JPH06505988A - 緑内症の治療に有用な有機硫黄化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 線内症の治療に有用な有機硫黄化合物 本発明は、有機硫黄化合物、その化合物を含む薬学的調製物及び線内症の治療方 法に関する。

線内症は、数１００万人がその人生の後半段階において罹かる非常に一般的な眼 疾患である。線内症は、異常に高い眼内圧に特徴があり、もし治療を受けないと 、視神経が侵されて、視野が狭くなり、最終的には不可逆的に失明する。

眼内圧は、流入及び流出の速度、即ち、水性液の流動により測定される。水性液 は、目の後戻に入り、次いで１孔を経て、前房にまで流動し、そこから、最終的 に線維柱帯網を経て目から出ていく。

水性液は、水晶体及び角膜に栄養物を供給し、その適当な供給は、健康な目を維 持するために最も重要なことである。

過剰な流入または流出の減少のいずれかによる水性液の流動の障害により、眼内 圧は１７〜２０　＋ｏ＋ａＨｇの通常値（成人の場合）よりも増加し、即ち、目 は圧力互選の状態となる。圧力亢進の状態が続くと、神経が損傷を受け、失明す る。線内症についての詳細は、Ｒ，Ｌ、コウクス及びＰ、Ｊ、ホルマーセラーズ によるｒＡｎ　０ｕｔｌｉｎｅ　ｏｆ　ＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙＪ　、ライ ト、ブリストルにより発行（１９８５）　、ｐ、５４１５７及びＪ、Ａ、ザドゥ ナイスキー及びに、ダイブソンにより編集された、シリーズ：　ｒ　Ｃｕｒｒｅ ｎｔＴｏｐｉｃｓ　ｉｎ　Ｅｙｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＪ　、アカデミツクプレス に記載されている。

市場の全ての公知の抗線内置薬は、水性液の生成を減少させるか、または流出、 即ち、目からの水性液の排出を増加させることによって、眼内圧を低下させるも のである。線内置薬は、従って、全て圧力降下剤である。

最も一般的な抗線内症剤群は、アドレナリン作用性拮抗薬である；それらの多く は、β−遮断薬（このタイプの中で最も広く使用されているのは、チモロールで ある）、アドレナリン作用薬、ドーパミン作用薬、コリン作用薬（この型の中で 最も広く使用されているのはピロカルピンである）またはいくつかのその他の化 合物群がある。

詳細な概要のために、例えば、ｒ　Ａｎｎｕａｌ　Ｒｅｐｏｒｔｓ　ｉｎ　Ｍｅ ｄｉｃｉｎａｌ　ＣｈｅｓｉｓｔｒｙＪ　、２０巻、９章：Ｍ、Ｆ、スゲルー及 びＲ，Ｌ、スミスによるｒＡｎｔｉｇｌａｕｃｏａ＋ａ　ＡｇｅｎｔｓＪ（１９ ８５、アカデミツクプレス）及びテキスト：Ａ。

グツドマン及びり、ギルマンスによるｒ　Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ ａｌ　Ｂａ５ｉｓ　ｏｆ　ＴｈｅｒｅａｐｅｕｔｉｃｓＪを参照のこと。

従７て、線内症治療の特徴の一つは、多種類の化学構造のタイプが、過剰に高い 眼内圧を減少させるために使用されることができるという事実である。

近年使用されている薬剤の中に、十分満足できるものはない。心臓、腎臓、肺及 び／またはリビドーに影響を与える重大な副作用がある。特に、炭酸脱水酵素阻 害剤、α−アドレナリン作用性拮抗薬及びβ−アドレナリン拮抗薬の場合におけ る、副作用のいくつかは、種々の作用方式により直接影響を受けるが、その他の ものは受けない。さらに、１日当り点眼薬のいくらかの投与を必要とする代謝安 定の問題がある。従って、上記の欠点を持たない新規な線内症剤を開発するため に多くの努力が払われている。最近、全く新しい化学構造型の化合物、即ち、ペ プチド及びペプチド誘導体が、抗線内症活性を有する、即ち圧力降下剤として文 献記載された。例としては、カルボキシアルキルジペプチド（欧州特許第００８ ８３５０号）及び房ナトリウム尿排泄冗進因子、２９アミノ酸長の長ペプチド（ ｒ　Ｆｏｒｔｓｃｈｒｉｔｔｅ　ｄｅｒ　ＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｅＪ、８ ９巻、ｐ、８９／９１　（１９８９）　）がある。

米国特許明細書第４，６３４，６９８号は、スルホンアミド基を介して、ベンゾ チアジアジニルスルホニルフェニル部分に結合したカルボキシアルキルジペプチ ドからなる眼科用薬学的組成物及び線内症の治療においてその組成物を使用する 方法を開示している。その組成物は、活性剤として、本発明の化合物とは実質的 に異なる環状のプロリン型のアミノ酸を含む。従って、存在するペプチド部分は 、本発明においてクレームされたアミノ酸様化合物とは実質的に異なり、また必 須に存在する硫黄原子は、ＳＯ３−酸化状態にあり、窒素により置換されてスル ホンアミド基を生成する。このスルホンアミド基は、炭酸脱水酵素阻害剤である 古い抗線内置薬アセトアゾールアミド中、及びその他の硫黄原子かへテロ環状芳 香族チアジアゾール環中に結合された所に存在する。

デンマーク特許出願第１３１５／８５号は（放棄されている）、線内症及び／ま たは眼内圧力亢進を、ＡＣＥ阻害剤を使用して治療する方法を開示している。上 記のＡＣＥ阻害剤は、種々の起源の高血圧を低下させるためにも有用であると記 載されている。しかしながら、提案されたＡＣＥ阻害剤は、本発明において提案 されるタイプのものとは異なる。さらに、その化合物がクレームされた効果を有 することは可能にすることはできない。

さらに、乳タンパク質の加水分解物が抗線内症活性を有することが開示されてい る（ＷＯ８６１０４２１７及びＥＰ２１０２０４）。そこに記載されたペプチド 組成物は、本発明の化合物と同じように十分に定義された化学的化合物ではなく 、むしろ、乳タンパク質の加水分解質から得られる混合物である。

１９９０年１２月７日に出願された本出願人による先の特許出願第ＰＣＴ／ＤＫ ９０１００３２２は、下記式％式％ （上記式中、 Ａは、存在しないか、または非疎水性で、未荷電のアミノ酸またはその誘導体で あり、 Ｂは、存在しないか、または未荷電のアミノ酸または未荷電のＮ−メチル化アミ ノ酸であり、Ｃは、未荷電のアミノ酸または未荷電のＮ−メチル化アミノ酸であ り、 Ｄは、非親水性または存在しない側鎖を有する未荷電のアミノ酸であり、 Ｅは、システィンまたはシスティン同族体であり、スルフヒドリル基が遊離であ るがまたは置換されており、Ｒ，は、任意に置換されたＮＨ，、任意に置換され たＯＨ，−０−グリコジル、Ｌ−またはＤ−α−アミノ酸であるか、または、Ｒ １は存在しない） のペプチド誘導体に関する。

これらの化合物は、線内症及び眼内圧力亢進に活性を有する。好適な化合物は、 Ｈ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｖａ　１−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）−ＮＨｓ及びＨ− Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｖａ　Ｉ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）　−ＮＨｓで線内症及 び眼内圧力亢進に対して局所投与により適当であることが証明されており、血圧 または心拍に対して副作用がないことが判明している。その化合物の心臓血管に 対する効果がないことが、ラットへの静脈内投与により示されている。

本発明者らは、意外にも、硫黄を含むそのような粗化合物のより小さい本体部分 が、それ自体で活性なコア構造物であることを発見した。その他のそのような有 意に異なる最小構造物群（同時出願のＤＫ特許出願第０５３２／９１号）は同定 されており、作用方法、代謝及び考えられる副作用の概要の両者が異なることが 認められ得る。このように、これらの新規なコア構造物の親構造物からの分離は 、特に、種々の形態の線内症、治療概要及び患者群をターゲットとする一方で副 作用のり支りを減少する眼科用薬学的調製物の設計の基礎としての有意な利点を 構成することができる。

本発明は、適当な動物モデルにおいて、眼内圧、ＩＯＰを低下する有機硫黄化合 物に関する。

本発明の化合物は、一般式： ［］ で示されるか、またはそのＮ−Ｃ−環状若しくはＳ−８架橋形態物またはヒトの 生理的条件下において前記の基本構造のいずれかに転換されるかまたはそれを放 出する化合物であり、式中、 Ｒｔは、Ｈ１任意に二重結合を含み、及び／またはハロゲン、ニトロ、アミノ、 スルホ、ホスホ若しくはカルボキシにより置換されるＣ１゜までの直鎖状または 分枝鎖状のアルキルまたはシクロアルキル、任意にハロゲン、ヒドロキシ、ニト ロ、アミノ、スルホ、ホスホ、カルボキシまたはアルキルにより１−または多置 換されるアラルキルまたはアリールであるか、またはＲ□は、グリコジル、ヌク レオシルまたはＬ−若しくはＤ−αアミノ酸またはタイプ［Ｐ］の結合により結 合された２〜８の残基のペプチド部分であり、 ａは、０．１．２または３であり、 Ｃｘは、ＲまたはＳ配置を有する四面体炭素原子（ＳＰ３混成）であり、 Ｃｙは、三平面の炭素（ＳＰ２混成）であって、Ｄは、存在しないか、またはｃ ｙは、四面体炭素原子であって、ＤはＨｌであり、 ［Ａ］は、存在しないか、脱カルボキシアミノ酸残基またはＮＨＲｔ”　Ｃ式中 、Ｒｌｏは、Ｒ，の定義の通りであり、化合物がＮ−Ｃ環状形態物である場合に は存在しない）であり、 ［Ｐ］は、存在しないかまたはペプチド結合Ｃｏ−ＮＨｌまたｇＩＣＨｔ　ＮＨ ，ＣＨｔ　５ＳＣｏ　ＣＨ＊１７）ようなそれらのイソステレス、ＮＨ−Ｃｏの ようなそれらのレトロインバース形態であり、 Ｂは、存在しないかまたはＣｔ　”””　Ｃ・の任意に分枝鎖状のアルキルまた はシクロアルキルであり、Ｓは、硫黄であり、 Ｅは、本化合物がジスルフィド架橋形態物である場合には存在せず、またはＥは 、 （ＣＲＩＲ４）ｃ−ＮＨＣＯＲｓ　Ｃ式中、Ｒ８及びＲ１は、独立して、Ｈ，Ｃ Ｈｓまたはハロゲンであり、ＲｍはＨ１直鎮、分枝鎮状のアルキルまたはシクロ アルキル、アラルキルまたはアリールであり、それらの全ては、任意にハロゲン 、ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスホ、アミノまたはニトロ、により１− または多置換され、または脱カルボキシアミノ酸または脱カルボキシペプチド部 分であり、Ｃは１．２または３である）、Ｓ　ＣＲｓＲｙＲｓ（式中、Ｒ，、Ｒ １及びＲ１は、独立して、Ｈ１ハロゲン、直鎮、分枝鎖状のアルキルまたはシク ロアルキル、アラルキルまたはアリールであり、その全てがＲｓについて説明し たように、任意にｍ−または多置換されている）、 ＣＲｍ　Ｒｔ。Ｒ１□（式中、Ｒ１、Ｒ１，及びＲ１１は、独立して、８％アル キル、アラルキルまたはアリールであり、その全てが、Ｒ，について説明したよ うに任意に１−または多置換されている）、または Ｓ−Ｒ工、（式中、Ｒ１１は、ＣＬ−ＣＬｏのアラルキルまたはヘテロアラルキ ルである）であるか、またはＲａｔ（式中、Ｒ１！は、上記定義の通りである） であり、Ｒ３は、Ｈ，０８％　ＣＨｓまたは Ｎ　ＲｒｓＲｔａ　（式中、Ｒ１３及びＲｔ４は、独立して、ＨｌＲ，について 説明したように任意にぼ換された直鎖、分枝鎮状のアルキルまたはシクロアルキ ル、アラルキルまたはアリールである）、 ＯＲ＋ｓ（式中、Ｒ１，は、ＨＳＲ＊について説明したように任意に置換された 直鎮、分枝鎖状のアルキルまたはシクロアルキル、アラルキルまたはアリールで ある）、０−グリコジル、または ＬまたはＤ−α−アミノ酸またはタイプ［Ｐ］の結合により結合した２〜８の残 基のペプチド部分であり、または、Ｒｔは、Ｅがシスティンの脱カルボキシ誘導 体またはその同族体である場合または本化合物がＮ−Ｃ環状形態物である場合に は、存在せず、ｂは、１．２．３．４または５であり、及びＲｈ　、　Ｒｓ及び Ｒ１は一緒になって、１０以下のアミノ酸残基を形成し、 水素原子は、フッ素によって置換され得る。

本発明の好適な化合物は、一般式 の化合物であり、式中、 ［Ｂ］ は、全体で２〜７の脂肪族炭素原子を含むこれらの脱アミノ−Ｃｙｓまたは−Ｐ ｅｎまたは側鎖同族体であり、Ｓは硫黄であり、 ａはＯであり、 ［Ｅ］は、 Ｒ目（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル 及びｔｅｒｔ、ブチル、ｎ−ペンチル、インペンチル、ｔｅｒｔ、ペンチル、１ ．２−ジメチルプロピル及び２．２−ジメチルプロピルのようなＣ４〜Ｃ１のア ルキルである）、または Ｒユ４（フェニル、ベンジル、トルイル及びピリジルのようなＣ６〜Ｃ１のホモ −またはヘテロアラルキルである）、または ＣＨ＊　Ｎ　ＨＣＯＲｔ　ｍまたは ＣＨＩＮ　ＨＣＯＲ！、または ＳＲｌｍまたは Ｓ　Ｒ１４または ［Ｅ］は、存在しない の中から構成される装置換基であり、本化合物は、Ｓ−８重量体であり、 Ｒ１１［Δ］、［Ｐ］　、ＣｙＳＤ、Ｒｘ及びｂは、請求の範囲第１項に記載の 定義の通りである。

本発明のより好適な化合物は、一般式■°の化合物でナインまたは３−メルカプ トプロピオン酸であり、Ｓ、Ｒｔ、［Δ］、［Ｐ］　、ＣＹ、［Ｅ］　、Ｄ、Ｒ １、ａ及びｂは請求の範囲第２項に記載の通りである。

活性化合物の例は、 Ｈ−Ｃｙｓ−（Ａｃｔｎ）−Ｍ＠ｔ−ＮＯ２゜またはそれらの薬学的に許容され 得る誘導体がある。

本発明において定義された化合物群に属する基本構造のいくつかを含む多数の小 ペプチドが知られている。例えば、ＥＰ０２７８７８７、ＥＰＯ３５９３９９、 ＥＰ０１７９４１２、ＷＯ３８１０３５３５、ＥＰＯ３９９６５６、日本国特許 要約１３．２３８、ＵＳ４９６８６９６、ＣＨ０６５８６６Ｌ、ＥＰＯ１８３２ ４５、ＥＰ０１６１０１７、日本国特許要約７．１７１、ＤＥ２２６１９２６、 Ｃ，Ａ、１０３．１０ｏ５７２ｂ、ＵＳ３されていない。

眼内圧力亢進の治療のために特に有効な化合物は、さらに、本発明は、線内症ま たは眼内圧力亢進の治療に有効な量の本発明の化合物と、薬学的に許容され得る 希釈液または賦形剤とを含む薬学的組成物に関する。

追加的に、本発明は、有効な抗線内症または眼内圧力亢進低下量の本発明の化合 物を咄乳動物に投与することからなる、線内症または眼内圧力亢進を治療する方 法に関する。

本発明の化合物は、好適には、目の局所治療に使用されるように、局所的な投与 可能な水性等張及び滅菌溶液または油中の滅菌溶液または分散液として使用され る。

目の治療のための典型的な油は、滅菌キャスター油である。これらの局所溶液ま たは分散液は、０．０１から１０％、特に、０１〜５％、好ましくは０．２５〜 １％（重量％）の少なくとも１の本発明の有機硫黄化合物を含む。これらの溶液 の通常の投与量は、目の結膜嚢に投与される１〜５滴である。この投与量は通常 、１日に２〜６回投与される。［ＤＡＢ−９ドロンパ一２０滴（Ｔｒｏｐｆｅｎ ｚａｅｈｌｅｒ　ｇｅ＋ｎａｅｓｓ　’Ｄｅｕｔｓｃｈｅｓ　Ａｒｚｎｅｉｂｕ ｃｈ　９＋は約１ｍｌ与える。］ 本発明の好適な化合物の多くにおいて、有機硫黄構造物は、アミノ酸を含むペプ チド化合物の一部である。本明細書中において、語句アミノ酸は、２０の天然ア ミノ酸を含むだけでなく、先行技術で認められているアミノ酸置換体及び置換置 を包含するものと理解されたい。

語句アルキルは、例えばＩ　ＵＰＡＣにおいて例示されている全ての飽和炭化水 素を含むものと理解されたい。

例として、ＣＬ−０４アルキルでは、メチル、エチル、ｎ−ブロピル、イソプロ ピル、ｎ−ブチル、イソブチル及びｔｅｒｔ、−ブチルが挙げられる。同様に、 語句シクロアルキル及びアリールは、例えばＩＵＰＡＣにおいて定義されている 通りであり、ハロゲンは、塩素、臭素、ヨウ素またはフッ素を意味する。

語句ペプチドは、ペプチド結合置換体及び／またはペプチド擬態物、即ち先行技 術において認められているような疑似ペプチド（例えば、ｒ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉ ｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　２０ｔｈ　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｍ ｐｏｓｉｕｍＪ　、Ｇ　、ユング、Ｅ、バイエル編集、ｐ、２８９／３３６及び その中の参考文献参照）並びに、その生活性ペプチドを特に満開としての局所投 与または経口運搬に特に適したものとする塩及び薬学的調製物及び／または処方 物を包含する。そのような塩、処方物、アミノ酸置換体及び疑似ペプチド構造物 は、安定性、処方、運搬性を高めるために、または製造の経済性を向上するため に必要で、望ましいものであり、増加した眼内圧の低下及び線内症に適した降圧 剤としてのペプチドの必要な生物学的活性に負の影響を与えないことを条件とし て許容される。

実際の薬理学的活性効果は、分子の構造的に活性な中心部を、今日まで未確立で しかも多分知られていない目の１またはそれ以上のレセプターに結合することを 介在して認識される。従って、インビボまたはインビトロのレセプター置換アッ セイが化合物ＨＡｓｎＬｅｕＧｌｙＶａ　ＩＣｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨｓについて 行われる限り、ＰＣＴＤＫ９０１００３２２による薬効を有する化合物は、α− アドレナリン作用またはβ−アドレナリン拮抗効果、コリン作用効果または炭酸 脱水酵素阻害効果を示すことができた。

たはそれ以上の基の置換のような追加的な構造的特徴を介して調整することがで き、薬理学的条件下における酵素的または自発的な化学変換に対する感受性を有 する場合において、それらは、プロドラッグ形態を構成することができる。異な る添加物及び賦形剤は、薬物動力学的及び治療効果に影響を与えることもできる 。

増加した安定性、目の浸透、レセプターまでの運搬または調節された放出のため に、調整は場合によっては、性能に著しい向上をもたらすことができる。安定性 を高めるアミノ酸及びＮ末端置換体の使用の例は、ゴールドスタイン、Ｇ、らの 米国特許４，５０５．５８３　（１９８５）　ｒＥｎｚｙｗ＋ｅ　ｒｅｓｉｓｔ ａｎｔ　ｉｍｍｕｎｏ＋ａｏｄｕｌａｔｏｒｙ　ｐｓｐｔｉｄｅｓＪに記載され ている。ペプチドプロドラッグの例は、バンドガード、Ｈｌによるｒｌｎｔ、　 Ｊ、　ｏｆ　ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓＪ、５２、ｐ、２５５　（１９８９） に記載されている。添加物の使用の例は、ディビス、Ｎ　、Ｍ　、らによる’ｉ 　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｕｃｏａｄｈｅｓｉｖｅ　ｐｏｌｙ＋ｏｅｒ ｓ　ｉｎ　ｏｃｕｌａｒ　ｄｒｕｇ　ｄｅｒｉｖｅｒｙ、　Ｉ　Ｊｉｓｃｏｕｓ 　５ｏｌｕｔｉｏｎｓＪ、ｒＰｈａｒａ＋ａｃｅｕｔｉｃａｌｓ　Ｒｅｓ、Ｊ、 ８、ｐ、１０３９　（１９９１）に記載されている。

置換体を別とすると、血液及びその他の場所におけるタンパク質分解酵素及びペ プチド分解酵素による分解の危険にさらしながら、生活性ペプチドを設計する場 合に、レセプターに結合しなければならないペプチド疑似及び／または特別の関 連を有する類似構造の３つの特定の形態が、特に挙げられ、下記の例により説明 する：第一に、Ｄ−アミノ酸残基構造をもたらす骨格キシル中心の反転は、特に Ｎ末端において、活性に損失を与えずに、タンパク質分解に対する増加された安 定性をもたらし得る。

１の例が、スミス、Ｃ，Ｓ、らの論文ｒ　Ｔｒｉｔｉａｔｅｄ　Ｄ−Ａｌａ”Ｐ ｅｐｔｉｄｅ　Ｔ　ＢｉｎｄｉｎｇＪ、ｒ　Ｄｒｕｇ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ 　Ｒｅｓ、　Ｊ　、１５、ｐ、３７１〜３７９　（１９８８）に記載されている 。

第二に、安定性及びしばしばレセプター結合もが、環状類似化合物の生成により 高められ得る。１の例が、ゴールドスタイン、Ｇらによるｒ　Ｃｏｎｆｏｒｍａ ｔｉｏｎａｌｌｙ　ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ　ｔｈｙａ＋ｏｐｅｎｔｉｎ−１ｉｋ ｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓＪ　、米国特許ｉ４，５４７．４８９　（１９８５）に 記載されている。最後に、ケトメチレン、メチルスルフィドの導入またはペプチ ド結合を置換するレトロインバース結合、即ちＣＯとＮＨの置き換えの両者は、 安定性及び薬効を大きく高める。

後者のタイプの１の例は、シスト　Ａ、らによる論文［Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌ ｙ　ａｃｔｉｖｅ　ｒｅｔｒｏｉｎｖｅｒｓｏ　ａｎａｌｏｇｕｅｓ　ｏｆ　ｔ ｈｙｍｏｐｅｎｔｉｎＪ　、リヴイエル、Ｊ、Ｅ、及びマーシャル、Ｇ、Ｒ。

（編集）　、ｒＰｅｐｔｉｄｅｓ、　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、５ｔｒｕｃｔｕｒｅ 　ａｎｄ　Ｂｉ。

１ｏｇｙＪ　、ニスコム、ライデン（１９９０）　、９．７２２〜７７３に記載 されている。

レセプター結合に直接関連がない構造修飾による効果の調整のより密接に関連す る例は、ペンタペプチドＨＡｓｎＬｅｕＧＩｙＶａ　ＩＣｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨ ｓが目の電膜を浸透し、有効な圧力低下剤であることが示されたＰＣＴ／ＤＫ９ ０１０　ｏ　３２２から得られる。それはさらに、２つの活性中心、本出願によ る１と、ＤＫ特許出Ｄｏ　５３２／９１による１を含み、−緒にトリペプチド部 分−Ｇ　Ｉ　ｙＶａ　ＩＣｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨｓを形成する。

しかしながら、相当する特定のＮ−α−未保護のトリペプチドＨＧＩｙＶａ　１ ｃｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨｓの拮抗効た場合には、これは予期したよりも著しく低 いことが見出された。しかしながら、単にトリペプチドをＡｃＧ　１ｙＶａ　Ｉ Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）ＨＮ＊ヘアセチル化すること菖Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨｓ及 びＨＧＩｙＶａ　ｌ０Ｂｚ　１における並行的研究により、薬効の低さは、それ らが良好な薬効を有していたので、遊離アミノ末端それ自体によるものではない ことが示されている。１の特定の理論にとられれずに、ＨＧｌｙＶａ　ＩＣｙｓ 　（Ａｃｍ）ＨＮ、の場合のアセチル化による分子の全体の両親媒性は、より好 ましいものとし、それにより、目を介し及び／またはレセプターに対する浸透及 び運搬を向上させるすることができることは推測することができる。いくらかの 高められた酵素安定性は、アセチル化により予見されることができる。

本発明の化合物は、原理が知られた種々の方法、即ち、化学的結合方法（ランシ ュ、Ｅ　、　：　ｒＭｅｔｈｏｄｅｎ　ｄｅｒ　ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ　Ｃｈ ｅａ＋ｉｅＪ　、１５巻、バンド１＋２、ｒｓｙｎｔｈｅｓｅｖｏｎ　Ｐｅｐｔ ｉｄｅｎＪ　、シームベルラーク、ストゥー／トガルト（１９７４）、及びバラ ニー、Ｇ、；メリフィールド、Ｒ、Ｂ　、　：　ｒＴｈｅ　ＰｅｐｔｉｄｅｓＪ 　、Ｅ　、グロス、Ｊ、マイエンホーファー、編集、２巻、１章、９．１−２８ ４、アカデミツクプレス（１９８０）参照）、または酵素結合方法（ウィドマー 、Ｆｌ、ジｇハンセン、Ｊ、Ｔ、、ｒ　Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ　Ｒｅｓ、　Ｃｏ＋ ｕｏｕｎ、Ｊ　、４４巻、ｐ、３７−４６　（１９７９）、及びクルマン、Ｗ　 、　：　ｒＥｎｚｙｏ＋ａｔｉｃ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓＪ、Ｃ ＲＣブレスインコー゛ボレイテッド、ポーカレイトン、フロリダ（１９８７）、 及びウィドマー、Ｆｌ、ジョハンセン、Ｊ、Ｔ、、ｒＳｙｎｔｈｅｔｉｃ　Ｐｅ ｐｔｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ＭｅｄｉｃｉｎｅＪ　、アリタ ロ、Ｋ９、バータネン、Ｐ８、パティエリ、Ａ、、ｐ、７９〜８６、エルセビエ ル、アムステルダム（１９８５）参照）、または方法の設計及び経済にとって好 都合である場合には化学的及び酵素的方法の組合せにより合成されることができ る。

本発明の化合物は、上記に挙げた一般的合成方法により、またはそれらの好都合 な組合せにより製造されることができる。

本発明の化合物は、可能であれば薬学的担体及び運搬システム及び／またはその 他の有用で薬学的に許容され得る添加物と組合せて、薬学的調製物として線内症 の治療に使用されることができる。

ラビットの目の眼内圧、ＩＯＰが平常値よりも実験的に高められた動物実験にお いて、本発明の化合物は、チモロールを投与する場合と類似の方法で眼内圧の低 下を達成することができることが示された。チモロールは、線内症の治療に一般 的に使用されるが、β−遮断薬であり、心臓、肺及び／または性的機能に対して 重大な副作用を有する。

本発明の化合物を用いれば、これらの及びその他の副作用の多くを避けることが できることが予期される。事実、本発明の化合物の特徴的な構造を含むＰ　ＣＴ ／Ｄ　Ｋ９０１０　Ｏ３２２による特定のペンタペプチド、ＨＡｓｎＬｅｕＧＩ ｙＶａ　１ｃｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨ，にツィテ、副作用、特に種々の動物及び微 生物モデルにおｌｊる血圧及び心拍効果、毒性及び突然変異誘発力並びに局所刺 激または知覚麻痺効果について特に完全に調査している。

抗線内症化合物（１または複数）のＩＯＰ低下効果が最初に確立された動物モデ ルは、本発明者らの１人の実験質において開発された臨床関連モデルであり、彼 は、このモデルにおいて多くのβ−遮断薬（チモロールのような）及びアドレナ リン作用薬の圧力低下効果をポジティブに示し、公知の及び推定的な繰向置薬に おけるモデルの臨床的関連性を示している。

この臨床モデルの主な特徴は、初期の通常値より高いラビットの目のＩＯＰのス トレス誘発された増加である。

ストレスは、７．５ｇを負荷された５ＨＩＯＴＺ−トノメータ−を使用する圧力 の測定（１２時間間隔）の形態で作用、即ち与えられる。圧力は最初５回の測定 、即ち２及び１／２日後に上昇し始め、１０回の測定、即ち５日後に最大に到達 する。

例えば圧力の測定のように外傷が治療中に持続するにも関わらず、ＩＯＰが明確 に確立された後に与えられた場合、公知の抗線内置薬がＩＯＰを低下させる。

抗線内置薬による治療が外傷付与、即ち、動物実験の開始における圧力の測定に よるストレスの行使と同時に開始される場合には、活性抗線内置薬は、初期及び 通常値より高い増加されたＩＯＰの発達を拮抗し、一方、不活性化合物は、拮抗 せず、従って増加した圧力が得られる。関連のこのモデルは、臨床的に使用され る抗線内置薬を使用する多くの実験において示されている。

このモデルの詳細な説明はニスタインバッハ、Ｔｏ、論文、ウニベルシテツーア ウゲンクリニク、ハンブルグーエツペンドルフ、１９８６　：　ｒＡｄｒｅｎｅ ｒｇｉｃａ　ｕｎｄ　ｎｅｕｅＰｅｐｔｉｄｅ　ｂｅｉ　Ａｕｇｅｎｉｎｎｅｎ ｄｒｕｃｋ：　Ｂｅｚｉｅｈｕｎｇ　ｚｕｍ　Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ　ｉ ｓ　Ｋａｍｍｅｒｗａｓｓｅｒ　ｖｏｎ　ＫａｎｉｎｃｈｅｎＪに記載されてい る。

本発明の化合物のＩＯＰ活性は、同様に、実施例において示されるようなこのモ デルにおいて示されている。

従って、これらの有機硫黄化合物は、線内症の治療の適当な候補である。

上記博士論文中に記載されたペプチド組成物は、本発明の化合物のようには十分 に同定された化学的化合物ではなく、むしろそれらは乳タンパク質の加水分解物 から得られる混合物である。これらのペプチド及びその中に抗線内症性が含まれ るそれらの種々の活性は、本発明者の１人による欧州特許第２１０２０４号に記 載されている。

ストレス誘発されたラビットモデルにおけるＩＯＰ低下効果の発見は、確認され 、さらにその他の増加された眼圧ラビットモデルを使用して研究されている。こ のモデル、広く応用される水負荷モデルにおいて、眼内圧の増加は、大容量の滅 菌水をラビットの腹膜内に注射することによって達成される。他方の目を食塩水 プラシーボで処理しながら、一方の目に点眼治療を開始した後に、両方の目のＩ ＯＰを種々の間隔をおいて測定し、目の間の圧力差を薬理学的効果の表現として とらえる。このモデルにおいて、ピロカルピン、周知の圧力低下コリン作用薬は 、圧力低下効果を有することが示された。

本発明の化合物の利点は、適当な登録及び、望ましいいと考えられる場合には、 現在発明されクレームされたものよりもいくらか優れた性質を有する類似化合物 を得るための論理的及び系統的構造修飾を可能にするそれらの定義された化学的 性質にある。

さらに、本発明の化合物は、低分子量（≦８００）であり、従って、分子量〜３ ０００を有し、抗線内症効果を得るために注射投与を必要とするｒ　Ｆｏｒｔｓ ｃｈｒｉｔｔｅ　ｄｅｒＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｅＪ　、８６巻、ｐ、８９ 〜９１　（１９８９）に記載の房ナトリウム尿排泄因子とは異なる、局所投与が 可能である。

さらに、房ナトリウム尿排泄因子は、心臓血管ホルモンであり、延長された時間 にわたって線内症の治療に使用されることは研究されていない。最終的に、ペプ チドタンパク質加水分解混合物（化学構造用語において必ず厳密にペプチド的で はない）及び房ナトリウム尿排泄因子の両者は、抗体の生成の後に免疫反応を生 じさせ得るサイズを有する。このような反応は、本発明の低分子量化合物では起 こりにくい。

本発明の有機硫黄が作用する１または複数のメカニズムは、これまでは詳細に知 られておらず、今日未知のタイプのものであるか、またはいくつかの知られたメ カニズムに関連するものであり得る。β−遮断効果、α−作用効果、コリン作用 効果及び酵素炭酸脱水酵素における阻害効果が明らかにないために、水性液流出 に対するその他の効果が作用することができる。後者のタイプのメカニズムのい くつかの示唆が、インビトロの研究において見出されている。即ち、初期の段階 において行われたインビトロの研究は、粗化合物ＨＡｓｎＧｌｙＧｌｙＶａ　１ ｃｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨ＊が培養ウシ線維柱帯網細胞におけるグルコサミンの取 り込みの著しく有意の減少を誘発することを示した。このことから、流出抵抗に 重要なグルコサミングリカンの合成における減少が推察される。

本開示中のアミノ酸及び保護基に関する略語は、命名に関するＩＵＰＡＣ−ＩＵ Ｂ標準規則に従う。従って、Ｐｅｎは、β、β−ジメチルンステインを意味する 。

追加的に、特に下記の略語を使用する：ＨＯＮＳｕ　：　Ｎ−ヒドロキシスクシ ンイミドＤＣＣ：　ジシクロへキシルカルボジイミドＢｏｃ　：ｔ＠ｒｔ、−ブ チルオキシー力ルボニルＤＣυ　：　ジシクロへキシルウレア ＴＦ＾　：　トリフルオロ酢酸 ＴＥＡ：）リエチルアミド ＯＭａ　：　メチルエステル Ａｃｍ　’　Ｈアセトアミ“トメチル ＭＰＲ：　３−メルカプトプロピオン酸ＲＡＭ　、ベンズアミドメチル Ｂｚｌ　：　ベンジル Ｂｚ：　ベンゾイル 本発明をさらに、実施例により説明及び証明する。

１１１杵ＩＪＬｆｉ ストレスを　え゛れたラビット　モデルにお番る眼られた場合に、ラビット動物 モデルにおける実験的に増加されたＩＯＰを低下させるか、または圧力の増加を 拮抗、即ち、予防する。

本化合物は、凍結乾燥粉末であり、粉末、または０゜９％ＮａＣ１水性溶液中に 溶解された満開としてラビットの目に与えられた。負の対照は、０．９％水中Ｎ ａＣ１溶液でこの研究は、「水負荷」動物モデルを利用した。

薬物溶液の点眼３０分前に、抗生混合物（Ｓｉｇｍａ　Ｐ　９０３２）を加えた 注射用滅菌蒸留水（３０℃）６０ｍｌ／ｋｇをラビットに腹膜内注射した。

時間Ｏにおいて、薬物溶液５０μｌを、１の目に点眼し、等しい容量の滅菌溶液 をその他の目に点眼した。−冬目のＩＯＰを、示された時間においてモニターし た。各時間におけるＩＯＰの変化は、投与されていない目におけるＩＯＰから、 投与された目におけるＩＯＰを引くことによって計算された。

このデータのプロットは、標準偏差を含むＩＯＰ対時間を示すように作成された 。これらのプロットがら、最大ＩＯＰ効果、それに達する時間及びＩｏＰ低下効 果の０または微小のレベルに戻る時間を評価した。これらの数値は、効能及び効 果の持続時間の基準としてとらえた。

−・　１〜７のためのチル・注１、 上記したように、４〜１０のラビットからなる群において、水負荷モデルまたは ストレス誘発された拮抗モデルの各々における眼内圧低下または拮抗効果につい てペプチドをテストした。このテストは、２．５〜３．０ｋｇ重のランダムな性 別のラビットであるが、世界中の数箇所の種々の研究所における異なる品種から なる相同の群において行った。従って、場合によりでは、ラビットの目の絶対出 発圧力において、群間の変異があった。

水負荷モデル構造の場合において、各ラビットは、実験の持続時間のその独自の 参照用対照として作用し、ストレス誘発拮抗モデルの場合において、ラビットの 各群は、１０ストレスユニツトの終りの始めにおいて、参照用対照として作用し た。通常、ペプチドは、混ざりもののない等張食塩水中に溶解されるが、水負荷 モデルの２の場合において、生理学的ｐＨのＴＲｌ５−緩衝液が含まれた。

両方の場合において、負の食塩対照群は、圧力に対して効果を示さなかった。関 連したＴＲｌ５−緩衝対照群は、水負荷モデルにおいても効果を示さず、一方、 公知の縮瞳線内置薬であるピロカルピンの２．６％溶液は、図４のグラフに示さ れるように、好適な化合物のいくつかと類似の反応を与えた。次いで、表中に示 される化合物を、下記の基準に基づいて、活性として分類した：水負荷モデルに おいて、１の口中の１％溶液の１滴は、対照治療された目に相当する有意の圧力 低下効果を与え、それは、１時間内に少なくとも１　ｍｍＨｇにおいて最大であ り、平均でその群で少なくとも９０分間の低下効果持続時間が得られた。ストレ ス誘発拮抗モデルにおいて、平均で治療された群に対する１ｏストレスユニツト に続く圧力増加は有意で負であり、０または２　ｒ＋＋＋ｎＨｇ未満であり、未 処理の対照における通常８〜１８　ｍｍＨｇと比較される。

下記の図面を使用して下記の実施例をさらに説明する。

図１は、化合物ペプチドＮｏ、１１９　［Ｈ−Ｃｙ　ｓ　（Ａｃｍ）］＝シスチ ンＭ　ｅ　、の時間（分）の関数としての眼内圧、ΔＩ　ＯＰ　（ｍｍＨｇ）の 変化を示し、゛図２は、化合物ペプチドＮｏ、１２５Ｈ−［Ｐｅｎ　（Ａｃｍ） ）　鵞　ＮＨ鵞の時間（分）の関数としての眼内圧、ΔＩ　ＯＰ　（ｍｍＨｇ） の変化を示し、図３は、化合物ペプチドＮｏ、Ｉ　Ｖ　Ｉ、１％、ＨｌｌｅＧｌ ｎＣｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨ＊の時間（分）の関数としての眼内圧、ΔＩ　ＯＰ　 （ｉ＋ｍＨｇ）の変化を示し、図４は、正の参照用対照、２．６％ピロカルピン の時間（分）の関数としての眼内圧、ΔＩ　ＯＰ　（ｍｍＨｇ）の変化を示し、 図５は、Ｎｏ、１２５、Ｈ−［Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）］　５−ＮＨ３のマススペク トルを示す。

実施例１ １０ストレスユニツトの後の、ラビットの目におけるストレス誘発された眼内圧 に対する、Ｃ−及びＮ−末端位置における３−メルカプトプロピオン酸（ＭＰＲ ）及びシスティンの硫黄原子上のアセトアミドメチル（Ａｃｍ）置換基を含むジ ペプチドの拮抗効果。

このペプチドを、５日間にわたって毎日３回６０μｌのアリコートで、０．９％ 水性ＮａＣ１中の１％溶液として局所投与した。

ペプチド　拮抗効果 Ｈ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｎｌ（２活性ＭＰＲ（Ａｃｍ　）　−Ｔｙｒ− ＯＨ活性実施例２ １０のストレスユニットの後の、ラビ・ノドの目におけるストレス誘発眼内圧に 対する、システィンのアセトアミドメチル（Ａｃｍ）またはメチオニンにおける メチルにより置換された２またはそれ以上の有機硫黄原子を含むジー及びトリペ プチドの拮抗効果。

このペプチドを、５日間にわたって毎日３回６０μｌのアリコートで、０．９％ 水性ＮａＣ１中の１％溶液として局所投与した。

ペプチド　拮抗効果 Ａｃ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｎｌ２　活性実施例３ １０のストレスユニットの後の、ラビットの目におけるストレス誘発眼内圧に対 する、種々のＮ−置換基を担持する、中間またはアミノ末端位置におけるシステ ィンの硫黄原子上にアセトアミドメチル置換基を含む種々のトリペプチドの拮抗 効果。

このペプチドを、５日間にわたって毎日３回６０μｍのアリコートで、０．９％ 水性ＮａＣ１中の１％溶液として局所投与した。

ペプチド　拮抗効果 実施例４ 単一投与治療によるラビットの目；こお喜する７に負荷誘発高血圧に対する、シ スティンの硫黄原子力＜Ｒ＝アセトアミドメチル（Ａｃｍ）またはＲ＝ベンズア ミドメチルＣＢＡＭ）基により置換された配列Ｈ−１１ｅ−Ｇｌｎ−Ｃｙ　ｓ　 （Ｒ）　ＮＨ＊を含むトリペプチドの圧力低下効果。

腹膜内水負荷の３０分後に、０．９％水性食塩７ににおけるペプチドの１％溶液 ５０μｌを１の目（こｔｉ与し、その他の口中に０．９％水性食塩水５０μｌを ｔλ与し、両目のＩＯＰを２時間測定し、誤差を算出した。

ペプチド　圧力低下効果 Ｈ−１１ｅ−Ｇｉｎ−Ｃｙｓ（ＢＡＭ　＋−Ｎｌ２ｔ８性Ｈ−Ｉ　１ｅ−Ｇｉｎ −Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）−ＮＨ＊の水負荷モデルにおける圧力低下効果の時間曲線 を図３に示すが、ペプチドは、番号Ｎｏ、１　、Ｖ　Ｉ　、を有する。

実施例５ １０のストレスユニットの後の、ラビットの目におけるストレス誘発されたＩＯ Ｐに対する、配列Ｈ−１１ｅ−Ｇ　Ｉ　ｎ−Ｃｙ　ｓ　（Ｒ）　−Ｘ　（式中、 Ｒは、各々、システィンのベンジル置換または硫黄のジスルフィド結合であり、 Ｘは、種々のＣ−置換を示す）を含む直鎖状トリペプチド及びジスルフィド架橋 へキサペプチドの拮抗効果。

このペプチドを、５日間にわたって毎日３回６０μｍのアリコートで、０．９％ 水性ＮａＣ１中の１％溶液としてペプチド　拮抗効果 Ｈ−１１ｅ−Ｇｉｎ−Ｃｙｓ−ＯＭｅ ｌ　（Ｓ−５Ｄｉｍａｒ）　Ｍ性 Ｈ−工１ｅ−Ｇｉｎ−Ｃｙｓ−ＯＭｅ 実施例６ 単一投与治療によるラビットの目の水負荷誘発圧力亢進に対する、配列Ｃｙｓ（ Ａｃｍ）−シスチンを含むテトラペプチドの圧力低下効果、テトラペプチドエス テル腹膜内水負荷３０分後に、ＴＲｌ５−緩衝液ｐ）１７．４を含む０．９％等 張食塩水中のペプチドの１％溶液５０μｌを、１の目に投与し、他方の目にＴＲ ｌ５−緩衝液７．４を含む０．９％等張食塩水５０μｌを投与し、両目において ２時間眼内圧を測定し、誤差を算出した。

ペプチド　圧力低下効果 １　（Ｓ−９Ｄｉｍｅｒ） Ｈ−Ｃｙｓ（八ｃｍ）−Ｃｙｓｓ　−ＯＭａこのペプチドの水負荷モデルにおけ る圧力低下効果の時間曲線を図１に示すが、ペプチドは番号Ｎｏ、１１９を有し ている。

実施例７ 単一投与治療によるラビットの目における水負荷誘発高血圧に対する、配列Ｐｅ ｎ　（Ａｃｍ）−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）を含むジペプチドの圧力低下効果、ジペプ チドアミドＨ−β、β−ジメチル（Ｓ−アセトアミドメチル）−システイニル− β、β−ジメチル（Ｓ−アセトアミドメチル）−システィンアミド。

腹膜内水負荷３０分後に、ＴＲｌ５−緩衝Ｉ＆ｐＦ１７．４を含む０．９％の等 張食塩水中のペプチドの１９％溶液５０μｌを１の目に投与し、ＴＲｌ５−緩衝 液ｐＨ７，４を合圧を両目において２時間測定し、誤差を算出した。

Ｈ−Ｐ＠ｎ（Ａｃｍ）−Ｐ＠ｎ（Ａｃｍ）−ＮＨ２活性このペプチドに対する水 負荷モデルの圧力低下効果の時間曲線を、図２に示すが、ペプチドは、番号Ｎｏ 、１２実施例８ Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）ＮＨ＊７７．６ｇ　（４０５ｍｍｏｌ）遊離塩基を、ＤＭＦ １３５０ａ＋１中に溶解し、４〜５℃に冷却した。Ｂｏｃ−Ｖａ　１−ＯＮＳｕ ８５．Ｏｇ　（２７０ｍｍ。

ｌ）を添加し、反応混合物を４〜５℃において１日及び室温において１日攪拌し た。粗溶液の濾過及び水／エタノール／酢酸緩衝液を使用する調製ＣＬＩＲＰ　 ＨＰ　Ｌ　Ｃクロマトグラフィーにより、純粋な生成物を含む画分を得て、それ を蒸発乾固して、白色粉末として乾燥生成物を得た。収量６６．４ｇ（６３％） 。

ＴＦＡ　Ｈ−Ｖａｔ−Ｃｓ　Ａｃｍ　ＮＨＢｏ　Ｃ−Ｖａ　１−Ｃｙｓ　（Ａｃ ｍ）ＮＨｘ４７．３ｇ（１２１，１＋＋＋＋ａｏｌ）を、ＴＦＡ１２０ｍｌ中に 溶解した。

攪拌下でジエチルエーテル４５０ｍ１を添加することにより、１５分後に生成物 を沈殿させた。攪拌を２時間続けて、より均質な生成物を得た。濾過及び真空下 で４０℃において１日乾燥して、固形の生成物を得た。収ｆ１６５゜０ｇ（９９ ％）。

アミノ酸分析：　Ｖａｌ（１，０） （酸加水分解の後）　同定されたＣｙｓ実施例９ Ｃｓ　ＢＡＭ　−ＮＨ ５−ベンズアミドメチル−Ｌ−システィン、メチルエステル、塩酸塩１．５２　 ｇ　（４，６ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール中の７Ｍアンモニア溶液３５ｍ１に 添加し、室温において４日間攪拌した。次いで、溶液を減圧下で乾燥させ、白色 粉末として生成物を得た。

Ｂｏ　ｃ　−Ｉ　１　ｅ−Ｇ　Ｉ　ｎ−０ＨＢｏｃ−Ｔ　Ｉ　ｅ−ＯＮＳｕ８． Ｏｇ　（２４，４ｍｍｏｌ）　を、アセトニトリル３０ｍ１中に溶解し、２Ｍ水 性水酸化ナトリウム３０鱈の添加によりアルカリ性のｐＨに調整されたＨ、０１ ００■ｌとアセトニトリル５０ｍ１の混合物中のし−グルタミン７．７　ｇ　（ ５２，５ｍ＋ｎｏｌ）中へ注いだ。この混合物を室温において反応が完了するま で４０分間攪拌し、で、これを濾過し、乾燥させ、ｐＨをＨＣｌ１０ｍ１を使用 して２に低下させ、その後、酢酸エチルを繰り返し添加し、有機相を合わせて、 １０％クエン酸、次いで水性飽和ＨａＣ１溶液により洗浄し、Ｍｇ５Ｏ，により 乾燥し、減圧下で乾燥させ、白色の粉末として生成物を得た。収量７．８５Ｂｏ 　ｃ　−１１ｅ−Ｇ　ｌ　ｎ−０ＨＩ　、６５　ｇ　（４，６ａ＋ｍｏｌ）及び ＨＯＮＳ　ｕ　０．５６　ｇ　（４，８ｍｍｏｌ）を、塩化メ°チレン７！１１ 中に溶解し、室温において１時間後に、ＤＣＣｏ。

９９　ｇ　（４，８＋ｕｏｏｌ）を添加した。

混合物を濾過し、０℃に冷却し、その後Ｃｙｓ（ＢＡＭ）　−ＮＨ＊１．５　ｇ 　（４，６ｍｍｏｌ）を乾燥粉末として添加した。

反応物を４℃において一晩攪拌した。次いで、反応混合物をＤＣＵのために濾過 し、ウェイターズのプレツブバック５００　Ｃ１ｇカラムに充填し、水性エタノ ール／酢酸／　Ｈ，０緩衝液を使用して精製した。純粋な生成物を含む両分を合 わせ、減圧下で乾燥させて、白色粉末として生成物を得た。

収量０．３ｇ（１２％）。

１ｉｅ−Ｇｌｎ−Ｃｓ　ＢＡＭ　−ＮＨ，ＴＦＡＢｏａ−Ｉ　１ｅ−Ｇｉｎ−Ｃ ｙｓ　（ＢＡＭ）−ＮＨｘ３００ｍｇに、Ｔ　Ｆ　Ａ　５　ｍｌを添加した。混 合物を１５分間攪拌した。トルエンを繰り返し添加し、減圧下で蒸発乾固した後 に、Ｉ　Ｉ　ｅ−Ｇ　ｌ　ｎ−Ｃｙ　ｓ　（ＢＡＭ）　−ＮＨ３を、５０■ＭＮ 　Ｈ４Ａ　Ｃ１０ｍｌ中に溶解し、濾過し、Ｈ鵞０中で平衡させたＣ１ｌ逆相Ｈ ＰＬＣカラムに充填し、溶離により部分的に精製した。

精製された生成物を含む両分を合わせ、凍結乾燥した。

精製手順を繰り返した。生成物を、５％エタノール／　ＨｚＯにより溶離し、純 粋な生成物の合わせた両分から凍結乾燥した。

収量：６５ｍｇ（２０％）。

実施例１０ ＭＰＲＡｃｍ　Ｔ　ｒＯＨ ＨＯＮＳｕ１４８ｇ　（０，８３５ｍｏｌ）及び１０５．７ｇ　（０，９１９ｍ ｏｌ）をＤＭＦＩＬ中に溶解した。この混合物を０℃に冷却した。０℃に冷却さ れたＤＭＦｏ、７Ｌ中に溶解されたＤＣＣ１７５，７ｇ　（０，８５２ｍｏｌ） の混合物を添加した。

反応物を４℃において２日間攪拌し、８遇した。次ｔ１で、混合物をゆっくりと （５〜６時間）、濃縮水性ＮａＯＨによりｐＨを８〜９に調整されたＤＭＦ４０ ０ｍｌ及びＨ２０１６００ｗｌ中のし一チロシン１８１．６ｇ（１モル）の溶液 へ添加した。

反応物を室温において一晩攪拌し、ｐＨをＨＣＩにより３に調整した。次いで、 反応混合物を濾過し、ウェイターズの２０Ｌ逆相Ｃ１１カラムに充填し、エタノ ール／水／酢酸緩衝液を使用して精製した。

純粋な生成物を含む両分を合わせ、乾燥エタノールの添加に続いて繰り返し減圧 下で乾燥させ、乾燥粉末として生成物を得た。

収量：　２０８．７ｇ　（７３％）。

実施例１１ Ｈ−Ｐｅｎ　Ａｃｍ　−Ｐｅｎ　Ａｃｍ　ＮＨＴＦＡＨ−Ｐｅｎ　Ａｃｍ　−Ｎ ＨのＡ Ｂｏｃ−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）　−０Ｈ２，４ｇ及びＨＯＮＳ　ｕ　１．３５　ｇ をアセトニトリル５０ｍ１中に溶解し、０℃に冷却した後に、ＤＣＣｌ、７ｇを 添加した。化学的活性化の後に、ＮＨＩ気体を通気させた。この混合物を減圧下 で乾燥させ、ＤＭＦ中に再溶解し、水／エタノール／酢酸緩衝液を使用する逆相 ＨＰＬＣを使用して精製し、生成物の合わせた画分を減圧下における蒸発により 乾燥させ、Ｂｏａ−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）−ＮＨｔｏ、８ｇを得た。次いで、これ をトリフルオロ酢酸触媒により脱ＢｏｃＬ、ＴＦＡＳＨ−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）− ＮＨｔを得た。

Ｂｏｃ−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）　−〇Ｈ１ｇ及びＨＯＮＳｕＯ０６ｇを、ＤＭＦ２ ０＋ａｌ中に溶解し、０℃に冷却し、その後、ＤＣＣｏ、７ｇを添加した。活性 化の後、上記のようにして製造されたＴＦＡＳＨ−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）−ＨＮ　 ＊をいくらかのＴＥＡを含むＤＭＦ２０ｍｌ中に添加し、ＴＦＡを中和した。生 成されたＢｏｃ−Ｐｅｎ（Ａｃｍ）−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）−ＮＨｚを塩化メチレ ン中の２０％ＴＦＡ中で脱ｂｏｃＬ、、その後、減圧下で乾燥させ、再溶解し、 水／エタノール／酢酸混合物を使用する逆相ＨＰＬＣにより精製した。純粋な生 成物を含む合わせた両分を、減圧下で乾燥させ、油状物として、ＡｃＯＨ，Ｈ− Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）−Ｐｅｎ　（Ａｃｍ）　−ＮＨ＊０．４４　ｇを得た。生成 物のマススペクトルを図５に示す。この油状物を水中に再溶解し、その後の使用 のために凍結乾燥した。

ペプチド＃〃９ 分 ペプチド＃１２５ 分 ａ／：′り 分 ピロカルビン　２６１ Ｆ／Ｃｙ　４ （２経路の合計） 補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法制８４条の８）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ の有機硫黄化合物、そのＮ−Ｃ−環状若しくはＳ−Ｓ架橋形態物、またはヒトの 生理的条件下において、前記の基本構造のいずれかに転換されるかまたはそれを 放出する化合物、またはその誘導体若しくは塩であって、上記式中、 Ｒ１は、Ｈ、任意に二重結合を含み、及び／またはハロゲン、ニトロ、アミノ、 スルホ、ホスホ若しくはカルボキシにより置換されるＣ２０までの直鎖状または 分枝鎖状のアルキルまたはシクロアルキル、任意にハロゲン、ヒドロキシ、ニト ロ、アミノ、スルホ、ホスホ、カルボキシまたはアルキルにより１−または多置 換されるアラルキルまたはアリールであるか、またはＲ１は、グリコシル、ヌク レオシルまたはＬ−若しくはＤ−αアミノ酸またはタイプ［Ｐ］の結合により結 合された２〜８の残基のペプチド部分であり、 ａは、０、１、２または３であり、 Ｃｘは、ＲまたはＳ配置を有する四面体炭素原子（ＳＰ３混成）であり、 Ｃｙは、三平面の炭素（ＳＰ２混成）であって、Ｄは、存在しないか、またはＣ ｙは、四面体炭素原子であって、ＤはＨ２であり、 ［Ａ］は、存在しないか、脱力ルボキシアミノ酸残基またはＮＨＲ１′（式中、 Ｒ１′は、Ｒ１の定義の通りであり、化合物がＮ−Ｃ環状形態物である場合には 存在しない）であり、 ［Ｐ］は、存在しないかまたはペプチド結合ＣＯ−ＮＨ、またはＣＨ２−ＮＨ、 ＣＨ２−Ｓ、ＣＯ−ＣＨ２のようなそれらのイソステレス、ＮＨ−ＣＯのような それらのレトロインバース形態であり、 Ｂは、存在しないかまたはＣ１〜Ｃ６の任意に分枝鎖状のアルキルまたはシクロ アルキルであり、Ｓは、硫黄であり、 Ｅは、本化合物がジスルフィド架橋形態物である場合には存在せず、またはＥは 、 （ＣＲ３Ｒ４）ｃ−ＮＨＣＯＲ６（式中、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｈ、ＣＨ ３またはハロゲンであり、Ｒ５はＨ、直鎖、分枝鎖状のアルキルまたはシクロア ルキル、アラルキルまたはアリールであり、それらの全ては、任意にハロゲン、 ヒドロキシ、カルボキシ、スルホ、ホスホ、アミノまたはニトロ、により１−ま たは多置換され、または脱カルボキシアミノ酸または脱カルボキシペプチド部分 であり、ｃは１、２または３である）、Ｓ−ＣＲ６Ｒ７Ｒ８（式中、Ｒ６、Ｒ７ 及びＲ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、直鎖、分枝鎖状のアルキルまたはシクロ アルキル、アラルキルまたはアリールであり、その全てがＲ８について説明した ように、任意に一−または多置換されている）、 ＣＲ９Ｒ１０Ｒ１１（式中、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１は、独立して、Ｈ、アルキ ル、アラルキルまたはアリールであり、その全てが、Ｒ８について説明したよう に任意に１−または多置換されている）、または Ｓ−Ｒ１２（式中、Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ１０のアラルキルまたはヘテロアラルキ ルである）であるか、またはＲ１２（式中、Ｒ１２は、上記定義の通りである） であり、Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＣＨ３または ＮＲ１３Ｒ１４（式中、Ｒ１３及びＲ１４は、独立して、Ｈ、Ｒ８について説明 したように任意に置換された直鎖、分枝鎖状のアルキルまたはシクロアルキル、 アラルキルまたはアリールである）、 ＯＲ１３（式中、Ｒ１５は、Ｈ、Ｒ５について説明したように任意に置換された 直鎖、分枝鎖状のアルキルまたはシクロアルキル、アラルキルまたはアリールで ある）、Ｏ−グリコシル、または しまたはＤ−α−アミノ酸またはタイプ［Ｐ］の結合により結合した２〜８の残 基のペプチド部分であり、または、Ｒ２は、Ｅがシステインの脱カルボキシ誘導 体またはその同族体である場合または本化合物がＮ−Ｃ環状形態物である場合に は、存在せず、ｂは、１、２、３、４または５であり、及びＲ１、Ｒ２及びＲ６ は一緒になって、１０以下のアミノ酸残基を形成し、 水素原子は、フッ素によって置換され得る。 ２．一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ′の請求の範囲第１項に記載の化合物また はそれらの誘導体若しくは塩であって、式中、 ▲数式、化学式、表等があります▼ は、全体で２〜７の脂肪族炭素原子を含むこれらの脱アミノ−Ｃｙｓまたは−Ｐ ｅｎまたは側鎖同族体であり、Ｓは硫黄であり、 ａはＯであり、 ［Ｅ］は、 Ｒ１３（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチ ル及びｔｅｒｔ．ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ．ペンチル、 １、２−ジメチルプロピル及び２、２−ジメチルプロピルのようなＣ１〜Ｃ■の アルキルである）、または Ｒ１４（フェニル、ベンジル、トルイル及びピリジルのようなＣ■〜Ｃ■のホモ ーまたはヘテロアラルキルである）、または ＣＨ２ＮＨＣＯＲ１３または ＣＨ２ＮＨＣＯＲ１４または Ｓ−Ｒ１３または Ｓ−Ｒ１４または ［Ｅ］は、存在しない の中から選択される硫黄置換基であり、本化合物は、Ｓ−Ｓ二量体であり、Ｒ１ 、［Ａ］、［Ｐ］、Ｃｙ、Ｄ、Ｒ２及びｂは、請求の範囲第１項に記載の定義の 通りである。 ３．Ｇが、脱アミノ−Ｃｙｓ、−Ｐｅｎまたは−ホモシステインまたは３−メル カプトプロピオン酸であり、Ｓ、Ｒ１、［Ａ］、［Ｐ］、Ｃｙ、［Ｅ］、Ｄ、Ｒ ２、ａ及びｂが、請求の範囲第２項の定義の通りである請求の範囲第２項に記載 の化合物またはその誘導体若しくは塩。 ４．Ｈ−Ｃｙｓ−（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−ＮＨ２、Ｈ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ（ Ａｃｍ）−ＮＨ２、（Ｈ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ）２−シスチン−（ＯＭｅ）２、Ｈ− Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ（ＢＡＭ）−ＮＨ２、３−メルカプトプロピオン酸−（ Ａｃｍ）−Ｔｙｒ−ＯＨ、 Ｈ−（Ｍｅｔ）２−ＮＨ２、 Ｈ−（Ｐｅｎ（Ａｃｍ））２−ＮＨ２または（Ｈ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ））２シスチ ン−ＯＭｅ２である請求の範囲第１、２または３に記載の化合物またはその誘導 体若しくは塩。 ５．Ｈ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｘ−ＮＨ２（式中、ＸはＢＡＭ（ベンズアミ ドメチル）またはＡｃｍ（アセトアミドメチル）である） である請求の範囲第１〜４項のいずれかに記載の化合物またはその誘導体若しく は塩。 ６．３−メルカプトプロピオン酸−（Ａｃｍ）−Ｔｙｒ−ＯＨである請求の範囲 箪１〜４のいずれかに記載の化合物またはその誘導体若しくは塩。 ７．Ｈ−（Ｍｅｔ）２−ＮＨ２である請求の範囲第１〜４項のいずれかに記載の 化合物またはその誘導体若しくは塩。 ８．Ｈ−（Ｐｅｎ（Ａｃｍ））２−ＮＨ２である請求の範囲第１〜４項のいずれ かに記載の化合物またはその誘導体若しくは塩。 ９．（Ｈ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ））２シスチン−ＯＭｅ２である請求の範囲第１〜４ 項のいずれかに記載の化合物またはその誘導体若しくは塩。 １０．有効な抗縁内匠または眼内圧低下量の請求の範囲第１〜９項のいずれかに 記載の少なくとも１の有機硫黄化合物またはその薬学的に許容され得る誘導体若 しくは塩及び薬学的許容され得る希釈液または賦形剤を含む薬学的組成物。 １１、有機硫黄化合物が、請求の範囲第５〜９項のいずれかに記載の化合物また はそれらの薬学的に許容され得る誘導体若しくは塩である請求の範囲第１０項に 記載の薬学的組成物。 １２．有機硫黄化合物の量が、０．０１〜１０重量％である請求の範囲第１０項 に記載の薬学的組成物。 １３．有機硫黄化合物の量が、０．１〜５重量％である請求の範囲第１０項に記 載の薬学的組成物。 １４．有機硫黄化合物の量が、０．２５〜１重量％である請求の範囲第１０項に 記載の薬学的組成物。 １５．緑内症及び／または眼内圧力亢進の治療に有用な薬学的組成物を製造する ための請求の範囲第１〜９のいずれかに記載の化合物の用途。 １６．有効な抗緑内症または眼内圧低下量の少なくとも１の請求の範囲第１〜９ 項のいずれかに記載の有機硫黄化合物、誘導体または塩を、哺乳動物に投与する ことからなる緑内症または眼内圧力亢進の治療方法。