JPH05247054A

JPH05247054A - Ｓｆ２３７０誘導体及びその製造法

Info

Publication number: JPH05247054A
Application number: JP4045851A
Authority: JP
Inventors: Yasuhisa Ootsuka; 晏央大塚; Toyoki Nishimata; 豊希西亦; Kenichi Fushihara; 謙一節原; Takamasa Iimori; 隆昌飯森; Takeshi Oishi; 武大石
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1992-03-04
Filing date: 1992-03-04
Publication date: 1993-09-24

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】本発明は抗生物質ＳＦ２３７０から誘導され
る新規化合物及びその製造法を提供することを目的とす
る。【構成】抗生物質ＳＦ２３７０を出発物質として化学
修飾により得られる新規な一般式（１）、及び一般式
（２）の化合物はグラム陽性菌、グラム陰性菌、真菌な
どに対して抗菌作用を有し、かつプロテインカイネース
Ｃ（ＰＫＣ）を阻害する。〔式中Ｒ^１はＨ，ＣＨＯ，ＣＨ_３ＣＯ等、Ｘは＝Ｏ又は
ＨとＯＲ（但しＲはＨ，Ｃ_１〜４−アシル基）を表わ
す〕

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、グラム陽性菌、グラム
陰性菌、真菌などに対して抗菌作用を有し、かつプロテ
インカイネースＣ（以下ＰＫＣと記す）を阻害する抗生
物質ＳＦ２３７０から誘導される新規化合物及びその製
造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ＳＦ２３７０（１）（Ｍ．Ｓｅｚａｋｉ
ｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３８，
１４３７（１９８５））はその抗菌活性に基づき、医薬
あるいは農薬として種々の用途に有用な抗生物質（特開
昭６１−８８８８５号）であり、また細胞増殖や発ガン
機構をはじめ生体内の多くの重要な生理反応、各種病態
に関わると考えられているＰＫＣを強力に阻害すること
が知られているＫ−２５２ａと同一物質である（Ｈ．Ｋ
ａｓｅｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，
３９，１０５９（１９８６），Ｈ，Ｋａｓｅｅｔａ
ｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏ
ｍｍｕｎ．，１４２，４３６（１９８７）。一方、スタ
ウロスポリン（２）はＳＦ２３７０（１）と構造類似の
抗生物質で抗菌作用（Ｓ．Ｏｍｕｒａｅｔａｌ．，
Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３０，２７５（１９７
７））、生体防御に重要な役割を果たすマクロファージ
賦活物質としての他、現在最強のＰＫＣ阻害活性を持つ
ことで知られている（Ｔ．Ｔａｍａｏｋｉｅｔａ
ｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏ
ｍｍｕｎ．，１３５，３９７（１９８６））。ＰＫＣを
特異的阻害剤等で抑制できれば、循環器系の疾病や、ア
レルギー、炎症、腫瘍、更に老人性疾患等の予防、ある
いは治療が可能となり、これまでにない新しいタイプの
医薬品になる可能性がある。しかし、化合物（１）、化
合物（２）は共に、ＰＫＣ以外の他のプロテインキナー
ゼをも阻害する非特異的阻害剤であり、このままでは医
療には使用できない。また、この他にスタウロスポリン
（２）構造の一部が異なる天然物質が多数知られてお
り、例えば、ＴＡＮ−１０３０Ａ（３）（Ｓ．Ｔａｎｉ
ｄａｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４
２，１１９（１９８９））や、ＲＫ−２８６Ｃ（４）
（Ｈ．Ｏｓａｄａｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏ
ｔｉｃｓ，４３，１６８（１９９０））がある。このう
ち化合物（３）はマクロファージ賦活物質として、化合
物（４）はＰＫＣ阻害活性を持つほか細胞周期に作用す
る物質として知られている。

【０００３】

【化５】

【０００４】このようにＳＦ２３７０関連化合物は、そ
の化学構造のごく一部を変化させるだけで更に新しい生
理活性を持たせることができる可能性があり、ＳＦ２３
７０の構造変換によって、多数の誘導体を合成しその生
理活性を検討することは新規医薬品開発の上からも重要
である。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上記のごとく、ＳＦ２
３７０（１）及びスタウロスポリン（２）はＰＫＣを阻
害するが、より優れたＰＫＣ阻害活性をはじめ、有用な
生理活性を有する化合物を創製するため、下部構造がス
タウロスポリン（２）のそれと一部異なる一般式（１）
のスタウロスポリン型化合物を合成した。この一般式
（１）の化合物はスタウロスポリン（２）をはじめ種々
のスタウロスポリン型化合物合成の重要な中間体になる
ものである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は新規な一般式
（１）及び一般式（２）

【０００７】

【化６】

【０００８】〔式中、Ｒ¹は水素原子あるいはホルミル
基、アセチル基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル
基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、
ｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル
基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、メ
トキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、ベンジル
オキシメチル基より選ばれるアミノ基の保護基を表わ
し、＝Ｘは＝０、又はＨとＯＲ（基中、Ｒは水素原子又
は炭素数１〜４の低級アシル基）を表す〕で表される化
合物、及び一般式（３）

【０００９】

【化７】

【００１０】〔式中、Ｒ¹は水素原子あるいはホルミル
基、アセチル基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル
基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、
ｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル
基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、メ
トキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、ベンジル
オキシメチル基より選ばれるアミノ基の保護基を表す〕
で表される化合物からＤｅｍｊａｎｏｖ反応、次に必要
に応じて還元、アシル化またはアミノ基の保護基を除去
することによる一般式（１）、及び一般式（２）の製造
法に関するものである。

【００１１】出発物質として容易に入手できるＳＦ２３
７０（１）を用いた。ＳＦ２３７０の下部構造は５員環
エーテルであるのに対しスタウロスポリン（２）のそれ
は６員環エーテルである。合成化学的に５員環化合物か
ら６員環化合物へ環を拡大する方法はいくつかあるが、
ＳＦ２３７０（１）の場合、既にエポキシ誘導体（５）
を経てアミノアルコール誘導体（６）に変換できる（特
開昭６２−２４０６８９号）ことから、このアミノアル
コール部のＤｅｍｊａｎｏｖ転位環拡大反応を用いるこ
とにした。

【００１２】

【化８】

【００１３】前記Ｄｅｍｊａｎｏｖ転位反応の出発物質
として、アミノアルコール誘導体（６）を用いることが
できるが、ラクタム窒素を適当な保護基で保護した一般
式（３）で表されるアミノアルコールの方が好都合であ
る。一般式（３）のアミノアルコールは、例えば文献
（特開昭６２−２４０６８９号）に従ってＳＦ２３７０
（１）から合成できるエポキシ誘導体（５）のラクタム
窒素を適当な保護基で保護した後、この文献（特開昭６
２−２４０６８９号）と同様にアンモニア水またはアン
モニア−メタノールと加熱することによって容易に得る
ことができる。この窒素の保護基として、通常よく使わ
れるホルミル基、アセチル基、クロロアセチル基、ジク
ロロアセチル基、トリクロロアセチル基、トリフルオロ
アセチル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキ
シカルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカル
ボニル基、メトキシメチル基、メトキシエトキシメチル
基、ベンジルオキシメチル基等を用いることができる
が、ｔ−ブトキシカルボニル基が好ましい。

【００１４】これら一般式（３）のアミノアルコール誘
導体に亜硝酸を作用しＤｅｍｊａｎｏｖ転位を起こさせ
ると環が拡大した一般式（１）で表される６員環ケト
ン、更に反応条件を変えることによって一般式（２）で
表される一般式（１）の異性体を得ることができる。こ
の一般式（１）及び一般式（２）の中の６員環ケトンは
具体的には以下に示す方法によって製造される。すなわ
ち、一般式（３）のアミノアルコールを酸の存在下適当
な溶媒に懸濁、あるいは溶解させ、これに亜硝酸ナトリ
ウム、あるいは、亜硝酸を作用させることによって製造
することができる。溶媒としては、水、酢酸、メタノー
ル、塩化メチレン、クロロホルム、トルエン、アセトニ
トリル、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、ジメチルス
ルホキシド、ジメチルホルムアミド等を用いることがで
き、また、酸としては酢酸、プロピオン酸などの有機
酸、硫酸、カンファースルホン酸、ｐ−トルエンスルホ
ン酸等のスルホン酸類のほか、塩酸、硝酸等の無機酸を
用いることができる。組合せとしては含水酢酸と亜硝酸
ナトリウムを用いるのが好ましい。反応温度、反応時間
は溶媒、酸、試薬の組合せによって異なるが、それぞ
れ、−６５°〜１００℃、１０分〜４８時間が適当であ
る。含水酢酸中室温、あるいは５０℃では１０分〜６時
間で反応が完結する。この反応では反応温度が１５〜５
０℃では目的とする一般式（１）の中の６員環ケトンの
ほか合成中間体のエポキシ誘導体（５）が副生するが、
反応温度を７０℃以上にすると一般式（１）の中の６員
環ケトン、エポキシ誘導体（５）の他に一般式（２）が
生成する。これら一般式（１），一般式（２）の中の６
員環ケトン、及びエポキシ誘導体（５）は常法、すなわ
ち溶媒抽出およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー
などで単離精製することができる。

【００１５】こうして得られた一般式（１），一般式
（２）の中の６員環ケトンはそれぞれ還元、更にはアシ
ル化することによって一般式（１），一般式（２）の中
のアルコール誘導体へと導くことができる。すなわち、
一般式（１），一般式（２）の中のケトンを適当な有機
溶媒に溶解させ、還元剤を用いて還元する。有機溶媒と
しては、水、メタノール、エタノール、イソプロピルア
ルコール、酢酸、塩化メチレン、クロロホルム、トルエ
ン、アセトニトリル、エーテル、テトラヒドロフラン、
酢酸エチル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムア
ミド等を用いることができ、また、還元剤としては水素
化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ア
ルミニウム、水素化アルミニウムリチウムを用いること
ができ、また接触還元を用いることができる。組合せと
してはメタノール（またはエタノール）中水素化ホウ素
ナトリウムを用いるのが好ましい。反応温度、反応時間
は、それぞれ、−６５〜５０℃、１０分〜４８時間が適
当である。メタノール中室温、あるいは、加熱する条件
では３０分〜２０時間で反応は完結する。

【００１６】この還元反応で得られたアルコールは通常
の反応条件下でアシル化される。例えば、アルコールの
ピリジン溶液に無水酢酸と触媒量の４，４−ジメチルア
ミノピリジンを加え、室温で２〜４時間放置すると相当
するアセチル誘導体を好収率で得ることができる。こう
して得られた一般式（１），一般式（２）のこれらのア
ルコール、及びアセチル体のラクタム窒素の保護基は通
常の脱保護の条件でなんら問題なく脱離させることがで
き、一般式（１），一般式（２）で表される化合物を容
易に得ることができる。

【００１７】

【実施例】以下に本発明の詳細を実施例で説明する。ま
ず本実施例中の化合物の化学構造を記載する。

【００１８】

【化９】

【００１９】実施例１化合物（７）の製造法化合物（５）６３２mg（１．５０mmol）とＮ，Ｎ−ジメ
チルアミノピリジン１７０mgのアセトニトリル（５０m
l）溶液に、二炭酸ジ−ｔ−ブチル０．５２ml（２．３m
mol）を滴下し、室温で１時間攪拌した。反応混合物を
酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水、飽和食塩水で洗った
後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒留去後、残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホル
ム／酢酸エチル＝４：１）で精製すると、化合物（７）
が淡黄色固形物として７０３mg（９０％）得られた。

【００２０】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．７２（９
Ｈ，ｓ），１．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．５Ｈｚ），
２．３７（３Ｈ，ｓ），２．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．
３Ｈｚ），２．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ），
３．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６，１４．５Ｈｚ），
４．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ），５．０６
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ），６．６０（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．
６Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），
７．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），９．４１（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）ＥＩＭＳｍ／ｚ：４２１（Ｍ⁺−１００）実施例２化合物（８）の製造法実施例１のガム状物８６．４mg（０．１７mmol）のテト
ラヒドロフラン（１．５ml）溶液に２８％アンモニア水
を加え、封管中５０℃で１時間加熱攪拌した。反応混合
物に酢酸エチルを加え、これを飽和食塩水で洗浄後、無
水硫酸マグネシウムで乾燥し溶媒を留去した。残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メ
タノール＝３：１）で分離精製し、淡黄色固形の化合物
（８）６６．５mg（７４％）を得た。

【００２１】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．５８（９
Ｈ，ｓ），２．４４（３Ｈ，ｓ），２．８１（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），３．００（１Ｈ，ｓ），３．
１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），４．７４（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．０Ｈｚ），４．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１７．０Ｈｚ），６．４２（１Ｈ，ｂｒ），７．０７
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．２２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈ
ｚ），７．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．８
７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）：３３００，１７５５，１７１０cm
^-1 ＥＩＭＳｍ／ｚ：３３７（Ｍ⁺−１０１）実施例３化合物（９）の製造法亜硝酸ナトリウム３９mg（０．５６４mmol）の水溶液
を、６０℃に加温した化合物（８）１０１mg（０．１８
８mmol）の２０％酢酸（１０ml）溶液に一気に加え、３
０分攪拌後、反応混合物を炭酸水素ナトリウムで中和
し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄
後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去した。
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン
／酢酸エチル＝１：１）で分離精製し、まず、化合物
（９）を淡黄色固形物として４１mg（４２％）を、続い
て化合物（７）を２７mg（２８％）得た。

【００２２】化合物（９）ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．７２（９Ｈ，ｓ），２．
１６（３Ｈ，ｓ），５．２３（２Ｈ，ｓ），６．６７
（１Ｈ，ｂｒ），７．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈ
ｚ），７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），９．４
１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）：１７６０，１７２０cm^-1 ＳＩＭＳｍ／ｚ：５２１（Ｍ⁺）ＥＩＭＳｍ／ｚ：４２１（Ｍ⁺−１００）実施例４化合物（１０）の製造法氷冷したケトンの化合物（９）１５．２mgのジクロロメ
タン（１ml）溶液にトリフルオロ酢酸０．１４５mlを加
え、１０分間攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えた
後、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄、
無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。残渣
をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム
／酢酸エチル＝１：１）で精製し、化合物（１０）を無
色固形物として９．０mg（７３％）得た。

【００２３】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：２．１６（３
Ｈ，ｓ），５．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），５．
０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ），６．６２（１Ｈ，
ｓ），６．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，５．０Ｈ
ｚ），７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．０
０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），９．４３（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）実施例５化合物（１１）の製造法化合物（１０）１１．５mgのメタノール（０．５ml）溶
液に水素化ホウ素ナトリウム１mgを加え、０℃で３０分
間攪拌した。反応液を常法処理し、シリカゲルでクロマ
トグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１：１）を行っ
て１０．６mg（９２％）のアルコール体である化合物
（１１）を淡黄色カラメル状物として得た。

【００２４】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．７１（９
Ｈ，ｓ），２．３８（３Ｈ，ｓ），４．１５（１Ｈ，
ｍ），５．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），５．
２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ），６．５４（１
Ｈ，ｂｒ），７．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），
８．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），９．４１（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）：３３５０，１７６０，１７１０cm
^-1 ＥＩＭＳｍ／ｚ：４０９（Ｍ⁺−１１４），３６６
（Ｍ⁺−１５７）実施例６化合物（１２）の製造法化合物（１１）１０．８mgを化合物（９）の場合と同様
の反応条件で脱保護し、シリカゲルクロマトグラフィー
（クロロホルム／酢酸エチル＝１：１）を行い、化合物
（１２）を無色固形物として７．６mg（８４％）得た。

【００２５】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：２．３２（３
Ｈ，ｓ），４．１３（１Ｈ，ｍ），４．３７（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ），４．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
６．８Ｈｚ），５．９３（１Ｈ，ｓ），６．４４（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），７．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７．３Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈ
ｚ），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），８．０
８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），９．１３（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）実施例７化合物（１３）の製造法化合物（１１）１０．６mgのピリジン（０．５ml）溶液
に無水酢酸０．０３ml及び触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルア
ミノピリジンを加え、室温で３０分間攪拌した。反応液
を常法で処理し、シリカゲルクロマトグラフィー（クロ
ロホルム／メタノール＝４０：１）を行い、１０．６mg
（９２％）の化合物（１３）を淡黄色固形物として得
た。

【００２６】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．７２（９
Ｈ，ｓ），１．９９（３Ｈ，ｓ），２．３６（３Ｈ，
ｓ），５．３４（２Ｈ，ｓ），５．３０〜５．４０（１
Ｈ，ｍ），６．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），
７．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６７（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７．３Ｈｚ），９．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）実施例８化合物（１４）の製造法化合物（１３）１０．１mgを化合物（９）の場合と同様
の反応条件で脱保護し、シリカゲルクロマトグラフィー
（ヘキサン／酢酸エチル＝１：２）を行い、化合物（１
４）を無色固形物として７mg（８４％）得た。

【００２７】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．９６（３
Ｈ，ｓ），２．３５（３Ｈ，ｓ），５．０３（２Ｈ，
ｓ），５．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．６，１１．６Ｈ
ｚ），６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．１
５（１Ｈ，ｓ），７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈ
ｚ），７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），９．４
７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）実施例９化合物（８）から化合物（９）及び化合物（１５）の合
成亜硝酸ナトリウム４１mg（０．５９mmol）を、８０℃に
加温したアミノアルコールである化合物（８）１０６mg
（０．２０mmol）の２０％酢酸（１０ml）溶液に一気に
加え、７分攪拌後、反応混合物を炭酸水素ナトリウムで
中和し、酢酸エチルで抽出した。実施例３と同様処理
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／
酢酸エチル＝１：１）で分離精製し、まず、ケトン体
化合物（９）を淡黄色固形物として４３mg（４２％）、
続いてケトン体化合物（１５）を淡黄色固形物として
１３mg（１２％）とエポキシ体化合物（７）を３２mg
（３１％）得た。

【００２８】化合物（１５）ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１．７１（９Ｈ，ｓ），２．
２８（３Ｈ，ｓ），２．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．
６，１５．８Ｈｚ），３．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．
６，７．３Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．
３，１５．８Ｈｚ），３．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．
５Ｈｚ），５．２６（２Ｈ，ｓ），６．９８（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝３．６，７．３Ｈｚ），７．２９〜７．６１
（５Ｈ，ｍ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈ
ｚ），７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），９．３
９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ）次にＰＫＣに対する阻害作用の実験方法とそこで得られ
た活性データについて説明する。ＰＫＣに対する阻害作用キッカワらの方法（ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍ
ｏｌｏｇｙ，９９，２８８（１９８３））に準じてプロ
テインカイネースＣ活性を測定した。すなわち、ラット
から麻酔下大脳を取り、０．２５Ｍシュークロース、１
０ｍＭＥＧＴＡ、２ｍＭＥＤＴＡを含む２０ｍＭ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．５）中でホモジナイ
ズする（全ての操作は４℃で行う）。ホモジネートを１
０５０００Ｇ、６０分間遠心分離して得られた上清をあ
らかじめ５０ｍＭ２−メルカプトエタノール、５ｍＭ
ＥＧＴＡ、２ｍＭＥＤＴＡを含む２０ｍＭＴｒｉ
ｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．５）で平衡化したＤＥ−５
２カラムに吸着させる。同一の緩衝液で洗浄後、更に５
０ｍＭ２−メルカプトエタノール、１ｍＭＥＧＴ
Ａ、１ｍＭＥＤＴＡを含む２０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣ
ｌ（ｐＨ７．５）緩衝液で再洗浄する。ＰＫＣは、再洗
浄に使用した緩衝液に溶解したＮａＣｌ（０から０．３
Ｍ）のリニアグラジエントにより溶出し、主ピークを集
め酵素液とした。

【００２９】ＰＫＣ活性は、牛胸腺由来のヒストンＨ１
への³²Ｐの（γ−³²Ｐ）ＡＴＰからの取り込みを見るこ
とにより測定した。反応系（０．２５ml）は５μｍｏｌ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）緩衝液１．２５μｍ
ｏｌ酢酸マグネシウム、１２．５ｎｍｏｌ（γ−³²Ｐ）
ＡＴＰ、５０μｇヒストンＨ１、１２５ｎｍｏｌ塩化カ
ルシウム、２００μｇホスファチジルセリン、４μｇジ
オレイン、及び酵素液からなる。ホスファチジルセリン
とジオレインはクロロホルム溶液中で混合し、窒素気流
下で溶媒を除いておき、少量の２０ｍＭＴｒｉｓ−Ｈ
Ｃｌ（ｐＨ７．５）緩衝液に懸濁後、超音波処理（０
℃、５分）し、ミセルを形成させてから反応系に添加し
た。バックグラウンド活性は、塩化カルシウム、ホスフ
ァチジルセリン、ジオレインの代わりに１２５ｎｍｏｌ
ＥＧＴＡを添加して測定した。

【００３０】反応は、３０℃、３分間行い、２５％トリ
クロル酢酸３mlを加えて反応を止める。酸沈澱物をニト
ロセルロース膜で集め、２５％トリクロル酢酸３mlで３
回洗浄する。ニトロセルロース膜でトラップされた酸沈
澱物の放射活性はシンチレーションカウンターにて測定
した。ＰＫＣ阻害作用は溶媒対照群と比較し、％抑制率
として表した。供試された化合物の５０％ＰＫＣ阻害濃
度〔ＩＣ₅₀値（μｇ／ml）〕を表１に示した。

【００３１】表１プロテインカイネースＣに対する阻害活性ＰＫＣ阻害率ＩＣ₅₀値サンプル（％／４０μｇ／ml）（μｇ／ml） SF2370 (K-252a) ９６．３０．２１化合物（６）９９．３０．２４化合物（５）８４．５０．３６化合物（１０）１０００．６２化合物（１２）９１．００．４２化合物（１４）９４．４３．０

【００３２】

【発明の効果】本発明によって得られる一般式（１），
一般式（２）の化合物の中、ラクタム窒素の保護されて
いない化合物は強いＰＫＣ阻害作用を示し、腫瘍、アレ
ルギー、炎症、痴呆等の医薬品として有用である。ま
た、前述のごとく一般式（１）、一般式（２）、及び一
般式（３）の化合物はスタウロスポリン（２）及び種々
のスタウロスポリン関連化合物合成の重要中間体になる
と考えられることから、これらの化合物より新たな有用
医薬品が合成されると期待できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｄ 309:00）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（１）の化合物【化１】〔式中、Ｒ¹は水素原子あるいはホルミル基、アセチル
基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、トリクロ
ロアセチル基、トリフルオロアセチル基、ｔ−ブトキシ
カルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、２，２，
２−トリクロロエトキシカルボニル基、メトキシメチル
基、メトキシエトキシメチル基、ベンジルオキシメチル
基より選ばれるアミノ基の保護基を表し、＝Ｘは＝０、
又はＨとＯＲ（基中、Ｒは水素原子又は炭素数１〜４の
低級アシル基）を表す〕
【請求項２】一般式（２）の化合物【化２】〔式中、Ｒ¹は水素原子あるいはホルミル基、アセチル
基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、トリクロ
ロアセチル基、トリフルオロアセチル基、ｔ−ブトキシ
カルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、２，２，
２−トリクロロエトキシカルボニル基、メトキシメチル
基、メトキシエトキシメチル基、ベンジルオキシメチル
基より選ばれるアミノ基の保護基を表し、＝Ｘは＝０、
又はＨとＯＲ（基中、Ｒは水素原子又は炭素数１〜４の
低級アシル基）を表す〕
【請求項３】一般式（３）【化３】〔式中、Ｒ¹は水素原子あるいはホルミル基、アセチル
基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、トリクロ
ロアセチル基、トリフルオロアセチル基、ｔ−ブトキシ
カルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、２，２，
２−トリクロロエトキシカルボニル基、メトキシメチル
基、メトキシエトキシメチル基、ベンジルオキシメチル
基より選ばれるアミノ基の保護基を表す〕で表される化
合物のＤｅｍｊａｎｏｖ反応、次に必要に応じて還元、
アシル化またはアミノ基の保護基を除去することを特徴
とする一般式（１）、及び一般式（２）の化合物の製造
法。【化４】〔式中、Ｒ¹は前記の意味を表し、＝Ｘは＝０、又はＨ
とＯＲ（基中、Ｒは水素原子又は炭素数１〜４の低級ア
シル基）を表す〕