JPH0540118A - 尿沈渣染色試薬およびその調製方法 - Google Patents
尿沈渣染色試薬およびその調製方法Info
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- JPH0540118A JPH0540118A JP19648091A JP19648091A JPH0540118A JP H0540118 A JPH0540118 A JP H0540118A JP 19648091 A JP19648091 A JP 19648091A JP 19648091 A JP19648091 A JP 19648091A JP H0540118 A JPH0540118 A JP H0540118A
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- staining reagent
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 この発明に係る尿沈渣染色試薬は、アルシア
ンブルー(Alcian blue）、ピロニンＢ(PyroninＢ) 、お
よび浸透圧上昇物質を含有した水溶液よりなるものとし
ている。 【効果】 この発明に係る尿沈渣染色試薬は、赤血球溶
血による赤血球数の算定が不正確になるということはな
く、また尿中有形成分の視認性にも優れており、日常検
査に用いる尿沈渣染色試薬として有用性の高いものとな
った。
ンブルー(Alcian blue）、ピロニンＢ(PyroninＢ) 、お
よび浸透圧上昇物質を含有した水溶液よりなるものとし
ている。 【効果】 この発明に係る尿沈渣染色試薬は、赤血球溶
血による赤血球数の算定が不正確になるということはな
く、また尿中有形成分の視認性にも優れており、日常検
査に用いる尿沈渣染色試薬として有用性の高いものとな
った。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、細胞成分や円柱など
の尿沈渣の染色試薬、およびその染色試薬の調製方法に
関するものである。
の尿沈渣の染色試薬、およびその染色試薬の調製方法に
関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来の尿沈渣染色試薬には、ステルンハ
イマー(Sternheimer) 染色試薬、変法ステルンハイマー
(New Sternheimer) 染色試薬、ステルンハイマー・マル
ビン(Sternheimer-Malbin)染色試薬などが存在する。ス
テルンハイマー染色試薬は、２％ナショナルファースト
ブルー (National fast blue) 水溶液のＩ液と、1.5 ％
ピロニンＢ(PyroninＢ) 水溶液のII液とからなり、この
染色試薬を調製するには、Ｉ液とII液を１：１の割合で
混合していた。
イマー(Sternheimer) 染色試薬、変法ステルンハイマー
(New Sternheimer) 染色試薬、ステルンハイマー・マル
ビン(Sternheimer-Malbin)染色試薬などが存在する。ス
テルンハイマー染色試薬は、２％ナショナルファースト
ブルー (National fast blue) 水溶液のＩ液と、1.5 ％
ピロニンＢ(PyroninＢ) 水溶液のII液とからなり、この
染色試薬を調製するには、Ｉ液とII液を１：１の割合で
混合していた。
【０００３】変法ステルンハイマー染色試薬は、２％ア
ルシアンブルー(Alcian blue）水溶液のＩ液と、1.5 ％
ピロニンＢ(PyroninＢ) 水溶液のII液とからなり、この
染色試薬を調製するには、Ｉ液とII液を２：１の割合で
混合していた。ステルンハイマー・マルビン染色試薬
は、クリスタル紫 3.0ｇを95％エチルアルコール 20.0m
l に溶解し、これにシュウ酸アンモニウム 0.8ｇを添加
して精製水 80.0ml で希釈してなるＩ液と、サフラニン
Ｏ 0.25 ｇを95％エチルアルコール 10.0ml に溶解し、
これを精製水 100.0mlで希釈してなるII液とからなり、
この染色試薬を調製するには、Ｉ液とII液を３：９７の
割合で混合していた。
ルシアンブルー(Alcian blue）水溶液のＩ液と、1.5 ％
ピロニンＢ(PyroninＢ) 水溶液のII液とからなり、この
染色試薬を調製するには、Ｉ液とII液を２：１の割合で
混合していた。ステルンハイマー・マルビン染色試薬
は、クリスタル紫 3.0ｇを95％エチルアルコール 20.0m
l に溶解し、これにシュウ酸アンモニウム 0.8ｇを添加
して精製水 80.0ml で希釈してなるＩ液と、サフラニン
Ｏ 0.25 ｇを95％エチルアルコール 10.0ml に溶解し、
これを精製水 100.0mlで希釈してなるII液とからなり、
この染色試薬を調製するには、Ｉ液とII液を３：９７の
割合で混合していた。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】ステルンハイマー染色
試薬および変法ステルンハイマー染色試薬を用いた尿沈
渣の染色法は、尿中有形成分の視認性に優れた有用性の
高い超生体染色法であるが、いくつかの課題を有してお
り、その中でも赤血球溶血作用による赤血球数の算定が
不正確になるという大きな課題を有していた。
試薬および変法ステルンハイマー染色試薬を用いた尿沈
渣の染色法は、尿中有形成分の視認性に優れた有用性の
高い超生体染色法であるが、いくつかの課題を有してお
り、その中でも赤血球溶血作用による赤血球数の算定が
不正確になるという大きな課題を有していた。
【０００５】ステルンハイマー・マルビン染色試薬を用
いた尿沈渣の染色法は、白血球の核の染め分けについて
上記染色法より劣るという課題を有していた。また、ス
テルンハイマー・マルビン染色試薬の調製は、Ｉ液とII
液を混合する割合が掛け離れているので、調製無駄が生
じるという課題を有していた。そこで、この発明は、上
記ステルンハイマー染色試薬、変法ステルンハイマー染
色試薬、およびステルンハイマー・マルビン染色試薬、
ならびにこれらの染色試薬を用いた尿沈渣の染色法が有
する課題を解決することを目的としてなされたものであ
る。
いた尿沈渣の染色法は、白血球の核の染め分けについて
上記染色法より劣るという課題を有していた。また、ス
テルンハイマー・マルビン染色試薬の調製は、Ｉ液とII
液を混合する割合が掛け離れているので、調製無駄が生
じるという課題を有していた。そこで、この発明は、上
記ステルンハイマー染色試薬、変法ステルンハイマー染
色試薬、およびステルンハイマー・マルビン染色試薬、
ならびにこれらの染色試薬を用いた尿沈渣の染色法が有
する課題を解決することを目的としてなされたものであ
る。
【０００６】
【課題を解決するための手段】この発明に係る尿沈渣染
色試薬は、アルシアンブルー(Alcian blue）、ピロニン
Ｂ(PyroninＢ)、および浸透圧上昇物質を含有した水溶
液よりなるものとしている。前記アルシアンブルー(Alc
ian blue）の濃度は、約0.7 〜1.3 ％とするのが好まし
く、ピロニンＢ(PyroninＢ) の濃度は、約0.4 〜0.5 ％
とするのが好ましい。さらに、前記尿沈渣染色試薬水溶
液のｐＨは、約5.0 とするのが好ましい。
色試薬は、アルシアンブルー(Alcian blue）、ピロニン
Ｂ(PyroninＢ)、および浸透圧上昇物質を含有した水溶
液よりなるものとしている。前記アルシアンブルー(Alc
ian blue）の濃度は、約0.7 〜1.3 ％とするのが好まし
く、ピロニンＢ(PyroninＢ) の濃度は、約0.4 〜0.5 ％
とするのが好ましい。さらに、前記尿沈渣染色試薬水溶
液のｐＨは、約5.0 とするのが好ましい。
【０００７】浸透圧上昇物質としては、塩化ナトリウ
ム、塩化カリウム、単糖類、二糖類、エチレンジアミン
四酢酸塩など用いることができる。エチレンジアミン四
酢酸塩を用いた場合は、その濃度を約４％とすれば、尿
沈渣染色の際に赤血球の浸透圧を最適な値 (280 〜285o
sm) に上昇させることができる。また、このエチレンジ
アミン四酢酸塩を用いた場合は、尿中に析出してくる塩
類を溶解させることができる。
ム、塩化カリウム、単糖類、二糖類、エチレンジアミン
四酢酸塩など用いることができる。エチレンジアミン四
酢酸塩を用いた場合は、その濃度を約４％とすれば、尿
沈渣染色の際に赤血球の浸透圧を最適な値 (280 〜285o
sm) に上昇させることができる。また、このエチレンジ
アミン四酢酸塩を用いた場合は、尿中に析出してくる塩
類を溶解させることができる。
【０００８】この発明に係る尿沈渣染色試薬の調製方法
は、約１〜2.0％アルシアンブルー(Alcian blue）水溶
液２容量と約1.2 〜1.5 ％ピロニンＢ(PyroninＢ) 水溶
液１容量とを混合し、この混合溶液に約４％の割合にな
るようにエチレンジアミン四酢酸塩を添加し、さらにこ
の混合溶液のｐＨを約5.0 にしている。この発明に係る
尿沈渣染色試薬の最適なｐＨとエチレンジアミン四酢酸
塩の濃度を決定するに当たって、次に示す実験を行っ
た。実験結果は、表１〜３、表４〜５、および図１に示
した。
は、約１〜2.0％アルシアンブルー(Alcian blue）水溶
液２容量と約1.2 〜1.5 ％ピロニンＢ(PyroninＢ) 水溶
液１容量とを混合し、この混合溶液に約４％の割合にな
るようにエチレンジアミン四酢酸塩を添加し、さらにこ
の混合溶液のｐＨを約5.0 にしている。この発明に係る
尿沈渣染色試薬の最適なｐＨとエチレンジアミン四酢酸
塩の濃度を決定するに当たって、次に示す実験を行っ
た。実験結果は、表１〜３、表４〜５、および図１に示
した。
【０００９】実験１． （実験方法）先ず、生理食塩水に健常人全血を加えた試
料 100μｌに、以下に示す各サンプルを20μｌ（無染色
は生理食塩水20μｌ）添加し、添加５分後、１０分後、
および３０分後の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝
１０）により算定した。
料 100μｌに、以下に示す各サンプルを20μｌ（無染色
は生理食塩水20μｌ）添加し、添加５分後、１０分後、
および３０分後の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝
１０）により算定した。
【００１０】次に、濾過健常人プール尿に健常人全血を
加えた試料 200μｌに、以下に示す各サンプルを20μｌ
（無染色は生理食塩水20μｌ）添加し、添加１０分後の
赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算定
した。各サンプルの組成 （なお、ｐＨ調節は水酸化ナトリウム
により行った） サンプル１…ｐＨを3.65とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを２％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル２…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを２％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル３…ｐＨを6.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを２％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル４…ｐＨを3.90とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル５…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル６…ｐＨを6.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル７…ステルンハイマー染色試薬 サンプル８…ステルンハイマー・マルビン染色試薬 （実験結果）表１〜３、図１よりサンプル２および５
は、溶血作用が少ないことが確認できた。また、表４〜
５よりサンプル５は、無染色（対照）との回帰式、相関
係数が最も良好であった。
加えた試料 200μｌに、以下に示す各サンプルを20μｌ
（無染色は生理食塩水20μｌ）添加し、添加１０分後の
赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算定
した。各サンプルの組成 （なお、ｐＨ調節は水酸化ナトリウム
により行った） サンプル１…ｐＨを3.65とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを２％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル２…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを２％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル３…ｐＨを6.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを２％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル４…ｐＨを3.90とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル５…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル６…ｐＨを6.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.6 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.2 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル７…ステルンハイマー染色試薬 サンプル８…ステルンハイマー・マルビン染色試薬 （実験結果）表１〜３、図１よりサンプル２および５
は、溶血作用が少ないことが確認できた。また、表４〜
５よりサンプル５は、無染色（対照）との回帰式、相関
係数が最も良好であった。
【００１１】以上によりサンプル５が最適なｐＨおよび
エチレンジアミン四酢酸塩の含有濃度であった。
エチレンジアミン四酢酸塩の含有濃度であった。
【００１２】
【表１】
【００１３】
【表２】
【００１４】
【表３】
【００１５】
【表４】
【００１６】
【表５】
【００１７】この発明に係る尿沈渣染色試薬の最適なア
ルシアンブルー水溶液の濃度を決定するに当たって、次
に示す実験を行った。実験結果は、表６に示した。 実験２． （実験方法）以下に示す各サンプルを１滴を日常検査の
尿沈渣200 μｌに滴下し、滴下１０分後に有形成分の染
色性を観察した。
ルシアンブルー水溶液の濃度を決定するに当たって、次
に示す実験を行った。実験結果は、表６に示した。 実験２． （実験方法）以下に示す各サンプルを１滴を日常検査の
尿沈渣200 μｌに滴下し、滴下１０分後に有形成分の染
色性を観察した。
【００１８】各サンプルの組成 サンプル９…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、2.0 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル10…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.0 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル11…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、0.75％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル12…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、0.5 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 （実験結果）表６に示すように、白血球の核、移行上皮
細胞の核、硝子円柱、粘液糸の染色性に注目して観察し
た結果、サンプル10が最も鏡検し易く、サンプル９が次
に鏡検し易い染色性であった。また、何れのサンプルも
エチレンジアミン四酢酸の添加やｐＨ調節による塩類の
消失や変形、赤血球塊の形成などは顕著に観察されなか
った。
二カリウムを４％含有し、2.0 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル10…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、1.0 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル11…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、0.75％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 サンプル12…ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸
二カリウムを４％含有し、0.5 ％のアルシアンブルー水
溶液２容量と1.5 ％のピロニンＢ水溶液１容量とを混合
した染色試薬 （実験結果）表６に示すように、白血球の核、移行上皮
細胞の核、硝子円柱、粘液糸の染色性に注目して観察し
た結果、サンプル10が最も鏡検し易く、サンプル９が次
に鏡検し易い染色性であった。また、何れのサンプルも
エチレンジアミン四酢酸の添加やｐＨ調節による塩類の
消失や変形、赤血球塊の形成などは顕著に観察されなか
った。
【００１９】
【表６】
【００２０】
【作用】この発明に係る尿沈渣染色試薬は、尿沈渣染色
に用いた場合、浸透圧上昇物質の含有により、赤血球の
浸透圧を適当な値に上昇させ、赤血球の溶血作用を防止
することができる。
に用いた場合、浸透圧上昇物質の含有により、赤血球の
浸透圧を適当な値に上昇させ、赤血球の溶血作用を防止
することができる。
【００２１】
【実施例】以下、この発明を実施例に基づいて、さらに
詳細に説明する。 実施例１．ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸二
カリウムを４％含有し、アルシアンブルーを0.67％含有
し、ピロニンＢを0.5％含有した水溶液よりなる染色試
薬を、以下のようにして調製した。
詳細に説明する。 実施例１．ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸二
カリウムを４％含有し、アルシアンブルーを0.67％含有
し、ピロニンＢを0.5％含有した水溶液よりなる染色試
薬を、以下のようにして調製した。
【００２２】アルシアンブルー1.0 ｇを精製水100ml
に、ピロニンＢ0.75ｇを精製水50mlにそれぞれ溶解し、
両溶液を混合する。この混合溶液にエチレンジアミン四
酢酸二カリウム６ｇを添加する。そして、この混合溶液
に少量の水酸化ナトリウムを添加し混合溶液のｐＨを5.
0に調製した。上記染色試薬（無染色は生理食塩水20μ
ｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人全血を加え
た試料 200μｌに添加し、添加１０分後および３０分後
の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算
定した。算定結果は表７〜８に示した。また、添加１０
分後の赤血球数が、無染色と比較して統計学的有意差
（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか否かを算出
したところ、統計学的有意差は認められなかった。 実施例２．ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸二
カリウムを４％含有し、アルシアンブルーを1.33％含有
し、ピロニンＢ水溶液を0.5 ％含有した水溶液よりなる
染色試薬を、以下のようにして調製した。
に、ピロニンＢ0.75ｇを精製水50mlにそれぞれ溶解し、
両溶液を混合する。この混合溶液にエチレンジアミン四
酢酸二カリウム６ｇを添加する。そして、この混合溶液
に少量の水酸化ナトリウムを添加し混合溶液のｐＨを5.
0に調製した。上記染色試薬（無染色は生理食塩水20μ
ｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人全血を加え
た試料 200μｌに添加し、添加１０分後および３０分後
の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算
定した。算定結果は表７〜８に示した。また、添加１０
分後の赤血球数が、無染色と比較して統計学的有意差
（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか否かを算出
したところ、統計学的有意差は認められなかった。 実施例２．ｐＨを5.0 とし、エチレンジアミン四酢酸二
カリウムを４％含有し、アルシアンブルーを1.33％含有
し、ピロニンＢ水溶液を0.5 ％含有した水溶液よりなる
染色試薬を、以下のようにして調製した。
【００２３】アルシアンブルー2.0 ｇを精製水100ml
に、ピロニンＢ0.75ｇを精製水50mlにそれぞれ溶解し、
両溶液を混合する。この混合溶液にエチレンジアミン四
酢酸二カリウム６ｇを添加する。そして、この混合溶液
に少量の水酸化ナトリウムを添加し混合溶液のｐＨを5.
0に調節した。上記染色試薬（無染色は生理食塩水20μ
ｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人全血を加え
た試料 200μｌに添加し、添加１０分後および３０分後
の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算
定した。算定結果は表７〜８に示した。また、添加１０
分後の赤血球数が、無染色と比較して統計学的有意差
（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか否かを算出
したところ、統計学的有意差は認められなかった。 比較例１．ステルンハイマー染色試薬を、以下のように
して調製した。
に、ピロニンＢ0.75ｇを精製水50mlにそれぞれ溶解し、
両溶液を混合する。この混合溶液にエチレンジアミン四
酢酸二カリウム６ｇを添加する。そして、この混合溶液
に少量の水酸化ナトリウムを添加し混合溶液のｐＨを5.
0に調節した。上記染色試薬（無染色は生理食塩水20μ
ｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人全血を加え
た試料 200μｌに添加し、添加１０分後および３０分後
の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算
定した。算定結果は表７〜８に示した。また、添加１０
分後の赤血球数が、無染色と比較して統計学的有意差
（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか否かを算出
したところ、統計学的有意差は認められなかった。 比較例１．ステルンハイマー染色試薬を、以下のように
して調製した。
【００２４】アルシアンブルー 2.0ｇを精製水100.0ml
に溶解したものをＩ液とする。ピロニンＢ 1.5ｇを精製
水100.0ml に溶解したものをII液とする。そして、Ｉ液
の100.0ml とII液の50.0mlを混合する。上記染色試薬
（無染色は生理食塩水20μｌ）20μｌを、濾過健常人プ
ール尿に健常人全血を加えた試料 200μｌに添加し、添
加１０分後および３０分後の赤血球数をノウバウエル計
算盤（Ｎ＝２０）により算定した。算定結果は表７〜８
に示した。また、添加１０分後の赤血球数が、無染色と
比較して統計学的有意差（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が
認められるか否かを算出したところ、統計学的有意差が
認められた。 比較例２ 市販のＭ社製ステルンハイマー染色試薬（無染色は生理
食塩水20μｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人
全血を加えた試料 200μｌに添加し、添加１０分後およ
び３０分後の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２
０）により算定した。算定結果は表７〜８に示した。ま
た、添加１０分後の赤血球数が、無染色と比較して統計
学的有意差（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか
否かを算出したところ、統計学的有意差が認められた。 比較例３ 市販のＫ社製ステルンハイマー染色試薬（無染色は生理
食塩水20μｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人
全血を加えた試料 200μｌに添加し、添加１０分後およ
び３０分後の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２
０）により算定した。算定結果は表７〜８に示した。ま
た、添加１０分後の赤血球数が、無染色と比較して統計
学的有意差（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか
否かを算出したところ、統計学的有意差が認められた。 比較例４．ステルンハイマー・マルビン染色試薬を、以
下のようにして調製した。
に溶解したものをＩ液とする。ピロニンＢ 1.5ｇを精製
水100.0ml に溶解したものをII液とする。そして、Ｉ液
の100.0ml とII液の50.0mlを混合する。上記染色試薬
（無染色は生理食塩水20μｌ）20μｌを、濾過健常人プ
ール尿に健常人全血を加えた試料 200μｌに添加し、添
加１０分後および３０分後の赤血球数をノウバウエル計
算盤（Ｎ＝２０）により算定した。算定結果は表７〜８
に示した。また、添加１０分後の赤血球数が、無染色と
比較して統計学的有意差（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が
認められるか否かを算出したところ、統計学的有意差が
認められた。 比較例２ 市販のＭ社製ステルンハイマー染色試薬（無染色は生理
食塩水20μｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人
全血を加えた試料 200μｌに添加し、添加１０分後およ
び３０分後の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２
０）により算定した。算定結果は表７〜８に示した。ま
た、添加１０分後の赤血球数が、無染色と比較して統計
学的有意差（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか
否かを算出したところ、統計学的有意差が認められた。 比較例３ 市販のＫ社製ステルンハイマー染色試薬（無染色は生理
食塩水20μｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人
全血を加えた試料 200μｌに添加し、添加１０分後およ
び３０分後の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２
０）により算定した。算定結果は表７〜８に示した。ま
た、添加１０分後の赤血球数が、無染色と比較して統計
学的有意差（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか
否かを算出したところ、統計学的有意差が認められた。 比較例４．ステルンハイマー・マルビン染色試薬を、以
下のようにして調製した。
【００２５】クリスタル紫 3.0ｇを95％エチルアルコー
ル 20.0ml に溶解し、これにシュウ酸アンモニウム 0.8
ｇを添加して精製水 80.0ml で希釈したものをＩ液とす
る。サフラニンＯ 0.25 ｇを95％エチルアルコール 10.
0ml に溶解し、これを精製水100.0ml で希釈したものを
II液とする。そして、Ｉ液の 3.0mlとII液の97.0mlを混
合する。
ル 20.0ml に溶解し、これにシュウ酸アンモニウム 0.8
ｇを添加して精製水 80.0ml で希釈したものをＩ液とす
る。サフラニンＯ 0.25 ｇを95％エチルアルコール 10.
0ml に溶解し、これを精製水100.0ml で希釈したものを
II液とする。そして、Ｉ液の 3.0mlとII液の97.0mlを混
合する。
【００２６】上記染色試薬（無染色は生理食塩水20μ
ｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人全血を加え
た試料 200μｌに添加し、添加１０分後および３０分後
の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算
定した。算定結果は表７〜８に示した。また、添加１０
分後の赤血球数が、無染色と比較して統計学的有意差
（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか否かを算出
したところ、統計学的有意差は認められなかった。
ｌ）20μｌを、濾過健常人プール尿に健常人全血を加え
た試料 200μｌに添加し、添加１０分後および３０分後
の赤血球数をノウバウエル計算盤（Ｎ＝２０）により算
定した。算定結果は表７〜８に示した。また、添加１０
分後の赤血球数が、無染色と比較して統計学的有意差
（Wilcoxon検定：Ｐ＜0.05）が認められるか否かを算出
したところ、統計学的有意差は認められなかった。
【００２７】
【表７】
【００２８】
【表８】
【００２９】
【発明の効果】この発明に係る尿沈渣染色試薬は、尿沈
渣染色に用いた場合、赤血球の溶血作用を防止すること
ができるので、赤血球溶血による赤血球数の算定が不正
確になるということはなく、また尿中有形成分の視認性
にも優れており、日常検査に用いる尿沈渣染色試薬とし
て有用性の高いものとなった。
渣染色に用いた場合、赤血球の溶血作用を防止すること
ができるので、赤血球溶血による赤血球数の算定が不正
確になるということはなく、また尿中有形成分の視認性
にも優れており、日常検査に用いる尿沈渣染色試薬とし
て有用性の高いものとなった。
【００３０】また、この発明に係る尿沈渣染色試薬の調
製方法は、ステルンハイマー・マルビン染色試薬の調製
方法と比較して調製無駄が生じないものとなった。
製方法は、ステルンハイマー・マルビン染色試薬の調製
方法と比較して調製無駄が生じないものとなった。
【図１】この発明に係る尿沈渣染色試薬および従来の尿
沈渣染色試薬の尿沈渣染色試料への添加経過時間と赤血
球数の増減率を示すグラフである。
沈渣染色試薬の尿沈渣染色試料への添加経過時間と赤血
球数の増減率を示すグラフである。
Claims (6)
- 【請求項１】 アルシアンブルー(Alcian blue）、ピロ
ニンＢ(PyroninＢ)、および浸透圧上昇物質を含有した
水溶液よりなることを特徴とする尿沈渣染色試薬。 - 【請求項２】 アルシアンブルー(Alcian blue）の濃度
を約0.7 〜1.3 ％、ピロニンＢ(PyroninＢ) の濃度を約
0.4 〜0.5 ％としたことを特徴とする請求項１記載の尿
沈渣染色試薬。 - 【請求項３】 水溶液のｐＨを約5.0 としたことを特徴
とする請求項１または２記載の尿沈渣染色試薬。 - 【請求項４】 浸透圧上昇物質として、エチレンジアミ
ン四酢酸塩を用いたことを特徴とする請求項１、２、ま
たは３記載の尿沈渣染色試薬。 - 【請求項５】 エチレンジアミン四酢酸塩の濃度を約４
％としたことを特徴とする請求項４記載の尿沈渣染色試
薬。 - 【請求項６】 約１〜2.0 ％アルシアンブルー(Alcian
blue）水溶液２容量と約1.2 〜1.5 ％ピロニンＢ(Pyron
inＢ) 水溶液１容量とを混合し、この混合溶液に約４％
の割合になるようにエチレンジアミン四酢酸塩を添加
し、さらにこの混合溶液のｐＨを約5.0 にすることを特
徴とする尿沈渣染色試薬の調製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19648091A JPH0540118A (ja) | 1991-08-06 | 1991-08-06 | 尿沈渣染色試薬およびその調製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19648091A JPH0540118A (ja) | 1991-08-06 | 1991-08-06 | 尿沈渣染色試薬およびその調製方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0540118A true JPH0540118A (ja) | 1993-02-19 |
Family
ID=16358494
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19648091A Pending JPH0540118A (ja) | 1991-08-06 | 1991-08-06 | 尿沈渣染色試薬およびその調製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0540118A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4862304A (en) * | 1984-10-05 | 1989-08-29 | Olympus Optical Co., Ltd. | Composite magnetic head |
| EP0656540A2 (en) * | 1993-10-08 | 1995-06-07 | Hitachi, Ltd. | Dyeing agent and apparatus for image analysis of flow type stain particles |
| EP0678742A2 (en) * | 1994-04-21 | 1995-10-25 | Hitachi, Ltd. | Monitoring method of stain solution for particle analysis and calibration method of particle analysis |
| KR100753899B1 (ko) * | 2005-12-27 | 2007-08-31 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 알시안 블루를 이용한 시각화 방법 |
| WO2014002748A1 (ja) * | 2012-06-25 | 2014-01-03 | 株式会社堀場製作所 | 光透過性粒子測定方法及び光透過性粒子測定装置 |
| WO2021240914A1 (ja) * | 2020-05-26 | 2021-12-02 | 東洋紡株式会社 | 尿沈渣用染色液 |
-
1991
- 1991-08-06 JP JP19648091A patent/JPH0540118A/ja active Pending
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4862304A (en) * | 1984-10-05 | 1989-08-29 | Olympus Optical Co., Ltd. | Composite magnetic head |
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| EP0656540A3 (en) * | 1993-10-08 | 1995-12-27 | Hitachi Ltd | Coloring reagent and flow type imaging analysis device for colored particles. |
| US5585469A (en) * | 1993-10-08 | 1996-12-17 | Hitachi, Ltd. | Dyeing agent having at least two dyes for staining a biological sample and staining method employing the dyeing agent |
| EP0678742A2 (en) * | 1994-04-21 | 1995-10-25 | Hitachi, Ltd. | Monitoring method of stain solution for particle analysis and calibration method of particle analysis |
| EP0678742A3 (en) * | 1994-04-21 | 1996-01-31 | Hitachi Ltd | Monitoring procedure of a coloring solution for particle analysis and calibration procedure of particle analysis. |
| US5728582A (en) * | 1994-04-21 | 1998-03-17 | Hitachi, Ltd. | Monitoring method of stain solution for particle analysis and calibration method of particle analysis |
| KR100753899B1 (ko) * | 2005-12-27 | 2007-08-31 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 알시안 블루를 이용한 시각화 방법 |
| WO2014002748A1 (ja) * | 2012-06-25 | 2014-01-03 | 株式会社堀場製作所 | 光透過性粒子測定方法及び光透過性粒子測定装置 |
| JPWO2014002748A1 (ja) * | 2012-06-25 | 2016-05-30 | 株式会社堀場製作所 | 光透過性粒子測定方法及び光透過性粒子測定装置 |
| WO2021240914A1 (ja) * | 2020-05-26 | 2021-12-02 | 東洋紡株式会社 | 尿沈渣用染色液 |
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