JPH06189781A - 培養液中の生理活性タンパク質の安定化方法 - Google Patents
培養液中の生理活性タンパク質の安定化方法Info
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- JPH06189781A JPH06189781A JP4346342A JP34634292A JPH06189781A JP H06189781 A JPH06189781 A JP H06189781A JP 4346342 A JP4346342 A JP 4346342A JP 34634292 A JP34634292 A JP 34634292A JP H06189781 A JPH06189781 A JP H06189781A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 動物細胞を灌流培養し生理活性タンパク質を
生産する方法において、生理活性タンパク質を安定な状
態で回収する方法を提供する。 【構成】 動物細胞を灌流培養して連続的に得られる回
収液のｐＨを６．０から７．０の範囲に調整することに
よりタンパク質分解酵素による生理活性タンパク質の分
解を防ぎ、該タンパク質を安定化させる。
生産する方法において、生理活性タンパク質を安定な状
態で回収する方法を提供する。 【構成】 動物細胞を灌流培養して連続的に得られる回
収液のｐＨを６．０から７．０の範囲に調整することに
よりタンパク質分解酵素による生理活性タンパク質の分
解を防ぎ、該タンパク質を安定化させる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、動物細胞の培養液中に
生産された生理活性タンパク質の安定化方法に関するも
のである。詳しくは、動物細胞を灌流培養したとき、連
続的に得られる培養液中の生理活性タンパク質の安定化
方法に関するものである。
生産された生理活性タンパク質の安定化方法に関するも
のである。詳しくは、動物細胞を灌流培養したとき、連
続的に得られる培養液中の生理活性タンパク質の安定化
方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】動物細胞培養は、有用な生理活性タンパ
ク質を生産するに当たって重要な過程である。この培養
方法としては、実験室レベルでは主にフラスコやプレー
ト等を用いた比較的小規模な方法が取られている場合が
多いが、比較的大量に培養を行い目的物質を得ようとす
る場合、大型の培養槽を用いた回分培養あるいは灌流培
養が行われている。中でも灌流培養は、新たな栄養分の
供給と老廃物の排出を連続的に行うことが可能であるこ
とから、回分培養に比べてより細胞の生育に適した条件
を長期間維持することが可能である。
ク質を生産するに当たって重要な過程である。この培養
方法としては、実験室レベルでは主にフラスコやプレー
ト等を用いた比較的小規模な方法が取られている場合が
多いが、比較的大量に培養を行い目的物質を得ようとす
る場合、大型の培養槽を用いた回分培養あるいは灌流培
養が行われている。中でも灌流培養は、新たな栄養分の
供給と老廃物の排出を連続的に行うことが可能であるこ
とから、回分培養に比べてより細胞の生育に適した条件
を長期間維持することが可能である。
【０００３】一般に、細胞培養による物質生産において
は、それぞれの細胞の生育あるいは物質生産に適した培
養条件に関しての詳細な検討が行われる。すなわち、培
地中に含まれる栄養成分、培養中の温度、ｐＨ、溶存酸
素濃度、培養液の攪はん速度、あるいは培地の灌流速度
等さまざまな方面からの検討の結果をもとに、適した条
件にコントロールされる場合が多い（例えばWO 88/0164
3）。
は、それぞれの細胞の生育あるいは物質生産に適した培
養条件に関しての詳細な検討が行われる。すなわち、培
地中に含まれる栄養成分、培養中の温度、ｐＨ、溶存酸
素濃度、培養液の攪はん速度、あるいは培地の灌流速度
等さまざまな方面からの検討の結果をもとに、適した条
件にコントロールされる場合が多い（例えばWO 88/0164
3）。
【０００４】灌流培養を行った場合の回収液は一般に回
収ラインを通って回収タンクに一時的に保存される。回
収液の保存は、生理活性タンパク質の安定化を考慮し、
通常低温でなされる場合が多いが、培養槽内で行ってい
るようなさまざまな条件のコントロールはなされず、通
常は温度管理程度しか行われない。
収ラインを通って回収タンクに一時的に保存される。回
収液の保存は、生理活性タンパク質の安定化を考慮し、
通常低温でなされる場合が多いが、培養槽内で行ってい
るようなさまざまな条件のコントロールはなされず、通
常は温度管理程度しか行われない。
【０００５】このような培養条件下で生産された生理活
性タンパク質が、上記のような条件にコントロールされ
た培養槽内においてもなおかつ分解される場合がある。
これは、細胞により生産されたあるいは死滅により細胞
内部から放出されたタンパク質分解酵素による場合が多
い。このような分解を防ぐ目的で、しばしば培地中にタ
ンパク質分解酵素に対する阻害剤を添加することが行わ
れる。しかしこのような分解活性を示す酵素の性質は未
知な場合が多く、該酵素の分解活性を十分抑えるにはそ
の阻害剤の検索と有用性の検討を十分に行う必要があ
り、必ずしも目的にかなった阻害剤がみつかるというわ
けではない。また、仮に有用な阻害剤が得られたとして
も、細胞の生育に害を与えないような添加条件の検討が
必要となることは言うまでもなく、細胞の生育にとって
無害でかつタンパク質分解活性を十分に阻害する有用な
阻害剤の使用が困難である場合が多い。しかも、阻害剤
添加条件下で生産された生理活性タンパク質を例えば医
薬品レベルで用いる場合、異物としての阻害剤は生体内
においてしばしば有害な作用を及ぼすため、精製工程で
の目的タンパク質との分離等安全面からの確認を十分に
行う必要がある。また、阻害剤は一般に高価な場合が多
く、生理活性タンパク質生産のコストを高めることにな
り不都合である。
性タンパク質が、上記のような条件にコントロールされ
た培養槽内においてもなおかつ分解される場合がある。
これは、細胞により生産されたあるいは死滅により細胞
内部から放出されたタンパク質分解酵素による場合が多
い。このような分解を防ぐ目的で、しばしば培地中にタ
ンパク質分解酵素に対する阻害剤を添加することが行わ
れる。しかしこのような分解活性を示す酵素の性質は未
知な場合が多く、該酵素の分解活性を十分抑えるにはそ
の阻害剤の検索と有用性の検討を十分に行う必要があ
り、必ずしも目的にかなった阻害剤がみつかるというわ
けではない。また、仮に有用な阻害剤が得られたとして
も、細胞の生育に害を与えないような添加条件の検討が
必要となることは言うまでもなく、細胞の生育にとって
無害でかつタンパク質分解活性を十分に阻害する有用な
阻害剤の使用が困難である場合が多い。しかも、阻害剤
添加条件下で生産された生理活性タンパク質を例えば医
薬品レベルで用いる場合、異物としての阻害剤は生体内
においてしばしば有害な作用を及ぼすため、精製工程で
の目的タンパク質との分離等安全面からの確認を十分に
行う必要がある。また、阻害剤は一般に高価な場合が多
く、生理活性タンパク質生産のコストを高めることにな
り不都合である。
【０００６】一方、培養液中に生産された生理活性タン
パク質が回収液として一時的に保存される過程において
分解を受ける場合がある。この場合、仮に生理活性タン
パク質が培養槽内で安定である場合でも、回収液として
一時的に保存される過程で分解されることがあり、この
ような現象の原因は不明であった。そしてこのための対
策として、培養液の場合と同様にタンパク質分解酵素に
対する阻害剤の添加がなされていた。 このように、培
養液および回収液のどちらにおいても生理活性タンパク
質の分解を防止するためには阻害剤の添加以外に有効な
対策がなかったが、阻害剤の添加は上述のとおり問題点
があり、阻害剤を添加せずに生理活性タンパク質の分解
を防止する方法が希求されていた。
パク質が回収液として一時的に保存される過程において
分解を受ける場合がある。この場合、仮に生理活性タン
パク質が培養槽内で安定である場合でも、回収液として
一時的に保存される過程で分解されることがあり、この
ような現象の原因は不明であった。そしてこのための対
策として、培養液の場合と同様にタンパク質分解酵素に
対する阻害剤の添加がなされていた。 このように、培
養液および回収液のどちらにおいても生理活性タンパク
質の分解を防止するためには阻害剤の添加以外に有効な
対策がなかったが、阻害剤の添加は上述のとおり問題点
があり、阻害剤を添加せずに生理活性タンパク質の分解
を防止する方法が希求されていた。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、動物
細胞を灌流培養し生理活性タンパク質を生産する方法に
おいて、生理活性タンパク質を安定な状態で回収する方
法を提供することにある。
細胞を灌流培養し生理活性タンパク質を生産する方法に
おいて、生理活性タンパク質を安定な状態で回収する方
法を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意検討を行った結果、動物細胞を灌
流培養し生理活性タンパク質を生産する方法において、
培養槽内で一般にｐＨの調整のために添加された炭素ガ
スが放出されてｐＨの上昇が起こること、そして回収液
中での生理活性タンパク質の分解が回収液のｐＨの上昇
と関連していることを発見した。そして、回収液のｐＨ
の上昇を抑えるべく該回収液のｐＨを６．０から７．０
に調整することにより生理活性物質を安定な状態で回収
することが可能であることを見いだし本発明を完成する
に至った。
を解決するために鋭意検討を行った結果、動物細胞を灌
流培養し生理活性タンパク質を生産する方法において、
培養槽内で一般にｐＨの調整のために添加された炭素ガ
スが放出されてｐＨの上昇が起こること、そして回収液
中での生理活性タンパク質の分解が回収液のｐＨの上昇
と関連していることを発見した。そして、回収液のｐＨ
の上昇を抑えるべく該回収液のｐＨを６．０から７．０
に調整することにより生理活性物質を安定な状態で回収
することが可能であることを見いだし本発明を完成する
に至った。
【０００９】即ち、本発明は動物細胞を灌流培養し生理
活性タンパク質を生産する方法において、連続的に得ら
れる回収液のｐＨを６．０から７．０の範囲に調整する
ことによる、培養液中に産生された生理活性タンパク質
の安定化方法を提供するものである。
活性タンパク質を生産する方法において、連続的に得ら
れる回収液のｐＨを６．０から７．０の範囲に調整する
ことによる、培養液中に産生された生理活性タンパク質
の安定化方法を提供するものである。
【００１０】以下本発明を具体的に説明する。本発明で
使用される動物細胞は哺乳動物由来の細胞であり、その
動物種は問わない。また、その細胞は遺伝子組み換えの
手法により生理活性タンパク質の遺伝子が組み込まれた
ものでも良く、細胞融合技術により作製された融合細胞
あるいは各種ウイルスを用いた形質転換手法で作製した
ものでも良く、正常細胞でもかまわない。
使用される動物細胞は哺乳動物由来の細胞であり、その
動物種は問わない。また、その細胞は遺伝子組み換えの
手法により生理活性タンパク質の遺伝子が組み込まれた
ものでも良く、細胞融合技術により作製された融合細胞
あるいは各種ウイルスを用いた形質転換手法で作製した
ものでも良く、正常細胞でもかまわない。
【００１１】本発明の生理活性タンパク質は、生体内で
重要な生理活性を示すタンパク質であり、酵素、ホルモ
ン、成長因子あるいは抗体分子等があげられるが、本発
明は生理活性タンパク質の種類を問わず使用できる。
重要な生理活性を示すタンパク質であり、酵素、ホルモ
ン、成長因子あるいは抗体分子等があげられるが、本発
明は生理活性タンパク質の種類を問わず使用できる。
【００１２】本発明の動物細胞の培養は、灌流培養で行
われる。細胞と培養液との分離は、膜分離、重力沈降、
あるいは遠心分離等が用いられるが、そのいずれの方法
をとっても良い。培養に用いられる培地は、動物細胞の
培養に通常用いられるものであり、血清添加培地でも無
血清培地でも良い。培養における温度、ｐＨ、溶存酸素
濃度、培養液の攪はん速度、培地の灌流速度等の各種条
件は、それぞれの動物細胞の生育あるいは物質生産に適
した条件であることが望ましく、用いる細胞によって異
なった条件になってもかまわなく、必ずしもこれらすべ
ての条件をコントロールする必要はない。
われる。細胞と培養液との分離は、膜分離、重力沈降、
あるいは遠心分離等が用いられるが、そのいずれの方法
をとっても良い。培養に用いられる培地は、動物細胞の
培養に通常用いられるものであり、血清添加培地でも無
血清培地でも良い。培養における温度、ｐＨ、溶存酸素
濃度、培養液の攪はん速度、培地の灌流速度等の各種条
件は、それぞれの動物細胞の生育あるいは物質生産に適
した条件であることが望ましく、用いる細胞によって異
なった条件になってもかまわなく、必ずしもこれらすべ
ての条件をコントロールする必要はない。
【００１３】回収液中の生理活性タンパク質の安定化を
目的として調整されるｐＨは、目的生理活性タンパク質
のｐＨ安定性により異なるが、好ましくはｐＨ６から７
の範囲である。先に示した通り培養槽内では一般にｐＨ
の調整がなされ、これは主に二酸化炭素ガスと炭酸水素
ナトリウム溶液の添加により行われる。しかしこの様な
培養液はそれ自体での緩衝作用は小さく、回収ラインを
通る際あるいは回収タンク内において炭酸ガスの放出に
よるｐＨの上昇が起こる。このｐＨ上昇により、培養槽
内では抑制されていたタンパク質分解酵素活性が発現さ
れ、生理活性タンパク質の分解が引き起こされると考え
られる。従って、このｐＨの上昇した状態で培養液を回
収し保存することは、タンパク質分解酵素による生理活
性タンパク質の分解につながり、好ましくない。回収液
のｐＨの調整はさまざまな方法で行うことが可能であ
り、回収タンクにあらかじめ緩衝液を添加してこれに回
収する方法、連続的に緩衝液を添加しながら回収する方
法、あるいは回収液のｐＨをセンサーでチェックしなが
ら酸あるいは緩衝液等を添加して調整する方法等がある
が、ｐＨを保つ方法であればどの様な方法であってもよ
い。ｐＨの調整に用いられる緩衝液としては、通常用い
られる有機酸や無機酸、及びそれらの塩等の化合物を単
独あるいは複数混合して調製すればよく、有機酸、無機
酸、およびそれらの塩としては、クエン酸、クエン酸ナ
トリウム、クエン酸カリウム、リン酸、リン酸ナトリウ
ム、リン酸カリウム、塩酸、酢酸、酢酸ナトリウム、酢
酸カリウム、トリスヒドロキシアミノメタン、水酸化ナ
トリウム、水酸化カリウム等があげられるが、リン酸あ
るいはリン酸ナトリウムが特に好ましい。また、ｐＨ調
整は緩衝液以外の酸及び塩基の添加によっても可能であ
り、塩酸、クエン酸、リン酸、酢酸、水酸化ナトリウム
等があげられるが、特にリン酸が好ましい。
目的として調整されるｐＨは、目的生理活性タンパク質
のｐＨ安定性により異なるが、好ましくはｐＨ６から７
の範囲である。先に示した通り培養槽内では一般にｐＨ
の調整がなされ、これは主に二酸化炭素ガスと炭酸水素
ナトリウム溶液の添加により行われる。しかしこの様な
培養液はそれ自体での緩衝作用は小さく、回収ラインを
通る際あるいは回収タンク内において炭酸ガスの放出に
よるｐＨの上昇が起こる。このｐＨ上昇により、培養槽
内では抑制されていたタンパク質分解酵素活性が発現さ
れ、生理活性タンパク質の分解が引き起こされると考え
られる。従って、このｐＨの上昇した状態で培養液を回
収し保存することは、タンパク質分解酵素による生理活
性タンパク質の分解につながり、好ましくない。回収液
のｐＨの調整はさまざまな方法で行うことが可能であ
り、回収タンクにあらかじめ緩衝液を添加してこれに回
収する方法、連続的に緩衝液を添加しながら回収する方
法、あるいは回収液のｐＨをセンサーでチェックしなが
ら酸あるいは緩衝液等を添加して調整する方法等がある
が、ｐＨを保つ方法であればどの様な方法であってもよ
い。ｐＨの調整に用いられる緩衝液としては、通常用い
られる有機酸や無機酸、及びそれらの塩等の化合物を単
独あるいは複数混合して調製すればよく、有機酸、無機
酸、およびそれらの塩としては、クエン酸、クエン酸ナ
トリウム、クエン酸カリウム、リン酸、リン酸ナトリウ
ム、リン酸カリウム、塩酸、酢酸、酢酸ナトリウム、酢
酸カリウム、トリスヒドロキシアミノメタン、水酸化ナ
トリウム、水酸化カリウム等があげられるが、リン酸あ
るいはリン酸ナトリウムが特に好ましい。また、ｐＨ調
整は緩衝液以外の酸及び塩基の添加によっても可能であ
り、塩酸、クエン酸、リン酸、酢酸、水酸化ナトリウム
等があげられるが、特にリン酸が好ましい。
【００１４】回収液を保存する温度は特に限定されない
が、好ましくは１８℃以下０℃以上である。
が、好ましくは１８℃以下０℃以上である。
【００１５】
【実施例】以下実施例を示して説明するが、本発明はこ
れに限られるものではない。 実施例１ コーン型沈降管付培養槽を用い、ヒト・モノクローナル
抗体を産生する細胞株ＭＰ−５１５６（微工研条寄第２
３３９号（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３３９））を灌流培養し
た。ＳＦ−１０１無血清培地（日水製薬（株））を用
い、細胞数約１×１０6 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ、灌流速度
１ＶＶＤ、培養温度３７℃、溶存酸素濃度２ｐｐｍ、培
養槽内のｐＨ７．０の条件で培養を行った。なお、この
際４℃に回収タンクを置き、タンク内にあらかじめ０．
１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）１００ｍｌ
を入れて回収した場合、及びそのままの状態で回収した
場合の２通りの回収方法をとり、それぞれ約１リットル
の培養液を回収した。回収液の一部を４℃及び１８℃に
移し、この中に含まれるモノクローナル抗体の抗原結合
活性を０日及び５日後に測定した。保存開始時の抗原結
合活性を１０とした時の、５日後の相対活性を表１（表
１）に示した。回収液のｐＨを調整せずに保存した場
合、５日後にはそのｐＨは７．７まで上昇し、このため
抗原結合活性の多くは失われた。これに対し、緩衝液添
加によりｐＨ調整された場合は、抗原結合活性は良く保
存されていた。
れに限られるものではない。 実施例１ コーン型沈降管付培養槽を用い、ヒト・モノクローナル
抗体を産生する細胞株ＭＰ−５１５６（微工研条寄第２
３３９号（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３３９））を灌流培養し
た。ＳＦ−１０１無血清培地（日水製薬（株））を用
い、細胞数約１×１０6 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ、灌流速度
１ＶＶＤ、培養温度３７℃、溶存酸素濃度２ｐｐｍ、培
養槽内のｐＨ７．０の条件で培養を行った。なお、この
際４℃に回収タンクを置き、タンク内にあらかじめ０．
１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）１００ｍｌ
を入れて回収した場合、及びそのままの状態で回収した
場合の２通りの回収方法をとり、それぞれ約１リットル
の培養液を回収した。回収液の一部を４℃及び１８℃に
移し、この中に含まれるモノクローナル抗体の抗原結合
活性を０日及び５日後に測定した。保存開始時の抗原結
合活性を１０とした時の、５日後の相対活性を表１（表
１）に示した。回収液のｐＨを調整せずに保存した場
合、５日後にはそのｐＨは７．７まで上昇し、このため
抗原結合活性の多くは失われた。これに対し、緩衝液添
加によりｐＨ調整された場合は、抗原結合活性は良く保
存されていた。
【００１６】
【表１】 ─────────────────────────────────── 培養液の回収方法 回収液の 相対抗原結合活性 ｐＨ ４℃保存 １８℃保存 ─────────────────────────────────── ｐＨ未調整 ７．７ ６ ０ ｐＨ調整（緩衝液添加） ６．７ １０ ７ ───────────────────────────────────
【００１７】実施例２ コーン型沈降管付培養槽を用い、実施例１と同様に灌流
培養した。この際、得られた回収液に等量の０．１Ｍリ
ン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨは６．０〜７．８の範囲で
調整）を混合し、これを４℃及び１８℃に７日間放置
し、回収液中に含まれるモノクローナル抗体の抗原結合
活性を測定した。保存開始時の抗原結合活性を１０とし
た時の７日後の相対活性を表２（表２）に示した。回収
液のｐＨが６．０から７．０の範囲で抗原結合活性は良
く保存されていた。
培養した。この際、得られた回収液に等量の０．１Ｍリ
ン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨは６．０〜７．８の範囲で
調整）を混合し、これを４℃及び１８℃に７日間放置
し、回収液中に含まれるモノクローナル抗体の抗原結合
活性を測定した。保存開始時の抗原結合活性を１０とし
た時の７日後の相対活性を表２（表２）に示した。回収
液のｐＨが６．０から７．０の範囲で抗原結合活性は良
く保存されていた。
【００１８】実施例３ 実施例１で示した細胞株を、同様の条件により灌流培養
した。回収液のｐＨ調整として、回収ラインの途中にｐ
Ｈ調整タンクを設置し、回収液２０容に対して０．１Ｍ
リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）を１容の割合で
添加混合し、回収液のｐＨ調整を行った。回収液は０．
２μｍのフィルターを通過後４℃に保存した。その結
果、回収液内の抗原結合活性は、５日間放置後も良く保
存されていた。
した。回収液のｐＨ調整として、回収ラインの途中にｐ
Ｈ調整タンクを設置し、回収液２０容に対して０．１Ｍ
リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）を１容の割合で
添加混合し、回収液のｐＨ調整を行った。回収液は０．
２μｍのフィルターを通過後４℃に保存した。その結
果、回収液内の抗原結合活性は、５日間放置後も良く保
存されていた。
【００１９】
【表２】 ─────────────────────────── 培養液のｐＨ 相対抗原結合活性 ４℃保存 １８℃保存 ─────────────────────────── ６．０ １０ １０ ６．５ １０ １０ ７．０ １０ ７ ７．８ ６ ０ ───────────────────────────
【００２０】
【発明の効果】動物細胞を灌流培養し生理活性タンパク
質を生産する方法において、本発明で示した培養液の回
収方法を用いることにより、回収時の生理活性タンパク
質の分解を最小限に抑えた生理活性タンパク質の安定化
が可能である。生理活性タンパク質は広い用途で用いら
れており、その有用性は高い。なかでも医薬品として生
産される場合、生理活性タンパク質の分解を最小限に抑
えた安定な条件での生産は重要であり、本発明で示した
方法が有用な手段となり得る。また、本方法で示した培
養液の回収方法は、灌流培養した場合の回収液への適用
のみならず、例えばフラスコやジャーを用いた回分培養
によって得られた培養液の保存時に適用することも可能
であり、回収液内の生理活性タンパク質の安定化を図る
ことができる。
質を生産する方法において、本発明で示した培養液の回
収方法を用いることにより、回収時の生理活性タンパク
質の分解を最小限に抑えた生理活性タンパク質の安定化
が可能である。生理活性タンパク質は広い用途で用いら
れており、その有用性は高い。なかでも医薬品として生
産される場合、生理活性タンパク質の分解を最小限に抑
えた安定な条件での生産は重要であり、本発明で示した
方法が有用な手段となり得る。また、本方法で示した培
養液の回収方法は、灌流培養した場合の回収液への適用
のみならず、例えばフラスコやジャーを用いた回分培養
によって得られた培養液の保存時に適用することも可能
であり、回収液内の生理活性タンパク質の安定化を図る
ことができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者 東 辰雄 千葉県茂原市東郷1900番地 三井東圧化学 株式会社内 (72)発明者 村中 英一 千葉県茂原市東郷1900番地 三井東圧化学 株式会社内 (72)発明者 高木 司郎 千葉県茂原市東郷1144番地 三井東圧化学 株式会社内 (72)発明者 里澤 昇 千葉県茂原市東郷1144番地 三井東圧化学 株式会社内 (72)発明者 池田 一郎 千葉県茂原市東郷1144番地 三井東圧化学 株式会社内 (72)発明者 川嶋 伸広 千葉県茂原市東郷1144番地 三井東圧化学 株式会社内 (72)発明者 相川 敏和 千葉県茂原市東郷1900番地 三井東圧化学 株式会社内
Claims (2)
- 【請求項１】 動物細胞を灌流培養して生理活性タンパ
ク質を生産する方法において、連続的に得られる回収液
のｐＨを６．０から７．０の範囲に調整することによ
る、培養液中に産生された生理活性タンパク質の安定化
方法。 - 【請求項２】 生理活性タンパク質がモノクローナル抗
体である請求項１記載の安定化方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4346342A JPH06189781A (ja) | 1992-12-25 | 1992-12-25 | 培養液中の生理活性タンパク質の安定化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4346342A JPH06189781A (ja) | 1992-12-25 | 1992-12-25 | 培養液中の生理活性タンパク質の安定化方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06189781A true JPH06189781A (ja) | 1994-07-12 |
Family
ID=18382767
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4346342A Pending JPH06189781A (ja) | 1992-12-25 | 1992-12-25 | 培養液中の生理活性タンパク質の安定化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06189781A (ja) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005033143A1 (ja) * | 2003-10-01 | 2005-04-14 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | 抗体の安定化方法及び安定化された溶液状抗体製剤 |
| WO2005035573A1 (ja) * | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | タンパク質溶液の安定化方法 |
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