JPH06104059B2 - New lactic acid bacteria - Google Patents

New lactic acid bacteria

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JPH06104059B2
JPH06104059B2 JP1080446A JP8044689A JPH06104059B2 JP H06104059 B2 JPH06104059 B2 JP H06104059B2 JP 1080446 A JP1080446 A JP 1080446A JP 8044689 A JP8044689 A JP 8044689A JP H06104059 B2 JPH06104059 B2 JP H06104059B2
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lactic acid
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lactobacillus
acid bacteria
anaerobic
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一郎 中村
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Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はラクトバチルス属に属する新規な乳酸菌に関す
る。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a novel lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus.

〔従来の技術〕[Conventional technology]

家畜の飼料となるサイレージは、牧草などを刈り取りサ
イロに保存することにより嫌気性発酵して製造される。
Silage, which is a feed for livestock, is produced by anaerobic fermentation by cutting grass and storing it in a silo.

〔発明が解決しようとする課題〕[Problems to be Solved by the Invention]

しかし、牧草などのサイレージ原料を刈り取った直後
は、これらが空気にさらされているため好気性雰囲気と
なっており、所定の嫌気性発酵を起こすことができな
い。したがって、家畜の飼料に供するには、刈り取られ
た原料自体の呼吸が進み、積み上げられた原料間の酸素
が十分に消費されて嫌気性雰囲気に達しなければなら
ず、嫌気性発酵が進行するまで少なからぬ時間を要して
いた。このような場合、サイレージ原料が嫌気性雰囲気
に達するまでに好気性菌が増殖する場合があり、原料に
微生物による障害が生じることがある。
However, immediately after cutting silage materials such as grass and the like, they are exposed to the air and thus have an aerobic atmosphere, so that a predetermined anaerobic fermentation cannot occur. Therefore, in order to feed the livestock, it is necessary for the regenerated raw material itself to breathe, the oxygen between the stacked raw materials to be sufficiently consumed to reach the anaerobic atmosphere, and the anaerobic fermentation to proceed. It took a considerable amount of time. In such a case, aerobic bacteria may grow before the silage raw material reaches the anaerobic atmosphere, and the raw material may be damaged by microorganisms.

また、嫌気性雰囲気に達しても、家畜の好まない臭いを
発する酪酸菌などが乳酸菌に替わって先に増殖すること
があり、常に良好な嫌気性発酵を実現することができる
わけではなかった。
Further, even when an anaerobic atmosphere is reached, butyric acid bacteria, etc., which emit an unpleasant odor of livestock, may proliferate first instead of lactic acid bacteria, so that good anaerobic fermentation cannot always be realized.

そこで、本発明は、上記従来の技術の有する問題点を解
消し、牧草などのサイレージ原料に対して刈り取り直後
から、栄養価が高く家畜の好む乳酸発酵を確実に促進さ
せる新規な乳酸菌を提供することを目的とする。
Therefore, the present invention solves the problems of the above-mentioned conventional techniques, and provides a novel lactic acid bacterium that surely promotes lactic acid fermentation, which has high nutritional value and is preferred by livestock immediately after cutting the silage raw material such as grass. The purpose is to

〔課題を解決するための手段〕[Means for Solving the Problems]

上記目的を達成するため、本発明にかかる新規な乳酸菌
の特徴構成は、ラクトバチルス属に属するものであっ
て、好気性及び嫌気性のいずれの雰囲気でもサイレージ
調製能力を有するラクトバチルスKB−292菌株(微工研
菌寄第10475号)である点にある。
To achieve the above-mentioned object, the characteristic constitution of the novel lactic acid bacterium according to the present invention belongs to the genus Lactobacillus, and has the ability to prepare silage in both aerobic and anaerobic atmospheres Lactobacillus KB-292 strain. (Ministry of Microbiological Research, No. 10475).

〔作用・効果〕[Action / effect]

本発明者らは、サイレージ原料の保存初期から乳酸発酵
を活発に促進する乳酸菌を発掘すべく多大の努力を重ね
た結果、従来の乳酸菌に比べて好気性雰囲気において
も、また嫌気性雰囲気のいずれにおいても、とくに保存
初期において十分なサイレージ調製能力を有する菌を見
出すことに成功した。
The present inventors have made great efforts to discover lactic acid bacteria that actively promote lactic acid fermentation from the initial stage of storage of silage raw material, and as a result, compared with conventional lactic acid bacteria, even in an aerobic atmosphere or in an anaerobic atmosphere. Also in the above, we succeeded in finding a bacterium having a sufficient silage preparation ability especially in the initial stage of storage.

本発明にかかる乳酸菌、ラクトバチルスKB−292菌株
は、下記の性質を有する。
The lactic acid bacterium and Lactobacillus KB-292 strain according to the present invention have the following properties.

培 地 LCM培地 pH:6.8,37℃,24時間の培養 で良好な生育を示す。Culture medium LCM medium pH: 6.8, which shows good growth when cultured at 37 ℃ for 24 hours.

形 態 短桿菌 胞 子 なし グラム染色 陽性 生理学的性質 乳酸発酵 ホモ型 カタラーゼ なし 生育適温 30〜35℃ 生育温度 15〜40℃ 糖の資化性 (これについてはラクトバチルス・プランタルム標準菌
と比較した結果を示す) ラクトバチルス・ 本菌株 プランタルム 標準菌 グルコース + + ガラクトース + + ソルボース − − サッカロース + + マルトース + + セロビオース + + トレハロース + − ラクトース + + メリビオース + + ラフィノース + − メレチトース + + イヌリン − − スターチ + + キシロース − − L−アラビノース + − リボース + + ラムノース − − エタノール − − グリセロール − − エリスリトール − − ガラクチトール − − マンニトール + + α−Me−グルコシド− − サリシン + + クエン酸 − − イノシトール − − マンノース + + なお、上記糖の資化性については、下記組成の基本培地
にBTBを加え、121℃、20分間滅菌して、冷却後に各糖類
を2%となるように加え、その後、乳酸菌の懸濁液を一
滴づつ接種し30℃下で培養して調べた。そして、培養7
日後に増殖の結果、培地の色が緑色から黄色に変わった
ものについて資化性があると判断したものである。
Form Bacillus spores None Gram stain Positive Physiological properties Lactic acid fermentation Homo-type catalase None Growth temperature 30-35 ℃ Growth temperature 15-40 ℃ Sugar assimilation (comparison with Lactobacillus plantarum standard bacteria Lactobacillus, this strain Plantarum standard bacteria glucose ++ galactose ++ sorbose − − sucrose + + maltose + + cellobiose + + trehalose + − lactose + + + melibiose + + + meletitose +. Xylose-L-arabinose + -Ribose ++ Rhamnose --- Ethanol--Glycerol--Erythritol--Galactitol--Mannitol ++. Alpha.-Me-Glucoside--Salicin ++ Citrate-- Inositol --- Mannose ++ As for the assimilation of the above sugars, BTB was added to the basic medium having the following composition, sterilized at 121 ° C for 20 minutes, and each sugar was added to 2% after cooling. , Lactobacillus suspension was inoculated drop by drop and cultured at 30 ° C for examination. And culture 7
It was judged that there was assimilation in the medium in which the color of the medium changed from green to yellow as a result of proliferation after a day.

基本培地 ポリペプトン 0.5% 酵母エキス 0.5% リン酸二カリ 0.5% 以上の結果より、本発明の乳酸菌はラクトバチルス属に
属することが明かであり、ラクトバチルス・プランタル
ムの類菌種であると認められる。しかしながら、ラクト
バチルス・プランタルムとは、トレハロース、ラフィノ
ース、Lーアラビノースの各糖類において資化性を有す
ること、更には後述するように、培養初期において好気
性、嫌気性のいずれの雰囲気においても乳酸生成量が多
いこと及びこれに付随するpH値の低下が著しいことにお
いて顕著な相違点が存する。このような事実を勘案する
と、本菌株はラクトバチルス属に属する新規な乳酸菌と
することが妥当であると認め、ラクトバチルスKB−292
菌株と命名した。
Basic medium Polypeptone 0.5% Yeast extract 0.5% Dipotassium phosphate 0.5% From the above results, it is clear that the lactic acid bacterium of the present invention belongs to the genus Lactobacillus, and it is recognized that it is a species of Lactobacillus plantarum. However, Lactobacillus plantarum has assimilation ability in each saccharide of trehalose, raffinose, and L-arabinose, and as described later, the amount of lactic acid produced in both aerobic and anaerobic atmospheres in the early stage of culture. There is a notable difference in the large number and the conspicuous decrease in pH value. Considering these facts, it was confirmed that this strain is a novel lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus, and Lactobacillus KB-292
The strain was named.

なお、本菌株ラクトバチルスKB−292は、微工研菌寄第1
0475号として工業技術院微生物工業技術研究所において
寄託されている。
This strain, Lactobacillus KB-292, is
No. 0475 has been deposited at the Institute of Microbial Technology of the Agency of Industrial Science and Technology.

〔実施例〕〔Example〕

つぎに、本菌株の具体的乳酸生成能力を実験結果を基に
説明する。
Next, the specific lactic acid-producing ability of this strain will be described based on the experimental results.

第1図(a),(b),(c)は、ラクトバチルス・プ
ランタルム標準菌と本菌株とを夫々20,30,37℃の各培養
温度において96時間まで培養したときのpHの変化を示
す。
FIGS. 1 (a), (b), and (c) show changes in pH when the Lactobacillus plantarum standard strain and this strain were cultured for up to 96 hours at respective culture temperatures of 20, 30, and 37 ° C., respectively. Show.

このときの測定は、0.5%ポリペプトン、0.5%酵母エキ
ス、0.5%リン酸二カリからなる基本培地に、グルコー
スを2.0%添加し、しかる後菌株を接種して、経時的に
行った。
The measurement at this time was carried out over time by adding 2.0% of glucose to a basal medium consisting of 0.5% polypeptone, 0.5% yeast extract and 0.5% dipotassium phosphate, and then inoculating the strain.

同図から、とくに培養初期において、本菌株の方がより
pHの低下をもたらすことが理解される。この傾向は、培
養温度が高いほど一層顕著な結果となっている。
From this figure, this strain is more
It is understood that it results in a decrease in pH. This tendency is more remarkable as the culture temperature is higher.

ついで、乳酸生成量を上記pHの測定と同様な条件で測定
し、その結果を第2図(a),(b),(c)に示す。
このときの、乳酸生成量の測定は次式に基づいて滴定法
により行った。
Then, the amount of lactic acid produced was measured under the same conditions as the above-mentioned pH measurement, and the results are shown in FIGS. 2 (a), (b) and (c).
At this time, the amount of lactic acid produced was measured by the titration method based on the following formula.

乳酸量(%)=N/10NaOH滴定数×f×0.009 ×100/サンプル量 ここに、N/10NaOH滴定数は1/10規定のNaOH滴定数を意味
し、fは滴定する際の補正ファクターであり、0.009はN
aOH溶液1cc当りの乳酸相当量である。
Lactic acid amount (%) = N / 10 NaOH drop constant × f × 0.009 × 100 / sample amount Here, the N / 10 NaOH drop constant means the 1/10 normal NaOH drop constant, and f is a correction factor for titration. Yes, 0.009 is N
It is the equivalent amount of lactic acid per 1 cc of aOH solution.

同図の結果についても、第1図の結果とほぼ同様な傾向
が窺える。
As for the result of the figure, a tendency similar to that of the result of FIG. 1 can be seen.

さらに、雰囲気の影響をラクトバチルス・プランタルム
標準菌と本菌株について調べた。
Furthermore, the influence of the atmosphere was examined for the Lactobacillus plantarum standard strain and this strain.

第3図(a),(b)に好気性雰囲気および嫌気性雰囲
気についての培養時間の経過に伴うpH変化の測定結果を
示す。
FIGS. 3 (a) and 3 (b) show the measurement results of pH changes with the passage of culture time in an aerobic atmosphere and an anaerobic atmosphere.

培地は前記したものと同様のものを用い、30℃下で靜置
培養してこれを好気性雰囲気とし、他方、BBL社製嫌気
ジャー中で培養することによりこれを嫌気性雰囲気とし
た。
The same medium as described above was used, and this was placed in an aerobic atmosphere by statically culturing at 30 ° C., while it was placed in an anaerobic jar manufactured by BBL to make it an anaerobic atmosphere.

本菌株は、好気性、嫌気性のいずれの場合においても、
培養初期の24時間の急激なpHの低下が認められる。
This strain, in both aerobic and anaerobic cases,
A sharp drop in pH is observed during the first 24 hours of culture.

同様な条件について乳酸生成量を測定したが、その結果
を第4図(a),(b)に示す。
Lactic acid production was measured under similar conditions, and the results are shown in FIGS. 4 (a) and 4 (b).

この場合も、培養初期の24時間で急激な乳酸生成量がみ
られ、第3図(a),(b)に示したpHの低下傾向と対
応する結果が得られた。
Also in this case, a rapid amount of lactic acid was observed in the first 24 hours of the culture, and the results corresponding to the tendency of pH decrease shown in FIGS. 3 (a) and 3 (b) were obtained.

以上の結果から、本菌株の乳酸菌は、従来の乳酸菌に比
べて好気性雰囲気においても、また嫌気性雰囲気のいず
れにおいても、とくに培養初期において乳酸発酵を活発
に促進することが明かである。したがって、本菌株をサ
イレージ原料に接種することにより、原料雰囲気が好気
性である保存初期においても、速やかにpHを低下させ乳
酸菌を増殖させて、栄養価が高く家畜の好むサイレージ
を提供することができるのであり、本菌株は十分にサイ
レージ調製能力を有するものである。
From the above results, it is clear that the lactic acid bacterium of this strain actively promotes lactic acid fermentation in both the aerobic atmosphere and the anaerobic atmosphere, especially in the initial stage of culture, as compared with conventional lactic acid bacteria. Therefore, by inoculating the silage raw material with this strain, even at the initial stage of storage when the raw material atmosphere is aerobic, the pH is rapidly lowered to grow the lactic acid bacteria, and it is possible to provide a silage that is high in nutritional value and favored by livestock. Therefore, this strain has sufficient silage preparation ability.

本菌株は、幅広いサイレージ原料に対して適応性のある
ものであり、各種の牧草の他、稲わら、麦わらなどの農
産廃棄物にも利用可能である。
The strain is adaptable to a wide range of silage raw materials, and can be used for agricultural wastes such as rice straw and straw as well as various grasses.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

第1図はラクトバチルス・プランタルム標準菌と本菌株
との異なる培養温度におけるpHの経時変化を示す図、第
2図は同じく乳酸生成量の経時変化を示す図、第3図は
異なる雰囲気におけるpHの経時変化を示す図、第4図は
同じく乳酸生成量の経時変化を示す図である。
Figure 1 shows the time course of pH of Lactobacillus plantarum standard strain and this strain at different culture temperatures, Figure 2 shows the time course of the amount of lactic acid produced, and Figure 3 shows the pH in different atmospheres. FIG. 4 is a view showing a change over time in the amount of lactic acid produced, and FIG.

Claims (1)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】ラクトバチルス属に属する乳酸菌であっ
て、好気性及び嫌気性のいずれの雰囲気でもサイレージ
調製能力を有するラクトバチルスKB−292菌株(微工研
菌寄第10475号)であることを特徴とする新規な乳酸
菌。
1. A lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus, which is a Lactobacillus KB-292 strain (Microtechnology Research Institute No. 10475) having the ability to prepare silage in both aerobic and anaerobic atmospheres. Characteristic novel lactic acid bacteria.
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