JPH0624975A

JPH0624975A - 制癌活性増強剤

Info

Publication number: JPH0624975A
Application number: JP4300977A
Authority: JP
Inventors: Yasuo Aoki; 康夫青木; Keiji Yamazaki; 圭治山崎; Hideji Takagaki; 秀次高垣; Tetsuo Ikegawa; 哲郎池川
Original assignee: Dainippon Ink and Chemicals Co Ltd
Current assignee: DIC Corp
Priority date: 1992-05-12
Filing date: 1992-11-11
Publication date: 1994-02-01

Abstract

(57)【要約】【構成】本発明は、イソリクイリチゲニン（４,２',
４',−トリヒドロキシカルコン）またはブテイン（３,
４,２',４'−テトラヒドロキシカルコン）から成る群か
ら選ばれたヒドロキシカルコン誘導体またはその生理学
的に許容される塩を有効成分とする制癌活性増強剤及
び、イソリクイリチゲニンまたはブテインから成る群か
ら選ばれたヒドロキシカルコン誘導体またはその生理学
的に許容される塩と制癌剤及び生理学的に許容される添
加物から成る制癌剤組成物に関するものである。【効果】本発明は、ヒドロキシカルコン誘導体である
イソリクイリチゲニンまたはブテインを、制癌剤と併用
もしくは制癌剤組成物とする事により、制癌剤の制癌活
性を著しく増強し、かつ制癌剤の毒性を緩和する優れた
効果を有し、制癌活性増強剤及び制癌剤組成物を提供で
きる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はイソリクイリチゲニン
（４,２',４',−トリヒドロキシカルコン）またはブテ
イン（３,４,２',４'−テトラヒドロキシカルコン）か
ら成る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘導体または
その生理学的に許容される塩を有効成分とする制癌活性
増強剤と、イソリクイリチゲニンまたはブテインから成
る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘導体またはその
生理学的に許容される塩と制癌剤及び生理学的に許容さ
れる添加物から成る制癌剤組成物に関するものである。
本発明によれば、制癌剤の制癌活性を著しく高めること
が出来、かつ制癌剤の毒性を緩和することが出来る。

【０００２】

【従来の技術】現在、種々の制癌剤が開発上市されてい
るが、その多くは細胞障害型の制癌剤であり、制癌作用
の強い制癌剤はしばしば副作用も強く臨床において問題
となっている。例えばシスプラチンは、上市されている
制癌剤の中で最も効力が高く、最も期待されている著名
な制癌剤であるが、細胞障害型制癌剤であり、重篤な腎
障害及び胃腸障害等の副作用を示すことも良く知られて
いる。シスプラチンの臨床使用に際しては、利尿剤もし
くは生理食塩水又はリンゲル液等の大量投与によりシス
プラチンの体外排泄を促進しつつ、制吐剤メトクロポパ
ミドやステロイドホルモンのメチルプレドニゾロンを併
用し、副作用の発現を最小限に抑えるべく、慎重な投与
がなされているが、副作用防止の充分な効果は得られて
いない。しかもこれらの薬剤により制癌剤の活性を増強
することは出来ない。本発明者らは、シスプラチン等に
よる薬物性急性腎炎及び慢性腎炎の治療薬の開発を目的
に鋭意研究を重ね、本発明のヒドロキシカルコン誘導体
であるイソリクイリチゲニン及びブテインにシスプラチ
ン腎障害の軽減作用を見い出している（特開平１−１０
４０１０号公報、特願昭６３−２９４８７８号）。

【０００３】一方、イソリクイリチゲニン及びブテイン
の癌に関する報告としては、浴本ら（特開昭６３−２９
２５号公報）及び加藤ら（カルシノジェネシス第１２巻
第２号３１７−３２３頁１９９１年（Ｃａｒｃｉｎｏｇ
ｅｎｅｓｉｓ，Ｖｏｌ．１２，Ｎｏ．２，ｐ．３１７−
３２３，１９９１年））の発ガン抑制作用に関する報告
及び高橋ら（特公平３−６７０４５号公報）の白血球系
癌細胞に対する分化誘導活性に関する報告がある。即
ち、浴本らは、特開昭６３−２９２５号公報において、
ヒドロキシカルコン誘導体のＣ−キナーゼ阻害作用を見
いだし、本発明のヒドロキシカルコン誘導体のブテイン
について、マウスを用いたベンツピレン肺癌における発
癌予防作用を示している。しかしながら、浴本らは、予
防作用について示したのみであり、既に発生した癌に対
する明らかな治療作用は示していなかった。

【０００４】また加藤らは（カルシノジェネシス第１２
巻第２号３１７−３２３頁１９９１年（Ｃａｒｃｉｎｏ
ｇｅｎｅｓｉｓ，Ｖｏｌ．１２，Ｎｏ．２，ｐ．３１７
−３２３，１９９１年））、本発明のヒドロキシカルコ
ン誘導体であるイソリクイリチゲニンの発癌プロモター
阻害作用すなわち発癌予防作用を示しているが、癌治療
作用については言及していない。また高橋らは、特公平
３−６７０４５号公報において、フレンド白血病細胞等
を用いた試験管内の試験系にてイソリクイリチゲニンの
分化誘導作用を見いだし、制癌活性を有すると主張して
いる。しかしながら、高橋らは試験管内の試験系での制
癌活性を示したのみで、生体内での制癌活性については
何等データを示していなかった。

【０００５】今回、本発明者らは本発明のヒドロキシカ
ルコン誘導体であるイソリクイリチゲニン及びブテイン
の生体内での癌治療効果を確認するため担癌動物試験を
行った。しかし、本発明者らが実施したＭｅｔｈ−Ａ
ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａを用いた担癌動物モデル系に
おいては、本発明のイソリクイリチゲニン及びブテイン
に腫瘍抑制傾向は認められたものの、その作用は僅かな
ものであり生体内での癌治療作用は比較的弱いものであ
ると考えられる。

【０００６】本発明者らは更に検討を進め本発明のヒド
ロキシカルコン誘導体であるイソリクイリチゲニンまた
はブテインと制癌剤との併用効果を検討したところ、驚
くべきことに制癌剤単独使用に比較し著しい癌治療効果
の増強作用を有する事を初めて見い出した。従い、本発
明のヒドロキシカルコン誘導体であるイソリクイリチゲ
ニンまたはブテインまたはそれらの生理学的に許容され
る塩が、制癌剤の制癌活性増強作用を有し、顕著な癌治
療効果の改善を示すことは、従来全く知られていなかっ
た。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】現在、種々の制癌剤が
開発上市されているが、その多くは細胞障害型の制癌剤
であり、制癌作用の強い制癌剤はしばしば副作用も強く
臨床において問題となっている。

【０００８】例えばシスプラチンは、上市されている制
癌剤の中で効力が高く、最も期待されている著名な制癌
剤であるが、細胞障害型制癌剤であり、極めて毒性が高
くラットにおける静脈内投与での５０％致死量は９．３
ｍｇ／ｋｇ（医薬品要覧第４版，薬業時報社，１９８８
年）である。また臨床においては腎障害、胃腸障害、骨
髄障害、体重抑制等の重篤な副作用を示すことが良く知
られている。またこの他、フルオロウラシル、塩酸ドキ
ソルビシン、シクロフォスファミド等も細胞障害型の制
癌剤であるが、これらも毒性が高く各々の５０％致死量
は、フルオロウラシルがマウスの経口投与にて２２６ｍ
ｇ／ｋｇ、塩酸ドキソルビシンがマウスの静脈内投与に
て９．８ｍｇ／ｋｇ、シクロフォスファミドはラットの
経口投与で１００ｍｇ／ｋｇである（医薬品要覧第４
版，薬業時報社，１９８８年）。

【０００９】多くの場合、制癌剤の副作用は治療有効用
量と毒性発現用量が近いことから生じるものであり、何
らかの方法により治療有効用量を下げるか、もしくは毒
性発現用量を上げることが出来れば、大半の制ガン剤は
非常に有用性の高い薬剤となり癌患者に福音をもたらす
ものと考えられる。従い、制癌剤の制癌活性を増強し
て、投与量を減少せしめるとともに、その副作用を緩和
せしめることが可能な制癌活性増強剤は極めて有用であ
る。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、シスプラ
チン等が惹き起こす薬剤性腎障害を軽減するための薬剤
を提供することを目的に鋭意研究を行った結果、本発明
のヒドロキシカルコン誘導体イソリクイリチゲニン、ブ
テインにシスプラチン等の薬剤で惹起される薬物性腎障
害の軽減作用を有することを既に見い出している。

【００１１】本発明者らは、さらに研究を進め、これら
イソリクイリチゲニン及びブテインによる制癌剤シスプ
ラチンの制癌活性に与える効果を検討したところ、驚く
べきことに極めて強い制癌活性の増強効果が発現するこ
とを見い出した。加えて、本発明者らは、シスプラチン
以外の制癌剤に対する併用効果を検討したところ、同様
に制癌活性の顕著な増強効果を確認し、ヒドロキシカル
コン誘導体であるイソリクイリチゲニンまたはブテイン
を有効成分とする制癌活性増強剤及びイソリクイリチゲ
ニンまたはブテインと制癌剤を有効成分とする制癌剤組
成物を製造することにより、本発明を完成するに至っ
た。

【００１２】（構成）本発明は、イソリクイリチゲニン
またはブテインから成る群から選ばれたヒドロキシカル
コン誘導体またはその生理学的に許容される塩を有効成
分とする制癌活性増強剤及び、イソリクイリチゲニンま
たはブテインから成る群から選ばれたヒドロキシカルコ
ン誘導体またはその生理学的に許容される塩と制癌剤及
び生理学的に許容される添加物から成る制癌剤組成物に
関するものである。また、これらヒドロキシカルコン誘
導体のイソリクイリチゲニンまたはブテインの互変異性
体又はその生理学的に許容される塩も本発明の範囲に含
まれる。

【００１３】本発明のヒドロキシカルコン誘導体のイソ
リクイリチゲニンまたはブテインは、公知の方法又は本
発明者らの提案した方法（米国特許５０６８３６４）
に準じて合成することが出来る。例えば、イソリクイリ
チゲニンの場合、下記化１に示す如く、ｐ−ヒドロキシ
ベンズアルデヒド（Ａ）及び２，４−ジヒドロキシアセ
トフェノン（Ｂ）を塩化メチレン中で、ｐ−トルエンス
ルホン酸ピリジン塩を触媒としてジヒドロピランと反応
させ化合物（Ｃ）及び（Ｄ）を得る。化合物（Ｃ）及び
（Ｄ）を水酸化バリウム・８水和物の存在下、メタノ−
ル中で反応させ、化合物（Ｅ）を得る。化合物（Ｅ）を
ｐ−トルエンスルホン酸により、テトラヒドロピラン基
を脱離させ、イソリクイリチゲニンを得る事が出来る。

【００１４】また、これら化合物の塩は、周知の方法に
従って、容易に製造することができ、これらの生理学的
に許容できる塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリ
ウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等があり、これ
ら生理学的に許容される塩も本発明の中に含まれる。

【００１５】

【化１】

【００１６】本発明のイソリクイリチゲニンまたはブテ
インから成る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘導体
と併せて制癌剤組成物とすることが出来る制癌剤は、具
体的には、シスプラチン等の白金化合物、チオテパ、シ
クロフォスファミド、イフォスファミド、ブスルファ
ン、塩酸ニムスチン等のアルキル化剤、メルカプトプリ
ン、チオイノシン、テガフール、フルオロウラシル、カ
ルモフール、ドキシフルリジン、メトトレキサート、シ
タラビン等の代謝拮抗剤、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビ
ンクリスチン、硫酸ビンデシン等の植物アルカロイド、
塩酸ドキソルビシン、塩酸ダウノマイシン、クロモマイ
シンＡ３、塩酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、
塩酸アクラルビシン、マイトマイシンＣ等の制癌抗生物
質等が挙げられる。これらの制癌剤を、本発明のイソリ
クイリチゲニンまたはブテインから成る群から選ばれた
ヒドロキシカルコン誘導体を有効成分とする制癌活性増
強剤と併せて使用することも出来る。

【００１７】本発明者らは、有用な制癌活性増強剤を提
供する事を目的に、担癌動物を用いて、鋭意研究を重ね
てきた。担癌動物を用いた試験系は、癌患者との相関性
が高く、且つ治療的効果を示す事が出来る試験方法であ
り、種々の方法が知られている。本発明者らは比較例１
に示す如く、Ｍｅｔｈ−Ａｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ
を移植した担癌動物にヒドロキシカルコン誘導体のイソ
リクイリチゲニンまたはブテインを制癌剤と併用せず単
独で経口投与し治療的効果を検討した。その結果、イソ
リクイリチゲニンまたはブテインの単独投与では、僅か
に腫瘍重量の抑制傾向は認められたが、その作用は弱く
本担癌モデル系においては腫瘍に対する治療的効果は弱
いものであると考えられる。

【００１８】本発明にいうイソリクイリチゲニンまたは
ブテインから成る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘
導体またはその生理学的に許容される塩を有効成分とす
る制癌活性増強剤、もしくはイソリクイリチゲニンまた
はブテインから成る群から選ばれたヒドロキシカルコン
誘導体またはそれらの生理学的に許容される塩と制癌剤
及び生理学的に許容される添加剤とから成る制癌剤組成
物は、経口又は非経口投与（例えば静脈内投与、皮下投
与、経皮投与又は直腸内投与等）することが出来、投与
に際してはそれぞれの投与法に適した剤型に調製するこ
とが出来る。

【００１９】かかる薬剤は、その用途に応じて錠剤、カ
プセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、トローチ剤、舌下
錠、坐剤、軟膏剤、注射剤、乳剤、懸濁剤、シロップ剤
等のいずれかの製剤形体に調製することが出来る。これ
らの調製に際しては、例えばこの種の薬剤に通常使用さ
れている無毒の賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、保存
剤、酸化防止剤、等張化剤、緩衝剤、コーティング剤、
矯味剤、溶解補助剤、基剤、分散剤、安定化剤、着色剤
等の添加剤を使用して公知の方法により製剤化すること
が出来る。

【００２０】前記使用し得る無毒性の添加剤の具体例を
列挙すると、以下のようである。まず、賦形剤として
は、でんぷん及びその誘導体（デキストリン、カルボキ
シメチルスターチ等）、セルロース及びその誘導体（メ
チルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース
等）、糖類（乳糖、白等、ブドウ糖等）、ケイ酸及びケ
イ酸塩類（天然ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウ
ム）、炭酸塩（炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、炭
酸水素ナトリウム等）、水酸化アルミニウム・マグネシ
ウム、合成ヒドロタルサイト、ポリオキシエチレン誘導
体、モノステアリン酸グリセリン、モノオレイン酸ソル
ビタン等が挙げられる。

【００２１】結合剤としては、でんぷん及びその誘導体
（アルファー化デンプン、デキストリン等）、セルロー
ス及びその誘導体（エチルセルロース、カルボキシメチ
ルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセ
ルロース等）、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、
糖類（ブドウ糖、白糖等）、エタノール、ポリビニルア
ルコール等が挙げられる。

【００２２】崩壊剤としては、でんぷん及びその誘導体
（カルボキシメチルスターチ、ヒドロキシプロピルスタ
ーチ等）、セルロース及びその誘導体（カルボキシメチ
ルセルロースナトリウム、結晶セルロース、ヒドロキシ
プロピルメチルセルロース等）、炭酸塩（炭酸カルシウ
ム、炭酸水素カルシウム等）、トラガント、ゼラチン、
寒天等が挙げられる。

【００２３】滑沢剤としては、ステアリン酸、ステアリ
ン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、
ケイ酸及びその塩類（軽質無水ケイ酸、天然ケイ酸アル
ミニウム等）、酸化チタン、リン酸水素カルシウム、乾
燥水酸化アルミニウムゲル、マクロゴール等が挙げられ
る。

【００２４】保存剤としては、パラオキシ安息香酸エス
テル類、亜硫酸塩類（亜硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナ
トリウム等）、リン酸塩類（リン酸ナトリウム、ポリリ
ン酸カルシウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナ
トリウム等）、アルコール類（クロロブタノール、ベン
ジルアルコール等）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベン
ゼトニウム、フェノール、クレゾール、クロロクレゾー
ル、デヒドロ酢酸、デヒドロ酢酸ナトリウム、ソルビン
酸グリセリン、糖類等が挙げられる。

【００２５】酸化防止剤としては、亜硫酸塩類（亜硫酸
ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム等）、ロンガリッ
ト、エリソルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸、システイ
ン、チオグリセロール、ブチルヒドロキシアニゾール、
ジブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、アス
コルビン酸パルミテート、ｄｌ−αートコフェロール等
が挙げられる。

【００２６】等張化剤としては、塩化ナトリウム、硝酸
ナトリウム、硝酸カリウム、デキストリン、グリセリ
ン、ブドウ糖等が挙げられる。緩衝剤としては、炭酸ナ
トリウム、塩酸、ホウ酸、リン酸塩（リン酸水素ナトリ
ウム等）等が挙げられる。

【００２７】コーティング剤としては、セルロース誘導
体（ヒドロキシプロピルセルロース、酢酸フタル酸セル
ロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレー
ト等）、セラック、ポリビニルピロリドン、ポリビニル
ピリジン類（ポリー２ービニルピリジン、ポリー２−ビ
ニル−５−エチルピリジン等）、ポリビニルアセチルジ
エチルアミノアセテート、ポリビニルアルコールフタレ
ート、メタアクリレート・メタアクリル酸共重合体等が
挙げられる。

【００２８】矯味剤としては、糖類（ブドウ糖、白糖、
乳糖等）、サッカリンナトリウム、糖アルコール類等が
挙げられる。溶解補助剤としては、エチレンジアミン、
ニコチン酸アミド、サッカリンナトリウム、クエン酸、
クエン酸塩類、安息香酸ナトリウム、石鹸類、ポリビニ
ルピロリドン、ポリソルベート類、ソルビタン脂肪酸エ
ステル類、グリセリン、ポリプレングリコール、ベンジ
ルアルコール等が挙げられる。

【００２９】基剤としては、脂肪類（豚脂等）、植物油
（オリーブ油、ゴマ油等）、動物油、ラノリン酸、ワセ
リン、パラフィン、ロウ、樹脂、ベントナイト、グリセ
リン、グリコール油、高級アルコール類（ステアリルア
ルコール、セタノール等）等が挙げられる。

【００３０】分散剤として、アラビアゴム、トラガン
ト、セルロース誘導体（メチルセルロース等）、ステア
リン酸ポリエステル類、セスキオレイン酸ソルビタン、
モノステアリン酸アルミニウム、アルギン酸ナトリウ
ム、ポリソルベート類、ソルビタン脂肪酸エステル類等
が挙げられる。

【００３１】最後に安定化剤としては、亜硫酸塩類（亜
硫酸水素ナトリウム等）、窒素、二酸化炭素等が挙げら
れる。

【００３２】また、かかる製剤中における本発明による
ヒドロキシカルコン誘導体又はその生理学的に許容され
る塩の含有量は、その剤型に応じて異なるが、一般に
０．１〜１００重量％の濃度で含有している事が望まし
い。また、制癌剤組成物中のヒドロキシカルコン誘導体
と制癌剤の比率は、制癌剤の種類により広範囲に変える
ことが出来る。

【００３３】本発明による該製剤の投与量は、対象とす
る人間をはじめとする温血動物の種類、症状の軽重、制
癌剤の種類及び投与量、医師の診断等により広範囲に変
える事が出来るが、一般に有効成分として、経口投与の
場合、体重１ｋｇ当たり１日に０．０１〜３００ｍｇ／
ｋｇ、好ましくは、０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ、非経
口投与の場合、体重１ｋｇ当たり１日に０．０１〜１０
０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ投
与する事が好ましい。しかし、患者の症状の軽重、医師
の診断に応じて投与範囲を変える事も可能である。ま
た、上記投与量は１日１回又は数回に分けて投与する事
が出来る。

【００３４】

【実施例】以下に実施例によって本発明のヒドロキシカ
ルコン誘導体イソリクイリチゲニンまたはブテインの制
癌活性増強作用について具体的に説明するが、もとより
本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

【００３５】（実施例１）マウス急性毒性試験本実施例は、本発明によるヒドロキシカルコン誘導体イ
ソリクイリチゲニンまたはブテインの安全性を確認する
ため行ったものである。以下に試験方法を説明する。試験方法：マウス用胃ゾンデを用いて各ヒドロキシカル
コン誘導体１０００及び２０００ｍｇ／ｋｇを１群５匹
のマウス（ＩＣＲ系雄性体重２０〜２５ｇ）に強制経
口投与した。経口投与後、ケージ内にて７日間飼育し、
死亡動物の有無及び一般状態を観察し、観察終了時のマ
ウスの生存率より５０％致死量（ＬＤ₅₀）を推定した。
表１にマウス急性毒性試験の結果を記載する。尚表１以
降、イソリクイリチゲニンを化合物１、ブテインを化合
物２とする。

【００３６】

【表１】いずれの化合物も１０００及び２０００ｍｇ／ｋｇの経
口投与にて死亡例は認められず、ＬＤ₅₀は２０００ｍｇ
／ｋｇ以上と推定された。以上の事より本発明のイソリ
クイリチゲニンまたはブテインは、極めて低毒性であり
安全性の高い化合物である事が判明した。

【００３７】（実施例２）制癌活性増強作用確認試験
（シスプラチンとの併用）本発明のヒドロキシカルコン誘導体であるイソリクイリ
チゲニンまたはブテインのシスプラチン（ＣＤＤＰ）に
対する制癌活性増強作用を確認するため、癌患者に比較
的外挿しやすい担癌動物を用いてシスプラチンと本発明
のヒドロキシカルコン誘導体の併用による制癌試験を実
施した。以下に試験方法を説明する。

【００３８】試験方法：担癌動物はＢａｌｂ／ｃ系雌性
マウス（５週齢）にＭｅｔｈ−Ａｆｉｂｒｏｓａｒｃｏ
ｍａ８．５×１０⁶ｃｅｌｌ／ｍｏｕｓｅを側腹部皮
下に移植することにより作製した。シスプラチン（日本
化薬製商品名ランダ注）は、生理食塩水により希釈
し、本発明のヒドロキシカルコン誘導体は０．５％カル
ボキシメチルセルロースナトリウムに懸濁し、試験に供
した。癌細胞の移植日を０日目とし、シスプラチンは２
〜３及び５〜８日目まで１日１回６日間３ｍｇ／ｋｇ
の用量を腹腔内投与し、本発明のヒドロキシカルコン誘
導体は、１〜３、５〜９及び１２〜１５日目まで１日１
回１２日間３０又は１００ｍｇ／ｋｇの用量をマウス
用胃ゾンデにて強制経口投与した。対照群として、担癌
動物に生理食塩水を腹腔内投与し、且つ０．５％カルボ
キシメチルセルロースナトリウムを強制経口した群を設
けた。制癌活性の指標として１６日目に担癌動物を放血
致死せしめ腫瘍組織部位を摘出し、腫瘍組織重量を測定
し比較した。また、シスプラチンの副作用の指標として
０、８、１２、１６日目に体重を測定し比較した。試験
は以下の６群を設け１群７匹にて実施した。

【００３９】１：対照群２：シスプラチン単独投与群３：シスプラチン＋化合物１（３０ｍｇ／ｋｇ）併用群４：シスプラチン＋化合物１（１００ｍｇ／ｋｇ）併用
群５：シスプラチン＋化合物２（３０ｍｇ／ｋｇ）併用群６：シスプラチン＋化合物２（１００ｍｇ／ｋｇ）併用
群

【００４０】制癌活性増強作用確認試験の腫瘍組織重量
及び対照群に対する各薬剤投与群の腫瘍組織重量の抑制
率の結果を表２に、対照群、シスプラチン単独投与群、
イソリクイリチゲニン（３０ｍｇ／ｋｇ）併用群及びブ
テイン（３０ｍｇ／ｋｇ）併用群の体重推移を表３，４
に記載した。尚、抑制率は下記の式により求めた。抑制率（％）＝（１−薬剤投与群の腫瘍重量／対照群の
腫瘍重量）×１００

【００４１】

【表２】

【００４２】

【表３】

【００４３】

【表４】本発明の化合物は、いずれもシスプラチンの単独投与群
に比較して腫瘍組織重量の著名な減少が認められた。ま
た、毒性の指標とした体重推移については、シスプラチ
ン単独投与群は著しい体重減少が認められたが、本発明
のヒドロキシカルコン誘導体のイソリクイリチゲニン及
びブテインの併用により体重減少は認められたものの、
その減少はシスプラチン単独投与群に比較して明らかに
軽度であった。本実施例からも自明な如く、本発明のイ
ソリクイリチゲニンまたはブテインから成る群から選ば
れたヒドロキシカルコン誘導体は、シスプラチンの制癌
活性を著名に増強し且つ毒性を軽減することができ、極
めて有用な制癌活性増強剤である事が明らかとなった。

【００４４】（実施例３）制癌活性確認試験（フルオロ
ウラシルとの併用）本実施例は、本発明のヒドロキシカルコン誘導体である
イソリクイリチゲニン及びブテインとフルオロウラシル
（５−ＦＵ）を併用したときの制癌活性増強効果を確認
するために実施した。本実施例は担癌動物を作製し実施
例２記載の方法と同様に実施した。フルオロウラシルの
投与量は２０ｍｇ／ｋｇとし１日１回６日間腹腔内投与
した。表５に対照群、各薬剤投与群の腫瘍組織重量及び
対照群に対する各薬剤投与群の腫瘍組織重量抑制率を記
載する。また体重推移を表６，７に記載した。

【００４５】

【表５】

【００４６】

【表６】

【００４７】

【表７】

【００４８】今回実施した担癌動物モデルにおいてフル
オロウラシル単独の２０ｍｇ／ｋｇ腹腔内投与では抗腫
瘍効果は認められなかった。ところが本発明のヒドロキ
シカルコン誘導体であるイソリクイリチゲニン及びブテ
インの併用により明らかな腫瘍重量の抑制が認められ
た。また、抗腫瘍作用を示さないフルオロウラシル２０
ｍｇ／ｋｇの投与では対照群とほぼ同様の体重推移を示
し毒性徴候は認められなかった。本実施例より明らかな
如く本発明のヒドロキシカルコン誘導体であるイソリク
イリチゲニン及びブテインの併用によりフルオロウラシ
ルの制癌活性が増強され、併用による毒性は認められな
かった。

【００４９】（実施例４）制癌活性確認試験（塩酸ドキ
ソルビシンとの併用）本実施例は、本発明のヒドロキシカルコン誘導体である
イソリクイリチゲニン及びブテインと塩酸ドキソルビシ
ン（ＡＤＲ）を併用したときの制癌活性増強効果を確認
するために実施した。本実施例は担癌動物を作製し実施
例２記載の方法と同様に実施した。塩酸ドキソルビシン
の投与量は３ｍｇ／ｋｇとし１日１回６日間腹腔内投与
した。表８に対照群、各薬剤投与群の腫瘍組織重量及び
対照群に対する各薬剤投与群の腫瘍組織重量抑制率を記
載する。また体重推移を表９，１０に記載した。

【００５０】

【表８】

【００５１】

【表９】

【００５２】

【表１０】

【００５３】塩酸ドキソルビシンの単独投与により腫瘍
重量は対照群の約５０％に減少した。また、体重推移に
おいては８日目に体重の減少が認められ以後回復が観察
された。これに対し本発明のヒドロキシカルコン誘導体
であるイソリクイリチゲニン及びブテインを併用した群
の腫瘍重量は、塩酸ドキソルビシン単独群の腫瘍重量の
約５０％の減少を示し明らかな制癌活性の増強作用が認
められた。また、体重推移においてはヒドロキシカルコ
ン誘導体のイソリクイリチゲニン及びブテインの併用群
では体重増加抑制は認められたものの体重減少は認めら
れず、毒性の緩和が観察された。

【００５４】（実施例５）制癌活性確認試験（シクロフ
ォスファミドとの併用）本実施例は、本発明のヒドロキシカルコン誘導体である
イソリクイリチゲニン及びブテインとシクロフォスファ
ミド（Ｃｙｃ．）とを併用したときの制癌活性増強効果
を確認するために実施した。本実施例は担癌動物を作製
し実施例２記載の方法と同様に実施した。シクロフォス
ファミドの投与量は１００ｍｇ／ｋｇとし１日１回６日
間腹腔内投与した。表１１に対照群、各薬剤投与群の腫
瘍組織重量及び対照群に対する各薬剤投与群の腫瘍組織
重量抑制率を記載する。また体重推移を表１２，１３に
記載した。

【００５５】

【表１１】

【００５６】

【表１２】

【００５７】

【表１３】

【００５８】シクロフォスファミド単独投与により腫瘍
重量の減少が認められ、また体重推移においては体重減
少が認められた。これに対しヒドロキシカルコン誘導体
のイソリクイリチゲニン及びブテインの併用群の腫瘍重
量は、シクロフォスファミド単独投与群の腫瘍重量の３
０〜４０％減少し制癌活性の増強が認められた。また体
重推移においては、ヒドロキシカルコン誘導体のイソリ
クイリチゲニン及びブテイン併用群では体重減少は認め
られず、シクロフォスファミドの毒性が緩和されたもの
と考えられる。

【００５９】（比較例１）制癌活性確認試験本比較例は、本発明のヒドロキシカルコン誘導体イソリ
クイリチゲニン及びブテインの単独投与での生体内おけ
る癌治療作用を検討するため、Ｍｅｔｈ−Ａｆｉｂｒｏ
ｓａｒｃｏｍａを移植した担癌動物を用い実施した。以
下に試験方法を説明する。

【００６０】試験方法：担癌動物の作製方法及びイソリ
クイリチゲニン及びブテインの投与方法は実施例２記載
の方法と同様に実施した。試験群は、対照群として担癌
動物に０．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム
を経口投与した群及びイソリクイリチゲニン叉はブテイ
ンを１００ｍｇ／ｋｇ１日１回１２日間強制経口投与し
た群の計３群を設け、１群は１２匹とした。制癌活性の
指標として、最終投与の翌日担癌動物を放血致死せしめ
腫瘍組織部位を摘出し腫瘍組織重量を測定し比較した。
制癌活性確認試験の腫瘍組織重量及び対照群に対するイ
ソリクイリチゲニン叉はブテインの腫瘍組織重量の抑制
率の結果を表１４に示す。

【００６１】

【表１４】

【００６２】今回本発明者が用いた担癌モデル系におい
ては、ヒドロキシカルコン誘導体のイソリクイリチゲニ
ン及びブテインいずれも単独投与にて、わずかながらに
腫瘍組織重量の抑制が認められたが、その作用は弱いも
のであった。

【００６３】乳鉢で、化合物１の結晶を粉砕し、それに乳糖を添加
し、乳棒で粉砕しながら、充分混合し、５％散剤とし
た。

【００６４】乳鉢内で、化合物２を等量のでんぷんと混合粉砕した。
これに乳糖、でんぷんの残分を加え混合した。別にゼラ
チン３０ｍｇに精製水１ｍｌを加えて、加熱溶解し、冷
後かき混ぜながらこれにエタノール１ｍｌを加え、ゼラ
チン液としたものを調製し、先の混合物にゼラチン液を
添加練合し、造粒した後、乾燥して整粒した。

【００６５】乳鉢内で上記配合の２０倍量の化合物を用いて錠剤の製
造をした。すなわち、１００ｍｇの化合物１の結晶を粉
砕し、それに乳糖及びでんぷんを加え混合する。１０％
でんぷんのりを上記の配合体に加え練合し、造粒する。
乾燥後、タルク及びステアリン酸マグネシウムを混合
し、常法により打錠した。

【００６６】（実施例９）（２０ｍｇ錠）化合物２２０ｍｇ６％ヒドロキシプロピルセルロース乳糖７５ｍｇステアリン酸タルク２ｍｇバレイショデンプン３ｍｇ ─────────────────────────── １００ｍｇ／錠上記化合物の各々１０倍量を用いて、２０ｍｇ錠剤を製
造した。すなわち、ヒドロキシプロピルセルロース６ｇ
を適量のエタノールに溶解し、これに乳糖９４ｇを添加
して練合した。少し乾燥した後、６０号ふるいにて整粒
し、６％ヒドロキシプロピルセルロース乳糖とした。ま
たステアリン酸マグネシウムとタルクを１：４の割合で
混合しステアリン酸タルクとした。化合物２、６％ヒド
ロキシプロピルセルロース乳糖、ステアリン酸タルク、
バレイショデンプンをよく混合し、常法により打錠し
た。

【００６７】（実施例１０）（２５ｍｇ錠）化合物１２５ｍｇ乳糖１２２ｍｇカルボキシメチルスターチ５０ｍｇタルク２ｍｇステアリン酸マグネシウム１ｍｇ ────────────────────────── ２００ｍｇ／錠乳鉢内で上記化合物の各々１０倍量の化合物を用いて２
５ｍｇを製造した。すなわち、乳鉢内で２５０ｍｇの化
合物１の結晶を粉砕し、それに乳糖を加えながら充分混
合する。カルボキシメチルスターチに適量の精製水を加
え、上記の混合物に添加練合し、造粒する。乾燥後、タ
ルク及びステアリン酸マグネシウムを混合し、常法によ
り打錠した。

【００６８】実施例７と同様の方法で顆粒を製造し、該顆粒１００ｍ
ｇづつをカプセルに充填した。

【００６９】化合物１の３００ｍｇをポリエチレングリコール４００
の５０ｍｌ中に徐々に添加攪拌し溶解させた。またシス
プラチンの３０ｍｇを日局生理食塩水５０ｍｌ中へ徐々
に添加攪拌し溶解させた。その後両者を混合し、混合液
１０ｍｌずつを乾熱滅菌したバイアル瓶に封入し注射用
バイアル瓶を製造した。

【００７０】乳鉢内で、化合物２の１００ｍｇ及びフルオロウラシル
２０ｍｇを等量のでんぷんと混合粉砕した。これに乳
糖、でんぷんの残分を加え混合した。別にゼラチン３０
ｍｇに精製水１ｍｌを加えて、加熱溶解し、冷後かき混
ぜながらこれにエタノール１ｍｌを加え、ゼラチン液と
したものを調製し、先の混合物にゼラチン液を添加練合
し、造粒した後、乾燥して整粒した。

【００７１】（実施例１４）（錠剤）化合物１２５ｍｇシクロフォスファミド２５ｍｇ乳糖１００ｍｇカルボキシメチルスターチ４７ｍｇタルク２ｍｇステアリン酸マグネシウム１ｍｇ ────────────────────────── ２００ｍｇ／錠乳鉢内で上記化合物の各々１０倍量の化合物を用いて製
造した。すなわち、乳鉢内で２５０ｍｇの化合物１及び
２５０ｍｇのシクロフォスファミドの結晶を粉砕し、そ
れに乳糖を加えながら充分混合する。カルボキシメチル
スターチに適量の精製水を加え、上記の混合物に添加練
合し、造粒する。乾燥後、タルク及びステアリン酸マグ
ネシウムを混合し、常法により打錠した。

【００７２】化合物１の１０ｍｇをポリエチレングリコール４００の
５ｍｌに添加し攪拌して溶解させ、乾熱滅菌したバイア
ル瓶に封入した。また塩酸ドキソルビシンを乳鉢にてよ
く粉砕し、３ｍｇを乾熱滅菌したバイアル瓶に封入し、
これと別に日局注射用蒸留水を乾熱滅菌したバイアル瓶
に封入し、用時調整注射用バイアル瓶を製造した。

【００７３】

【発明の効果】本発明は、ヒドロキシカルコン誘導体で
あるイソリクイリチゲニンまたはブテインを、制癌剤と
併用もしくは制癌剤組成物とする事により、制癌剤の制
癌活性を著しく増強し、かつ制癌剤の毒性を緩和する優
れた効果を有し、制癌活性増強剤及び制癌剤組成物を提
供できる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】イソリクイリチゲニンまたはブテインか
ら成る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘導体または
その生理学的に許容される塩を有効成分とする制癌活性
増強剤。
【請求項２】イソリクイリチゲニンまたはブテインか
ら成る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘導体または
その生理学的に許容される塩と制癌剤及び生理学的に許
容される添加物から成る制癌剤組成物。
【請求項３】イソリクイリチゲニンまたはブテインか
ら成る群から選ばれたヒドロキシカルコン誘導体または
その生理学的に許容される塩を有効成分とする制癌活性
増強剤と制癌剤を併用する癌治療方法。
【請求項４】ヒドロキシカルコン誘導体がイソリクイ
リチゲニンまたはその生理学的に許容される塩である請
求項１記載の制癌活性増強剤。
【請求項５】ヒドロキシカルコン誘導体がブテインま
たはその生理学的に許容される塩である請求項１記載の
制癌活性増強剤。
【請求項６】ヒドロキシカルコン誘導体がイソリクイ
リチゲニンまたはその生理学的に許容される塩である請
求項２記載の制癌剤組成物。
【請求項７】ヒドロキシカルコン誘導体がブテインま
たはその生理学的に許容される塩である請求項２記載の
制癌剤組成物。
【請求項８】請求項２、６または７に記載の制癌剤が
シスプラチンである制癌剤組成物。
【請求項９】請求項２、６または７に記載の制癌剤が
フルオロウラシルである制癌剤組成物。
【請求項１０】請求項２、６または７に記載の制癌剤
が塩酸ドキソルビシンである制癌剤組成物。
【請求項１１】請求項２、６または７に記載の制癌剤
がシクロフォスファミドである制癌剤組成物。