JPH05339165A - 線維芽細胞成長因子含有製剤 - Google Patents
線維芽細胞成長因子含有製剤Info
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- JPH05339165A JPH05339165A JP4168552A JP16855292A JPH05339165A JP H05339165 A JPH05339165 A JP H05339165A JP 4168552 A JP4168552 A JP 4168552A JP 16855292 A JP16855292 A JP 16855292A JP H05339165 A JPH05339165 A JP H05339165A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）を吸着させた
リン酸カルシウム質を種々の溶媒、コラーゲン、フィブ
リノーゲンあるいはフィブリン中で懸濁あるいは接触さ
せることにより得られることを特徴とする製剤である。 【効果】 本発明の製剤は、ＦＧＦを安定に保持し、さ
らにそれを徐々に放出することにより薬効を示すことか
ら、ＦＧＦの製剤として有用である。
リン酸カルシウム質を種々の溶媒、コラーゲン、フィブ
リノーゲンあるいはフィブリン中で懸濁あるいは接触さ
せることにより得られることを特徴とする製剤である。 【効果】 本発明の製剤は、ＦＧＦを安定に保持し、さ
らにそれを徐々に放出することにより薬効を示すことか
ら、ＦＧＦの製剤として有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、線維芽細胞成長因子
（Fibroblast growth factor、以下ＦＧＦと略称す
る。）を含有する製剤に関するものである。
（Fibroblast growth factor、以下ＦＧＦと略称す
る。）を含有する製剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】ＦＧＦは、１９７４年Ｇｏｓｐｏｄａｒ
ｏｗｉｃｚにより、ウシ下垂体から線維芽細胞の増殖を
強く刺激するタンパク質として見いだされた（Ｎａｔｕ
ｒｅ：２４巻，１２３頁，１９７４年）。その後ＦＧＦ
の遺伝子がクローニングされ、遺伝子組み換え技術を用
いた大量生産が可能となり、ＦＧＦの研究は精力的に行
われるようになった。その結果、線維芽細胞ばかりでな
く血管内皮細胞、血管平滑筋細胞、角膜内皮細胞、骨芽
細胞、軟骨細胞など多種の細胞に対して、細胞増殖を刺
激することが明らかになってきた。
ｏｗｉｃｚにより、ウシ下垂体から線維芽細胞の増殖を
強く刺激するタンパク質として見いだされた（Ｎａｔｕ
ｒｅ：２４巻，１２３頁，１９７４年）。その後ＦＧＦ
の遺伝子がクローニングされ、遺伝子組み換え技術を用
いた大量生産が可能となり、ＦＧＦの研究は精力的に行
われるようになった。その結果、線維芽細胞ばかりでな
く血管内皮細胞、血管平滑筋細胞、角膜内皮細胞、骨芽
細胞、軟骨細胞など多種の細胞に対して、細胞増殖を刺
激することが明らかになってきた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】ＦＧＦは、このように
種々の薬理作用を持つことから種々の臨床応用が考えら
れるが、一方そのためには疾患部位への使用に適した製
剤が望まれている。特に疾患部位での滞溜性を有し、徐
々にＦＧＦを放出させる製剤が望まれている。
種々の薬理作用を持つことから種々の臨床応用が考えら
れるが、一方そのためには疾患部位への使用に適した製
剤が望まれている。特に疾患部位での滞溜性を有し、徐
々にＦＧＦを放出させる製剤が望まれている。
【０００４】そこで、このような特性を有するＦＧＦの
製剤化を目的に検討を進めてきた。
製剤化を目的に検討を進めてきた。
【０００５】
【問題を解決するための手段】本発明者らは、この目的
を達成するために鋭意検討した結果、ＦＧＦをリン酸カ
ルシウム質に吸着させることにより、またＦＧＦをゲル
中に含有させることにより、さらにはＦＧＦをリン酸カ
ルシウム質に吸着させたものをコラーゲン、フィブリノ
ーゲンあるいはフィブリン等のゲル中に含有させること
により本発明を完成した。
を達成するために鋭意検討した結果、ＦＧＦをリン酸カ
ルシウム質に吸着させることにより、またＦＧＦをゲル
中に含有させることにより、さらにはＦＧＦをリン酸カ
ルシウム質に吸着させたものをコラーゲン、フィブリノ
ーゲンあるいはフィブリン等のゲル中に含有させること
により本発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明はＦＧＦを吸着させたリ
ン酸カルシウム質を、種々の溶媒、コラーゲン、フィブ
リノーゲンあるいはフィブリン中で懸濁あるいは接触さ
せることにより得られることを特徴とする製剤である。
これらのリン酸カルシウム質吸着製剤あるいはゲル製剤
は、ＦＧＦの疾患部位での滞溜性を保ち、かつＦＧＦを
徐々に放出させる特徴を有する製剤である。
ン酸カルシウム質を、種々の溶媒、コラーゲン、フィブ
リノーゲンあるいはフィブリン中で懸濁あるいは接触さ
せることにより得られることを特徴とする製剤である。
これらのリン酸カルシウム質吸着製剤あるいはゲル製剤
は、ＦＧＦの疾患部位での滞溜性を保ち、かつＦＧＦを
徐々に放出させる特徴を有する製剤である。
【０００７】本発明で用いられるＦＧＦとしては、塩基
性ＦＧＦでもよく酸性ＦＧＦでもよい。
性ＦＧＦでもよく酸性ＦＧＦでもよい。
【０００８】本発明で用いられるＦＧＦは、例えばヒ
ト、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ等の哺乳動物由来のもの
が挙げられる。
ト、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ等の哺乳動物由来のもの
が挙げられる。
【０００９】本発明で用いられるＦＧＦは、天然源から
単離されたＦＧＦあるいは組み換えＤＮＡ技術によって
製造されたＦＧＦのいずれのものでもよい。本明細書に
おいては、リコンビナントヒト塩基性ＦＧＦをｒｈｂＦ
ＧＦと略称することもある。
単離されたＦＧＦあるいは組み換えＤＮＡ技術によって
製造されたＦＧＦのいずれのものでもよい。本明細書に
おいては、リコンビナントヒト塩基性ＦＧＦをｒｈｂＦ
ＧＦと略称することもある。
【００１０】本発明で用いられるリン酸カルシウム質
は、人工的に合成されたものでも、哺乳動物の骨等から
得られたものでもよい。人工的に合成されたものとして
は、例えばリン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイト、
リン酸四カルシウムまたはフッ素アパタイト等が挙げら
れるが、特に合成ヒドロキシアパタイトが好ましい。ま
た、これらを単独もしくは２種以上の混合物として用い
ることができる。
は、人工的に合成されたものでも、哺乳動物の骨等から
得られたものでもよい。人工的に合成されたものとして
は、例えばリン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイト、
リン酸四カルシウムまたはフッ素アパタイト等が挙げら
れるが、特に合成ヒドロキシアパタイトが好ましい。ま
た、これらを単独もしくは２種以上の混合物として用い
ることができる。
【００１１】本発明で用いられるリン酸カルシウム質の
形状としては、粉末状、粒状あるいはブロック状のもの
が挙げられる。
形状としては、粉末状、粒状あるいはブロック状のもの
が挙げられる。
【００１２】本発明のＦＧＦ吸着リン酸カルシウム質製
剤の製造の際に用いられる溶媒としては、目的とする吸
着率に応じ適宜注射用溶媒から自由に選択できる。
剤の製造の際に用いられる溶媒としては、目的とする吸
着率に応じ適宜注射用溶媒から自由に選択できる。
【００１３】本発明のＦＧＦを含有したゲル製剤に用い
られるゲル化基剤としては、投与前あるいは生体内でゲ
ル化するいずれのものでもよく、例えばコラーゲン、フ
ィブリノーゲン、フィブリン、トロンビン等が挙げられ
る。
られるゲル化基剤としては、投与前あるいは生体内でゲ
ル化するいずれのものでもよく、例えばコラーゲン、フ
ィブリノーゲン、フィブリン、トロンビン等が挙げられ
る。
【００１４】これらのゲル化基剤としては、哺乳動物由
来のものが挙げられる。哺乳動物としては、ヒト、サ
ル、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマ等が挙げられる。
来のものが挙げられる。哺乳動物としては、ヒト、サ
ル、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマ等が挙げられる。
【００１５】また、フィブリノーゲン、フィブリンゲル
中にはアプロチニン、塩化カルシウムを添加してもよ
い。
中にはアプロチニン、塩化カルシウムを添加してもよ
い。
【００１６】本発明で用いられる製剤中のＦＧＦの濃度
は０．０１μｇ／ｇ〜１，０００μｇ／ｇが好ましい。
は０．０１μｇ／ｇ〜１，０００μｇ／ｇが好ましい。
【００１７】本発明で用いられるゲル製剤中のコラーゲ
ン、フィブリノーゲン、フィブリン等の濃度は１〜５％
が好ましく、ｐＨは中性付近が好ましい。
ン、フィブリノーゲン、フィブリン等の濃度は１〜５％
が好ましく、ｐＨは中性付近が好ましい。
【００１８】また、本発明で用いられるゲル製剤中のト
ロンビン含量は２〜２５０単位が好ましく、ｐＨは中性
付近が好ましい。
ロンビン含量は２〜２５０単位が好ましく、ｐＨは中性
付近が好ましい。
【００１９】本発明の製剤は、そのまままたは公知の製
剤学的製造法に準じ、所望により製剤学的に許容され得
る添加剤、希釈剤、賦形剤、無痛化剤等を混合し、常套
手段により製造することができる。製剤としては、上記
の特性を利用して懸濁状製剤、注射剤、埋め込み製剤と
して疾患部位に投与することができる。
剤学的製造法に準じ、所望により製剤学的に許容され得
る添加剤、希釈剤、賦形剤、無痛化剤等を混合し、常套
手段により製造することができる。製剤としては、上記
の特性を利用して懸濁状製剤、注射剤、埋め込み製剤と
して疾患部位に投与することができる。
【００２０】次に実施例を挙げて本発明を具体的に説明
するが、本発明はこれに限定されるものではない。
するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００２１】
〔実施例１〕２５０μｇのｒｈｂＦＧＦを含む表１の各
溶液１ｍｌ中に、２５ｍｇの粉末状の合成ヒドロキシア
パタイト（ペンタックス製）を加えてよく混合し、一部
あるいは完全にＦＧＦを吸着した懸濁製剤を得た。
溶液１ｍｌ中に、２５ｍｇの粉末状の合成ヒドロキシア
パタイト（ペンタックス製）を加えてよく混合し、一部
あるいは完全にＦＧＦを吸着した懸濁製剤を得た。
【００２２】それぞれの溶液中におけるヒドロキシアパ
タイトへのＦＧＦの吸着量を表１に記載した。
タイトへのＦＧＦの吸着量を表１に記載した。
【００２３】
【表１】 ＦＧＦのヒドロキシアパタイトへの吸着率 ────────────────────────────────── 溶 液 吸着率（％） ────────────────────────────────── 注射用水 １００ 生理食塩液 ４０ クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０） １００ ０．３Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．０） ６９ リン酸緩衝液（ｐＨ７．４） ８０ クエン酸−リン酸水素二ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０） ８８ クエン酸−リン酸水素二ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５） ３１ リン酸水素二ナトリウム−リン酸二水素ナトリウム緩衝液 ＋８０ｍＭ塩化ナトリウム（ｐＨ６．０） ９３ リン酸水素二ナトリウム−リン酸二水素ナトリウム緩衝液 ＋８０ｍＭ塩化ナトリウム（ｐＨ７．０） ９４ ──────────────────────────────────
【００２４】次に、２５０μｇのｒｈｂＦＧＦを含む表
２の各溶液１ｍｌ中に、２５ｍｇの粉末状の牛の焼成骨
を加えてよく混合し一部ＦＧＦを吸着した懸濁製剤を得
た。
２の各溶液１ｍｌ中に、２５ｍｇの粉末状の牛の焼成骨
を加えてよく混合し一部ＦＧＦを吸着した懸濁製剤を得
た。
【００２５】それぞれの溶液中における牛の焼成骨への
ＦＧＦの吸着量を表２に記載した。
ＦＧＦの吸着量を表２に記載した。
【００２６】
【表２】 ＦＧＦの牛の焼成骨への吸着率 ────────────────────────────────── 溶 液 吸着率（％） ────────────────────────────────── 注射用水 ５ 生理食塩液 ５ クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０） ３８ リン酸緩衝液（ｐＨ７．４） ３７ ──────────────────────────────────
【００２７】〔実施例２〕上記実施例１のクエン酸−ク
エン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０）中で、ｒｈｂＦ
ＧＦを吸着させた合成ヒドロキシアパタイト及び牛の焼
成骨の懸濁液を遠心分離後上澄み液９００μｌを除去
し、その残渣にｐＨ７．０のリン酸水素二ナトリウム−
クエン酸緩衝液を９００μｌ加えよく振り混ぜ吸着され
たＦＧＦを抽出し、その抽出物中のｒｈｂＦＧＦの生物
活性を次の方法で測定した。
エン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０）中で、ｒｈｂＦ
ＧＦを吸着させた合成ヒドロキシアパタイト及び牛の焼
成骨の懸濁液を遠心分離後上澄み液９００μｌを除去
し、その残渣にｐＨ７．０のリン酸水素二ナトリウム−
クエン酸緩衝液を９００μｌ加えよく振り混ぜ吸着され
たＦＧＦを抽出し、その抽出物中のｒｈｂＦＧＦの生物
活性を次の方法で測定した。
【００２８】生物活性試験は、ｒｈｂＦＧＦをＤＭＥ
Ｍ：Ｆ−１２Ｈａｍにて３段階希釈したものを９６穴マ
イクロプレート（平底）に０．１ｍｌ添加し、そこにＢ
ＨＫ−２１細胞をＤＭＥＭ：Ｆ−１２Ｈａｍにて浮遊さ
せた細胞懸濁液（３×１０4 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を０．
１ｍｌ播種した。３日間培養したのち５％グルタルアル
デヒドを４０μｌ加え１５分間固定し、メタノ−ル、Ｐ
ＢＳで洗浄を行った後ＢＣＡ試薬を２００μｌ入れて６
５℃、３０分間加熱し、５９５ｎｍにおける吸光度を測
定することにより行った。
Ｍ：Ｆ−１２Ｈａｍにて３段階希釈したものを９６穴マ
イクロプレート（平底）に０．１ｍｌ添加し、そこにＢ
ＨＫ−２１細胞をＤＭＥＭ：Ｆ−１２Ｈａｍにて浮遊さ
せた細胞懸濁液（３×１０4 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を０．
１ｍｌ播種した。３日間培養したのち５％グルタルアル
デヒドを４０μｌ加え１５分間固定し、メタノ−ル、Ｐ
ＢＳで洗浄を行った後ＢＣＡ試薬を２００μｌ入れて６
５℃、３０分間加熱し、５９５ｎｍにおける吸光度を測
定することにより行った。
【００２９】コントロール（無処理）としては、ヒドロ
キシアパタイト無添加のＦＧＦ水溶液を使用し、結果を
表３に記載した。
キシアパタイト無添加のＦＧＦ水溶液を使用し、結果を
表３に記載した。
【００３０】
【表３】 吸着されたｒｈｂＦＧＦの生物活性 ─────────────────────────── 組成物 生物活性 ─────────────────────────── 無処理 １００％ 合成ヒドロキシアパタイト １００％ 牛の焼成骨 １００％ ───────────────────────────
【００３１】無処理のものと同様に、リン酸カルシウム
質に吸着されたｒｈｂＦＧＦの活性は１００％の活性を
示したことから、リン酸カルシウム質に吸着されたｒｈ
ｂＦＧＦの生物活性は安定に保持されていた。
質に吸着されたｒｈｂＦＧＦの活性は１００％の活性を
示したことから、リン酸カルシウム質に吸着されたｒｈ
ｂＦＧＦの生物活性は安定に保持されていた。
【００３２】〔実施例３〕上記実施例１と同様の方法に
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させた後凍結乾燥を行い、
合成ヒドロキシアパタイトにｒｈｂＦＧＦを吸着させた
固体粉末製剤を得た。
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させた後凍結乾燥を行い、
合成ヒドロキシアパタイトにｒｈｂＦＧＦを吸着させた
固体粉末製剤を得た。
【００３３】〔実施例４〕ｒｈｂＦＧＦ２５０μｇを含
有するクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中に１ｃｍ3 のブロック状の合成ヒドロキシアパタ
イトあるいは牛の焼成骨を入れ、ＦＧＦを含浸吸着させ
た製剤を得た。
有するクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中に１ｃｍ3 のブロック状の合成ヒドロキシアパタ
イトあるいは牛の焼成骨を入れ、ＦＧＦを含浸吸着させ
た製剤を得た。
【００３４】〔実施例５〕上記実施例４でＦＧＦを含浸
吸着させたブロックを取り出し、（１）２ｍｌの２．５
％フィブリノーゲン溶液、（２）１ｍｌの５％フィブリ
ノーゲン及び１ｍｌのトロンビン溶液（４単位／ｍｌ）
から成る２ｍｌのフィブリンゲル、（３）あるいは２ｍ
ｌの１％コラーゲン溶液中に各々入れてゲル化剤と接触
させ、ブロック状のＦＧＦ吸着合成ヒドロキシアパタイ
ト−ゲル複合製剤を得た。
吸着させたブロックを取り出し、（１）２ｍｌの２．５
％フィブリノーゲン溶液、（２）１ｍｌの５％フィブリ
ノーゲン及び１ｍｌのトロンビン溶液（４単位／ｍｌ）
から成る２ｍｌのフィブリンゲル、（３）あるいは２ｍ
ｌの１％コラーゲン溶液中に各々入れてゲル化剤と接触
させ、ブロック状のＦＧＦ吸着合成ヒドロキシアパタイ
ト−ゲル複合製剤を得た。
【００３５】〔実施例６〕上記実施例４の製剤を凍結乾
燥し、ＦＧＦを吸着したブロック状の合成ヒドロキシア
パタイト固体乾燥製剤を得た。
燥し、ＦＧＦを吸着したブロック状の合成ヒドロキシア
パタイト固体乾燥製剤を得た。
【００３６】〔実施例７〕上記実施例１と同様の方法に
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させたリン酸カルシウム質
を遠心分離により採取後、得られたリン酸カルシウム質
−ｒｈｂＦＧＦ複合体に２．５％フィブリノーゲン溶液
１ｍｌを加え懸濁製剤を得た。
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させたリン酸カルシウム質
を遠心分離により採取後、得られたリン酸カルシウム質
−ｒｈｂＦＧＦ複合体に２．５％フィブリノーゲン溶液
１ｍｌを加え懸濁製剤を得た。
【００３７】〔実施例８〕上記実施例１と同様の方法に
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させたリン酸カルシウム質
を遠心分離により採取後、得られたリン酸カルシウム質
−ｒｈｂＦＧＦ複合体に５％フィブリノーゲン溶液及び
トロンビン溶液（４単位／ｍｌ）の等量混合液１ｍｌを
加えよく混合し、ＦＧＦ吸着粉末リン酸カルシウム質を
ゲル中に懸濁させたゲル懸濁製剤を得た。
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させたリン酸カルシウム質
を遠心分離により採取後、得られたリン酸カルシウム質
−ｒｈｂＦＧＦ複合体に５％フィブリノーゲン溶液及び
トロンビン溶液（４単位／ｍｌ）の等量混合液１ｍｌを
加えよく混合し、ＦＧＦ吸着粉末リン酸カルシウム質を
ゲル中に懸濁させたゲル懸濁製剤を得た。
【００３８】〔実施例９〕上記実施例１と同様の方法に
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させたリン酸カルシウム質
を遠心分離により採取後、得られたリン酸カルシウム質
−ｒｈｂＦＧＦ複合体に１％コラーゲン溶液１ｍｌを加
えよく混合し、ＦＧＦ吸着粉末リン酸カルシウム質をゲ
ル中に懸濁させたゲル懸濁製剤を得た。
より、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．
０）中でｒｈｂＦＧＦを吸着させたリン酸カルシウム質
を遠心分離により採取後、得られたリン酸カルシウム質
−ｒｈｂＦＧＦ複合体に１％コラーゲン溶液１ｍｌを加
えよく混合し、ＦＧＦ吸着粉末リン酸カルシウム質をゲ
ル中に懸濁させたゲル懸濁製剤を得た。
【００３９】〔実施例１０〕上記実施例１と同様の方法
により、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ
５．０）中で懸濁させたリン酸カルシウム質−ＦＧＦ吸
着製剤及び上記実施例８で得られたＦＧＦ１０μｇに対
応する量の合成ヒドロキシアパタイト−ゲル複合製剤を
用いて、ラットによるＦＧＦの肉芽形成に対する影響を
検討した。
により、クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ
５．０）中で懸濁させたリン酸カルシウム質−ＦＧＦ吸
着製剤及び上記実施例８で得られたＦＧＦ１０μｇに対
応する量の合成ヒドロキシアパタイト−ゲル複合製剤を
用いて、ラットによるＦＧＦの肉芽形成に対する影響を
検討した。
【００４０】肉芽形成に関する試験は、エーテル麻酔下
にてラットの背部を電気バリカンで剪毛後、背部正中線
に沿って皮膚切開し、切開部よりピンセットを用いてそ
れぞれの製剤で処置したペーパーディスクを肩甲部皮下
に埋没した後、切開部を縫合した。手術７日後エーテル
麻酔下で屠殺し、背部皮下よりペーパーディスクとそれ
を取り巻く肉芽を注意深く剥離して乾燥（１００℃、２
４時間）重量を測定することにより行い、結果を表４に
記載した。
にてラットの背部を電気バリカンで剪毛後、背部正中線
に沿って皮膚切開し、切開部よりピンセットを用いてそ
れぞれの製剤で処置したペーパーディスクを肩甲部皮下
に埋没した後、切開部を縫合した。手術７日後エーテル
麻酔下で屠殺し、背部皮下よりペーパーディスクとそれ
を取り巻く肉芽を注意深く剥離して乾燥（１００℃、２
４時間）重量を測定することにより行い、結果を表４に
記載した。
【００４１】
【表４】 吸着されたＦＧＦの肉芽形成に対する影響 ──────────────────────────────────── 被験製剤 例数 平均肉芽乾燥重量(mg) ──────────────────────────────────── 生理食塩液（対照） ４ １４．３ 生理食塩液−ＦＧＦ ４ ４７．５＊ 合成ヒドロキシアパタイト−ＦＧＦ ４ ７８．０＊＃ （実施例１） 牛の焼成骨−ＦＧＦ （実施例１） ４ ５２．６＊ 合成ヒドロキシアパタイト−フィブリン ４ ７７．３＊＃ −ＦＧＦ （実施例８） ──────────────────────────────────── 対照との有意差 ＊：Ｐ＜０．０５ 生理食塩液−ＦＧＦとの有意差 ＃：Ｐ＜０．０５
【００４２】ＦＧＦの薬理作用の一つとして、ＦＧＦの
血管新生作用にともない肉芽形成に影響を及ぼすが、本
発明の組成物を投与することにより、ＦＧＦによる肉芽
形成は単なる水溶液製剤と比較して有意な増加が認めら
れた。
血管新生作用にともない肉芽形成に影響を及ぼすが、本
発明の組成物を投与することにより、ＦＧＦによる肉芽
形成は単なる水溶液製剤と比較して有意な増加が認めら
れた。
【００４３】〔実施例１１〕（１）１％コラーゲン１ｍ
ｌ、（２）２．５％フィブリノーゲン１ｍｌ、（３）あ
るいはトロンビン（４単位／ｍｌ）及び５％フィブリノ
ーゲンの等量混合液から成る１ｇのフィブリンゲル中
に、各々２５０μｇのｒｈｂＦＧＦを含むように混合調
製しＦＧＦのゲル製剤を得た。
ｌ、（２）２．５％フィブリノーゲン１ｍｌ、（３）あ
るいはトロンビン（４単位／ｍｌ）及び５％フィブリノ
ーゲンの等量混合液から成る１ｇのフィブリンゲル中
に、各々２５０μｇのｒｈｂＦＧＦを含むように混合調
製しＦＧＦのゲル製剤を得た。
【００４４】〔実施例１２〕実施例１１で得られた各製
剤１ｍｌを３７℃の注射用水１ｍｌ中に入れ、経時的に
ゲル上部の水層からサンプリングし、液体クロマトグラ
フ法によりＦＧＦ含量を測定して、注射用水中でのゲル
製剤からのＦＧＦの放出試験を行った。
剤１ｍｌを３７℃の注射用水１ｍｌ中に入れ、経時的に
ゲル上部の水層からサンプリングし、液体クロマトグラ
フ法によりＦＧＦ含量を測定して、注射用水中でのゲル
製剤からのＦＧＦの放出試験を行った。
【００４５】その結果を図１に記載したが、いずれも徐
放性の放出パターンを示した。
放性の放出パターンを示した。
【００４６】ただし、フィブリノーゲン製剤による試験
液は注射用水中にトロンビンを含む（４単位／ｍｌ）溶
液を用いた。
液は注射用水中にトロンビンを含む（４単位／ｍｌ）溶
液を用いた。
【００４７】〔実施例１３〕実施例３で得られた製剤
を、（１）１％コラーゲン、（２）２．５％フィブリノ
ーゲン、（３）あるいはトロンビン（４単位／ｍｌ）及
び５％フィブリノーゲンの等量混合液から成るフィブリ
ンゲルの各５００μｌ中に加え、よく懸濁後注射用水５
００μｌを加えて３７℃でインキュベートし、経時的に
遠心分離後上澄み液からサンプリングし、液体クロマト
グラフ法によりＦＧＦ含量を測定してその変化量から放
出率を算出し、ＦＧＦの放出試験を行った。
を、（１）１％コラーゲン、（２）２．５％フィブリノ
ーゲン、（３）あるいはトロンビン（４単位／ｍｌ）及
び５％フィブリノーゲンの等量混合液から成るフィブリ
ンゲルの各５００μｌ中に加え、よく懸濁後注射用水５
００μｌを加えて３７℃でインキュベートし、経時的に
遠心分離後上澄み液からサンプリングし、液体クロマト
グラフ法によりＦＧＦ含量を測定してその変化量から放
出率を算出し、ＦＧＦの放出試験を行った。
【００４８】その結果を図２に記載したが、いずれも徐
放性のパターンを示した。
放性のパターンを示した。
【００４９】
【発明の効果】本発明の製剤は、ＦＧＦを安定に保持
し、さらにそれを徐々に放出することにより薬効を示す
ことから、ＦＧＦの製剤として有用である。
し、さらにそれを徐々に放出することにより薬効を示す
ことから、ＦＧＦの製剤として有用である。
【図１】実施例１２におけるＦＧＦの溶出率と時間との
関係を示すグラフである。
関係を示すグラフである。
【図２】実施例１３におけるＦＧＦの溶出率と時間との
関係を示すグラフである。
関係を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 47/02 Ｂ 7433−4Ｃ Ｃ 7433−4Ｃ 47/42 Ｆ 7433−4Ｃ
Claims (3)
- 【請求項１】リン酸カルシウム質に吸着された線維芽細
胞成長因子を含有することを特徴とする線維芽細胞成長
因子含有製剤。 - 【請求項２】ゲル製剤であることを特徴とする線維芽細
胞成長因子含有製剤。 - 【請求項３】リン酸カルシウム質に吸着された線維芽細
胞成長因子を含有しているゲル製剤であることを特徴と
する線維芽細胞成長因子含有製剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4168552A JPH05339165A (ja) | 1992-06-03 | 1992-06-03 | 線維芽細胞成長因子含有製剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4168552A JPH05339165A (ja) | 1992-06-03 | 1992-06-03 | 線維芽細胞成長因子含有製剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05339165A true JPH05339165A (ja) | 1993-12-21 |
Family
ID=15870145
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4168552A Pending JPH05339165A (ja) | 1992-06-03 | 1992-06-03 | 線維芽細胞成長因子含有製剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05339165A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004168739A (ja) * | 2002-11-22 | 2004-06-17 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | 骨形成を促進する水溶性タンパク質−リン酸カルシウム複合体およびその製造方法 |
| WO2005025542A1 (ja) * | 2003-09-16 | 2005-03-24 | Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. | 脂溶性薬物封入微粒子、その製造法およびそれを含有する製剤 |
| CN1302822C (zh) * | 2002-11-28 | 2007-03-07 | 上海瑞邦生物材料有限公司 | 自固化磷酸钙原位成骨活性骨水泥及其制备方法和应用 |
-
1992
- 1992-06-03 JP JP4168552A patent/JPH05339165A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004168739A (ja) * | 2002-11-22 | 2004-06-17 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | 骨形成を促進する水溶性タンパク質−リン酸カルシウム複合体およびその製造方法 |
| JP4654427B2 (ja) * | 2002-11-22 | 2011-03-23 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 骨形成を促進する水溶性タンパク質−リン酸カルシウム複合体およびその製造方法 |
| CN1302822C (zh) * | 2002-11-28 | 2007-03-07 | 上海瑞邦生物材料有限公司 | 自固化磷酸钙原位成骨活性骨水泥及其制备方法和应用 |
| WO2005025542A1 (ja) * | 2003-09-16 | 2005-03-24 | Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. | 脂溶性薬物封入微粒子、その製造法およびそれを含有する製剤 |
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