活性化効果及び細胞分裂促進効果
は、ヒト血清又はＩｇＧの存在により完全にブロックさ
れる。Chang, T.W. et al., Proc. Natl. Acad. Sci.,
U.S.A. 78:1805(1981); Looney, R.F. and Abraham, G.
N., J. Immunol. 133:154(1984) 。これらの結果は、全
抗ＣＤ３抗体又はその断片は、ヒトの体内ではＴ細胞を
活性化しないことを示唆しており、従って、以下に記載
する本発明を示唆していない。
【００２２】
【課題を解決するための手段】本発明は、Ｔリンパ球上
の異なる１価の抗原性エピトープに対してそれぞれ特異
的な、Ｆｃ領域を欠く、複合していない２価の結合性分
子の２種又は３種以上の混合物；Ｔリンパ球上の抗原上
の１種類の１価の抗原性エピトープに対して特異性を有
する部分と、前記抗原と同一の抗原上の他の種類の１価
の抗原性エピトープに対して特異性を有する部分とを含
む二特異的Ｆ（ａｂ’）2 ；Ｔ細胞上の抗原に対して特
異的な複数の結合性分子が結合されたポリマー主鎖又は
マイクロビーズを有する分子複合体；Ｔ細胞上の同一の
抗原上の異なる１価の抗原性エピトープに対してそれぞ
れ特異的な結合性分子がそれぞれ結合したポリマー主鎖
をそれぞれ含む分子複合体の２種又は３種以上の混合
物；Ｔ細胞上の同一の抗原上の異なる１価の抗原性エピ
トープに非競合的に結合する複数の異なる結合性分子が
結合されたポリマー主鎖を含む分子複合体；Ｔ細胞上の
同一の抗原上の異なる１価の抗原性エピトープに非競合
的に結合する２種又は３種以上の異なる結合性分子がそ
の表面に結合されたリポソーム；Ｆｃ領域を欠き、ＣＤ
３−δダイマーに結合するが、同一のダイマーに他の抗
ＣＤ３−δ結合性分子が結合することを妨げない二価結
合性分子；並びにＴ細胞上の１種類の抗原に特異的な複
数の結合性分子が結合されたリポソームを含む分子複合
体を提供する。
【００２３】本発明の免疫調節物質は、Ｔ細胞又はその
部分(subset)の表面抗原に対して特異的である。これら
の抗原は、ＣＤ３、イディオタイプ担持レセプター鎖及
び他のＴ細胞レセプター（ＴＣＲ）−結合成分；並びに
ＣＤ２、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８及び他のＴ細胞特異的
表面成分を包含する。これらの抗原の多くは個々のモノ
クローナル抗体に対する結合部位を１つだけ含む（すな
わち、１価の抗原性エピトープ）。
【００２４】免疫調節物質の主な用途は免疫増強剤であ
る。これらは、Ｔ細胞又はその部分を活性化し、増殖さ
せ、Ｔ細胞によるＩＬ−２、γ−インターフェロン、Ｉ
Ｌ−１、ＩＬ−４、ＩＬ−６、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）
及び他のリンホカインの生産を促進する。Ｔ細胞は、免
疫系の多くの分枝の調節において中心的役割を果たすの
で、多くのリンホカインの統制がとれた分泌は多くの免
疫機構を活性化するであろう。一方、個々のリンホカイ
ンを投与した場合にはその効果はより限定されるであろ
う。
【００２５】このような免疫増強剤は癌及び感染症患者
の治療に用いることができ、感染源と接触した人が感染
症に罹ることを予防することができる。免疫増強剤はワ
クチンのアジュバントとして適用することができる。
【００２６】Ｔ細胞（又はその部分）上の多くの抗原
は、１つのモノクローナル抗体に対して特異的な抗原性
エピトープを１つだけ有する。モノクローナル抗体断片
自体は表面抗原を架橋させ凝集させることができない。
なお、表面抗原の架橋及び凝集は細胞の活性化にしばし
ば必要である。対照的に、本発明の物質は、補体媒介細
胞溶解及び抗体媒介細胞性細胞障害（ＡＤＣＣ）を生体
内において誘起することなく表面抗原を架橋し、凝集さ
せるように設計されている。
【００２７】本発明の具体例として、これらの目的を達
成するＦ（ａｂ’）2 断片（複数）（及びＦｃを欠く他
の二価結合性分子）を挙げることができる。本発明の第
１の断片（Ｆ（ａｂ’）2 及び他の二価結合性分子を含
む）は、同一の抗原上の１価の抗原性エピトープに非競
合的に結合する。本発明の第２の断片（Ｆ（ａｂ’）2
及び他の二価結合性分子を含む）は、同一の抗原上の１
価の抗原性エピトープに非競合的に結合する２つのモノ
クローナル抗体の１つから誘導された結合部位のそれぞ
れを有する二特異的抗体から誘導されたものである。
【００２８】本発明の別の具体例では、本発明の物質
は、結合性分子（Ｆｖ、Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）2 を包
含する）を結合させることができる分子主鎖又は基体を
含む。主鎖は、ＰＥＧ、セルロース、デキストラン、フ
ィコール、アガロース又は他の親水性ポリマーであって
よい。架橋のための活性基を確立された方法により導入
することができる。あるいは、リジン又はシステインを
含む長鎖ペプチドを合成することもできる。グリシン、
セリン及びリジン（又はシステイン）を２０：４：１の
比率で含み、分子量が１万ないし１００万（約１５０〜
１５０００アミノ酸）の好ましいアミノ酸コポリマーは
常法により合成することができる。デキストランやアガ
ロースのような架橋ポリマーにより形成されたリポソー
ム又はマイクロビーズも抗体断片を結合させる基体とし
て用いることができる。これらのリポソーム及びマイク
ロビーズは好ましくは直径が１〜１０μｍであり、撹拌
することにより液体媒体中に均一に懸濁することができ
る。
【００２９】上述のように、本発明の免疫調節物質は、
同一の抗原上の異なる１価の抗原性エピトープに非競合
的に結合するＦ（ａｂ’）2 断片（又はＦｃを欠く他の
二結合性分子）の混合物；同一の抗原上の１価の抗原性
エピトープに非競合的に（すなわち、互いに有意に妨害
することなく）結合する２つのモノクローナル抗体の１
つから誘導された結合部位をそれぞれ有する二特異的抗
体のＦ（ａｂ’）2 断片（又はＦｃを欠く他の二結合性
分子）；同一の抗原上の１価の抗原性エピトープに結合
する、抗体から誘導されたＦｃを欠く結合性分子、例え
ば、Ｆｖ、Ｆａｂ又はＦ（ａｂ’）2 に結合された、ポ
リエチレングリコール（ＰＥＧ）、セルロース、デキス
トラン、フィコール、アガロース、アミノ酸コポリマ
ー、リポソーム又はマクロビーズのような重合性主鎖を
含む複合体；並びに例えばＦｖ、Ｆａｂ又はＦ（ａ
ｂ’）2 のような結合性分子と結合した重合体主鎖、リ
ポソーム又はマイクロビーズを含む複合体であって、該
結合性分子の１つはＴ細胞上のＣＤ３抗原を特異的に標
的にし、他の結合性分子（単数及び複数）は、ＣＤ２、
ＣＤ４、ＣＤ５及びＣＤ８のような、Ｔ細胞上の１又は
２以上の他の抗原を特異的に標的にするもの、を包含す
る。
【００３０】モノクローナル抗体のＦｖ断片は、米国特
許第4,946,778 号及び国際出願WO88/09344号に記載され
たように、単鎖抗体法を用いて細菌中で生産することが
できる。Ｆｖはまた、グリコシル化部位を含み哺乳動物
細胞中で生産され得るように遺伝子操作することがで
き、それにより炭水化物部分を含む断片を得ることがで
きる。
【００３１】Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）2 は、ハイブリド
ーマ又はトランスフェクトされたセルライン（ミエロー
マ又はＣＨＯのようなセルライン）により生産された全
ＩｇＧを、ペプシン及びパパインでそれぞれ消化するこ
とによる酵素的開裂により生産することができる。
【００３２】Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）2 断片は全体的に
動物又はヒト由来のものであってもよいし、定常領域が
ヒト免疫グロブリンの定常領域から誘導され、可変領域
が親マウスモノクローナル抗体から誘導されたものであ
るキメラ型であってもよい。あるいは、Ｆｖ、Ｆａｂ及
びＦ（ａｂ’）2 はヒト由来のものであってもよい。す
なわち、相補性決定領域（ＣＤＲ）のみが動物モノクロ
ーナル抗体由来のものであって、定常領域及び可変領域
のフレームワーク領域はほぼ完全にヒト由来のものであ
ってよい。これらのキメラ型及びヒト型断片は完全に動
物由来のものに比べて免疫原性が低く、従って、生体投
与により適している。投与が長期間にわたって行われる
場合、特にそうである。
【００３３】キメラ抗体及びヒト型抗体の調製方法はこ
の分野において周知である（例えば、米国特許第4,816,
567 号及び国際出願第WO84/03712号参照）。Ｆｖ、Ｆａ
ｂ及びＦ（ａｂ’）2 断片は、これらのキメラ又はヒト
型抗体から上述のようにタンパク質分解酵素による消化
によって調製することができる。
【００３４】抗体断片は常法によりリポソームの線状又
は架橋主鎖に結合することができる。例えば、Ostro,
M.J. (Ed.), Liposomes: from Biophysics to Therapeu
tics(Marcel Dekker, New York, 1987) 参照。好ましい
リポソームの調製方法及びその表面に免疫グロブリンを
結合させる方法は、Ishimoto, Y et al., J. Immunol.
Met. 75:351 (1984)に記載されている。ジパルミトイル
フォスファチジルコリン、コレステロール及びフォスフ
ァチジルエタノールアミンから成る多層リポソームが好
ましい。精製断片を次いで、架橋剤Ｎ−ヒドロキシスク
シニミジル３−）２−ピリジルチオ）プロピオネートに
よりフォスファチジルエタノールアミンに結合すること
ができる。リポソームに断片が結合したことは、結合し
た断片に対する第２抗体及び補体でリポソームを処理す
ることにより予め補足されていた、例えばカルボキシフ
ロレッセンスのようなマーカーが放出されることにより
示される。リポソームは０．１〜５μｍの範囲の直径を
有する。
【００３５】抗体断片はまた、マイクロビーズに結合す
ることもできる。マイクロビーズはその直径が好ましく
は１〜１０μｍであり（すなわち、血液中の静止リンパ
球の直径と同じかそれより小さい）、これにより、生体
投与のための医薬に適した液体媒体中に懸濁することが
できる。撹拌すると、マイクロビーズ懸濁液は少なくと
も数分間は均一であり、この間に懸濁液を注射器で吸い
取って患者に投与することができる。Ｔ細胞活性化のイ
ンビトロの研究に用いられている、抗ＣＤ３抗体を不動
化するために用いられるセファロース４Ｂビーズ（Will
iams, J.M. etal., J. Immunol. 135:2249(1985))は直
径が約４５〜１６５μｍである。これらの大きなセファ
ロース４Ｂビーズは迅速に沈殿し、均一な懸濁液を注射
器で吸い取って患者に投与するのに十分な時間懸濁され
た状態を維持しない。また、ビーズが大きすぎて小さな
直径（すなわち大きなゲージ番号）の針の穴を通過する
ことができない。生体投与のためには、好ましいマイク
ロビーズは比較的長時間安定であるべきであり、しかし
体液中のヒドロラーゼにより分解を受けるものであるべ
きである。このようなマイクロビーズはアガロース又は
デキストランを周知の方法で架橋することにより製造さ
れたものを包含する。一例としてスーパーローズ１２
（ファルマシアＬＫＢバイオテクノロジー社、ニュージ
ャージー州０８８５４，ピスカタワェイ）を挙げること
ができる。
【００３６】抗体断片は、リポソーム、マイクロビーズ
又は本発明の他の担体に炭水化物部分を介して結合する
ことができる。炭水化物部分が超可変部又は抗体結合部
位に存在しないならば、炭水化物の架橋による結合は、
抗体断片の結合性に影響を与えない。抗体の結合部位は
なお、細胞表面抗原と結合できるからである。
【００３７】本発明の断片（Ｆｖ以外の断片）をポリマ
ー主鎖、リポソーム又はマイクロビーズに結合する好ま
しい方法は、定常領域上の炭水化物部分を介して結合す
ることである。これにより、妨害されずに抗原との結合
に利用な結合部位が最大化される。
【００３８】糖環状部分を誘導して断片（及び抗体）と
の結合のためのヒドラジド基を創出する方法が確立され
ている。Rodwell, J.D. et al., Proc. Natl. Acad. Sc
i. U.S.A. 83:2632(1986) 参照。この方法で調製された
数種の免疫複合体が臨床試験中又は定常的な臨床使用の
ための承認申請中である。
【００３９】抗原の結合部位を結合するためのポリマー
に、確立された方法に従って結合のための活性基を生成
させることができる。例えば、ＰＥＧを１，１’−カル
ボニルジアミダゾールで処理して、タンパク質のアミノ
基と反応するイミダゾールカルバメート活性基を誘導す
ることができる。Beauchamp, C.O. et al., Anal. Bioc
hem. 131:25(1983) 参照。同様な反応を、アガロースの
修飾に用いることができる。Bethell G.S. et al., J.
Biol. chem. 254:2572(1979)。
【００４０】抗体断片は、修飾され、活性化されたポリ
マーに直接結合することができる。活性化されたポリマ
ー（又はリポソーム若しくはマイクロビーズ）に結合す
るための二官能性架橋剤は、所望の性質及び架橋される
物質に応じて選択することができる。これらのヘテロニ
官能性試薬は数種類のものが市販されており（例えば、
Pierce Chemical Co.,、イリノイ州、ロックフォー
ド）、その反応操作は周知である。
【００４１】本発明の物質は、適当な医薬担体に混合さ
れた状態で、静脈注射により投与することができる。こ
れにより、本発明の物質は、循環中、脾臓、肝臓及び種
々のリンパ節中のＴ細胞に到達し得る。
【００４２】本発明の物質はまた、腹腔内投与すること
もできる。これにより、本発明の物質は主として腹腔内
の細胞と相互作用し、リンパ循環により他のリンパ組織
に分配される。脾臓中及び腹腔内の活性化され、増殖さ
れたＴ細胞はまた他の組織へ移動するかもしれない。
【００４３】本発明の物質はまた、固体の腫瘍、いぼ又
は他の異常組織の近傍に直接注射することもできる。こ
の場合、局部のＴ細胞が活性化され、増殖され、種々の
免疫機構を効果的に媒介する。
【００４４】本発明の物質のあるものは、静止リンパ球
の活性化のみを誘起し、増殖を誘起しない。このような
場合、本発明の物質の投与に続いてＩＬ−１、ＩＬ−２
又はＩＬ−４のようなＴ細胞増殖因子を投与してもよ
い。
【００４５】本発明の物質は、単独で投与することもで
きるし、癌患者の場合には外科手術、放射線治療又は化
学療法と併用することもできる。また、感染症患者につ
いては、ウイルス抗生物質又は他の抗ウイルス剤と併用
することもできる。本発明の物質のあるものは感染症の
ためのワクチンのアジュバントとして投与することもで
きる。
【００４６】本発明のユニークな物質の免疫増強剤とし
ての用途については、十分な実験的支持がある。上述の
ように、抗ＣＤ３モノクローナル抗体と単球／マクロフ
ァージ上のＦｃレセプター（ＦｃＲ）の間の相互作用
は、インビトロでの細胞分裂促進効果及び生体内でのＡ
ＤＣＣ効果の両方に必要である。Ｆｃを欠く、ＯＫＴ３
のＦ（ａｂ’）2 及びＦａｂ断片はもはや細胞分裂促進
効果がなく、また、単核細胞培養物から単球が枯渇する
と全ＯＫＴ３はＴ細胞の増殖を誘起できないことが初め
て見出された。Van Wauwe, J.P. et al., J. Immunol.
124:2708(1980),Chang, T.W. et al., Proc. Natl. Aca
d. Sci. U.S.A. 78:1805(1981)参照。ヒト血清、精製ヒ
トＩｇＧ又は単離されたＦｃ断片はＯＫＴ３の細胞分裂
促進効果をブロックすることができるので、抗ＣＤ３抗
体の細胞分裂促進作用には、抗ＣＤ３のＦｃと単球上の
ＦｃＲの相互作用が関与することが示唆された。Loone
y, R.F. and Abraham, G.N., J. Immunol. 133:154(198
4); Chang, T.W., Immunol. Today (1985) 。また、い
くつかの研究により、ＩｇＧに対する単球上のＦｃＲの
の欠陥は、抗ＣＤ３抗体の細胞分裂促進効果を阻害する
ことが示された。このことは、Ｆｃ−ＦｃＲ相互作用が
抗ＣＤ３抗体の細胞分裂促進作用にとって重要であるこ
とを示している。Ceuppens, J.L. et al., J. Immunol.
135:3882(1982);Tax, W.J.M., et al., Nature 304:44
5(1983); Tax, W.J.M., J. Immunol. 133:1185(1984)
参照。
【００４７】２、３の研究では抗ＣＤ３抗体の細胞分裂
促進メカニズムがさらに調べられた。セファロース４Ｂ
ビーズに高密度に結合された抗ヒトＣＤ３抗体及び精製
ヒトＩＬ−１は、抗原を提供する単球が完全に枯渇した
培養物中のＴ細胞の増殖を誘起し得ることが見出され
た。抗ヒトＣＤ３モノクローナル抗体−セファロース４
Ｂは静止ヒトＴ細胞を活性化することができ、次いでＩ
Ｌ−１はＲＮＡ合成、ＩＬ−２分泌、ＩＬ−２レセプタ
ーの発現そして究極的にＤＮＡ合成を開始させることが
できるものと結論づけられた。Williams, J.M. et al.,
J. Immunol. 135:2249(1985) 参照。また、単球が完全
に存在しない状態においては、可溶性の抗ヒトＣＤ５モ
ノクローナル抗体が培地中に存在するならば、抗ヒトＣ
Ｄ３抗体で被覆されたプラスチック培養プレート中でＴ
細胞を培養することにより、Ｔ細胞の増殖が誘起される
ことが報告された。Ceuppens, J.L. and Baroja, M.L.,
J.Immunol. 137:1816(1986) 参照。後に、付随する単
球が完全に枯渇した静止Ｔ細胞は、高濃度の抗ヒトＣＤ
３抗体（６４．１モノクローナル抗体について４０〜１
０００ｎｇ／ｍｌ）で被覆されたマイクロタイタープレ
ート中で、ＩＬ−２又は単球を添加することなく増殖で
きることが報告された。Geppert, T.D. and Lipsky, P.
K., J. Immunol. 138:1660(1987)参照。
【００４８】これらの結果は、「固相」抗ヒトＣＤ３抗
体が単球の非存在下でＴ細胞の活性化及び／又は増殖を
促進し得ることを示している。しかしながら、抗ＣＤ３
抗体の完全なＩｇＧで被覆された固相プラスチックシー
ト又はセファロース４Ｂビーズは、インビトロの使用に
は適しているが、生体内での適用には適していない。被
覆された抗体は、Ｔ細胞及びマクロファージの両方を吸
収できる。さらに、これらの固相材料は、腹腔内又は他
の経路で投与しても、投与したその位置に維持されるで
あろう。生体内での使用のためには、多数の抗ヒトＣＤ
３モノクローナル抗体を結合するのに適した、親水性で
可溶性のポリマー、リポソーム又はマイクロビーズが好
ましい。
【００４９】抗ＣＤ３モノクローナル抗体をポリマー主
鎖、リポソーム又はマイクロビーズに結合すると、抗Ｃ
Ｄ３モノクローナル抗体のＦｃ部分が単球、マクロファ
ージ及びＲＥＳの他の細胞と接触可能となり、貪食作用
により複合体が消失することを容易にするであろう。こ
のような消失を最小にし、抗ＣＤ３抗体による細胞分裂
促進効果が主たる効果であることを確保し、さらに、Ａ
ＤＣＣ又は補体媒介細胞溶解作用のようなあらゆる抑制
的作用を低レベルに減少させるために、Ｆｃ領域を欠如
した抗ＣＤ３モノクローナル抗体（すなわち、Ｆｖ、Ｆ
ａｂ及びＦ（ａｂ’）2 ）であって、Ｆｃ依存性ＡＤＣ
Ｃ及び補体媒介細胞溶解作用を引き起こさない抗ＣＤ３
モノクローナル抗体断片がポリマー主鎖、リポソーム又
はマイクロビーズに結合される。固相結合された抗ＣＤ
３モノクローナル抗体を用いた実験により、ある条件下
では、抗体のＦｃ領域は細胞分裂促進のために必要では
ないことが示唆された。
【００５０】リンパ球の活性の調節に関与する表面分子
のうち、最も重要なものはＴ細胞上のＴＣＲに付随する
成分又は分子である。これらの抗原レセプターは抗原又
は抗原を有する細胞と反応し、細胞を一連の活性化、ク
ローナル増殖及び分化に付することにより抗原刺激に応
答する。リンパ球の活性化及び増殖は次いで種々の免疫
反応及び応答をもたらす。
【００５１】ＴＣＲ複合体は極めて複雑で、鋭意研究に
も関わらずその構造は完全には特徴づけられていない。
入手可能な情報によると、「完全な」ＴＣＲ複合物は１
つのα鎖、１つのβ鎖、１つのγ鎖、１つのε鎖、１つ
のδ鎖及び１つのホモダイマーζ鎖を有する。α鎖及び
β鎖はクローン的に異なり、α／βダイマーが慣用的に
ＴＣＲと呼ばれている。ＴＣＲ複合物の残りの成分
（γ、ε、ζ及びδ鎖）は多型がなく、総括的にＣＤ３
抗原と呼ばれる。
【００５２】異なる分化段階にあるＴ細胞又は異なる機
能を有するＴ細胞は異なる組の鎖を発現することが知ら
れている。例えば、Baniyash, M. et al., J. Immunol.
263:9874(1988); Geisler, C. et al., J. Immunol. 1
45:1761(1990) 参照。従って、ほとんどのＴ細胞上のＴ
ＣＲ複合物中では、ほとんどのモノクローナル抗体によ
り認識される抗原性エピトープは１価である（複合物当
り１つのエピトープ）。
【００５３】いくつかのＴ細胞のＴＣＲ複合物中には２
つのζ鎖が存在するので、ＣＤ３−ζ鎖を認識するいく
つかのモノクローナル抗体に対しては２つの抗原部位が
存在する可能性がある。これらのモノクローナル抗体の
うち、あるものはＣＤ３／ＴＣＲ複合物を架橋できるか
もしれない。ζ鎖は比較的小さい（１６ｋｄ）ので、そ
のわずかな部分のみが該表面上に露出している。ＣＤ３
−ζダイマーに特異的ないくつかのモノクローナル抗体
は、物理的に近接する２つの二価の抗原性エピトープの
１つに結合し、他の抗ＣＤ３−ζモノクローナル抗体が
同一部位に結合することを排除するかもしれない。従っ
て、実際的な目的のためには、この後者のモノクローナ
ル抗体のグループ（おそらく小さなグループである）
は、これらもまた二価の抗原性部位に結合するが、ＣＤ
３／ＴＣＲ複合物を架橋することはできない。
【００５４】抗ＣＤ３抗体によるＴ細胞の細胞分裂促進
において、単球は、抗ＣＤ３抗体のＦｃと単球上のＦｃ
Ｒとの相互作用を介して、Ｔ細胞表面上のＣＤ３を凝集
させることができることが示唆されている。ＣＤ３はＴ
ＣＲに付随するので、ＴＣＲ複合物の凝集はＴ細胞の活
性化及びそれに続くＴ細胞の増殖を開始させる。ＣＤ３
−ζ鎖に特異的なモノクローナル抗体は二価の抗原性エ
ピトープを認識し、ＣＤ３／ＴＣＲ複合物を凝集し得
る。ほとんどの抗ＣＤ３モノクローナル抗体は、ＣＤ３
−γ、ＣＤ３−ε若しくはＣＤ３−δ又はＣＤ３−ζ上
の１価の抗原性エピトープに対して特異的である。従っ
て、可溶化抗ＣＤ３モノクローナル抗体はＴ細胞の活性
化及び増殖を開始させることができない。なぜなら、抗
ＣＤ３モノクローナル抗体により認識されるＣＤ３分子
の上の抗原性エピトープはほとんど１価であるからであ
る。従って、モノクローナル抗体又はＦ（ａｂ’）2 は
表面分子に橋をかけＣＤ３の組を複数形成することがで
きるが、これらを架橋して凝集させることはできない。
従って、ＣＤ３上の１価の抗原性エピトープに対してそ
れぞれ非競合的に結合する２種又はそれ以上の抗ＣＤ３
モノクローナル抗体を用いることにより、ＣＤ３抗原は
架橋され凝集され、それによってＴ細胞の活性化及び増
殖が開始される。抗ＣＤ３モノクローナル抗体のＦｃ領
域によって引き起こされる細胞障害を避けるために、全
ＩｇＧから誘導されたＦ（ａｂ’）2 又は遺伝子工学的
に生産されたＦ（ａｂ’）2 が好ましい。
【００５５】図１は、ある抗原分子１０が２つの１価の
抗原性エピトープ１１及び１２をそれぞれ有している様
子を模式的に示している。それぞれのエピトープ１１及
び１２はそれぞれ１つのモノクローナル抗体により認識
される。図２はこのようなモノクローナル抗体断片１４
のＦ（ａｂ’）2 を示している。モノクローナル抗体断
片１４は、図３に示すように、Ｔ細胞表面上の抗原１６
の対を形成するであろう。
【００５６】単球の助けなしに架橋及び凝集を引き起こ
すためには、１つの１価の抗原性エピトープをそれぞれ
認識する２又は３以上のモノクローナル抗体断片が必要
である。図４は、２種類の抗原性エピトープ１１、１２
の１つをそれぞれ認識する２種類のＦ（ａｂ’）2 （１
４及び１８）を模式的に示す。図５は、Ｆ（ａｂ’）2
１４及び１８を用いることによって、ある程度の架橋及
び凝集が達成できるが、分子２０のいくつかの対もまた
結合されることを示している。３つの異なる抗抗原モノ
クローナル抗体を用いると、架橋及び凝集がより明瞭に
起こることがわかる。
【００５７】図６は、ＣＤ３の１価の抗原性エピトープ
１１及び１２に対する２つの特異性２３及び２４を有す
る二特異的Ｆ（ａｂ’）2 ２２を模式的に示す。図７
は、Ｔ細胞表面上に単独で対になった分子２６のいくつ
かが残されるが、この２特異的断片２２により分子の架
橋及び凝集が達成できることを示している。これらのＦ
（ａｂ’）2 製剤は従って、Ｔ細胞の活性化及び増殖を
誘起するであろう。
【００５８】Ｔ細胞又はＢ細胞表面への抗原性エピトー
プの架橋を達成するもう１つの方法は抗ＣＤ３モノクロ
ーナル抗体で被覆されまたはこれが結合されたプラスチ
ックシート又はセファロース４Ｂビーズを用いることで
ある。これらは、細胞分裂促進を開始するために、体内
のある部分に埋め込まれる。もっとも、上述のように、
これらの製剤はリンパ球循環を介して輸送されず、ま
た、静脈内投与もできない。従って、その上に抗ＣＤ３
モノクローナル抗体が結合される適当な主鎖又は基体
は、親水性で、安定で、非免疫原性で、無毒で患者の血
清及び他の体液中のヒドロラーゼ（例えばグリコシダー
ゼ及びプロテアーゼ）に対して耐性なポリマーであるべ
きである。例として、ＰＥＧ、セルロース、デキストラ
ン、フィコール及びアガロースを挙げることができる。
これらは異なる分子サイズを有し、全てよく特徴づけら
れ、研究されている。
【００５９】他の適当な「主鎖」はアミノ酸コポリマー
である。１つの好ましいアミノ酸コポリマーは、結合部
位を与えるために、グリシン及びセリン残基、並びにリ
ジン、システイン又は他の適当な残基を有する。Ｆｖ、
Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）2 の分子サイズを考慮すると、
隣接するリジン又はシステイン残基の間の最適の距離は
１５〜２５アミノ酸の範囲である。従って、好ましいア
ミノ酸コポリマーは（Gly15Ser5Lys)n（ｎは５〜６０
０）の組成を有する。
【００６０】本発明の断片はまた、上述した方法を用い
てリポソームに結合することもできる。この場合、架橋
のための反応基がリポソームの表面に導入され、断片が
それに結合される。あるモノクローナル抗体のある臨床
適用のためには、リポソームに結合された断片（又は結
合性分子）は、断片／ポリマー複合体よりも好ましい場
合がある。なぜなら、リポソーム複合体は、ポリマー主
鎖上の断片よりも、細胞間の相互作用によく似たメカニ
ズムによってＴ細胞上の抗原と相互作用することができ
るからである。
【００６１】本発明の断片はまた、マイクロビーズに結
合することもできる。マイクロビーズの大きさは好まし
くはクロマトグラフィーで典型的に用いられているセフ
ァロース４Ｂ又はセファデックスビーズよりも小さい
（好ましくは約１〜１０μｍ）が、その化学組成はセフ
ァロース４Ｂ又はセファデックスビーズに類似してい
る。
【００６２】アガロース分子の異なる架橋度を有するセ
ファロース２Ｂ、４Ｂ及び６Ｂビーズは、湿ったビーズ
直径で、それぞれ約６０〜２００μｍ、４５〜１６５μ
ｍ、４５〜１６５μｍの直径を有する。デキストラン分
子の異なる架橋度を有するセファデックスビーズは、湿
ったビーズ直径で２０〜６００μｍの直径を有する。最
も小さなセファデックスビーズ（セファデックスG-25 S
F)の湿潤ビーズ直径は１７．２〜６９μｍである。これ
らのビーズは、直径が約１０〜１５μｍである白血球よ
りもはるかに大きい。これらはクロマトグラフィーのた
めに作られており、撹拌後、容易に沈殿する。アガロー
ス又はデキストランの架橋により生産され、ファルマシ
アＬＫＢバイオテクノロジーにより販売されている他の
ビーズの多くも最小のビーズ直径が約２０μｍである。
しかしながら、スーパーローズ12HR10/30は１０±２μ
ｍの直径を有する。スーパーローズ１２ビーズの大きさ
は、小さな静止リンパ球の大きさとほぼ同じである。血
液中の白血球は容易に懸濁し、患者に投与することがで
きるので、抗体と結合したスーパーローズ１２も同様な
物理的性質を有し、容易に懸濁でき、生体投与のために
注射器に容易に吸い取ることができる。より小さなサイ
ズのビーズも同一の化学組成により形成されることがで
きる。より小さなサイズのビーズは、懸濁液中の沈降速
度を利用して大きなサイズのビーズから分画することに
より得ることができる。
【００６３】重合化した本発明の断片の細胞分裂促進性
は、それらのサイズ、より詳細には、１複合体分子当り
の結合部位の数におそらく依存する。好ましい分子複合
体は、小さいが最適の細胞分裂促進効果を誘起できるも
のである。異なる長さ又はサイズの適当なポリマーが多
く市販されている。異なる長さのアミノ酸コポリマーも
また合成することができ、分子ふるいクロマトグラフィ
ーによって分画することができる。セルロースやアガロ
ースのようなポリマーは、例えばセルラーゼ及びアガラ
ーゼのような特定の酵素で処理して異なる長さにするこ
とができる。
【００６４】図８は、図１の１価の抗原性エピトープ１
２に特異的な１価のＦａｂ断片３４が結合されたポリマ
ー主鎖３２から成る分子複合体３０を用いることにより
表面分子の架橋及び凝集を達成できることを模式的に示
している。分子複合体はまた、Ｔ細胞の活性化を最大に
するためにリポソーム又はマイクロビーズに結合するこ
ともできる。
【００６５】より小さな分子複合体又は粒子が好ましい
ということを念頭に置くと、図９及び１０に示される他
の具体例もまた本発明の範囲に含まれる。図９に示す具
体例では、ポリマー主鎖４０（これはマイクロビーズで
あってもよい）には図１の抗原性エピトープ１２に対す
る１価のＦａｂ断片４２が結合され、ポリマー主鎖４４
には図１の抗原性エピトープ１１に対する１価のＦａｂ
断片４６が結合されている。図１０に示す具体例では、
ポリマー主鎖５０（これはまたマイクロビーズであって
もよい）にＦａｂ断片４２及び４６が結合されている。
【００６６】これらの具体例は、原理的に図４及び図６
に示す２つの産物と同様に機能する。異なる点は、図４
及び図６に示されるＦ（ａｂ’）2 におけるよりも多く
の結合部位が分子複合体中に存在するということであ
る。結合部位の数が多いので、架橋及び凝集がより完全
であり、架橋されない単一対の分子はより少ないであろ
う。リポソーム及びマイクロビーズはＴ細胞に対する抗
体断片を提供するために比較的整った表面を有している
ので、本発明の他の具体例では、デキストラン−抗ＣＤ
３Ｆａｂのような、抗体断片とポリマーの複合物をＴ細
胞活性化のためにリポソーム又はマイクロビーズに結合
することもできる。
【００６７】上述のように、本発明は、抗ＣＤ３抗体断
片に限定されるものではなく、ヒトＴリンパ球の表面抗
原に対して特異性を有し、投与した際に生体内で免疫調
節活性を有する結合性分子及び断片（並びにそれらの複
合体）をも包含する。抗ＣＤ３抗体について真実である
ように、これらの生体内での効果の多くは公知のインビ
トロでの効果及び全抗体の生体内での効果からは推測す
ることができない。Ｔ細胞に特異的なＩｇＧの生体内効
果が主として補体により媒介される細胞溶解効果、ＡＤ
ＣＣ又は他の細胞溶解メカニズムであるにも関わらず、
本発明に従って調製されたこのような産物の望ましい刺
激効果は発揮される。抗ＣＤ３抗体に加え、これらの細
胞溶解効果を開始させる抗体の他の例として抗ＣＤ４抗
体がある。Alters, S.E. et al., J. Immunol. 144:458
7(1990) 。これらの抗体の全ては生体内でＴ細胞の枯渇
を引き起こす。
【００６８】抗ＣＤ４抗体及びＢ細胞抗原レセプターに
対する抗体は、インビトロにおいて刺激効果があること
がわかっている。このことは、抗ＣＤ３抗体と同様に、
本発明に従って製剤すると、それらも生体内でそれぞれ
の標的細胞を活性化又は変調するであろうことを示して
いる。抗ＣＤ３モノクローナル抗体によるＴ細胞の活性
化は、Ｔ細胞上の異なる表面抗原に特異的なモノクロー
ナル抗体により促進され得ることが多くの実験により示
されている。これらの補助的なモノクローナル抗体はＨ
ＬＡクラス１抗原、ＨＬＡクラスII抗原（例えばＩ
ａ）、ＣＤ２、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ２８又は
ＣＤ３７に特異的なモノクローナル抗体を包含する。Ce
uppens, J.L. et al., J. Immunol. 137:1816(1986); T
utt, A. et al., J. Immunol. 147:60(1991)。これらの
抗原のあるもの、例えばＨＬＡやＣＤ３７は多くの細胞
型により表現される。従って、これらの抗原を標的とす
るモノクローナル抗体は単独で用いても抗ＣＤ３モノク
ローナル抗体と共に用いても、特異性を欠いているので
好ましくない。それにも関わらず、ＣＤ２、ＣＤ４、Ｃ
Ｄ５及びＣＤ８のような、これらの抗原のあるものはＴ
細胞又はその部分により特異的に表現される。従って、
本発明の１つの具体例においては、抗ＣＤ３モノクロー
ナル抗体の断片と抗ＣＤ２、抗ＣＤ４、抗ＣＤ５、抗Ｃ
Ｄ８モノクローナル抗体又はＴ細胞に特異的な他のモノ
クローナル抗体とがポリマー主鎖、リポソーム又はマイ
クロビーズに結合される。Ｆｃ領域を欠く重合化又は不
動化モノクローナル抗体の対は、生体内においてＴ細胞
を活性化するために用いられる。
【００６９】少なくとも２種類の異なる抗原決定基に結
合できる断片混合物である本発明の断片とは異なり、１
価の抗原決定基に結合する単一のモノクローナル抗体は
細胞表面上の抗原を架橋することができない。細胞の活
性化及び増殖を促進するためには、表面抗原の架橋が通
常必要である。しかしながら、ＣＤ４のような多くの表
面分子は単一のポリペプチド鎖又は異なるポリペプチド
鎖（複数）から成り、１価の抗原性エピトープを認識す
る単一の二価抗体によっては効率的に架橋することがで
きない。
【００７０】
【実施例】Ｔ細胞上のＣＤ３への非競合的結合に関する
抗ＣＤ３モノクローナル抗体の試験種々の抗ＣＤ３モノ
クローナル抗体は免疫化学的試薬を販売する会社から購
入することができる。このような会社の例として、ニュ
ージャージー州ラリタンのオルソ・ダイアグノスティッ
ク・システムズ社、カリフォルニア州マウンティンビュ
ーのベクトン・ディッケンソン・イムノロジカル・リエ
イジェンツ社、フロリダ州ヒアリーチのカルター・ダイ
アグノスティック社、ミズリー州セントルイスのシグマ
・ケミカル社、インジアナ州インジアナポリスのベーリ
ンガー・マンハイム社及びニューヨーク州レイクサクセ
スのオリンパス社を挙げることができる。これらのモノ
クローナル抗体は全て異なるグループにより開発された
ものである。これらの会社は抗ＣＤ３モノクローナル抗
体を精製されたＩｇＧの形態としてだけでなく、フルオ
レッセインで標識した形態のものをも市販している。
【００７１】ヒトＣＤ３に対するさらなるモノクローナ
ル抗体は、Kung P.C. et al., Science 206:347 (1979)
によって記載されたハイブリドーマ法により容易に調製
することができる。
【００７２】ヒトＣＤ３に対して特異的な２つのモノク
ローナル抗体（又はその断片）が同時にＣＤ３−担持Ｔ
細胞に結合できるか否かを決定するために、蛍光フロー
サイトメトリー分析を適用することができる。この分析
のために、ＣＥＭ（ＡＴＣＣＣＣＬ１１９）のようなヒ
トＴセルライン又は末梢血単核細胞を細胞染色のために
用いることができる。この分析は、ＦＩＴＣ又はローダ
ミン標識抗ＣＤ３モノクローナル抗体の細胞への結合
が、異なる濃度の第２抗ＣＤ３モノクローナル抗体の存
在によって阻害されるか否かを調べるものである。この
分析はまた、逆に、蛍光標識した第２抗ＣＤ３抗体の結
合がもう一方の抗ＣＤ３抗体の存在により阻害されるか
否かを調べるべきである。
【００７３】個々の抗ＣＤ３抗体のＴ細胞への結合が５
〜１０倍濃度のもう一方の抗ＣＤ３抗体によって有意に
影響を受けないならば、それらの抗ＣＤ３モノクローナ
ル抗体は互いに非競合的にＴ細胞上のＣＤ３分子に結合
するものと結論することができる。これら２種のモノク
ローナル抗体によるＴ細胞への結合が追加的であるか否
かを測定することにより、上記分析結果をさらに確認す
ることができる。
【００７４】ここで記載した用語及び表現は例示のため
のみに用いたものであり、本発明の範囲は特許請求の範
囲の記載に基づいてのみ限定され、また、各請求項の全
ての均等物も本発明の範囲に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【図１】異なるモノクローナル抗体の結合部位によって
それぞれ認識される２種類の１価の抗原性エピトープを
有する表面分子を模式的に示す図。
【図２】２つのＦａｂ腕が同一であり、図１の表面分子
の１価の抗原性エピトープの１つに対して特異的なモノ
クローナル抗体のＦ（ａｂ’）2 断片を模式的に示す
図。
【図３】図２のＦ（ａｂ’）2 による橋かけによって分
子の対ができることを示す模式図。
【図４】図１に示す表面分子の１価の抗原性エピトープ
の１つにそれぞれ特異的な２種類のモノクローナル抗体
の２種類のＦ（ａｂ’）2 の混合物を模式的に示す図で
ある。
【図５】図４に示す２種類のＦ（ａｂ’）2 の混合物に
よって図１に示す表面分子が架橋された様子を模式的に
示す図。いくつかの単一対の分子もまた形成されること
に注意。
【図６】図１の表面分子の２種類の異なる１価の抗原性
エピトープの両方に特異的な二特異的Ｆ（ａｂ’）2 を
示す模式図である。
【図７】図６に示す二特異的Ｆ（ａｂ’）2 によって図
１に示す表面エピトープが架橋される様子を示す。いく
つかの対になった分子が形成される。
【図８】単一特異的な重合化モノクローナル抗体によっ
て表面エピトープが架橋される様子を模式的に示す図で
ある。
【図９】図１に示す表面分子の２種類の１価の抗原性エ
ピトープのそれぞれ１つに特異的なモノクローナル抗体
のＦａｂが結合されたポリマー主鎖からそれぞれ成る、
２種類の分子複合体の混合物を模式的に示す図である。
【図１０】図１に示す表面分子の２種類の１価の抗原性
エピトープの１つに対してそれぞれ特異的な、異なる２
種類のモノクローナル抗体の２種類のＦａｂが結合され
たポリマー主鎖から成る分子複合体を模式的に示す図で
ある。
【符号の説明】
１０ 抗原分子 １１ １価の抗原性エピトープ １２ １価の抗原性エピトープ １４ モノクローナル抗体のＦ（ａｂ’）2 断片 １６ 対になった抗原 １８ モノクローナル抗体のＦ（ａｂ’）2 断片 ２０ 分子の対 ２２ 二特異的Ｆ（ａｂ’）2 ３０ 分子複合体 ３２ ポリマー主鎖 ３４ １価のＦａｂ断片 ４０ ポリマー主鎖 ４２ １価のＦａｂ断片 ４４ ポリマー主鎖 ４６ １価のＦａｂ断片 ５０ ポリマー主鎖
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 47/34 Ｂ 7433−4Ｃ 47/36 Ｂ 7433−4Ｃ 47/38 Ｂ 7433−4Ｃ

Claims (24)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 Ｔリンパ球上の異なる１価の抗原性エピ
    トープに対してそれぞれ特異的な、Ｆｃ領域を欠く、複
    合していない２価の結合性分子の２種又は３種以上の混
    合物。
  2. 【請求項２】 前記結合性分子はＦ（ａｂ’）2 であ
    り、かつ、前記結合性分子は互いに非競合的に１価の抗
    原性エピトープに結合する請求項１記載の混合物。
  3. 【請求項３】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ細
    胞抗原レセプターに付随する成分である請求項１記載の
    混合物。
  4. 【請求項４】 Ｔリンパ球上の抗原上の１種類の１価の
    抗原性エピトープに対して特異性を有する部分と、前記
    抗原と同一の抗原上の他の種類の１価の抗原性エピトー
    プに対して特異性を有する部分とを含む二特異的Ｆ（ａ
    ｂ’）2 。
  5. 【請求項５】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ細
    胞抗原レセプターに付随する成分である請求項４記載の
    Ｆ（ａｂ’）2 。
  6. 【請求項６】 Ｔ細胞上の抗原に対して特異的な複数の
    結合性分子が結合されたポリマー主鎖又はマイクロビー
    ズを有する分子複合体。
  7. 【請求項７】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ細
    胞抗原レセプターに付随する成分である請求項６記載の
    分子複合体。
  8. 【請求項８】 前記ポリマーは親水性で、安定で、人体
    中で非免疫原性であり、ヒト体液中で加水分解に対して
    耐性である請求項６記載の分子複合体。
  9. 【請求項９】 前記ポリマーはポリエチレングリコー
    ル、セルロース、デキストラン、アガロース又はアミノ
    酸コポリマーである請求項６記載の分子複合体。
  10. 【請求項１０】 結合性分子はＦｖ、Ｆａｂ及びＦ（ａ
    ｂ’）2 から成る群より選ばれる請求項７記載の分子複
    合体。
  11. 【請求項１１】 前記マイクロビーズは、１〜１０μｍ
    の直径を有する請求項６記載の分子複合体。
  12. 【請求項１２】 前記マイクロビーズはアガロース又は
    デキストランを架橋することにより製造されたものであ
    る請求項１１記載の分子複合体。
  13. 【請求項１３】 前記マイクロビーズはスーパーローズ
    12 HR 10/30 である請求項１２記載の分子複合体。
  14. 【請求項１４】 Ｔ細胞上の同一の抗原上の異なる１価
    の抗原性エピトープに対してそれぞれ特異的な結合性分
    子がそれぞれ結合したポリマー主鎖をそれぞれ含む分子
    複合体の２種又は３種以上の混合物。
  15. 【請求項１５】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ
    細胞抗原レセプターに付随する成分である請求項１４記
    載の混合物。
  16. 【請求項１６】 Ｔ細胞上の同一の抗原上の異なる１価
    の抗原性エピトープに非競合的に結合する複数の異なる
    結合性分子が結合されたポリマー主鎖を含む分子複合
    体。
  17. 【請求項１７】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ
    細胞抗原レセプターに付随する成分である請求項１６記
    載の分子複合体。
  18. 【請求項１８】 Ｔ細胞上の同一の抗原上の異なる１価
    の抗原性エピトープに非競合的に結合する２種又は３種
    以上の異なる結合性分子がその表面に結合されたリポソ
    ーム。
  19. 【請求項１９】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ
    細胞抗原レセプターに付随する成分である請求項１８記
    載のリポソーム。
  20. 【請求項２０】 Ｆｃ領域を欠き、ＣＤ３−δダイマー
    に結合するが、同一のダイマーに他の抗ＣＤ３−δ結合
    性分子が結合することを妨げない二価結合性分子。
  21. 【請求項２１】 Ｆ（ａｂ’）2 断片である請求項２０
    記載の結合性分子。
  22. 【請求項２２】 Ｔ細胞上の抗原上の１種類の１価の抗
    原性エピトープに対して特異的な結合性分子と、前記と
    同一の抗原上の異なる種類の１価の抗原性エピトープに
    対して特異的な結合性分子が結合されたリポソームを含
    む分子複合体。
  23. 【請求項２３】 抗原がＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８又はＴ
    細胞抗原レセプターに付随する成分である請求項１２記
    載の分子複合体。
  24. 【請求項２４】 Ｔ細胞上の１種類の抗原に特異的な複
    数の結合性分子が結合されたリポソームを含む分子複合
    体。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007500217A (ja) * 2003-05-13 2007-01-11 マイケル ハル−ノイ， 同種異系細胞治療：ミラー効果
JP2007525225A (ja) * 2004-02-26 2007-09-06 イミュノバティブ セラピーズ， リミテッド 細胞治療のためのｔ細胞を調製するための方法
JP2007526314A (ja) * 2004-03-01 2007-09-13 イミュノバティブ セラピーズ， リミテッド 細胞治療処方方法および組成物
JP2021515189A (ja) * 2018-02-28 2021-06-17 プラス−フリー リミテッド 生体液から線溶タンパク質を除去するための体外装置及びマトリックス、その方法及び使用

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7541184B2 (en) 2000-02-24 2009-06-02 Invitrogen Corporation Activation and expansion of cells
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
EP1539929B1 (en) * 2002-06-28 2013-04-10 Life Technologies Corporation Methods for restoring immune repertoire in patients with immunological defects related to autoimmunity and organ or hematopoietic stem cell transplantation
US20050084967A1 (en) * 2002-06-28 2005-04-21 Xcyte Therapies, Inc. Compositions and methods for eliminating undesired subpopulations of T cells in patients with immunological defects related to autoimmunity and organ or hematopoietic stem cell transplantation
US20040175373A1 (en) * 2002-06-28 2004-09-09 Xcyte Therapies, Inc. Compositions and methods for eliminating undesired subpopulations of T cells in patients with immunological defects related to autoimmunity and organ or hematopoietic stem cell transplantation
US20050233390A1 (en) * 2003-04-09 2005-10-20 Allen John W Device including a proteinaceous factor, a recombinant proteinaceous factor, and a nucleotide sequence encoding the proteinaceous factor
EP1708752B1 (en) * 2004-01-27 2012-02-22 University Of Southern California Polymer-bound antibody cancer therapeutic agent
JP2006345852A (ja) * 2005-06-16 2006-12-28 Virxsys Corp 抗体複合体
CA2646329C (en) 2006-03-20 2018-07-03 The Regents Of The University Of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting
EP2361930A3 (en) 2007-03-26 2011-10-26 Dako Denmark A/S Multimers of MHC-peptide complexes and uses thereof in Borrelia infectious diseases
EP2167536A1 (en) 2007-07-03 2010-03-31 Dako Denmark A/S Mhc multimers, methods for their generation, labeling and use
EP2197491A4 (en) 2007-09-04 2011-01-12 Univ California HIGHAFFINE ANTI-PROSTATE STEM CELL ANTIGEN (PSCA) ANTIBODIES TO CANCER AND TO THE DETECTION OF CANCER
US10611818B2 (en) 2007-09-27 2020-04-07 Agilent Technologies, Inc. MHC multimers in tuberculosis diagnostics, vaccine and therapeutics
US10968269B1 (en) 2008-02-28 2021-04-06 Agilent Technologies, Inc. MHC multimers in borrelia diagnostics and disease
WO2010009735A2 (en) 2008-07-23 2010-01-28 Dako Denmark A/S Combinatorial analysis and repair
GB0817244D0 (en) 2008-09-20 2008-10-29 Univ Cardiff Use of a protein kinase inhibitor to detect immune cells, such as T cells
WO2010037402A1 (en) 2008-10-02 2010-04-08 Dako Denmark A/S Molecular vaccines for infectious disease
WO2010059253A2 (en) 2008-11-24 2010-05-27 Massachusets Institute Of Technology Methods and compositions for localized agent delivery
EP2711418B1 (en) * 2012-09-25 2017-08-23 Miltenyi Biotec GmbH Method for polyclonal stimulation of T cells by flexible nanomatrices
JP7097667B2 (ja) 2013-09-27 2022-07-08 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 無担体生物活性タンパク質ナノ構造体
CN116212048A (zh) 2015-08-12 2023-06-06 麻省理工学院 纳米颗粒的细胞表面偶联
AU2017283480A1 (en) 2016-06-13 2019-01-24 Torque Therapeutics, Inc. Methods and compositions for promoting immune cell function
US10294454B2 (en) 2016-08-24 2019-05-21 General Electric Company Methods and kits for cell activation
EP3678701A4 (en) 2017-09-05 2021-12-01 Torque Therapeutics, Inc. THERAPEUTIC PROTEIN COMPOSITIONS AND METHOD FOR MANUFACTURING AND USING THEREOF

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01304356A (ja) * 1988-04-04 1989-12-07 Oncogen Lp リンパ球活性調節用抗体ヘテロコンジュゲート

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4867973A (en) * 1984-08-31 1989-09-19 Cytogen Corporation Antibody-therapeutic agent conjugates
US5024940A (en) * 1987-02-19 1991-06-18 T Cell Sciences, Inc. Nucleic acids encoding the delta chain of the T cell antigen receptor
US4867962A (en) * 1988-02-26 1989-09-19 Neorx Corporation Functionally specific antibodies
FI891226A (fi) * 1988-04-28 1989-10-29 Univ Leland Stanford Junior Reseptordeterminanter i anti-t-celler foer behandling av autoimmunsjukdom.
EP0420913B1 (en) * 1988-06-14 1995-11-15 Cell Med, Inc. Heterofunctional cellular immunological reagents, vaccines containing same and methods for the use of same
US4925648A (en) * 1988-07-29 1990-05-15 Immunomedics, Inc. Detection and treatment of infectious and inflammatory lesions
US5223426A (en) * 1988-12-15 1993-06-29 T Cell Sciences, Inc. Monoclonal antibodies reactive with defined regions of the t-cell antigen receptor
ZA903258B (en) * 1989-04-28 1991-02-27 Baylor College Medicine Method of suppressing hiv infection
WO1990013316A1 (en) * 1989-04-28 1990-11-15 Baylor College Of Medicine Dissemination of hiv-1 infected cells
CA1339415C (en) * 1989-08-24 1997-09-02 Milton David Goldenberg Detection and treatment of infections with immunoconjugates
AU6290090A (en) * 1989-08-29 1991-04-08 University Of Southampton Bi-or trispecific (fab)3 or (fab)4 conjugates
CA2069342A1 (en) * 1989-10-20 1991-04-21 Herman Waldmann Materials and methods for the treatment of foreign tissue
ZA914625B (en) * 1990-06-22 1993-02-24 Lilly Co Eli In vivo targeting with bifunctional antibodies
GB9021679D0 (en) * 1990-10-05 1990-11-21 Gorman Scott David Antibody preparation
HUT66445A (en) * 1990-10-26 1994-11-28 New York Health Res Inst Monoclonal antibodies specific for the v3 loop and cd-4 binding site of hiv-1 gp120
US5167956A (en) * 1991-02-11 1992-12-01 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Immunotoxin with in-vivo t cell suppressant activity

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01304356A (ja) * 1988-04-04 1989-12-07 Oncogen Lp リンパ球活性調節用抗体ヘテロコンジュゲート

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007500217A (ja) * 2003-05-13 2007-01-11 マイケル ハル−ノイ， 同種異系細胞治療：ミラー効果
JP2011006491A (ja) * 2003-05-13 2011-01-13 Immunovative Therapies Ltd 同種異系細胞治療：ミラー効果
US10806777B2 (en) 2003-05-13 2020-10-20 Mirror Biologics, Inc. Method for allogeneic cell therapy
JP2007525225A (ja) * 2004-02-26 2007-09-06 イミュノバティブ セラピーズ， リミテッド 細胞治療のためのｔ細胞を調製するための方法
JP2007526314A (ja) * 2004-03-01 2007-09-13 イミュノバティブ セラピーズ， リミテッド 細胞治療処方方法および組成物
JP2021515189A (ja) * 2018-02-28 2021-06-17 プラス−フリー リミテッド 生体液から線溶タンパク質を除去するための体外装置及びマトリックス、その方法及び使用
US11975132B2 (en) 2018-02-28 2024-05-07 Plas-Free Ltd Extracorporeal device and matrix for removing fibrinolytic proteins from biological fluids, methods and uses thereof

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Publication number Publication date
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