JPH0578380A - ペプチフルオリンおよびネオペプチフルオリン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 新規抗生物質を提供する。 【構成】 シュードモナス・フルオレッセンス株ＡＴＣ
ＣＮｏ.５３,９５８およびＡＴＣＣＮｏ.５５,１２９の
培養によりそれぞれ産生させた２つの関連する新規抗生
物質であるペプチフルオリンおよびネオペプチフルオリ
ン。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規な抗生物質、ペプ
チフルオリン(peptifluorin)およびネオペプチフルオリ
ン(neopeptifluorin)に関する。

【発明の概要】微生物株、シュードモナス・フルオレッ
センス(Pseudomonas fluorescens)(アメリカン・タイプ
・カルチャー・コレクションに受託番号ＡＴＣＣ５３,
９５８にて寄託してある)を培養すると新規抗生物質で
あるペプチフルオリンが産生され、一方、シュードモナ
ス・フルオレッセンスの他の単離物、すなわちＡＴＣＣ
５５,１２９を培養すると新規かつ関連する抗生物質で
あるネオペプチフルオリンが産生される。両抗生物質と
も、広いスペクトルの抗細菌作用および抗真菌作用を有
する。

【０００２】微生物 ペプチフルオリンの産生に用いる微生物は、池の堆積物
の試料から単離した。この微生物の継代培養は、アメリ
カン・タイプ・カルチャー・コレクション(ロックビ
ル、メリーランド州)の永久採集(受託番号は５３.９５
８)から得ることができる。本明細書に記載し特徴付け
た上記微生物に加えて、その変異株(Ｘ線、突然変異原
などを使用することにより生成)を培養してペプチフル
オリンを産生させることもできることを理解すべきであ
る。

【０００３】ネオペプチフルオリンの産生に用いる微生
物は、湿った腐敗葉の葉積層の試料から単離した。この
微生物の継代培養は、アメリカン・タイプ・カルチャー
・コレクション(ロックビル、メリーランド州)の永久採
集(受託番号は５５.１２９)から得ることができる。本
明細書に記載し特徴付けた上記微生物に加えて、その変
異株(Ｘ線、突然変異原などを使用することにより生成)
を培養してネオペプチフルオリンを産生させることもで
きることを理解すべきである。

【０００４】シュードモナス・フルオレッセンス(ＡＴ
ＣＣ Ｎｏ.５３,９５８)は、該微生物が存在する池の堆
積物(この場合はハミルトンタウンシップ、ニュージャ
ージー州で得た)から単離することができ、そのため、
まず試料を滅菌希釈液(たとえば、０.０１％ゼラチンを
含有する緩衝食塩水)中に懸濁し、ついで震盪する。こ
の懸濁液の希釈液を、シクロヘキシミドを添加した栄養
培地上にプレーティングする。この培地の組成は以下の
通りである。

【０００５】 酵母エキス ０.４ｇ マンニトール １０.０ｇ リン酸水素カリウム、二塩基性 ０.５ｇ 塩化ナトリウム ０.１ｇ 硫酸マグネシウム７水和物 ０.２ｇ アガー １５.０ｇ コンゴレッド ０.２５％水溶
液、１０.０ｍｌ 蒸留水 ８００ｍｌ シクロヘキシミド＊ １％水溶液、１
０ｍｌ (＊)濾過滅菌し、培地(ｐＨを約６.８に調節し、１２１
℃で３０分間オートクレーブにかけることにより滅菌し
ておいた)に加えた。

【０００６】室温で３日間インキュベートした後、プレ
ーティングした堆積物からシュードモナス・フルオレッ
センスＡＴＣＣ Ｎｏ.５３,９５８のコロニーを単離
し、取り出し、ニュートリエントアガー(ディフコ・ラ
ボラトリーズ、デトロイト、ミシガン州)上に保持し
た。

【０００７】この微生物は、単一または短くふくれた双
桿菌として存在するグラム陰性の運動性桿菌である。こ
の微生物は、１または２以上の極性鞭毛により運動性で
ある。この微生物は、粗いコロニー型および平滑なコロ
ニー型の両方で存在し、両方とも同じ生化学的特性を示
す。この微生物は、ヒュー・レイフソンのＯ／Ｆグルコ
ース試験では酸化性であり、チトクロームオキシダーゼ
陽性であり、キングＢ培地上で蛍光性である。キングＡ
培地上ではピオチアニン色素は産生されず、拡散性色素
も認められなかった。

【０００８】下記生化学反応が陽性である：カタラー
ゼ、アルギニンジヒドロラーゼ、ゼラチナーゼ。下記生
化学反応が陰性である：デンプン加水分解、硝酸塩還
元、インドール、ポリβ−ヒドロキシブチレート。単独
の炭素源として下記化合物を用いることができる：ＤＬ
−アルギニン、クエン酸塩、グルコース、キシロースお
よびショ糖。この微生物の増殖は、４℃では起こるが、
４２℃では起こらない。以上の特性はシュードモナス・
フルオレッセンスの特性と一致し、ペプチフルオリンの
産生体をシュードモナス・フルオレッセンスとして同定
することができる。

【０００９】シュードモナス・フルオレッセンスＡＴＣ
Ｃ Ｎｏ.５５,１２９は、シュードモナス・フルオレッ
センスＡＴＣＣ Ｎｏ.５３,９５８の単離の場合と同様
の方法により、該微生物が存在する湿った腐敗葉の葉積
層(この場合はベテラン公園、ハミルトンタウンシッ
プ、ニュージャージー州)から単離すことができる。こ
の微生物の形態学的特性、染色特性および生化学特性
は、上記シュードモナス・フルオレッセンスについて記
載したものと一致し、それゆえ、ネオペプチフルオリン
の産生体をシュードモナス・フルオレッセンスとして同
定することができる。

【００１０】抗生物質 抗生物質のペプチフルオリンの産生は、炭素の同化源お
よび窒素の同化源を含有する水性栄養培地中、液内好気
性条件下、室温(２５℃)か室温周辺の温度にてシュード
モナス・フルオレッセンスＡＴＣＣ Ｎｏ.５３,９５８
を培養することにより行うことができる。実質的な抗生
物質活性が培地に付与されるまで(通常、約２４〜４８
時間)まで発酵を行う。発酵工程並びにその後の単離工
程は、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcu
s aureus)をアッセイ生物として用いる通常のペーパー
ディスク−アガー拡散アッセイによりモニターすること
ができる。ペプチフルオリンのブロス上澄み液からの単
離精製は、細胞塊を遠心分離により除いた後、当該技術
分野で公知の方法により行うことができる。

【００１１】発酵上澄み液から抗生物質を得るには、抗
生物質を非イオン性樹脂、ＸＡＤ−２に吸着させ、つい
でメタノールで溶出する。活性なメタノール溶出液をさ
らにＣＨＰ２０Ｐ上のクロマトグラフィーにより処理
し、アセトニトリル−水−トリフルオロ酢酸(２００：
８００：１〜８００：２００：１)の直線勾配を有する
溶媒で活性体を溶出させる。活性なフラクションをプー
ルし、ダルコ(Darco)Ｇ６０活性炭とセライトフィルタ
ーエイドの１：１混合物で処理してさらに精製し、つい
で濾過し、アセトニトリル：水(２０：８０および３
０：７０)で洗浄し、炉液および洗浄液をコンバインし
た中に活性体を回収した。

【００１２】別法として、発酵上澄み液からの活性体の
回収は、ｎ−ブタノール中に抽出し、ついで有機層を真
空濃縮し、ついで該濃縮物を非イオン性樹脂ＸＡＤ−２
上に吸着させることによっても行うことができる。その
後の精製は、上澄み液フラクション中の活性体を処理す
るのに記載した上記手順に従って行うことができる。ネ
オペプチフルオリンの産生もペプチフルオリンの場合と
同様にしてシュードモナス・フルオレッセンスＡＴＣＣ
Ｎｏ.５５,１２９を培養することによって行うことがで
き、単離および精製も上記ペプチフルオリンの単離精製
に記載したのと同様の当該技術分野で公知の方法により
行うことができる。

【実施例】つぎに、本発明を実施例に基づいてさらに詳
しく説明するが、本発明はそれらに限られるものではな
い。

【００１３】実施例１ ペプチフルオリンの調製：栄養アガー斜面にシュードモ
ナス・フルオレッセンスＡＴＣＣＮｏ,５３,９５８を接
種し、２５℃で一夜インキュベートした。その後の増殖
物を用い、２５０ｍｌ容エーレンマイヤーフラスコに入
れた水性培地の５０ｍｌ部分に接種した。発芽培地の組
成は下記の通りであった。 酵母エキス ５.０ｇ ペプトン ３.０ｇ マンニトール ５.０ｇ 蒸留水 １０００ｍ
ｌまで 上記培地は使用前に１２１℃で１５分間滅菌した。

【００１４】接種した発芽フラスコを、ロータリーシェ
ーカー上、２５℃にて約２４時間インキュベートした。
このシェーカーを３００ｒｐｍのスピード、２−インチ
のストローク(2-inch stroke)で操作した。この時、発
芽フラスコ中の増殖物から１％を、２５０ｍｌ容のエー
レンマイヤーフラスコ中の同培地の５０ｍｌ部分に移し
た。接種したフラスコを、３００ｒｐｍ、２−インチス
トロークで操作しているロータリーシェーカー上、２５
℃にて約２４時間インキュベートした。

【００１５】回収に際して、フラスコ中のプールした内
容物を遠心分離にかけて上澄み液と固形物を分離した。
固形物を廃棄した。上記上澄み液の１０Ｌ部分に約０.
９ＬのＸＡＤ−２樹脂を加え、得られた懸濁液(ｐＨ７
に調節)をロータリーミキサー上で１５分間穏やかに混
合した。ついで、負荷した樹脂を分離し、水(６Ｌ)、つ
いでメタノール：水(１：１)(６Ｌ)で洗浄した。活性体
をメタノール(３Ｌ)で溶出し、この活性溶出液を真空濃
縮して粗製のペプチフルオリン(０.８３ｇ)を得た。１.
７ｇの粗製抗生物質が蓄積するまで、上記手順を発酵上
澄み液の他の１０Ｌ部分について繰り返した。

【００１６】１０ｍｌのアセトニトリル：水：トリフル
オロ酢酸(２００：８００：１)中に溶解した上記粗製の
抗生物質(１.６ｇ)を、同じ溶媒中に充填したＣＨＰ２
０Ｐ樹脂のカラム(５×４１ｃｍ)に適用した。抗生物質
をアセトニトリル：水：トリフルオロ酢酸の２００：８
００：１〜８００：２００：１の直線勾配を３６００ｍ
ｌ以上用い、９ｍｌ／分の流速にて溶出し、２３ｍｌの
フラクションを回収した。プールした活性なフラクショ
ンを真空濃縮して水溶液とし、凍結乾燥してペプチフル
オリンに富む物質(０.６１ｇ)を得た。

【００１７】この物質をアセトニトリル：水(２０：８
０)(１０ｍｌ)中に溶解し、ダルコＧ６０活性炭とセラ
イトフィルターエイド[アセトニトリル：水：トリフル
オロ酢酸(５００：５００：１)の混合物で洗浄し、つい
で中性になるまで水で洗浄しておいた]との１：１混合
物(１５ｍｌ)で処理することによりさらに精製した。こ
の混合物を濾過し、固形物をアセトニトリル：水(２
０：８０)(５０ｍｌ)および３０：７０混合の同溶媒(８
０ｍｌ)で洗浄した。コンバインした濾液および洗浄液
を真空濃縮して水溶液とし、これを凍結乾燥して精製ペ
プチフルオリン(０．３９ｇ)を得た。

【００１８】実施例２ ネオペプチフルオリンの調製：ペプチフルオリンの単離
の場合と同様にして、ネオペプチフルオリンの産生およ
び単離を行った。発酵培地およびネオペプチフルオリン
の産生のための条件は、シュードモナス・フルオレッセ
ンスＡＴＣＣＮｏ.５５,１２９を用いる他はペプチフル
オリンの産生の場合と同じであった。発酵完了後、ブロ
ス上澄み液の２つの１０Ｌ部分を上記ＸＡＤ−２樹脂で
処理して活性なメタノール溶出液を得た。これら溶出液
をコンバインして粗製のネオペプチフルオリン(１.７８
ｇ)を得た。

【００１９】この物質(１.４５ｇ)をアセトニトリル：
水：トリフルオロ酢酸(２００：８００：１)(３０ｍｌ)
中に溶解し、同溶媒中に充填したＣＨＰ２０Ｐ樹脂のカ
ラム(５×２７ｃｍ)に適用した。樹脂を７５０ｍｌの同
溶媒で洗浄した後、活性体をアセトニトリル：水：トリ
フルオロ酢酸(３５０：６５０：１)溶媒混合物(７５０
ｍｌ)および５００：５００：１溶媒混合物(７５０ｍ
ｌ)で溶出した。活性な溶出液をコンバインし、真空濃
縮して水溶液とし、これを凍結乾燥してネオペプチフル
オリンに富む物質(０.６２ｇ)を得た。上記ネオペプチ
フルオリンに富む物質の０.６０ｇ試料を、ペプチフル
オリンの精製の場合に記載したのと同じ手順に従ってダ
ルコＧ６０活性炭で処理してさらに精製して、精製ネオ
ペプチフルオリン(０.１６２ｇ)を得た。

【００２０】ペプチフルオリンは下記特性を有する：高
速原子衝撃マススペクトル(ＦＡＢ−ＭＳ)が、１９８６
の名目の分子量に対して陽イオンモードでｍ／ｚ １９
８７にピークを有し、陰イオンモードでｍ／ｚ １９８
５にピークを有する；ＵＶｍａｘ(メタノール)端吸収；
図１に示すＩＲ(臭化カリウム)；図２に示すＣＤ₃ＯＤ
中の４００ＭＨｚ ¹Ｈ ＮＭＲスペクトル；図３に示す
ＣＤ₃ＯＤ中の６７.５ＭＨｚ ¹³Ｃ ＮＭＲスペクトル；
ペーパー上でのビタミンＢ₁₂(０.０)およびｐ−ニトロ
ベンゼンスルホネートアニオン(１.０)との相対的なペ
プチフルオリンの電気泳動移動度は、ギ酸：酢酸：水
(１：３：３６)の組成からなる緩衝液を用いた場合は
０.４５、０.０５Ｍリン酸水素カリウム緩衝液を用いた
場合は０.２５である；融点は２２５〜２３０℃；ペプ
チフルオリンは、陽性のニンヒドリンの発色反応(紫色)
およびライドン−スミス(Rydon−Smith)発色反応を与
え；元素分析値は４７.９３％Ｃ、７.４０％Ｈ、１０.
１０％Ｎである。上記特性は、公知のすべての抗生物質
からペプチフルオリンを識別するのに役立つ。

【００２１】ネオペプチフルオリンは下記特性を有す
る：高速原子衝撃マススペクトル(ＦＡＢ−ＭＳ)が、１
９７０の名目の分子量に対して陽イオンモードでｍ／ｚ
１９７１にピークを有し、陰イオンモードでｍ／ｚ １
９６９にピークを有する：ＵＶｍａｘ(メタノール)端吸
収；図４に示すＩＲ(臭化カリウム)；図５に示すＣＤ₃
ＯＤ中の４００ＭＨｚ ¹Ｈ ＮＭＲスペクトル；図６に
示すＣＤ₃ＯＤ中の６７.５ＭＨｚ ¹³Ｃ ＮＭＲ；ペーパ
ー上でのビタミンＢ₁₂(０.０)およびｐ−ニトロベンゼ
ンスルホネートアニオン(１.０)との相対的なネオペプ
チフルオリンの電気泳動移動度は、ペプチフルオリンの
場合に記載した緩衝液系でのペプチフルオリンのものと
同じである；融点は＞３００℃；ネオペプチフルオリン
は、陽性のニンヒドリンの発色反応(紫色)およびライド
ン−スミス発色反応を与え；元素分析値は４７.０５％
Ｃ、７.００％Ｈ、９.３０％Ｎである。

【００２２】上記特性に加えて、６Ｎ ＨＣｌで１１０
℃にて２４〜４８時間ペプチフルオリンを加水分解する
ことにより下記アミノ酸が得られた：Ｄ−Ｇｌｕ(１)、
Ｄ−Ｓｅｒ(２)、Ｐｒｏ(１)、Ｄａｂ(１)、ホモセリン
(２)、Ｄ−Ｖａｌ(２)、Ｌ−Ｖａｌ(１)、Ｌ−Ｉｌｅ
(０〜１)、Ｄ−Ｌｅｕ(２)、Ｌ−Ｌｅｕ(１)、Ｌ−Ｌｙ
ｓ(１)、Ａｂｕ(２)。ネオペプチフルオリンについては
下記アミノ酸が得られた：Ｇｌｕ(１)、Ｓｅｒ(１)、Ａ
ｌａ(１)、Ｐｒｏ(１)、Ｄａｂ(１)、ホモセリン(２)、
Ｖａｌ(３)、Ｌｅｕ(３〜４)、Ｌｙｓ(１)、−Ａｂｕ
(２)。上記特性は、ペプチフルオリンをネオペプチフル
オリンから識別する上に役立ち、また両抗生物質を他の
公知のすべての抗生物質から識別するのに役立つ。

【００２３】生物学的活性 下記方法を用い、細菌に対する本発明の化合物の最小阻
止濃度(以下、「ＭＩＣ」と称する)を決定した。ＢＨＩ
(ディフコ)アガー斜面からの１白金耳の被験微生物を抗
生物質アッセイブロス(Antibiotic Assay Broth)(ディ
フコ)(２０ｍｌ)(試験管中)に接種することにより、被
験微生物を該ブロス中で増殖させた。接種した試験管を
３７℃で１８〜２４時間インキュベートした。これらの
培養液は、１ｍｌ当たり１０⁹のコロニー生成単位(ＣＦ
Ｕ)を含有すると思われた。培養液を１：１００に希釈
して最終接種レベルを１０⁷ＣＦＵとした。希釈液は、
イーストビーフブロス(Yeast Beef Broth)(ディフコ)を
用いて調製した。

【００２４】被験化合物を適当な希釈液中に１,０００
μｇ／ｍｌの濃度で溶解した。２倍希釈液をイーストビ
ーフブロス(ディフコ)中で調製して、１０００μｇ／ｍ
ｌ〜０.５μｇ／ｍｌの範囲とした。各希釈液の１.５ｍ
ｌ部分をそれぞれペトリ皿に入れ、Ｋ−１０アガー(１
３.５ｍｌ)を加えた。Ｋ−１０アガーの組成は下記の通
りであった。 牛肉エキス １.５ｇ 酵母エキス ３.０ｇ ペプトン ６.０ｇ デキストロース １.０ｇ アガー １５.０ｇ 蒸留水 適量 １０００ｍｌまで 上記培地を１５ポンドｐｓｉ、１２１℃にて１５分間滅
菌した。

【００２５】アガー中の最終薬物濃度は１００μｇ／ｍ
ｌ〜０.０５μｇ／ｍｌの範囲であった。アガーのみを
含有する微生物増殖コントロールプレートを調製し、被
験プレートの前および後に接種した。デンリーマルチポ
イントイノキュレーター(Denly Multipoint Inoculato
r)(約０.００１ｍｌの各接種物を送り出す)を用いて各
プレートのアガー表面に微生物を適用し、アガー表面上
の最終接種物を１０⁴ＣＦＵとした。上記プレートを３
７℃で１８時間インキュベートし、ＭＩＣを決定した。
ＭＩＣは、微生物の増殖を阻止するのに要する化合物の
最小濃度である。

【００２６】上記方法は、酵母に対する活性をアッセイ
する場合には少し変えた。被験化合物の新たなＦ−４斜
面を凍結バイアル(−７０℃)から得た。これら培養液を
Ｆ−４ブロスの試験管中に接種し、３７℃で１８〜２４
時間インキュベートした。このとき、平均細胞数は５×
１０⁷ＣＦＵ／ｍｌであると思われた。これらを新たな
Ｆ−４ブロスで１：５０に希釈して、１×１０⁶ＣＦＵ
／ｍｌの接種レベルとした。ついで、微生物を滅菌テン
プレート中に分配し(ウエル当たり０.８ｍｌ)、デンリ
ーマルチポイントイノキュレーターを用いて上記被験化
合物を含有する各プレートの表面上に移し、アガー表面
上の最終接種物を１０³ＣＦＵとした。

【００２７】Ｆ−４ブロスの組成は、下記の通りであ
る。 トリプトン ５ｇ 麦芽エキス ３ｇ グルコース １０ｇ 酵母エキス ３ｇ 蒸留水 １０００ｍｌまで 上記培地を１５ｐｓｉ、１２１℃にて１５分間滅菌し
た。Ｆ−４アガーは上記ブロスと同じ組成を有するが、
１Ｌ当たり１５ｇのアガーを添加した。

【００２８】細菌でのアガー希釈アッセイの結果は下記
の通りである。 ペプチフルオリン 微生物 ＭＩＣ(μｇ／ｍｌ)スタフィロッコカス・アウレウス (Staphylococcus aureus) SC1276* ６.３スタフィロッコカス・アウレウス SC2399 ６.３スタフィロッコカス・アウレウス SC2400 ６.３ストレフ゜トコッカス・ファエカリス (Streptococcus faecalis) SC9011 ６.３ミクロコッカス・ルテウス (Micrococcus luteus) SC2495 ６.３エシェリキア・コリ (Escherichia coli) SC8294 ＞１００.０エシェリキア・コリ SC10,896 １２.５エシェリキア・コリ SC10,857 ５０.０クレフ゛シエラ・ニューモニエ (Klebsiella pneumoniae) SC10,440 ５０.０クレフ゛シエラ・ニューモニエ SC9527 ＞１００.０サルモネラ・チホサ (Salmonella typhosa) SC1195 ＞１００.０シケ゛ラ・ソンネイ (Shigella sonnei) SC8449 ２５.０エンテロハ゛クター・クロアカエ (Enterobacter cloacae) SC8236 ２５.０ (＊)ＳＣは、イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ
・インコーポレイテッド(E.R.Squibb & Sons,Inc.)のジ
ェネラルカルチャーコレクション(general culture col
lection)からのものである。

【００２９】 ネオペプチフルオリン 微生物 ＭＩＣ(μｇ／ｍｌ)スタフィロッコカス・アウレウス SC1276* ３.１スタフィロッコカス・アウレウス SC2399 ６.３スタフィロッコカス・アウレウス SC2400 ６.３ストレフ゜トコッカス・ファエカリス SC9011 ６.３ストレフ゜トコッカス・アカ゛ラクチエ (Streptococcus agalactiae) SC14,008 ６.３ミクロコッカス・ルテウス SC2495 ６.３エシェリキア・コリ SC8294 ５０.０エシェリキア・コリ SC10,896 １２.５エシェリキア・コリ SC10,857 １２.５クレフ゛シエラ・ニューモニエ SC10,440 ２５.０クレフ゛シエラ・ニューモニエ SC9527 ＞１００.０サルモネラ・チホサ SC1195 １００.０シケ゛ラ・ソンネイ SC8449 ２５.０エンテロハ゛クター・クロアカエ SC8236 １２.５ (＊)ＳＣは、イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ
・インコーポレイテッドのジェネラルカルチャーコレク
ションからのものを意味する。

【００３０】酵母のアガー希釈アッセイ(３７℃で３６
〜４８時間インキュベーションした後に決定)の結果は
下記の通りである。 ペプチフルオリン 微生物 ＭＩＣ(μｇ／ｍｌ)カンシ゛タ゛・アルヒ゛カンス (Candida albicans) SC5314* １２.５カンシ゛タ゛・アルヒ゛カンス SC9177 ２５.０カンシ゛タ゛・アルヒ゛カンス SC11,422 １２.５カンシ゛タ゛・トロヒ゜カリス (Candida tropicalis) SC8159 １２.５カンシ゛タ゛・トロヒ゜カリス SC9861 ３.１カンシ゛タ゛・クルセイ (Candida krusei) SC2967 １００カンシ゛タ゛・ク゛ラフ゛ラタ (Candida glabrata) SC11,267 １２.５サッカロミセス・セレヒ゛シエ (Saccharomyces cerevisiae) SC12,955 ２５.０サッカロミセス・セレヒ゛シエ SGY1139** ３.１サッカロミセス・セレヒ゛シエ SC1600 １２.５ (＊)ＳＣは、イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ
・インコーポレイテッドのジェネラルカルチャーコレク
ションからのものを意味する。 (＊＊)ＳＧＹは、ブリストル−マイヤーズ・スクイブ・
インコーポレイテッド(Bristol−Myers Squibb,Inc.)の
イーストジェネティックスカルチャーコレクション(Yea
st Genetics culture collection)からのものを意味す
る。

【００３１】 ネオペプチフルオリン 微生物 ＭＩＣ(μｇ／ｍｌ)カンシ゛タ゛・アルヒ゛カンス SC5314* ６.３カンシ゛タ゛・アルヒ゛カンス SC9177 ２５.０カンシ゛タ゛・アルヒ゛カンス SC11,422 １２.５カンシ゛タ゛・トロヒ゜カリス SC8159 ６.３カンシ゛タ゛・トロヒ゜カリス SC9861 ３.１カンシ゛タ゛・クルセイ SC2967 １００カンシ゛タ゛・ク゛ラフ゛ラタ SC11,267 ２５.０サッカロミセス・セレヒ゛シエ SC12,955 １２.５サッカロミセス・セレヒ゛シエ SGY1139** １.６サッカロミセス・セレヒ゛シエ SC1600 ６.３ (＊)ＳＣは、イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ
・インコーポレイテッドのジェネラルカルチャーコレク
ションからのものを意味する。 (＊＊)ＳＧＹは、ブリストル−マイヤーズ・スクイブ・
インコーポレイテッドのイーストジェネティックスカル
チャーコレクションからのものを意味する。

【００３２】ペプチフルオリンおよびネオペプチフルオ
リンは、それらの抗菌作用に加えて、酵母からのメバロ
ネートキナーゼ(酵母におけるエルゴステロール生合成
に関与する酵素)の抑制において適度に活性である。

【図面の簡単な説明】

【図１】 臭化カリウム中でのペプチフルオリンのＩＲ
スペクトルを示すグラフ。

【図２】 ＣＤ₃ＯＤ中でのペプチフルオリンの４００
ＭＨｚ ¹Ｈ ＮＭＲスペクトルを示すグラフ。

【図３】 ＣＤ₃ＯＤ中でのペプチフルオリンの６７.５
ＭＨｚ¹³Ｃ ＮＭＲを示すグラフ。

【図４】 臭化カリウム中でのネオペプチフルオリンの
ＩＲスペクトルを示すグラフ。

【図５】 ＣＤ₃ＯＤ中でのネオペプチフルオリンの４
００ＭＨｚ ¹Ｈ ＮＭＲスペクトルを示すグラフ。

【図６】 ＣＤ₃ＯＤ中でのネオペプチフルオリンの６
７.５ＭＨｚ ¹³Ｃ ＮＭＲを示すグラフ。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ウエン−チー・リウ アメリカ合衆国ニユージヤージー州プリン ストン・ジヤンクシヨン、ウイコーム・ウ エイ７番 (72)発明者 ゴードン・ダブリユー・ロビンソン アメリカ合衆国ニユージヤージー州ローレ ンスビル、ロータス・レイン７番

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 図１に示す臭化カリウム中の赤外吸収、
   図２に示すＣＤ₃ＯＤ中の４００ＭＨｚ ¹Ｈ ＮＭＲスペ
   クトル、および図３に示すＣＤ₃ＯＤ中の６７.５ＭＨｚ
   ¹³Ｃ ＮＭＲスペクトルを有し、高速原子衝撃マススペ
   クトルが１９８６の名目の分子量に対して陽イオンモー
   ドでｍ／ｚ １９８７にピークを有し、陰イオンモード
   でｍ／ｚ １９８５にピークを有し、そのおよその元素
   分析値が炭素４７.９３％、水素７.４０％、窒素１０.
   １０％であることを特徴とするペプチフルオリン。
2. 【請求項２】 図４に示す臭化カリウム中でのネオペプ
   チフルオリンのＩＲスペクトル、図５に示すＣＤ₃ＯＤ
   中でのネオペプチフルオリンの４００ＭＨｚ ¹Ｈ ＮＭ
   Ｒスペクトル、図６に示すＣＤ₃ＯＤ中でのネオペプチ
   フルオリンの６７.５ＭＨｚ ¹³Ｃ ＮＭＲスペクトル、
   高速原子衝撃マススペクトルが１９７０の名目の分子量
   に対して陽イオンモードでｍ／ｚ １９７１にピークを
   有し、陰イオンモードでｍ／ｚ １９６９にピークを有
   し、そのおよその元素分析値が炭素４７.０５％、水素
   ７.００％、窒素９.３０％であることを特徴とするネオ
   ペプチフルオリン。