JPH05505390A - レトロウィルス類のウィルスに対する活性剤、該活性剤を含有する組成物、及びそれらの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 レトロウィルス類のウィルスに対する活性剤、該活性剤を含有する組成物、及び それらの使用本発明は、レトロウィルス類のウィルス、特に、ヒト免疫不全ウィ ルス（Ｈｍに対する活性剤、及びその活性剤を含む組成物に関する。更に、本発 明は、その活性剤及び組成物の使用に関する。

本発明において、レトロウィルス類とは、リポ核酸鎖に保持される遺伝材料カル トロウィルスの複製にとって、逆転写酵素と呼ばれる酵素によってデノキシリポ 核酸の形に変わることを必要とするウィルスを言う。

人間とともに、植物界及び動物界でもかかるウィルスに感染する。そのようなウ ィルスの例は、Ｊ、Ｍ、　Ｈｕｒａｕｘら、Ｖｉｒｏｌｏｇｉｅ、　Ｆｌａｎｗ ｍｒｉｏｎ　Ｍｅｄｅｃｉｎｅ−３ｃｉｅｎｃｅｓ、　１９８５　（パリ）に見 いだされる。かかるウィルスの多くは動物に対して発ガン性を育し、最近の研究 によれば、人間に対しても同一の危険か存在することか分かった。

動物のガンを引き起こすウィルスは、人間の病気を治療できる物質を研究するた めのモデルとして有用である。

ラウス肉腫（マウスの病気）のウィルスか発見されてから約７０年を経過して、 ヒト白血病の最初のレトロウィルスか発見された。

これらのウィルス（ＨＴＬＶＩ及びＨＴＬＶＩ［）は、サルに感染するウィルス 種と関連かあるように思われ、この病気は世界のある国々においてのみ知られて いる。

この病気は急速に拡大しており、治療方法は知られていない。

ある種のレトロウィルスはガンを起こさないか、他の病気（例えば、動物におけ る脳炎、貧血及び肺炎）、特に動物及び人間における後天性免疫不全症候群（Ａ ＩＤＳ）を引き起こす。

かかる症候群を引き起こすヒトウィルスに対して、ＨＴＶという国際的な名称か 受け入れられている。ヒトウィルスは突然変異を存することかてき、４種の異な る同定されたウィルスか知られている。サルの免疫不全を引き起こすウィルスは 、ＳＩＶと呼ばれている。

明らかに、重大な問題はヒトＡＩＤＳの出現及び世界におけるその急激な拡大に ある。

患者の防御手段を冒すこの病気によって、日和見病、例えば、患者に死をもたら す特定のガン（カポシ）を起こさせる。

現在、患者の生存を延はし、しかし治癒させることのない唯一の治療か知られて いる。この治療は、３−アジド−３゛−デソキンチミシンを投与することからな る（ＥＰ−Ａ−１９６１８５）。この物質は、大変に毒性か強くまた大変に高価 なものと考えられる。更に、多かれ少なかれ長期間経過すると、特に約１２〜１ ８か月経過すると、この物質に対するウィルス抵抗性か既に確立したように思わ れる（Ｓｃｈｕｌｈａｆｅｒ　Ｅ、ら、Ａｃｑｕｉｒｅｄ　１ａｎｕｎｏ−ｄｅ ｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ、、、、Ｉｎ　Ｖｉｖｏ　R（ ２）：６１−７８　（１９８９））。

また、レトロウィルス類に対する薬として、ハロゲンで任意に置換されたある種 のベンジジン誘導体を使用することか考えられている（ＦＲ−Ａ−２６１２５１ ５）。しかしなから、この文献はこれらの化合物の活性に関する単なる確認をし たに過ぎない。

ウィルスの伝染経路は、直接の血液接触及び感染材料による傷を通しての接触の 場合に確認されている。感染物、特に医療材料からの伝染の危険は無視するへき てはない。

一方、性的伝染及び感染した母乳を通しての子供への伝染もまた確立している。

このことから、感染性の粒子か健康な粘膜を通して通過することか可能であるこ とが分かる（Ｐ、　Ｌｅｐａｇｅら、Ｐｏ５ｔｎａｔａｌ　Ｔｒａｎｓｍｉｓｓ ｉｏｎ　ｏｆ　ＨＩＶ　ｆｒｏｍ　Ｍｏｔｈｅｒ　ｔｏ　Ｃｈｉｌｄ、　Ｔｈｅ 　Ｌａｎｃｅｔ、　１９８７年８月１５日、４００頁：　Ｃ，Ｊ、　Ｍｉｌｌｅ ｒら、Ｇｅｎ１ｔａｌ　Ｍｕｃｏｓａｌ　Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　５ １ｍ１ａｎ　Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ　Ｓ@Ｊｏｕｒｎ ａ ｌ　ｏｆ　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　、　１９８９年１０月、４２７７〜４２８４頁） 。

単純接触による、即ち皮膚又は粘膜を通してのウィルスの感染は、次第に増える と考えられる。ある研究者によれば、接種ウィルスは複製段階を経過し、その間 、キャリアの粘膜又は皮膚の領域に残ると考えられる。この段階は数カ月継続し 得る。ウィルス及び／又はその構成物か粘膜に広がるのは、第２段階においての みである（Ｒ，Ｚｉｔｔｏｕｎ、　Ｓｙｎｄｒｏｍｅ　［ｍｍｕｎｏ　Ｄｅｆｉ ｃｉｔａｉｒｅ　Ａｃｑｕｉｓ、　Ｄ。

ｉｎｓ　Ｅｄｉｔｅｕｒｓ、Ｐａｒｉｓ、１９８６．　ｐ、１８３−１８４）　 。

従って、この病気を撲滅するためには、粘膜及び皮膚と接触する材料及び製品と ともに無生物表面及び物体を殺菌又は消毒することができる物質を調製すること か必要である。キャリアから健康な人へのレトロウィルスの伝染を出来るたけ広 く防止することか必須である。特に感染の「粘膜Ｊ　（ｍｕｃｏｓａｌ）段階に おいて、可能であれは全身的又は少なくとも局所的に活性な治療組成物を調製す ることか望ましい。

少なくとも１つのＳ−オキソ酸基を有する天然又は合成オリコー又はポリサッカ ライドを使用する殺菌組成物又は殺菌方法は既に公知である（ＥＰ−Ａ−２８５ ３５７）。

しかし、実施例によれば、これらの組成物カルトロウィルスに対して活性である としても、処理されたウィルスの一部は常に生き延び、一定期間後、更に危険な 抵抗性ウィルス集団の世代か現れる大きな危険性かある。

通常の化学消毒剤、例えば特にエタノール、グルタルアルデヒド、次亜塩素酸ナ トリウム、フォルマリン、β−プロピオンラクトン、メチル化スピリ・ソトのレ トロウィルスに対する作用は調へられている（Ｖ、Ｂ、　５ｐｉｒｅら、Ｉｎａ ｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｌｙｍｐｈａｄｅｎｏｐａｔｈｙ　Ａｓ５ｏｃｉａ ｔｅｄ　Ｖｉｒｕｓ　ｂｙ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ刀A 　Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ、　１９８４年１０月２０日、８９９−９０１頁；、　Ｐ、Ｊ、Ｖ 、　Ｈａｎｓｏｎら、Ｃｈｅｍｉｃａｌ　［ｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈ ［Ｖ　ｏｎ　５ｕｒｆａｃｅｓ、Ｂｒ、Ｍｅｄ、Ｊ、、　＋９８９．　２９８： ８６２−４：　Ｌ、ＲｅTｎｉ ｃｋら、５ｔａｂ山ｔｙ　ａｎｄ　Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＴＬＶ −ＩＩＩ／ＬＡＶ　ｕｎｄｅｒ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　ａｎｄ@Ｌａ ｂｏｒａｊｏｒｙ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ、ＪＡＭＡ、１９８６．　Ｖｏｌ 、２５５．　１４：　Ｌ、Ｓ、　Ｍａｒｔｉｎ　ら、Ｄｉｓ奄獅■ ｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　１ｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｈｕｍａｎ 　Ｔ　Ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐｉｃ　Ｖｉｒｕｓ　Ｔｙｐｅ　h［ｉ／Ｌｙｍ ｐｈａｄｅｎｏｐａｔｈｙ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　Ｖｉｒｕｓ、　Ｔｈｅ　Ｊ ｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓｅａｓ■刀A　Ｖｏｌ。

１５２、　Ｎｏ、　２．１９８５）。

これらの分析によれは、病院で使用されている殆どの消毒剤はレトロウィルスＨ ＩＶに対して不十分な効果しか示さないか又は十分効果的ではなく、従って潜在 的に危険である。最も効果のあるこれらの消毒剤には、少なくとも１０分間の接 触時間か必要てあり、これは地面やテーブルなとの洗浄に対しては実際上適用す るのか困難である。更に、これらの消毒剤の幾つかは、タンノくり質の存在下で はその効果を失うか、又はその化学的な激しさのために生物体の皮膚又は粘膜と 接触しなければならない場合には適用てきないと考えられる。

文献からは、ウィルスＨＩＶに対する活性を調へるために化合物に対して行われ た試験の殆どはウィルスの酵素活性、即ち逆転写酵素活性に限定されている。こ の種の試験はそれほど感度のよいものではない。つまり、実際問題として、酵素 活性は多数の感染性粒子か存在する時にのみ検出することかできる。

この試験によっては、不活化ウィルスの破壊又は消滅は検出することかできない 。

従って、本発明の目的は、無生物の物体におけるレトロウィルス類、特にヒト免 疫不全ウィルスＨＩＶに対する活性剤を調製することにある。この活性剤は、レ トロウィルス類に対して非常に活性であり、完全にそれらのレトロウィルスを除 去することかでき、同時に長期にわたってその活性を維持することかできる。利 点として、この活性剤は、細胞媒体や、水性媒体内において、若しくは有機物質 、特にタンパク質の存在下で、その活性を維持する。この活性剤の毒性は、低い ことか好ましい。好ましい態様によれば、殺ウイルス作用はウィルスＨＩＶに対 して非常に早い。

例えば、地面の消毒や、分析実験室のような場所からの有機排出物の消毒のため の使用に応じて、この活性剤は溶解性、毒性又は安定性のへて異なる要件を達成 しなければならない。

驚くへきことには、ある種の塩素化化合物か、調査した活性剤の一部の役割を非 常に効果的にまた著しく果たすことか分かった。見いだされた問題点を解決する ために、溶液において利用できる塩素を安定的にかつ長期に放出する塩素化有機 化合物か、本発明の活性剤として提供される。この特性によって、部分的な使用 の後においても活性剤の活性か保持される。この活性は、処理された媒体におい て、ある時には数日連続して維持され、従って、例えば水泳プールの水を消毒す るためには大変に都合のよいものである。

塩素化有機化合物の内、特に有機クロラミン類はそのような特性を存し、活性て 、安定でかつ長期にわたる態様で消毒液に塩素を存在させる、即ち利用できる塩 素をゆっくりとかつ連続的に放出する。

有機クロラミンは、ＨＯＣＩと、アミン、アミド、イミン又はイミドとの反応生 成物を意味する。有機クロラミンは、特に、スルホンアミドのＮ−クロロ誘導体 （クロラミン−Ｔ、ジクロラミン−Ｔ１クロラミン−８１ハラゾーン）、環中に 窒素を存するヘテロ環化合物のＮ−クロロ誘導体（ヒダントイン、サクシンクロ ルイミド、ジクロロ−及びトリクロローイソンアヌレート、トリクロロメラミン ）、グアニジノ誘導体からの縮合アミンのＮ−クロロ誘導体（クロロアゾシン） 及びアニリドのＮ−クロロ誘導体である（Ｓ、Ｓ、　Ｂｌｏｃｋ、　Ｄｉｓｉｎ ｆｅｃｔｉｏｎ、　５ｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｐｒｅｓｅｒｖａｔ ｉｏｎ、　ｔｈｉｒｄ　ｅｄ、、　Ｌｅａ　＆　Ｆｅｂｉｇｅｒ、@１９８３゜ フィラデルフィア、ｐ、　＋７３’）。

上記クロラミンの幾つかは、良好な水溶性を育するか又はその溶解性は通常の添 加剤を添加することによって改良することかできる。有機クロラミン、例えばク ロロアゾジン、クロラミン−Ｔ等は、細胞に対する非毒性濃度において病原性生 物に対して非常に広いスペクトルを有する。それらのクロラミン類はタンパク質 の存在下においても外見上大きな影響を受けない。

クロロアゾシンは特にしトロウィルスＨＩＶに対して安定でかつ永続性の活性を 有する。更に、その活性は１００％完全てあり、また約１分の短時間でかつ非常 に低濃度で活性か生しる。更に、健康な細胞に対して毒性を有さないこのような 物質は、驚くへきことに、ＨＩＶに感染した細胞に対して選択的に毒性を発揮す る。

本発明によれば、適当な担体とともに少なくとも上記型の活性剤を含む無生物物 体を消毒する組成物か提供される。活性剤か溶液である場合には、担体として適 当な水又は池の溶媒か有利に提供される。任意に、他の消毒剤又は通常の添加剤 を付加的に添加してもよい。

特に、クロロアゾノン及び七トリミドを含む組成物は、細菌やウィルスたけてな く微に対しても予想外に広いスペクトルを示す。

本発明によれは、レトロウィルス類、特にヒト免疫不全ウィルスＨＩＶに対して 無生物物体を消毒するための上記活性剤の使用又は消毒組成物の使用も提供され る。

レトロウィルス項に対する消毒とは、病原性生物の破壊たけてなく、細胞・＼の その進入の防止を言う。

消毒すべき無生物物体として、本発明の使用において以下のものを例示的に挙げ ることかできる。

・プラスチック製、ゴム製又は織物製衛生材％）：項線、吸収性綿−毛、ガーゼ 、包帯、トイレットペーパー、填塞フィルムなと。

・医療、獣医療又は歯科医療器具及び装置：注射器、カニユーレ、探子、クリッ プ、鋏、胃洗浄キット、外科テーブル、洗面器なと。

・美容器具　髪美容師、マニキュア師、足治療師、美容師のための材料又は器具 なと。　− ・栄養分野における取扱いを要する物体：特に、飲料用の瓶、平鍋、缶なと。

・衛生に関する乗物：救急車、回転テーブルなと。

・地面又は壁の表面、特に病院における部屋又は−棟の建物なと。

・衛生に関する器具９手洗浄用洗面器、尿容器、皿、浴槽なと。

・飲料・飲料用の水、ミルクなと。

・水泳プール用の水。

排出物、分析実験室からの廃棄物、特に、例えば分析のため人間又は動物の体か ら取り出した試料を消毒することができる。

本発明によれば、ある種の化粧組成物が少なくとも本発明の活性剤を含有するよ うに有利に提供される。この場合、明らかに、この分野における種々のかつ通常 の担体及び添加剤を使用することかできる。

人間又は動物の体（ウィルスキャリアである場合も含む）の皮膚又は粘膜と接触 することのある物体に関して、本発明の活性剤又は活性組成物を使用する特定の 方法か提供される。これらの物体のある種のもの、例えば、医師又は歯科医師の 手袋、ペッサリー、避妊鞘等に関して、本発明の活性剤又は活性組成物は消毒作 用の形管とともに、キャリアから健康な人へのレトロウィルスの伝染を防止する バリヤー媒体を形成する。例えば、避妊ゴム鞘を、本発明の活性剤を含むペトロ ラタムにより潤滑にさせることかてきる。医師の手袋に対しては、本発明の活性 剤を含むアミラーゼアミロペクチン粉末を例えば２つのゴムフィルムの間に位置 させることかできる。この場合には、バリヤーとして使用される消毒粉末は皮膚 と直接接触することはない。

本発明の目的は、利用できる塩素を安定してカリ永続的に放出する少なくとも一 種の塩素化有機化合物を、レトロウィルス群のウィルスに対して活性な治療組成 物を製造するのに使用することにある。塩素化有機化合物として、有機クロラミ ン、例えばクロラミン−Ｔを有利に使用することかできる。クロロアゾジンが優 先的に使用される。この化合物のウィルスＨＩＶに対する活性は１　ｍｇ／ｍｌ 〜３゜Ｏμｇ／’ｍｌ、特に、６６０　μｇ／ｍｌ〜３３０　μｇノ’ｍｌの非 常に低い濃度に対して完全である。

ここで、「消毒」とは、酵素的又は池の細胞内の不活化をも意味する。

ｌｒ機クりラミン類は細胞媒体においてその安定性を維持することかでき、生存 細胞と適合性かあり、細胞に対して非毒性である。タンパク質の存在によって、 利用可能な塩素のゆっくりとしたまた永続的な放出作用は実質的に影響を受けな い。例えば、傷、１１傷又は皮膚若しくは粘膜の一部を消毒するための局所消毒 組成物を製造するためにクロラミン−Ｔ又はクロロアゾジンの使用が特に提供さ れる。タンパク質媒体におけるクロロアゾジンの著しい安定性のための結果とし てＡＩＤＳの全身的な治療のための医薬を製造するために上記クロロアゾシンを 使用すてンニとか考えられる。

上述したように、有機クロラミン類は、広い殺微生物スペクトルを提供する大き な利点を有し、従って、レトロウィルスＨＩＶ以外の病原性又は同種異形の作用 物質に対する認めつる防御を既に形成する。

この特性は、得られる広範な消毒作用のためたけてなく、その性質がウィルスキ ャリア自信にとっても作用であるか故に、大変に重要な事項である。ウィルスキ ャリアはリンパ球の活性化をできるだけ効果的に避けなければならない。Ｆ（Ｉ Ｖキャリアにとって、かかる活性化はウィルスの復製及びキャリアの細胞への増 殖の結果をもたらす。ＨＩＶキャリアは、感染細胞の活性ｒヒの危険性及びその 結果としての生体の免疫反応を避けるために、衛生的な生活習慣に従うことが有 利である。

本発明の活性剤及び組成物を使用することにより、ウィルスキャリアは自分自身 を殺菌でき、更に別の源からの免疫反応に対する保護か得られる可能性を有する 。

本発明について、幾つかの非限定的な実施例によって更に詳細に説明する。

実施例１ 洗浄用の消毒粉末 クロロアゾシン　２５０ｍｇ ラクトース　Ｉｍｇ この粉末は、袋に貯蔵することかでき、また水］リットルに溶解させることかで きる。

実施例２ 軟膏剤 １チユーブ当たり、　「イエローソルフト（ｙｅｌｌｏｗ　５ｏｌｆｔ）　Ｊパ ラフィン中にクロラミン−Ｔ　１％ 実施例３ 実施例４ 膣錠 粉末状クロロアゾジン、酒石酸及び重炭酸ナトリウムを、薬学的に好適な割合で 混合し、得られた混合物を圧縮して膣錠とした。

実施例５ 表面消毒用の製品又は飲料用の水 ４ｍｇのハラゾーンを１リツトルの水に希釈した。

Ｉｎ５ｔｉｔｕｔ　Ｐａ５ｔｅｕｒ　ｄｕ　Ｂｒａｂａｎｔの実験室て、実験分 析を行い、本発明の活性剤の効果を調へｔ島 その分析物は、初めの材料として以下のものを含む。

・Ｎ、　Ｎ’−ジクロロアゾジカルホンアミシン（クロロアゾシン）（純度９５ ％）純度は薄層クロマトグラフィー及び炭素−水素試験（Ｂｒａｚ　Ｇ、　１． 　ら、Ｊ、　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｃｈｅｍ、　（ＵＳＳＲ）　１７：５６５−９（ ＋９４４））によって測定した。

・ＨＩＶ−１ウイルスを連続的に生産する細胞培養物（Ｍｏｌｔ−３）の上澄使 用ウィルス上澄は、ｌ　ｘ　Ｉ　Ｏ’ｃｐｍ／′ｍｌの逆転写酵素活性を有した 。

・ＲＰＭＩ培養基で培養し、更に１０％の牛胎児血清及び１％のグルタミンを付 与した、１４表現型の連続ヒトＴライン（Ｓｕｐｔ−１）の細胞クロロアゾジン の効果を以下の２つの点についてまず調へた。

（ａ）Ｓｕｐｔ−１ラインに対するＨＩＶ−１ウイルスの感染力における作用（ ｂ）　５ｕｐｔ−１細胞の染色体ＤＮＡ中へのウィルスゲノムの導入に対する作 用この分析の結果を以下の実施例６〜８で報告する。

実施例６ Ｓｕｐｔ−１細胞に関するクロロアゾジンの毒性の試験１１５００に希釈したク ロロアゾジン（即ち、２　ｍｇ、’ｍｌ）は５ｕｐｔ−１細胞に対して毒性を有 していた。Ｉ／Ｉ　５００及びＩ／３０００の希釈物（即ち、６６０μｇ／ｍｌ 及び３３０μｇ／ｍｌ）は細胞の生存率を低下させない。

実施例７ Ｓｕｐｔ−１ラインに対するＨ［Ｖ−１ウイルスの感染力高含量のＨＩＶ−１の ウィルス調製物を、クロロアゾジンの１／１５００及びｌ／３０００の希釈物の 存在下及び種々の期間にわたって培養した。３０分間５ｕｐｔ−１細胞を予め３ ７°ＣてＩＯμｇ／ｍｌのポリブレン（ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ）て処理し、次いて 処理ウィルス調製物とともに培養した。コントロールとして、非培養細胞及び非 処理ウィルス調製物で培養した細胞を準備した。

次いて、調製物の感染力を各々の細胞継代について測定し、ウィルス産生（発現 したｐ２４抗原を測定）を、測定した５ｕｐｔ−１細胞の溶解した細胞溶解産物 において行った。

クロロアゾノンでの培養後のＨＩＶ−１ウイルスの感染力の測定は、表１〜３及 びそれに各々対応する図１〜３から行った。これらの図面において、縦座標は光 学濃度（Ｄ、　０．　）を示し、横座標は感染後の日数を示す。実線は、非処理 コントロールを示し、破線はクロロアゾシンの１／＋５００希釈物を示し、点線 はクロロアゾジンの１／３０００希釈物を示す。

これらの分析結果から、通常の温度においては、活性剤との１分、１ｏ分及び３ ０分の培養後において、１／１５００及び１／３０００の希釈率を存するクロロ アゾジンは全体的に５ｕｐｔ−１細胞におけるＨ［Ｖ−１ウイルスの増殖を抑え ることか分かる。

位相差顕微鏡によれば、予めクロロアゾジンで処理したウィルスを接種した細胞 については細胞変性性は観察されなかった。これとは対照的に、合胞体（ノンノ チウム）か、コントロールのウィルス調製物で感染させて１４日してから現れた 。

実施例８ ウィルスゲノムの５ｕｐｔ−１細胞染色体ＤＮＡへの導入熱安定性のポリメラー ゼによる遺伝的増幅方法によって、ＨＩＶ−１プロウイルスの遺伝子ｒｇａｇ　 Ｊ、ｒＬＴＲＪ及びｒｅｎｖ　Ｊの存在を明らかにした。この方法は、Ｐ、Ｃ， Ｒ，（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　Ｃｈａｉｎ　ＲｅａｃｔｉｏｎＸＣｈｉｎ−Ｙｉ ｈ　Ｏｕ　ら、５ｃｉｅｎｃｅ、２３９：２９５−Q９７゜ １９８８）と呼ばれる。

この方法は、実施例７て示されているように、クロロアゾジンで培養したＨＩＶ −■ウィルスで接種した５ｕｐｔ−１細胞のゲノムにおけるＨＩＶ−１プロウイ ルスを検出するのに使用される。

エチジウムブロマイドにより、紫外線で可視化した増幅オリゴヌクレオチドはク ロロアゾノンで処理しなかったＨ［Ｖ−１ウイルスを接種したチューブにおいて たけ現れた。

更に、これら３種の検査した遺伝子に対して、特定のＰ３２を標識した糸状菌と 雑種形成させた後、クロロアゾジンの１／＋５００及び１／３０００希釈物て処 理したＨ［Ｖ−１ウイルス粒子の接種物を取り入れた５ｕｐｔ−１細胞内にはＨ ＩＶ−１プロウイルスか全体として存在しないと結論することかできる。

実施例６〜８の分析から、非常に短時間（１分以下）で細胞内において低濃度の クロロアゾツノによりウィルスを完全に撲滅することかできることか分かる。

ウィルスに対するり０ロアゾジ７・のこの著しい活性か有機媒体において生しる ことは明記すべきことがらである。

実施例９ 血清陰性の患者（ＰＢＬ）の血液からえられたヒトリンパ球に、Ｍｏ１ｔ−３細 胞、即ち連続的にＨＩＶ−１ウイルスを産生する細胞の上澄から得れるＨＩＶ− １を感染させた。

感染後８日に、抗原ｐ２４の発現によって（エライザ法　実施例７を参照）ウィ ルスの存在を確認した。

以下の４種の細胞集団の死亡率を調へた。

１、培養した通常のリンパ球（コントロールＡ）２　クロロアゾジンＩ／３００ ０の存在下での通常のリンパ球３、非処理の感染リンパ球（コントロールＢ）４ 、　クロロアゾジンＩ／３０００の存在下での感染リンパ球表４ 細胞　期間（分）　生存細胞　死細胞　死細胞の数　の数　の％ コントロールＡ　Ｉ　２＋　２０　４９リンパ球十 クロロアゾジン　！　＋５　２（１５７コントロールＢ　Ｉ　１９　１５　４９ １８０　１２　＋９　６１ 感染リンパ球十 クロロアゾジン　１　１７　３１　６５この比較実験結果から、感染リンパ球は クロロアゾジンの存在下では強く破壊される。実際問題としてコントロールＡ及 びＢと、健康なリンパ球＋クロロアゾノンとの差異は重要てはないが、感染リン パ球の培養物はクロロアゾジンの存在下で１５％の死亡率の増大を示すことか分 かる。

このことから、クロロアゾジンか感染細胞に対して選択的な毒性を示すことか分 かる。

実施例１０ Ｈ（Ｖ−１細胞を連続的に産生ずるＭｏ１ｔ−３細胞を、１分、１０分及び３０ 分という期間、希釈率かｌ／１５００及びｌ／３０００のクロロアゾジンで処理 した。

培養上澄で発現した抗原ｐ２４を、２４時間、４８時間、７２時間及び９６時間 後に調へた。

感染した細胞に対する物質の毒性による影響を受けずに、この効果を測定するた めに、非常に多（の細胞数を選択し、９６時間後に非常に低いかつ十分な数の生 存細胞を維持した。

結論として、クロロアゾジンは感染細胞による１（ＩＶの産生を阻止し、非感染 細胞での再集団化の場合には、９６時間後に非感染培養物を提供することかでき る。

実施例１１ ＨＩＶ−１で感染させたヒトリンパ球を使用することを除いては、実施例１０を 行った。クロロアゾジンは、１時間、３時間及び６時間の間、希釈率１／３００ ０て感染細胞上で使用した。

実施例１Ｏの場合と同一の結論かこの実施例の場合にも適用される。

十分な数の生存リンパ球を得るために、分析を６時間までとした。

実施例１２ ３３０μｇ、／ｍｌのクロロアブジンの毒性及びクロロアブシンと４級界面活性 剤との環境に対する毒性を、魚に対する毒性によって評価した。

化合物は、消毒の為に使用する場合には、環境に対する毒性の限界値に至らない 。

実施例１３ 消毒組成物 クロロアゾジンと、七トリミドと呼ばれるアルキルトリメチルアンモニウムプロ ミドの消毒混合物とを含む組成物を調製した。相乗性に関する研究によれば、こ の組成物は、１０％の牛胎児血清の存在下、２５°Ｃて５分間で、以下の微生物 を完全に阻害した。

Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ　、　Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ、　 Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ@ｐｎｅ ｕｍｏｎｉａｅ　、　５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｙｏｇｅｎｅｓＳＭｙｃ ｏｂａｃｔｅｒｊｕｍ　ｆｏｒｔｕｉｔｕｍ　、　Ｐｒｏｔ■浮■ ｖｕｌｇａｒｉｓＳＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａＳＳａｌｍ ｏｎｅｌｌａ　ｇｒｏｕｐ　Ｂ、　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅ秩@ａ ｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ、　５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　５Ｈ ｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　ｌウィルス、ｖｅｓｉｃｕｌａｒ　ｓｔｏｍａｔ ｉｔｉｓウィルス、レトロウィルス、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｆｕｍｉｇａｔ ｅｓ　。

Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ　ｃａｎｉｓ　、及びＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｒ　ｒｕ ｂｒｕｍ。

血液及び有機材料においても活性を仔する錠剤の組成物を調製した。

クロロアゾジン　３３０■ アルキルトリメチル アンモニウムプロミド （セトリミト）　１００ｍｇ クエン酸　１５０■ 酒石酸　１７５ｍｇ ＮａＨＣＯ＋　３７５ｍｇ アヒセルＰＨ＋０２　１８０■ ラクトースεＦＫ　５２２ｍｇ エアロノル２００　３．８ｍｇ デナトニウムベンゾエート　０．２■ （ｄｅｎａｔｏｎｉｕｍ　ｂｅｎｚｏａｔｅ）１錠につき　１８３６ｍｇ 投与量　水１リットルに対して１錠 要約書 レトロウィルス群のウィルスに対する活性剤、その活性剤を含む組成物及びそれ らの使用。

無生物物体においてレトロウィルス群のウィルス、特にヒト免疫不全ウィルスＨ ＩＶに対する活性剤であって、利用できる塩素を溶液中に安定してかつ永続的に 放出する塩素化有機化合物かＩ）なる活性剤が開示される。また、その活性剤を 含む、無生物物体のための消毒組成物、無生物物体を消毒するためのかかる活性 剤及び組成物の使用、並びにレトロウィルス群のウィルスに対して効果的な治療 組成物を製造するために、溶液で安定してかつ永続的に利用できる塩素を放出す る少なくとも一種の塩素化有機化合物を使用することが開示される。

国際調査報告 ””””””　ＰＣＴ／ＥＰ　９０１０２１１１国際調査報告

Claims (28)

【特許請求の範囲】
1. １．無生物物体における、レトロウイルス群のウィルス、特にヒト免疫不全ウィ ルスＨＩＶに対する活性剤であって、前記活性剤が、液中において利用できる塩 素を安定かつ永続的に放出する塩素化有機化合物からなる活性剤。
2. ２．前記塩素化有機化合物が５分より短い期間、好ましくは１分間、前記ウィル スに対して活性である請求項１記載の活性剤。
3. ３．前記塩素化有機化合物がその効果的な濃度において前記レトロウイルスに対 して低い毒性を有する請求項１記載の活性剤。
4. ４．前記塩素化有機化合物が有機媒体内で活性である請求項１記載の活性剤。
5. ５．前記塩素化有機化合物が有機クロラミン類から選択される請求項１記載の活 性剤。
6. ６．前記有機クロラミンがスルホンアミドのＮ−クロロ誘導体である請求項５記 載の活性剤。
7. ７．前記スルホンアミドのＮ−クロロ誘導体がクロラミン−Ｔ、ジクロラミン− Ｔ、クロラミン−Ｂ又はハラゾーンである請求項６記載の活性剤。
8. ８．前記有機クロラミンが環中に窒素原子を有する複素環式化合物のＮ−クロロ 誘導体である請求項５記載の活性剤。
9. ９．前記Ｎ−クロロ誘導体がハラン（ｈａｌａｎｅ）（１．３−ジクロロ−５． ５−ジメチルヒダントイン）又は塩素化イソシアヌレートである請求項８記載の 活性剤。
10. １０．前記有機クロラミンがグアニジン誘導体からの縮合アミンのＮ−クロロ誘 導体である請求項５記載の活性剤。
11. １１．前記Ｎ−クロロ誘導体がクロロアゾジンである請求項１０記載の活性剤。
12. １２．前記有機クロラミンがアニリドのＮ−クロロ誘導体である請求項５記載の 活性剤。
13. １３．無生物物体の消毒組成物であって、１以上の請求項１記載の活性剤と、適 当な担体と、任意の他の消毒剤又は通常の添加剤とを含む組成物。
14. １４．１ｍｇ／ｍｌ〜３００μｇ／ｍｌ、特に６６０〜３３０μｇ／ｍｌの濃度 のクロロアゾジンの水溶液を含む請求項１３記載の組成物。
15. １５．クロロアゾジンと、他の消毒剤、即ち、アルキルトリメチルアンモニウム ブロミドとを含む請求項１３記載の組成物。
16. １６．レトロウイルス群のウィルス、特にヒト免疫不全ウィルスＨＩＶに関して 無生物物体を消毒するための請求項１記載の活性剤の使用。
17. １７．消毒すべき無生物物体がプラスチック製、ゴム製又は織物製の衛生材料、 医療、獣医医療又は歯科医療器具又は衣服、栄養分野における取扱いを要する物 体、美容器具、衛生に関する乗物、地面又は壁の表面、衛生器具、水泳プール用 の水、飲料等である請求項１６記載の使用。
18. １８．前記無生物物体が排泄物、分析実験室からの廃棄物、ヒト又は動物の体か らの試料等である請求項１６記載の使用。
19. １９．前記無生物物体が化粧組成物である請求項１６記載の使用。
20. ２０．前記無生物物体が、ヒト又は動物体、任意にウィルスキャリアの皮膚又は 粘膜と接触しうる製品であって、前記活性剤が該製品において前記ウィルスの伝 染に対するバリヤーを同時に形成する製品である請求項１６記載の使用。
21. ２１．前記製品が、外科医又は歯科医用手袋、ペッサリー、保存鞘などである請 求項２０記載の使用。
22. ２２．レトロウイルス群のウィノしス、特にヒト免疫不全ウィルスＨＩＶに対し て活性な治療組成物を使用するための、利用できる塩素を溶液中に安定してかつ 永続的に放出する少なくとも一種の塩素化有機化合物の使用。
23. ２３．前記塩素化有機化合物が５分より短い期間、好ましくは１分間、前記ウィ ルスに対して活性である請求項２２記載の使用。
24. ２４．前記塩素化有機化合物が低い毒性を有し、かつ前記ウィルスに対して効果 的な濃度において薬学的に適合性がある請求項２２記載の使用。
25. ２５．前記塩素化有機化合物が、有機媒体において活性である請求項２２記載の 使用。
26. ２６．前記塩素化有機化合物が、有機クロラミン類から選択される請求項２２記 載の使用。
27. ２７．前記有機クロラミンが、クロラミン−Ｔである請求項２６記載の使用。
28. ２８．前記有機クロラミンが、クロロアゾジンである請求項２６記載の使用。