JPH04507286A

JPH04507286A - Ｈｔｌｖ―ｉ、ｈｔｌｖ―ｉｉ又は関連レトロウイルスに対する抗体間の識別、新規ペプチド、抗体の検出及び免疫アッセイキット

Info

Publication number: JPH04507286A
Application number: JP2505002A
Authority: JP
Inventors: ブロムベルグ，ヨナス; ピプコルン，リュディゲル
Original assignee: レプリコ、メディカル、アクチボラグ
Priority date: 1989-03-02
Filing date: 1990-03-02
Publication date: 1992-12-17
Anticipated expiration: 2017-04-02
Also published as: DE69024951T2; JP3271666B2; WO1990010231A1; DE69024951D1; CA2048655A1; AU640921B2; EP0461193A1; CA2048655C; AU5283490A; SE8900721D0; US6242174B1; EP0461193B1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】ＨＴＬＶ−１、ＨＴＬＶ−Ｉ＋又は関連レトロウィルスに対する抗体間の識別、新規ペプチド、抗体の検出及び免疫アッセイキット本発明はＨＴＬＶ−ｌ５ＨＴＬＶ−Ｉ＋又ハ関連１ｚ）ｃｒウィルスとの感染から生じる抗体を保有したヒト又は他の霊長類からの血清又は他の体液のサンプルにおいて特異的抗体間を識別する方法に関する。加えて、本発明は上記識別方法に適合化された免疫アッセイキット、新規ペプチド及び抗体を上記ペプチドで検出する方法に関する。

背景現在まで下記技術が２ウイルスとの感染の区別に関して用いられてきた：類別化によるウィルス単離、血清学的技術（抗体競合又は中和に基づく）又は核酸技術（核酸増幅又はハイブリッド形成）。これら技術のほとんどは面倒であり、特別な能力を要する。

ヒト向Ｔリンパ球つィルスＩ型（ＨＴＬＶ−１）及びＩＩ型（ＨＴＬＶ−１１）は広域性のヒトレトロウィルスである（簡単なレビューは参考文献６で示されている）（１，２，３，２０）、ＨＴＬＶ−１１？！何年間にもわ；／：りまれであると考えられてきたが、最近になり主に米国識別することは不可能である。２ウィルス感染間を区別することは臨床上重要であろう。ＨＴＬＶ−Ｉはあるタイプの白血病（成人Ｔ細胞白血病、ＡＴＬ）に関係し、一方ＨＴＬＶ−１１はいくつかのケースの毛様細胞性白血病で観察された。２感染間を区別する簡単な試験に関して必要性が存在する。

ＨＴＬＶ−１及びＨＴＬｖ−１１タンパク質のアミノ酸配列はたとえ類似しているとしても、それらが著しく異なる領域がいくつかある。我々の考えは抗体試験において抗原のような領域からの合成ペプチドを用いることである。我々は例えば面相免疫アッセイに適しかつ型特異性抗体反応性を示す配列をもつペプチドを発見した。我々はＨＴＬＶ−１感染をＨＴＬ、Ｖ−１１感染から識別するためにそれらを用いる技術も発見した。

発明の説明本発明の一面はＨＴＬＶ−Ｉ感染から生じる抗体を含む、ＨＴＬＶ−Ｉ＋感染から生じる抗体を含む又は関連レトロウィルス感染から生じる抗体を含むヒト又は他の霊長類からの血清又は他の体液のサンプルにおいて特異的抗体間を識別する方法に関し、それによって分析されるサンプルが少なくとも４種の菟疫アッセイに付され、各々で下記グループａ）〜ｄ）：ａ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−Ｉｇａｇの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；る少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｄ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−１１ｅｎｖの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；から選択される異なる診断抗原を用いるが、但しグループａ）〜ｄ）の各々から少なくとも１種のペプチドが選択サレ、更にＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＩ、Ｖ−［１の少す＜トも一部重複する配列に相当する少なくとも一対のペプチドがグループａ）＋ｂ）及びｃ）＋ｄ）の各々から選択され、しかも前記少なくとも４種の免疫アッセイでサンプルの抗体の分析される異なる結合強度が、一方の特異的レトロウィルス感染から生じる抗体と他方の特異的レトロウィルス感染から生じる抗体とを識別するために用で下記ペプチドから選択される：ｉｌ　）ｉＴＬＶ−Ｉ　Ｌｌ　２９Ｂ−３４９ＬＲＳＬＩＹＳＮ！５ＫＥＣＱＫＬＬｔＪ、ＲＧＨ丁ＮＳＰＬＧＤＭＬＰＪ、ＣＱ丁＾７ｐ’戟AＤＫ７’ｉＶＬ ’ｖ”ｙＴＱ　？に’ｆ。

ｂｌ　）：ＴＬＶ−１１２二２３０５−ｊｓ５　ＬＲ５ＬＡＹＥＮＡｈＫＥＣＱＫＩＬＱＪ、ｉ！ＧＨ丁ＮＥＰＬＧＥＭＬＲ丁ＣＱ五ＷτＦjＩ）Ｋ丁ＫＶＬｂ ”ＶＱ：’ＦＪａ）　）！ＴＬＶ−エ　エラ４−２０　工ＦＳＲ５ＡＳＰ工ＰＲＰＰＲＧＬＡｂ）　Ｈ’ｒＬＶ−エエ　９二９４−２０　１ＨＧＬＳＰＴＰ工ＰＫＡＰＲＧＬＳａ）　ＨＴＬＶ−４ｇ５１１１１−１３０　ＰＤＳＤＰＱ工ＰＰＰＹＶＥＰＴＡＰＱＶＬｂ）　ＨＴＬＶ−１１ｆｉ　１１７−１３６　ＰＳＰＥＡＨＶＰＰＰＹＶＥＰＴＴＴＱＣＰｆｉ）　ＨＴＬＶ−工　ｇ３３２６５−２８５５ＩＬＱＧＬＥＥＰＹＨＡｆｉＥＲＬＮ工ＡＬａ）　ＨＴＬＶ−Ｉ　５２ｆｉ　３０２−３２０　ＬＡＹＳＮＡＮＫＥＣＯＫＬＬＱ八ＲＧＨａ）　ＨＴＬＶ−１へ　ｆｉ　３２３−３４１　ＳＰＬＧＤＭＬＲＡＣＱＴＷＴＰＫＤＫＴａ）　ＨＴＬＶ−Ｉ　Ｃ１！！！１３３７−３５５　ＰＫＤＫＴＫＶＬＷＱＰＫＫＰＰＰＮＱｂ）　ＨＴＬＶ−ＩＩ　ｇｇｇ　３４３−３６１　ＰＫＤＫＴＫＶＬＷＯＰＲＲＰＰＰＴＯａ）　１（ＴＬＶ−エ　エ５３７Ｂ−３９９ＰＣＰＬＣＱＤＰＴＨＷＫＲＤＣＰＲＬＫＰＴａ）　ＨＴＬＶ−工　ｆｉ　３９２−４１１　ＤＣＰＲＬＫＰＴ工ＰＥＰＥＰＥＥＤＡＬＬｂ）　ＨＴＬＶ−エエ　λ弘ｇ　３９８−４４６　ＤＣＰＱＬにＰＰＱＥＥＧＥＰＬＬＬＤＬＣ）　）ＩＴＬＶ−工　ｇｎｖ　１９０− ２１３　ＬＬＰＨ５ＮＩ、ＤＨＩＬＥＰＳ工ＰＷＫＳＫＬＬＴＬｄ）　ＨＴＬＶ（工ｅｎｖ　１８６−２０９　ＬＶＨＤＳＤＬＥＨＶＬＴＰＳＴＳｗＴＴＫ工ＬＫＦｃ）　ＨＴＬＶ−Ｉ　ａｎｖ　２９０−３１２　ＨＮＳＩＪＬＰＰＦＳＬＳＰＶＰＴＬＧＳＲ５ＲＲｃ）　ＨＴＬＶ−１ｅｎｖ　３６０−３７８　ＡＩＶＫＮＨＫＮＬＬＫＩＡＱＹＡＡＱＮＣ）　ＨＴＬＶ−工　ｅｎｖ　３７６−３９２　八ＱＮＲＲＧＬＤＬＬＦＷＥＱＧＧＬＣ）　ＨＴＬＶ−工ｅｎＶ　３８０−３９８　ＲＧＬＤＬＬＦ’１ＪＥＱＧＧＬＣＫＡＬＱＥｃ）　ＨＴＬＶ−４ｅｎｖ　４６５−４８８　ＲＱＬＲＨＬＰＳＲＶＲＹＰ）ｆＹｓｒ、工ＬＰＥＳＳＬｄ）　ＨＴＬＶ−エエｅｎｖ　４６３−４８６エＱＡＬＰＱＲＬＱＮＲＨＮＱＹＳＬ工ＮＰＥＴＭＬ好ましい態様において、少なくとも下記ペプチドが選択される：ａ）　ＨＴＬＶ−１ｇ３３１１１−１３０　ＰＤＳＤＰＯ工ＰＰＰＹＶＥＰＴＡＰＱＶＬｂ）　ＨＴＬＶ−工：Ｃ工瓜１１７−１３６　ＰＳＰＥＡＩ（ＶＰＰＰＹＶＥＰτＴＴＱＣＰＣ）　ＨＴＬＶ−工　ＱｎＶ　１９０−２１３　Ｉ、ＬＰＨ５ＮＬＤＨ工ＬＥＰＳ工ＰＷＫＳＫＩ、ＬＴＬ（１）　ＨＴＬＶ−ＩＩ　ＱｎＶ　１８６−２０９　ＬＶＨＤＳＤＬＥＨＶＬＴＰＳＴＳＷＴＴＫＩＬＫＦ更に好ましい態様において、分析されるサンプルは少なくとも８種の免疫アッセイに付され、結合強度の分析パターンはコンピュータープログラムで処理される。

場合により、少なくとも１種の選択されたペプチドが不活性な可溶性又は不溶性キャリアに付着される。

本発明のもう１つの面は、各々が抗原構造を含むＨＴＬＶ−Ｌ　ＨＴＬＶ−ＩＩ又は関連レトロウィルスノ配列に相当しかつ下記配列から選択される少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチドに関する：ＨＴＬＶ−１９！１１３０−１９７　ＰＶＫＨＦＨＧ７．Ｐ？１ｉｉＰＷＱ！’ＪＤＬＱ入工ＫＱＥＶＳＱｉｌＰＧＳＰＱＦＭｐＴＩＦ、Ｌ`ＶＱＱＦＤ？ＴＡ？、ＤＬＱＣＬＬＱＹＬＣ５ＳＬＶＡＥＴＬＶ−１１５３１３７−２１４ＦＩＬＥ？Ｆ（Ｊ、ＰＳ？：、ＲＦ’Ｗ９ＱＤＬＱＡＩＫＱミＶＳＳ５ｉ、ＬＧＳ？ＱＦＭＱ丁ＬＲＬＡuＱＱＦＤＦ’ＴＡＫＤＬＱＤＬＬＱＹＬＣ５ＳＬ菅１（ＴＬＶ−ｆ　６２９８−３４９　ＬＲ５ＩＪ、ＹＷＪ：ＥＣＱＫＬＬＱＡＲＧ）ＩＴＮＳ？ＬＧＤＭＬＪＪＣＱＴＩ／ＴＰＫＤに丁ｎＬuＶＱＦＫＫＨＴＬＶ−１１５ｇ　３０５−３５６　ＬＲ５！Ｊ、ＹＳＮ７−１ｉＫＥｃＱＫルＱＡＲＧＩ（ＴＮＳＦＬＧＥＭＬＲτＣＱＡ讐丁ＰＫＤＫ嘯jｖＬｖＶＱ：’ ＦＩＲＨＴＬＶ−工　迩４−２０工ＦＳＲ５ＡＳＰ工ＰＲＰＰＲＧＬＡＨＴＬＶ−エエヱユ４−２０紺ＧＬＳＰ’ｒＰ工Ｐ臥ＰＲＧＬＳＨＴＬＶ−１エラ１１１−１３０　ＰＤＳＤＰＱＩＰＰＰＹＶＥＰＴＡＰＱＶＬＨＴＬＶ−エエ　ＣＥ！ｓｉ　１１７−１３６　Ｐ！ｊＰＥ入ＨＶＰＰＰＹＶＥＰＴＴＴＱＣＦ’ＨＴＬＶ−エ　ヱ瓜２６５−２８５　Ｓ工ＬＱＧＬＥＥＰＹＨＡＦＶＥＲＬＮ話ＬＨＴＬＶ− Ｉ　ｇＡｇ　３０２−３２０　ＬＡＹＳＮＡＮＫＥＣＯＫＬＬＱＡＲＧＨＨＴＬＶ−４Ｃ１Ａｇ５３７−３５５　ＰＫＤＫＴＫＶＬＷＱＰＫＫＰＰＰＮＱＨ’ｌ ’ｌ、Ｖ−エＩＣＢ５３４３−３６Ｌ　Ｐ鴎ＫＴＫＶＬＷＱＰ餓ＰＰＰＴＱＨＴＬＶ−エ　ヱ！２３７Ｂ−３９９ＰＣＰＬＣＱＤＰＴ囮に即ＣＰＲＬＫＰＴＨＴＬＶ−工　ｇｇｇ　３９２−４１１　ＤＣＰＲＬＫｐＴ工ＰＥＰＥＰＥＥＤＡＬＬＨＴＬＶ−工１　エラ３９Ｂ−４１６ＤＣＰＯｒ、ＫＰＰＱＥＥＧＥＰＩ、ＬＬＤＬｌ（ＴＬＶ−工ａｎｖ　１９０−２１３　ＬＬＰＨ５ＮＬＤＨ工ＬＥＰＳ工ＰＷＫＳＫＬＬＴＬＨＴＩ、Ｖ−工　ａｎｖ　３６０−３７８　Ａ工ＶＫＮ′ ＨＫ？ＪＬＬＫ工へＱＹ入ＡＱＮＨＴＩ、Ｖ−工ｔｎＶ　３７６−３９２　ＡＱＮＲＲＧＬＤＬＬＦＷＥＱＧＧＬＨＴＬＶ−４ａｎｖ　３８０−３９８　ＲＧＬＤＬｒ、ＦＷＥＱＧＧＬＣＫＡＬＱＥＨＴＬＶ−工　ａｎｖ　４６５−４８８　ＲＱＬＲＨＬＰＳＲＶＲＹＰＨＹＳＬＩＬＰＥＳＳＬ本発明の更にもう１つの面はヒト又は他の霊長類からの血清又は池の体液のサンプルにおいてＨＴＬＶ−１゜ＨＴＬＶ−１１又は関連レトロウィルスとの感染から生じる抗体を検出する方法に関し、それによって上記サンプルが診断抗原として本発明の少なくとも１種のペプチドを用いて免疫アッセイに付される。

本発明の更にもう１つの面はＨＴＬＶ−１感染から生じる抗体を含む、ＨＴＬＶ −Ｉ＋感染から生じる抗体を含む又は関連レトロウィルス感染から生じる抗体を含むヒト又は他の霊長類からの血清又は他の体液のサンプル間における識別のための免疫アッセイキットに関し、そのキットは下記グループａ）〜ｄ）二ａ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−１ｇａ工の配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｂ）抗原構造含有ＨＴ　Ｌ　Ｖ　−１１Ｌ！！ＪＬ（７）配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；Ｃ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−Ｉ　ｅｎｖの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｄ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−１１ｅ旦ヱの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；から選択される少なくとも４種のペプチドを含むが、但しそれはグループａ）〜ｄ）の各々から少なくとも１種のペプチドを含み、更にそれはグループａ）＋ｂ）及びｃ）＋ｄ）（７）各々からＨＴＬＶ−１及びＨＴＩ、Ｖ−１１７７）のペプチドを含む。

は前記方法において下記ペプチドから選択される少なくとも４種のペプチドを含む：ａ）　ＨＴＬＶ−工　ｇ３３４−２０　ＩＦＳＲ６ＡＳＰＩＰＲＰＰＲＧＬＡｂ）　ＨＴＩ、Ｖ−４１ｆｉ　４−２０１！（ＧＬＳＰＴＰＩＰＫＡＰＲＧＬＳａ）　ＨＴＬＶ−４５１！！５２１１１−１３０　ＰＤＳＤＰＯＩＰＰＰＹＶＥＰＴＡＰＱＶＬｂ）　ＨＴＬＶ−エＩＣｉ！！５ｉ１１７−１３６　ＰＳＰＥＡ）ｒＶＰＰＰＹ’／ＥＰＴＴＴＱＣＰａ）　ＨＴＬＶ−Ｉ　ｃ；３５１２６５−２８５５ＩＬＯＧＬＥＥＰＹ）ＬＡＦＶＥＲＬＮＩＡＬａ）　）ＩＴＬＶ−４ｇｇｇ　３０２−３２０　ＬＡＹＳＮＡＮＫＥＣＱＫＬＬＱＡＲＧＨａ）　ＨＴＬＶ −Ｘ　ｇ３３３２３−３４１　ＳＰＬＧＤＭＬＲＡＣＱＴＷＴＰＫＤＫ？ａ）　ＨＴＬＶ−１ｇ！！！ｇ３３７−３５５　ＰＫＤＫＴＫｔ／ＬＷＱＰＫＫＰＰＰＮＱｂ）　ＨＴＬＶ−１工工捏３４３−３６１　ＰＫＤＫＴＫＶＬＷＱＰＲＲＰＰＰ’ｒ’Ｑａ）　ＨＴＬＶ−Ｘ　史Ｊ　３７Ｂ−３９９ＰＣＰＬＣＯＤＰＴＨＷＫＲＤＣＰＲＬＫＰ’！’ａ）　ＨＴＩ、Ｖ−ＩＣＢ５１３９２−４１１　ＤＣＰＲＬＫＰＴＩＰＥＰＥＰＥＥＤＡＬＬｂ）　ＨＴＬＶ−エエＣＥ！５１３９Ｂ−４１６ＤＣＰＱＬＫＰＰＱＥＥＧＥＰＬＬＬＤＬｃ）　ＨＴＬＶ−１ａｎｖ　１９０−２１３　ＬＬＰＨ６ＮＬＤＨｔＬＥＰＳＩＰＷＫＳＫｒ、ＬＴＬｄ）　ＨＴＬＶ−ＸＸ　ａｎＶ　１８６−２０９　ＬＶＨＤＳＤＬＥＨＶＬＴＰＳＴＳＷＴＴＫ工ＬＫＦｃ）　ＨＴＬＶ−工　ｅｎｖ　２９０−３１２　ＨＮＳＬ工ＬＰＰＦＳＬＳＰＶＰＴＬＧＳＲ６ＲＲｃ）　ＨＴＬＶ−工　ｅｎｖ　３７６− ３９２　ＡＱＮＲＲＧＬＤＬＬＦＷＥＱＧＧＬｃ）　ＨＴＬＶ−工　ｅｎｖ　３８０−３９８　ＲＧＬＤＬＬＦＷＥＱＧＧＬＣＫＡＬＱＥｃ）　ＨＴＬＶ−工　ｅｎｖ　４６５−４８８　ＲＱＬＲＨＬＰＳＲＶＲＹＰＨＹＳＬＩＬＰＥＳＳＬｄ）　ＨＴＩ、Ｖ−エエａｎｖ　４６３−４８６１ＱＡＬＰＱＲＬＱＮＲＨＮＱＹＳＬ工ＮＰＥＴＭＬ本発明のこの面の好ましい態様において、免疫アッセａ）　ＨＴＬＶ−エエ狙１１１−１３０　ＰＤＳＤＰＱ工ＰＰＰＹＶＥＰＴＡＰＱＶＬｂ）　ＨＴＬＶ−１１エ瓜１１７−１３６　ＰＳＰＥＡＨＶＰＰＰＹＶＥＰＴＴＴＱＣＰ図１．ペプチド対ＩＧＢ／２ＧＢとの抗体反応性の分布図。米国（７）ＨＴＬＶ−１の１５例及びＨＴＬＶ−１１（１’）１０例の陽性血清からのデータ。黒丸＝ＨＴＬＶ−Ｉ＋陽性血清。

図２．ペプチド対しＥＡ／２ＥＡとの抗体反応性の分布図。図１の場合と同じ記号及び血清。

図３．コンピュータープログラム）ＩＴＬＶＰＡＲ３の補助による血清学的反応性の分類。ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−１］ポイントは図１及び２の場合と同じ血清でコンピューター解析され、同じ記号で示されている。

アミノ酸に関する一文字コード本明細書及び請求の範囲において、下記の慣用的−文字コードが用いられる・Ａ　アラニンＩＧＡ　ＨＴＬＶ−Ｘ　迩４−２０　ＸＦＳＲ５ｋＳＰＸＰＲＰＰＲＧＬｋ２Ｃ λ　Ｍ’ｆ！ＬシーＴＴｒｙｑａ４−２０　工ＨＧＬＳＰ’！’Ｐ工ＰＫＡＰＲＣ；ＬＳＣシスティンＤ　アスパラギン酸Ｅ　グルタミン酸Ｎ　アスパラギン下記ペプチドが合成された。以下で左側の文字は用いられるペプチドを表す。

ＩＥＢ　ＨＴＬＶ−工ｅｎＶ　２９０−３１２　ＨＮＳＬ工ＬＰＰＦＳＬＳＰＶＰＴＬＧＳＲ９ＲＲ４１Ｊ／％　ｎ五シＶ“ムシ　３ｊ５　憤−ムー　ふΩリーーｒ尚ｒ１ｒ八八ｒハ曽−コＩＧＢ　ＨＴＬＶ−工ｒＨ５１１ｌｌ−１３０ＰＤＳＤＰＱＩＰＰＰＹＶＥＰＴＡＰＱＶＬ２ＧＢ　ＨＴＬＶ−エエＣＬ！５ｉ１１７−１３６　ＰＳＰＥＡＨＶＰＰＰＹＶＥＰＴＴＴＱＣＰＩＧｃ　ＨＴＬＶ−工ｇ３１２６５−２８５　Ｓ工ＬＱＧＬＥＥＰＹ）ｔＡＦＶＥＲＬＮＩＡＬＩＧＤ　ＨＴＬＶ−Ｉ　ＣＡ１３０２−３２０　ＬＡＹＳＮＡＮＫＥＣＱＫＬＬＱＡＲＧＨＩＧＥ　ＨＴＬＶ−１ｃＩＨ３２３−３４１ＳＰＬＧＤＭＬＲＡＣＱＴＷＴＰＫＤＫＴ２ＧＦ　ＨＴＬＶ−工ｇ３３３３７−３５５　ＰＫＤＫＴ）ＣＶＬＶＶＱＰＫＫＰＰＰＮＱＩＧＧ　ＨＴＬＶ−１１ｇ３３３４３−３６１　ＰＫＤＫＴＫＶｔ、ＷＱｐＲＲＰＰｐＴＱＩＧＨＨＴＬＶ−Ｉ　ＣＪＡｇ　３７Ｂ−３９９ＰＣＰＬＣＱＤＦ’ＴＨＷＫＲＤＣＰＲＬＫＰＴＩＧＩ　ＨＴＬＶ−１ｃＢ３３９２−４１１　ＤＣＰＲＬＫＰＴ工ＰＥＰＥＰＥＥＤＡＬＬ２ＧＩ　１（ＴＬＶ−ＩＩ　エラ３９Ｂ−４１６ＤＣＰＱＬＫＰＰＱＥＥＧＥＰＬＬＬＤＩ。

１Ｅｃ　ＨＴＬＶ（ａｎｖ　３６０−３７８　Ａ工ＶＫＮＨＫＮＬＬＫＩＡＱＹＡＡＱＮＬＥＤ　ＨＴＬＶ−４ａｎｖ　３７６−３９２　ＡＱＮＲＲＧＬＤＬＬＦＷεＱＧＧＬＩＥＥ　ＨＴＬＶ−工ＱｎＶ　３８０−３９８　ＲＧＬＤＬＬＦＷＥＱＧＧＬＣＫＡＬＱＥＩＥＦ　ＨＴＬＶ−４ａｎｖ　４６５−４８Ｅ］　ＲＱＬＲＨＬＰＳＲＶＲＹＰＨＹＳＬＩＬＰＥＳＳＬ２ＥＦ　ＨＴＬＶ−ＩＩ　ａｒ＋ｖ　４６３−４８５１ＱＡＬＰＱＲＬＱＮＲＨＮＱＹＳＬＩＮＰＥＴＭＬペプチドはアプライド・バイオシステムズ（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｊｅｍｓ）　４３０　Ａ機においてＦＭＯＣ技術に従い固相技術で合成された。それらはＨＰＬＣクロマトグラフによりＣ１８カラムで純度９９．５％に精製され、分析ＨＰＬＣ，アミノ酸配列決定及びアミノ酸分析により特徴付けられた。

應清我々は成人Ｔ細胞白血病のＨＴＬＶ−Ｉ血清陽性患者４例（日本のヒヌマ・ヨリオ博士から進呈）、熱帯痙性不全対麻痺のＨＴＬＶ−Ｉ血清陽性患者１例（ＴＳＰ。

スウェーデンへのエチオピア移民）　、５ＴＬＶ−Ｉ抗体陽性カニクイザル５例（多数の今ル血清の試験中に我々により発見された；　（５）参照）、米国のＨＴＬＶ−１血清陽性静脈内薬物乱用者１５例（競合ＲＩＰＡで類型化された血清（１７，２５）；米国立席研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｘｎｃ！ｒ　Ｉｎ５ｔｉｔ＋ｕｅ）のマージヨリ−ｍロバ−ドーグｏ７博士（ｄｒ　Ｍａ＋１ｏｒｉｅ　Ｒｏｂｅｒｔ−Ｇｕｒｏｆｌ）から進呈）からの血清を用いた。我々は陰性コント西−ルとしてスウェーデン人血液ドナーからの血清３８例を用いた。

免疫酵素抗体測定我々は酵素抗体検出技術（酵素免疫アッセイ、　Ｅ　Ｉ　Ａ）を利用したが、その場合に濃度２０μｇ／ｍ　ｌで溶解された合成ＨＴＬＶペプチドが、活性化プラスチック表面に容量１００μｌから吸着され、次いで患者血清の抗体しかる後酵素（ペルオキシダーゼ）標識指示抗体と反応せしめられた。その技術は我々が以前記載したものに相当する（４．１５）。各合成ペプチドに対する血清学的反応性（ＩｇＧ活性）の測定として、我々は１１５０希釈で同血清とインキュ＜− ）されたペプチド被覆及び非ペプチド被覆マイクロプレートウェル間における４５０ｎｍの吸光度の差異を用いた。

する分析では下記結果を示した。数値はＥＩＡにおけるペプチド被覆及び非ペプチド被覆ウェル間の吸光度差である。明確かつ特異的な反応性（吸光度差〉０．３及び陰性コントロールで反応性の欠如）を示すペプチドがらの結果のみが示されている：ＩＧＢ　２ＧＢ　２ＧＦ　ＩＥＡ　２ＥＡ　ＩＥＢ　ＩＥＣＩＥＤ　ＩＥＥ　ＩＥＦ　２ＥＦ　定型成人Ｔ細胞白血病患者４例の血清１．４　Ｇ、！ｌ　ｔｕ　１．１　［ＩＪ　ａ、００．４［１ｊＯ，５１ｉ、０［１，’［ｌ　１　（１’）＋、＋　ｏ、２０．＋１　ａ、７０．、！０．０１１．２０．Ｇ　Ｏ，Ｑ’０．２０．０　１　’　（１）Ｑ、８０．７　Ｑ、１０．４’０、ｉｏ、Ｏ’ｏ、３’０．００１０．５０．１　１　’　（ｉ）ＳＴＬＶ−Ｉ陽性カニクイザル５例の血清１．７１．３０．６０．４０．１０、Ｏｆｌ、ｆｌ　Ｏ，１１０Ｊ　Ｏ，００，０１（１）１．６０．４０．００．３０．１０．０　Ｇ、２０．４　Ｑ、００．０　Ｇ、０　１　（１）１．６０．３　［１，１１，００，３Ｇ、００．００．００．［ｌ　０．００．０　＋　（。

１．５０．００．０１．１　Ｇ、３　［１，００，００，２０，４Ｇ、１１０．０　１　（１）１．５０．５０．００Ｊ　Ｇ、Ｉ　Ｏ，０Ｇ、６０．００．００．００．０　＋　（１）表１ｂ、すべて米国からの静脈内薬物乱用者２５Ｎの血清はブラインドで分析された。１血清からの結果が１列を占める。

我々　既知の結果　／推ＩＧＢ　２ＧＢ　２ＧＦ　ＩＥＡ　２ＥＡ　ＩＥＢ　ＩＥＣＩＥＤ　ＩＥＥ　ＩＥＦ　２ＥＦ　定型Ｄ　１１　Ｇ、ＩＯ，２［１００，ＩＯ，２［１，１０，２０，１１１０，８Ｇ、８０　１．００．５１．１０．４１．（１１，４０，３０１１００［１，ｌ０４ｆ１．６０．ＩＩ）　０．２［１，４０，１０，４２２００００，１００［１０００００００，８００１，１００００００，１０１’　１０．８０．９Ｇ、８１．０Ｇ、４０．８０　０．１１１．３００　１　１０、７　Ｇ、　１００．４００００Ｑｆ１．１ｆｌ　１　１０．３０．３０　０．１０．４［１００Ｇ　０．１０．４　２　２００．５０　０　０．６０ＪＯＯｒＪ　Ｑ、１０．５　２　２０００００００００００　０’１０　０．２０　０　０．４［１，２００，５１，００，Ｉｌｌ、６　２　２０　０　Ｄ　Ｄ　［１，６［１，３ｆｌ　ＯＯＪＯ，ｌｉｌ、５　２　２０．８０Ｊ０　０．３０　０　０　０ＪＯＯＱ　１　１０ＱＯＧＩ）Ｇｏ（１（ｔｏ（ｌ　ＯＱｏ　０．１０　０　０　０　０　０　０　０　ａ　Ｑ　００．２０．４０　ｒＪ　０．４Ｑ、２０　０　ｔｌ、５０　［１，３２２Ｇ　ＯＱ　Ｏ，ｌＱ、２０　０　０　０　０　０　？　１０　０　０　０　［１，５００００，２００，１２’１０　０．２０　００．６０　０　０　０．１０　０．１　２　、　２０．１０　０　０．３０．１０Ｊ０　０　１．０θ、９［１，１１１００００，４０００００，５０，２０１１００００，５０００００，１０，ＩＱ　１　１００．２０．ＩＱ、２０．２００１］、２００Ｑ　？　Ｉｆｏ　０．４０　０　０　．０　０　０　０　０　０　？　１００［１１１００ＱＱＯ００００３０，６００，３００，１０００，２００？　１０．１０．５０　０　１１．１０　０　０　０　［＋　０．１　２　２０．４０００．３００ＱＱＯ’Ｏｆｌ　１　１スウ工−デン人血液ドナー血清３８例に関する反応性（吸光度差＞０．３）の頻度１／３８　Ｇ／３８　［１／３８　Ｇ／３８　０／３８　Ｇ／３８０／３８　Ｇ／３８　Ｇ／３８　Ｇ／３８　０／３８　’説明・０・コントロール血清、１・ＨＴＬＶ−Ｉ陽性血清、２　：　ＨＴＬＶ−Ｉ＋陽性血清、？：不明確反応性の血清表１でみられるように、単一ペプチドのＥＩＡではＨＴＬＶ−１及びＨＴＬＶ− １１間で明確に区別できなかった。次いで我々は二次元図でデータを分析することを試みた。少なくとも２つのペプチド対は比較的良い型特異性識別能を示すことがわかった（図１及び２）。しかしながら、これらの対であってもいくつかの不一致があった。

ＨＴＬＶ血清型の自動解析ＺＨＴＬＶ型間の識別能を更に改善するため、我々は各ペプチドのパラメーターに関して識別しうる相対的能力に従い吸光度を重量と掛は合わせることですべての結果を考慮しようと試みた。次いで重量化吸光度はＨＴＬＶ−１”及び“ＨＴＬＶ−１１″ポイントの計算に関して各々用いられた。操作は下記のようにｄＢＡＳＥｌｌに書き込まれたコンピュータープログラムに従い行われた。

”ＨＴＬＶＰＡＲｌｉ、　ＣＭＤ、血清学的類型化血清に関してルーチン”ＨＴＬＶ−１及び−１１陽性中に強度セットオフ　− 通話セットオフクリア ’ＯＫ″をＩＩＩＮＤＴにいれるＨＴＬＶＴＹＰ、　ＴＸＴニ代替物をセットするＭＩＮＤＴ＝’　ＯＫ’で行う消去− Ｅｌ、Ｏ表示１−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− −−−−−−−。

Ｅｌ、５０表示′−−−−−−〜−〜−−−−−−−−−−−−−１Ｅ２，２４表表示面清のＨＴＬＶ類型化に関するプログラム１Ｅ３，０表示１　＋＋−＋＋＋＋＋＋−−−−−−＋−一−−−−−−−−−−−−−−−−−＋Ｅ３．５０表示１−−−−−−−−−−−−−−−−一−−−−−Ｊ読取り ′をＭＤＢＡＳにいれるＥ５．５表示′データベースの名称は何？（Ｓ＝ニストップ′ＭＤＲＡＳをとる読取りＭＤＢＡＳ＝”のときループＥＮＤ［Ｆ！　（ＭＤＲＡＳ）　＝’　Ｓ’のときＵＩＴＮＤＩＦトリム（＋　（ＭＤＢＡＳ））＋’、　ＤＢＦ’　をＭＦＤＢＡＳにいれる、　ＮＯＴ、ファイル（’＆ＭＤＲＡＳ’）のときループＮＤＩＦクリア・ゲットプリント・セットオフＡＭＤＢＡＳ使用代替物セットオンコンソール・セットオフ？　ＣＨＲ（１２）？　″血清サンプルの）ＩＴＬＶ類型化の結果が登録される゛？パ？′　データベース’　＋ＭＤＢＡＳ十″、′？１′ ７’Ｎｔ−サンプルーーーー　結果−一一一−−−−−−−−−−−−−−−− 一−−−？パコンソールφセットオン代替物セットオフＮＯＴ、　ＥＯＦで行うＥ７．５表示ＳＴＲ（１，３１Ｅ９．５表示′血清数’＋ＡＯＭＲ＋”　＋ＹＲ＋”　＋ＳＴＲ（ＭＡＬ（ＬＡＢＮＯ）、　５１　＋’　が試験されている゛Ｅｌｌ、５表示″＋；読取り０、（ｌを）ＩＴＩＪポイントにいれる０、［ｌをＨＴＬＶＩポイントにいれる０、０をＨＴＬＶ２ポイントにいれるＧ２：１１７＞０．２０のとき（Ｇｌ：Ｉｌｌ／Ｇ２・１１７）　＞＝１．４のとき（Ｇｌ：１１１／Ｇ２：１１７）　（＝０．６のとき［ＩＴＬＶ２ポイント＋ｌをＨＴｔ、Ｖ２ポイントにいれるＮＤＩＦＮＤＩＦＧ１：１１Ｄ０．３及びＧ２：１１７＜［１，１のときＦＩＴＬＶＩポイント＋１をＨＴＬＶＩポイントにいれるＮＤＩＦＧ１：１１１＞０．３及びＧ２：１１７（０，３のときＨＴＬｖポイント＋０．５をＨＴＩ、ＶポイントにいれるＮＤＩＦＧ２：３９８＞０．３のときＧ１：３９２／Ｇ２：３９ｇ＜０．５のときＨＴＬＶ２ポイント＋０．５を１ｌＴＬＶ２ポイント４ｍｌ、ＮレルＮＤＩＦＮＤＩＦＥ２：１８６＞［１，２［１のときＥｌ：１９０／Ｅ２：、１８６＜０．６のとき１１ＴＬＶ２ポイント＋ｌをＨＴＬＶ２ポイントにいれるＮＤＩＦＥｌ・１９０／Ｅ２　：　１８６＞＝１．４のとき１１ＴＬＶＩポイント＋ｌをＩＩＴＬＶＩポイントにいれるその他Ｅｌ・１９［１／Ｅ２・１８６＞２．５のときＨＴＬＶＩポイント＋２をｏｔｖｘポイントにいれるＥＮＤＩＦＥＮＤＩＦその他Ｅｌ：１９Ｇ＞０．５のとき１１ＴＬＶＩポイント＋ｌをＨＴＬＶＩポイントにいれるＥＮＤＩＦＥＮＤＩＦＥｌ：２９０＞０．２５のときＨＴＬＶポイント＋１を）！ＴＬＶポイントにいれるＥＮＤＩＦＥｌ・３８Ｇ＞０．２５のときＨＴＬＶポイント＋１をＨＴＬＶポイントにいれるＥＮＤＩＦ０１：２４＞０．２５のとき（０１・１９／ＤＩ：２４）＞ｌ、９のとき１１ＴＬＶＩポイント＋１をＩＩＴＬＶＩポイントにいれるＥＮＤＩＦＥＮＤＩＦ（ＤＩ：１９＋旧２４１　＞２のとき＋１ＴＬＶポイント＋１をＨＴＬＶポイントにいれるＥＮＤＩＦ０１：　１９＞５のときＨＴＩＪポイント＋０．５を）ＩＴＬＶポイントにいれるＥＮＤ［Ｆ）ＴをＨＴＬＶＩポイント＋１（ＴＬＶ２ポイント＋１ＩＴＬＶ２ポイントチＭＴ＞１．０のとき１１Ｔ＞３．５のとき °λクリア１　をＭＥＰＩＴＩＩＥＴにいれるその他 ′λ′をＭＥＰＩＴＨＥＴにいれるＥＮＤＩＦ下記ケースを行うＨＴＬＶＩポイント〉ＨＴＬｖ２ポイント及びＨＴＬＶＩポイント〉１型を７１１　と代えるＭＥＰＩＴＩ（ＲＴ＋’　ＨＴＬＶ−１ｆ；１ｍ相当する血清学的反応性′をＭＴＹＰＥＣＯＭにいれるＨＴＬＶＩポイント＞ＨＴＬＶ２ポイントノケース型を′ｌ？′と代えるＭＥＰＩＴＨＥＴ＋’　ＩＩＴＬＶ−１の場合に似た血清学的反応性′をＩＴＹＰＥＣＯＭにいれるＨＴＬＶＩポイ：ｚ　ト＝）ＩＴＬＶ２ポイントノケース型を’Ｉ（Ｔ’と代えるＭＥＰＩＴＨＥＴ＋’　ＨＴＬＶ−Ｉ及び’Ｉｆ、Ｔ　Ｉ、Ｖ　−１１（７）　双方ニ匹敵スル反応性′　をＭＴＹＰＥＣＯＭにいれる）ＩＴＬＶ１ポイン）　＜ＨＴＬＶ２ポイント及ヒＨＴＬｖ２ホイント〉１のケース型を′２゛　と代えるＭＥＰＩＴ）ＩＥＴ＋’１（ＴＬＶ−１１！、：、相当する血清学的反応性’　ｔ−ＭＴＹＰＥＣＯＭにいれる１１ＴＬｖＩポイント＜１ＩＴＬＩ／２ポイントのケース型を′２？′と代えるＭＥｆ’１ＴＨＥＴ＋’１（ＴＬＶ−＋＋　（７）場合ｌニー　（Ｑ　ｔ：　血ａ　学的反応性’をＭＴＹＰＥＣＯＭにいれる最終ケースその他型を′Ｏａ′と代える ″血清学的反応性は類型化には弱すぎる′をＭＴＹＰＥＣＯＭにいれるＥＮＤＩＦＥｌｌ、５表示ＭＴＹＰＥＣＯＭ読取り代替物セットオンコンソール・セットオフ？　５ＴＲ（１，３）＋”　＋ＡＯＭＲ＋”　＋ＹＲ＋”　＋５ＴＲ（ＶＡＬ（ＬＡＢＮＯ）、５）÷”　＋ＭＴＹＰＥＣＯＭコンソール・セットオン代替物セットオフスキップＮＤＤＯＮＤＤＱ結果は図３で示されている。

４ケースにおいて、類型結果は“類型化できず”であった。これら血清のうち２つは最初ＨＴＬＶ抗体陰性と分類され、２つは最初弱いＨＴＬＶ−１反応性と類型化された。このため、ペプチド類型結果が既知又は推定的結果と明らかに異なったケースはなかった。これから判断して、我々の技術による血清類型化は偽類型結果に至らなかったが、但し少数の結果はカテゴリー上“類型化できず”又は “不定型のＨＴＬＶ”になった。

一連の試験結果の考察ＨＴＬＶタンパク質の免疫原性ＨＴＬＶ−１及び−ＩＩゲノムは核酸レベルで５０％類似である（６．１０）。

類似性はｅｎｖよりもｇａｇ”８大きい。しかしながら明白な類似性はｅｎヱでも存在する（１０）。長鎖型特異性配列は主にｅｎｖで存在する。

該２ウィルス種内のバリエーションは非常に少ない。これは一方の配列から取られたペプチドが多数の感染人で抗体を検出しうろことを意味するが、但しそれらの配列は免疫原性に富んでいる。ＨＴＬＶ抗原は慣用的血清学（１９，１７）及びモノクローナル抗体（８，２２，２７）の双方で研究されてきた。

ｇａｇの血清学的反応性：バ＝カー（Ｐｘｌｋｔｒ）　（２３）らはＨＴＬＶ−Ｉｐ１９のする重要なエピトープを含むことを最初に示した。我々がこの研究で用いたＨＴＬＶ−１及び− １１ペプチド（−１ＧＢ及び２ＧＢ）はバーカーが研究したペプチドに一部相当するが、但しそれらはもっと長い。我々はこの領域からの我々の２ペプチドを含む更に長い血清学的物質において、Ｃ末端に対する抗体がＨＴＬＶ−Ｉ及び何１陽性血清の双方で非常に多くかつ我々の２ペプチドの組合せが各ペプチド自体よりも良好な識別能を示すことを発見した。我々の更に長いペプチドはｐ１９の元のコンホメーションを更に良く再形成し、多数の血清学的技術で慣用的な固相に結合したままでそれを維持しうる更に良い可能性を有している。これは実際的方法で型識別分析を行う上の前提条件である。

我々はＨＴＬＶ−１及び−１１血清陽性ヒト双方の抗体と反応する他のいくつかの配列をＨＴＬＶ−Ｉのｇａｇ中において発見した（主に２ＧＦ、更に少ない程度でＩＧＡ及び２ＧＡ、データ示さず）。これらは全体的な血清学的ＨＴＬＶマーカーとして機能する。

ｅｎｖの血清学的反応性。

我々はｇｐ２１で進化的に保存された配列（ペプチドＩＥＣ，ＬＥＤ及びＩＥＥに相当する）が型共通血清学的ＨＴＬＶマーカーとして用いつることも発見した。我々は非常に保存された配列（ＩＥＤ）と反応する血清７例を発見したが、その配列は免疫抑制活性をおそらく有するネズミ白血病つィルスｐ１５Ｅ中の配列と非常に類似している。これはＨＴＬＶと関連する疾患の病因を理解する上での含意及び診断的含意を有しているのであろう（１５）。

ＨＴＬＶ−Ｉ及び−１１間の血清学的差異はｖｓｖ及びＨＴＬＶ間における擬型との中和試験が行われた場合に残留することが知られている（１０）。これはエンベロープに型特異性決定基が存在することを確証させる（１９．３０参照）。

我々は１つのこのような決定基を発見したが、ここでそれは外部エンベロープ糖タンパク質から得られるペプチドＬＥＡ及び２ＥＡで代表される。

我々のシリーズにおいて、ＨＴＬＶ−１陽性血清１５例中１０例及びＨＴＬＶ− １１陽性血清１０例中８例は２種のそれらと相同的な相対物と反応した。ヒト血清は同様の頻度でペプチドＬＥＡ内に含まれる更に短いＨＴＬＶ−■ペプチドと反応できることが報告された（２４）。

我々はペプチド対ＩＧＢ及び２ＧＢの場合のように、ペプチドＩＥＡ及び２ＥＡの組合せが最適型識別にとり要求されることを発見した。既知型の血清２５例中２１例において、２ペプチドの組合せが正確な型を示した。残り４例の血清は弱く反応しすぎたため、類型化できなかった。型下一致反応性はこの対で観察されなかった。

外廊エンベロープ糖タンパク質（ｇ　ｐ　５６）は直鎖及びコンホメーションエピトープあ双方を含むことがウシ白血病ウィルスから知られている（７）。それらの一部はＢＬｖの中和に関与している。このため我々が３種のｇｐ５６ペプチドで証明した抗体は中和ＨＴＬＶ抗体の検出にも間接的に有用となりつる。Ｃ末端ペプチド自体Ｂでさえも比較的多く反応した（既知ＨＴＬＶ陽性血陽性血清３５倒中６しかしながら、それは非常に特異的な型ではなかった。

我々の発見は外部糖タンパク質、最も可変的なｅｎｖタンパク質及びｌ！遣の最も可変的な部分の−っｐ１９ｍのＣ末端の型特異性にある。５ＴＬＶ−１陽性血清は主にＨＴＬＶ−Ｉ陽性血清のように反応した。しかしながら、多数のｅｎｖペプチドとの反応は比較的弱かった（１９．２９．３０参照）。異なる霊長類種からのこれら２ウィルス間における高度の類似性は、ペプチド血清学的レベルでも反映されるが（１２参照’）　、ＨＴＬＶ−■及びＨＴＬＶ　−Ｉ＋の共通祖先よりも新しい共通祖先であることを示す（２９）。

医学的問題上のＨＴＬＶ−Ｉ及び−１１，厳格な血清学的技術上の必要性ＨＴＬＶ−Ｉはたとえ感染人の最大頻度が南日本、西太平洋、カリブ諸島、アフリカ及び南イタリアで存在す１９ン。それは成人Ｔ細胞白血病（６，１９）及び熱帯痙性不全対麻痺（２１，２５）疾患の背後に控えた重要なファクターである。ＨＴＬＶ−１１はこれまでいくつかのケースの毛様細胞性白血病に関係している（６．１６．２０）。

ＨＴＬＶ−Ｉ及び川Ｉは双方とも比較的低い感染入墨の諸国でも徐々に大きな医学的問題となりつつあった。

双方とも血液から伝達でき、米国及び日本においてＨＴＬＶ−Ｉ抗体は献血でルーチンに分析される（３２）。

このため可能な限り信頼できる方法による血清学的スクリーニング結果の確認のために大きな必要性が生まれた。

ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−１１感染間を区別することも重要になってきた。しかしながら患者にとり２種の感染を区別する重要性はまだ不明である。双方とも重篤な疾患に関係している。ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−１１陽性患者で生じる疾患の程度及び型に重要な差異があると仮定することは妥当である。

米国において、最近驚くほど高度のＨＴＬＶ血清陽性が静脈内薬物乱用者でみられた（１４．２６）。これらの血清が類型化された場合、これら反応のほとんどはＨＴＬＶ−Ｉｌｌ、：基づくとわかツタ。ＨＴＬＶ−１１！［初非常にまれであると考えられた。そのウィルスが何に由来するかは不明である。更に英国（２８）及びイタリア（１１）では、双方の型のＨＴＬＶが静脈内薬物乱用者で存箕することが示された。

広域的使用にもかかわらず、ＨＴＬＶ血清学はＨＴＬＶ感染の実証及び類型化に関してなお不完全な手段である。初回陽性判定の大部分は総合分析で陰性になる。弱い及び不明確な反応性が多い。したがって血清学上無視できない数の偽陰性結果がたぶん存在するであろう（３）。しかしながら、初回陽性判定の確認に関していくつかの可能性が存在する。

ＨＴＬＶ感染の類型化に関して現在利用可能な技術は、類型化によるウィルス単離、ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−１１抗原によるウェスターンプロット、ポリアクリルアミドゲル電気泳動及び双方のウィルスの抗原による放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩ　ＰＡ）　、双方のウィルスの擬型による中和アッセイ並びに核酸増幅、しかる後可能であれば制限酵素分析、ハイブリッド形成又は配列決定からなる。ＨＴＬＶ−Ｉ抗原によるウェスターンプロットにおいて、ｐ１９におけるＨＴＬＶ−ＩＩとの交差反応はほとんどないことが多い−。ｔＰＡにおいて、型特異性反応は特によく研究できる。競合ＲＩＰＡにおいて、型特異性反応はｐ２４でも証明された。ＰＣＲ（ポリメラーゼ鎖反応、核酸増幅タイプ）は２ウィルス間の識別に関して非常に有望であるとわかったが、これまで患者の的多くの時間及び能力を要する。簡単、安価かつ迅速な試験が必要である。

合成ペプチドとの血清学的反応性パターンは個別的であることが多い（１５）。

したがって感度はいくつかの合成ペプチドからの結果が合わせられた場合に増加される。商業的試験において、ときどきペプチドを分析用ウェル内で直接ミックスできるが、これは各ペプチドによる質的関与が無視されることを意味する。各ペプチドの反応性を分析することにより、感度は特異性情報の損失なしに高度に保てる。上記コンピュータープログラムは原理を示している。我々は後でそのプログラムをやや修正したが、それによりやや良い型識別能を得た。そのプログラムは類型化が入手可能な情報から行えるかどうかを判断する。そうでないならば、これが指示される。

ＨＴＬＶ−１及びＨＴＬＶ−ＩＩの数が各々明らかに異ならない場合には、結果は“ＨＴＬＶ抗体証明。類型化不可能”として分類される。ある型のポイント数が他方のポイント数より少なくとも２倍高い場合には、その型が報告される。プログラムは容易に修正できる。新規ペプチドはそれらの全体的ＨＴＬｖ反応性及び型識別能がほぼ判明した場合に容易に加えることができる。重量ファクターはコントロールの反応性及び経験増加に応じて継続的ｊこ修正されねばならないであろう。このパターン認れらの原理はここでは詳細に議論されない。現実的理由から、我々は第三原理に従い主に作動するプログラムを選択した。

新規技術合成ペプチドのパネルの使用はＨＴＬＶに対する免疫応答を詳細に見抜け、ＨＴＬＶ感染の確認及び類型化のために他の技術を補足する。エンベロープ糖タンパク質遺伝子からのペプチドは特に良い結果を示した。エンベロープ糖タンパク質との反応性はウェスターンプロットで弱いことが多いが、我々のペプチド試験では強いことが多い。このためペプチド試験では真のＨＴＬＶ抗体活性の重要な基準であるエンベロープ（ｅ　ｎ　ｖ）及び内部既知又は推定ＨＴ、ＬＶ型の血清３６例中３２例において、我々は血清がＨＴＬＶ−１又はＨＴＬＶ−１１陽性であるか否かを正確に決定できた。矛盾する血清はすべて非常に弱い反応を示した。

更に４種のペプチド前記合成及び試験されたペプチドに加えて、我々は同様の技術で下記４種のペプチドを合成した：予備結果テハ、ＨＴＬＶ−Ｉ及び−］Ｉのｐ２４から得られるこれらのペプチドがＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−１１抗体を検出できかつそれらが本発明による免疫アッセイで型特異的に反応することを支持する。これらペプチドの区別しうる特徴は、それらの鎖長のせいでそれらが更に短いペプチドよりもＨＴＬＶ特異性エピトープとよく似ていることである。

文献：１゜Ａｓｈｅｒ　ＤＭ、Ｇｏａｄｓｍｉｊ　Ｊ、、Ｐｏｍｅｒｏ７　ＫＬ、Ｇａｔｒｖｔｏ　ＲＭ。

Ｂａｋｋｅｒ　Ｍ、Ｏｎｏ　ＳＧ、Ｅｌｌｉｏｊｔ　Ｎ、Ｈａ＋＋ｉｓ　Ｋ、Ａｓｋｉｎｇ　Ｈ。

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Ｌ　Ｂｌａｔｔｎａｒ　ＷＡ、Ｎｏｍｎ＋ａ＾、Ｃ１ａｒｋ　ＪＷ、Ｈａ　ＧＹＦ、Ｎａｋａ。

Ｙ、ＧＩＩＩＯＲ，Ｒｏｂｅｒｔ−Ｇｕｔｏｆｌ　Ｍ　、　Ｍｏｄｅｓ　ｏｌ　！ｒｘｎｓｍｉｓｓｉｏｎｘｎｄ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｖｉｒａｌ　１ａｊｅｎｃ７　ｆｒｏｍ　５ｔｕｄｉｅｓ　ｏｆＨｕｍａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌ　１７ｍｐｈｏｊｒｏｐｉｃ　ｖｉｒｕｓ　ｔ７ｐｅ　Ｉ　ｉｎ　Ｊｘｐａｎｅｓｅｍｉｇ＋ａｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｈａｗａｉｉ　（ハワイの日本人移民におけるヒト向Ｔ細胞すンパ球つィルスＩ型の研究からウィルス潜伏に関する伝達様式及び証拠）、　Ｐｒｏｃ、　Ｈａ目。

Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　８３：４８９５−４８９８（１９８６）。

４、　Ｂｌｏｍｂｅｒｇ　Ｊ、Ｎｔｌｓｔｏｎ　１．＾ｎｄｅ’＋５ｓｏｎ　ＭｏＶｉｒａｌａｎｔｉｂｏｄ７　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｓ７ｓｌｅｍ　ｔｈａｔ　ｕｓｅｓ　ａ　ｓｊａｎｄａｒｄｉｕｄｓｉｎｇｌｅ　ｄｉｌａｔｉｏｎ　ｉｍａ＋ｕｎｏｇｌｏｂｎｌｉｎ　Ｇ　ｇｎｏｍｅｉｍｍｕｎｏｘｓｓａ７　ｗｉｔｈ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ａ＋ｕｉｇｅｎｓ　（多数抗原による標準化単一希釈免疫グロブリンＧ酵素免疫アッセイを用いたウィルス抗体スクリーニング系）１Ｊ、　ＣＩ　ｉｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔ、　、　１７：１０８１−１０９１　（１９８３）。

５−　Ｂｌｏｍｂｅｒｇ　Ｊ、Ｎｉ１ｓｓｏｎ　ＩＪｉｅｌｌｅｎ　ＬｃｌＨＴＬＶ　ｉｎＳｗｅｄｅｎ：Ａｎｌｉｂｏｄ７　ｔｏ　ＨＴＬＶ　ｌ　ｉｎｌｉｇｅｎ　ｉｎ　！ｘｐｅｒｉｍｅｎｔ１１ｍｏｎｋｃ７ｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｃａｒｅｔａｋｅｒｓ（スウェーデンにおけるＨＴＬＶ　：実験サル及びそれらの管理人におけるＨＴＬｖ−ｉ抗原に対する抗体）、　５ｃａｎｄ、　Ｌ　Ｉｎｆｅｃｔ、　Ｄｉｓ、　、　１７：ｌ３５−１３９　（１９８５）　。

５、Ｂｌｏｍｂｅｒｇ　Ｊｏ　旧’ＬＶ−１−ｐｒｏｌｏｊ７ｐ　ｉ　ｅｎ　ｙａｘａｎｄｅｇｒｏｐｐ　ａｔ　！ｕｋｅｍｏｇｅｎｇ　ｖｉｒｕｓ（白血病ウィルスのＨＴＬＶ　−Ｉ）、Ｌａｋａｒ目ｄｎｉｎｇｅｎ、　８６：２２９４− ２２９５　（１９８９）。

７、Ｂｒｕｃｋ　Ｃ，Ｐｏ１ｉｅｔｅｌｌｅ　Ｄ、Ｂｕｒｎ７　Ａ、２ａｖａｄａ　Ｊ　０Ｔｏｐｏｇｒａｐｈｉｃａｌ　ａｎｇ１７ｔｉｓ　ｂ７　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｃｄｉｇｓ　ｏｌＢＬＶ−ｇｐ５１　ｅｐｉｔｏｐｅｓ　ｉｎｗｏｌｖｅｄ　ｉｎ幀ｒｘｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　（ウィルス機能に関与するＢＬＶ−ｇｐ５１エピトープのモノクローナル抗体による地形的分析）、　Ｖｉｒｏ１６ｇｙ、　１２２・３５３−３５２　’（１９８２）　。

８、　Ｃｏｇｎｉａａｘ　Ｊ、ｊａｃｑｕ＋＋ｍａｉｎ　ＰＣｏＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｌｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ＨＴＬＶ−１ｐｒ＋＋！ｅｉｎｓ＋ｅｃｏｇｎｉｓｉｎｇ　５ｕｒｆａｃｅ　ｅｐ目ａｐｅｓ　ｏｆ’　ｌｉｗｅ　１ｎｆｅｃｔｅｄｃｅｌｌｓ　（生感染細胞の表面エピトープを認識するＨＴＬＶ−１タンパク質に対するモノクローナル抗体の産生）。

Ｌｅｕｋｅｍｉａ　Ｒｃｓｅｘ＋ｃｈ、９：１１１７−１１２６（１９８５）。

９、　Ｃ１ａｐｈａｌＩＩＰ、Ｎａｇｙ　Ｋ、Ｗｅｉｓｓ　ＲＡ　ｏＰｓｅｏｄｏｔｙｐｅｓ　ｏ［ｈ＋ｖａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｗｉｒＩＩｓ　ｔｙｐｅｓ　１　ａｎｄ　２：Ｎｅｌｒｇｌｉｚｘｌｉｏｎ　ｂｙ　ｐｘｔｔｅｎｌｓ’５ｅｒａ　（ヒトＴ細胞白血病ウィルス１及び２型の擬型：患者血清による中和）、　Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　Ｕ！ｉＡ、　８１：３Ｑ８３−３０８６　（１９８４）。

１０、　Ｃｈｅｎ　ＩＳＹ、Ｍｃｌａｕｇｈｌｉｎ　Ｊ、Ｇａｇｓｏｎ　ＩＣ，Ｃｌ１ｒｋ　ＳＣ。

Ｇｏｌｄｅ　ＤＷ６Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｈａｒａｃｌｅ＋１２ａｔｉｏｎ　ｏｌ　ｇｅｎｏｍｅ　ｏｆａ　ｎｏｖｅｌ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ（新規ヒトＴ細胞白血病ウィルスのゲノムの分子特徴化）、　Ｎａｔｕｒｅ、　３０５：５Ｇ２−５０５　（１９１１３）。

１１、　ｄｅ　Ｒｏｓｓｉ　Ａ、Ｂｏｒｔｏｌｏｔｌｉ　Ｆ、Ｃａｄｒｏｂｂｉ　Ｐ、Ｃｈｉｅｃｏ−Ｂｉａｎｅｂｉ　Ｌ　ｏＴｔｅｎｄｓ　ｏｆ　ＨＴＬＶ− １ｇｎｄ　ＨＩＶ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎｓ　ｉｎｄｒｕｇ　１ｄｄｉｃｔｓ（薬物常用者におけるＨＴＬ、Ｖ−Ｉ及びＨＩＶ感染の傾向）、　Ｅｏｔ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｌ１ｎ。０ｎｃｏ１．、２４＋２７９−２８０　（１９１１０）　。

１２、　Ｄｒａｃｏｐｏｌｉ　ＮＣ，Ｔｕｒｎｅ＋　ＴＲ，Ｅｌｓｅ　ＪＧ、Ｊｏｌ１７　ＣＪ。

Ａｎｔｈｏｎ７　Ｒ，Ｇａ１ｌｏ　ＲＣ，！ｉａｘｉｎｇｅｒ　ＷＣｃｌＳＴＬＶ−１１ｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎ　ｆｃｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｌ　Ｅ＋ｓｔ　Ａｆｔｉｃａｎ　ｗｅｒｖｅｔｍｏｎｋｅ７ｓ（Ｃｅｒｃｏｐｉｔｂｅｃｕｓ　ａｅｊｂｉｏｐｓ）　［東アフリカオナガザル（サーコピテカス・エチオプス）の野生群における５ＴＬＶ−Ｉ抗体）　、　Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ’、　３８：５２３−５２９　（１９８６）。

１３、　Ｇａ１ｌｏ　ＲＣ，Ｋｚ１丁！ｎａｒａｍａｎ　ＶＳ、Ｓｘｒｎｇａｄｈａｒａｎ　ＭＧ。

５ｌｉｓｋｉ＾、Ｖｏｎｄｅｔｈｅｉｄ　ＥＣ，Ｍｘｅｄａ　Ｍ、Ｎａｋａｏ　Ｙ、Ｙａｍａｄａ　Ｋ。

ｌｊｏ　Ｙ、　Ｇｕｔｅｎｓｏｂｎ　Ｎ、　Ｍｏｒｐｈ７　Ｓ、　Ｂｏｎｎ　Ｊｒ、　ＰＡ、　Ｃａｔｏｖｓｋｙ　Ｄ。

Ｇ＋ｅａｖｅｓ　ＭＦ、　Ｂｌａ７ｎｅｙ　ＤＷ、　ＢｌａＨｎｅｒ　ＷＡ、　ＪｘｒｒｅＨＷＦＨ，ｘｕｔＨｘｕｇｅｎ　Ｈ，Ｓｅｌｉｇｍａｎ＋＋　Ｍ、　Ｂ＋ｏｕｅｌ　ＪＣ，ＨａＹｎｅｓ　ＢＦ、　Ｊｅｇａｓｏｔｈ７ＢＹ、　Ｊａｌｆｅ　ＥＳ、　Ｃｏｇｓｍａｎ　Ｉ、　Ｂｉｏｄｅｒ　Ｓ、　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｒ１，Ｇｏｌｄｅ　ＤＷ。

Ｒｏｂｅｒｔ−Ｇｕ＋ｏｆｌ　Ｍ　０＾５ｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　１？＋１！−ＣｒｅＨｏｖｉｆｎｓ　ｗｉｔｈ　ａ　５ｕｂｓｅｔ　ｏｆ　ａｄｏ目Ｔ−ｃｅｌｌ　ｃａｎｃｅｒｓ（ヒトＣ型レトロウィルスと成人Ｔ細胞癌のサブセットとの関係）、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５１．４３：３８９２ −３８９９　（１９８３３゜１４、　Ｌａ５ｏｎ　ＩＭ、關ｃＤｏｕｇａｌ　Ｓ、Ｃａｂｒａｄｉｌｌｘ　Ｃ。

ｐｒｏｄＩＩｃｔ　ｔｅｃｉｐｉｅｎｔｓ　にューヨーク市血液製剤受容者におけるヒトＴ細胞白血病ウィルス（ＨＴＬＶ−１）ｐ２４抗体）、　Ａｍｅｔ、　Ｊ、　Ｈｅｍａｔｏｌｌ、　２０：１２９−１３７＜１９８５）。

１５、　Ｋｌａｓｓｅ　ＰＪ、Ｐｉｐｋｏｒｎ　Ｒ，Ｂｌｏｍｂｅｔｇ　１ｏＰｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ａ　ｐｕｌａｊｉｖｅ１７　ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｔｅｓｓｉｖｅ　ｐａｎｏｆ　ｂｕｍａｎ　’ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃ７　ｖｉｒｕｓ（）ＩＩＶ）　ｅｎｙｅｌｏｐｅｇ１７ｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｐ４１　ｉｓ　ｓｌｒｏｎｇｌｌ　ａｓｓａｓｉｉｔ！ｄ　ｖ目ｈｈｅａｌｔｈ　ａｍｏｎｇ　ＨＩＶ−ｐｏｓｉｌｉｗｅ　５ｕｂｊ！ｃｔｓ（ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩ　Ｖ）エンベロープ糖タンパク質ｇｐ　４１ノ推定免疫抑制部分に対する抗体の存在はＨＩＶ陽性者における健康と強く関係している）、　Ｐｒｏｃ、　Ｎｘｔｌ、Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ。

ＵＳＡ、　８５：５２２５−５２２９（１９８８）。

１６、１［ａ１７ａｎａｒａｍａｎ　ＶＳ、Ｓａｒｎｇａｄｈａｒａｎ　ＭＧ、Ｒｏｂｅｒｔ−Ｇｕｒｏｆｌ　Ｍ、Ｍｉ７ｏｓｂｉ　Ｉ、　Ｂｌａｌｎｅ７　Ｄ、Ｇｏｌｄｅ　Ｄ、Ｇ！１１１１　ＲＣ０Ａｎｃｖ　５ａｂｔ７ｐｅ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌ　１ｅｕｋｅＩｌｌｉａ　ｗｉｒｅｓ（ＨＴＬＶ−１１）ａｓｓｏｃｉｊｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　Ｔ−ｃｅｌｌ　ｙａ＋１ａｎｔ　ｏｆ　ｂａｉＴ７−ｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａ　（毛様細胞白血病のＴ細胞変異体と関連したヒトＴ細胞白血病ウィルス（ＨＴＬＶ−１１）の新規サブタイプ）、　５ｃｉｅｎｃｅ、　２１８：５７１−５７３　（１９８２）。

１６、　Ｋｘｌｙｌｎａｒａｍａｎ　ＶＳ、　Ｓａｒｎｇａｄｈａｒａｎ　ＭＧ、　Ｐｏｉｃｓｗ　８゜Ｒｎ５ｃｅｔｌｉ　ＦＷ、Ｇａ１ｌｏ　ＲＣｏｌｍｍＩＩｎｏｌｏｇｔｅａｌ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆａ　ｔ７ｐｅ　Ｃｒｅｌ＋ｕｉ＋ｕｓ　ｉ＋ｏｌｘｊｅｄ　１ｒｏＩＩｌｅｎｌｔｖｒｅｄ　ｂｎｍａｎＴ −１７ｍｐｂｏｍｘ　ｃｅ…ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｔｏ　ｏｔｈｅｒ　ｍａｍｍ山ｘｎ山型ｎＣ型レトロウィルス学的性質及び他の哺乳類レトロウィルスとの比較）、　Ｉ、　Ｖｉ　ｔｏｌ、　、　３８：９０６−９１５　（１９８１）。

ＩＬ　Ｌｅｅ　Ｒ，５ｖａｎｓｏｎ　Ｐ、　５ｂｏｔｔｙ　ＶＳ、　１ａｃｋ　Ｉｋ。

ＲｏｇｅｎｂｔｇＮ　１０．Ｃｈｅｎ　Ｉｓ　０　旧ｇｈｔ　ｒａｔｅ　ｏｆ　）ＩＴＬＶ−Ｊｌｉｎｆｅｃｔｔｏｎ　ｉｎ　５ｅｒｏｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｉ、ｖ、　ｄｒｕｇ　ａｂｕｓｅｒｓ　ｉｎ　ＮｅｗＯｒｌｅｘｎｓ　にューオリンズの血清陽性ｉ、マ、薬物乱用者における高いＨＴＬＶ−１１感染率）、　５ｃｉｅｎｃｅ、　２！ｌ＋４７１−４７５（１９８９１゜１８、　Ｌｅｅ　ＴＨ，Ｃｏｌｉｇａｎ　ＩＥ、ＭｃＬａｎｅ　ＭＦ、Ｓｏｄ＋ｏｓｋｉ　ＪＧ。

Ｐａｐｏｖｉｅ　Ｍ、Ｗｏｎｇ−５ｔａａｌ　Ｆ、Ｇａ１ｌｏ　ＲＣ，）ｌａｓｅｌ目ｎｅ　Ｗ、　Ｅｓｓｔｘｇｅｎｅ　ｐｔｏｄｕｃｔｓ　ｏｌ　ｔｌｐｅ　Ｉ　ｘｎｄ　ＩＩ　ｈｕａｓｎ　Ｔ−ｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ　（Ｉ及び］］型ヒトＴ細胞白血病ウィルつのエンベロープ遺伝子産物間における血清学的交差反応性１．　Ｐｒｏｃ、　Ｎａ１１．＾ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＬＩＳＡ、　［ｌｆニア５７９−７５１ｔ３　（ｔ９１ｔ４）。

１９、　Ｍｘｎｘａｒｉ　Ｖ、Ｇｒａｄｉｌｏｎｅ　Ａ、Ｂａｒｉｌｌａｒｉ　Ｇ、２ａｎｉ　Ｍ。

Ｃｏ１１ａＮｉ　Ｅ、Ｐａｎｄｏｌ［ｉ−Ｆ、Ｄｅ　Ｒｏｓｓｉ　Ｇ、Ｌｉ５ｏ　Ｖ、　１ｌａｂｂｏ　Ｐ。

Ｒａｂ！ｔｊ−Ｇｕｒａｌｆ　Ｍ、Ｆ＋ａｔｉ　Ｌ　０ＨＴＬＶ−１ｉｓ　ｅｎｄｅｍｉｃ　１ｎｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｉｔａｌｙ：Ｄ！ｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　１ｉｔｓｌ　１ｎｆｅｃ目ｏｎｓｃｌｕｓｔｅｒ　ｉｎ　ａ　ｗｈＮｅ　ｐｏｐＩＩｌａｔｉｏｎ　（ＨＴＬＶ　−１は南イタリアで特有である・白人における最初の感染群の検出）、　ＩＩｕ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ、　３６：５５７−５５９　（１９８５）。

２０、０ｓａＩ！ｌｅ　Ｍ、Ｍａｊｓａｍｏｔｏ　Ｍ、Ｕｓｉｋｕ　Ｋ、　Ｉｒｕ＋ｏ　Ｓ、　！ｊｉｅｈｉｍ７ｅｌｏｐａｔｂｙ　ａｓｓｏｃｉａＨｄ　ｖｉｌｈ　ｅｌ！ｖａｔｅｄ　＠ｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔ。

ｂｏｍａｎ　Ｔ−１１ｍｐｈｏｔｒａｐｉｃ　ｙｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　ｌ　ａｎｄ　ａｄｕｌｔ　Ｔ−ｃｅ−１１１ｅｕｋｅｍｉａ−［ｉｋｅ　ｃｅｌｌｓ　（ヒト向Ｔリンパ球つィルスＩ型及び成人Ｔ細胞白血病様細胞に対する抗体増加を伴う慢性進行性ミニロバシー）、　Ａｎｎ、　Ｎｅｕｒａｌ、　、　２１：１１７−１２２　（１９８７）。

２１、　Ｐａ１ｋｅｒ　Ｔｌ、　Ｔａｎｎｅｒ　ＭＥ、　５ｃｅａｒｃｅ　ＲＭ、　５ｔｒｅｉｌｅｉｎ　ＲＤ。

Ｃ１ｕｋ　ＭＥ、Ｈａ７ｎｅｓ　ＢＦｏＭａｐｐｉｎｇ　ｏ）　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ　ｒｅｇｉｏｎｓｏｆ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−Ｃ！＋１　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ　ｔ７ｐｅ　Ｉ（ＨＴＬＹ−１）　ｇｐ４６！ａｄ　ｇｐ２ｔ　ｅｎｖｅｌｏｐｅ　ｇｌｌｃｏｐｒｏｆ！ｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ｅｎｖ−ｅｎｃｏｄｅｄｓ７ｎｌｂｅロＣｐｅｐ目ｄｅｓ　ａｎｄ　！　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄ７　ｔｏ　ｇｐ４６（ヒトＴ細胞白血病つィルスＩ型（ＨＴＬＶ− Ｉ）ｇｐ４６及びｇｐ２１エンベロープ糖タンパク質とｅｎｖコード合成ペプチドの免疫原性領域の地図化並びにｇｐ４６に対するモノクローナル抗体）、　Ｊ、　Ｉｍｎａｎｏｌ、。

１４２・！１７１−９７８（１９８９）。

２２、　Ｐａ１ｋｅ＋　ＴＪ、５ｅｅａｒｃｅ　ＲＭ、Ｃｏｐｓｌｉｎｄ　ＴＤ、０ｒｏｓｚｌａｎ　Ｓ。

Ｈａ７ｎｅｓ　ＢＦ　ａ　Ｃ−ｔｅｒｍｉｎａｌ　ｒｅｇｉｏｎ　ｏｌ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−ｃｅｌ１１７ａ＋ｐｈｏｊｒｏｐｉｃ　ｖｉｒｕｓ　１７ｐｅ　Ｉ（ＨＴＬＶ−Ｉ）　ｐ１９　ｃｏｒｅ　ｐｒｏｔｅｉｎｉｓ　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ａｎｄ　ｃｏｎｔａｉｎｓ　ａｎ　ＨＴＬＶ−１−ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｅｐｉｌｏｐｅ　（ヒト向Ｔ細胞リンパ球ウィル、ｌ型（ＨＴＬＶ−Ｉ）ｐ１９コアタンパク質のＣ末端領域はヒトに免疫原性であり、ＨＴＬＶ−Ｉ特異性エピトープ０ｒｏｓｚｌａｎ　Ｓ、　Ｐａｐｏｖｉｅ　Ｍ、Ｈａ７ｎｅｓ　ＢＦ、　Ｍａｎｏｃｌｏｎａｌｘｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｗｉｔｈ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌ　ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐ’１ｃｖｉｒｕ　Ｉ（ＨＴＬＶ−１）　ｐ１９１ｎｆｅｒｎａｌ　ｃｕｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ：Ｃｒｏｓｓ＋ｅａｃｔｉｖ口１　ｗＮｈ　ｎｏｒＩＩｌａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｔｕｕｉａｌｒｅａｃｔｉｖｉｊ７　ｗ目ｈ　）ＩＴＬＶ− Ｉ　（Ｉｐｅ　Ｉ　ａｎｄ　ＩＩ　（ヒト向Ｔ細胞すンパ球つィルスＩ型（ＨＴＬＶ−Ｉ）　ｐ１９内部コアタンパク質と反応性のモノクローナル抗体：正常組織との交差反応性並びにＨＴＬＶ−Ｉ及びＩＩとの異なる反応性）、Ｊ、Ｉｍｎａｎｏｌ、、１３５：２４７−２５３（１９８５）。

２４、　Ｒｏｂｅ「ｔ−Ｇａｒｏｌｌ　１４．Ｗｅｉｓｓ　ＳＨ，Ｇｉ＋ｏｎ　Ｊ＾、　ＪｅｎｎｉｎｇｓＡＭ、　Ｃｉｎｅｂｕｒｇ　）ＩＭ、　ｕａｒｇｏｌｉｇ　Ｔｅｌ、　Ｂｌｘｊ’ｊｎｅｒ　ＷＡ、　Ｇａ１ｌｏＲＣ。

Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ＨＴＬＶ−１，− １１ａｎｄ　−ＩＩＩ　１ｎｉｎｌｒａｖｅｎｏｕｓ　ｄｒｕｇ　ａｂｕｓｅｒｓ　ｆｒｏｍ　ａｎ　ＡＩＤＳ　ｅｎｄｅｍｉｃｒ！ｇｉｏｎ　（エイズ特有地域の静脈内薬物乱用者におけるＨＴＬＶ−１，ＩＩ及び■に対する抗体の保有）、　ＪＡＪＪＡ、　２５５　：３１３３−３１３７（１！１８６１゜２５−　Ｒｏｂ！ｒｔ−Ｇｕｒｏ［Ｍ、Ｇａ１ｌｏ　ＲＣ，Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　ｏｌａｎ　ｅｔｉｏｌａｇｉｃ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　Ｔ　ｃａｌｌｌｅｕｋｅｍｉａ／ｌｙｍｐｂｏｍａ　ｖｉｒｕｓ（ＨＴＬＶ）　ａｎｄ　ａｄｕｌｔ　Ｔ−ｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａ　（ヒトＴ細胞白血病／リンパ腫ウィルス（ＨＴＬＶ）と成人Ｔ細胞白血病との病因関係の確立）。

Ｂｔｕ、　、　４７：１−１２　（１９８３）。

ｏｆ　ＨＴＬＶ−１（ｐ２４．ｐ１９　ａｎｄ　ｐ１５）　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　１ｎｌｒａｃｅｌｌｕｌａｒ１ｏｃａｌｉ！ａ目ｏｎｓ、ａｓ　ｄｅ［１ｎｅｄ　ｂｙ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄ’１ｅｓ（モノクローナル抗体で規定されるような、ＨＴＬＶ−■の３種のコアタンパク質（ｐ２４、ｐ１９及びｐ１５）と関連した抗原及びそれらの細胞内位置）、Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｔ。

３７・３５−４２　（１９８６）２７、　Ｔｅｄｄｅｒ　Ｒ３，５ｎａｎｓｏｎ　ＤＣ，Ｊｅｆｆ＋ｉｅｇ　ＤＪ、　Ｃｂｅｉｎｇｓｏｎｇ−Ｐｏｐｏｖ　Ｒ，Ｃｌａｐｈａｍ　Ｐ、Ｄａｌｇｌａｉｃｈ　Ａ、Ｎａｇｙ　Ｋ、Ｗｅｉｓｓ　ＲＡ　０Ｌｏｗ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＵにｏｆＨＴＬＶ−１ａｎｄ　ＨＴＬＶ−１ｆ■ｆｅｃｔＩｏｎ　ｉｒ＋　５ｕｂｊｅｃ＋ｓ　ｗｉｔｈ　ＡＩＤＳ、ｗｉｔｈ　ｅｘ（ｅｎｄｅｄ１７ｍｐｈａｄｃ＋＋＋＋ｐａｔｂｙ、ａｎｄ　ａｔ　ｒｉｉｋ　ｏｆ ’ＡＩＤＳ　（英国におけるエイズ、広範性リンパ節症及びエイズ危険性のある者の低いＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−ＩＩ感染率）、　Ｌａｎｃｅｔ、　ｉｉ：１２５−１２８　（１９８４）。

Ｈ−Ｔｏ！ａｗａ　Ｈ，Ａｎｄｏｈ　Ｓ、Ｔａｋａｙａｍａ　Ｙ、Ｔａｎａｋａ　Ｙ、（、ｅｅ　Ｂ。

ＮａｋａｇＩｎｒａ　Ｈ，）ｌｘ７ａｍｉ　Ｍ、Ｈｉｎｕｍａ　ＹｏＳｐｅｃｉｅｓ−ｄｅｐｅｎｄａｎｔａｎｔｉｇｅｎｉｃｉｔ７　ａｔ　ｔｈｅ　３４−ｋＤａ　ｇ１７ｃｏｐｒｏｌｅｉｎ　ｆｏｎｎｄ　ｏｎｔｂｅ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ａｔ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｐ＋ｉｍｘｔｅ　１７ｍｐｈｏｃ７ｔｅｓｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ｈｕｍａｎ　Ｔ−ｃ！ｌｌ　ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ　ｊ７ｐｅ１（ＨＴＬＶ−１）　ａｎｄ　５１ｍ１ａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌ　Ｉｅｕｋ！ｍｉａ　ｖｉｒｕｓ（ＳＴＬＶ−１１（ヒトＴ細胞白血病つィルスＩ型（ＨＴＬＶ−Ｉ）及びサルＴ細胞白血病ウィルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）で形質転換され −た様々な霊長類リンパ球の膜で見つけられた３４２３１−２３８　（１９８８）。

２９、　Ｗｅｉｓｓ　Ｒ＾、Ｃｌａｐｈａｍ　Ｐ、ＮａｇＹＫ、Ｈｏ５ｈｉｎｏ　ＨｏＥｎｖｅｌｏｐｅ　ｐｒｏｐｅｔｔｉｅｓ　ｏｆ　ｈｒｉｍａｎ　Ｔ−ｃｅｌｌ　ｌｅＵｋｅｍｉａ　ｖｉｒｕｓ（ヒトＴ細胞白血病ウィルスのエンベロープ性質）、Ｃｕ＋ｒ。

Ｔｏｐ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　１ｍｍｕｎａ１．　、１１５：２３５−２４６　（１９８５）。

３０、　Ｗｈｉｔｅ　ＰＭｏＣｏｍｐｘｒｉｓａｎ　ｏｆ　ａｓｓａ７ｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉｂｏｄ７ｔｏ　ＨＴＬＹ−１（ＨＴＬＶ　−Ｉ　ｌ：対する抗体に関しタアッセイの比較）、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｐａ１ｈｏ１．　、４１ニア００−７０２　（１９８８）。

３１、Ｗｉｌｌｉａｍｓ　ＡＥ、Ｆａｎｇ　ＴＣ，Ｓｌａｍｏｎ　ＤＪ、Ｐｏ１ｅｓｚ　ＢＪ。

５ａｎｄｌｅ＋　ＧＳ、Ｄａｒｒ　ＩＩ　Ｆ、Ｓｈｕｌｍａｎ　Ｇ、ＭｃＧｏｖａｎ　Ｅｌ、ＤｏｕｇｌａｓＤＫ、　Ｂｏｗｍａｎ　Ｒ１，Ｐｅｅｔｏｍ　Ｆ、　Ｋｌｅｉｎｍａｎ　ＳＨ，Ｌｅｎｅｓ　Ｂ、　Ｄｏｄｄ　ＲＹ　０Ｓｅｒｏｐｒｅｖａｌｓｎｃｅ　ａｎｄ　ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｏｒｔｅｌａｊｅｓ　ｏｆＨＴＩ４−１１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ＵＳ　ｂｌｏｏｄ　ｄｏｎｏｒｓ　（米国血液ドナーにおけるＨＴＬＶ−１感染の血清頻度及び疫学的相関）、　５ｃｉｅｎｃｅ、　２４［１：５４３−６４６　（１９８８）ΔＡ４５０　１ＧＢり ΔＡ４５０　１ＥＡプ国際調査報告１．ｌｌｌ−いａｌ１４１ｍ＋ｍ１ｌａ　ＰＣＴ／ＳＥ　９０１００１３９

Claims

【特許請求の範囲】

１．ＨＴＬＶ−Ｉ感染から生じる抗体を含む、ＨＴＬＶ−ＩＩ感染から生じる抗体を含む又は関連レトロウイルス感染から生じる抗体を含むヒト又は他の霊長類からの血清又は他の体液のサンプルにおいて特異的抗体間を識別する方法であって、分析されるサンプルが少なくとも４種の免疫アッセイに付され、各々で下記グループａ）〜ｄ）：ａ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−Ｉｇａｇの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｂ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−ＩＩｇａｇの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｃ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−Ｉｅｎｖの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｄ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−ＩＩｅｎｖの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；から選択される異なる診断抗原を用いるが、但しグループａ）〜ｄ）の各々から少なくとも１種のペプチドが選択され、更にＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−ＩＩの少なくとも一部重複する配列に相当する少なくとも一対のペプチドがグループａ）＋ｂ）及びｃ−）＋ｄ）の各々から選択され、しかも前記少なくとも４種の免疫アッセイでサンプルの抗体の分析される異なる結合強度が一方の特異的レトロウイルス感染から生じる抗体と他方の特異的レトロウイルス感染から生じる抗体とを識別するために用いられることを特徴とする方法。
２．診断抗原が下記ペプチド：ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｄ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｄ）【配列があります】から選択される、請求項１に記載の方法。
３．少なくとも下記ペプチド：ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｄ）【配列があります】が選択される、請求項２に記載の方法。
４．分析されるサンプルが少なくとも８種の免疫アッセイに付され、結合強度の分析パターンがコンピュータープログラムで処理される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
５．少なくとも１種の選択されたペプチドが不活性な可溶性又は不溶性キャリアに付着される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
６．各々が抗原構造を含むＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ又は関連レトロウイルスの配列に相当しかつ下記配列：【配列があります】から選択される少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含むことを特徴とするペプチド。
７．ヒト又は他の霊長類からの血清又は他の体液のサンプルにおいてＨＴＬＶ− Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ又は関連レトロウイルスとの感染から生じる抗体を検出する方法であって、上記サンプルが診断抗原として請求項６に記載された少なくとも１種のペプチドを用いた免疫アッセイに付されることを特徴とする方法。
８．ＨＴＬＶ−Ｉ感染から生じる抗体を含む、ＨＴＬＶ−ＩＩ感染から生じる抗体を含む又は関連レトロウイルス感染から生じる抗体を含むヒト又は他の霊長類からの血清又は他の体液のサンプル中における特異的抗体間の識別のための免疫アッセイキットであって、１記グループａ）〜ｄ）：ａ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−Ｉｇａｇの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｂ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−ＩＩｇａｇの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｃ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−Ｉｅｎｖの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；ｄ）抗原構造含有ＨＴＬＶ−ＩＩｅｎｖの配列に相当する少なくとも１７のアミノ酸残基の配列を含んだペプチド；から選択される少なくとも４種のペプチドを含むが、但しグループａ）〜ｄ）の各々から少なくとも１種のペプチドを含み、更にグループａ）＋ｂ）及びｃ）＋ｄ）の各々からＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−ＩＩの少なくとも一部重複する配列に相当する少なくとも一対のペプチドを含むことを特徴とする免疫アッセイキット。
９．下記ペプチド：（ａ）【配列があります】（ｂ）【配列があります】（ａ）【配列があります】（ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ａ）【配列があります】ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｄ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｄ）【配列があります】から選択される少なくとも４種のペプチドを含む、請求項８記載の免疫アッセイキット。
１０．少なくとも下記ペプチド：ａ）【配列があります】ｂ）【配列があります】ｃ）【配列があります】ｄ）【配列があります】を含む、請求項９記載の免疫アッセイキット。