JPH0585999A - ２−インダニルグリシン及びその関連化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 ペプチド化学上、フェニルアラニンの類縁体
として用いることのできる新規アミノ酸誘導体およびそ
のアミノ酸に由来する残基を含んでなるペプチド類を提
供する。 【構成】 次式 【化２１】 で表わされる２−（１′−インダニル）グリシンの各立
体異性体およびその混合物、ならびにそれらに由来する
残基を鎖中に含んでなるペプチド類を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は光学活性な２−インダニ
ルグリシン及び該化合物を構成アミノ酸として含有する
ペプチドに関する。 【０００２】 【従来の技術】従来から多くの異常アミノ酸が合成さ
れ、それらを天然に存在するペプチドに導入することに
よってより強い生理活性あるいは選択性を有するペプチ
ドへの探究が行なわれてきた。例えば、血圧降下や腸管
収縮活性等を示すタキキニン系ペプチドの一部はそのレ
セプターの存在が知られていると共に、ペプチド鎖の一
部アミノ酸を異常アミノ酸で置換した特定の拮抗剤開発
も試みられている（特開平２−４５４９７号公報参
照）。 【０００３】しかし、ペプチドを構成するアミノ酸のう
ちフェニルアラニン部分が活性発現に重要な役割を担う
と考えられる場合、上記目的を充分に達成できる異常ア
ミノ酸は存在せず、フェニルアラニンを置換しうる新た
なアミノ酸の開発が必要とされていた。 【０００４】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、各種
生理活性ペプチドを構成するフェニルアラニン残基（部
分）を置換して、対応するレセプターとの作用機作の解
明や新たな生理活性の発現に寄与しうる新規アミノ酸誘
導体およびそれらを構成アミノ酸として含んでなるペプ
チドの提供にある。 【０００５】 【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成すべく各種アミノ酸誘導体について研究してきた
ところ、従来技術文献未載の２−インダニルグリシン
が、フェニルアラニンに対応する異常アミノ酸としてフ
ェニルアラニン含有ペプチド、特にタキキニン系ペプチ
ドのレセプターに対する結合性の解明やそれらの競合的
結合阻害活性物質の提供に利用できることを見い出し
た。 【０００６】従って、上記目的は、次式〔Ｉ〕 【０００７】 【化３】 【０００８】で表わされる２−インダニルグリシン〔ま
たは２−（１′−インダニル）グリシン〕及びそれに由
来するアミノ酸残基を含んでなるペプチドの提供によっ
て達成できる。２−（１′−インダニル）グリシンは２
及び１′位にキラルな部分を有するので４種の立体異性
体が存在しうるが、本発明ではこれらの各異性体、すな
わち、（２Ｓ，１′Ｓ）体、（２Ｒ，１′Ｓ）体、（２
Ｓ，１′Ｒ）体および（２Ｒ、１′Ｒ）体ならびにそれ
らの２種以上からなる混合物が提供される。さらに本発
明では、これらの立体異性体のいずれかに由来するアミ
ノ酸残基を含有するペプチドも提供される。 【０００９】かかる立体異性体は、ペプチド中のフェニ
ルアラニンのフェニル部分が特定の空間配置をとりうる
のでフェニルアラニン含有ペプチドの特定レセプーへの
結合様式の探究に有用であり、また特異的な生理活性を
示す新規ペプチドの提供にも利用できる。こうして提供
される本発明のペプチドは、２−（１′−インダニル）
グリシンをその構成アミノ酸残基の少なくとも１つに含
むものを全て包含するが、特にフェニルアラニン残基を
含んでなるペプチドにおいて、その残基の少なくとも１
個が２−（１′−インダニル）グリシン由来のアミノ酸
残基で置換されたものを好ましいものとして挙げること
ができる。このようなペプチドのより具体的なものとし
ては、次式〔II〕で表わされるものを挙げることができ
る。 【００１０】 【化４】 【００１１】上式中、Ｘは水素原子、Ｃ₁ 〜Ｃ₆ のアル
キル基またはＣ₂ 〜Ｃ₁₀のアシル基であり、Ａ₁ はアミ
ノ酸１〜３個からなるアミノ酸残基またはオリゴペプチ
ド残基であり、Ａ₂ はＡｓｐ，ＧｌｕまたはＧｌｎ由来
のアミノ酸残基であり、Ａ₃ はアミノ酸１個に由来する
アミノ酸残基であり、Ｙは式〔Ｉ〕のアミノ酸由来のア
ミノ酸残基であり、Ａ₄ はＰｈｅ，ＩｌｅまたはＶａｌ
由来のアミノ酸残基であり、そしてＺはＮＨ₂ またはＯ
ＣＨ₃ である。 【００１２】なお、本明細書に記載されるペプチド類の
構造は、ペプチド化学の技術分野でペプチドを特定する
のに通常用いる様式および略号を用いて表示されてい
る。従って、アミノ末端がペプチド鎖の左側にあり、そ
して３文字表示のアミノ酸はそれぞれ天然由来のアミノ
酸を通常特定するのに用いるのと同じ意味を有する。上
記式〔II〕で表わされるペプチドのうち、Ｘが水素原子
であり、Ａ₁ がＨｉｓ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ、Ｌｙｓ−Ｔｈ
ｒまたはＴｈｒであり、またＡ₂ がＡｓｐでそれぞれ示
される残基を含んでなるペプチドが好ましい。さらに、
Ａ₃ がＧｌｙ，Ｇｌｎ，ＡｓｎまたはＳｅｒであり、特
にＡｌａまたはＳｅｒに由来する残基からなるものが好
ましい。 【００１３】式〔II〕のペプチド類は、任意の無毒性有
機または無機酸と薬学的に許容される塩類を形成でき
る。適当な塩類を形成する無機酸の例としては、塩酸、
臭化水素酸、硫酸およびリン酸ならびにオルトリン酸一
水素ナトリウムや硫酸水素カリウムのような酸金属塩類
が挙げられる。適当な塩類を形成する有機酸の例として
は、モノ−、ジ−、およびトリカルボン酸が挙げられ
る。このような有機酸類の具体例は、酢酸、グリコール
酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、こはく酸、グルター
ル酸、フマール酸、りんご酸、酒石酸、くえん酸、アス
コルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息
香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、サ
リチル酸、２−フェノキシ安息香酸、およびメタンスル
ホン酸や２−ヒドロキシエタンスルホン酸のようなスル
ホン酸類である。カルボキシ末端アミノ酸部分の塩類と
しては、適当な無機または有機塩基類で形成される無毒
性のカルボン酸塩類が挙げられる。これらの塩類の具体
的なものとしては、アルカリ金属、例えばナトリウムお
よびカリウム；アルカリ土類金属、例えばカルシウムお
よびマグネシウム；アルミニウムを初めとする第III Ａ
族の軽金属；ならびに有機第一級、第二級および第三級
アミン類、例えばトリエチルアミンを初めとするトリア
ルキルアミン類、プロカイン、ジベンジルアミン、１−
エテナミン、Ｎ，Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン、
ジヒドロアビエチルアミン、Ｎ−（低級）アルキルピペ
リジン、およびその他の任意適当なアミンが挙げられ
る。 【００１４】本発明で提供される式〔Ｉ〕で表わされる
２−（１′−インダニル）グリシンは、例えば、次の反
応工程に従って製造することができる。 【００１５】 【化５】 【００１６】（上記各式中、Ｒ¹ は置換されていてもよ
いフェニル基を表わし、Ｘはハロゲン原子を表わす。）
まずインダニル酢酸〔III 〕に対してキラルなウレタン
化合物、例えばエバンスらによって開発された化合物
を、例えば塩化ピバロイル等の存在下、あるいはインダ
ニル酢酸〔III 〕を酸塩化物に変換した後、縮合剤と結
合させることにより、一般式〔IV〕の化合物を得る。 【００１７】次に、得られた化合物に対して、第３級ア
ミンの存在下ジアルキルボリルトリフラートを作用さ
せ、ボロンエノラートに変換した後、Ｎ−ブロモサクシ
ンイミド（ＮＢＳ）あるいはＮ−クロロサクシンイミド
（ＮＣＳ）などを用いてハロゲン化した式〔Ｖ〕の化合
物を得る。これを、さらにテトラメチルグアニジウムア
ジド、あるいはアジ化ナトリウムなどを用いるアジド化
により式〔VI〕の化合物を得る。 【００１８】式〔VI〕の化合物は、下記の各式で表わさ
れる立体異性体の混合物として得られるので、これらを
常法の光学分割法、例えばシリカゲルクロマトグラフィ
ーあるいは高速液体クロマトグラフィーにより、それぞ
れの異性体を単離する。 【００１９】 【化６】 【００２０】次に、これらの化合物を、それぞれ水酸化
リチウムあるいは水酸化ナトリウムなどの塩基で処理し
て対応するアジドカルボン酸〔VII 〕を得る。 【００２１】 【化７】 【００２２】さらに、式〔VII 〕の化合物をパラジウム
−カーボン／水素（Ｐｄ−Ｃ／Ｈ₂)あるいは酸化白金／
水素（ＰｔＯ₂ ／Ｈ₂)を用いて還元し目的とする２−
（１′−インダニル）グリシン〔Ｉ〕とすることができ
る。また、式〔VII 〕の（２Ｒ，１′Ｒ）体は、別法に
よっても製造できる。すなわち、α−フェネチルアミン
またはα−ナフチルアミン等により化合物〔III 〕を分
割し、次式で表わされる〔III 〕の（２Ｒ）体を得る。 【００２３】 【化８】 【００２４】この化合物は、例えば、Tanizawa,KらのBi
ochimica Biophsica Acta,第９１６巻、２０５頁、１９
８７年、に記載の方法に従って製造することができる。
これを上記反応工程と同様に光学活性な環状ウレタン化
合物で処理して式〔Ｉ〕で表わされる目的の化合物を得
ることができる。式〔Ｉ〕の化合物は、常法によりＮ−
ｔ−ブトキシカルボニル化を行うことにより対応するＮ
−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ酸に転化し、それ自体
公知の固相ペプチド合成法、好ましくは自動化ペプチド
合成機を用いることにより２−（１′−インダニル）グ
リシン由来の残基をペプチド鎖中に含んでなる各種ペプ
チドを製造することができる。 【００２５】例えば、α−アミノ保護されたアミノ酸の
樹脂支持体へのカップリング後、塩化メチレン中のトリ
フルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸のみ、またはジオキサ
ン中の塩酸を用いるなど、任意の適当な手順を用いて保
護基を除去する。脱保護は、０℃と室温の間の温度で実
施される。限定的なα−アミノ保護基を除去するための
その他の標準的な開裂試薬および条件も使用できる。α
−アミノ保護基の除去後、その他のアミノ保護アミノ酸
類が所望の順序で段階的にカップリングされる。その代
わりに、樹脂支持されたアミノ酸配列とのカップリング
に先立って、複数のアミノ酸基を溶液法によってカップ
リングできる。 【００２６】ペプチド配列に導入される各アミノ酸に使
用されるα−アミノ保護基は、当該技術分野で知られた
任意のこのような保護基でありうる。考えられるα−ア
ミノ保護基類としては、（１）アシル型保護基、例えば
ホルミル、トリフルオロアセチル、フタリル、トルエン
スルホニル（トシル）、ベンジンスルホニル、ニトロ−
フェニルスルフェニル、トリチルスルフェニル、ｏ−ニ
トロフェノキシアセチル、およびα−クロロブチリル；
（２）芳香族ウレタン型保護基、例えばベンジロキシカ
ルボニルおよび置換ベンジロキシカルボニル、例えばｐ
−クロロベンジロキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジロ
キシカルボニル、ｐ−ブロモベンジロキシカルボニル、
ｐ−メトキシベンジロキシカルボニル、１−（ｐ−ビフ
ェニリル）−１−メチルエトキシカルボニル、α，α−
ジメチル−３，５−ジメトキシベンジロキシカルボニル
およびベンズヒドロキシカルボニル；（３）脂肪族ウレ
タン保護基、例えば第三級ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂ
ｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロ
ピロキシカルボニル、エトキシカルボニルおよびアリロ
キシカルボニル；（４）シクロアルキルウレタン型保護
基、例えばシクロペンチロキシカルボニル、アダマンチ
ロキシカルボニル、およびシクロヘキシロキシカルボニ
ル；（５）フェニルチオカルボニルのようなチオウレタ
ン型保護基；（６）トリフェニルメチル（トリチル）と
ベンジルのようなアルキル型保護基；および（７）トリ
メチルシランのようなトリアルキルシラン基がある。好
ましいα−アミノ保護基は第三ブチロキシカルボニルで
ある。 【００２７】適当なカップリング試薬の選択は当該技術
分野の技術水準の範囲内にある。添加アミノ酸がＧｌ
ｎ，ＡｓｎまたはＡｒｇの場合の特に適したカップリン
グ試薬は、Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピルカルボジイミドと
１−ヒドロキシベンゾトリアゾールである。これらの試
薬の使用はニトリルおよびラクタムの形成を予防する。
その他のカップリング剤は（１）カルボジイミド（例え
ば、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミドとＮ−
エチル−Ｎ′−（γ−ジメチルアミノプロピルカルボジ
イミド）；（２）シアナミド類（例えば、Ｎ，Ｎ′−ジ
ベンジルシアナミド）；（３）ケテンイミン類；（４）
イソキサゾリウム塩（例えば、Ｎ−エチル−５−フェニ
ルイソキサゾリウム−３′−スルホネート）；（５）環
中に１〜４個の窒素を含有する芳香族性で単環の窒素含
有複素環式アミド類、例えばイミダゾリド類、ピラゾリ
ド類および１，２，４−トリアゾリド類（有用な具体的
な複素環式アミド類としては、Ｎ，Ｎ′−カルボニルジ
イミダゾールとＮ，Ｎ′−カルボニル−ジ−１，２，４
−トリアゾールが挙げられる）；（６）アルコキシル化
アセチレン（例えば、エトキシアセチレン）；（７）ア
ミノ酸のカルボキシル部分と混合酸無水物を形成する試
薬（例えば、エチルクロロフォルメートとイソブチルク
ロロフォルメート）またはカップリングしようとするア
ミノ酸の対称無水物（例えば、Boc-Ala-O-Ala-Boc)；お
よび（８）一つの環上に１個のヒドロキシ基をもった窒
素含有複素環式化合物類（例えば、Ｎ−ヒドロキシフタ
ルイミド、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミドおよび１−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール）である。その他の活性化
試薬と、ペプチドのカップリングにおけるそれらの使用
は、ケイパー（Kapoor), J.Pharm.Sci. 第５９巻１〜２
７頁（１９７０年）に記述されている。本発明者らは、
Ａｒｇ，ＡｓｎおよびＧｌｎを除き、すべてのアミノ酸
に対するカップリング試薬として、対称的酸無水物の使
用を好ましいと考える。 【００２８】各々の保護アミノ酸またはアミノ酸配列
が、４倍過剰量で固相反応器に導入され、ジメチルホル
ムアミド：塩化メチレン（１：１）またはジメチルホル
ムアミドのみ、または好ましくは塩化メチレンのみの媒
体中でカップリングが行なわれる。不完全なカップリッ
グが起こる場合は、α−アミノ保護基の除去前に、固相
反応器中で次のアミノ酸のカップリングに先立って、カ
ップリング手順を繰り返す。各合成段階でのカップリン
グ反応の成功は、イー・カイザー(E.Kaiser)ら、Analy
t.Biochem. 第３４巻５９５頁（１９７０年）に記述さ
れたとおりに、ニンヒドリン反応によって追跡される。 【００２９】所望のアミノ酸配列が得られた後、ペプチ
ドは樹脂から除去される。これは樹脂結合ペプチドを無
水フッ化水素酸中の硫化ジメチル、ｐ−クレゾール、お
よびチオクレゾールの溶液で処理するなどの加水分解に
よって行なうことができる。固相ペプチド合成の技術に
知られているように、アミノ酸類の多くは連鎖生成中に
保護を必要とするような官能基をもっている。適当な保
護基の選定と使用は当業者の能力の範囲内にあり、保護
しようとするアミノ酸と、ペプチド上の他の保護アミノ
酸残基の存在に依存しよう。このような側鎖保護基の選
択は、α−アミノ部分の保護基の開裂中にそれが除去さ
れてはならないという点で決定的重要性をもっている。
例えば、リジンに適した側鎖保護基はベンジロキシカル
ボニルおよび置換ベンジロキシカルボニル〔この置換基
はハロゲン（例えば、クロロ、ブロモ、フルオロ）およ
びニトロ（例えば、２−クロロベンジロキシカルボニ
ル、ｐ−ニトロベンジロキシカルボニル、３，４−ジク
ロロベンジロキシカルボニル）から選ばれる〕、トシ
ル、ｔ−アミロキシカルボニル、ｔ−ブチロキシカルボ
ニル、およびジイソプロピルメトキシカルボニルであ
る。 【００３０】 【実施例】以下の実施例により本発明をさらに具体的に
説明する。実施例１ ２−インダニル酢酸クロリド〔２〕 【００３１】 【化９】 【００３２】２−インダニル酢酸〔１〕（４４５mg，
２．５３mmol）に塩化チオニル（１ml，１１．５mmol）
を加え窒素雰囲気下３時間リフラックスした。塩化チオ
ニルをエバポレーターを用いて留去した後、減圧蒸留し
（ｂ．ｐ．３mmHg，２５０℃）、化合物〔２〕（４３５
mg，２．２４mmol）を得た（収率８９％）。NMR.δ, CDCl₃ ；7.27-7.18(4H,m), 3.73-3.62(1H,m),
3.36(q,J=5.3,17.2), 3.09-2.86(3H,m), 2.51-2.38(1H,
m), 1.83-1.70(1H,m)IR.Film （cm^-1) NaCl 2946,1787, 1478, 1458, 953,
748, 711Ｎ−１′−インダニルアセチル−（４Ｒ）−４−フェニ
ルメチル−２−オキサゾリドン〔３〕 【００３３】 【化１０】 【００３４】（４Ｒ）−（フェニルメチル）−２−オキ
サゾリドン（３４６mg，２．０５７mmol）とトリフェニ
ールメタン（１mg）のＴＨＦ溶液（４ml）に窒素雰囲気
下−７８℃でｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍ ｎ−ヘキ
サン溶液、１．２８６ml、２．０５７mmol）を溶液がオ
レンジ色になるまで加えた。さらにこの溶液に−７８℃
で化合物〔２〕（４００mg，２．０６mmol）を加えた
後、０℃に上げ４mlの飽和ＮａＨＣＯ₃ 水を加え室温で
３０分攪拌した。この反応混合液を塩化メチレンで抽
出、硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去後シリカ
ゲル（８ｇ）カラムに付し酢酸エチル−ヘキサン（５：
９５→１０：９５）で流出し、化合物〔３〕（６５７m
g，１．９６mmol）を得た（収率９５％）。NMR.δ, CDCl₃ ；7.38-7.15(9H,m), 4.25-4.15(1H,m),
3.75-3.67(1H,m), 3.51-3.31(2H,m), 3.18-2.79(4H,m),
2.51-2.38(1H,m), 1.88-1.75(1H,m)IR, KBrdisk （cm^-1) KBr 3028, 2944, 1782, 1764,
1687, 1478, 1456, 1386, 1363, 1197, 752, 743, 700 m.p. 91 〜95°Ｎ−〔２′−アジド−２′−（１″−インダニル）アセ
チル〕−４−フェニルメチル−２−オキサゾリドン
〔４〕 【００３５】 【化１１】 【００３６】化合物〔３〕（６３０mg，１．８８mmol）
の塩化メチレン溶液（２．５ml）に窒素雰囲気下、−７
８℃でジイソプロピルエチルアミン（３９３μｌ，２．
２６mmol）さらにジブチルボリールトリフレート（１．
０Ｍ塩化メチレン溶液、１．９７４ml、１．９７mmol）
を加え、−７８℃で１５分間、０℃で１時間攪拌した。
−７８℃に冷却したこの反応液を−７８℃にてＮ−ブロ
モスクシンイミド（３６８mg，２．０７mmol）の塩化メ
チレン溶液（２ml）に加え、−７８℃で１時間１５分攪
拌後、０．５Ｎリジウム−チオスルフェイト水を加え、
酢酸エチルで抽出した。この有機層を硫酸マグネシウム
で乾燥、溶媒を減圧蒸留し、粗生成物（１．２６６ｇ）
を得た。 【００３７】ひき続き粗生成物（１．２５２ｇ）を塩化
メチレン（５ml）に溶解させ窒素雰囲気下０℃でテトラ
メチルグアニジウムアジド（８９１mg，５．６４mmol）
を加え、室温で一夜攪拌した。この反応混合液に飽和Ｎ
ａＨＣＯ₃ 水を入れ塩化メチレンで抽出、硫酸マグネシ
ウムで乾燥した。濃縮して得られた粗生成物をシリカゲ
ル（５０ｇ）カラムに付し酢酸エチル−ヘキサン（５：
９５）で溶出し、溶出順に化合物〔４Ａ〕，〔４Ｂ〕，
及び〔４Ｃ〕を得た。 ４Ａ：NMR.δ, CDCl₃ 7.43-7.15(9H,m), 5.18(1H,d,J=
8.6Hz), 4.83-4.74(1H,m), 4.30-4.18(2H,m), 3.42(1M,
d,J=3.3Hz,13.2Hz), 3.15-3.04(1H,m), 2.96-2.85(1H,
m), 2.68(1H,d,J=13.2Hz,10.6Hz), 2.42-2.28(1H,m),
2.04-1.92(1H,m)IR.Film, （cm^-1) 3028, 2945, 2853, 2108, 1790, 177
0, 1704, 1698,1694, 1479, 1455, 1392, 1211, 1113,
1051, 1030, 994, 910, 756, 736,702 ４Ｂ：NMR.δ, CDCl₃ 7.37-7.15(9H,m), 5.49(1H,d,J=
5.3Hz), 4.83-4.75(1H,m), 4.31-4.13(2H,m), 3.88-3.8
1(1H,m), 3.39(1H,d,J=3.3Hz,13.2Hz), 3.21-3.09(1H,
m), 3.00-2.87(1H,m), 2.74(1H,d,J=9.6Hz,13.6Hz), 2.
33-2.12(2H,m)IR.Film, （cm^-1) 3028, 2946, 2851, 2108, 1778, 170
4, 1698, 1480, 1455, 1386, 1212, 1113, 1076, 1053,
998, 910, 758, 733, 702 ４Ｃ：NMR.δ, CDCl₃ 7.41-7.15(9H,m), 5.21(1H,d,J=
8.6Hz), 4.73-4.65(1H,m), 4.26-4.15(2H,m), 3.81-3.7
3(1H,m), 3.35(1H,d,J=3.3Hz,13.9Hz), 3.10-2.98(1H,
m), 2.94-2.83(2H,m), 2.40-2.26(1H,m), 1.97-1.86(1
H,m)IR.Film, （cm^-1) 3027, 2928, 2107, 1781, 1704, 147
8, 1455, 1386,1210, 1110, 1074, 1051, 992, 753, 20
2（２Ｓ，１′Ｓ）−２−アジド−２−（１′−インダニ
ル）酢酸〔５〕 【００３８】 【化１２】 【００３９】化合物〔４Ａ〕（９６５mg，２．５７mmo
l）のＴＨＦ−Ｈ₂ Ｏ（３：１，２５ml）溶液に０℃で
水酸化リチウム−水和物（２１５mg，５．１３mmol）を
加え、窒素雰囲気中、室温で３０分攪拌した。この溶液
に飽和ＮａＨＣＯ₃ 水（２０ml）を入れ、酢酸エチルお
よび塩化メチレンで洗浄後水層に６ＮＨＣｌ水を加えpH
２とした後、塩化メチレンで抽出した。これを硫酸マグ
ネシウムで乾燥、溶媒を減圧蒸留し、化合物〔５〕（４
６４mg，２．１４mmol）を得た（収率８３％）。 NMR.δ, CDCl₃ 7.36-7.17(4H,m), 4.04(1H,d,J=6.6H
z), 3.80-3.72(1H,m), 3.13-2.84(2H,m), 2.44-2.38(1
H,m), 2.11-2.01(1H,m)IR.Film, （cm^-1) 3024, 2944, 2110, 1715, 1479, 145
9, 1418, 1231,902, 755 （２Ｓ，１′Ｓ）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２−
（１′−インダニル）グリシン〔６〕 【００４０】 【化１３】 【００４１】化合物〔５〕（４４８mg，２．０６mmol）
をメタノール：ＴＨＦ：トリフルオロ酢酸（１０：８：
１，５４ml）に溶解させ１０％パラジウム−カーボン
（Ｐｄ−Ｃ）（１００mg）を加え、水素雰囲気下室温で
１時間３０分攪拌した。この溶液をハイフロスーパーセ
ルを通してパラジウム−カーボンを除いた後溶媒を減圧
留去し、粗生成物を得た。 【００４２】この粗生成物のメタノール（５ml）溶液に
トリエチルアミン（８６１μｌ，６１８mmol）、ジ−ｔ
ｅｒｔ−ブチルジカーボネート（９４６μｌ，４．１２
mmol）を加え、室温で１時間３０分攪拌した。この溶液
に５％ＮａＨＣＯ₃ 水を加え、メタノールを減圧蒸留し
た後、ヘキサンで洗浄、水層を６Ｎ塩酸を用いてpH２と
し塩化メチレンで抽出した。この有機層を硫酸マグネシ
ウムで乾燥、濃縮後、シリカゲル（８０ｇ）に付しクロ
ロホルム−酢酸−アセトン（６０：０．５：０．５）で
流出し、目的化合物〔６〕（５１６mg，１．７７mmol）
を得た（収率８６％）。NMR.δ, CDCl₃ 7.26-7.16(4H,m), 4.75-4.63(1H,br),
3.90-3.85(1H,br), 3.05-2.80(2H,m), 2.42-2.30(1H,
m), 2.13-2.00(1H,m), 1.42(9H,s)IR.Film, （cm^-1) 2977, 1716, 1508, 1394, 1368, 124
8, 1161, 1059,858, 755 Ｍ／Ｓ（ＦＡＢ）：〔Ｍ＋１〕⁺ ２９２ 旋光度：〔α〕²⁵ _D ＋３７．６°（ｃ＝０．７１，Ｅ＋
ＯＨ） なお、化合物〔６〕をトリフルオロ酢酸に溶解させ、室
温で１時間攪拌することにより（２Ｓ，１′Ｓ）−２−
（１′−インダニル）グリシン・トリフルオロ酢酸塩
（Ｍ／Ｓ（ＦＡＢ）：〔Ｍ＋１〕⁺ ３０６）を得た。実施例２ （１Ｓ，１′Ｒ）−１−アジド−１′−インダニル酢酸
メチルエステル〔７〕 【００４３】 【化１４】 【００４４】化合物〔４Ｂ〕（１．５４０ｇ，４．０９
mmol）のＴＨＦ：Ｈ₂ Ｏ（３：１，４０ml）溶液に０°
で水酸化リチウム・一水和物（６９２mg，１６．５mmo
l）を加え、窒素雰囲気下０℃で１時間攪拌した。この
反応溶液に飽和ＮａＨＣＯ₃ 水を加え、ＴＨＦを減圧留
去後、酢酸エチルで洗浄、水層を６Ｎ ＨＣｌでpH２と
し酢酸エチルおよび塩化メチレンで抽出した。この有機
層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去した。 【００４５】ひき続き、この中間体をメタノール−ベン
ゼン（３６ml，１：３．５）に溶解させトリメチルシリ
ルジアゾメタン（１０％ヘキサン溶液）を溶液の色が黄
色くなるまで加えた。この溶液を室温で３０分間攪拌し
た後、溶媒を減圧蒸留した。この粗生成物をシリカゲル
（２００ｇ）カラムに付し、酢酸エチル−ヘキサン
（３：９７→５：９５）で溶出し、目的化合物〔７〕
（７９０mg）を得た（収率８４％）。NMR.δ, CDCl₃ 7.27-7.14(1H,m), 4.27(1H,d,J=5.3H
z), 3.82(3H,s), 3.78-3.72(1H, m), 3.09-2.80(2H,m),
2.26-2.03(2H,m)IR.Film, （cm^-1) 3021, 2952, 2849, 2107, 1738, 147
9, 1456, 1436,1265, 1203, 1005, 755（２Ｓ，１′Ｒ）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２−
（１′−インダニル）グリシンメチルエステル〔８〕 【００４６】 【化１５】 【００４７】化合物〔７〕（３５mg，０．１５２mmol）
をメタノール−ＴＨＦ−トリフルオロ酢酸（１０：８：
１，４ml）溶解させ、室温で１０％Ｐｄ−Ｃ（７．５m
g）を加え水素雰囲気下で３時間攪拌した。この反応混
合液をハイフロスーパーセルを通してＰｄ−Ｃを除いた
後、メタノールでハイフロスーパーセルを洗浄し、溶媒
を減圧留去、一夜ポンプを用いて乾固させた。 【００４８】さらにその化合物にメタノール（１ml）中
室温でトリエチルアミン（６４μｌ，０．４５６mmo
l）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを加えた。
１時間攪拌の後、飽和塩化アンモニア水を加え、メタノ
ールを蒸留したのち、塩化メチレンで抽出、硫酸マグネ
シウムで乾燥、溶媒を減圧留去した。この粗生成物をシ
リカゲル（５ｇ）カラムに付し酢酸エチル−ヘキサン
（５：９５−１０：９０）で溶出し、目的化合物（２５
mg）を得た（収率５４％）。NMR.δ, CDCl₃ 7.26-7.15(4H,m), 4.98-4.92(1H,br),
4.78-4.72(1H,br), 3.72(3H,s), 3.72-3.66(1H,m), 3.
02-2.80(2H,m), 2.20-2.07(1H,m), 1.94-1.85(1H,m),
1.37(9H,s)IR.Film, （cm^-1) NaCl 2975, 1742, 1713, 1503, 136
6, 1248, 1161,1060, 754（２Ｓ，１′Ｒ）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２−
（１′−インダニル）グリシン〔９〕 【００４９】 【化１６】 【００５０】化合物〔８〕（２５mg，０．０８１７mmo
l）のＴＨＦ溶液（０．５ml）に０℃で１Ｎ ＮａＯＨ
水溶液（８６μｌ，０．０８５８mmol）を加え、０℃で
２時間、室温で一夜攪拌、さらに１Ｎ ＮａＯＨ水溶液
（４０μｌ，０．０４０mmol）を加え室温で３０分間攪
拌した。この溶液に飽和ＮａＨＣＯ₃ 水溶液を加え、エ
ーテルで洗浄、水層を６Ｎ ＨＣｌ水溶液でpH２とし、
塩化メチレンで抽出、硫酸マグネシウムで乾燥した。こ
の溶媒を減圧留去し、目的化合物〔９〕（２０mg）を得
た（収率８４％）。NMR.δ, CDCl₃ 7.27-7.16(4H,m), 4.93-4.81(1H,br),
3.82-3.73(1H,br), 3.05-2.82(2H,m), 2.26-2.12(1H,
m), 1.95-1.85(1H,m), 1.36(9H,s)IR.KBrdisk （cm^-1) KBr 3322, 2978, 1724, 1654, 148
1, 1456, 1410, 1370, 1255, 1162, 1054, 759 ｍ．ｐ．：１０７〜１０８° ＭＳ：〔Ｍ＋Ｈ〕⁺ （ＦＡＢ）２９１ 旋光度：〔α〕²⁵ _D ＋１３．８（ｃ＝１．１７，Ｅ＋Ｏ
Ｈ） なお、化合物〔９〕を実施例１と同様の方法で処理し、
（２Ｓ，１′Ｒ）−２−（１′−インダニル）グリシン
・トリフルオロ酢酸塩（Ｍ／Ｓ（ＦＡＢ）：〔Ｍ＋１〕
⁺ ３０６）を得た。実施例３ （１′Ｒ）−Ｎ−（１′−インダニル）アセチル−（４
Ｓ）−４−フェニルメチル−２−オキサゾリドン〔１
１〕 （Ｒ）−２−インダニル酢酸クロリド〔１０〕および
（４Ｓ）−４−フェニルメチル−２−オキサゾリドンを
用いて実施例１の化合物〔３〕の製造方法と同様の操作
により得た。 【００５１】 【化１７】 【００５２】NMR.δ, CDCl₃ 7.38-7.15(9H,m), 4.77-
4.68(1H,m), 4.25-4.13(2H,m), 3.77-3.67(1H,m), 3.51
-3.33(2H,m), 3.10-2.75(4H,m), 2.50-2.36(1H,m), 1.8
6-1.72(1H,m)（４Ｓ，２′Ｒ，１″Ｓ）−Ｎ−（２′−アジド−２′
−（１″−インダニル）アセチル）−４−フェニルメチ
ル−２−オキサゾリドン〔１２〕 化合物〔１１〕を同じ、実施例１の化合物〔４〕の製造
方法と同様の操作にて得た。 【００５３】 【化１８】 【００５４】NMR.δ, CDCl₃ 7.38-7.15(9H,m), 5.49
(d,J=4.6Hz), 4.83-4.76(1H,m), 4.31-4.14(2H,m), 3.8
8-3.81(1H,m), 3.39(1H,q,J=3.30Hz,13.2Hz), 3.21-3.0
9(1H,m), 2.97-2.86(1H,m), 2.74(1H,q,J=9.9Hz,13.2H
z), 2.34-2.12(2H,m)IR.Film, （cm^-1) 3027, 2944, 2108, 1778, 1704, 147
9, 1455, 1389,1240, 1212, 1113, 1049, 757, 702（２Ｒ，１′Ｓ）−２−アジド−２−（１′−インダニ
ル）酢酸〔１３〕 【００５５】 【化１９】 【００５６】化合物〔１２〕を用い、実施例１の化合物
〔５〕の製造方法と同様の操作にて得た。NMR.δ, CDCl₃ 7.28-7.18(4H,m), 4.45(1H,d,J=4.62H
z), 5.88-3.79(1H,m), 3.10-2.84(2H,m), 2.27-2.07(2
H,m)IR.Film, （cm^-1) NaCl 3022, 2943, 2111, 1736, 172
0, 1712, 1264, 754（２Ｒ，１′Ｓ）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２−
（１′−インダニル）グリシン〔１４〕 【００５７】 【化２０】 【００５８】化合物〔１３〕を用い実施例１の化合物
〔６〕の製造方法と同様の操作にて得た。なお、化合物
〔１４〕を実施例１と同様の方法で処理し、（２Ｒ，
１′Ｓ）−２−（１′−インダニル）グリシン・トリフ
ルオロ酢酸塩（Ｍ／Ｓ（ＦＡＢ）：〔Ｍ＋１〕⁺ ３０
６）を得た。実施例４ H-His-Lys-Thr-Asp-Ser-L-(1′S)- インダニ
ルグリシル-Val-Gly-Leu-Met-NH₂ 〔１５〕 Applied Biosystem 社のペプチドシンセサイザー４３０
Ａにより、ｔＢｏｃ／ＨＯＢｔ／ＮＭＰ法を用い、ｐ−
メチル−ＢＨＡ ｒｅｓｉｎ ＨＣｌ Ｓａｌｔ（０．
６４mmol／ｇ，０．１mmol）より、順次合成を行ない、
常法に従って樹脂より目的ペプチドの粗生成物を得、Ｈ
ＰＬＣにて分取することにより、目的物を得た（２０m
g）。アミノ酸分析ＨＣｌ消化 His(0.89) Lys(0.91) Thr(0.
90) Asp(0.99) Sar (0.86) Val(0.83) Gly(0.99) Leu
(1.00) Met(0.99) ＭＳ（ＦＡＢ）：１１５９（Ｍ＋Ｈ）⁺ 実施例５ H-His-Lys-Thr-Asp-Ser-L-(1′R)- インダニ
ルグリシル-Val-Gly-Leu-Met-NH₂ 〔１６〕 実施例１３と同様に化合物９を用い目的物を得た。 アミノ酸分析ＨＣｌ消化 His(0.94) Lys(0.97) Thr(0.
92) Asp(0.99) Ser(0.86) Val(0.96) Gly(1.00) Leu(1.
00) Met(0.98) ＭＳ（ＦＡＢ）：１１５９（Ｍ＋Ｈ）⁺ 実施例６ １．ラットサブスタンスＰレセプター（ＳＰＲ）および
ニューロチニンＡ（サブスタンスＫ）レセプター（ＳＫ
Ｒ）発現ＣＨＯ細胞の作成 ラットＳＰＲ、ＳＫＲのｍＲＮＡで発現プラスミドを作
製し、ＣＨＯｄｈｆｒ細胞にＣａＰＯ₄ 法で導入した。
ｄｈｆｒ⁺ のtransformantの中からＳＰＲ，ＳＫＲ発現
細胞を得た。 【００５９】２．レセプター結合活性の測定 化合物のレセプター結合活性はレセプターに対する放射
性ヨードラベルしたリガンドとの競合結合実験にて検討
した。レセプター標品としては、上記のＳＰＲないしＳ
ＫＲ発現ＣＨＯ細胞を多穴培養プレートで培養したもの
を用いた。またリガンドは Cascieri and Liarg の方法
（J.Biol.Chem.258 ., 5158 〜5164, 1983）に従い、Bo
lton-Hurte法にて放射性ヨード標識を行ない
（〔 ¹²⁵Ｉ〕−ＢＨＳＰ，〔 ¹²⁵Ｉ〕−ＢＨＮＫＡ）Ｈ
ＰＬＣにて精製した。 【００６０】化合物のレセプター結合活性はYokotaらの
方法(J.Biol.Chem., 264., 17649〜17652, 1989)に従い
以下の手順で測定した。表１にこれらの化合物の５０％
結合阻害濃度、ＩＣ₅₀を記した。 【００６１】 【表１】 【００６２】 【発明の効果】本発明によれば、対応するフェニルアラ
ニンのフェニル基が特定の空間配置をとりうる２−
（１′−インダニル）グリシン誘導体が提供される。さ
らにその各立体異性体に由来する残基をペプチド鎖中に
含んでなるペプチド、例えば化合物〔１５〕及び〔１
６〕のレセプター（タキキニン類、特にニューロキニン
Ａ受容体）結合活性の測定から判明するように、その結
合活性の発現に最も重要であるフェニルアラニンの受容
体中での３次元的位置を確認するのに有用である。すな
わち、化合物〔１５〕及び〔１６〕の活性値から、アミ
ノ酸のβ−位の不斉炭素に由来する異性体間で、大きな
活性の差が存在すること、又これらの活性の差はアルキ
ル基の長さあるいは電荷の差によるものではなく、純粋
にそのフェニル基の空間的位置の違いによるものである
ことから、タキキニン類受容体には、フェニル基に対し
て特異的に好ましい位置があることが明らかになった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 99:00 (72)発明者 石黒 正路 大阪府三島郡島本町若山台１丁目１番１号 サントリー株式会社生物医学研究所内

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次式〔Ｉ〕 【化１】 で表わされる２−インダニルグリシン。
2. 【請求項２】 フェニルアラニン残基を含んでなるペプ
   チドにおいて、前記残基の少なくとも１個が請求項１記
   載の２−インダニルグリシンに由来するアミノ酸残基で
   置換されたペプチド。
3. 【請求項３】 次式〔II〕 【化２】 （上式中、Ｘは水素原子、Ｃ₁ 〜Ｃ₆ のアルキル基また
   はＣ₂ 〜Ｃ₁₀のアシル基であり、 Ａ₁ はアミノ酸１〜３個からなるアミノ酸残基またはオ
   リゴペプチド残基であり、 Ａ₂ はＡｓｐ，ＧｌｕまたはＧｌｎ由来のアミノ酸残基
   であり、 Ａ₃ はアミノ酸１個に由来するアミノ酸残基であり、 Ｙは式〔Ｉ〕のアミノ酸由来のアミノ酸残基であり、 Ａ₄ はＰｈｅ，ＩｌｅまたはＶａｌ由来のアミノ酸残基
   であり、そしてＺはＮＨ₂ またはＯＣＨ₃ である）で表
   わされる請求項２記載のペプチド。