JPH05503689A

JPH05503689A - ＧｎＲＨ類似体

Info

Publication number: JPH05503689A
Application number: JP2515871A
Authority: JP
Inventors: ホージャー，キャロル・エイ; リヴィアー，ジーン・エドアード・フレデリック; セオバード，ポーラ・グウェス; ポーター，ジョン・エス; リヴィアー，キャサリン・ローレ; バル，ウィリー・ウォーカー，ジュニア
Original assignee: ザ・ソーク・インスティチュート・フォー・バイオロジカル・スタディーズ
Priority date: 1989-10-30
Filing date: 1990-10-30
Publication date: 1993-06-17
Also published as: KR920702351A; EP0500695A1; AU6739290A; ATE163430T1; NZ235812A; IL96094A0; PT95742B; US5169932A; IL96094A; IE903881A1; PT95742A; WO1991006543A1; AU633384B2; CA2066184A1; DE69032070D1; EP0500695A4; EP0500695B1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】旦二尺旦厘似体本発明は一般に、アンナチュラルなアミノ酸を含むペプチドと、例えばＬｙｓ、Ｏｒｎ、Ｄｐｒ及びＤｂｕのようなジアミノ酸に由来する、新しいアンナチュラルなアミノ酸の製造方法とに関する。さらに詳しくは、本発明は、このような完全集成ペプチドとして又は通常の連鎖延長合成方法の一部としてこのようなペプチドに添加するものとして製造されうる、このようなアンナチュラルなアミノ酸を有するＧｎＲＨ類似体に関する。

さらにより特定の１実施悪様では、本発明は、生殖腺機能と、ステロイドホルモン、プロゲステロン及びテストステロンの放出とを阻害するペプチド、このようなステロイドの放出を促進するペプチド、並びに排卵を促進もしくは防止する方法に関する。

産明９背旦下垂体は視床下部として知られる脳の底部の領域に柄（ｓｔａｌｋ）によって結合する。特に、時にはゴナドトロピン又は性腺刺激ホルモンとも呼ばれる濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）は下垂体によって放出される。これらのホルモンは、協同して、生殖腺の機能を調節して、精巣ではテストステロンを、卵巣ではプロゲステロンを産生させる、これらはまた生殖体の産生と成熟とを調節する。

下垂体の前累によるホルモン放出は通常、視床下部によって産生される他の種類のホルモンの先行放出を必要とする。視床下部ホルモンの１種は性腺刺激ホルモン、特にＬＨの放出を誘発する因子として作用し、このホルモンはここではＧｎＲＨと呼ぶが、これは今までＬＨ−ＲＨ及びＬＲＦとも呼ばれていたホルモンである。ＧｎＲＨは単離され、次の構造を有するデカペプチドとして特性化されペプチドは、１つの酸のカルボキシル基が他の酸のアミノ基に結合する２個以上のアミノ酸を含有する。上記の式：ＧｎＲＨはペプチドの通常の表現方法によるものであり、式の左側にはアミン末端基が存在し、右側にはカルボキシル基が存在する。アミノ酸残基の位置はアミノ酸残基を左から右へ番号を付けることによって、確認される。ＧｎＲＨの場合には、Ｃ末端のグリシンのカルボキシル基のヒドロキシル部分がアミノ基（ＮＨ２）によって置換されている、すなわちＣ末端はアミド化されている。上記の各アミノ酸残基の略号は慣習的であり、アミノ酸の慣用名に基づくものであり、飼えばｐＧｌｕはピログルタミン酸であり、Ｇｌｕはグルタミン酸であり、Ｈｉｓはヒスチジンであり、Ｔｒｐはトリプトファンであり、Ｓｅｒはセリンであり、Ｔｙｒはチロシンであり、Ｇｌｙはグリシンであり、Ｌｅｕはロイシンであり、Ｎｌｅはノルロイシンであり、Ｏｒｎはオルニチンであり、Ａｒｇはアルギニンであり、ｈａｒはホモアルギニンであり、Ｐｒｏはプロリンであり、Ｓａｒはサルコシンであり、Ｐｈｅはフェニルアラニンであり、Ａｌａはアラニンであり、Ｖａｌはバリンであり、Ｎｖａはノルバリンであり、Ｉｌｅはインロイシンであり、Ｔｈｅはスレオニンであり、Ｌｙｓはりシンであり、Ａｓｐはアスバルギン酸であり、Ｇｌｎはグルタミンであり、Ｍｅｔはメチオニンである。グリシンを除いて、本発明のペプチドのアミノ酸は、特に記載しないかぎり、Ｌ−立体配置である。

雌の哺乳動物の排卵の防止が望ましい理由がある場合には、ＧｎＲＨの正常機能に拮抗するＧｎＲＨ類似体の投与を利用して、排卵を抑制するか又は遅延させる。この理由から、ＧｎＲＨに拮抗するＧｎＲＨ類似体が避妊薬としての可能な用途のために又は受胎期間の調節のために開発されている。ＧｎＲＨ拮抗薬は早熟思春期及び子宮内膜症の治療にも用いられている。このような拮抗薬は雄の哺乳動物におけるゴナドトロピンの分泌を調節するために有用であることが判明しており、例えば男性の性犯罪者の治療のため及び前立腺発育不全症の治療のための男性避妊薬として、精子形成の抑止に用いられている。さらに詳しくは、ＧｎＲＨ拮抗薬は例えば前立腺腫瘍及び乳房腫瘍のようなステロイド依存性腫瘍の治療に使用可能である。女性では、ＧｎＲＨ拮抗薬は多毛性早弊症にも使用可能である。

他方では、ＧｎＲＨ拮抗薬はＬＨ及びＦＳＨの放出の促進に、ＧｎＲＨと同様に、機能し、より大きい生体効力（ｂｉｏｐｏｔｅｎｃｙ）及び／又はより長い作用持続期間を有する拮抗薬か貴重であると考えられる。

１態様では、内因性ＧｎＲＨに強く拮抗し、ＬＨの分泌及び哺乳動物の生殖腺によるステロイドの放出を防止するか、又は特に重要なＧｎＲＨの強力な拮抗薬であり、経口投与した場合にインビボでより有効な化合物である改良されたペプチドを提供することが望ましい。

泣咀Ω型！本発明は、新たに製造されうるアンナチュラル　アミノ酸又は、修飾されつる１個以上のアミノ酸残基を含む好ましい総塩基配列を含有する既製ペプチドもしくは保護されたペプチド樹脂を修飾することによって製造されうるアンナチュラル　アミノ酸を提供する。本発明の好ましいアミノ酸は修飾グアニジノ基を含むもう一つの特定の態様では、本発明はヒトを含めた哺乳動物のゴナドトロピン放出を抑制するペプチドを提供し、雄及び雌の哺乳動物の生殖腺によるステロイド放出を抑制する方法をも提供する。本発明は又、ＧｂＲＨの強力な拮抗薬であり、哺乳動物の生殖プロセスの促進に使用可能な改良ＧｎＲＨ類似体をも提供する。

上述したように、これらのＧｎＲＨ拮抗薬を用いて、早熟思春期、ホルモン依存性腫瘍形成、月経困難、子宮内膜症及びステロイド依存性腫瘍を含めた、種々な状況下でのゴナドトロピン及び性ホルモンの産生を抑制することができる。

本発明は次式Ｕを有するアンナチュラル　アミノ酸を提供する：式中、ｎは１〜６の整数であり、好ましくは１．２．３又は４である。Ｙ−Ｎ−ＣＮ、Ｎ−Ｃ０ＮＨＲＩ、Ｓ、０又はＣＨ−ＮＯ２、コノ場合Ｒ１はＨ，Ａｃ。

アルキル（好ましくはＣｌ−Ｃ４）、ナフチル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、インドリル、キノリニル又はイミダゾリルであり、アルキル基及び環状基は非置換又は置換（好ましくはクロロ、フルオロ、ブロモ、アミノ、ニトロ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル及びＣＩ−Ｃ，アルコキシによる）基である。Ｘ−ＮＨ，ＯＳＳ。

Ｎ１、Ｍｌ−（ＣＨ−）　、Ｍｚ又はＭｌ　（ＣＨ２）−’　Ｍ２　（ＣＨ２） −”　Ｍｓ、この場合Ｍ、はＮＲ，。、Ｎ、ＯｌＳ又はＣＨＲｓ　（Ｒｓはメチル、エチル、プロピル、フェニル、ピリジニル、ピリミジニル又はプリニルである）である；　ｑ＝＝ｌ又は２；ｐ、　ｐ＋　、り”はＯ〜６の整数である：Ｒ４゜はＨ、メチル、エチル、プロピル、フェニル又は置換フェニル（好ましくはＣＩ、ＦＳＮｏ□又はＮＨ２による）である、及びＭ２とＭ　！　＝　Ｍ　Ｉ、　ＣＯＯＨ１ＣＯＮ　Ｈｚ、ＣＯＯＲｓ又はｃＮ（好ましくはＸはＮＨｌｏ又はＳである）　；　Ｒｌ　＝　Ｈ、アルキル（好ましくはＣＩ〜Ｃ６、最も好ましくはＣ５〜Ｃ４）、修飾アルキル（好ましくはＣＩ−Ｃｓ、これの末端炭素はＮＨ２、ＯＨ，ＣＩ、ＢｒもしくはＦのいずれかによって置換されるか、又はＣＦ３もしくはＣＦＩＣＦ、によって置換される）、アルケニル（好ましくはＣ２〜Ｃ２）、例えばＣＨ２ＣＨ譚ＣＨＲ３、アルケニル（好ましくはＣ２〜Ｃ１）、例えばＣＨ２ＣＨミＣＨＲ，、アリール、例えばベンジル、トリル、ｐ−アミノ −ベンジル（アナリニル）及びｐＣＩ−ベンジル又はＸへの直接結合、Ｒ，−Ｒ１、ＯＨ，ＮＨ２、ＮＨＲ，、複素環（好ましくは以下で説明するような複素環）又はｄｅｓＲ２、この場合Ｘ−Ｎ５であるときにＲ７はｄｅｓＲ，である。任意に、ＲｚとＸは相互結合しうる、又はＲ１とＲ２は−（ＣＨ２）、−もしくは −（ＣＨ２）−Ｍ−（ＣＨ２）、’　−型の枝分かれもしくは非枝分かれメチレン架橋を介して相互に結合可能である。このようなＲ，−Ｒ２部分では、ｍとｍｏは１〜６の整数、好ましくは１〜３の整数である。Ｍ＝ＮＨ，ＯｌＳ又はＣＨＲ，、この場合Ｒ１は低級アルキル又はアリールであり、好ましくはメチル、エチル、プロピル、フェニル又はｐＣＩ−フェニルであり、Ｍは好ましくは０又はＳである。最も好ましくは、Ｒ１とＲ２が相互結合する場合に、Ｒ１とＲ２は式ＵのｒＮ−Ｃ−ＸＪ部分と共に５．６又は７員複素環を形成する。環状ペプチドを形成することが望ましい場合には、ＸＲ，は同じペプチド内のもう一つのジアミノ屡の一部を含むことができる、例えば５−位置残基のオメガアミノ酸は８− 位置のこのようなアンナチュラルアミノ酸残基にこのように結合することができる。

一定アミノ酸又はペプチドの特定第一アミノ官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎ）の修飾は適当な保護ペプチド又はアミノ酸の適当な試薬による処理によって行われる、ＹがＮ−ＣＮであるペプチド又はアミノＷＩ（ここではシアノグアニジンと呼ぶ）は、アミノ基とジフェニルシアノ力ルポニミジン酸（１）との反応によって製造される式中、ｒＱＪは式Ｕの一部として第一７ミノ基を有するペプチドの主要部分又はアミノ酸（例えば、上述のアミノ酸）を大ざっばに表すために用いられる。

Ｎ−置換−Ｎ゛Ｎシーノー０−フェニルイソ尿素（ｎ）を有するペプチド又はアミノ酸は、第二求核ＨＸＲ，との反応によってｍｓするか、又はさらに官能基化して（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ）、式（Ｉｌｌ）を有するシアノグｙ−１ −ジン含有ペプチドもしくはアミノ酸を製造する例えば、ＨＸ　Ｒ２”　Ｈ２Ｎ　ＣＨ２−ピリジンである場合に、結果はこの基はＮ−ｇ−シアノ−Ｎ−ｇ’　 −３−メチルピリジルグアニジノとも呼ばれる（ＩＵＰＡＣ命名法）。

このような化合物を酸性条件下で加水分解すると、生体効力も有する例えば次のような化合物が得られるここではＮ−ｇ’　−アミド基を含むものとして表される加水分解型は、ホスゲン誘導体とグアニジノ官能基を有する部分との反応によって直接合成することもできる。

ＨＸＲ２が別のペプチド又は蛋白質の７ミノ基である場合には、シアノグアニジン部分によって結合した、ペプチド−ペプチド　ダイマー又はペプチド−蛋白質ダイマーが得られる。ＨＸＲ２が同じペプチド中の別のアミノ酸のＮ−末端第一アミノ基又は側鎖アミノ基である場合には、シアノグアニジン部分によって結合した環状ペプチド（ｒＶ）が得られる゛式中、Ｑ＋とＱ２は同じペプチド中の２７ミノ駿残基の残りを表す。後の線状ペプチドの環化とは対照的に、ペプチドレジンの一部中でシアノグアニジン誘導体による環化が行われることが好ましい。

−ＸＲ，が第二求核部位を含み、Ｘが一般形：Ｍ＋　（ＣＨ−）−Ｍ２又はＭ、 −（ＣＨｚ）、’　Ｍ２　（ＣＨ２）−’　Ｍｓを有し、Ｍｌ、Ｍ２及びＭ、が個々にＮＨｌＮ、　ＯｌＳ又はＣＨＲ３であり、ｐ、ｐ’　、ｐ″が０．Ｌ　２又は３であり、ｑが１または２であるときには、特別な場合が生ずる。このような核試薬の例はＨ，ＮＮＨ２、ＣＨｓ　ＨＮ　Ｎ　Ｈｘ、ＣＨｓ　ＨＮ　Ｎ　ＨＣＨｓ、Ｈ２ＮＯＨ，及びＨ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ，ＯＨを含む。この場合には、形成されるシアノグアニジン部分は対応複素環式化合物（Ｖ）に転化されうる、これはオメガアミノ基と下記のようなシアノ基との反応によって初期中間体から形成される：例えば、　Ｘ　Ｒ２＝　ＨＮ　Ｎ　Ｈｚの場合、さらに、−Ｘ　Ｒｘ　−ＣＨｓ　Ｎ　Ｎ　ＨＣＨｓの場合、ＸＲ，がカルボン酸基又は同等な基、特にカルボン酸エステル又はカルボン酸アミドを含む場合には、Ｍ、がＮであるときに、複素環式部分、例えば飽和ピリミジン様部分（ｖＩ）がカルボン酸基と第二アミノ基（Ｒ１）との反応にょフて形成され、Ｍｌが０又はＳであるときには、同様な６員複素環式部分が形成される。例えば、ＲｚはＭｌ　（ＣＨ−）− Ｍｚであ”）、Ｍｘ−ＣＯＯＨ−ＣＯＯＣＨｓ又はＣＯＮ　Ｈ２、ｐが１〜４である。例えば、脂肪族カルボン酸基が存在し、ｐ　−２であるような場合には・Ｒ７がオルト置換芳香族カルボン酸、例えば安、は香１１（ｑ−１及びｐ−６）を含む場合には、対応キナゾリン様化合物種（■）が形成される：このような安息香酸をさらに置換することができ、このような置換は他の４環位置のいずれにおいても上述のように行われて、非置換体と同等であると考えられる対応置換キナゾリン様部分を形成することができる。Ｘ゛はＨ，ＣＩ、Ｂｒ、Ｆ、ＮＨＣＨ！又は５ＣＨｓであり、Ｒ７とＲｓはＨＳＣＨ！又はＣＨ２ＣＨｈＴＦありうる。

Ｘ＝Ｎ３、Ｒ２がｄｅｓＲｚ（すなわち欠失）である分子は、−Ｎ３基の活性のためにフォトラベリングに有用であり、部分（ｎ）とアジ化ナトリウム（ＮａＮ。

）との反応によって形成される。

Ｙが０である（ここでは、尿素と呼ぶ）又はＳである（ここでは、チオ尿素と呼ぶ）ペプチドは、好ましい側鎖アミノ基を適当なイソシアネート又はインチオシアネートで処理して、このような尿素又はチオ尿素をそれぞれ得る周知の方法によって製造される。

ＹかＣＨ−Ｎｏ、−ｒ：８８ペプチド又はアミノ酸（ここでは、ジアミノニトロエチレンと呼ぶ）は対応尿素のカルボジイミドへの転化：及び次のニドＯメタン陰イオン（乾燥ＤＭＦ中のニトロメタンへの水素化ナトリウムの作用によって形成）による処理によって製造される。

使用可能な代替え合成方法は次の通りである：Ｈ−Ｃ−Ｎｏ２Ｈ−Ｃ−Ｎｏ２Ｑ−冊、　＋　ｌ　−−−−＞　１ＣＨ３Ｓ−Ｃ−５ＣＨ，０ＮＨ−Ｃ−５ＣＨ。

一般に、本発明によると、ＧｎＲＨの拮抗薬又は作用薬（ａｇｏｎｉｓｔ）であるペプチドが合成される、すなわちこれらはヒトを含めた哺乳動物の下垂体によるゴナドトロピン分泌を強度に抑制するか、又は生殖腺によるステロイド放出を抑制する、あるいはこれらはこのような分泌又は放出を強度に抑制する。これらのペプチドは５−位置及び／又は６−位置及び／又は８−位置に１個以上の式Ｕアンナチュラルアミノ酸を含むＧｎＲＨ類似体である。拮抗薬は１−位置置換基（ｓｕｂｓ　ｔ　ｉ　ｔｕｔ　１ｏｎ）　、好ましくはデヒド０Ｐｒｏまたはβ −（１−又は２−ナフチル）−Ｄ−アラニン（以下では、β−Ｄ−ＩＮＡＬ又は β−り一２ＮＡＬ）　、修飾Ｄ−Ｐｈｅとしての２−位置置換基、及び好ましくは置換もしくは非置換Ｄ−ＴｒｐＳＤ−３ＰＡＬもしくはβ−Ｄ−ＮＡＬとしての３−位置置換基を有するべきである。５−位置は（ａ）Ｔｙｒ、（ｂ）水素化もしくはメチル化ＰｈｅもしくはＴｙｒ、（ｃ）Ａｒｇ、（ｄ）側鎖アミノ基が３−カルボキシピリジンにコチン酸）又は２もしくは４−カルボキシピリジン、すなわちｆ−ｙｓ　（ｃｐｄ）、好ましくはＬｙｓ　（３ｃｐｄ）［Ｌｙｓ　（Ｎｉ　ｃ）とも呼ぷコによってアシル化されたＬｙｓ、（ｅ）Ｈ’ｉ　ｓ又は（ｆ）アミノ酸Ｕの残基によって占められることができる。作用薬はＵである６− 位置置換基を有し、拮抗薬は６−位置にＵ又はこのような置換Ｌｙｓもしくはアシル化Ｌｙｓを有する。

両者とも、７−位置のＬｅｕの代わりに、Ｎｌ　ｅＳＮＭＬ、Ｐｈｅ、Ｎｖａ、Ｍｅ　ｔＳＴｙｒ、Ｔｒｐ又はＰＡＬを有することができ、この中Ｐｈｅ又はＴｒｐは置換可能である。拮抗薬は８−位置に任意置換基、好ましくはＵ又は、側鎖アミン基がイソプロピルによって置換されたイソプロピルＩ、ｙｓ、すなわち（ＴＬｙｓ）もしくはＬｙｓ　（Ｉｐｒ）を有し、１〇−位置に例えばＤ−Ａ　Ｉ　ａのような置換基を有する。式Ｕの少なくとも１つのアミノ酸残基が本発明の各ペプチドに存在する。

２−位置の修ＩＨＤ−Ｐｈｅはベンゼン環に特定の修飾が存在する結果として拮抗活性を増大させる。環内のバラ−位置もしくは４−位置に水素の単独置換が行われるのが好ましいが、２−又は３−位置における置換も可能である：置換基はクロロ、フルオロ、ブロモ、メチル、メトキシ及びニトロから選択され、クロロ、フルオロ及びニトロが好ましい。環内の２．４−位置又は３．４−位置にはジクロロ置換基が存在する。α−炭素原子もメチル化されることができる、例えば（Ｃ’Ｍｅ／４Ｃ１）Ｐｈｅ、１−位置置換基はそのαアミノ基が例えばホルミル（Ｆｏｒ）、アセチル（Ａｃ）、アクリリル（Ａｃｒ）、ビニルアセチル（ＶａＣ）又はベンゾイル（Ｂｚ）、好ましくはアセチル及びアクリリルを含むように修飾されることが好ましい。ＰＡＬとＤ−ＰＡＬはピリジルアラニンのＬ−及びＤ−異性体を表し、この場合Ａｌａのβ−炭素はピリジン環の２−２３−又は４−位置、好ましくは３−位置に結合する。β−Ｄ−ＮＡＬが１−位置に存在し、ＲｓがＡｒｇでない場合には、Ｕが存在しないならば、６−位置に例えば４− ＭＨｚ−Ｄ−Ｐｈｅ、４−グアニジノ−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｈｉｓ、Ｄ−Ｌｉｓ。

Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｈａｒ　（ホモアルギニン）又はＤ−ＰＡＬが存在することが好ましい。デヒドロＰｒｏが１−位置に存在する場合には、Ｕが存在しないならば、６−位置にＤ−ＰＡＬ又は親油性アミノ酸のＤ−異性体、例えばＤ−Ｔｒｐ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｆｏｒ−Ｄ−Ｔｒｐ、Ｎｏ２−Ｄ−Ｔｒｐ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−１１ｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｖａ　ｌ、Ｄ−Ａｌａ、ジアルキルＡｒｇ、ジアルキルＨａｒＳＤ−３ｅｒ　（ＯｔＢｕ）、β−Ｄ−ＮＡＬ又は（ｉｍＢｚ　１）Ｄ−Ｈｉｓが存在することが好ましい。

これらのＧｎＲＨは生理的ｐＨより僅かに低いｐＨ，すなわち約４．５〜約６において易溶であるので、濃縮形で調合され、投与されることができ、現在好ましいＩ）Ｈ約５〜７．４での投与を容易にする。この拮抗薬は発情期前に低レベルで投与した場合に雌動物の排卵を抑制し、妊娠直後に投与した場合には受精卵を吸収させるために有効である。この拮抗薬は雄哺乳動物の避妊処理及びステロイド依存性腫瘍の治療にも有効である。作用薬はネイティブＧｎＲＨよりも実買的に効果的である。

ましい　態　の　な既述したように、アンナチュラルなアミノ酸は式Ｕ：によって表され、本発明の各ペプチドには、Ｘ、Ｙ、Ｒ，及びＲ２が既述した通りであるこのような残基が少なくとも１つ存在する。

さらに詳しくは、本発明のＧｎＲＨは次式（Ｆ、）にょ７て表される；Ｇ−ＡＡ　＋　−（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ−ＡＡ　ｓ　−３ｅｒ−ＡＡ　ｓ　−ＡＡ　ｅ−ＡＡ　ｔ−ＡＡａ　−Ｐｒｏ−ＡＡ　Ｉａ式中、Ｇは水素又は炭素数７以下のアシル基であり；ＡＡ、はデヒドロＰｒｏ。

Ｄ−ｐＧｌｕ、（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｂ）Ｄ−ＴｒｐＳＰｒｏ又はβ−Ｄ−ＮＡしてあり、ＡはＨ，ＣＩ、Ｆ、ＮＣｈ、ＣＨｓ、ＯＣＨｓ、Ｃ′″Ｍｅ／４Ｃ１゜ＣＩ２又はＢｒであり、ＢはＨＳＮＯｘ、ＮＨ２，０ＣＨｓ、Ｆ、ＣＩ、Ｂｒ、ＣＨ３、Ｎ”Ｆｏｒ又はＮ”Ａｃであり、ＡＡ、は改Ｄ−ＰＡＬ、β−Ｄ−ＮＡＬ又は（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐであり；ＡＡｓはＴｌ”、　Ｔ　ｙ　ｒ、（Ｃ）Ａｒｇ、Ｌｙｓ　（ｃｐｄ）　、Ｏｒｎ　（ｃｐｄ）　、Ｄｂｕ　（ｃｐｄ）　、Ｄｐｒ　（ｃｐｄ）、（Ａ）Ｐｈｅ、（３１）Ｔｙｒ又はＨｉｓであり、ＡＡｓは広β−Ｄ−ＮＡＬ、（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐ、（Ａ’　）　Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｄ）　Ｄ− Ｏｒｎ、（Ｄ）　Ｄ−Ｏｒｎ、（Ｄ）　Ｄ−Ｌｙｓ、（Ｄ）　Ｄ−Ｄｂｕ、（Ｄ）　Ｄ−Ｄｐｒ、　Ｄ−ＨａｒＳＤ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−Ｈｉ　ｓ、Ｄ−ＰＡＬ、（Ｃ）Ｄ−Ａｒｇ又は適当な親油性り一異性体であり、Ａ′はＡ、ＮＨ２、ＮＨＣＨ，又はｇｕａであり：ＣはＨ又は低級アルキルであり、ＤはＧ、ｃｐｄ又はアリール基であり、ＥはＨ，ｉｍＢｚｌ又はジニトロフェノールであり；ＡＡｔはＮ１ｅＳＬｅｕ、ＮＭＬ、（Ａ）Ｐｈｅ、Ｍｅ　ｔ、ＮｖａＳＴｙｒ、（Ｂ）Ｔｒｐ又はＰＡＬであり：ＡＡｓはＵ、（Ｃ’　）　Ａｒｇｌ　（Ｃ’　）Ｈａｒ又はＩＬｙｓであり、Ｃ゛　はＨ又はジ低級アルキルであり２Ａ　Ａ　１ｏはＤ−Ａｌａ−ＮＨ２、ＧＩＹ−ＮＨ，又はＮＨ（Ｒ）であり；Ｒは低級アルキル、好ましくはＣＨ２ＣＨ！であり：Ｕは上記で定義した通りである。ＡＡ。

がβ−Ｄ−ＮＡＬであり、ＡＡｓがＡｒｇでない場合には、ＡＡａかＵ、４−ＮＨｚ−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−ＯｒｎＳＤ−Ｈａｒ、Ｄ−Ｈｉ　ｓ、４− ｇｕａ−Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−ＰＡＬ又はＤ−Ａｒｇである。

デヒドロＰｒｏは３．４−デヒドロプロリン、Ｃ３Ｈ７０２Ｎを意味する。β− Ｄ−ＮＡＬはβ−炭素原子においてナフチルによって置換された、すなわち３− Ｄ−ナフチルでもあるアラニンのＤ−異性体を意味する。ナフタレンが環構造の２−位置に結合したβ−Ｄ−２ＮＡＬを用いることが好ましい、しかし、β−Ｄ −ＩＮＡＬを用いることも可能である。ＰＡＬはβ−炭素原子においてピリジルによって置換されたアラニンを表し、好ましくは、結合はピリジン環の３−位置に対してである。置換Ｄ−Ｔｒｐを用いる場合には、５−もしくは６−位置において、クロロ、フルオロ、ブロモ、メチル、アミ人メトキシ及びニトロから選択され、クロロ、フルオロ及びニトロであることが好ましい置換基によって水素の単一置換が行われる。或いは、インドール窒素を例えばホルミルによって（Ｎ’ ″Ｆｏｒ又は１Ｆｏｒ）によって又はアセチルによってアシル化することもできる。Ｎ”Ｆ　ｏ　ｒ　−Ｄ−Ｔ　ｒ　ｐ及び６ＮＯ２−Ｄ−Ｔｒｐが好ましい置換残基である。ＮＭＬはＮ’ＣＨ，−Ｌ−Ｌｅｕを意味する。Ｄｂｕはアルファ、ガンマジアミノ酪酸を意味し、Ｄｐｒはα、βジアミノプロピオン酸を意味する。デヒドロＰｒｏが１−位置に存在する場合に、Ｔｙｒ又はＵが５−位置に存在し、親油性残基が６−位置に存在することが好ましい。４−ｇｕａ−Ｄ−Ｐｈｅはバラ位置において置換したグアニジンを有するＤ−Ｐｈｅの残基を意味する。ＡｚａＧｌｙ−ＮＨ，はＮＨＮＨＣＯＮＨ２を意味する。５−もしくは６−位置におけるＡｒｇ残基のグアニジノ基は低級アルキル、すなわち炭素数１〜４のアルキル、例えばプロピル（Ｐｒ）によって置換されつる。Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−Ｄｐｒ又はＤ−Ｏｒｎが６＝位置に存在し、それか特別なアミノ酸Ｕの一部でない場合に、その側鎖アミノ基は脂肪族、複素環式又は芳香族、例えばニコチン酸でありうるアシル基によってアシル化されうる、又は１個以下のフェニル環を有するアリール基によって置換されつる。

さらに詳しくは、本発明のＧｎＲＨ作用薬作用式（Ｆ２）によって表される。

ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−５ｅｒ−Ｔｙｒ−（Ｕ）−ＡＡｔ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ −ＡＡ　１６式中、ＡＡ７とＡＡ、。は前記で定義した通りであり、好ましくはＡＡｔはＬｅｕ又はＮＭＬであり、ＡＡ、。はＮＨＣＨ２ＣＨ，である。

全体的に見て、本発明はこのように式（Ｆｌ。）を有するＧｎＲＨ類似体を提供するＧ−ＡＡ−ＡＡ２−ＡＡ’−５ｅｒ−ＡＡ５−ん輸−ＡＡｔ−ＡＡｓ−Ｐｒｏ− ＡＡ＋。

式中、ＡＡはｐＧｌｕ又はＡＡ、であり、ＡＡ、はＨｉｓ又は（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅであり、ＡＡ’はＴｒｐ又はＡＡ、であり、他の全ては前記で定義した通りである。

本発明のペプチドは伝統的な溶液合成方法によって合成されるが、好ましくは固相方法によって合成される。クロロメチル化樹脂又はヒドロキシクロロメチル化樹脂を用いることができるが、このようなＣ末端が望ましい場合には、メチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）樹脂、ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂又は、開裂時にＣ末端アミドもしくは置換アミドを直接与える、技術上公知の他の適当な樹脂を用いることが好ましい。例えば、Ｃ末端に置換アミドををするペプチドは、米国特許第４．５６９．９６７号（１９８６年２月１１日発行）に教えられているように、Ｎ−アルキルアミノメチル樹脂を用いて合成するのが好ましい。固相台或は米国特許第４．２１１．６９３号に詳述されているように、鎖中にアミノ酸を段階的に加える方法で実施される。技術上周知であるような側鎖保護基は特に反応性側鎖を有するアミノ酸の一部として含ま６るのか好ましく、Ｔｒｐのような、アミノ酸が鎖中に結合するべき他の場合には、任意に樹脂に形成される。このような合成は完全に保護された中間体ペプチドレジンを形成する一般に本発明によって形成される化学的中間体は次式によって表されるＸ【−＾Ａ −ＡＡ２（ＸＳ）−１１３−３ｅｒ（Ｘ”）−（１５−（１６−ＡＡ７（Ｉ２またｌＸ７）−口５−Ｐｒｏ−Ｘ”式中、Ｕ３はＵｏ又はＡＡ’　（Ｘ”）であり：Ｕ、はＵｏ又はＡＡｓ（Ｘ鴫又はＸＳ）であり；Ｕ６はＵｏ又はＡＡａ　（Ｘ ’又はＩ５又はＸＩ）であり；　ＵｓはＵｏ又はＡＡ８　（Ｘｓ又はＸ’）であり：ＵｏはＬｙｓ（Ｘつ、Ｏｒｎ　（Ｘ’）、Ｄｂｕ　（Ｘ’）又はＤｐｒ（Ｘ “）であり、ＸＩはポリペプチドの段階的合成に有用であると知られている種類のα−アミノ保護基であり、望ましいペプチド組成物中のＧが特定のアシル基である場合に、この基は保護基として用いられる。ＸＩによってカバーされるα− アミノ保護基の種類には、（１）アシル型保護基、例えばホルミル（Ｆｏｒ）、トリフルオロアセチル、フタリル、ｐ−トルエンスルホニル（Ｔｏｓ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、ベンゼンスルホニル、ジチアスクシノイル（Ｄｔｓ）、ｏ−ニトロフェニルスルフェニル（Ｎｐｓ）、トリチルスルフェニル、０−ニトロフェノキシアセチル、アクリリル（Ａｃｒ）、クロロアセチル、アセチル（Ａｃ）及び γ−クロロブチリル：　（２）芳香族ウレタン型保護基、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、及び置換ベンジルオキシカルボニル、例えばｐ−クロロベンジルオキシ−カルボニル（ＣＩＺ）、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル及びｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル：　（３）脂肪族ウレタン保護基、例えばｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキンカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキンカルボニル及びアリルオキシカルボニル、（４）シクロアルキルウレタン型保護基、例えばシクロペンチルオキシカポニル、アダマンチルオキシカルボニル及びシクロへキシルオキシカルボニル：　（５）チオウレタン型保護基、例えばフェニルチオカルボニル：　（６）アルキル型保護基、例えばアリル（Ａｌｙ）、トリフェニルメチル（ｔｒｉｔｙｌ）及びベンジル（Ｂｚｌ）；　（７）　トリアルキルシラン基、例えばトリノチルシランがある。好ましいα−アミノ保護基は、Ｘが水素であるときに、Ｂｏｃである。

Ｉ２は水素又はＴｒｐのインドール窒素の保護基、例えばＢｚ、Ａｃ又はＦ。

ｒである。多くの合成では、Ｔｒｐの保護は必要なく、アシル化Ｄ−Ｔｒｐがペプチド中の他に存在する場合には、このような保護は用いられない。

Ｉ３はＳｅｒ又はＴｈｒのヒドロキシル側鎖の保護基、例えばＡｃ、Ｂｚ、　トリチル、ＤＣＢ又はベンジルエーテル（Ｂｚｌ）であり、Ｂｚｌであることが好ましい。

Ｉ４は水素又はＴｙｒのフェノールヒドロキシル基の保護基であり、テトラヒドロピラニル、ｔｅｒｔ−ブチル、トリチル、ベンジル、Ｚ、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２ＢｒＺ）及び２．６−ジクロロベンジル（ＤＣＢ）から成る群から選択される。２ＢｒＺが好ましい。

ＸｉはＡｒｇ又はＨａｒにおけるような側鎖グアニジノ基の保護基又はＨｉｓのイミダゾール基の保護基であり、例えばニトロ、Ｔ　ｏ　ｓ　ｓ　トリチル、アダマンチルオキシカルボニル、２及び２．４−ジニトロフェノール（Ｄｎｐ）である、又はＸｓは水素であり、このことは側鎖基原子に保護がないことを意味する。Ｔｏｓが一般に好ましい。

Ｉ６は例えば２又は２ＣＩＺのような、アミノ側鎖基の保護基である。Ｘ゛は他の側鎖保護基を除去せずに除去され、オメガ−アミノ基をその後にアンナチュラル　アミノ酸残基を形成するための反応に参加させるような保護基を含むＩ６のサブクラスである。例えばＦｍｏｃ、メチルスルホニルエチルオキシカルポニル（Ｍｓｃ）又はトリフルオロアセチル（Ｔｆａ、）のような塩基ラビル（ｂ　ａ　ｓ　ｅ−）ａｂｉｄｅ）基を用いるのが好ましい：しかし、ヒドラジンーラビル基、例えばフタロイルを用いることも、チオラビル（ｔｈｉｏｌａｂｉ　Ｉｅ）基、例えばＮｐｓ又はＤｔｓを用いることも可能である。

Ｘ７は水素、又はＭｅｔの保護基、例えば酸素であり、Ｍｅｔは一般に保護されずに残される。

ＸａはＧｌｙ−ＮＨ−［樹脂サポート］　、Ｄ−Ａ　Ｉ　ａ　−ＮＨ−［樹脂サポート］又はＮ　（Ａ、）　−［樹脂サポート］であり：ＸａはＧｌｙもしくはＤ−Ａ　ｌ　ａのいずれかのアミドであるか、又はＰｒｏもしくはＮＨＮＨＣＯＮＨ，に直接結合した置換アミドでもありうる。

Ｘ２〜Ｘ７の側鎖保護基を選択するための判断基準は、合成の各工程においてα アミノ保護基（好ましくはＢｏａ）を除去するために選択された反応条件下で、保護基が試薬に安定であることである。保護基は結合条件下で分離されるべきではないが、ペプチド鎖を変えないような反応条件下での所望のアミノ酸配列の合・成の完成時に除去されるべきである。

ＸＳかＧｌ　ｙ−ＮＨ−［樹脂サポート］又はＤ−Ａ　ｌ　ａ　−ＮＨ−［ｍ脂すポート］である場合に、アミド結合はＧＩＹ又はＤ−ＡｌａをＢＨＡ樹脂又はＭＢＨＡ樹脂に結合させる。ＸｌかＮ　（Ａ）−［樹脂サポート］である場合に、置換アミド結合はＰｒｏをＮ−アルキルアミノメチル（ＮＡＡＭ）樹脂に結合させる。

ＸｌがＡｚａＧｌｙ−ＮＨ２である場合には、ペプチドを好ましくは米国特許第４．２３４．５７１号に開示されているような、古典的溶液合成によって製造するＧが例えば最終式においてアセチルである場合に、これをβ−Ｄ−ＮＡＬのα −アミノ基のＸ１保護基として用いることも可能である、又は如何なるアミノ酸もこの最後のアミノ酸をペプチド鎖に結合させる前に加えることによって、１− 位置に用いられる。しかし、例えばジシクロへギシル力ルポジイミド（ＤＣＣ）存在下での酢酸との、好ましくは無水酢酸との反応によって、又は技術上公知のような他の適当な反応によって、樹脂上のペプチドによって反応か実施されることか好ましい（側鎖基が保護された状態であるときにα−アミノ基の脱ブロツク後に）。

従って、本発明は次式を有するペプチドの製造方法をも提供するＧ−ＡＡ−ＡＡ、−＾Ａ’　−５ｅｒ−ＡＡ５−ＡＡｓ−ＡＡ７−ＡＡ６−Ｐｒｏ−ＡＡ１゜［式中、ＡＡ’　、ＡＡｓ、ＡＡ６及びＡＡ８の少なくとも１つはＵであり、記号は前述した通りである］、この方法は（ａ）式　Ｘ　’−ＡＡ−ＡＡ２　（Ｘ’ ）−Ｔｏ−５ｅｒ（Ｘ’）−Ｕ５−Ｔ。

−ＡＡｔ（Ｘ２ｉｅ＃Ｘ７）−Ｕｓ−Ｐｒｏ−Ｘｌ［式中、Ｕ、はＵ′又はＡＡ ”　（Ｘ２）であり、Ｕ、はＵ′又はＡＡｓ　（Ｘ’又はＸ’）であり：Ｕ、はＵ′又はＡＡＢ　（Ｘ’又はＸＳ又はＸ６）であり１　Ｕ、はＵ′又はＡＡａ　（ＸＳ又はＸｌ）であり：Ｕ″　はＬｙｓ（Ｘ”）、Ｏｒｎ　（Ｘ’）　、Ｄｂｕ　（Ｘ’）又はＤｐｒ（Ｘ’）であり、ＸＩは水素又はα−アミノ保護基であり、Ｘ２は水素又はインドール窒素の保護基であり、Ｘ！はＳｅｒ又はＴｈｒのヒドロキシル側鎖の保護基であり：Ｘ４は水素又はＴｙｒのフェノールヒドロキシル基の保護基であり：Ｘ５は水素又はグアニジノ又はイミダゾール側鎖の保護基であり、Ｘｓは第一アミノ側鎖の保護基であり；ＸＳは他の保１基を除去せずに除去可能な、Ｘｌのサブクラスであり；Ｘ７は水素又はＭｅｔの保護基であり：ＸＲはＧｕｙ−ＮＨ−［樹脂サポート］　、Ｄ−Ａ　ｌ　ａ−ＮＨ−〔樹脂サポート］又はＮ　（Ａ）−［樹脂サポートコであり、ＸｌはＧｌｙもしくはＤ− Ａ１．ａのいずれかのアミドであるか、又はＰｒｏもしくはＮＨＮＨＣＯＮＨ２に直接結合した置換アミドである。但し、Ｕｌ、Ｕ６、Ｕ６及びＵ８の少なくとも１つはＬｙｓ　（Ｘ’）　、Ｏｒｎ　（Ｘつ、ｐｂｕ　（Ｘ’）又はＤｐｒ（Ｘつのいずれかである］で示される中間体ペプチドを形成する工程：　（ｂ）少なくとも１つのＸ“を除去して、前記中間体ペプチドの少なくとも１つのアミノ酸残基の側鎖第一アミノ基を脱保護する工程、（Ｃ）前記脱保護側鎖第一アミノ基を反応させて、前記残基を式Ｕを有する残基に組み入れる工程、及び（ｄ）残留基ＸＩ〜Ｘ７を分離及び／又はＸｌに含まれる樹脂サポートから解離する工程を含む。

ペプチドの精製はＣＭＣカラム上のイオン交換クロマトグラフィーと、その後の、セファデックスＧ−２５充填カラムに溶離系　ｎ−ブタノール　０．ＩＮ酢酸（１：１容量比）を用いる分配クロマトグラフィーによって、又は技術上公知で、特にジェイ、リビエールＤ、Ｒｉｖｉｅｒ）等のジエイ、クロマトグラフ＜　二（Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏ　ｒａ　ｈ　）、２８旦（１９８４）３０４−３２８頁に記載されているようなＨＰＬＣを用いることによって行われる。

本発明の拮抗薬は、雌ラットの排卵を防止するために、発情期前の日の大体正午に皮下投与する場合に、１００μｇ未満／体重ｋｇのレベルで有効である。排卵の長時間抑制のためには、０．１〜２．５ｍｇ／体重ｋｇの範囲内の用量レベルを用いることが必要である。これらの類似体は生理的ｐＨにおいて特に可溶性であるので、投与のために比較的濃厚溶液として製造することかできる。この拮抗薬は標準ベースで雄補乳動物に投与した場合に精子形成の停止にも有効である。

これらの化合物はテストステロンレベルを減する（正常な性的に活性な雄において好ましくない意義を有する）ので、ＧｎＲＨ拮抗薬と共にテストステロンの補充量を投与することが妥当である。これらの拮抗薬は、前述したような他の目的のために、ゴナゴトロビン及び性ステロイドの産生の調節のためにも用いられる。

次式では、Ｕ残基は側鎖アミノ基＋添付括弧内に記載される問題の修飾を有するオリジナルのアミノ酸残基として定義される。好ましくは、オリジナル残基は主ペプチド鎖、例えばＬｙｓもしくはＤ−Ｌｙｓ又は○ｒｎ％Ｄｂｕ、Ｄｐｒ又はこれらのＤ−異性体に組み込まれ、修飾され、ペプチドの一部はまだ樹脂に結合し、アミノ酸Ｕの好ましい残基を形成する。しかし、前述したように、適当に保護されたアンナチュラルなアミノａｄ”＋通常の連鎖延長プロセスの一部として加えることができる。

アミノ酸ＬｙｓＳＯｒｎ、Ｄｂｕ及びＤｐｒの修飾側鎖アミノ基に対して、下記略号を用いるａｃｔ−アセチルアミノトリアゾール２ａｍｐ＝２７ミノメチルピリジルシアノグアニジノ３ａｍｐ＝３７ミノメチルピリジルシアノグアニジノ４ａｍｐ＝４７ミノメチルビリジルシアノグアニジノｂｃｇ−アミノブチルシアノグアニジノｂｚｃｇｍアミノベンジルシアノグアニジノｂｕｒｘＮ−ｇ−アミド、Ｎ−ｇ’　−ブチルグアジニノｃｈｃｇ＝アミノシクロヘキシルシアノグアニジノｅｃｇ＝アミノエチルシアノグアニジノＩＣｇ −アミノイソプロピルシアノグアニジノｈｃｇ−アミンへキシルシアノグアニジノｈｉｃｇ＝ヒスタミニルシアノグアニジノｍｃｇ−アミノメチルシアノグアニジノｎＣｇ”アミノエチル（１又は２）ナフチルシアノグアニジノｍｎｃｇ−アミノメチル（１又は２）ナフチルシアノグアニジノＯｃｇ−０−フェニルシアノグアニジノｐｃｉ”アミノプロピルシアノグアニジノＳｂｃｇ−チオブチルシアノグアニジノｔｃｇ＝３−アミノ１．　２．　４−トリアゾールｔｒｃｇ−インドールエチルアミノシアノグアニジノ（トリブトアミノシアノグｍｐｃｇ−メチルビリジルシアノグアニジノ害施健１式　ＡＣ−β−Ｄ−２ＮＡＬ−（４Ｃ１）Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−３ＰＡＬ−５ｅｒ− ＾Ａｓ−ＡＡ６−Ｌｅｕ−ＡＡａ−Ｐｒｏ−Ｄ−＾１ａ＝Ｎg２を有する表１に記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

表１１１　ＴＩ　（ＯＣｇン　β−Ｄ−２ＮＡＬ実施例のために、［Ａｃ−β−Ｄ− ２ＮＡＬ’、（４Ｃ１）Ｄ−Ｐｈｅ２、Ｄ−３ＰＡ、Ｌ３、Ｌｙｓ　（ｉ　ｃｇ）　５、Ｄ−Ｌｙｓ　（ｉ　ｃｇ）’、Ｉ　Ｌｙ　ｓｇ、　Ｄ−Ａ　１ａ”］− ＧｎＲＨと呼ばれる、上記ペプチドＮｏ、１の典型的な固相合成を下記で説明する。このペプチドは次式を育する　Ａｃ−β−Ｄ−２ＮＡＬ−（４ＣＩ）Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−３ＰＡＬ−５ｅｒ−Ｌｙｓ　（イソプロピルシアノグアニジノ）−Ｄ −Ｌｙｓ（イソプロピルシアノグアニジノ）−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ　（イソプロピル）　−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ｄ−Ａ　Ｉ　ａ　−ＮＨ２ＭＢＨＡ樹脂を用いて、Ｂｏｃ保！ＩＤ−Ａｌａを３倍過剰なりｏｃ誘導体と活性化剤としてのＤＣＣとによってＣＨ２Ｃｌ２中で２時間にわたって樹脂に結合させる。Ｄ−Ａ　ｌ　ａ残基はアミド結合によってＭＢＨＡ残基に結合する。

各アミノ酸残基の結合後に、次のアミノ酸残基の洗浄、脱ブロック及び結合は自動装置を用いて、約５ｇの樹脂で出発して、下記スケジュールで実施する：工程　区！上傑作　泥金持間ユ公ルＩ　ＣＨ，ＣＩ□洗浄−８０ｍ１　（２回）　３２　メタノール（ＭｅＯＨ）洗浄−３０ｍ１　（２回）　３３　ＣＨ，Ｃ１２洗浄−８０ｍ１　（３回）　３４　ＣＨＣＨ２Ｃｌ２−７ＯＯｓＯ４ＴＦＡ＋５％１．２−エタンジチオール（３回）１０５　イソプロピルアルコール＋１％エタンジチオール洗浄−８０ｍ１　（２回）　３６　ＣＨ２Ｃｌ２　７０ｍ１中ＴＥＡ１２．５％（２回）　５７　ＭｅＯＨ洗浄 −４０ｍ１　（２回〕　２８　ＧＨｚＣＬｚ洗浄−８０ｍ１　（３回）　３９　特定の保護アミノ酸の溶解度に依存して、ジメチルホルムアミド又はＣＨ，Ｃ１２のいずれか３０ｍ１中のＢｏａ−アミノ酸（１０ｍｍｏ　Ｉ）（１回）＋ＣＨ２Ｃｌ２中のＤＣＣ（１０ｍｍｏ　Ｉ）　３０−３００１０　ＭｅＯＨ洗浄−４０ｍ１　（２回）　３１１　ＣＨ２Ｃ１２１２−７Ｏ中のトリエチルアミン（ＴＥＡ）１２．５％（１回）　３工程３の後に、技術上周知のニンヒドリン試験のためにアリコートを採取するこの試験が陰性であるならば、次にアミノ酸の結合前にＢｏｃ基を除去するための工程４に進む：この試験が陽性又は軽度に陽性であるならば、工程９〜１１を繰り返す。第一アミノ酸が結合した後に、本発明のペプチドの各アミノ酸を結合させるために上記スケジュールを用いる。合成を通して各残留アミノ酸に対してＮ ’Ｂｏｃ保護を用いる。Ｎ”Ｂｏｃ−β−Ｄ−ＮＡＬを米国特許第４．　２３４゜５７１号（１９８０年１１月１８日発行）に詳述されているか、又はシンス　チク（Ｓｙｎｔｈｅ　Ｔｅｃｈ）（米国、オレゴン州）から商業的に入手可能な技術上公知の方法によって製造する。５−位！のＬｙｓの側鎖と６−位置のＤ− Ｌｙｓの側鎖をＦｍｏｃによって保護する。Ｓｅｔのヒドロキシル基の側鎖保護基としてＢｚｌ（ペンシルエーテル）を用いる。８−位置にはＢｏｃ−Ｌｙｓ　（１ｐｒ）を用いる。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いたＮ−末端のαアミノ基の脱ブロツク後に、大きく過剰なジクロロメタン中無水酢醗を用いて、アセチル化を行う。

ペプチドのアッセンブリーとＮ−末端のアシル化との完成後に、下記中間体が得られる：Ａｃ−β−Ｄ−２ＮＡＬ−（４Ｃ１）Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−３ＰＡＬ−３ｅ　ｒ　（Ｂｚ　Ｉ）−Ｌｙｓ　（Ｆｍｏｃ）−Ｄ−Ｌｙｓ　（Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ　（Ｉｐ　ｒ）　−Ｐ　ｒｏ−Ｄ−Ａ　Ｉ　ａ　−ＮＨ−［ＭＢＨＡ樹脂サポーす］。

Ｌｙｓ残基の脱保護側鎖との次の反応を同時に実施することによって、５−位置と６＝位置のアンナチュラル　アミノ酸を形成する。ＤＭＦ中２０％ピペリジンによるペプチドレジンの５分間の処理、ＤＭＦによる洗浄、次にさらに多くのピペリジン／ＤＭＦによる２０分間の処理の両方によってＦｍｏｃ保護基を除去する。樹脂をＤＭＦ、ＣＩ（ｓＯＨ，ＣＨｚＣＩｚ及び最後にＤＭＦによる洗浄後に、新たにａＳしたアミノ基を大きく過剰な（〉１０倍）ＤＭＦ中ジフジフェニルシアノカルボンイミデートＣＩ）によって処理する。その後、ペプチドを標準的洗浄にさらしく工程１０−１１を参照）、ＤＭＦ中に溶解したイソプロピルアミンによって約２２℃において２４時間処理して、アミノイソプロピルシアノグアニジノ部分の形成を完成する、立体障害の大きい反応物質のために、この工程を繰り返すことができる。

樹脂からのペプチドの解離と、Ｓｅｒ＠Ｍｌの脱保護とはＨＦによって０℃において非常に迅速に行われる。ＨＦ処理の前にスキャベンジャ−としてアニソールを加える。ＨＦの真空除去後に、樹脂を５０％酢酸によって抽出し、洗液を凍結乾燥し、粗ペプチド粉末を得る。

次に、技術上公知で、特にジエイ、リビエール等のジエイ　クロマト　゛ラフィニ、２８８　（１９８４）　、３０４−３２８に記載されている高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、ペプチドを精製する。

薄層クロマトグラフィーと数種類の溶媒系を用いて、並びに逆相高圧液体クロマトグラフィーと、トリエチルアンモニウムホスフェート水溶液＋アセトニトリルとを用いてペプチドが均質であるかどうかを判断する。得られる精製ペプチドのアミノ酸分析は、鎖中の各アミノ酸の実質的な整数値を示す、生成構造体の式と一致する：質量スペクトル分析も一致する。光電旋光計によって旋光度を次のように測定する− 表１の他のペプチドを同様に合成し、精製する。ペプチドをインビボで分析し、インビトロでも試験する。インビトロ試験を実施する場合に、インビトロ試験は分析前の４日間培養基中に維持した解離ラット下垂体細胞を用いて実施する。ペプチドの供給に応じて仲介されるＬＨレベルをラットＬＨの比ラジオイムノアッセイによって評価する。細胞の対照器は３ナノモルのＧｎＲＨの測定単位（ｍｅａｓｕｒｅ）のみを受容し、実験皿は３ナノモルのＧｎＲＨの測定単位と０．０１−１０ナノモルの範囲内の濃度の比較のための本発明の標準拮抗薬すなわち［ＡＣ−デヒドｏＰｒｏ’、（４Ｆ）Ｄ−Ｐｈｅ２、Ｄ−Ｔｒｐ’、’］　−ＧｎＲＨ又は試験ペプチドを有する測定単位を受容する。ＧｎＲＨによってのみ処理されるサンプルで分泌されるＬＨ量をペプチド＋ＧｎＲＨによって処理されるサンプルが分泌するＬＨ量と比較する。３ナノモルのＧｎＲＨによって放出されるＬＨ量を試験ペプチドか減する可能性を本発明の標準ペプチドの可能性と比較する。　インビボ試験は雌ラットの排卵を阻止する効果を評価する。この試験では、それぞれ体重２２５〜２５０ｇを有する特定数の成熟雌スプラーグーダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラット、例えば５〜１０匹に、生理食塩水、静菌水、ポリエチレングリコール、トウモロコシ油又はこれらとエタノールとの混合物に溶解したペプチドの特定μｇ量を、発情前期の日の大体正午に注射する。発情前期は排卵の午後（ａｆｔｅｒｎｏｏｎ　ｏｆ　ｏｖｕｌａｔｉｏｎ）である。別の雌ラット群をペプチドを投与しない対照として用いる。対照雌ラットの各々は発情前期の夕方に排卵する。処理ラット中の排卵ラット数を記録する。

各ペプチドは約５００μｇの用量において雌ラットの排卵を阻止するために全体的に有効であると考えられる。

表１にリストした全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ誘導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全ては低用量において４哺乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。下記表Ａは種々なこれらのＧｎＲＨ拮抗薬のインビボ試験の結果を示す一表へペプチドＮｏ、　里員　之ヱ上淳卵　ｆｆ１ｊｉ　之ヱ上排卵１、　２．５　０／９　１．０　０１５２、　２．５　６／６　２．０　２／１０３、　２．５　７／９　２．０　１／１０４、　２．５　０／６　２．０　１／１０５、　２．０　１／１０６、　２．５　０／６　１．０　７／１７７、　２．５　３／２０８、　２．５　５／１９　１．０　５１５９、　２．５　０／６　１．０　５１５１０、　２．５　５／８　２．０　１／１０１２、　２．５　６／７　５．０　９／１０１３、　５．０　５／１２　１０．０　３１５１５、　２．５　０／４　１．０　８／１８叉施例且式　Ａｃ−デヒドｏＰｒｏ−（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ−ＡＡｓ−５ｅ　ｒ−ＡＡｓ−β −Ｄ−２ＮＡＬ−Ｌｅｕ−ＡＡｇ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌ　ａ−ＮＨｘを有する表ゴに記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

表呈２４　（２Ｂｒ）Ｐｈａ”　（４ｇｍｐ）２５　ＨＤ−Ｔｒｐ　（２Ｃ１）　Ｐｈｉ　Ｏｒｎ（２ｍｎｃｇ）２ｇ　２，４Ｃユ２　（５Ｃ１）Ｄ−Ｔｒｐ　（コＦ）　Ｐｈｅ　Ｄｐｒ（ｔｒｃｇ）２９　（６ＮＯ２）Ｄ−Ｔｒｐ　（コＢｒ）Ｐｈａ　Ｏｒｎ（ｌｎｅｇ）コＯＣ”Ｍｅ／４Ｃ１（５０ＣＨｓ）Ｄ−Ｔｒｐ　（コニ）ＴＹｒ　″　（ＰＣｑ）コ１　３，４Ｃ１２（５ｎ２）Ｄ−Ｔｒｐ　（コＣ１）Ｐｈｉ　’　Ｄｐｒ（ｃｈｃｇ）表■に記載した全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ誘導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全ては低用量において雌哺乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

大施桝旦式：Ｇ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４Ｃｌ）　Ｄ−Ｐｈｅ　−Ｄ−３ＰＡＬ−Ｓｅ　ｒ　−Ｔｙｒ−ＡＡｇ−Ｌｅｕ−ＡＡｓ−Ｐｒｏ−ＡＡ＋ｏを冑する表■に記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

表！Ｇ　ＡＡ、　八　鮎１゜コ２　Ａｃ　Ｄ−人ｒｑ　Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｄ−人１ａ−ＮＨ２ココ　入ｃ　Ｄ−ＬＹ！ｌ（ｂｅｇ）　λｒｇコ４　Ｆ口：　Ｄ−Ｔｙｒ　Ｌｙｓ（ｉｃｇ）　Ｇｌｙ−ＮＭ２３５　ＢＺ　（Ｅｔ）Ｄ−人ｒｇ　ｏｒｎ　”コロ　人ｅ　Ｄ −Ｌｙｓ　″　Ｃ＊ｃｑ）　”コア　Ｖａｃ　Ｄ−Ｈａｒ　”　（ｗＣｇ）　” ：ｌｌＢ　Ａｃｒ　（４ｇｕａ）Ｄ−Ｐｈａ　Ｄｐｒ（２ｎｃｇ）　λｚａＧ１ｙ−Ｎ’Ｈ２３９Ａｅ　Ｄ−Ｏｒｎ　”（ｃｈｃｇ）　Ｄ−人１ａ−）ＪＨ２４ｏ　入ｃｒ　Ｄ−Ｈｉｓ　”　（ｔｃｇ）　”４１　人ｃ　（Ｂｕ）Ｄ−Ａｒｇ　Ｄｂｕ（１ｍｎｃｇ）　”４２　（Ｂｚ）Ｄ−Ｏｒｎ　”　（２ｇｍｐ）　” ４コ　Ｖａｃ　（４Ｎ！（２）Ｄ−Ｐｈｉ　’　（４ａｅｐ）　４４　ＢＺ　（Ａｅ）Ｄ−Ｌ”／Ｓ　”　（ｔｒ（：ｌｉ）　入ｚａＧ１ｙ−Ｎ’Ｈ２表■に記載した全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ誘導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全ては低用量において４哺乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

実施廻Ｎ式：Ａｃ−ＡＡ、−（４Ｃ１）Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−３ＰＡＬ−３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ　Ａｒｇ　ＡＡ７　ＡＡｓ　Ｐｒｏ−Ｄ　Ａｌａ　ＮＨ２を有する表■に記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

表Ｎ表■に記載した全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ誘導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全ては低用量において４哺乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

寒施鍔ｙ式：Ａｃ−ＡＡ、−（４Ｃ１）　Ｄ−Ｐｈｅ　−ＡＡｓ−Ｓｅｒ　−ＡＡｓ　ＡＡｇ　Ｌｅｕ−ＩＬｙｓ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ２を有する表Ｖに記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

獣竹　ＡＡ３　橘　ＡＡ。

６０　β−Ｄ−２Ｎ入ＬＤ−コＰＡＬ　Ｌｙｓ　（ｂｅｇ）　β−Ｄ−２ＮＡＬ６ｍ　［６ＮＯ，）Ｄ−Ｔ’ｒｐ　”　”　（Ｄｒｌｐ）Ｄ−Ｈｉｓ６２　Ｄ− Ｔｒｐ　”　（ｅｃｇ）　（４ｇｕａ）Ｄ−Ｐｈｅ６５　β−Ｄ−２ＮＡＬ　（ｍＦｏｒ）Ｄ−Ｔｒｐ　Ｉｌ（ｔｃｇ）　（Ｐｒ）Ｄ−Ａｒｇ６６　Ｄｂｕ（ｂｃｇ）　（５ＮＭ２）Ｄ−Ｔｒｐ６７　ｄｅｈｙｄｒａＰｒｏ　Ｄ−Ｔｒｐ　” 　（２ａｚｐ）　Ｄ−Ｔｙｒ６８　Ｄ−２ＰλＬ　”　（４ｅｍｐ）　Ｄ−Ｎｌｅ６９　（１Ａｃ）Ｄ−Ｔｒｐ　″　（ｈａｇ）　（４Ｆ）Ｄ−Ｐｈｅ７０　Ｐｒｏ　Ｄ−コＰＡＬ　Ｌｙｓ（ｐｅｇ）　β−〇−ユＮＡＬ７１　（ｌＦｏｒ）Ｄ−Ｔｒｐ　”　”　（ｃｈｅｇ）　（４ＮＨＣＨ，）Ｄ−Ｐｈｅ７２　β−Ｄ −２ＮＡＬ　”　Ｄｐｒ（ｈｃｇ）　（Ａｃ）Ｄ−Ｏｒｎ７コ　”　（Ｏｃｇ）　（４ＮＨよ）Ｄ−Ｐｈａ７４　β−Ｄ−ＩＮＡＬ　（６Ｂｒ）Ｄ−Ｔｒｐ　” 　（ｔａｇ）　（ＩＦｏｒ）Ｄ−Ｔｒ’ｐ７５　（６ＣＨ，）Ｄ−Ｔｒｐ　Ｄ− ４ＰＡＬ　”　（ｂｚｃｇ）　Ｄ−４ＰＡＩ。

表■に記載した全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ９導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全ては低用量において４唾乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

実施側型式：Ｇ−ＡＡ、　−（４Ｃ］）　Ｄ−Ｐｈｅ　−Ｄ−Ｔｒｐ−５ｅ　ｒ−Ｔｙｒ　−ＡＡｓ−Ｌｅｕ−ＡＡｓ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ２を有する表■に記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

前回７７　人Ｃβ−Ｄ−２８人Ｌ　β−Ｄ−２８ＡＬ　”　（コａｍｐ）７８　人Ｃ β−Ｄ−２ｆＪＡＬ　Ｄ−Ｖａｌ　”　（ｔａｇ）７９　人ｅｒ　Ｐｒｏ　Ｄ− ５ｅｒ（ＯｔＢｕ）　”　（ｃｈｃｇ）８０　ＨｄｅｈｙｄｒｏＰｒｏ　（ｉ：ｐＥｌｚｌｌＤ−Ｈｉｓ　”　（ａｃｇ）８１　Ｂｚ　（４Ｂｒ）Ｄ−Ｐｈａ　（５Ｃ１）Ｄ−Ｔｒｐ　Ｏｒｎ”８６　人ｃ　＋’＋　（八ｒｇ５）　β−Ｄ− ２Ｎ入Ｌ　Ｌｙｓ（Ｏｃｇ）８７　ＨｄｅｈｙｄｒｏＰｒｏ　Ｄ−、Ａｌａ　” 　（ｔＣｇ）表■に記載した全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ誘導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全てｉｔ低用量において４噛乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

叉施何舅式Ｇ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４ＣＩ）　Ｄ−Ｐｈｅ　−Ｄ−３ＰＡＬ−３ｅ　ｒ　−ＡＡｓ−ＡＡｇ−Ｌｅｕ−ＡＡｇ−Ｐｒｏ−叶Ａｌａ　ＮＨ２を有する表 ■に記載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

表３においで４噛乳動物の排卵の防止１こ有効であると考えられる。

実施−！載のペプチドは、上記固相方法によって製造される。

青！においで４噛乳動物の排卵の防止（こ有効であると考えられる。

実施例■ ブチドは、上記固相方法によって製造される。

表■ 礒　橘　鮎６ＸＡｓ１１Ｌ　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｔｙｒ　Ｄ−人ｒｑ　ｓｑ１ユ２　Ｄ−Ｌｙｓ（２ｅｍｐｌ　Ｔｙｒ　Ｄ−人ｒｑ　Ａｒｇ１１コ　Ｄ−Ｌｙｓ（ｔｃｇ）　Ｔｙｒ　Ｄ−Ａｒｇ　入ｒｇ１１４　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ａｒｇ　β−Ｄ−２ＮＡＬ　Ａｒｇ１’Ｊ、５　Ｄ−Ｌｙｓ（ｔａｇ）　Ａｒｇ　β−Ｄ−２ＮＡＬ　Ａｒｇユ１６　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂａｇ）　Ｔｙｒ　Ｄ−人ｒｇ　！Ｌｙｓ１１７　Ｄ−Ｌ、ｙｓ（ｔＣｇ）　Ｔｙｒ　Ｄ−Ａｒｇ　工ＬＹＳ１１８　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｔｙｒ　β−Ｄ−２ＮＡＬ　工Ｌ”ｆＳ１１９　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｔｙｒ　Ｄ−３Ｐ入Ｌ　工ＬｙＳ１２０　Ｄ−Ｌｙｓ（２ｍｐｃｇ）　’ ！’ｙｒ　Ｄ−コＰＡＬ　工ＬＹ！１）Ｉ　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｔｙｒ　Ｄ −人ｒ９　λｒｇ１２２　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｌｙｓ（ｂｃｇ）　Ｄ−ＬＹＳＣｂＣ９）　ＸＬＹＳ１２コ　Ｄ−コＰＡＬ　Ｌｙｓ（ｂｕｒ）　β−Ｄ−２８人−入ｒｇ１２４　Ｄ−Ｌｙｓ（ｂｅｇ）　Ｔｙｒ　β−Ｄ−２８λＬ　Ｌｙｓ（ｂｅｇ）１２５　Ｄ−Ｏｒｎ（２ｅｍｐｌ　Ｔｙｒ　Ｄ−コＰＡＬ　Ｌｙｓ（２ｅ！＋Ｉｐ１表■に記載した全てのペプチドは妥当な濃度でのインビトロのＧｎＲＨ誘導ＬＨ分泌をブロックするために有効であると考えられる。ペプチドの全て番よ低用量において離隔乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

これらの拮抗薬から選択された拮抗薬のインビボ試験の結果を下記表Ｂｉこ示す。

表呈ペプチドＮｏ、　用量　之ヱ１捲卵　用量　之ヱ上迷卵１７、　１ｏ　６／ａ　１５　７／ｉ。

ココ、　２．５　４／１７５５、　ｉｏ　６／７　２５　２１５６０＋２．５　４／１４　１．ＯＢ／１０８６、　２．５　４／１５　５．０　５１５８１１、　２．５　０／４　１．０　４／１５１０　ロ／ａ８９、　１０　２７１ｍ９コ、　２．５　５７１０９４、　１．０　７／１１９６、　工、Ｑ　９／１２１０４、　２．５　、　Ｃ１５ユ、Ｑ　５／８１０２、　２．５　２／９１０３＋　２．５　５７７１０４、　′　２．５　６／８１０５、　２．５　ロ１５１０６、　５．０　０／〕１１１、　２ｊ　ｌ／１１　Ｌ、Ｏ０１５０，５５／７１１２、　１．０　４／８１１コ、　１．０　５７６１１４、　５．０　４７５１１ｇ、　２．５　０／６　１＋ｏ　２／ａ１１７、　１０　０／６　５　２１５ｍ２２．　１０　ａ７６１２コ、　）Ｏｌ／ＬＯ５０／６叉施廼Ｘ式　ｐＧＩ　ｕ−Ｈｉ　５−Ｔｒｐ−３ｅ　ｒ−Ａｒｇ−ＡＡ６−ＡＡ？−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＡＡＩＯを膏する表Ｘに記載のペプチド番よ、上記固相方法によって製造される。

表Ｘ１３０　”　（ｔａｇ）　ＮＨＣＨ２Ｃ１（。

１コｌ　”（４ｅｍＰ）　” １３２　ＩＩ　（）ａｍｐ）　ＮＭＬ表Ｘに記載のペプチドは雌ラットにおし為でＬＨとＦＳＨを放出させるために有効であると考えられる。これらの全てζよネイティブＧｎＲＨよりも実質的により有効であると考えられる。

Ｘ施的よ土旦式Ａｃ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４ＣＩ）　Ｄ−Ｐｈｅ　−Ｄ−３ＰＡＬ−５ｅ　ｒ（Ｂｚ　１）−Ｌｙｓ　（Ｆｍｏｃ）　−Ｄ−３ＰＡＬ−ＮＭＬ−Ｌｙｓ　（Ｄｔ　５）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ−［樹脂サポート］を有するペプチド中間体を一般的に上述した固相方法によって製造する。中間体を次にピペリジンによって処理して、Ｆｍｏｃ保護基を除去し、次に前述したようにＰＣＩと反応させる。次にＤＭＦ中の適当なチオール、例えばβ−メルカプトエタノール又はチオフェノール（ＰｈＳＨ）を用いて、８−位置のＬｙｓ残基のアミノ側鎖からＤｔｓ保護基を除去し、ペプチドレジンを標準的に洗浄する。この後に、これを１０〜６０分間又はニンヒドリン試験が陰性になるまで２２℃に維持して、反応を完成まで進行させ、Ｌｙｓ’の側ｗｉ第一アミノ基とＬｙｓ’上に予め形成されたシアノグアニジノ部分とを環化させる。次に、脱保護と開裂を既述したように実施する。既述したようなＨＰＬＣ精製後に、ＧｎＲＨ拮抗薬を試験する。このペプチドは低用量において離隔乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

Ｘ施鍔上土旦式Ａｃ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４Ｃｌ）　Ｄ−Ｐｈｅ　−Ｄ−３ＰＡＬ−５ｅ　ｒ（Ｂｚ　Ｉ）−０ｒｎ　（Ｆｍｏｃ）−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ　（Ｎｐｓ）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨＥ樹脂サポート］を有するペプチド中間体を一般的に上述した固相方法によって製造する。このペプチド中間体を実施例１４５に述べたように適当なチオールによって処理して、ＰＣＩと８−位置のＬｙｓ残基の側鎖アミノ基とを反応させて、シアノグアニジノ部分を形成し、次に、Ｆｍｏｃ保護基の除去後に、５−位置のＯｒｎの脱保護側鎖アミノ基によって環化させる。

既述したような開裂とＨＰＬＣ精製後に、ＧｎＲＨ拮抗藁を試験する。このペプチドは低用量において離隔乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

実施男１ユヱ式・ＡＣ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４Ｃｌ）　Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−３ＰＡＬ−３ｅ　ｒ（Ｂｚ　１）−Ｔｙｒ　（２ＢｒＺ）−Ｄ−Ｌｙｓ　（Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ −Ｌｙｓ　（１ｐｒ）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ−［樹脂サポート］を有するペプチド中間体を一般的に上述した固相方法によって製造する。Ｆｍｏｃ保護の除去後に、ペプチド中間体を実施例１に一般的に述べたように、但しＰＣＩの代わりにナフチルイソシアネートを用いて反応させ、６−位置のＤ−Ｌｙｓ残基の側鎖アミノ基と共にナフチル尿素部分を形成する。既述したような開裂とＨＰＬＣ精製後に、ＧｎＲＨ拮抗藁を試験する。このペプチドは低用量において離隔乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

犬應冊工Ａ旦式、ＡＣ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４Ｃｌ）　Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−３ＰＡＬ−３ｅ　ｒ（Ｂｚ　１）−Ｔｙｒ　（２ＢｒＺ）−Ｄ−Ｌｙｓ　（Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ −Ｌｙｓ　（Ｉｐｒ）−Ｐｒｏ−Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ−［樹脂サポート］を有するペプチド中間体を一般的に上述した固相方法によって製造する。Ｆｍｏｃ保護の除去後に、ペプチド中間体を実施例１に一般的に述べたように、但しＰＣＩの代わりにナフチルイソシアネートを用いて反応させ、６−位置のＤ−Ｌｙｓ残基の側鎖アミノ基と共にナフチル尿素部分を形成する。既述したような開裂とＨＰＬＣ精製後に、ＧｎＲＨ拮抗薬を試験する。このペプチドは低用量において離隔乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

実施何ＩＡ旦式Ａｃ−β−Ｄ−２ＮＡＬ　−（４Ｃｌ）　Ｄ−Ｐｈ　ｅ　−Ｄ−３ＰＡＬ−９ｅ　ｔ（Ｂｚ　Ｉ）−Ｔｙｒ　（２ＢｒＺ）−Ｄ−Ｌｙｓ　（Ｆｍｏｃ）−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ　（１ｐ　ｒ）　−Ｐ　ｒ　ｏ−Ｄ−Ａ　Ｉ　ａ−ＮＨ−［樹脂す永 −トコを有するペプチド中間体を一般的に上述した固相方法によって製造する。

Ｆｍｏｃ保護の除去後に、ペプチド中間体を最初にＤＭＦ中の２−ブロモエチル１．２’　（Ｂｏｃ−アミカニチルエーテルを用いて、１時間又はニンヒドリン試論が陰性になるまで反応させて、ハロゲンの除去によって側鎖アミノ基に炭素を結合させて、Ｑ−ＮＨ−（ＣＨ２）　！　Ｏ（ＣＨ２）　２　ＮＨ（Ｂ　ｏ　ｃ）を形成する。次に、この化合物を実施例１に一般的に述べたように、ＰＣＩを用いて反応させ、６−位置の残基の側鎖第二アミノ基と共にシアノグアニジノ部分を形成する。次に、Ｂｏｃ保護基を除去し、第一アミノ基を一０Ｐｈ基と反応させて、下記化合物を得る・既述したような開裂と）ＴＰＬＣ精製後に、ＧｎＲＨ拮抗薬を試験する。このペプチドは低用量において雌補乳動物の排卵の防止に有効であると考えられる。

実施例１１旦（Ｂｏａ）Ｄｐｒを実施例１と同様にＰＣＩと反応させて、下記化合物：を製造し、次にこれをＤＭＦ中に溶解したヒドラジンと室温において１〜２日間反応させ、ＤＭＦで洗浄し、次にこれを繰り返して、−ｏｐｈ基を置換し、同時に次の複素環式化合物を形成する：これはペプチド合成においてＨｉｓの代替えとして特に冑用である。

ペプチドの精製後に、これらの種々なペプチドに対してＣ１ｇシリカ（Ｖｙｄａｃｏ、４６ｘ２５ｃｍ）上での高性能液体クロマトグラフィーを、１．７ｍｌ／分の流量と緩衝ｆｉＢの３５〜８５容量％の勾配とを用いて（残りは緩衝液Ａ）　５０分間にわたって実施して、これらの種々なペプチドをさらに特性化する。

緩衝液ＡはｐＨ７，０の水中の０．　３％トリエチルアミン（ｖ／Ｖ）と０．　１％リン酸であり：緩衝液Ｂは緩衝液Ａ中の６６容量％アセトニトリルである。

次の表Ｃは特定のペプチドが、約５μの粒度と３００人の孔度とを有するＣＩｌシリカから、１．７ｍｌ／分の流量において３５％緩衝液Ｂから８５％緩衝液Ｂの勾配（残りは緩衝液Ａである）に５０分間さらされ、その後に８５％に均一に１０分間さらされた場合に、溶離する時間を示す。

前二ペプチドＮｏ　浴限時間２　２６．５６３　４７．６４　２０．３２７　２８．９６８　２７．７４９　５４．２４１０　３０．８６１１　５６．９１２　４６．７８３２　４０．５６３３　３５、　８４本発明のペプチドはしばしば、薬剤学的に受容される非毒性塩、例えば、酸付加塩として、又は亜鉛、バリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム等による金属錯体（この出願のためには、付加塩と見なされる）として、又は両者の組合せとして投与される。このような酸付加塩の具体例には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、蓚酸塩、フマル酸塩、グルコン駿塩、タンニン酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、アルギン酸塩、リンゴ酸塩、アスコルビン酸塩、酒石破壌等である。例えば、ペプチドの水溶液をＩＮ酢酸によって反復処理し、次に凍結乾燥して、その酢酸塩を得ることができる。活性成分を錠剤形で投与する場合には、錠剤は例えばトラガカントガム、コーンスターチもしくはゼラチンのような結合剤：例えばアルギニン酸塩のような崩壊剤：及び例えばステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤を含む、薬剤学的に受容される希釈剤を含みうる。液体形での投与が望ましい場合には、甘味料及び風味剤を薬剤学的に受容される希釈剤の一部として用いることができ、等張性生理食塩水、リン酸塩緩衝液の溶液としての静脈内投与を行うことができる。

薬剤組成物は通常、ペプチドを通常の薬剤学的に受容できるキャリヤーと共に含む。通常、用量は静脈内投与の場合に、ペプチド約１０μｇ〜約２ｍｇ／ホスト体重ｋｇであり、経口投与量はこれより高いが、これらの化合物の性質は効果的な経口投与を可能にすると考えられる。全体的に、これらのペプチドによる対象の治療は、ペプチドが可溶である適当なキャリヤーを用いた、ＧｎＲＨの他の拮抗藁又は作用薬による臨床治療と同様に、一般に、実施される。

ＧｎＲＨ類似体を１回投与から長時間にわたって、例えば１週間から１年間にわたって供給することも好ましく、持続放出、デポ−（ｄｅｐｏｔ）又はインブラント投与形を利用することができる。例えば、投与形は体液への溶解度が低い化合物の薬剤学的に受容される塩、例えば多塩基酸による酸付加塩、多価金属陽イオンによる塩、又は２種の塩の組合せを含むことができる。比較的不溶な塩もゲルに、例えばステアリン酸アルミニウムゲルに配合することができる。注射のための適当な持続放出デポ−組成物も、例えば米国特許簗３．７７３．９１９号に述べられている、ポリ乳Ｊ？／ポリグリコール酸ポリマーのような、持続分解性、無毒性又は非抗原性ポリマー中に分散した又は封入されたＧｎＲＨ又はその塩を含みうる。これらの化合物はシラスティックインブラントにも配合することができる。

これらのペプチドは哺乳動物に静脈内、皮下、筋肉内、経口、経皮、例えば鼻腔内もしぐは膣内投与して、生殖能力を抑制及び／又は制御することができる、また例えば早熟思春期の管理のため又は放射線療法もしくは化学療法中のような、可逆的な生殖腺活性抑制を必要とする用途にも投与可能である。これらはステロイド依存性腫瘍の治療にも有用である。有効用量は投与形態、治療される哺乳動物の特定の種によっても変化する。典型的な投与形の１例はペプチドを含む静菌水溶液であり、これは約０．　１〜２．５ｍｇ／体重ｋｇ／日の範囲内の用量を与えるように非経口投与される。ペプチドの経口投与は固体形又は液体形のいずれかで行われる。

本発明をその好ましい実施態様に関して説明したが、当業者に自明であるような変化及び変更が、これに添付される請求の範囲に記載の本発明の範囲から逸脱せずになされうろことは理解されよう。例えば、ペプチドの効果を存意に減じないような、技術上公知の他の置換基を本発明のペプチドに用いることができる。

Ｄ−２ＰＡＬ及びＤ−４ＰＡ、ＬはＤ−３ＰＡＩ、と等価であると考えられる。

表■に記載した６−位置置換基は先行技術で公知の同等物であると考えられ、本発明のペプチドに含まれる。（４Ｆ）Ｐｈｅのような置換Ｐｈｅは７−位置にＰｈｅの代わりに使用可能である。ブチルＬｙｓとジエチルＬｙｓの両方はｒＬｙｓの同等物であると考えられるが：ＴＬｙｓはＵ又はＡｒｇが８−位置に存在しない場合に好ましい。他の疎水性アミノ酸残基も１−位置に、好ましくはＤ−異性体形で使用可能であり、所定アミノ酸残基の同等物と考えられる。さらに、類似体は同等と見なされる、前述したような、それらの薬剤学的もしくはヴエチナリアリイ（ｖｅｔ　１ｎａｒｉａｌ　ｌｙ）に受容される無毒性塩としても投与される。

本発明の特別な特徴は以下の請求の範囲において強調する。

補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）エア、１４□３０Ｂ団

Claims

【特許請求の範囲】

１．式：Ｇ−ＡＡ−ＡＡ２−ＡＡ′−Ｓｅｒ−ＡＡ５−ＡＡ６−ＡＡ７−ＡＡ８ −Ｐｒｏ−ＡＡ１０［式中、Ｇは水素もしくは炭素数７以下のアシル基であり；ＡＡはＡＡ１もしくはｐＧｌｕであり；ＡＡ１はデヒドロＰｒｏ、Ｄ−ｐＧｌｕ、（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐ、Ｐｒｏもしくはβ−Ｄ−ＮＡＬであり；ＡはＨ、Ｃｌ、Ｆ、ＮＯ２、ＣＨ３、ＯＣＨ３、Ｃ■Ｍｅ／４Ｃｌ、Ｃｌ２もしくはＢｒであり；ＢはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＨ３、Ｎ１ｍＦｏｒもしくはＮ■■Ａｃであり；ＡＡ２はＨｉｓもしくは（Ａ）Ｄ −Ｐｈｅであり；ＡＡ′はＡＡ３もしくはＴｒｐであり；ＡＡ３はＵ、Ｄ−ＰＡＬ，β−Ｄ−ＮＡＬもしくは（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐであり；ＡＡ５はＵ＊、Ｌｙｓ（ｃｐｄ）、Ｏｒｎ（ｃｐｄ）、Ｄｂｕ（ｃｐｄ）、Ｄｐｒ（ｃｐｄ）、Ｔｙｒ、（Ｃ）Ａｒｇ、（Ａ）Ｐｈｅ、（３Ｉ）ＴｙｒもしくはＨｉｓであり；ＣはＨもしくは低級アルキルであり；ＡＡ６はＵ＊、β−Ｄ−ＮＡＬ、（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐ、（Ａ′）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｄ）Ｄ−Ｏｒｎ、（Ｄ）Ｄ−Ｌｙｓ、（Ｄ）Ｄｂｕ、（Ｄ）Ｄ−Ｄｐｒ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−Ｈｉｓ、Ｄ−ＰＡＬ、（Ｃ）Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｖａ１、Ｄ−ＡｌａもしくはＤ−Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）であり；Ａ′はＡ、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３もしくはｇｕａであり；ＤはＧ、ｃｐｄもしくはアリール基であり；ＥはＨ、ｉｍＢｚ１もしくはジニトロフェノールであり；ＡＡ７はＮｌｅ、Ｌｅｕ、ＮＭＬ、（Ａ）Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｎｖａ、Ｔｙｒ、（Ｂ）ＴｒｐもしくはＰＡＬであり；ＡＡ８はＵ、ＩＬｙｓ、（Ｃ′）Ａｒｇもしくは（Ｃ′）Ｈａｒであり；Ｃ′はＨもしくはジ−低級アルキルであり；ＡＡ１０はＤ−ＡＩａ−ＮＨ２、Ｇｌｙ− ＮＨ２、ＮＨＮＨＣＯＮＨ２もしくはＮＨ（Ｒ）であり；Ｒは低級アルキルであり；Ｕ＊は次式で示され、▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは１〜６の整数であり；ＹはＮ−ＣＮ、Ｎ−ＣＯＮＨＲ９、Ｓ、ＯもしくはＣＨ−ＮＯ２であり、この場合Ｒ９はＨ、Ａｃ、アルキル、ナフチル、ビリジル、ビリミジル、ビラジニル、インドリル、キノリニルもしくはイミダゾリルであり、アルキル基及び環状基は非置換又は置換される；ＸはＮＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ３、Ｍ１−（ＣＨｑ）ｐ−Ｍ２もしくはＭ１−（ＣＨ２）ｐ′−Ｍ２（ＣＨ２）ｐ′′−Ｍ３であり、この場合Ｍ１はＮＲ１０、Ｎ、Ｏ、ＳもしくはＣＨＲ３であり、Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、フェニル、ビリジニル、ビリミジニルもしくはプリニルである；ｑは１もしくは２であり；Ｐ、ｐ′、ｐ′′は０〜６整数である；ｐ１０はＨ、メチル、エチル、プロピル、フェニルもしくは置換フェニルであり；Ｍ２とＭ３はＭ１、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＯＲ３もしくはＣＮであり；Ｒ１はＨ、アルキル、（ＣＨ２）ｎ′Ｘ′′、アルケニル、アルキニル、アリール、ましくはＸへの直接結合であり；ｎ′は１、２、３もしくは４であり；Ｘ′′はＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｂｒ、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３もしくはＣＦ２ＣＦ３であり；Ｒ２はＲ１、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ１、複素環もしくはｄｅｓＲ２であり、ＸがＮ３であるときにＲ２はｄｅｓＲ２である；但し、任意に、Ｒ１とＲ２は、Ｒ１−Ｒ２が−（ＣＨ２）ｍ−もしくは− （ＣＨ２）−Ｍ−（ＣＨ２）ｍ′−であるような、枝分かれもしくは非枝分かれメチレン架橋を介して相互に結合可能であり、この場合、ｍとｍ′は１〜６の整数であり、ＭはＮＨ、Ｏ、ＳもしくはＣＨＲ４であり、この場合Ｒ４は低級アルキル又はアリールである；但し、さらにＹとＲ２も任意に相互結合可能であり；但し、さらにＡＡ３、ＡＡ５、ＡＡ６及びＡＡ８の少なくとも１つはＵ＊であるとする］で示されるペプチド又はその非毒性塩。
２．式：ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−（Ｕ）−ＡＡ７−Ａｒｇ −Ｐｒｏ−ＡＡ１０で表され、ＡＡ７がＬｅｕもしくはＮＭＬであり、ＡＡ１０がＮＨ（Ｒ）である請求項１記載のペプチド。
３．式：Ｇ−ＡＡ１−（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ−ＡＡ３−Ｓｅｒ−ＡＡ５−ＡＡ６−ＡＡ７−ＡＡ８−Ｐｒｏ−ＡＡ１０を有する請求項１記載のペプチド。
４．ＡＡ６がＵ＊である請求項１記載のペプチド。
５．ＡＡ５がＵ＊である請求項１記載のペプチド。
６．ＡＡ８がＵである請求項１記載のペプチド。
７．ＡＡ３がＵである請求項１記載のペプチド。
８．ＡＡ１がβ−Ｄ−ＮＡＬであり、（Ａ）が４Ｃ１もしくは４Ｆであり；ＡＡ３がＤ−３ＰＡＬである請求項３記載のペプチド。
９．ＡＡ６がＤ−Ｔｒｐ，Ｄ−ＰＡＬ，β−Ｄ−ＮＡＬ，（ｉｍＢｚｌ）Ｄ−Ｈｉ３もしくは（６ＮＯ２）Ｄ−Ｔｒｐであり、ＡＡ５がＵである請求項８記載のペプチド。
１０．Ｕ＊がシアノグアニジン部分を含み、ｎが１，２，３もしくは４である請求項３記載のペプチド。
１１．Ｕ＊がＬｙｓ（ｂｃｇ）である請求項３記載のペプチド。
１２．Ｕ＊がＬｙｓ（ｉｃｇ）である請求項３記載のペプチド。
１３．ＡＡ８がＡｒｇであり、ＧがＡｃであり、（Ｄ）と（Ｅ）が両方ともＨである請求項３記載のペプチド。
１４．Ｕ＊がＬｙｓ（２ａｍｐ）である請求項３記載のペプチド。
１５．Ｕ＊がＬｙｓ（ｐｃｇ）である請求項３記載のペプチド。
１６．ＡＡ８がＩＬｙｓである請求項３記載のペプチド。
１７．Ｕ＊がＬｙｓ（ｔｃｇ）であり、ＡＡ８がＡｒｇである請求項３記載のペプチド。
１８．ＡＡ５がＬｙｓ（Ｎｉｃ）であり、ＡＡ６がＵであり、ＡＡ８がＩＬｙｓである請求項３記載のペプチド。
１９．Ｕ＊がＯｒｎ（ｉｃｇ）である請求項３記載のペプチド。
２０．請求項１記載のペプチド又はその非毒性塩の有効量を投与することを含むゴナドトロピン分泌の調節方法。
２１．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、ｎは１〜６の整数、好ましくは１、２、３もしくは４であり；ＹはＮ− ＣＮ、Ｎ−ＣＯＮＨＲ９、Ｓ、ＯもしくはＣＨ−ＮＯ２であり、この場合Ｒ９はＨ、ＡＣ、アルキル、ナフチル、ビリジル、ビリミジル、ビラジニル、インドリル、キノリニルもしくはイミダゾリルであり、アルキル基及び環状基は非置換又は置換される；ＸはＮＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ３、Ｍ１−（ＣＨｑ）ｐ−Ｍ２もしくはＭ１−（ＣＨ２）ｐ′−Ｍ２（ＣＨ２）ｐ′′−Ｍ３であり、この場合Ｍ１はＮＲ１０、Ｎ、Ｏ、ＳもしくはＣＨＲ３であり、Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、フェニル、ビリジニル、ビリミジニルもしくはプリニルである；ｑは１もしくは２であり：ｐ、ｐ′、ｐ′′は０〜６の整数である；Ｒ１０はＨ、メチル、エチル、プロピル、フェニル又はＣｌ、Ｆ、ＮＯ２もしくはＮＨ２による置換フェニルであり；Ｍ２とＭ３はＭ１、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＯＲ３もしくはＣＮであり；Ｒ１はＨ、アルキル（Ｃｌ〜Ｃ５）、（ＣＨ２）ｐ′Ｘ′′、アルケニル（Ｃ２〜Ｃ４）、アルキニル（Ｃ２〜Ｃ４）、アリール、ましくはＸへの直接結合であり；ｎ′は１、２、３もしくは４であり；Ｘ′′はＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ１、ＣＨ２Ｂｒ、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３もしくはＣＦ２ＣＦ３であり；Ｒ２はＲ１、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ１、複素環もしくはｄｅｓＲ２であり、ＸがＮ３であるときにＲ２はｄｅｓＲ２である；但し、任意に、Ｒ１とＲ２は、Ｒ１−Ｒ２が−（ＣＨ２）ｍ−もしくは−（ＣＨ２）−Ｍ−（ＣＨ２）ｍ′−であるような、枝分かれもしくは非枝分かれメチレン架橋を介して相互に結合可能であり、この場合、ｍとｍ′は１〜６の整数であり、ＭはＮＨ、Ｏ、ＳもしくはＣＨＲ４であり、この場合Ｒ４は低級アルキル又はアリールである；但し、さらにＹとＲ２も任意に相互結合可能である］を有するアンナチュラルアミノ酸。
２２．式：Ｇ−ＡＡ−ＡＡ２−ＡＡ′−Ｓｅｒ−ＡＡ５−ＡＡ５−ＡＡ７−ＡＡ８−Ｐｒｏ−ＡＡ１０［式中、Ｇは水素もしくは炭素数７以下のアシル基であり；ＡＡはＡＡ１もしくはｐＧｌｕであり；ＡＡ１はデヒドロＰｒｏ、Ｄ−ｐＧｌｕ、（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐ、Ｐｒｏもしくはβ−Ｄ−ＮＡＬであり；ＡはＨ、Ｃｌ、Ｆ、ＮＯ２、ＣＨ３、ＯＣＨ３、Ｃ■Ｍｅ／４ＣＩ、Ｃ１２もしくはＢｒであり；ＢはＨ、ＮＯ２、ＮＨ２、ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃ１、Ｂｒ、ＣＨ３、Ｎ■■ＦｏｒもしくはＮ■■Ａｃであり；ＡＡｚはＨｉｓもしくは（Ａ）Ｄ−Ｐｈｅであり；ＡＡ′はＡＡ３もしくはＴｒｐであり；ＡＡ３はＵ＊、Ｄ− ＰＡＬ，β−Ｄ−ＮＡＬもしくは（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐであり；ＡＡｓはＵ＊、Ｌｙｓ（ｃｐｄ）、Ｏｒｎ（ｃｐｄ）、Ｄｂｕ（ｃｐｄ）、Ｄｐｒ（ｃｐｄ）、Ｔｙｒ、（Ｃ）Ａｒｇ、（Ａ）Ｐｈｅ、（３Ｉ）ＴｙｒもしくはＨｉｓであり；ＣはＨもしくは低級アルキルであり；ＡＡ６はＵ、β−Ｄ−ＮＡＬ、（Ｂ）Ｄ−Ｔｒｐ、（Ａ′）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｄ）Ｄ−Ｏｒｎ、（Ｄ）Ｄ−Ｌｙｓ、（Ｄ）Ｄｂｕ、（Ｄ）Ｄ−Ｄｐｒ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−Ｈｉｓ、Ｄ−ＰＡＬ、（Ｃ）Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｄ− ＡｌａもしくはＤ−Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）であり；Ａ′はＡ、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３もしくはｇｕａであり；ＤはＧ、ｃｐｄもしくはアリール基であり；ＥはＨ、ｉｍＢｚｌもしくはジニトロフェノールであり；ＡＡ７はＮｌｅ、Ｌｅｕ、ＮＭＬ、（Ａ）Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｎｖａ、Ｔｙｒ、（Ｂ）ＴｒｐもしくはＰＡＬであり；ＡＡ８はＵ、ＩＬｙｓ、（Ｃ′）Ａｒｇもしくは（Ｃ′）Ｈａｒであり；Ｃ′ はＨもしくはジ−低級アルキルであり；ＡＡ１０はＤ−Ａｌａ−ＮＨ２、Ｇｌｙ −ＮＨ２、ＮＨＮＨＣＯＮＨ２もしくはＮＨ（Ｒ）であり；Ｒは低級アルキルであり；Ｕは次式で示され、▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは１〜６の整数であり；ＹはＮ−ＣＮ、Ｎ−ＣＯＮＨＲ９、Ｓ、ＯもしくはＣＨ−ＮＯ２であり、この場合Ｒ９はＨ、Ａｃ、アルキル、ナフチル、ビリジル、ビリミジル、ビラジニル、インドリル、キノリニルもしくはイミダゾリルであり、アルキル基及び環状基は非置換又は置換される；ＸはＮＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ３、Ｍ１−（ＣＨｑ）ｐ−Ｍ２もしくはＭ１−（ＣＨ２）ｐ′−Ｍ２（ＣＨ２）ｐ′′−Ｍ３であり、この場合Ｍ１はＮＲ１０、Ｎ、Ｏ、ＳもしくはＣＨＲ３であり、Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、フェニル、ビリジニル、ビリミジニルもしくはプリニルである；ｑは１もしくは２であり；ｐ、ｐ′、ｐ′′は０〜６の整数である；Ｒ１０はＨ、メチル、エチル、プロピル、フェニルもしくは置換フェニルであり；Ｍ２とＭ３はＭ１、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＯＲ３もしくはＣＮであり；Ｒ１はＨ、アルキル、（ＣＨ２）ｐ′Ｘ′′、アルケニル、アルキニル、アリール、ましくはＸへの直接結合であり；ｎ′は１、２、３もしくは４であり；Ｘ′′はＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｂｒ、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３もしくはＣＦ２ＣＦ３であり；Ｒ２はＲ１、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ１、複素環もしくはｄｅｓＲ２であり、ＸがＮ３であるときにＲ２はｄｅｓＲ２である；但し、任意に、Ｒ１とＲ２は、Ｒ１−Ｒ２が−（ＣＨ２）ｍ−もし（は −（ＣＨ２）−Ｍ−（ＣＨ２）ｍ′−であるような、枝分かれもしくは非枝分かれメチレン架橋を介して相互に結合可能であり、この場合、ｍとｍ′は１〜６の整数であり、ＭはＮＨ、Ｏ、ＳもしくはＣＨＲ４であり、この場合Ｒ４は低級アルキル又はアリールである；但し、さらにＹとＲ２も任意に相互結合可能であり；但し、さらにＡＡ３、ＡＡ５、ＡＡ６及びＡＡ８の少なくとも１つはＵであるとする〕で示されるペプチド又はその非毒性塩の製造方法であって、〔ａ）式：Ｘ１−ＡＡ−ＡＡ２（Ｘ５）−Ｕ３−Ｓｅｒ（Ｘ３）−Ｕ５−Ｕ６−ＡＡ７（Ｘ２またはＸ７）−Ｕ８−Ｐｒｏ−Ｘ８［式中、Ｕ３はＵ′又はＡＡ′（Ｘ２）であり；Ｕ５はＵ′又はＡＡ５（Ｘ４又はＸ５）であり；Ｕ６はＵ′又はＡＡ６（Ｘ４又はＸ５又はＸ６）であり；Ｕ８はＵ′又はＡＡ３（Ｘ５又はＸ６）であり；ＵはＬｙｓ（Ｘ■）、Ｏｒｎ（Ｘ■）、Ｄｂｕ（Ｘ■）又はＤｐｒ（Ｘ■）であり；Ｘ１は水素又はα−アミノ保護基であり：Ｘ２は水素又はインドール窒素の保護基であり；Ｘ３はＳｅｒ又はＴｈｒのヒドロキシル側鎖の保護基であり；Ｘ４は水素又はＴｙｒのフェノールヒドロキシル基の保護基であり；Ｘ５は水素又はグアニジノ又はイミダゾール側さの保護基であり；Ｘ６は第一アミノ側鎖の保護基であり；Ｘ２は塩基ラビル、ヒドラジンラビル又はチオラビルである第一アミノ基の保護基であり；Ｘ７は水素又はＭｅｔの保護基であり；Ｘ８はＧｌｙ−ＮＨ− ［樹脂サポート］、Ｄ−Ａｌａ−ＮＨ−［樹脂サポート］又はＮ（Ａ）−［樹脂サポート］であり；ＸａはＧｌｙもしくはＤ−ＡＩａのいずれかのアミドであるか、又はＰｒｏに直接結合した置換アミドである；但し、Ｕ３、Ｕ５、Ｕ６及びＵ８の少なくとも１つはＬｙｓ（Ｘ■）、Ｏｒｎ（Ｘ■）、Ｄｂｕ（Ｘ■）又はＤｐｒ（Ｘ■）のいずれかである］で示される中間体ペプチドを形成する工程；（ｂ）少なくとも１つのＸ■を除去して、前記中間体ペプチドの少なくとも１つのアミノ酸残基の側鎖第一アミノ基を脱保護する工程；（ｃ）前記脱保護側鎖第一アミノ基を反応させて、前記残基を式Ｕを有する残基に組み入れる工程；及び（ｄ）残留基Ｘ１〜Ｘ７を分離及び／又はＸ８に含まれる樹脂サポートから解離する工程を含む方法。
２３．Ｕ５がＵ′である請求項２２記載の方法。
２４．Ｕ６がＵ′である請求項２２記載の方法。
２５．Ｕ３又はＵ８がＵ′である請求項２２記載の方法。
２６．Ｕ５又はＵ８がＵ′である請求項２２記載の方法。
２７．前記ペプチド中のＡＡ５がＵ＊であり、ＡＡ８の一部である側側アミノ基を組み込むシアノグアニジノ部分を含む請求項２６記載の方法。