JPH06256399A - ヒト・インターロイキン１１の精製法 - Google Patents
ヒト・インターロイキン１１の精製法Info
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- JPH06256399A JPH06256399A JP4968193A JP4968193A JPH06256399A JP H06256399 A JPH06256399 A JP H06256399A JP 4968193 A JP4968193 A JP 4968193A JP 4968193 A JP4968193 A JP 4968193A JP H06256399 A JPH06256399 A JP H06256399A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 粗ヒト・インターロイキン１１溶液をシリカ
担体を用いたクロマトグラフィーにより精製する。 【効果】 再現性、操作性にも優れ、工業的規模の大量
精製も可能であり、効率よく高品位のＩＬ−１１を得る
ことができる。
担体を用いたクロマトグラフィーにより精製する。 【効果】 再現性、操作性にも優れ、工業的規模の大量
精製も可能であり、効率よく高品位のＩＬ−１１を得る
ことができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ヒト・インターロイキ
ン１１（以下、ＩＬ−１１と略す）の精製法に関する。
ン１１（以下、ＩＬ−１１と略す）の精製法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ＩＬ−１１は、ヒト細胞が炎症関連因子
などに刺激されることによって細胞が産生する血小板増
加活性、抗体産生能増強活性、コロニー形成活性などを
有するタンパク質である（血液腫瘍科 2215 : 478-485,
1991 ）。
などに刺激されることによって細胞が産生する血小板増
加活性、抗体産生能増強活性、コロニー形成活性などを
有するタンパク質である（血液腫瘍科 2215 : 478-485,
1991 ）。
【０００３】ＩＬ−１１の産生は、ヒト培養細胞をポリ
Ｉ：ポリＣなどの合成核酸で刺激して産生する方法、Ｉ
Ｌ−１１遺伝子を大腸菌や枯草菌酵母などの微生物や動
物細胞、カイコに組み込んで産生させる遺伝子組換えに
よる方法、さらには化学合成による方法がある。
Ｉ：ポリＣなどの合成核酸で刺激して産生する方法、Ｉ
Ｌ−１１遺伝子を大腸菌や枯草菌酵母などの微生物や動
物細胞、カイコに組み込んで産生させる遺伝子組換えに
よる方法、さらには化学合成による方法がある。
【０００４】このＩＬ−１１を医薬品として利用するた
めには、細胞や微生物によって産生された粗ＩＬ−１１
を安全性が認められた純度にまで精製純化しなければな
らない。従って、ＩＬ−１１をいかに効率よく高純度に
精製分離するかが、ＩＬ−１１を医薬品として開発する
際の極めて重要な技術となる。
めには、細胞や微生物によって産生された粗ＩＬ−１１
を安全性が認められた純度にまで精製純化しなければな
らない。従って、ＩＬ−１１をいかに効率よく高純度に
精製分離するかが、ＩＬ−１１を医薬品として開発する
際の極めて重要な技術となる。
【０００５】ＩＬ−１１の精製方法としては、ＣＯＳ細
胞上清を透析後、弱陽イオン交換クロマトグラフィー、
ゲル濾過、疎水クロマトグラフイーの三段で精製する方
法が知られているが（宮台ら、日本血液学会、第５４
巻、補冊第１号、ｐ２２１（１９９１））、この方法で
は収率１．５％で、大量に効率良く精製することは難し
く、工業的スケールで大量かつ効率良く精製する方法が
必要とされている。
胞上清を透析後、弱陽イオン交換クロマトグラフィー、
ゲル濾過、疎水クロマトグラフイーの三段で精製する方
法が知られているが（宮台ら、日本血液学会、第５４
巻、補冊第１号、ｐ２２１（１９９１））、この方法で
は収率１．５％で、大量に効率良く精製することは難し
く、工業的スケールで大量かつ効率良く精製する方法が
必要とされている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】ＩＬ−１１は高い疎水
性、デキストランなどに対する高い吸着性からクロマト
グラフィー用担体に非特異的に吸着されやすく、効率良
い精製が未だ困難であるという問題点を残している。
性、デキストランなどに対する高い吸着性からクロマト
グラフィー用担体に非特異的に吸着されやすく、効率良
い精製が未だ困難であるという問題点を残している。
【０００７】本発明は上記の問題点を解決し、ＩＬ−１
１を高純度かつ高収率で精製することを目的とする。
１を高純度かつ高収率で精製することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】上記目的は、以下の本発
明により達成される。すなわち本発明は、粗ヒト・イン
ターロイキン１１溶液をシリカ担体を用いたクロマトグ
ラフィーにより精製することを特徴とするヒト・インタ
ーロイキン１１の精製法である。本発明は、さらに純度
を向上させるために、陽イオン交換担体を用いるクロマ
トグラフイー、逆相クロマトグラフイーなどを組み合わ
せて使用するのが好ましい。
明により達成される。すなわち本発明は、粗ヒト・イン
ターロイキン１１溶液をシリカ担体を用いたクロマトグ
ラフィーにより精製することを特徴とするヒト・インタ
ーロイキン１１の精製法である。本発明は、さらに純度
を向上させるために、陽イオン交換担体を用いるクロマ
トグラフイー、逆相クロマトグラフイーなどを組み合わ
せて使用するのが好ましい。
【０００９】本発明の粗ＩＬ−１１溶液としては、ヒト
培養細胞をウィルスや合成核酸などで刺激させることに
より産生されるＩＬ−１１を含む溶液、および遺伝子組
換え技術を用いてＩＬ−１１構造遺伝子を組み込んだ大
腸菌、枯草菌などの微生物やカイコ、夜盗蛾などの昆虫
細胞、ハムスター、サルなどの動物細胞により産生され
る遺伝子組換え型ＩＬ−１１を含む溶液、さらに化学合
成によって得られるＩＬ−１１を含む溶液を指す。
培養細胞をウィルスや合成核酸などで刺激させることに
より産生されるＩＬ−１１を含む溶液、および遺伝子組
換え技術を用いてＩＬ−１１構造遺伝子を組み込んだ大
腸菌、枯草菌などの微生物やカイコ、夜盗蛾などの昆虫
細胞、ハムスター、サルなどの動物細胞により産生され
る遺伝子組換え型ＩＬ−１１を含む溶液、さらに化学合
成によって得られるＩＬ−１１を含む溶液を指す。
【００１０】本発明で使用するシリカ担体は、ケイ酸塩
を主成分とするものであれば特に限定されないが、具体
的には、“マイクロビーズシリカゲル”（富士デビソン
社）や“コントロールポアグラス”（エレクトロヌクレ
オニクス社）などが挙げられる。
を主成分とするものであれば特に限定されないが、具体
的には、“マイクロビーズシリカゲル”（富士デビソン
社）や“コントロールポアグラス”（エレクトロヌクレ
オニクス社）などが挙げられる。
【００１１】シリカ担体を用いたクロマトグラフィーの
実際の操作は、次のように行なう。すなわち、まずヒト
細胞培養上清、遺伝子組換え大腸菌破砕遠心上清、ある
いは遺伝子組換え動物細胞培養上清などの粗ＩＬ−１１
溶液をシリカ担体と接触吸着させる。
実際の操作は、次のように行なう。すなわち、まずヒト
細胞培養上清、遺伝子組換え大腸菌破砕遠心上清、ある
いは遺伝子組換え動物細胞培養上清などの粗ＩＬ−１１
溶液をシリカ担体と接触吸着させる。
【００１２】吸着法はバッチ法、カラム法どちらでも可
能であるが、カラム法の方が吸着効率が高い。吸着条件
はｐＨ５〜９、望ましくはｐＨ６〜８であり、１Ｍ程度
の無機塩は存在していても吸着に影響はない。
能であるが、カラム法の方が吸着効率が高い。吸着条件
はｐＨ５〜９、望ましくはｐＨ６〜８であり、１Ｍ程度
の無機塩は存在していても吸着に影響はない。
【００１３】吸着後、適当な中性緩衝液で十分に担体を
洗って吸着しないタンパク質を除去した後、ｐＨ２〜３
の酸性緩衝液でシリカゲル担体に吸着した余分なタンパ
ク質を除く。この場合、酸性緩衝液には水溶性有機溶媒
（例えば、グリセロール、エレチングリコール、プロピ
レングリコール、ポリエチレングリコールなど）を０〜
２５％加えた方が望ましい。
洗って吸着しないタンパク質を除去した後、ｐＨ２〜３
の酸性緩衝液でシリカゲル担体に吸着した余分なタンパ
ク質を除く。この場合、酸性緩衝液には水溶性有機溶媒
（例えば、グリセロール、エレチングリコール、プロピ
レングリコール、ポリエチレングリコールなど）を０〜
２５％加えた方が望ましい。
【００１４】ＩＬ−１１の溶出には、水溶性有機溶媒を
含む酸性緩衝液を用いてＩＬ−１１を得る。この場合、
酸性緩衝液は０．０５〜０．１Ｍクエン酸、０．０５Ｍ
以下の塩酸、硫酸、ギ酸などである。
含む酸性緩衝液を用いてＩＬ−１１を得る。この場合、
酸性緩衝液は０．０５〜０．１Ｍクエン酸、０．０５Ｍ
以下の塩酸、硫酸、ギ酸などである。
【００１５】本発明ではシリカ担体を用いたクロマトグ
ラフィーに、さらに陽イオン交換担体を用いるクロマト
グラフイー、逆相クロマトグラフイーを組み合わせて使
用するのが好ましい。この場合、その使用順序は特に限
定されないが、シリカ担体を用いたクロマトグラフィー
の後に導入されるクロマト系は、水溶性有機溶媒を除く
ことができ、かつ高収率で濃縮できるクロマト系が好ま
しく、シリカ担体を用いたクロマトグラフィーの後に陽
イオン交換担体を用いるクロマトグラフイー、その後に
逆相クロマトグラフイーを使用する方法が特に好ましく
用いられる。
ラフィーに、さらに陽イオン交換担体を用いるクロマト
グラフイー、逆相クロマトグラフイーを組み合わせて使
用するのが好ましい。この場合、その使用順序は特に限
定されないが、シリカ担体を用いたクロマトグラフィー
の後に導入されるクロマト系は、水溶性有機溶媒を除く
ことができ、かつ高収率で濃縮できるクロマト系が好ま
しく、シリカ担体を用いたクロマトグラフィーの後に陽
イオン交換担体を用いるクロマトグラフイー、その後に
逆相クロマトグラフイーを使用する方法が特に好ましく
用いられる。
【００１６】シリカクロマトグラフィー溶出液の組成ｐ
Ｈを変えることなく水溶性有機溶媒を除き、かつ高収率
で濃縮可能なクロマトグラフィーとして、陽イオン交換
クロマトグラフィーが適している。ここで用いられる陽
イオン交換担体は、カルボキシメチル、スルホプロピ
ル、エチルスルホネート、フォスフェートなどの解離基
を有するイオン交換体である。高い吸着容量を得るため
には、スルホネートを解離基とする強イオン交換体が好
ましく、具体的には、“ハイロードＳセファロースＨ
Ｐ”、“ハイロードＳセファロースＦＦ”、“Ｓセファ
ロースＦＦ”、“ＳＰセファデックス”（Ｃ−２５、Ｃ
−５０）（ファルマシア社）、“ＡＧ−ＳＯＷ”シリー
ズ（バイオラッド社）などがある。
Ｈを変えることなく水溶性有機溶媒を除き、かつ高収率
で濃縮可能なクロマトグラフィーとして、陽イオン交換
クロマトグラフィーが適している。ここで用いられる陽
イオン交換担体は、カルボキシメチル、スルホプロピ
ル、エチルスルホネート、フォスフェートなどの解離基
を有するイオン交換体である。高い吸着容量を得るため
には、スルホネートを解離基とする強イオン交換体が好
ましく、具体的には、“ハイロードＳセファロースＨ
Ｐ”、“ハイロードＳセファロースＦＦ”、“Ｓセファ
ロースＦＦ”、“ＳＰセファデックス”（Ｃ−２５、Ｃ
−５０）（ファルマシア社）、“ＡＧ−ＳＯＷ”シリー
ズ（バイオラッド社）などがある。
【００１７】陽イオン交換クロマトグラフィーは、次の
ように行なう。すなわち、シリカクロマトグラフィー溶
出画分をそのまま陽イオン交換担体に接触させた後、酸
性緩衝液、次に中性緩衝液で洗浄する。洗浄液について
は、酸性緩衝液では０．０５Ｍ以下の塩酸、硫酸、ギ酸
緩衝液などが適当であり、一方、中性緩衝液にはｐＨ６
〜９で０．０５Ｍ以下のリン酸、トリス、ホウ酸緩衝液
が適当である。この洗浄操作によって陽イオン交換体に
吸着していた爽雑タンパク質を除去することができる。
ように行なう。すなわち、シリカクロマトグラフィー溶
出画分をそのまま陽イオン交換担体に接触させた後、酸
性緩衝液、次に中性緩衝液で洗浄する。洗浄液について
は、酸性緩衝液では０．０５Ｍ以下の塩酸、硫酸、ギ酸
緩衝液などが適当であり、一方、中性緩衝液にはｐＨ６
〜９で０．０５Ｍ以下のリン酸、トリス、ホウ酸緩衝液
が適当である。この洗浄操作によって陽イオン交換体に
吸着していた爽雑タンパク質を除去することができる。
【００１８】陽イオン交換担体からのＩＬ−１１の溶出
には、０．１〜１Ｍ塩化ナトリウムあるいは塩化カリウ
ムを添加した０．０５Ｍ以下のリン酸、トリス、ホウ酸
でｐＨ６〜９の中性緩衝液が用いられ、添加塩濃度は好
ましくは０．２〜０．７Ｍである。
には、０．１〜１Ｍ塩化ナトリウムあるいは塩化カリウ
ムを添加した０．０５Ｍ以下のリン酸、トリス、ホウ酸
でｐＨ６〜９の中性緩衝液が用いられ、添加塩濃度は好
ましくは０．２〜０．７Ｍである。
【００１９】陽イオン交換担体からの溶出画分を、さら
に疎水基をリガンドとするクロマトグラフィーで精製す
ることが好ましい。疎水クロマトグラフィーに用いられ
るリガンドは、メチル基、ブチル基、エチル基、プロピ
ル基、フェニル基、オクチル基などであるが、いわゆる
逆相系高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）でより
好ましい結果が得られる。
に疎水基をリガンドとするクロマトグラフィーで精製す
ることが好ましい。疎水クロマトグラフィーに用いられ
るリガンドは、メチル基、ブチル基、エチル基、プロピ
ル基、フェニル基、オクチル基などであるが、いわゆる
逆相系高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）でより
好ましい結果が得られる。
【００２０】逆相ＨＰＬＣに用いる担体リガンドでは、
Ｃ4 、Ｃ8 、Ｃ18が好ましく用いられる。逆相カラムに
吸着させた後、酸性条件下の有機溶媒濃度勾配によりＩ
Ｌ−１１を溶出することができる。用いられる酸はｐＨ
２〜４を保つ能力がある酸であればいずれも構わない
が、好ましくは０．１％トリフルオロ酢酸が用いられ、
有機溶媒としてはアセトニトリル、イソプロパノール、
ｎ−プロパノールなどが用いられる。
Ｃ4 、Ｃ8 、Ｃ18が好ましく用いられる。逆相カラムに
吸着させた後、酸性条件下の有機溶媒濃度勾配によりＩ
Ｌ−１１を溶出することができる。用いられる酸はｐＨ
２〜４を保つ能力がある酸であればいずれも構わない
が、好ましくは０．１％トリフルオロ酢酸が用いられ、
有機溶媒としてはアセトニトリル、イソプロパノール、
ｎ−プロパノールなどが用いられる。
【００２１】このようにして、本発明による精製法で
は、ＩＬ−１１は粗原料が高純度に精製され、かつ高収
率で得ることができる。
は、ＩＬ−１１は粗原料が高純度に精製され、かつ高収
率で得ることができる。
【００２２】なお、ＩＬ−１１の活性測定は脂肪細胞分
化作用を指標としたバイオアッセイ（FEBS Cett, 288,
13, 1991）により測定することができる。
化作用を指標としたバイオアッセイ（FEBS Cett, 288,
13, 1991）により測定することができる。
【００２３】
【実施例】以下、実施例を挙げ本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明は実施例に限定されるものではな
い。
説明するが、本発明は実施例に限定されるものではな
い。
【００２４】実施例１ ヒト正常二倍体線維芽細胞を“Cytodex １”（ファルマ
シア、ＬＫＢバイオテクノロジー社、３ｇ／１００ｍ
ｌ）上で、３７℃で培養し、十分増殖させた後、合成核
酸ポリＩ：ポリＣ（１０μｇ／ｍｌ）で誘発した。
シア、ＬＫＢバイオテクノロジー社、３ｇ／１００ｍ
ｌ）上で、３７℃で培養し、十分増殖させた後、合成核
酸ポリＩ：ポリＣ（１０μｇ／ｍｌ）で誘発した。
【００２５】この培養上清１２リットル（タンパク質濃
度：２９２μｇ／ｍｌ）を精製原料としてシリカカラム
（“マイクロビーズシリカゲル”、富士デビソン社、３
０φ×２００ｍｍ）に通液した。
度：２９２μｇ／ｍｌ）を精製原料としてシリカカラム
（“マイクロビーズシリカゲル”、富士デビソン社、３
０φ×２００ｍｍ）に通液した。
【００２６】ＰＢＳ（−）で洗浄後、３００ｍｌの２０
ｍＭ塩酸（ｐＨ２）、５００ｍｌの２５％エチレングリ
コールを含む２０ｍＭ塩酸（ｐＨ２）で洗浄した後、５
０％エレチングリコールを含む２０ｍＭ塩酸（ｐＨ２）
１００ｍｌでＩＬ−１１を溶出した。Ｃ4 カラム（Vyda
c 社、４．６×２５０ｍｍ）を用いた逆相ＨＰＬＣによ
る純度検定では、純度３０％であった。
ｍＭ塩酸（ｐＨ２）、５００ｍｌの２５％エチレングリ
コールを含む２０ｍＭ塩酸（ｐＨ２）で洗浄した後、５
０％エレチングリコールを含む２０ｍＭ塩酸（ｐＨ２）
１００ｍｌでＩＬ−１１を溶出した。Ｃ4 カラム（Vyda
c 社、４．６×２５０ｍｍ）を用いた逆相ＨＰＬＣによ
る純度検定では、純度３０％であった。
【００２７】続いて、このシリカクロマトグラフィー溶
出画分を“Ｓセファロースカラム”（ファルマシア・バ
イオテクノロジー社、１０φ×２０ｍｍ）に通液した
後、２０ｍＭ塩酸（ｐＨ２）６０ｍｌ、２０ｍＭリン酸
緩衝液（ｐＨ７．４）５０ｍｌ、２０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ８．０）５０ｍｌ、２０ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ
９．０）２０ｍｌ、さらに２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
８．０）２０ｍｌで洗浄後、０．２Ｍ塩化ナトリウム２
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）２０ｍｌでＩＬ−１
１を溶出した。Ｃ4 カラムを用いた逆相ＨＰＬＣによる
純度検定では、純度６０％であった。
出画分を“Ｓセファロースカラム”（ファルマシア・バ
イオテクノロジー社、１０φ×２０ｍｍ）に通液した
後、２０ｍＭ塩酸（ｐＨ２）６０ｍｌ、２０ｍＭリン酸
緩衝液（ｐＨ７．４）５０ｍｌ、２０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ８．０）５０ｍｌ、２０ｍＭホウ酸緩衝液（ｐＨ
９．０）２０ｍｌ、さらに２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ
８．０）２０ｍｌで洗浄後、０．２Ｍ塩化ナトリウム２
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）２０ｍｌでＩＬ−１
１を溶出した。Ｃ4 カラムを用いた逆相ＨＰＬＣによる
純度検定では、純度６０％であった。
【００２８】さらに、“Ｓセファロース”溶出画分をＣ
4 カラムにかけ、０．１％トリフルオロ酢酸を含むアセ
トニトリル濃度勾配でＩＬ−１１を溶出させた。精製Ｉ
Ｌ−１１は約６０％のアセトニトリルで溶出された。バ
イオアッセイによるオーバーオール収率は約４０％であ
った。Laemmli の方法のドデシル硫酸ナトリウムを含む
ポリアクリルアシドゲル電気泳動（Nature, 227, 680-6
85, 1970）のゲル上で、精製ＩＬ−１１は分子量約２４
０００の単一バンドを示し、デシンメトリーによる純度
は９５％以上であった。また、Ｃ4 カラムを用いた逆相
ＨＰＬＣ上ではシングルピークを示し、純度は９６％で
あった。
4 カラムにかけ、０．１％トリフルオロ酢酸を含むアセ
トニトリル濃度勾配でＩＬ−１１を溶出させた。精製Ｉ
Ｌ−１１は約６０％のアセトニトリルで溶出された。バ
イオアッセイによるオーバーオール収率は約４０％であ
った。Laemmli の方法のドデシル硫酸ナトリウムを含む
ポリアクリルアシドゲル電気泳動（Nature, 227, 680-6
85, 1970）のゲル上で、精製ＩＬ−１１は分子量約２４
０００の単一バンドを示し、デシンメトリーによる純度
は９５％以上であった。また、Ｃ4 カラムを用いた逆相
ＨＰＬＣ上ではシングルピークを示し、純度は９６％で
あった。
【００２９】
【発明の効果】ＩＬ−１１は、現在主に血小板増加薬と
して期待されているが、高収率、高精製度が得られる簡
便な精製法は未だ確立していない。
して期待されているが、高収率、高精製度が得られる簡
便な精製法は未だ確立していない。
【００３０】しかしながら、本発明者らは鋭意研究の結
果、ＩＬ−１１の精製法としてシリカクロマトグラフィ
ーにより、簡便に高純度のＩＬ−１１を高収率で得るこ
とが可能となった。また、陽イオン交換クロマトグラフ
ィー、疎水性クロマトグラフィーを組み合わせることに
より、さらに純度を向上させることができた。
果、ＩＬ−１１の精製法としてシリカクロマトグラフィ
ーにより、簡便に高純度のＩＬ−１１を高収率で得るこ
とが可能となった。また、陽イオン交換クロマトグラフ
ィー、疎水性クロマトグラフィーを組み合わせることに
より、さらに純度を向上させることができた。
【００３１】本発明の精製法は、再現性、操作性にも優
れ、工業的規模の大量精製も可能であり、効率よく高品
位のＩＬ−１１を得ることができる。
れ、工業的規模の大量精製も可能であり、効率よく高品
位のＩＬ−１１を得ることができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 岡野 清 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内 (72)発明者 内海 潤 神奈川県鎌倉市手広1111番地 東レ株式会 社基礎研究所内
Claims (2)
- 【請求項１】 粗ヒト・インターロイキン１１溶液をシ
リカ担体を用いたクロマトグラフィーにより精製するこ
とを特徴とするヒト・インターロイキン１１の精製法。 - 【請求項２】 陽イオン交換担体を用いるクロマトグラ
フイーおよび／または逆相クロマトグラフイーをさらに
組み合わせて使用することを特徴とする請求項１記載の
ヒト・インターロイキン１１の精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4968193A JPH06256399A (ja) | 1993-03-10 | 1993-03-10 | ヒト・インターロイキン１１の精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4968193A JPH06256399A (ja) | 1993-03-10 | 1993-03-10 | ヒト・インターロイキン１１の精製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06256399A true JPH06256399A (ja) | 1994-09-13 |
Family
ID=12837925
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4968193A Pending JPH06256399A (ja) | 1993-03-10 | 1993-03-10 | ヒト・インターロイキン１１の精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06256399A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996009115A1 (fr) * | 1994-09-21 | 1996-03-28 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Adsorbant pour interleukines, procede d'elimination de celles-ci par adsorption et dispositif d'adsorption |
| WO1998027996A1 (en) * | 1996-12-24 | 1998-07-02 | Amrad Operations Pty Ltd | A method of treatment and prophylaxis |
| JP2006176504A (ja) * | 2004-11-26 | 2006-07-06 | Proteios Research Inc | 改質されたインターロイキン−１１とその製造方法 |
| WO2009098707A1 (en) * | 2008-02-06 | 2009-08-13 | Biocon Limited | A method of purifying a peptide |
-
1993
- 1993-03-10 JP JP4968193A patent/JPH06256399A/ja active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996009115A1 (fr) * | 1994-09-21 | 1996-03-28 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Adsorbant pour interleukines, procede d'elimination de celles-ci par adsorption et dispositif d'adsorption |
| US5902877A (en) * | 1994-09-21 | 1999-05-11 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Adsorbent of interleukins, process for removing the same, and adsorber for the same |
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