JPH05119036A

JPH05119036A - 粒子計測装置

Info

Publication number: JPH05119036A
Application number: JP3279181A
Authority: JP
Inventors: Akira Miyake; 亮三宅; Masayoshi Matsumoto; 政悦松本; Hiroshi Oki; 博大木; Isao Yamazaki; 功夫山崎; Riyouhei Yabe; 良平矢辺; Hideyuki Horiuchi; 秀之堀内; Shinichi Sakuraba; 伸一桜庭; Nobuyuki Tatara; 信之多田羅
Original assignee: Hitachi Ltd
Current assignee: Hitachi Ltd
Priority date: 1991-10-25
Filing date: 1991-10-25
Publication date: 1993-05-14

Abstract

(57)【要約】【目的】本発明は、血液等の生体粒子あるいは流体中の
無機物の微細粒子の性状を多面的に分析し、その分析を
高スル−プットで行なうのに好適な粒子計測装置に関す
る。【構成】本発明の粒子計測装置は全血を定量採取するた
めの定量系と、定量系からのサンプルを染色するための
染色系と、定量系からのサンプルを計数するための計数
系から構成し、定量には全血を採取するために定量サン
プリングバルブ１１４を用い、計数系では調整済みのサ
ンプルの計数器への輸送をピペッタ３１３で行なう。ま
た、染色系では同時に独立して複数の染色が可能な移動
染色槽２０１を設けている。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、粒子計測装置に係わ
り、特に血液や尿等に含まれる生体粒子あるいは流体中
の無機物の微細粒子の性状を多面的に分析し、しかもそ
の分析を高スル−プットで行なうのに好適な粒子計測装
置に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】粒子計測装置の従来の技術例として、特
公昭５９−１６６６７号公報に開示された自動血液分析
装置がある。上記公報に代表されるように、複数項目の
測定が可能な自動血液分析装置の従来技術としては、パ
イプと、測定及び撹拌用の容器と、それらの中の流れを
制御する電磁弁とからなる流体回路より構成されてい
る。上記公報に記載されている装置は、血球計数を行な
う装置で、赤血球の計数のために２段希釈を行なう系
と、白血球計数のために溶血と希釈を行なう系と、ヘモ
グロビンの測定のために希釈溶血を行なう系とが設けら
れている。

【０００３】上記従来技術の白血球計数の系において
は、次のような工程で計数されていた。すなわち、定量
採取装置で定量された血液サンプルは前後を希釈液で挟
まれて希釈撹拌室まで送液され、そこで一定倍率に希釈
される。その希釈された血液サンプルは定量採取装置に
送りこまれて、再び定量採取されて今度は溶血剤に挟ま
れて別の溶血用の室まで送液される。そこで溶血反応を
受け、白血球だけが存在する白血球懸濁サンプルにな
る。最後にそのサンプルの一部が粒子計数部へチュ−ブ
を通して送られ白血球の計数が行なわれる。希釈撹拌室
や溶血用の室に残った血液サンプルは排出されて、洗浄
液で洗浄される。しかるのち次の血液サンプルがこの希
釈撹拌室に導かれて上記と同様の処理を受ける。

【０００４】

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上記従来技術では、血
液サンプルの定量、希釈、溶血等の処理をチュ−ブ内を
通過させていく過程で行なう為、流路切替えで定量を行
なう定量サンプリングバルブを容易に備えることが可能
であり、定量サンプリングバルブは微量の血液を正確に
採取することができ、血液の単位体積当たりに存在する
血球数等を精度良く求めるには有用な装置であるという
メリットがある。

【０００６】チュ−ブによる送液処理ではこのようなメ
リットがある反面、サンプルは送液中に前後の搬送用の
液と拡散をおこし、前後端で濃度が変化するため、次の
ような重大な問題が生じる。この搬送用の液との拡散
は、ディスパ−ジョンと呼ばれており、サンプルと試薬
の境界の濃度勾配が原因で発生する拡散と、チュ−ブ内
で発生する速度分布が原因でおこる拡散が組み合わさっ
たものである。特に、混合済みのサンプルをチュ−ブの
中を通して計数部へ送る過程では、肝心のサンプル粒子
濃度が変わる為、計測値が実際のそれと異なってしまい
高精度な計数測定ができない。定量サンプリングバルブ
による高精度な微量定量も無駄に帰してしまう。

【０００７】チュ−ブを用いた流路系の別の問題点とし
て、前の血液サンプルが流路系を専有している間は、つ
ぎの血液サンプルは流すことができない為、スル−プッ
トが向上しないという点がある。上記従来技術のように
単純に希釈するとか、瞬時に溶血するような短時間で済
む処理の場合にはさほど長い間流路系をサンプルが専有
しない為、スル−プットはある程度までは向上させるこ
とができる。しかしながら、近年免疫学や血液学の進歩
により生体粒子に対してより多面的な計測が求められる
ようになり、単純に希釈したり、溶血したりする操作の
他に粒子を試薬と一定時間染色反応させるような処理が
必要になってきている。その場合チュ−ブによる流路系
では、流路途中に染色反応にある程度の時間が必要なた
め、一つの血液サンプルが系を専有する時間が長くなり
スル−プットは低下してしまう。

【０００８】本発明の第１の目的は、定量性能に優れ、
送液中にサンプル濃度の小さい高精度な粒子計測装置を
提供することである。

【０００９】本発明の第２の目的は、生体粒子、ないし
は無機物の粒子の多面的な計測を高精度、高スル−プッ
トでおこなう粒子計測装置を提供することである。

【００１０】

【課題を解決するための手段】上記第１の目的を達成す
るために、本発明の粒子計測装置は、粒子計測部を備え
た粒子計測装置において、粒子懸濁液を定量採取するた
めの定量採取装置と、該定量採取装置によって定量採取
された粒子懸濁液と試薬を混合、反応する為の反応容器
と、前記粒子懸濁液を定量採取装置から前反応記容器へ
送液する手段と、前記反応容器に一定量の試薬を添加供
給する試薬供給手段と、この反応容器から試薬と混合し
た混合された粒子懸濁液を吸引して粒子計測部の混合さ
れた懸濁液供給口まで運び、前記混合された懸濁液を粒
子計測部へ吐出供給するピペッタを備えたものである。

【００１１】又、粒子計測部を備えた粒子計測装置にお
いて、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置
と、該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液
と試薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁
液を定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、
前記反応容器に一定量の試薬を添加供給する試薬供給手
段と、この反応容器から試薬と混合した混合された粒子
懸濁液を吸引して粒子計測部の混合された懸濁液供給口
まで運び、前記混合された懸濁液を粒子計測部へ吐出供
給するピペッタとを備えるとともに、該ピペッタに直接
試薬を供給する第２の試薬供給手段を設け、ピペッタ流
路途中に試薬と前記混合された懸濁液を吸引して２度目
の混合、反応を行なうための反応槽部分を設けたもので
ある。

【００１２】又、粒子計測部を備えた粒子計測装置にお
いて、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置
と、該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液
と試薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁
液を定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、
前記反応容器に一定量の試薬を添加供給するノズルと、
この反応容器から試薬と混合した混合された粒子懸濁液
を吸引して粒子計測部の混合された懸濁液供給口まで運
び、前記混合された懸濁液を粒子計測部へ吐出供給する
ピペッタを備えるとともに、前記反応容器のうちの一部
が染色槽を有するものであって、該染色槽を前記ノズル
に接続したダイヤフラムポンプの吸引、吐出により撹拌
するものである。

【００１３】又、粒子計測部を備えた粒子計測装置にお
いて、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置
と、該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液
と試薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁
液を定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、
前記反応容器に一定量の試薬を添加供給する試薬供給手
段と、この反応容器から試薬と混合した混合された粒子
懸濁液を染色するための移動染色槽と粒子計測部として
のシ−スフロ−セルを備えたものである。

【００１４】又、粒子計測部に細孔を備えた電気抵抗方
式のセルを用いたものである。

【００１５】又、粒子計測装置が複数台備えられるもの
であって、同一の粒子懸濁液を分配供給するための分配
供給手段を備なえ、同時に多種類の性状の計測をおこな
うものである。

【００１６】又、定量され、試薬と混合・反応させられ
た粒子懸濁液を所定の反応容器から再び定量サンプリン
グバルブへ吸引し直し、再度定量し、試薬と混合、反応
させた後、別の反応容器に供給するための２段階反応手
段を備えたものである。

【００１７】又、定量採取装置が粒子懸濁液が満たされ
ている第１の流路の一部を第２の流路の一部に切替える
ことで定量を行なう定量サンプリングバルブであり、か
つ定量した粒子懸濁液を第２の流路を通して前記反応容
器へ供給するものである。

【００１８】又、粒子懸濁液と試薬を混合・反応させる
為の反応容器において粒子懸濁液と試薬を均一に混合せ
しめる為の撹拌手段を設けたものである。

【００１９】又、定量サンプリングバルブの第２の流路
へ、希釈や反応用の試薬を供給する試薬供給手段を設け
たものである。

【００２０】又、ピペッタに直接試薬を供給する第２の
試薬供給手段を設け、該ピペッタ流路途中に試薬と混合
懸濁液を吸引してさらに２度目の混合・反応を行なうた
めの反応槽部分を備えたものである。

【００２１】また、上記第２の目的を達成するために、
本発明の粒子計測装置は、粒子計測部を備えた粒子計測
装置において、粒子懸濁液を第１の流路に吸引し、該第
１の流路に吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそ
れぞれ切替えることで一度に複数の定量を行なう定量サ
ンプリングバルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに
試薬を供給する複数の試薬供給手段と、前記定量サンプ
リングバルブにより定量された粒子懸濁液を試薬と共に
混合、反応させる為の複数の反応容器と、前記定量され
た懸濁液と試薬を複数の反応容器へ送液する為の送液手
段と、前記反応容器から粒子計測部に試薬と混合、反応
した懸濁液を粒子計測部へ吐出供給するためのピペッタ
を備えたものである。

【００２２】又、粒子計測部を備えた粒子計測装置にお
いて、粒子懸濁液を第１の流路に吸引し、該第１の流路
に吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞれ切
替えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプリン
グバルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに試薬を供
給する複数の試薬供給手段と、前記定量サンプリングバ
ルブにより定量された粒子懸濁液を試薬と共に混合、反
応させる為の複数の反応容器と、前記定量された懸濁液
と試薬を複数の反応容器へ送液する為の送液手段と、前
記反応容器から粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁
液を粒子計測部へ吐出供給するためのピペッタを備え、
前記反応器である溶液槽および希釈槽に前記ピペッタを
同時的に挿入するように構成したものである。

【００２３】又、粒子計測部を備えた粒子計測装置にお
いて、粒子懸濁液を第１の流路に吸引し、該第１の流路
に吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞれ切
替えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプリン
グバルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに試薬を供
給する複数の試薬供給手段と、前記定量サンプリングバ
ルブにより定量された粒子懸濁液を試薬と共に混合、反
応させる為の複数の反応容器と、前記定量された懸濁液
と試薬を複数の反応容器へ送液する為の送液手段と、前
記反応容器から粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁
液を粒子計測部へ吐出供給するためのピペッタを備え、
５項目を２０秒以内に測定するように前記各機器を制御
する制御手段を備えたものである。

【００２４】又、粒子計測部を備えた粒子計測装置にお
いて、粒子懸濁液をその第１の流路に吸引し、該第１の
流路に吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞ
れ切替えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプ
リングバルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに複数
の試薬を供給する複数の試薬供給手段と、定量された粒
子懸濁液を試薬と共に混合、反応させる為の複数の反応
容器と、前記定量された懸濁液と試薬を複数の反応容器
へ送液する為の複数の送液手段と、該反応容器の一部か
ら粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁液を運ぶとと
もに、一部の反応容器から試薬と混合・反応した混合懸
濁液をさらに別の試薬と混合、反応させる為の複数のピ
ペッタを備え、該ピペッタに直接試薬を供給する為の複
数の第２の試薬供給手段を備えたものである。

【００２５】

【作用】まず、上記粒子計測装置の定量採取装置は粒子
懸濁液を吸引して懸濁液の定量採取を行なう。送液手段
がこの定量された懸濁液を定量採取装置から懸濁液の反
応容器へ送液する。試薬供給手段は容器に試薬を一定量
添加し、粒子懸濁液と試薬を混合させる。均一な混合が
終了すると、ピペッタが反応容器内まで移動し混合懸濁
液を所定量吸引する。その後粒子計測部まで移動して、
懸濁液供給口へ接続し、混合懸濁液をその内部へ吐出す
る。

【００２６】以上の様に混合懸濁液の輸送にはピペッタ
を用い、搬送液は使わないので拡散は発生しない。よっ
て混合懸濁液の粒子濃度は変化することなく粒子計測部
において精度良い計測が行なわれる。

【００２７】また、定量サンプリングバルブが動作し
て、第１の流路に粒子懸濁液を吸入し、第１の流路の複
数の部分が別の複数の流路に切り換り、一度に多数の定
量を行なう。この複数の流路には予め一定量の試薬が試
薬供給手段によって満たされており、切替えが行なわれ
るとこの試薬の一部が粒子懸濁液に入れ替わる。

【００２８】その後試薬吸引手段が動作してこの懸濁液
を含んだ試薬を各反応容器に送液し、そこで混合反応を
おこす。この混合反応が終了するとピペッタが反応槽ま
で移動し混合懸濁液を所定量吸引する。その後粒子計測
部まで移動しピペッタ内の混合懸濁液を粒子計測部の入
口に供給する。

【００２９】一方、反応槽を備えているピペッタの方は
第２の試薬供給手段からは試薬を、反応容器からは混合
懸濁液を吸引して流路途中にある反応槽でこの２液を混
合させる。一定時間反応を行なった後、粒子計測部へこ
の懸濁液を供給する。

【００３０】この反応槽を備えたピペッタを複数用いて
処理を行なうと、多数の懸濁液を同時に反応させること
ができ、終了したものから順次計測部へ供給すれば反応
時間が長い検査でもスル−プットを低下させることなく
測定を継続させることができる。

【００３１】

【実施例】本発明では、対象として赤血球、白血球、血
小板等の血球粒子を取り上げ、その測定装置について説
明する。近年、免疫学や血液学の進歩によりこれら生体
粒子に対して多面的な測定が求められるようになってい
る。たとえば、白血球に関しては単にそのサイズや体積
の計測から、白血球の５分類の比率の計測、リンパ球の
サブポプュレ−ションの計測などが重要になりつつあ
る。また幼若な赤血球である網状赤血球の存在率につい
ても重要な情報として扱われるようになってきている。
本実施例に示した粒子計測装置の測定項目は白血球の分
類、網状赤血球の比率計測、赤血球、白血球の計数、ヘ
モグロビン量の測定である。

【００３２】本発明の一実施例を図１から図１０により
説明する。図１は、粒子計測装置の全体構成を示す図で
ある。図２は、図１に示した粒子計測装置における処理
手順を示したブロック図である。図３及び図４は、図１
の全血を定量するためのサンプリングバルブの構成と動
作の詳細を説明した図である。図５は、図１に示した粒
子計測装置のタイムテ−ブルを示す図である。図６は、
図１に示した粒子計測装置における染色系を詳細に説明
するための構成図である。図７は図６で説明した染色反
応系の測定の構成を示す図である。図８は、図１に示し
た粒子計測装置の染色系にある蛍光粒子測定装置部の構
成を説明する図である。図９は図１に示した粒子計測装
置の染色系にある計数系の血球数計数装置部の構成を示
す図である。図１０は、本粒子測定装置を動作させるた
めの電気系の接続図である。

【００３３】図１により粒子計測装置の構成を説明す
る。本装置は、大きく別けて３つの系から構成されてい
る。図１中の符号のうち、１００番台あるいは１０００
番台のものが血球等を定量するための定量系を示し、２
００番台あるいは２０００番台のものが血球を染色して
蛍光測定するための染色系を示す。また同じく３００番
台あるいは３０００番台のものが血球を計数するための
計数系を示す。

【００３４】まず、定量系は大きく別けて、全血を採取
する部分、全血を定量するサンプリングバルブ、試薬を
供給するシリンジから成り立っている。この定量系は、
図１から図３に示すように、微量の全血を定量して、試
薬流路中に添加するための定量サンプリングバルブ１１
４（この定量サンプリングバルブ１１４は５つの入口と
同数の出口を有している。）の第１の入口には、全血流
路１１１１を介してピアス式血液吸引機構１０１につな
がれており、それと対応した第１の出口には全血吸引用
シリンジ１０７が接続されている。この接続路の途中に
は洗浄液を供給するための流路が全血吸入流路切替えバ
ルブ１１６を介してつながれている。その他の第２から
第５の入口には白血球染色液用シリンジ１０８、網状赤
血球染色用シリンジ１０９、溶血剤用シリンジ１１０、
希釈液用シリンジ１１１が接続されている。これらの各
接続流路の途中には、各々の試薬を補充するための試薬
ボトルに４つの試薬流路切替えバルブ１１３を介してつ
ながれている。これら試薬ボトルには、白血球染色用の
試薬１０３、網状赤血球用の試薬１０４、赤血球計数の
ための希釈液１０５、白血球計数の為の溶血剤１０６が
蓄えられている。上記第２から第５の各入口に対応した
各出口には染色系と計数系に試薬と定量された全血を吐
出するためのノズル２０５１、２０５２、３１１に接続
されている。

【００３５】上記定量サンプリングバルブ１１４は、図
３及び第４図に示すように、１つのロ−タ１１４２とそ
れを挟む２つのステ−タ１１４１、１１４３から成る。
この定量サンプリングバルブ１１４は、次のように動作
する。ロ−タ１１４２が図３に示す状態にある時に、全
血は図３中の符号４で示す経路で吸引される。その際、
他の流路には図３に示したように、白血球染色用試薬１
０３、網状赤血球染色用試薬１０４、血球計数用希釈液
１０５、白血球計数用溶血剤１０６が満たされている。
次に、図４に示すように、ロ−タ１１４２が回転する
と、ロ−タ１１４２は全血流路から全血４０１、４０
２、４０３、４０４を切り出し、となりの試薬流路には
め込む。この状態で各試薬を図４中に点線で示す方向に
所定量吐出すると一定希釈倍率の混合サンプルを染色
系、計数系へ供給することができる。全血流路では流路
切替えバルブ１１６が切替わって、洗浄液が全血の吸引
と逆方向に流れ、残った血液を洗い流す。

【００３６】次に、染色系の構成について説明する。染
色系は大きく別けて、定量系からのサンプルを一時蓄え
ておくための槽と、そこから所定量の混合サンプルを採
取して一定時間染色し、同時にフロ−セル２１０位置ま
で移動するための移動染色槽２０１、および蛍光測定用
のフロ−セル２１０から成る。定量系からの混合サンプ
ルを吐出するノズル２０５１、２０５２の下方には、そ
れぞれ網状赤血球と染色液を撹拌するための網状赤血球
用撹拌槽２０５、白血球と染色液を撹拌するための白血
球用撹拌槽２０４が設けられている。これら各槽の上方
には移動染色槽２０１が駆動円盤２０２の円周上に等間
隔に９箇所に設けられている。駆動円盤２０２には駆動
機構２０３が設けられており、駆動円盤２０２は駆動機
構２０３により反時計周り４０度ずつ回転するようにな
っている。図５に示すように、各移動染色槽２０１の上
方にはチュ−ブ２０１１が繋がれており、その先はロ−
タリ−バルブ２０２１のロ−タに接続されている。この
ロ−タリ−バルブ２０２１のステ−タ側の流路端には混
合サンプル吸引用シリンジ２１４、２１５、撹拌用ダイ
アフラムポンプ２２１、混合サンプル吐出シリンジ２１
８、洗浄液の吐出を制御するバルブ２２０を備えた移動
染色槽洗浄用の流路がつながれている。ロ−タリ−バル
ブ２０２１が、回転して再び停止する毎にシリンジ２１
５、２１４、撹拌用ダイアフラムポンプ２２１、サンプ
ル吐出シリンジ２１８、洗浄用バルブ２２０の順に切替
わる。撹拌用ダイアフラムポンプ２２１は微量のストロ
−クで吸引と吐出を繰り返す。このダイヤフラムポンプ
２２１と移動染色槽２０１が接続されると、微量の吸引
と吐出が繰り返されるので、槽内と吸引ノズルの間で急
拡大・急縮小による渦が繰り返し発生して、血球サンプ
ルの沈降を防ぎ、染色を促進させる。本実施例では前記
移動染色槽２０１がフロ−セル２１０へ移動する間に２
箇所の停留位置でこのポンプと接続して動作する。ま
た、移動染色槽２０１の回転円周下方には、図１に示す
ように、上記した２つの撹拌槽の他に蛍光測定用フロ−
セル２１０、洗浄槽２０６が配置されている。蛍光測定
用フロ−セル２１０にはシ−ス液を供給するためのシ−
ス供給シリンジ２２２が接続されている。また、フロ−
セル２１０の出口流路は廃液を吸引するためのシリンジ
２２３と接続されており、このシリンジ２２３は前記シ
−ス供給シリンジ２２２と同じモ−タで連動して動作す
るように設けられている。フロ−セル２１０のフラッシ
ュ洗浄を行なうための吸引機構として、ダイアフラムポ
ンプ２１１が設けられている。撹拌槽内の残留サンプル
を排出したり、新たに洗浄液を供給するための制御弁２
１２、２１３が設けられている。

【００３７】次に、計数系の構成について説明する。計
数系は、主として計数用の混合サンプルを受けるための
槽とそこから所定量のサンプルを採取して血球計数器へ
サンプルを搬送するためのピペッタ、残留サンプルを洗
浄するための洗浄機構から構成されている。計数系で
は、赤血球計数用の希釈槽３０１、３０３、３０５と白
血球計数用の溶血槽３０２、３０４、３０６が、この順
に駆動円盤３０７の円周上に交互に配置されている。駆
動円盤３０７は、時計周り１２０度毎に回転するように
なっており、希釈槽と溶血槽は対になって周方向３箇所
で停止する。ノズル３１１はこれらの停止箇所のひとつ
の位置で、希釈槽と溶血槽に同時にサンプルを吐出でき
るように駆動円盤３０７の円周の上方に配置されてい
る。つぎの停止箇所の周囲には赤血球、白血球の計数器
３１４、３１５、およびサンプルを搬送するためのピペ
ッタ３１３、ピペッタ３１３の洗浄装置が設けられてい
る。このピペッタ３１３は２つの吸引パイプを有してお
り、一つは溶血槽へ、もう一つは希釈槽へ同時に挿入で
きるように成っている。サンプルの吸引及び吐出はサン
プル吸引シリンジ３１６、３１７で行なわれる。また溶
血槽の停止位置下方には溶血サンプルの透過光量でヘモ
グロビン量を測定するセンサ３２１が設けられている。
その次の停止位置には希釈槽、溶血槽を同時に洗浄する
ための洗浄機構３０８が設けられている。計数器は赤血
球用３１４と白血球用３１５と２つあり、ピペッタの旋
回下方に設けられている。これら計数器にはシ−ス液を
供給するシリンジ３２４、フラッシュ洗浄を行なうため
のダイアフラムポンプ３２５がつながれている。

【００３８】その他の要素として洗浄液、シ−ス液５０
２を供給するためのポンプ５０１が設けられている。通
常の測定時のシ−ス液、洗浄液として本実施例では、
０．９％の食塩水を用いる。また廃液を集めるための廃
液ボトル６が設けられている。図中２重丸の記号で示し
た流路は、全てポンプ５０１に接続されている。また図
中×印で示した流路は全て廃液ボトルへ接続されてい
る。

【００３９】次に電気系は、図１０に示すように構成さ
れている。測定スタ−ト信号を入力するための入力装置
７０４が中央制御回路７０３を介してシステム制御回路
７０２に接続され、システム制御回路７０２は、さらに
各モ−タ、バルブ等の各要素を駆動するための駆動系制
御回路９０７および検知器制御回路７０９に接続されて
いる。検知器制御回路７０９は、さらに各検知器２１
０、３１４、３１５、３２１に接続され、デ−タ処理回
路７０１を経て中央制御回路７０３へフィ−ドバックさ
れる。また、中央制御回路７０３は、表示部７０５と必
要に応じてデ−タを記録する記録装置７０６に接続され
ている。

【００４０】次に、以上のように構成された粒子計測装
置の動作について説明する。まず、定量系は、次のよう
に動作する。図２に示したように、採取された全血サン
プル４は定量サンプリングバルブ１１４で３０μｌ、２
μｌ、２μｌ、２０μｌに定量される。各定量された全
血は、白血球染色用試薬１０３、網状赤血球染色用試薬
１０４、赤血球計数用希釈液１０５、白血球計数用溶血
剤１０６の詰まった流路の一部に切替えられ、各シリン
ジ１０８〜１１１が動作することによって、それぞれ染
色系、計数系にある撹拌槽、希釈槽、溶血槽に試薬とい
っしょに所定量分配される。

【００４１】図３は、定量サンプリングバルブ１１４に
より全血が定量される際の動作を示したものである。定
量サンプリングバルブ１１４は、上記したように１つの
ロ−タ１１４２とそれを挟む２つのステ−タ１１４１、
１１４３から構成されるが、ロ−タ１１４２は最初は図
３に示す状態にあり、全血は図３中に符号４で示した経
路で吸引され、その際、他の流路は図中に示したよう
に、白血球染色用試薬１０３、網状赤血球染色用試薬１
０４、血球計数用希釈液１０５、白血球計数用溶血剤１
０６が満たされている。図４に示したようにロ−タ１１
４２が回転すると、ロ−タ１１４２は全血流路から全血
４０１、４０２、４０３、４０４を切り出し、隣の試薬
流路にはめ込む。この状態で各試薬を図中に点線で示す
方向に所定量吐出すると一定希釈倍率の混合サンプルを
染色系、計数系へ供給することができる。全血流路では
流路切替えバルブ１１６が切替わって、洗浄液が全血が
吸引される方向とは逆方向に流れ、残った血液を洗い流
す。図５のタイムテ−ブルに示したように血液の吸引、
試薬の補充を同時に行ない、サンプリングバルブ１１４
を切替えた後、試薬流路切替えバルブ１１６をサンプリ
ングバルブ１１４側に切替えて、混合サンプルを吐出す
るようにすれば、これらの動作は１つのモ−タで制御す
ることができる。以上が定量系の動作である。

【００４２】次に染色系の動作について説明する。図２
に示すように、定量系から白血球撹拌槽２０４に混合サ
ンプルが３３０μｌ吐出される。また、網状赤血球撹拌
槽２０５には混合サンプルが４０２μｌ吐出される。撹
拌槽での撹拌はノズル２０４１、２０５１からサンプル
が吐出される時の勢いを利用して行なわれる。撹拌が十
分になされると移動染色槽２０１が撹拌槽内に降下し
て、混合サンプルを所定量吸引する。図１に示したよう
に、白血球用撹拌槽２０４の位置にある移動染色槽２０
１はサンプルを吸引してから、フロ−セル２１０で測定
が行なわれるまで、反時計方向に４０度毎に６回停止す
るので、図５のタイムテ−ブルに示すように各１０秒間
停止すると、６０秒間染色される事になる。網状赤血球
混合サンプルでは７０秒間染色される。フロ−セル２１
０位置での測定が終了すると、次の洗浄槽２０６の位置
では移動染色槽２０１の残留サンプルが洗い流される。

【００４３】ここで、移動染色槽２０１の昇降は図６に
示すように昇降機構２０８が下降して移動染色槽２０１
の頭部を押さえることで行なう。上昇は、ばねの反発力
を利用して行なわれる。昇降機構２０８の下降動作を制
御することで、必要な時にだけ移動染色槽を昇降させる
ことが出来る。撹拌槽位置での移動染色槽２０１の昇降
は、次のサンプルが新しく供給される毎に、つまり２回
停留（８０度）する度に行なわれる。このような移動染
色槽２０１は図７に示すような構成となっている。移動
染色槽２０１はサンプルを内部に吸引するために、吸引
ノズル２０１５を持つ。染色槽内部２０１２は図に在る
ようにノズル部分から膨らんだ形状をしており、ノズル
部分から槽内部にサンプルを引き込む時、急拡大部が原
因で渦２０１７が起きる。この渦を利用して撹拌を行な
うことが出来る。また槽にはヒ−タ２０１４を備えてお
り染色反応を促進する役割を持つ。図７に示すように槽
上部はチュ−ブ２０１１を介してロ−タリ−バルブ２０
２１につながっており、回転して停止する毎にシリンジ
２１５、２１４、撹拌用ダイアフラムポンプ２２１、サ
ンプル吐出シリンジ２１８、洗浄用バルブ２２０の順に
切替わる。撹拌用ダイアフラムポンプ２２１は微量のス
トロ−クで吸引及び吐出を繰り返す。このポンプと移動
染色槽２０１が接続すると、微量の吸引と吐出が繰り返
されることにより、槽内と吸引ノズルの間で急拡大・急
縮小による渦が繰り返し発生して、血球サンプルの沈降
を防ぎ、染色を促進させる。本実施例では前記染色槽２
０１が、フロ−セル２１０へ移動する間に２箇所の停留
位置でこのポンプ２２１と接続して動作する。

【００４４】図８を用いてフロ−セル２１０部での蛍光
測定の動作について説明する。移動染色槽２０１が下降
すると、先端のノズル２０１５がフロ−セル２１０上部
の接続部からセル内部に挿入される。この状態で混合サ
ンプルの吐出用シリンジ２１８が動作して測定用のサン
プル吐出を開始する。図４のタイムテ−ブルに示したよ
うに、サンプル吐出を開始した少し後に、シ−ス液供給
シリンジ２２２が動作を開始して流路２１０１を通して
シ−ス液が供給される。また、シ−スフロ−の廃液は流
路２１０２から廃液吸引シリンジ２２３によって吸引さ
れる。シ−ス液供給シリンジ２２２と廃液吸引シリンジ
２２３は同一の駆動機構２２５によって動作する。フロ
−セル２１０の検出位置では周りをシ−ス液で包まれた
細いサンプルの流れ（以下これをシ−スフロ−と呼ぶ）
２１０３が形成され、白血球や網状赤血球がほぼ一粒ず
つ流れる。これら細胞にレ−ザ−光を照射することで、
先の染色反応により細胞に取り込まれた蛍光色素から蛍
光２１０９が発生する。これらの蛍光は検知器２１０
４、２１０５によって電気信号に変換され、パルス波高
検知器２１０６等を経てデ−タ処理回路７０１へ送られ
る。測定が終了するとシリンジ２２２、２２３は初期位
置に戻る。その際、流路の途中に設けられた切替えバル
ブ２２４が切替わり、シ−ス液供給シリンジ２２２へは
シ−ス液が供給され、廃液吸引シリンジ２２３からは廃
液が排出される。

【００４５】なお、本実施例の蛍光測定装置の計測対象
としては、上述した白血球の分類、網状赤血球の比率計
測の他、リンパ球のサブポピュレ−ションの測定、血漿
中の免疫抗体量の計測、特定淡白質の計測などにも応用
可能であるこというまでもない。

【００４６】また、本実施例の白血球の蛍光染色色素と
しては、一度の染色反応で細胞質と核を染め分けること
が出来る点で、例えばアクリジンオレンジなどが適して
いる。所定の条件で染色反応した白血球に波長４８８ｎ
ｍのＡｒイオンレ−ザ−を照射すると細胞質に相当する
部分からは、緑色の蛍光が、核に相当する部分からは赤
色の蛍光を発生する。この２色の蛍光量を分析すること
で白血球の種類を同定する事が出来る。また網状赤血球
の検出のためには細胞質内にあるＲＮＡを染色すること
が行なわれる。試薬として前記のアクリジンオレンジの
他、オ−ラミンなどの試薬が一般的に用いられている。
白血球分類の場合と同様にこの染色された網状赤血球に
レ−ザ−光を照射すると蛍光を発生するので、これを検
知して存在比率をなどの測定を行なう事が出来る。

【００４７】次に計数系の動作について説明する。図２
に示すように定量系から計数系に移動させるための駆動
円盤３０７の赤血球計数用希釈槽３０１に混合サンプル
が１００２μｌ、白血球計数用溶血槽３０２には５２０
μｌ吐出される。撹拌は染色系と同様にノズル３１１の
吐出の勢いで行なう。図５のタイムテ−ブルで示すよう
に、吐出が終了するとただちに駆動円盤は１２０度回転
して、その位置で待機しているピペッタ３１３が、各槽
内へ降下して、混合サンプル吸引吐出シリンジ３１６、
３１７によってピペッタ３１３の内部へ所定量の混合サ
ンプルを吸引する。その後、このピペッタ３１３は血球
計数器３１４、３１５と接続して、シリンジ３１６、３
１７の動作で測定用の吐出を行なう。シ−ス液の吐出は
シ−ス液供給シリンジ３２４によって染色系の場合と同
様の動作で行なわれる。溶血槽内に残ったサンプルはセ
ンサ３２１によって残液の透過光強度を測定され、ヘモ
グロビン量の計測が行なわれる。図５のタイムテ−ブル
に示したように、２０秒ごとに駆動円盤は１２０度回転
して、これら測定済みのサンプルの入った槽は次の洗浄
機構３０８のある位置へ移動する。洗浄機構の動作は図
４のタイムテ−ブルに示すように、まずこれら２つの槽
内へ洗浄機構にある吸引吐出ノズル３０８１を降下さ
せ、その時点でダイアフラムポンプ３１０の動作で残留
液を吸引した後、バルブ３０９を切替え洗浄液を同ノズ
ル３０８１により各槽内へ吐出する。再び、バルブ３０
９を切替えて洗浄液をダイアフラムポンプ３１０で吸引
して終了する。ピペッタ３１３の洗浄は、上記測定が終
了して、駆動円盤上方位置へ戻る際に洗浄槽３２０をゆ
っくり通過することにより行なわれる。バルブ３２２が
開いて洗浄槽では洗浄液が供給され、ピペッタ３１３の
外側を迅速に洗浄する。またピペッタ３１３内部に残留
しているサンプルはこの洗浄槽を通過する際にサンプル
吸引吐出シリンジ３１６、３１７に付属のバルブ３１８
が切替わり、洗浄液を内部から供給して行なわれる。

【００４８】次に図９を用いて計数器の動作を説明す
る。蛍光測定用フロ−セル２１０と同様にピペッタ３１
３のノズルが計数器の上部からセル内部まで挿入され図
９に示したように接続される。シ−ス液供給、及び廃液
吸引は符号３１４４、３１４３で示したように、それぞ
れ図示した流れのように行なわれ、シ−スフロ−３１４
５が形成される。流れ３１４４、３１４３の中には電極
が設けられており、この２極間に電圧がかけられてい
る。サンプルがシ−スフロ−３１４５となって細孔３１
４８を通過する際に、細胞のサイズに応じた電気抵抗信
号が検出される。これはパルス波高検知器３１４７等を
経てデ−タ処理回路７０１へ転送される。測定が終了す
ると、ノズル３１３は計数器から離脱するが、その際、
バルブ３２３は切替わり、洗浄液を大量にシ−ス液流路
から供給する。これはノズル接続部３１４１洗浄しなが
ら上部へ流出する。その溢れでた洗浄液は流路３１４２
よりダイアフラムポンプ３２５で吸引される。以上が計
数系の動作である。

【００４９】次に図１０を用いて電気系の動作について
説明する。入力装置７０４から測定スタ−ト信号が入力
されると中央制御回路７０３はその信号をシステム制御
回路７０２へ伝達する。システム制御回路７０２では、
図２に示すタイムテ−ブルが書き込まれており、それに
合わせて、駆動する要素の指定とその設定条件の信号を
駆動系制御回路９０７に送る。駆動系制御回路９０７か
らは各モ−タ、バルブに動作用の信号が送信される。検
知器制御回路７０９については、検知開始、終了の信号
が送信される。各検知器２１０、３１４、３１５、３２
１で検知された信号は、デ−タ処理回路で他の検知器か
らのデ−タと総合的な結果にまとめられ中央制御回路７
０３をへて表示部７０５で表示される。必要に応じてデ
−タは記録装置７０６に記録される。

【００５０】近年、臨床検査における血球計測では、血
球計数の他に白血球分類、網状赤血球比率計測は重要な
測定項目に成りつつある。しかし、従来これらの項目を
単一の機種で測定できる装置はなかった。本実施例の効
果の一つとして、これら多項目を同時に測定可能とする
装置を提供したことが挙げられる。

【００５１】また別の効果として図５に示したタイムテ
−ブルで明らかなように、これら５項目の測定を僅か２
０秒のタクトタイムで実施できるため、一時間当たりの
処理検体数は１８０検体が可能であることが挙げられ
る。これら５項目を同時に測定する本発明では、各項目
を単独で計測する従来装置と比較して、その処理速度は
１．５倍から２倍を達成している。

【００５２】また、図５に示す染色系のタイムテ−ブル
に着目すると、計測を白血球分類、あるいは網状赤血球
の計測のいずれか１つの項目を実施することにすれば、
同じタクトタイムの間に２検体分の計測が可能になる。
その場合、１時間あたりの処理検体数は倍の３６０検体
に達する。これは従来の装置に比べて３倍から４倍の処
理能力である。

【００５３】以上本実施例では、測定対象として、血球
を取り上げて装置の説明を行なったが、その他の生体粒
子、たとえばがん細胞、肝臓細胞、淡白質等あるいは生
体液と反応付着させたビ−ズ類の検出にも容易に対応可
能であることは自明である。

【００５４】また水中の微細粒子等の無機物の検出等に
も応用可能である。

【発明の効果】本発明の粒子計測装置によれば定量性能
に優れ送液中にサンプル濃度の変化を小さくできるの
で、高精度な粒子濃度の計測が可能な装置が提供出来
る。

【００５５】また、本発明の粒子計測装置によれば生体
粒子、ないしは無機物の粒子の多面的な計測を高精度、
高スル−プットでおこなうことが可能となる。

【００５６】

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の一実施例を示す粒子計測装置の全体構
成図である。

【図２】図１に示した粒子計測装置における処理手順を
示したブロック図である。

【図３】定量サンプリングバルブの構成および動作を示
した斜視図である。

【図４】定量サンプリングバルブの構成および動作を示
した斜視図である。

【図５】図１にで示した粒子計測装置の動作のタイムテ
−ブルを示した図である。

【図６】図１に示した染色系の構成図である。

【図７】染色反応系の移動染色槽の構成図である。

【図８】染色系の蛍光測定のためのフロ−セル周りの構
成図である。

【図９】計数系の計数器の構成図である。

【図１０】図１に示した粒子計測装置を動作させるため
の電気系回路の構成図である。

【符合の説明】

１…定量系、２…染色系、３…計数系、４…全血、１０
３…白血球染色用試薬、１０４…網状赤血球染色用試
薬、１０５…赤血球計数用希釈液、１０６…白血球計数
用溶血剤、１１４…定量サンプリングバルブ、２０４…
白血球用撹拌槽、２０５…網状赤血球用撹拌槽、２０１
…移動染色槽、２１０…蛍光測定用フロ−セル２１０、
３０１、３０３、３０５…赤血球計数用希釈槽、３０
２、３０４、３０６…白血球計数用溶血槽、３１３…ピ
ペッタ、３１４…赤血球計数器、３１５…白血球計数
器、５０２…洗浄液・シ−ス液、５０３…洗浄液、６…
廃液槽。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者山崎功夫茨城県土浦市神立町502番地株式会社日立製作所機械研究所内 (72)発明者矢辺良平茨城県勝田市大字市毛882番地株式会社日立製作所那珂工場内 (72)発明者堀内秀之茨城県勝田市大字市毛882番地株式会社日立製作所那珂工場内 (72)発明者桜庭伸一茨城県勝田市大字市毛882番地株式会社日立製作所那珂工場内 (72)発明者多田羅信之茨城県勝田市大字市毛882番地日立計測エンジニアリング株式会社内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置と、
該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液と試
薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁液を
定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、前記
反応容器に一定量の試薬を添加供給する試薬供給手段
と、この反応容器から試薬と混合された粒子懸濁液を吸
引して粒子計測部の混合された懸濁液供給口まで運び、
前記混合された懸濁液を粒子計測部へ吐出供給するピペ
ッタを備えたことを特徴とする粒子計測装置。
【請求項２】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を第１の流路に吸引し、該第１の流路に
吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞれ切替
えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプリング
バルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに試薬を供給
する複数の試薬供給手段と、前記定量サンプリングバル
ブにより定量された粒子懸濁液を試薬と共に混合、反応
させる為の複数の反応容器と、前記定量された懸濁液と
試薬を複数の反応容器へ送液する為の送液手段と、前記
反応容器から粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁液
を粒子計測部へ吐出供給するためのピペッタを備えたこ
とを特徴とする粒子計測装置。
【請求項３】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置と、
該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液と試
薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁液を
定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、前記
反応容器に一定量の試薬を添加供給する試薬供給手段
と、この反応容器から試薬と混合した混合された粒子懸
濁液を吸引して粒子計測部の混合された懸濁液供給口ま
で運び、前記混合された懸濁液を粒子計測部へ吐出供給
するピペッタとを備えるとともに、該ピペッタに直接試
薬を供給する第２の試薬供給手段を設け、ピペッタ流路
途中に試薬と前記混合された懸濁液を吸引して２度目の
混合、反応を行なうための反応槽部分を設けたことを特
徴する粒子計測装置。
【請求項４】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を第１の流路に吸引し、該第１の流路に
吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞれ切替
えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプリング
バルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに試薬を供給
する複数の試薬供給手段と、前記定量サンプリングバル
ブにより定量された粒子懸濁液を試薬と共に混合、反応
させる為の複数の反応容器と、前記定量された懸濁液と
試薬を複数の反応容器へ送液する為の送液手段と、前記
反応容器から粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁液
を粒子計測部へ吐出供給するためのピペッタを備え、前
記反応器である溶液槽および希釈槽に前記ピペッタを同
時的に挿入するように構成したことを特徴とする粒子計
測装置。
【請求項５】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置と、
該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液と試
薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁液を
定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、前記
反応容器に一定量の試薬を添加供給するノズルと、この
反応容器から試薬と混合した混合された粒子懸濁液を吸
引して粒子計測部の混合された懸濁液供給口まで運び、
前記混合された懸濁液を粒子計測部へ吐出供給するピペ
ッタを備えるとともに、前記反応容器のうちの一部が染
色槽を有するものであって、該染色槽を前記ノズルに接
続したダイヤフラムポンプの吸引、吐出により撹拌する
ことを特徴とする粒子計測装置。
【請求項６】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を定量採取するための定量採取装置と、
該定量採取装置によって定量採取された粒子懸濁液と試
薬を混合、反応する為の反応容器と、前記粒子懸濁液を
定量採取装置から前反応記容器へ送液する手段と、前記
反応容器に一定量の試薬を添加供給する試薬供給手段
と、この反応容器から試薬と混合した混合された粒子懸
濁液を染色するための移動染色槽と粒子計測部としての
シ−スフロ−セルを備えたことを特徴とする粒子計測装
置。
【請求項７】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液を第１の流路に吸引し、該第１の流路に
吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞれ切替
えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプリング
バルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに試薬を供給
する複数の試薬供給手段と、前記定量サンプリングバル
ブにより定量された粒子懸濁液を試薬と共に混合、反応
させる為の複数の反応容器と、前記定量された懸濁液と
試薬を複数の反応容器へ送液する為の送液手段と、前記
反応容器から粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁液
を粒子計測部へ吐出供給するためのピペッタを備え、５
項目を２０秒以内に測定するように前記各機器を制御す
る制御手段を備えたことを特徴とする粒子計測装置。
【請求項８】粒子計測部を備えた粒子計測装置におい
て、粒子懸濁液をその第１の流路に吸引し、該第１の流
路に吸引された粒子懸濁液を複数の別の流路にそれぞれ
切替えることで一度に複数の定量を行なう定量サンプリ
ングバルブと、前記複数の別の流路のそれぞれに複数の
試薬を供給する複数の試薬供給手段と、定量された粒子
懸濁液を試薬と共に混合、反応させる為の複数の反応容
器と、前記定量された懸濁液と試薬を複数の反応容器へ
送液する為の複数の送液手段と、該反応容器の一部から
粒子計測部に試薬と混合、反応した懸濁液を運ぶととも
に、一部の反応容器から試薬と混合・反応した混合懸濁
液をさらに別の試薬と混合、反応させる為の複数のピペ
ッタを備え、該ピペッタに直接試薬を供給する為の複数
の第２の試薬供給手段を備えたことを特徴とする粒子計
測装置。
【請求項９】前記粒子計測部がシ−スフロ−セルである
請求項１、２、３、４、５、７又は８に記載の粒子計測
装置。
【請求項１０】前記粒子計測部が細孔を備えた電気抵抗
方式のセルである請求項１、２、３、４、５、７又は８
に記載の粒子計測装置。
【請求項１１】前記定量採取装置が、前記粒子懸濁液を
第１の流路に吸引し、該第１の流路に吸引された粒子懸
濁液を複数の別の流路にそれぞれ切替えることで一度に
複数の定量を行なう定量サンプリングバルブである請求
項１、３、５、又は６に記載の粒子計測装置。
【請求項１２】前記ピペッタが第２の試薬供給手段を備
えるものである請求項１、２、４、５又は７に記載の粒
子計測装置。
【請求項１３】前記粒子計測装置が複数台備えられるも
のであって、同一の粒子懸濁液を分配供給するための分
配供給手段を備なえ、同時に多種類の性状の計測をおこ
なう請求項１から８のいずれかに記載の粒子計測装置。
【請求項１４】定量され、試薬と混合・反応させられた
粒子懸濁液を所定の反応容器から再び定量サンプリング
バルブへ吸引し直し、再度定量し、試薬と混合、反応さ
せた後、別の反応容器に供給するための２段階反応手段
を備えた請求項１、２、４、５、６、７又は８に記載の
粒子計測装置。
【請求項１５】前記定量採取装置が粒子懸濁液が満たさ
れている第１の流路の一部を第２の流路の一部に切替え
ることで定量を行なう定量サンプリングバルブであり、
かつ定量した粒子懸濁液を第２の流路を通して前記反応
容器へ供給するための送液手段を設けた請求項１、３、
５又は６に記載の粒子計測装置。
【請求項１６】前記粒子懸濁液と試薬を混合・反応させ
る為の反応容器において粒子懸濁液と試薬を均一に混合
せしめる為の撹拌手段を設けた請求項１、２、３、４、
５、７又は８に記載の粒子計測装置。
【請求項１７】前記定量サンプリングバルブの第２の流
路へ、希釈や反応用の試薬を供給する試薬供給手段を設
けた請求項２、４、７又は８に記載の粒子計測装置。
【請求項１８】前記ピペッタに直接試薬を供給する第２
の試薬供給手段を設け、該ピペッタ流路途中に試薬と混
合懸濁液を吸引してさらに２度目の混合・反応を行なう
ための反応槽部分を備えた請求項１、２又は７に記載の
粒子計測装置。