JPH04506217A - 免疫結合体による感染症の検出と治療 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 免疫　合体による感染症の検出と治療 発明の背景 本発明は、病原体または病原体関連抗原の１つ以上の接近可能なエピトープに特 異的に結合する抗体結合体（ｃｏｎｉａｇ［ｅ）を標的に向ける（＋ｇＢｅｊ） ベヒクルとして使用することにより、診断薬及び／または治療薬を病原体感染の 病巣に向ける試薬−及び方法に関する。

従来、病原体に対する薬物療法では、病原体が体内のどこに潜伏していても、病 原体に対して毒性な薬物血中濃度を得るために薬剤を全身投与する。すなわち、 感染部位で適当な薬剤濃度を得るためには一定の血中濃度が必要である。このた め、大量投与が必要となり、また、このような薬剤の多くは一般に細胞毒性作用 を持つため患者に許容されない副作用を与えることなく所望の毒性効果を得るこ とはできないことが多い。

感染性生物に対するマウスモノクローナル抗体（ＭＡｂｓ）の開発や説明につい ての総説が数多く出されている（１例えば、Ｍ、Ｃ，Ｈｉ＋＋ｉ＋　ら、Ｉｎｄ ｉａｎ　１．　［’ｅｄｉｉ＋ｒ、、５４：４８１−４８８．　１９８７；Ｓ。

Ｃｏｈｅ＋＋、　Ｂａ１ｔ、　Ｍｓｄ、Ｂｕｌｌ、、４０：２９１−２９６．　 １９８４；　Ｒ，Ａ、　Ｐｏ１ｉｎ。

Ｅａｒ　１．　Ｃｌ１ｎ、１ｌｉｃ＋ｏｂｉｏ１．、　３：３８７−３９８．　 １９８４；　Ｒ，Ｃ，Ｎｏｖｉｎｓｋｉら、５ｃｔｅｆｉｃｅ、２１９：６３７ −６４４．　１９８３；　Ｐｇｒｔ　Ｖ、Ｍｏａｏｃｌｏｎ＊１ｔｎｔｉｂｏｄ ｉｅ＋　ｔｏ　Ｍｉｃ＋ｏｏｒｇ＊ｎ１５ｍ５．　１７−２０　章、Ｒ，Ｈ，Ｋ ｅｎｎｅｔｔらＰｌｅｎａａ　ＰＩｅｓｓ、１９８Ｇ、ｐ９．２９５−３６２） ｏこれらの文献やこの分野の他の文献は、細菌、ウィルス、原生動物（原虫）及 び嬬虫を含む感染性微生物の診断テストを改善するための、このようなモノクロ ーナル抗体試薬の使用に関するものである。

これらのＭＡｂｓをある種の細菌疾患例えばＢ群ストレプトコッカス感染！　（ Ｈｘｒｒ口、上記）では診断と治療の両方に、ウィルス性疾患（Ｉｈｒｒ口、上 記）では診断のみに使用できることが提起されている。８群ストレプトコッカス 感染症の場合には、ＭＡｂｓは感染症を治療するためにゲッシ動物で使用されて おり、この限定された実験では、感染後すぐに注入した場合のみＭＡｂｓが効果 的であり、６時間後以降では動物の生存は認められないことが示された（ＣｔＢ ｉｇｊｅｎｓｃｎ　ら、Ｐｅｄｉｉｔｒｉｃ　Ｒｅｘ、。

１８：１０９３−１０９６．１９８４）。マラリア寄生体の場合には、マラリア スポロゾイトの表面コートに対するモノクローナル抗体のＦａｂ断片はマラリア 感染からマウスを保護しうることが示されており、宿主受容体細胞へのスポロゾ イトの結合をこの断片が阻止することを示している（Ｐ、　Ｐｏ１ｏｃｎｊｔｋ ら、　１．　Ｅ！Ｐ。

Ｗｅｄ、、１５１：１５０３−１５１３．　１９ｆｌｏ　）　、また、Ｆｃ部分 を欠いた免疫グロブリン分子によるものであることから、抗体の保護活性は補体 または細胞に無関係であることも示している。

これらの動物実験は、ある種の細菌及び寄生体を使用する管理の優れた実験では 生物特異性のあるＭ　Ａ　ｂ　ｓを使用することにより初期感染に対処できるこ とを示している。何年も前にこれらの報告がなされているが、ＭＡｂｓがヒトの 感染症に治療的役割を有していることはまだ示されていない。１つの主な原因は 、このようなＭ　Ａ　ｂ　ｓが通常は感染の初期の段階にのみ特異的に保護作用 を示し、注入されたＭ　Ａ　ｂ　ｓとの相互作用を受けにくい組織貯蔵器官内に 感染性微生物が広がっているときにはＭＡｂｓは感染微生物と相互作用しにくい ことである。このようなＭＡｂｓを使用４して治療用結合体を形成することは参 考文献には示唆されていない。

従って、より効率的にまたは高い治療指数で診断薬例えば造影剤または治療薬例 えば薬剤もしくは放射性同位元素を感染病巣に向かわせ、感染をより効果的に診 断及び／または治療でき本発明の目的は、感染病巣に標的を合わせる（）ｓｒｇ ｅ＋）効果的で選択的な方法を提供することである。

本発明の別の目的は、感染病巣に高い特異性を持つ診断用及び治療用薬剤を提供 することである。

本発明の別の目的は、化学療法が効果を示さず比較的反応しない、衰弱させたり 生命を脅かす疾患を引き起こす微生物及び寄生体感染症の治療のための化学療法 の代替薬または補助薬を提供することである。

本発明の別の目的は、化学療法剤及び／または放射性医薬品の治療指数を改良す ることである。

本発明の他の目的は以下の説明から当業者に明かになろう。

発明の概要 本発明のこれら及び他の目的は、診断薬または治療薬を感染病巣に向ける方法を 提供することにより達成される。この方法は病原体に感染した患者に、前記感染 部位に付着した前記病原体または病原体関連抗原の接近可能なエピトープと特異 的に結合する抗体結合体を非経口的に注入することからなり、この抗体結合体は 感染を検出し、造影しまたは治療する結合した診断薬または治療薬をさらに含ん でいる。

本発明はさらに感染病巣を標的にするための身持異性または単一特異性抗体結合 体も提供し、この抗体結合体は少なくとも１つの診断薬または治療薬と結合した 少なくとも１つの実質的に単一特異性抗体または抗体断片を含む免疫反応性成分 からなり、ここで抗体または抗体断片は病原体または病原体関連抗原の接近可能 なエピトープと特異的に結合する。これらは滅菌した注入可能（ｉｎｉｅｃｔｓ ｂｌｅ）製剤及び前記方法を実施するために使用するキットの形で提供されつる 。

発明の詳細な説明 抗微生物薬はこれまで次の４つの主なグループ、（１）細菌細胞壁の合成に作用 するもの、（２）細胞質膜に作用するもの、（３）蛋白質合成に作用するもの、 及び（４）核酸合成に作用するものに分類されており、多くの場合これらのグル ープはさらにいくつかに細分される。抗微生物化学療法の総説はＭ、　Ｐ、　Ｅ 。

５ｌｘｃｋによる章（Ｏｔｆｏ＋ｄ　Ｔｅｘｔｂｏｏｋ　ｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ 、第２版。

第１巻、Ｄ、１．　Ｗｅａｔｈｅｒｒｌｌ、　Ｉ、Ｇ、Ｇ、　Ｌｉｄｉｎｇｈａ ｍ及びり、＾Ｗｘｒｒｅｌ１編、１１９．　５．３５−５．５３；　０ｘｆｏｒ ｄ　Ｕｎｉｙｅｒｓｉｔ７　Ｐｒｅｓｓ。

０ｘｆｏｒｄ／Ｍｅｌｂｏａｒｎｅ／Ｎｅｗ　Ｙｏｔｋ、　１９８７　）及びＣ ｈｅｍｏｊｈｅｒ＊ｐ７　ｏｆｌｉｉｃｒｏｂｉｓｌ　Ｄｉ＋ｅｘ＋ｅｓのＸｒ ｒ節（Ｇｏｏｄｍｘｎ　５ＩＩｄ　Ｇ１１ａ＋ｇｏ’　ｔ　Ｔｈ＊Ｐｂ！＋ｍｓ ｃｏｌｏｇｉｃｘｌ　Ｂｘｓｉ＋　ｏ［Ｔｈｅ「５ｐｅｕ）ｉｃ＋、第６版、　 Ｇｏｏｄｍｘａら編、ｐｐ、１０８Ｇ−１２４８；　Ｍｘｃｍｉｌｌｔｎ　Ｐｕ ｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏ、、Ｍａｙ　Ｙｏｒｋ。

１９８Ｇ）に見られる。

これらの文献に示されているように、抗微生物薬の中には、宿主に許容される濃 度で微生物を殺すまたはその発育を阻止するために毒性が選択的なものもある（ すなわち、薬剤が宿主細胞のものとは異なる微生物の構造または生合成経路に作 用する）。微生物の発育を一時的に阻止できるだけで、阻止剤を除去すると微生 物が発育を開始し得る薬剤もある。多くの場合、微生物または寄生体を殺すまた は阻止する能力は体内及び体液内の薬剤濃度の関数である。

これらの原理や入手可能な抗微生物薬が多くの感染症特に細菌感染の治療に成功 をおさめているが、他の感染症例えばウィルス感染及びある種の真菌、原生動物 及び寄生体感染は薬剤の全身投与に耐性であるかまたは比較的反応性が低かった 。

本明細書中では、「微生物ｊとはウィルス、細菌、リケッチア、マイコプラズマ 、原生動物及び真菌を意味し、「病原体」とは微生物と感染性多細胞無を椎動物 例えば端上（腸内寄生虫）、スピロヘータ等との両方を意味する。

ウィルスは宿主細胞に感染し、循環している全身投与薬剤から「隠れる」ことが できる。ウィルス増殖が活性でウィルスが宿主細胞から放出されるときでさえ、 全身投与薬剤は患者に許容される濃度では十分に強力なものではないことがある 。

同様に、数多くの真菌、原生動物及び寄生体感染症は薬剤の全身投与療法に耐性 であった。その原因の少なくとも一部には、薬剤の抗病原体有効用量が患者に許 容される量より高かったこと、または薬物投与の従来の全身投与経路では感染に 接近が困難であうたことが挙げられる。

本発明は、微生物または寄生体の抗原に非常に特異的な抗体を作成し、これを使 用して効果的な放射性核種及び／または化学薬剤を感染の病巣に向け、病原体を 選択的に死滅させることにより、従来の薬物療法に耐性である感染症の治療に関 する問題の多くを解決する。標的部位では体の他の部位より薬剤濃度が高くなる ため、標的に向けた薬剤の有効性を高めることができる。標的に向ける抗体は、 感染部位に付着している病原体または病原体が出すもしくはその分断及び／また は破壊により形成された抗原の接近可能なエピトープと結合できる。エピトープ は病原体または抗原の表面または病原体の接近可能な部位にありうる。従って、 結合体の治療用成分はより高い効率及び標的部位対非標的部位比で標的部位に局 在する。

標的に向けることは診断薬特に感染部位のシンチグラフ造影または磁気共鳴造影 の薬剤にも有用である。これは担当医師が患者の感染の程度や段階を評価し、治 療プロトコールを立案、モニターする際の手助けとなる。

結合体の抗体成分は病原体または病原体抗原の１つのエピトープと反応する１つ の単一特異性抗体であってよい。このような場合には、この抗体は患者自身の抗 体が結合するエピトープとは異なる別個のエピトープと結合するのが好ましい。

このことにより、病原体またはその抗原が生体の抗体で飽和したために遮断され 、従って標的に向けることが阻害されるという問題を避けることができる。

また、抗体成分は身持異性であってよく、すなわち病原体またはその抗原の複数 のエピトープに結合する複数の抗体を含んでいてよい。身持異的な抗体成分はポ リクローナル抗血清、好ましくは免疫原性を持つ形の病原体またはその抗原で免 疫し、刺激して、病原体またはその抗原に対して特異的な複数の抗体を産生させ た動物からアフィニティー精製したポリクローナル抗血清であってよい。もう１ つの方法は「工学処理したポリクローナル」混合物の使用であり、これは規定範 囲のエピトープ特異性を育するモノクローナル抗体の混合物である。

どちらの型のポリクローナル混合物でも、身持異性抗体を化学的に結合させてい くつかのエピトープのいずれにも結合できる１つの身持異性抗体を形成すると好 都合でありうる。このような身持異的な標的分子を診断薬または治療薬と結合す ると、薬剤が感染部位に到達する可能性が高まり、従って、ベヒクルの標的対非 標的比及び有効性が高くなる可能性がある。このような結合を得る１つの方法は 、例えば、２つの異なる抗体をベブンンで消化し、還元により切断してＦａｂ’ 断片混合物を形成し、次にジスルフィド結合を酸化により再形成して元の各抗原 に特異的なＦａｂ’　部分を含有する７％イブリッド断片を含むＦ　（ａｂ’　 ）２断片混合物を作成することにより得られた２つの異なるＦ　（ａ　ｂ’　） 　２断片を２混合することにより、二価のＦ　（ａ　ｂ’　）　２ハイブリッド 断片を作成することである。このような抗体断片を調製する方法は、Ｆｅ＋ｅｘ ｎｕのｒＬｔｂｅｌｅｄＡｌｉｂｏｄｉｅｓ　ｉｎ　Ｂｉｏｌｏｇ７　ｔｎｄ　 ＭｅｄｉｃｉｎｅＪ　、ｐｐ、３２１−３２３　（ＭｃＧ＋ｘｖ−Ｈｉｌｌ　Ｉ ｎｌ　Ｂｋ、Ｃｏ、、Ｈｅｖ　Ｌｒｋ　（１９７Ｂ）；　Ｎ１ｘｏｎｏｆ＋　ら 、Ａｒｃｈ。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈ７ｓ、、　９３．４７０　（１９６１）；及びＨｘ ｍｍｅｒｌｉｎｇら１１、　ＥＩＬ　Ｍｅｄ、、１２８．１４６１　（１９６！ ｌ）；並びに米国特許第４．３３１，６４７号に開示されている。

完全にヘテロ特異的な二価断片を作成する他の方法、例えば二官能性リンカ−を 使用して切断断片を連結することが当業界で知られている。例えば、１ｌｏｓｓ らの米国特許第４．８１６．３９７号の方法に従って得られる、抗体のし鎖とＨ 鎖を含有する組換え分子が知られている。抗体の特性を持つ組換えまたは合成結 合分子を作成する同様な方法も本発明に含まれる。当業界で公知の種々リンカ− を使用して、２つ以上の単一特異性抗体または抗体断片を結合することができる 。

本発明の身持異性結合体の作成に使用する実質的に単一特異的な、好ましくはモ ノクローナルな抗体の免疫学的プロフィールは病原体またはその抗原に対して最 適な結合が得られるように調整でき、個々の感染や標的エピトープに対する結合 定数によって種々の抗原及びそのエピトープに対する抗体特異性を混合し、本発 明の試薬の選択性及び標的効率を微調整して実施する。

本発明の造影用試薬は二特異性、三特異性またはより一般的には身持異性抗体／ ｌｉ片結合体を含んでよく、さらに造影用ラジオアイソトープまたは常磁性物質 を含有してよい。

結合体の抗体成分は完全な抗体、抗体断片または抗体のサブ断片を含んでよい。

本明細書中の「抗体」という用語は完全な抗体、抗体断片及び抗体サブ断片を含 むものと理解され、従って、特記しない限り、説明中で互換的に使用される「抗 体／断片」という用語と均等である。抗体は、全ての種類の完全な免疫グロブリ ン（ＩｇＧ）例えばＩ　ｇＧ、ｒ　ｇＭ、Ｉ　ｇＡ。

ＩｇＤ、ＩｇＥ、２つまたは複数の抗原またはエピトープ特異性を持つキメラ抗 体またはハイブリッド抗体、またはハイブリッド断片を含む断片例えばＦ　（ａ ｂ’　）　、Ｆａｂ’　、Ｆａｂ等であってよ（、さらに任意の免疫グロブリン または特異的抗原に結合して複合体を形成することにより抗体様の作用をする任 意の天然、合成または遺伝子工学で得た蛋白質も含んでいる。

抗体は一般に使用される種々の動物例えば羊、霊長層、ろば、ブタ、ウサギ、ウ マ、ニワトリ、モルモット、ラットまたはマウスから得た抗血清製剤及びさらに は適切に選択し、精製したヒト抗血清も包含しつる。動物の抗血清は、慣用法で 動物に免疫原性の形の病原体またはその抗原を接種し、動物を飼育し、血清また は免疫グロブリン含有血清画分を回収することにより作成する。

抗血清は好ましくは、慣用手法、例えばセファデックスのクロマトカラム充填剤 に抗原を結合させ、抗血清をカラムに通し、特異性抗体を保持しながら他の免疫 グロブリンや汚染物質を分離して除き、次にカオトロピック剤で溶出して精製し た抗体を回収し、続いて任意に例えば結合した血液型抗原または他の非病原性物 質のカラムを通してさらに精製して、アフィニティー精製する。この手法は、該 当の病原体に対する抗体価をすでに有しており、露出したエピトープに結合しつ る抗体を確実に保持している患者の血清から所望の抗体を単離するときに好まし い。

ハイブリドーマ由来のモノクローナル抗体（ヒト、サル、ラット、マウス等）も 本発明への使用に適しており、特異性が高い利点がある。これらの抗体は、哺乳 類を免疫原性抗原製剤で免疫感作し、免疫リンパまたは膵臓細胞を永久ミエロー マセルラインと融合し、特異的なハイブリドーマクローンを単離する現在一般に 慣用法と考えられている方法で容易に製造できる。

本発明への有用性に影響するものは主として抗体の抗原特異性であるため、独゛ 創的なモノクローナル抗体調製法、例えば種間融合及び超可真領域の遺伝子操作 も使用できる。ヒトリンパ球をヒトミエローマセルラインに融合させて、特別の 特異性、好ましくは病原体の主要な抗原部位に対する循環抗体でマスクされてい ないエピトープに対する特異性を持つ抗体を産生できる。

本発明は身持異性抗体結合体を作成するための抗原特異的断片の使用も包含して いる。慣用法により完全な免疫グロブリンをペプシンまたはパパインで消化して 抗体断片を作成できる。

抗体をペプシンで酵素的に切断してＦ　（ａ　ｂ’　）　２と呼ばれる５Ｓ断片 を得ることにより抗体断片を作成できることは公知である。この断片はチオール 還元剤と任意にジスルフィド結合の切断で得られるスルフィドリル基のブロック 基とを使用してさらに切断し、３．５ＳＦａｂ“−価断片を作成することができ る。また、パパインによる酵素的切断により２つの一価Ｆａｂ断片と１つのＦｃ 断片が直接得られる。これらの方法は、特に、Ｇｏｌｄｅｎｂｅ＋ｇの米国特許 第４．０３６，９４５号及び４．３３１，６４７号並びにその参考文献に記載さ れており、前記特許明細書全体は参照により本明細書に含むものとする。

また、Ｎ１５ｏｎｏＨら、　Ａ「ｃｈ、　Ｂｉｏｃｈｅｉ、Ｂｉｏｐｈ７ｓ、、 　８９．２３０（１９６Ｇ）　；Ｐｏｕｅｒ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、、　７ ３．　１１９　（１９５９）：及びＥｄｅｌｍｘｎら。

ｒＭｅｌｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ７　ｉｎｄ　ｌａ＋ａ＋ｕｎｏｃ ｈｅｍｉｓｊｔ７　Ｊ　、ｖｏｌ、１゜４２２　（Ａｅｘｄ、　Ｐ＋ｅ＋３　１ ９６７）が慣用技術である。

断片が、その親の抗体が病原体または抗原に対して有している特異性を保持でき る限りは、抗体を切断する他の方法、例えばＨ鎖と分離して一価のＬ−Ｈ鎖断片 を形成すること、断片をさらに切断すること、または他の酵素、化学または遺伝 子学的手法も使用できる。

ウィルスまたはウィルス抗原に対する抗体は、未精製または精製の、生きている 、弱毒化したまたは殺したウィルス、またはウィルスが出す抗原例えばコート蛋 白質、その部分またはウィルスを破壊して得られる断片を宿主に接種して作るこ とができる。モノクローナル抗体は、マウスその他の哺乳類をウィルスまたはウ ィルス抗原で免疫感作し、免疫感作した宿主の膵臓細胞を取り出し、体細胞ハイ ブリッド形成手法を使用して膵臓細胞と好適なミエローマセルラインとを融合し 、抗ウイルス抗体を産生ずるハイブリドーマを作ることにより作成できる。これ らのハイブリドーマを単離し、サブクローニングし、培養して、モノクローナル 抗体を作成することができる。ハイブリドーマ由来のウィルス抗原に対するモノ クローナル抗体は一般にマウスまたはラット起源であり、一般にはＩｇＧまたは ＩｇＭであるが、本発明結合体の作成に使用するのに適した抗体を種またはＩｇ のクラスについて限定するつもりはない。

一般に、当業界で現在よく知られている多くの慣用法を使用して、はとんどの抗 原に対する抗体を作成できる。従って、前記手法を当業界で慣用されている方法 に適用して、他の微生物及び寄生体の抗原に対し生物自身上またはその断片上の 抗原、または分泌されたまたは付着した抗原で特異的に結合する抗体を作成でき る。哺乳類の体内の感染病巣で十分な濃度で見いだされる病原体またはその抗原 に結合する、すべての抗体を使用して本発明に使用するための標的結合体を作成 することができる。

感染症原因物質に対する広範なモノクローナル抗体が開発され、Ｅｕ＋、Ｊ、Ｃ ｌ１ｎ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、、３（５）：３８７−３９８．　１９８４のＰｏ １ｉ。

の総説に概説されており、容易に入手できることが示されている。しかし、これ までは、このような抗体を１ｎマ目ｒＯの診断アッセイに取り込むことに主とし て興味が持たれていた。２−３の結合していない抗体を動物モデルで治療剤とし て試用しているが、はんのわずかな成功しか認められていない。

このような抗体を放射性同位元素及び／または薬剤またはトキシンと結合して感 染の標的を定めた検出、造影及び治療を達成することの価値はこれまで理解され ておらず、このような薬剤の有効性はこのようなこれまでの開示からは予測でき なかった。

Ｐｏ１ｉｎ　（上記）の述べた病原体及びその抗原に対するモノクローナル抗体 （ＭＡｂＳ）には次のものがある：抗細菌ＭＡｂｓ： ｓｌ＋ｅｐｌＯｃＯｅｅ０１　ｘｇ＊１ｘｃｌｉａｅ　（ストレプトコッカス・ アガラクティエ薗） Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌｇ　ｐｎｅｕｍｏｐｈ目目　（レジュネラ・ニューモフイラ 薗）Ｈｔｅｐ）ｏｅｏｅｃｕｓ　ｐｌｏｇｅａｅｓ　（化膿連鎖球菌）Ｅ＋ｃｈ ｅｒｉｃｉ＊　ｃｏｌｉ　（大腸菌）Ｎｅｉｉ＋ｅｔｉｉ　ｇｏｎｏ＋ｒｈｏ＋ ｘ！（淋菌）Ｎｅｉｓｓｅｒｉ！ｍｅｎｉｎｇｉ）ｉｄｉ＋　（髄膜炎菌）Ｐ＋ ＋ｅｕｍｏｃｏｃｃ＋ｕ　（肺炎球菌）Ｈｅｍｏｐｈｉｌｉｓ　ｉｎ＋１ａｅｎ ｘｘｅ　Ｂ　（Ｂ型インフルエンザ薗）ＴｔｅｐｏｎｅｍＪｐｘｌｌｉｄ＋＋ｍ 　（梅毒トレポネーマ）Ｌ７ｍｅ　ｄｉ＋ｅｓｓｅ　＋ｐｉｒｏｃｈｅ＋ｅｓ　 （ライム病スピロヘータ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏａａｒ　ｘｅ＋ｕｇｉｎｏｓｓ　（ 緑膿菌）Ｍｙｃｏｂ＊ｃ＋ｅｒｉｎｉ　１ｅｐｒａｅ　（らい菌）Ｂｒａｃｅｌ ｌｘ　ａｂｏｔ＋ｕｓ　（ウシ流産Ｍ）Ｍ７ｃｏｂｘｃ＋ｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅ ｒｃｕｌｏｓｉｓ　（ヒト結核菌）Ｔｅｔｔｎａｘ　ｔｏｘｉｎ　（破傷風菌） 抗ウィルスＭＡｂｓ 狂犬病ウィルス インフルエンザウィルス サイトメガロウィルス 単純ヘルペス１クイルスＩ及びＩＩ ヒト血血清パルボウウィル ス吸器シンシチウムウィルス（ＳＲウィルス）水痘帯状庖疹／＼ルペスウィルス Ｂ型肝炎ウィルス はしか（麻疹）ウィルス アデノウィルス ヒトＴ細胞白血病ウィルス ニブスティン−パールウィルス マウス白血病ウィルス＊ おたふくかぜウィルス 水痘性口内炎ウィルス シンドビスウィルス リンパ性脈絡髄膜炎ウィルス いぼウィルス ブルータングウィルス センダイウィルス ネコ白血病ウィルス＊ レオウィルス ポリオウィルス シミアンウィルス４０＊ マウス乳癌ウィルス＊ ダング熱ウィルス 風疹ウィルス ＊　動物ウィルス 抗原生動物Ｍ　Ａ　ｂ　５ Ｐｌｘ＋ｍｏｄｉｏｍ　［ａｌｅｉｐｘ＋ｕｍ　（熱帯熱マラリア原虫）Ｐｌｉ ｓｍｏｄｉｕｍ　ｙｉｙａｘ　（三日熱マラリア原虫）Ｔｏｘｏｐｌｘｍｍａ　 ｇｏｎｄｉｉ　（トキソプラズマ）Ｔｒ７ｐｘｎｏｔｏｍａ　ｒｌｎｇｅｌｉＴ Ｂｐｘｎｏｓｏｍｘ　ｃｒｕｚｉ Ｔ＋７ｐｘｎｏｓｏｍａ　＋ｈｏｄｅａｉｅｎ＋ｅ４Ｔ＋７ｐｇｎｏｘｏｍａ　 ｂ＋ｕｅｅｉＳｃｈｉ［ｏｓｏｍＩＩＩｌｘｎｓｏａｉ　（ｖンソン住血吸虫） Ｓｃｈｉ＋ｔｏ＋ｏｍａ　ｉｘｐａｎｉｃａｍ　（日本住血吸虫）ＢｚｂｅＢｚ 　ｂｏｙｉｘ Ｅｌｍｅｒｉｉ　ｊｅｏ・ｅｌｌａ Ｏｎ＋ｈｏｃｅｒｃａ　ｖｏｌｖｕｌｕｓ　（回旋糸状虫）Ｌｅｉ＋ｂｍａｎｉ ａ　ｔｒｏｐｉｃｓ　（熱帯リーシユマニア）Ｔ＋１ｃｈｉｎｅｌｌａ　５ｐｉ ｒｘ１口（旋毛虫）Ｔｈｅｉｌｅ＋ｉｘ　ｐｇｒｖｘ Ｔｉｅｎｉａ　ｈｙｄａｎ＋ｉｇｅａｉ　（胞状条虫）Ｔｘｅｎｉｉ　ｏｖｉｔ Ｔｓｅｎｉｘ　＋１ｇ１ｎ＊ｔａ　（無鉤条虫）Ｅｃｈｉｏｏｃｏｃｃａ＋　ｇ ｔｘｎ、ｕｌｏｓｕｇ　（単色条虫）Ｍｅ＋ｏｃｅｓｌｏｉｄｅｔ　ｅｏｒｌｉ 抗マイコプラズマＭＡｂｓ Ｍ７ｃｏｐｌ＊ｓｍ＊　ａｒａｊｈｒｉｌｉｄｉｓＭ、　ｈ７ｏｒｈｉｎｉ＋ Ｍ、ｏｒａｌｅ Ｍ、ｓｒｆｉｎｉｎｉ Ａｃｈｏｌｅｐｌｓｓｍｘ　ｌｘｉｄ１ｇｖ目Ｍ、ｓＪＨｒｚｒｉｌｌｍ Ｍ、ｐｏｅｕｍｏｎｉｔｅ　（肺炎マイコプラズマ）文献に記載されている感染 性微生物に対して産生されたＭＡｂｓの他の例を下記に示す。

マラリア寄生体のスポロゾイト、メロゾイト、シゾント及びガメトサイト段階に 対するＭＡｂｓが可能である。スポロゾイト（サーカムスポロゾイト（ｃｉｒｃ 、ｌ＋ｐｏ＋ｏｘｏｉｔｅ）抗原）に対するモノクローナル抗体が生成されてお り、Ｉｎマ１ｌｒｏ及びゲッシ動物でスポロゾイトを中和することが示されてい る（１１゜Ｙｏｓｈｉｄｔ　ら、５ｃｉｅ＋＋ｃｅ　２０７：７１−７３．　１ ９８０　）　。

いくつかのグループがトキソプラズマ症に関与する原生動物寄生体であるＴ、　 ｇｏｎｄＨに対するＭ　Ａ　ｂ　ｓ開発している（Ｋａｓｐｅ＋ら、１．　１ｍ ｍｕ＋ｏ１．　１２９：１５９４−１６９９；　Ｉｄ、、１３０：２４０７−２ ４１２、１９８３）。

シストソミュラー（ｘｅｈ口＋ｏｓｏｍｕｌａｒ）表面抗原に対するＭＡｂｓが 開発され、これはジストスミュラーに対し、１ｎｖ１マ０または　ｉｎ　ｆｉｌ ｒｏで作用することが発見されている（Ｓｉｍｐｔｏｎ　ら、ｈｎｓ白ｏｌｏｇ ｒ、８３＋１６３−１７７、　１９８１；　Ｓｇ＋ｉｔｈ　ら。

Ｐｘ＋ｚｓｉｌｏｌｏＨ，８４：８３−９１．　１９ｇ２；　Ｇｒ７ｘｃｈら、 Ｊ、Ｉａｍｕｎｏｌ、、１２９：２７３９−２７４３．　１９８２；　ｚｏｄｄ ＊　ら、Ｊ、［ｍｌｌ１ｕｎｏ１．、　１２９：２３２６−２３２８゜１９８２ ：Ｄｉｓｓｏｕｓ　ら、Ｊ、Ｉｍｍａ＋＋ｏｌ、、１２９：２２３２−２２３４ ．　１９８２）。

ＴＢｐｘｎｏｘｏｍｉ　ｃｅＩｌ！ｉはチェガス病（Ｃｈ＊Ｈ’ｓ　ｄｉ＋ｅ！ ＋ｅ　）　（７）原因物質であり、吸血サシガメ昆虫が媒介する。ｌａマｉ＋ｒ ｏで寄生体の１つの形から別な形（上鞭毛型から錘鞭毛型段Ｎ）への分化を特異 的に阻止し、細胞表面の糖蛋白質と反応するＭＡｂｓが生成されている。しかし 、この抗原は哺乳原型（血流）の寄生体には存在しない（Ｓｂｓ＋ら、Ｎｔｌｕ ＋ｅ、３０Ｇ＋６３９−６４０．　１９８２　）。

ヒトの大部分の感染症に関与するほとんどの微生物（細菌、ウィルス、原生動物 、嬬虫）に対して好適なＭ　Ａ　ｂ　ｓが開発されており、多くはこれまでにｉ ｎマ１ｔｒｏでの診断の目的に使用されている。これらの抗体及び、ＭＡｂｓを 組み合わせて使用することにより標的を定める力をさらに改良するために慣用法 で生成されうる新規のＭＡｂｓは、好適な放射性核種及び薬剤と結合すると造影 及び治療薬としてｉｎ　ｖｉｖｏでの使用に適している。

一般に、免疫反応性が比較的高く、すなわち結合定数が少なくとも約１０５１モ ル、好ましくは少な（とも約１０７１モルであり、病原体抗体に対する免疫特異 性が高い、すなわち少なくとも約４０％、好ましくは少なくとも約６０％、より 好ましくは少なくとも約７０−９５％である抗体を使用することが望ましい。

しかし、本発明では用途によって、例えば造影用には、幾分結合定数の低い抗体 の使用が好ましいことがある。結合定数の高い抗体は感染部位の病原体及びその 抗原だけでなく循環系に存在するこのような病原体及び／または抗原ともしっか り結合する可能性がある。一方、結合定数のより低い抗体は一種の集合作用効果 により濃度の高い病原体／抗体部位に主として付着する傾向がある。これにより 造影標識の早期排出や非標的への付着が減少し、感染病巣に向かう有効量が増加 する。

造影用抗体都合体は、単純なグルタアルデヒド結合からより洗練された官能基間 の特異的な結合までの種々の常法で作成できる。抗体及び／または抗体断片は好 ましくは直接または１つの短いまたは長いリンカ一部分を介して、抗体／断片の １つ以上の官能基例えばアミン、カルボキシル、フェニル、チオールまたはヒド ロキシル基を介して互いに共有結合している。グルタアルデヒド以外の種々の慣 用のリンカ−例えばジイソシアネート、ジイソチオシアネート、ビス（ヒドロキ シサクシンイミド）エステル、カルボジイミド、マレイミドーヒドロキシサクシ ンイミドエステル等が使用できる。

簡単な方法はグルタアルデヒドの存在下で抗体／断片を混合して抗体複合物を形 成することである。最初のシッフ塩基結合を、例えばホウ水素化物還元により第 ２アミンとして安定化させることができる。この方法は従来、蛋白質の他の結合 体例えば免疫組織化学的用途または免疫アッセイに使用するペルオキシダーゼ− 抗体結合体の製造に使用されている。非部位特異性リンカ−としてはグルタルア ルデヒドの代わりにジイソチオシアネートまたはカルボジイミドを使用すること ができる。

二特異的抗体は種々の慣用法、例えばジスルフィド切断及び完全なＩｇＧまたは 好ましくはＦ　（ａ　ｂ’　）　２断片混合物の再形成、１つ以上の特異性を有 する免疫グロブリンを産生ずるポリオーマを形成するための１つ以上のクローン の融合、及び遺伝子操作により作成できる。二特異的抗体は１つ以上のウィルス エピトープと結合できる。二特異的（「ハイブリッド」）抗体断片は、異なる抗 体の還元的切断により得られたＦａｂ’断片を酸化により結合して作成されてい る。これらの一部は元の抗体が反応しつる抗原の両方に対して特異的な断片を含 んでいよう。

より選択的な結合はマレイミドーヒドロキシサクシンイミドエステルのようなヘ テロニ官能性リンカ−を使用して得られる。

このリンカ−と抗体／断片との反応により抗体／断片上のアミン基を誘導体化し 、次にこの誘導体を例えば遊離スルフィドリル基を有する抗体のＦａｂ断片（ま たは例えばＴｒｅａｔ試薬で添加したスルフィドリル基を持つより大きな断片ま たは完全な免疫グロブリン）と反応させることができる。このようなリンカ−は 同じ抗体の基を架橋結合させることは少な（、結合の選択性を改善する。

抗原結合部位から離れた部位で抗体／断片を結合すると有利であり、例えば、上 記のように切断した鏡開スルフィドリル基への結合により実施できる。もう１つ の方法には、少なくとも１つの遊離アミン基を有する別の抗体と炭化水素部分を 酸化しである抗体との反応を含んでいる。これにより最初のシッフ塩基（イミン ）結合が得られ、好ましくはこれを例えばホウ水素化物還元により第２アミンに 還元して安定化し、最終的複合物を形成する。このような部位特異的な結合は、 小さい分子もしくはポリペプチドまたは固相ポリマー支持体に関しては米国特許 ＄４，６７１，９５８号に、より大きなアダンド（ｉｄｄｅａｄ）に関しては米 国特許第４．６９９，７８４号に開示されている。

同様の反応を使用して複数の抗体及び／または抗体断片例えばＦａｂまたはＦ（ ａｂ’）２断片を互いに結合して、身持異性結合体また病原体またはその抗原に 対し１つ以上のエピトープ特異性を有する結合体を形成し、標的部位に対する結 合親和性または効率を高めることができる。二特異性結合体は第３、第４または そわ以上のエピトープに特異的な抗体／断片に結合できる。これは、例えばヘテ ロニ官能性マレイミドーヒドロキシサクシンイミドエステルリンカーを使用して アミン基を誘導体化し、次に、適宜２−イミノチオランのような試薬を使用して 導入した遊離スルフィドリル基を有する断片と誘導体を反応させて実施できる。

別な結合様式も二特異的複合物形成に関する開示に基づいて当業者には容易に明 らかであろうし、このような方法をほんの僅かに変更や改変するだけでよい。

結合体の抗体成分をシンチグラフ造影剤または磁気共鳴造影増強剤用の放射性同 位元素で標識し、またはこれと結合し、またはこれと結合できるようにして診断 用造影剤として使用することができる。ｉｎマｉマ０で使用するための蛋白質の 標識に好適な放射性標識の任意慣用の方法が一般に複合物の標記に好適であろう 。これは、慣用法またはより洗練された方法を使用して例えばハロゲンまたは金 属イオンの放射性同位元素で直接標識することにより、または放射性金属または 常磁性イオンのキレータ（ｃｈｅｌ息１ｏ＋）を結合することにより実施できる 。このようなキレータ及びその抗体への結合様式は当業者にはよく知られており 、特に、例えばＣｈｉｌｄｓら、Ｊ、ＮｕｃｏＭｅｄ、、２６＋２９３（１９８ ５）；及びＧｏｌｄｅｎｂｅ、Ｈの米国特許第４．３３１．６４７号、第４，３ ４８．３７６号、第４．３６１．５４４号、第４．４６８，４５７号、第４，４ ４４，７４４号及び第４．６２４．８４６号に開示されている。エチレンジアミ ン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ）の誘 導体が一般的である。これらは一般に側鎖上に基を有しており、キレータはこの 側鎖で抗体に結合できる。また、よく知られた方法でキレータのカルボキシルま たはアミン基を活性化し、次に抗体に結合させることができる。例えば、Ｇａ− ６７のキレータであるデフエロキシアミンは遊離アミン基を有しており、これを 好適リンカ−で活性化し、活性化カルボキシル、イソチオシアネート等の基を含 有させ、次に抗体のアミンと結合させることができる。

キレータは直接または短鎖もしくは長鎖リンカ一部分を介して、抗体の１つ以上 の官能基例えばアミン、カルボキシル、フェニル、チオールまたはヒドロキシル 基を介して抗体に結合できる。種々の慣用のリンカ−例えばジイソシアネート、 ジイソチオシアネート、カルボジイミド、ビスーヒドロキシサクシンイミドエス テル、マレイミドーヒドロキシサクシンイミドエステル、グルタルアルデヒド等 、好ましくは選択的な逐次リンカ−例えば米国特許第４，６８０，３８８号に開 示のアニヒドリドイソチオシアネートリン力−を使用できる。

ヨウ素−１３１（１４３１）またはヨウ素−１２３（Ｔ−１２３）での標識は、 放射性のヨウ化カリウムまたはナトリウムと抗体との混合物をクロラミン−Ｔで 処理する酸化的手法を使用して容易に実施でき、この方法は例えばＧｒｅｅｎｖ ｏｏｄ　ら。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、１．、　８９．　１１４　（１９６３）に記載されており、Ｍ ｃＣｏｎｌｈＢら、Ｉｎ１．　Ａｒｃｈ、Ａｌｌｅｒｇｙ　Ａｐｐｌ、Ｉｍｍ＋ ｕｏ１．、　２９．　１８５（１９６９１が変法を実施している。この結果、試 薬の割合及び反応条件に応じて、抗体分子のおそらくチロシン残基、また多分ト リプトファン及びさらにフェニルアラニン残基の水素原子がヨウ素原子で直接置 換される。また、Ｆａｌｅｚｎａ　％上記、ｐｐ、３０３及びその参考文献に記 載されているように、ラクトペ、ルオキシダーゼヨウ素化も使用できる。

さらに進んだ標識法は係属中の米国特許出願第７４２．４３６号（６−７−８５ ）策０８４，５４４号（８−１２−８７）及び第１７６．４２１号（４−１−８ ８）に開示されている。前記全ての特許及び特許出願の開示は全て参照により本 明細書に含むものとする。Ｆｅｊｅ直ｎｏ、　ｒＬｘｂｅｌｅｄＡｎｔｉｂｏｄ ｉｅ＋　ｉｎ　Ｂｉｏｌｏｇ７　ｘｎｄ　ＭｅｄｉｃｉｎｅＪ　、　９９．２１ ４−３０９（ＭｃＧｔａｖ−ｆｌｉｌｌ　ｌｏｔ、Ｂｏｏｋ　Ｃｏ、、　Ｎｅｗ 　Ｙｏｌｋ、１９７８１　には広範囲の標識手法が開示されている。種々の金属 の放射性同位元素の導入＋１、ＷＪＢｅｒら、Ｊ、Ｎｏｃｌ、Ｍｅｄ、、２０． 　４２８　（１９７９）；　Ｓｕｎｄｂｅｒｇ　ら、Ｊ。

Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｌｌ、　、１７．　ＮＯ４（１９７４）　；　及び５ｓｈｘら 、１．　ＨＩｌｅｌ、　Ｍｅｄ、。

６、　５４２　（１９７６）の方法に従って実施できる。前記のものは単に当業 界で公知の多数の放射性標識法の例である。

ＭＲＩ造影増強に有用な化合物の例には、常磁性イオン例えばＧｄ　（ＩＩＩ） 、Ｅｕ（ＩＩＩ）、Ｄｙ　（ＩＩＩ）、Ｐｒ（ＩＩＩ）、Ｐａ（ＩＶ）、Ｍｎ（ ＩＩ）、Ｃｒ　（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＴＩＴ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、 Ｎ１（Ｉ　Ｉ）　、Ｔｉ　（Ｉ　Ｉ　Ｉ）、及びｖ（■ｖ）イオン、＊　ｆ＝　 ｉ！　ラジカル例えばニトロオキシドを含み、これらの化合物は常磁性イオンキ レータ、またはそのイオンの露出キレート化官能基例えば５Ｈ１ＮＨ２、Ｃ０ｏ Ｈまたはラジカルアダンドのリンカ−を有する基質と結合する。ＭＲＩ増強剤は 、磁場強度が相応に得られ、患者の安全性や機械の設計と適合する磁場の強度を 使用して外部カメラでの検出を可能にするのに十分な量存在してよい。このよう な薬剤に対する要件は媒質中の水分子に対して作用する薬剤について当業界でよ く知られており、特に、例えば、Ｐ７ｋｅｆｔ、　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ａａ ＋ｅｒｉｃａｎ、２４６：７８　（１９ｇ２）：及びＲａｎｇｅ　ら、入ｍ、１ ．　Ｒｓｄｉｏｌ、、口１：１２０９　（１９８７）　に開示されている。

抗体に直接またはキレートの形で金属を導入する同じ方法の多（は、感染症用造 影剤を形成するための本発明の抗体結合体へのＭＲＩ剤の導入にも適しているこ とはよく理解される。ＭＲＩ剤は造影増強のために多（の常磁性イオンまたはラ ジカルを有しているのと好都合である。このようなイオンを複数導入する方法の 一つはキャリアーポリマーにキレートを負青し、担体を抗体複合物に、好ましく は結合体の抗原結合部位から離れた部位で部位特異的に結合させることである。

このことは抗体自身のより少ない部位でより多くのキレータを抗体に結合させる ことができるために、免疫反応性がそれほど重大にそこなわれないという利点が ある。キレータを抗体に負荷するために有用なポリマーの例には、例えばポリオ ール、多糖類、ポリペプチド等、例えば米国特許第４，６９９，７８４号（Ｓｈ ｉｈら）及び第４，０４６，７２２号（Ｒｏｖｌｘｎｄ　）に記載のものが含ま れる。

１つの型の多糖類はデキストランである。キレータを官能化してデキストランヒ ドロキシルに対する反応基例えば無水物、インシアネートまたはインチオシアネ ート等を含有するようにさせつる。また、デキストランは多くの方法例えばアミ ノデキストランへの変換により誘導体化することができる。同様な方法は抗体ま たは抗体結合体に複数の薬剤分子を載せるために有用であることが理解されるで あろう。このことは後に詳述する。

アミノデキストラン（ＡＤ）キャリアーを有する抗体結合体の製法は通常デキス トランポリマー、有利には平均分子量（ＭＷ）約１０，０００−１００．０００ 、好ましくは約１０．０００−４０．０００、より好ましくは約１５，０００の デキストランから出発する。次に、デキストランを酸化剤と反応させ１蒙化物環 の部分を調整して酸化してアルデヒド環を生成する。この酸化は糖分解用化学試 薬例えばＮ　ａ　Ｅ　Ｏ４を使用して慣用法で実施できる。

分子量約４０．０００のデキストランに対して約５０−１００、好ましくは１０ ０個のアルデヒド基を生成し、他の分子量のデキストランに対してもほぼ同じ割 合のアルデヒドを生成するように酸化剤量を調整すると好都合である。アルデヒ ド基及びそれに伴いアミン基がそれ以上多くなると、ポリマーがポリリシン様の 挙動をとりやすくなるためあまり好ましくない。

また、より少ないと望ましくないキレータまたはホウ素アダンドの負荷が起こり 、これは不都合でありうる。

次に、酸化したデキストランをポリアミン、好ましくはジアミン、より好ましく はモノ−またはポリ−ヒドロキシジアミンと反応させる。好適アミンには、例え ばエチレンジアミン、プロピレンジアミンまたは同様のポリメチレンジアミン、 ジエチレントリアミンまたは同様のポリアミン、１．３−ジアミノ−２−ヒドロ キシプロパンまたは同様のヒドロキシル化ジアミンまたはポリアミンが含まれる 。アルデヒド基に対して過剰のアミンを使用してアルデヒド官能基をシッフ塩基 （イミン）基に実質的に完全に確実に変換することができる。

得られた中間体を還元的に安定化するにはシック塩基中間体を還元剤例えばＮａ ＢＨ、ＮａＢＨ３ＣＮ等と反応させる。

過剰な還元剤を使用して、確実にイミン基を第２アミン基に実質的に完全に還元 し、すべての未反応アルデヒド基をヒドロキシル基に還元する。得られたアダク トを慣用のサイジングカラムに通して架橋結合したデキストランを除去してさら に精製することかできる。ＡＤ上の利用できる第１７ミノ基の数は、計量したサ ンプルをトリニトロベンゼンスルホン酸と反応させ、４２０ｎｍでの光学密度と 標準との相関から算定することかできる。通常、この方法では、計算した数のア ルデヒド基はＡＤの第１アミン基に本賀的に完全に変換される。

また、デキストランをアミン基導入の慣用法により、例えば臭化シアンと反応さ せ、次にジアミンと反応させて誘導体化することができる。ＡＤは特定薬剤また はキレータの活性型の誘導体、好ましくは、例えばジシクロへキシルカルボジイ ミド（Ｄ　ＣＣ）またはその水溶性修飾体を使用して慣用法で製造したカルボキ シル−活性化誘導体と反応させるとよい。

これまで述べたことは単に放射活性標識及び／または薬剤またはトキシンを抗体 ／断片に付加する当業界で公知の方法を例示しただけであり、本発明の結合体の 製造には他の方法も使用できることは理解されよう。

本発明のシンチグラフによる造影法は、ヒトの患者に放射性標識した結合体をシ ンチグラフ造影剤に有効量非経口注入して実施する。非経口とは、例えば静脈内 、動脈内、髄腔内、間隙内または腔内を意味する。患者は放射性標識した結合体 を約１ｍＣｉ−５０ｍＣｉ投与されるが、この用量は特定の放射性同位元素と投 与様式の関数であると考えられる。静脈投与では、用量は通常次の通りである： 　ｒ−１３１では約２−１２−１Ｏ。

好ましくは約２−５ｍＣ１；　ｌ−１２３では約５−１０　ｍ　Ｃｉ　。

好ましくは約８ｍＣ１；Ｔｃ−９９ｍでは、約１０−１０−４Ｏ，好ましくは約 ２０ｍＣ１；　Ｉｎ−１１１またはＧａ−６７では約２−５ｍＣｊ、好ましくは 約４　ｍ　Ｃｉ　０他の造影用放射性核種の用量は上記同位元素を参照し、核種 の半減期及びそれに結合しようとする抗体／断片／複合物の大きさを考慮するこ とにより当業者は容易に決定できよう。

放射性標識抗体複合物は通常、感染の病巣にシンチグラフ造影剤を向けるための 、哺乳類に使用できる注入可能製剤、好ましくはヒトに使用するための滅菌した 注入可能製剤、好ましくは医薬的に許容される滅菌した注入用ベヒクル、好まし くは生理的ｐＨ及び濃度の燐酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中に有効量の放射性標識結 合体を含有する滅菌した注入可能溶液からなる製剤として提供される。他の慣用 の医薬的に許容されるベヒクルも非経口投与の部位に応じて使用できる。

本発明に従って非経口投与する代表的製剤は、例えば０．９％塩化ナトリウム含 有０．０４Ｍ燐酸バッファ（ｐＨ７，４、Ｂｉｏｖｓｔｔ　）　１　ｍ　１当り 約１０ｍｇのヒト血清アルブミン（１％Ｕ　Ｓ　Ｐ　：　Ｐｘｒｋｅ−Ｄ＊マロ ）も含有すると好ましい滅菌溶液中に、通常的０．１−２０ｍｇ、好ましくは約 ２ｍｇの放射性標識抗体結合体を含有する。

標的部位に十分量の放射性同位元素を沈積させたら、慣用の平面及び／または５ ＰＥＣＴガンマカメラまたは感染の部位を捜すために外部または内部で使用する ハンドベルトのガンマプローブを使用してスキャンニングを実施する。シンチグ ラムは通常５Ｏ−５００Ｋｅｖのエネルギーを検出する１つ以上の窓を備えたガ ンマ造影カメラでとる。標的部位は比較的集中した病巣にある病原体またはその 抗原を有する任意の部位であってよい。

磁気共鳴造影法（ＭＲＩ）はシンチグラフ造影法と同様の方法で実施するが、こ の造影剤は放射性同位元素よりＭＲＩ増強種を含有している。磁気共鳴現象はシ ンチグラフとは異なる原理で作用することは理解されよう。通常、発生した信号 は造影すべき領域の水分子の水素原子核中の陽子の磁気モーメントの緩和時間と 相関する。磁気共鳴造影増強剤は緩和速度を高め、造影剤が付着している領域の 水分子と体内の他の場所の水分子とのコントラストを増すことにより作用する。

しかし、この薬剤は、よりはっきりしたコントラストをもたらすＴ１とコントラ ストを弱めるＴ２の両方を高める作用を持つ。従って、この現象は濃度依存性で あり、通常最大の効率を得るためには常磁性種の最適濃度がある。最適濃度は使 用する特定の薬剤、造影部位、造影法すなわちスピン−エコー、飽和−回復及び 種々の他の非常にＴ　依存性またはＴ２依存的造影手法、薬剤を溶解または懸濁 する媒質の組成により真北しよう。これらの因子及びその相対的な重要性は当業 界で公知である。例えば、Ｐ７ｋｅ口、上記及びＲａｎｇｅ　ら、上記を参照の こと。

本発明のＭＲＩ法は、哺乳類好ましくはヒトに、ＭＨＩ造影剤を含む抗体結合体 である本発明の結合体の磁気共鳴造影有効量を非経口注入して実施する。患者に は感染部位でのＭＲ１信号を少なくとも約２０％、好ましくは約５０−５００％ 増強するのに十分な量の標識結合体を投与するが、この量は特定の常磁性種及び 投与様式の関数であると考えられる。

また、標識した抗体結合体は通常、哺乳類用の注入可能製剤、好ましくはヒトに 使用するする滅菌した注入可能製剤として提供される。感染病巣にＭＲＩ剤を向 けるための典型的な製剤は、医薬的に許容される滅菌した注射用ベヒクル、好ま しくは生理的ｐＨ及び濃度の燐酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中に有効量の標識結合体 を含有する滅菌した注入可能溶液を含む。他の慣用の非経口投与用の医薬的に許 容されるベヒクルも非経口投与の部位に応じて使用できる。

本発明に従って非経口投与する代表的な製剤は、０．９％塩化ナトリウム含有０ ．０４Ｍ燐酸バッファ（ｐＨ７，４、Ｂｉｏｖ＊＋ｅ　）　１　ｍ　１当り例え ば約１０ｍｇのヒト血清アルブミン（１％Ｕ　Ｓ　Ｐ　：　ＰＡｒｋｅ−Ｄｘｔ ｉｓ　）も含有すると好ましい滅菌溶液に標識した身持異性抗体複合物を通常的 ０．１−５０ｍｇ、好ましくは約５ｍｇ含有する。標的部位にＭＲＩ剤を沈積さ せた後、感染を造影する慣用のＭＨＩカメラでスキャンする。

本発明の好ましい実施態様では、Ｇｏｌｄｅａｂｅｒｇの米国特許第４．６２４ ，８４６号に関連する像影剤について開示されているように、第１の標識抗体結 合体の局在化率は、標的に向かっていない循環結合体を浄化（ｓｃａｎマｅ＋＋ ｇｅ）　Ｌその除去を促進する標識していない第２の抗体を使用すると高まる。

前記特許の開示全体は参照により本明細書に含むものとする。この方法は後記す るように治療薬剤と結合した抗体または抗体複合物にも応用できる。「局在化率 」という用語は通常の意味で使用しており、すなわち標的抗体結合体と非標的抗 体結合体の比である。

一般に、第２の抗体は、第１の抗体複合体の局在化率を少なくとも約２０％、通 常５０％以上上昇させる量で使用する。

箪２の抗体は第１の抗体結合体と結合して循環系及び非標的空間から第１の抗体 結合体自体より迅速に除去される複合体を形成するものであれば、完全なＩｇＧ もしくはＩｇＭまたはＩｇＧもしくはＩｇＭの断片であってよい。好ましくは、 第２の抗体は完全なＩｇＧまたはＩｇＭである。東１の抗体がＩｇＧまたはＩｇ Ｍの断片のときには、第２の抗体が完全なＩｇＧまたはＩｇＭであり、第１／第 ２複合体が補体カスケード活性化能を保持できるのが好ましい。反対に、第１抗 体が完全なＩｇＧである場合、複合体が補体固定能を保持していれば第２抗体は 断片であってよい。

第１／第２対の少なくとも１つが完全なＩｇＧまたはｒｇＭであるのが好ましい 。ＩｇＭを使用する１つの利点は、ＩｇＭが第１抗体または分離した結合体すな わち給断用主薬及び／または治療用主薬例えｉ？薬剤、キレート剤、放射性各種 等とより大きな高分子複合体を形成することである。このことにより特に血液か らの非標的第１抗体及び／または生薬の除去の速度及び効率が増強される。

第２抗体は前記のＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇの゛　８４６特許に開示されている方法 で製造できる。モノクロ−≠ル抗一種１ｇＧも入手でき、本発明方法で第２抗体 として有利１巳使用できる。非金属結合体例えば放射硅ヨウ素化した結合基また は有機常磁性種例えばニトロキシドも第２抗体が特異的なハブテンでありうる。

第２抗体は、第１の身持異性抗体結合体を非経゛口投与してから感染病巣での取 り込みが最大となる十分な時間が経過した後、通常最初の投与の約２−７２時間 後、好ましくは投与約４−４８時間後に患者に注入する。第１の抗体が静脈投与 されないときには、第２抗原の少な（とも一部を同じ非経口経路で投与すると有 利でありうる。しかし、第２抗体の少なくとも一部を静脈注入して循環系に拡散 している第１抗体の除去を早めると有利である。

循環している標識した第１抗体を除去し、第１抗体の局在化率を高めるための第 ２抗体の使用に代わるものまたは付は加えるものとしては、前記Ｇｏｌｄｅａｂ ｅｒｇの特許及びその参考文献に開示されているような造影増強剤の使用がある 。この方法は当業界で公知の手法であり、無作用（ｉｎｄ百＋ｅｒｒｎｔ）抗体 または断片を別々に検出可能な放射核種で標識し、標識した無作用抗体を患者に 注入する。この抗体は造影に必要な時間の間、第１抗体と同じ分配及び代謝の動 力学を有している。このような抗体の注入は慣用の減算剤（ｓｏｂ’ｔ＋ｘｃｔ ｉｏｎ’　Ｂａｎｄ）例えばＴｃ−９９ｍ標識血清アルブミンより好ましい。減 算剤はバックグラウンドを補償して造影過程を増強するための使用に適している 。放射性標識した無作用抗体を減算剤として使用すると、循環系からの抗体の除 去に影響する器官からの非標識バックグラウンド放射についてコンピュータで修 正できる。

当業者には、東１のモノクローナル抗体と減算剤として使用される無作用抗体は 同じ種またはミエローマ／ハイブリドーマ由来であり、第２の抗体が実質的に同 じ速度で第１のモノクローナル抗体と無作用抗体免疫グロブリンを非榎的部位か ら除去するのが好ましいことは理解されよう。また、第２抗体が第１抗体及び無 作用免疫グロブリン種の不変領域に特異的であることが好ましい。

導入する第２抗体の量は一般に、循環する第１抗体を２−７２時間以内に１０− ８５％減少できる量である。除去に影響を与える第２抗体と第１抗体の比は第１ 抗体と第２抗体の対の結合特性に左右される。Ｉｎｖ口ｒｏで患者の血液を予め スクリーニングし適当な比を最初に算定することができる。このスクリーニング を使用して、例えばゲル拡散テストで沈降素帯を得るために必要な第２抗体と第 １抗体の比を決めることができる。

これは第２抗体と第１抗体のモル比の一般的な範囲を示すが、ｉｎ月マＯでの使 用では、このようなｉｎ　ｖｉｔ＋ｏテストで示した第２抗体と第１抗体の比よ りも高い比が必要なことがあるので、比の最低限度として使用できる。

実際、第２抗体の第１抗体に対するモル比は限定的なものと考えるべきではない が、一般に約５−５０の範囲である。第１及び第２抗体が完全なＩｇＧである場 合には、１５−２５、好ましくは２０−２５の第２抗体の第１抗体に対するモル 比が有利であることが判っている。

造影用製剤及びキットには抗体結合体投与後に注入するために別な容器に入れた 第２抗体も含んでよい。

ヒトに感染し得る病原体微生物に対して細胞毒性効力を有する多数の薬剤及び毒 素が知られている。それらは、薬剤及び毒素についての容易に入手可能な当業界 で周知の刊行物中、例えハＭ　ｅ　ｒ　ｋ　Ｉ　ｎ　ｄ　ｅ　ｘ等に記載されて いる。このような抗生物質又は細胞毒剤は全て抗病原体抗体又は抗体複合体に結 合〆。

して、本発明の治療薬を生成し得、そしてこのような結合体を、その部位での有 効濃度を増大するために抗生物質又は細胞毒剤の感染部位への標的を改良するた めに使用することは、本発明の一部である。

一つ又はそれ以上の抗生物質又は細胞毒剤を、高分子担体に結合し、次にこれを 抗体又は抗体複合物に結合して、治療に用いる。ある場合には、抗体結合体の一 部としての薬剤が循環中に部分的に又は完全に解毒し得、これにより薬剤又は毒 素の全身的副作用は低減され、薬剤の全身投与が受け入れられない場合でも薬剤 を使用することができる。抗体とさらに結合されるポリマーに結合した薬剤の分 子を投与すると、全身毒性を軽減している間に治療が可能になる。

本発明の方法は、−次抗体又は抗体複合物を抗生物質又は細胞毒剤又は毒素に結 合することにより感染の治療的処置に適用される。薬剤又は毒素をイムノグロブ リンに結合する当業界周知の方法は、例えばＤｒｕｇ　Ｃａｒｒｉｅｒｓ　ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｇ。

Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ、ｅｄ、、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ　Ｌｏｎｄｏｎ 、１９７９の″Ｔｈｅ　Ｕｓｅｏｆ　Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ａｓ　ＤｒｕｇＣ ａｒｒｉｅｒｓ”　という表題のＯ’Ｎｅ１ｌｌｉ：よる章；Ａｒｎｏｎ　ｅｔ 　ａｌ、、Ｒｅｃｅｎｔ　Ｒｅ５ｕｌｔｓｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、７５： ２３６．１９８０；及びＭｏｅｌｔｏｎ　ｅｔ　ａｌ、、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ、 Ｒｅｓ。

６２：４７．１９８２（技術水準を示す）に記載されている。

これらの方法は、覆々の疾病誘発性微生物、例えば細菌、ウィルス、カビ、及び 種々の寄生虫に対して有効な薬剤をこれらの微生物、それらの産生物、又はそれ らの病変に関連する抗原に対して発現される抗体と結合するために用いる方法と 非常によく似ている。

例えばテトラサイクリン、クロラムフェニコール、ピペラジン、クロロキン、ジ アミノピリジン、メトロニアシト、イソニアシト、リファムピン、ストレプトマ イシン、スルホン、エリスロマイシン、ポリミキシン、ナイスクチン、アムホテ リシン、５−フルオロサイトシン、５−ヨード−２′デオキシウリジン、１−ア ダマンタナミン１、アデニンアラビノシト、アマニチン、及びアジドチミジン（ Ａ　Ｚ　Ｔ）を含めたこのような抗生物質又は細胞毒剤は、適切な特異的な複数 の抗体／断片及び単数の抗体／断片複合物に結合するために好ましい。本発明に おける使用のための考え得る種々のその他の抗生物質／細胞毒剤は、Ｇｏｏｄｍ ａｎ　ｅｔ　ａｌ、、”Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ 　ｏｆ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ。

”５ｉｘｔｈ　Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ａ、Ｇ、Ｇｉｌｍａｎ　ｅｔａｌ、、ｅｄｓ、 、Ｍａｃｍｉｌｌａｎ　ＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ、、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、１９ ８０に列挙されている（一般的技術水準を示す）、特異的標的部位を薬剤の標的 にするために適切な且つ望ましい条件は、例えばＴｒｏｕｅｔ　ｅｔ　ａｔ、。

が、Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｏｆ　Ｄｒｕｇｓ、Ｇ。

Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ　ｅｔ　ａｌ、、ｅｄｓ、。

Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　ａｎｄＬｏｎｄｏｎ、１９８２ ．　ｐｐ、１９−３０　（このような標的方法が感染病変を蒙っている患者にい かに冑益であるかについての臨床的知識を示す）で検討している。

画像形成の箇所で上記のように、二次抗体の使用は、診断的画像形成結合体に関 するのと同様の方法で、本発明の治療薬の有効性を増大する。治療薬の有効性は 、一般的意味で用いられ、治療効果と望ましくない副作用の比として示されるそ の治療指数によって表わされる。それは、しばしば、標準モデル系における効率 対毒性の定量的測定、例えばメジアン致死重量（ＬＤ　）対メジアン有効用量（ Ｅ　Ｄ　５　Ｇ）の比で示される。本明細書中に上記のような二次抗体の使用は 、非標的−次抗体及び／又は分離した治療素因を一掃することによって抗ウイル ス抗体及び抗体後合物結合体の治療指数の増大をもたらす。二次抗体は、上記の ように一次モツクローナル抗体に対して特異的であることに加えて、治療的製剤 の場合は治療薬に対して特異的であり得る。それは、治療薬のための担体にも特 異的であり得る。

本発明で意図される治療製剤は、非経口的投与に好適なビヒクル中に、治療的に 有効な放射性同位体及び／又は抗生物質／細胞毒剤に結合した上記のような単一 特異性抗病原体抗体／断片を含有する。また、治療製剤は、放射性同位元素及び ／又は抗生物質／細胞毒剤に結合した身持異性抗病原体抗体／断片複合物を含有 してもよい。

ある場合には、薬剤と放射性核種を組み合わせるのが有益であり、この場合、病 原体は”隠れる”か又は多少接近し難い。

作用範囲の長い放射性核種は、何らかの抗原が結合体に接近可能である限り、隠 れた病原体に達し得る。さらに、照射は感染細胞の溶解を引き起こし、細胞内病 原体を結合体の抗微生物剤成分に暴露し得る。

治療製剤は、上記のような別個にパックされた二次抗体を含有してもよい。好適 なビヒクルは当業界で十分公知であって、例えば本明細書中に上記のような診断 用画像形成剤の投与のために用いられるものと同様の滅菌ＰＢＳ溶液が挙げられ る。

本発明の抗微生物身持異性画像形成結合体、及び単−特異性又は身持異性治療結 合体はさらに、感染病巣を標的にする抗体のための治療又は診断キット中に提供 されるのが便利である。

一般に、このようなキットは、凍結乾燥製剤として又は注射ビヒクル中に、本発 明の抗体結合体を含入するバイアルを包含する。結合体がシンチグラフィー画像 形成用に、又は放射性同位元素療法に用いられるものである場合は、それは一般 に、別々の容器中に、放射能標識化のための試薬及び付属物とともに冷結合体と して提供されるが、一方ＭＲＴ剤及び治療薬／毒素結合体は一般に、常磁性種、 又は抗体／断片複合物又は単一特異性抗体／断片と既に結合した抗生物質／細胞 毒剤とともに供給される。キットはさらに、抗体又は断片に対して特異的な二次 の、別々にパックされた非標識化抗体又は抗体断片、あるいはその担体、又は放 射性核種又は常磁性イオンのためのキレート化剤を含有し得る。

本発明の画像形成製剤及び方法は、相対的に小さな感染病巣を検出及び画像診断 することができるし、容易に且つ安全に使用できる。本発明の治療試薬及び方法 は、放射性同位′元素及び薬剤で感染部位を標的にする手段を提供して、その治 療指数を改良し、それらの全身的副作用を低減し、そしてその効率を増強する。

放射性核種免疫結合体は、微生物治療に特に有効である。標識化抗体が被験者の 感染部位に局在することが確認された後に、各々７０ｋｇの体重の患者を基準に して、一般に１−１３１の場合２０ｍＣ１〜１５０ｍＣ１，Ｙ−９０の場合５　 ｍ　Ｃｉ　〜３０ｍＣ１，又はＲｅ−１８６の場合５ｍＣ１〜２０ｍＣ１の高用 量の標識化抗体を注入する。注入は、静脈内、動脈内、リンパ管内、莢膜内、又 は体腔内（例えば非経口的に）であって、反復注入してもよい。治療によっては 抗体又は抗体複合物を複数回に分けて投与するのが有益であって、それによって 、通常正常組織の放射を比例的に増加ｌさせずに、高微生物毒性用量／が提供さ れる。

種々の放射性核種が治療に有用であって、それらは、上記の標識法、並びに当業 界で十分公知のその他の慣用的方法によって特異的抗体中に取り込まれる。好ま しい治療的に有効な放射性核種は、アスクチン−２１１、ビスマス−２１２、イ ツトリウム−９０、レニウム−１８６、レニウム−１８８、銅−６７、ヨウ素− １３１、及びヨウ素−１２５であるが、しかしその他の放射性核種並びに光増感 剤も適している。

本発明の別の態様は、少なくとも２０％の天然、存在量のホウ素−１０同位体を 有する有意数のホウ素原子を含有する抗体の使用に関する。ホウ素含有アダンド （ａｄｄｅｎｄ）は、種々の方法、例えば米国特許第４，８２４，６５９号（Ｈ ａｗｔｈｏｒｎｅ）（この記載内容は、参照により本明細書中に含めるものとす る）に記載の方法によって導入され得る。

ホウ素−１０含有抗体を、一つ又はそれ以上の上記の手法によって放射能標識化 して、感染検出及び／又は治療のための一つ又はそれ以上の放射能標識、並びに 熱中性子の吸収のための高含量のホウ素−１０原子を含有する抗体を産生ずる。

あるいは、ホウ素標識化抗体は、抗体へのガンマ線放出同位体の結合を伴わずに 用い得る。次に、感染病変に、優先的にホウ素含有アデノド上のホウ素−１０核 により吸収される熱中性子の十分平行にした（ｃｏ　１１　ｉｍａｔｅｄ）光線 を照射し、活性化核は急速にリチウム−７及びα粒子に放射崩壊する。これらの 結果束じたα粒子は有毒であって、その産生により隣接微生物及び細胞が殺され る。

本発明の方法及び組成物の特に有効な適用は、ＨＩＶ感染による後天性免疫不全 症候群（ＡＩＤＳ）、及びＡＩＤＳ関連複合症候群（ＡＲＣ）として公知の前駆 免疫不全症の治療である。

ＡＩＤＳ又はＡＲＣに対する治療法はないけれども、ＨＩＶレトロウィルスの独 特の特徴である逆転写酵素活性を遮断する薬剤をＡＩＤＳ患者で研究中である。

しかしながら、患者は結局は耐性をもち、再発し、他の治療法を必要とする。

ＡＩＤＳ患者は、異なるＨＩＶ成分、例えばウィルスコア抗原、エンベロープ糖 蛋白質抗原複合体、及びトランスメンブラン蛋白質に対する循環抗体を発現する 。ＡＩＤＳ患者における主な反応活性は、分子量４１０００　（ｇｐ４１）のお そらくウィルスエンベロープ糖蛋白質に向けられている。患者自身の抗体は外因 性ＨＩＶ抗体の標的に必要な標的部位を飽和することが予期されたために、抗体 がヒトにおけるＨＩＶの標的化に有用であることは予測されなかった。

ＨＸｖに対する外因性モノクローナル抗体、特にある種のエンベロープ糖蛋白質 エピトープに特異的な抗体が、ウィルスに対する高い選択性及び親和性を有する ことが目下判明しており、事実、エピトープ特異性によって天然ヒトＨＩＶ抗体 とは区別し得る。ＨＩＶエンベロープ糖蛋白質抗原抽出物でマウスを免疫化する ことによって、異なるエンベロープ抗原エピトープと反応するモノクローナル抗 体が生じた。単一のこのようなモノクローナル抗体、しかし好ましくはこのよう な抗体の組み合わせが、ＨＩＶ感染の検出、画像診断、及び治療に用いるための 本発明の抗体結合体の好ましい抗体成分である。あるいは、ヒト又はサルの抗体 を、慣用的免疫グロブリン単離及び精製法によってその宿主から単離し、ＨＩＶ 感染細胞を１ｎｖｉ　ｔ　ｒｏで（例えば免疫蛍光染色法によって）標的化する その能力によって標的剤として選択する。ヒト抗体は、好ましくは多数の抗原部 位と区別される異なるウィルス上のエピトープを標的化するものである。サル抗 体は、好ましくはＨＩＶ感染の有効なモデルが達成された動物中に産生ずる。モ ノクローナルヒト又はサル抗体は、例えばＧ１１ｌｉｅｓ　ｅｔ　ａｌ、。

Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、７　（８）　ニア９９−８０４゜１９８９；Ｎａ ｋａｔａｎｉ　ｅｔ　ａｌ、。

Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、７　（８）：８０５−８１０に記載されているよ うな、例えば抗体産生のためのマウス骨髄腫細胞のヒト又はサルＤＮＡによるト ランスフェクシヨンを含めた公知の技法によって産生じ得る。

したがって、放射性核種、例えばビスマス−２１２又は別の定範囲α線放出物と 、あるいは逆転写酵素の阻害剤に結合した複合物ＨＩＶ抗体製剤は、ＡＩＤＳ患 者を有効に治療するために放射性核種又は薬剤の治療用量で用い得る。

その他の疾患も全身的化学療法に対して耐性又は免疫性であることが立証されて いる。これらの例としては、種々のウィルス、カビ、細菌、及び原生動物感染、 並びに特定の寄生虫感染が挙げられる。その他のウィルス感染としては、インフ ルエンザウィルス、ヘルペスウィルス、例えばエプスタイン−バールウィルス及 びサイトメガロウィルス、狂犬病ウィルス（Ｒｈａｂｄｏｖ　ｉ　ｒ　ｉ　ｄａ 　ｅ）　、並びにパポーバウイルスによって引き起こされる感染が挙げられるが 、これらはすべて、全身性抗生物質／細胞毒剤での治療が困難である。このよう なウィルスを標的化するための抗体結合体、特に抗体／断片複合物の結合体の使 用により、抗ウィルス剤及び前管＝−量方有意に高い治療指数が提供され、した がってその効率が増強されて、全身性副作用が低減される。抗体／断片及び／又 は治療放射性同位体（熱中性子で活性化可能なホウ素アダンドを含む）とのその 複合物の結合体による標的化ラジオイムノセラビーは、抗ウイルス療法に新規の アプローチを提供する。

全身性化学療法に相対的に耐性の原生動物としては、例えばプラスモデューム（ 特にＰ、ｆａｌｃｔｐａｒｕｍ、マラリア病原虫）、トキソブラスマゴンディ（ トキソプラスマ症感染因）、リーシュマニア（リーシュマニア症の感染刃）、及 びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａが挙げられる。種々の段階 におけるマラリアの検出及び治療は、本発明の抗体／断片結合体を用いて有意に 増強される。上記のように、スポロゾイト抗原と結合するＭ　Ａ　ｂ　ｓが公知 である。しかしながら、スポロゾイト抗原は血液段階寄生虫によって保有されな いために、標的化のためのスポロゾイト抗原に対するＭＡｂｓの使用は、注入の そして宿主の肝細胞中に発現する前及び直後のスポロゾイトが循環中に存在しな いかなり短期間に限定される。したがって、慣用的化学療法に反応しないヒトに おけるマラリアのより有効な治療のための標的剤として、例えば一つ以上の寄生 虫段階のＰ、ｆａｌｃｉｐａｒｕｍに対してＭＡｂｓの混合物又はＭＡｂ複合複 合層いるのが好ましい。ＭＡｂｓを、画像形成するのに好適な放射性核種（例え ばＴｃ−９９ｍ）、又は治療に適した放射性核種（例えばアスクチン−２１１； レニウム−１８６）と、あるいはより選択的な治療のために抗マラリア剤（例え ばピリメタミン）と結合する。

トキソプラスマ症も全身性化学療法に耐性である。Ｔ。

ｇｏｎｄｉｉと、又は天然の宿主抗体と特異的に結合するＭＡｂｓがトキソプラ スマ症に対する免疫応答においである役割を演じるか否かは明らかではないが、 しかしマラリア病原虫の場合のように、おおかたの標的ＭＡｂｓが治療剤の受け 渡しのための有効なビヒクルである。

広範に流行する寄生虫感染である住血吸虫症は、いくつかの淡水産巻貝が運搬す る自由遊泳ケルカリアにより発症する。マラリアの場合のように、異なる段階の ケルカリアが感染過程に関与する。複数段階のケルカリアと、任意に一つ又はそ れ以上のその上の複数のエピトープと、そして好ましくは身持異性複金物の形態 で結合するＭＡｂｓは、有効な標的化、及び治療効率の増強のために、画像形成 剤又は治療剤と結合し得る。

一つ又はそれ以上の形態のシャーガス病の原因であるＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａ　 ｃｒｕｚｉと結合するＭＡｂｓを作製し、この微生物感染の検出及び治療のため に用いる。細胞表面糖蛋白質と反応する上記のＭＡｂｓ、並びに分化段階のトリ パノゾーマ上のその他の表面抗原と反応するＭＡｂｓは、身体の寄生虫浸潤部位 に対する画像形成剤及び治療剤に当てるのに適している。

市販の薬剤では治療が非常に困難な別の感染性生物は、らい病杆菌（Ｍｙｃｏｂ ａｃｔｅｒｉｕｍ　１ｅｐｒａｅ）である。

Ｍ、Ｉｅｐｒａｅの表面上の複数のエピトープと特異的に結合する抗体は、例え ばマウスに弱毒化又は断片化Ｍ。

１ｅｐｒａｅ又はその表面抗原を投子して作製し得るし、これらは、単独又は組 み合わせて、画像形成剤及び／又は抗生物質／細胞毒剤を杆菌に対する標的にす るために用い得る。

化学療法剤に対してそれ自体相対的に抗治療性である寄生虫感染、例えば糞線主 従及び旋毛主従は、寄生虫上の一つ、又は好ましくは複数のエピトープと特異的 に結合する抗体を用いる本発明の抗体標的化診断及び治療に適した疾患候補であ る。

前記で説明したように、そして参考文献に引用したように、ヒトにおける大多数 の感染に関与する微生物及び寄生虫の殆どと特異的に結合する抗体は、入手可能 であるか、又は容易に産生じつる。これらの多くは、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ診断の目 的で従来用いられており、本発明は、診断及び治療剤で感染部位を標的化するた めの抗体結合体の成分としてのその使用を示す。ヒト及び哺乳類の微生物病原体 及び無セキツイ寄生虫は、その種々の段階で発現される多様な抗原を有する複雑 な生活環を持つ生物体である。したがって、標的化療法は、異なる形態の抗原決 定基を認識する抗体結合体を、適切な治療法と結びついた混合物として又は身持 異性結合体として、組み合わせて用いる場合に最もよく作用し得る。同様の原理 は、画像形成剤、例えば放射性核種及び／又はＭＲＩ増強剤の結合による感染部 位の検出のためのＭＡｂ試薬の使用に適用する。

治療用放射性同位元素、薬剤、毒素、及びその他の細胞毒剤がその投与の副作用 として造血毒性を生じる程度までは、このような毒性を軽減又は防止し、骨髄産 生を刺激するための有効量のサイトカイン、特にリンホカイン又はその他の成長 因子の投与は育益であり、本発明の一部である。このような投与は、共に譲渡さ れ、同時係属中の米国特許出願第１７４，４９０号（この記載内容はすべて、参 照により本明細書中に含めるものとする）に開示されているものと同様に実施す る。

さらに詳論しなくても、当業者は、前記の説明を用いて本発明を十分に用い得る と考えられる。したがって、以下の好ましい実施例は、本発明を説明するだけの ものであって、本発明を限定するものではない。

実施例 以下の実施例において、温度はすべて、摂氏に逆修正して説明する。別記しない 限り、部及びパーセンテージはすべて重量ＨＩＶ−ｇｐ１６０に対する特異蜂１ ウスモノクローナル抗倦 マウスを、ＨＩＶ−１のｇｐ１６０エンベロープ前駆体蛋白質で高度免疫化する 。高度免疫化動物からの膵臓リンパ球をＳ　Ｐ　２１０骨髄腫細胞と融合し、融 合細胞をミクロ滴定プレートウェル中のＨＡＴで希釈する。１０日後、増殖中の ハイブリラドを含有するウェルからの上澄をｇｐ１６０との反応性に関してＥＬ ＩＳＡにより試験する。次にｇｐ１６０と反応するモノクローナル抗体を含有す るウェルを、ＨＩＶ−１工ンベロープ蛋白質ｇｐ１２０及びｇｐ４１　（ｇｐ１ ６０産生物）との反応性に関してスクリーニングする。血清陽性ＡＩＤＳ患者か らのヒト血清中の抗体によってブロックされないｇｐ１６０に特異的なりローン をサブクローン化する。高特異性及び親和性を有する４つのクローンのうち、少 なくとも２つは、別のもの（以後、集合的にＭ　Ａ　ｂ　−１５Ｑ　ｓ、そして 個々にＭＡｂ−１６０ｓｌ、ＭＡｂ−１６０ｓ２、ＭＡｂ−１６０ｓ３、ＭＡｂ １６０ｓ４とする）の存在下でＨＩＶと結合し、各々培養中で展開し、Ｂａ１ｂ −ｃマウスにおいて腹水液を生成するために用いる。各ＭＡｂ−１６０ｓを、蛋 白ｉＡ上での親和性クロマトグラフィーによって腹水液から精製する。クローン は、ｒｇＧｌ、サブクラスのものであることを測定し、結合体を調製するために 使用する。

その他のＨＩＶ−抗原に対するモノクローナル抗体は、有意血液レベルの抗原、 又は抗ＨＩＶモノクローナル抗体の結合をブロックする有意血液レベルの抗体を 有しない患者に用い得る。

実施例２ ９９ｍ−Ｔｃ−ＭＡｂ−１６０ｓｌ−ＦＡｂ’　画像形成剤の調製 実施例１で調製した精製ＭＡｂ−１６０ｓｌを、ペプシンでＦ　（ａ　ｂ’　） 　２断片に変換し、そして二価断片をシスチンで還元してＦａｂ”に変換する。

ゲル濾過によってシスチンを除去後、Ｆａｂ’　を緩衝化還元剤、好ましくはＳ 　ｎ　Ｃ１２と混合し、凍結乾燥する。凍結乾燥したＭＡｂ−１６０ｓｌ−Ｆａ ｂ’　を含入するバイアルに滅菌塩水中の２０　ｍ　Ｃｉの９９ｍ−Ｔｃペルテ クネテートを添加して患者に注射する直前に、９９ｍ−Ｔｃ−ＭＡｂ−１６０ｓ −ＦＡｂ’　を調製する。

実施例１で調製した精製ＭＡｂ−１６０ｓｌ及びＭＡｂ−１６０ｓ２を、各々実 施例２の記載のようにＦａｂ’断片に変換する。ＭＡｂ−１６０ｓ２断片のチオ ール基をヨードアセトアミドでキャップし、キャップ化断片をマレイミドヒドロ キシスクシンイミドｐ−ニトロ安息香酸エステルで誘導し、その断片をゲル濾過 により別々に精製する。精製断片を別のものと反応させてｇｐ−１６０抗原に対 して二重の特異性を有する化学的結合した二価複合物を生成する。その複合物を クロラミン−Ｔ法によってｌ−１３１で放射性ヨウ素化して、１８０ｍＣｌ／用 量の活性を達成する。

２４歳の男性患者をＡＺＴで処置すると、薬剤耐性になり、血液中にＨＩＶ−ｐ ２４抗原を発現する。彼は倦怠感を示し、毎日悪寒及び発熱を有する。実施例２ で調製した画像形成剤を用いて、免疫シンチグラフ試験を実施する。１ｍＨの凍 結乾燥Ｆａｂ’　を倉入するバイアルに、ＰＢＳ中の２０ｍＣｉの発生器で生成 したナトリウムペルテクネテートを添加する。５分後、画像形成剤を注入し、３ 時間後に患者を５ＰＥＣＴ／モードのガンマカメラでスキャニングする。結合Ｔ ｃ−９９ｍの強病巣が、多数のリンパ節及び膵臓中に観察される。

その他のウィルス感染の同様の検出及び画像形成は、放射能標識した単−抗体又 は多抗体、あるいはＭＨＩエンハンサ−標識化結合体を用いて、前記実施例で説 明した一般的方法によって実施し得る。

実施例４の患者に、実施例３にしたがって標準用量のアリコートから調製した１ ３１−１−ＭＡｂ−１６０ｓｌ＋２−Ｆ（ａｂ’）２の５ｍＣｉ線量注入を施す 。ガンマカメラを用いた平面画像形成は、９９ｍ−Ｔｃ−ＭＡｂ−１６０ｓ−Ｆ ａｂ’で画像形成された同一部位のｒ−１３１の強度の蓄積を示す。

血液薬物動態は、患者が１８０ｍＣ１の放射性ヨウ素化ＭＡｂで安全に処置され 得ることを示す。彼に、１８０ｍＣｉの１３１−Ｉ　−Ｍ　Ａ　ｂ　１６０　ｓ 　１　＋　２　Ｆ　（ａ　ｂ　’　）　２を注射する。次の２週間に、ｐ２４− ＨｒＶ抗原の血液レベルは急速に低下し、３週間後、抗原は検出できない。９９ ｍ−Ｔｃ−ＭＡｂ−１６０ｓ−Ｆａｂ’　を用いた４時間後の第二画像形成試験 は離性であって、リンパ節又は膵臓中に結合Ｔｃ−９９ｍの局在化を示せない。

この時点で、患者は熱の低下を伴うその他の改善の徴候を示す。

同様の抗ウイルス治療結合体は、前記実施例で説明した一般的方法を用いて、そ の他のウィルス感染の治療用に作製し得る。

実施例６ 抗マラリア抗体 マウスを、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ　ｆａｌｃｉｐａｒｕｍからのメロゾイトで高 度免疫化する。高度免疫化動物からの膵臓細胞をＳ　Ｐ　２１０骨髄腫細胞と融 合し、融合細胞をミクロ滴定プレートウェルにおいてＨＡＴで希釈する。１０日 後、増殖中のハイブリッドを含有するウェルからの上澄を、ｌ−１２５−標識化 ウサギ抗マウスＩｇＧを用いて、グルタルアルデヒドによりポリアクリルアミド ビーズと結合するメロゾイトとの特異的結合に関して試験する。メロゾイト結合 モノクローナル抗体を含有するウェルからのハイブリドーマクローンをサブクロ ーン化する。２０個の陽性クローンの内の３つは、各々別のもの（以後、集合的 に！−ｍａｒ−ＭＡｂ、そして個々に１−ｍａｒ−ＭＡｂｌ、ｇ−ｍａｒ−ＭＡ ｂ２、及びｉ−ｍｅｒ−ＭＡｂ３とする）の存在下でメロゾイトと結合し、各々 培養中で展開し、Ｂａ１ｂ−ｃマウスにおいて腹水液を生成するために用いる。

各ａ−ｍａｒ−ＭＡｂを、蛋白質Ａ上での親和性クロマトグラフィーによって腹 水液から精製する。クローンは、ＩｇＧ１サブクラスのものであることを測定し 、結合体を調製するために使用する。

全く同様の経路によって、Ｐ、ｆａｌｃｆｐａｒｕｍスポロゾイトと特異的に結 合する３つのクローン（以後、集合的にａ−ｓｐｏ−ＭＡｂ、そして個々にａ　 −ｓｐａ−ＭＡｂｌ、１−ｓｐｌ−５ｐｏ−、及びｇ−ｓｐｏ−ＭＡｂ３とする ）を作製し、展開して、腹水生成モノクローナルを精製する。それらも、ＩｇＧ 、サブクローンのものであることを測定する。

実施例６にしたがって調製した精製ａ　−ｍａ　ｒ−ＭＡｂｓ及びｓ−ｓｐａ− ５ｐｏ−を、各々実施例２の手順と同様に、ヘフシンでＦａｂ’　断片に変換し 、シスチン還元し、その後その断片を過剰のヨードアセトアミドでキャップする 。水性溶液。

ｐＨ４，５中の６つの異なるキャップ化Ｆａｂ“断片の等モル混合物に５０倍モ ルの過剰のグルタルアルデヒドを添加し、約５〜１５分後に、３０倍モルまでの 過剰のピリメタミンを添加して（各々、抗体断片のモル総数に対して）、その混 合物を３７℃で６時間インキュベートする。その結果生じる結合体は、結合体分 子当たり、平均２〜３Ｆａｂ”断片、及び５〜１０ピリメタミンを有する。結合 体を、短ポリアクリルアミドゲルカラム上で低分子試薬から遊離し、滅菌濾過す る。

Ｐ、ｆａｌｃｉｐａｒｕｍマラリアの後期発作に罹患し、悪寒及び発熱を示す患 者に、生理食塩水中の実施例７の抗マラリア結合体の溶液を注入する。メロゾイ トの血中レベルの急速な低下が観察され、悪寒及び発熱が２〜３時間以内に低減 する。

患者の肝臓は、メロゾイト結合体複合体及び非複合結合体を受け入れ、この両方 がスポロゾイトにピリメタミンを放出し、これによって発作の再発を阻害する。

さらに、ピリメタミンとの５ｃｈｉｆｆ塩基結合の緩徐な加水分解性切断が薬剤 の血漿レベル延長を生じ、これが感染の抑制的治療をもたらす。患者の血液を頻 繁に監視すると、最適薬剤レベル及び治療効果を達成するように注入を調節し得 る。

トキソブラスマ症原生動物抗原、住血吸虫抗原、トリパノゾーマ抗原、細菌、カ ビ、及びその他の微生物又は寄生虫抗原と結合する薬剤又は放射性核覆の単−又 は多抗体／断片結合体を用いる同様の結合体は、当業者には考え得る方法での前 記説明の方法の変法により産生じ得るし、このような病原体によって引き起こさ れる感染は、これらの結合体を用いて治療し得る。

実施例９ らい菌　Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　１ｅｐｒａｅに対する特異的モノクロー ナル らい病杆菌と特異的に結合する一連のモノクローナル抗体を、Ｍｙｃｏｂａｃｔ ｅｒｉｕｍ　１ｅｐｒａｅを音波破砕し、その結果生じる膵臓細胞を融合し、次 いで増殖中のハイブリッドを含入するウェルからの上澄をフルオレセインと結合 させ結合体を固定Ｍ、１ｅｐｒａｅとともにインキユベートシ、洗浄して、Ｕ、 Ｖ、光線下で結合抗体を検出することによって杆菌とし一ノ の特異的結合に関してクローンをスクリーニング産生する。

４つの陽性クローンをサブクローン化し、展開させて、腹水生成抗体を実施例１ と同様の手順によって精製する。

実施例１０ らい病治療結合体の調製 実施例９にしたがって産生じた４つのモノクローナル抗体の混合物を、過ヨウ素 酸塩で静かに酸化させて、炭水化物領域の平均１個の糖残基を切断する。平均２ ０個のカーボランと結合するアミノデキストランを酸化抗体と反応させて、５ｃ ｈｉｆｆ塩基結合体をホウ水素化物で安定化する。その結果生じる結合体を実施 例３と同様の手順でｌ−１３１で放射性ヨウ素化し、７０　ｍ　Ｃｉ　／用量の 活性を達成する。

急性、散在性らい病に罹患し、高熱及び多数の皮膚病変を示し、慣用的化学療法 に抗治療性であった患者に、生理食塩水中の７０　ｍ　Ｃｉ用量の実施例１０に したがって生成した結合体を静脈内注入する。熱がしだいに下がり、皮下病変及 びその他の病巣部位での結合体の局在化がガンマシンチグラフで検出される。５ 日後、非局在化結合体を実質的に除去、排泄するが、しかし感染の病変及び病巣 は依然として結合結合体を含有する。

次に、患者をシンチグラフィーで検出された病変及び病巣に焦点を当てた平行化 熱中性子線に暴露する。次週内に、病変部位に有意の壊死が観察され、病変の境 界で組繊の再生が開始する。

次に、慣用的化学療法を再開すると、さらに改善が認められ、患者を結果的に首 尾よく処置し得る。

その他の記載された反応体及び／又は本発明の操作条件を前記実施例で用いたも のに取り換えることにより、前記実施例を繰り返して同様の成功を収め得る。し たがって、その他のヒト疾患を引き起こす病原体及び／又はそれらの抗原、例え ば任意のその他の本明細書中に列記して説明した病原体に対する抗体を産生じ、 本発明の画像形成及び治療薬中に組み込み得るし、患者に上首尾の診断及び治療 結果を達成し得る。

前記の説明から、当業者は本発明の本質的特徴を容易に確認し得るし、本発明の 精神及び範囲から逸脱しない限り、種々の用途及び条件に種々の変更及び修正を 適用し得る。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）平成４年２月２４日

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. １． （ａ）単一種の病原体又はそれに由来する抗原上のエピトープと結合する抗体又 は抗体断片；あるいは（ｂ）単一種の病原体又はそれに由来する抗原上の複数の エピトープと結合する複数の化学的結合抗体又は抗体断片の免疫活性複合物 であって、少なくとも１つの診断又は治療薬と結合して抗体結合体を形成する上 記抗体又は抗体断片、あるいは複合物を、医薬的に許容可能な滅菌注入ビヒクル と組み合わせて含有する、ヒト患者の感染病巣を標的にする滅菌注入可能製剤。
2. ２．感染病巣の診断又は治療の方法に用いるための薬剤の調製における、 （ａ）単一種の病原体又はそれに由来する抗原上のエピトープと結合する抗体又 は抗体断片；あるいは（ｂ）単一種の病原体又はそれに由来する抗原上の複数の エピトープと結合する複数の化学的結合抗体又は抗体断片の免疫活性複合物 であって、少なくとも１つの診断又は治療薬と結合して抗体結合体を形成する上 記抗体又は抗体断片、あるいは複合物の使用であって、病原体に感染した患者に 上記抗体結合体を非経口的に注入し、結合された診断又は治療薬が上記病巣を標 的にし、それによってその診断又は治療機能が作用する該使用。
3. ３．上記診断又は治療薬が、放射性同位元素、磁気共鳴画像増強剤、治療用放射 性同位元素、ホウ素アデンド、抗病原体剤、又は細胞毒剤から成る群から選択さ れる、請求項１又は２記載の製剤又は使用。
4. ４．上記抗体結合体が、患者の生得抗体によって飽和又は遮断されない上記病原 体又は病原体関連抗原の１つ又は複数の接近可能なエピトープと特異的に結合す る、請求項１又は２記載の製剤又は使用。
5. ５．上記抗体、あるいは抗体断片がモノクローン抗体又はその断片である請求項 １又は２記載の製剤又は使用。
6. ６．上記免疫活性複合物結合体が抗血清の結合体である請求項１又は２記載の製 剤又は使用。
7. ７．上記抗血清が、患者の血流中に有意レベルで循環する上記病原体に関連する 抗原と結合する抗体の除去；及び／又は結合病原体又は病原体関連抗原との接触 と、その後の、上記病原体又は病原体関連抗原と結合する抗体を豊富に含有する 抗血清の回収によってアフィニティー精製される請求項６記載の製剤又は使用。
8. ８．上記病原体が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヘルペスウイルス、サイ トメガロウイルス、狂犬病ウイルス、インフルエンザウイルス、Ｂ型肝炎ウイル ス、センダイウイルス、ネコ白血病ウイルス、レオウイルス、ポリオウイルス、 ヒト血清バルボ様ウイルス、シミアンウイルス４０、ＳＲウイルス、マウス乳癌 ウイルス、水痘・帯状庖疹ウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、はしか ウイルス、アデノウイルス、ヒトＴ細胞白血病ウイルス、エプスタイン−バール ウイルス、マウス白血病ウイルス、おたふくかぜウイルス、水庖性口内炎ウイル ス、シンドビスウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、いぼウイルス、及び ブルータングウイルスから成る群から選択されるＲＮＡ又はＤＮＡウイルスであ る、請求項１又は２記載の製剤又は使用。
9. ９．上記病原体が、ストレプトコッカス・アガラクティエ菌、レジュネラ・ニュ ーモフィラ菌、化膿連鎖球菌、大腸菌、淋菌、髄膜炎菌、肺炎球菌、Ｂ型インフ ルエンザ菌、梅毒トレポネーマ、ライム病スピロヘータ、緑膿菌、らい菌、ウシ 流産菌、ヒト結核菌、及び破傷風菌から成る群から選択される細菌である請求項 １又は２記載の製剤又は使用。
10. １０．上記病原体が、熱帯熱マラリア病原虫、三日熱マラリア病原虫、Ｔｏｘｏ ｐｌａｓｍａ　ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ　ｒａｎｇｅｌｉ、Ｔｒ ｙｐａｎｏｓｏｍａ　ｃｒｕｚｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ　ｒｈｏｄｅｓｉｅ ｎｓｅｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ　ｂｒｕｃｅｉ、マンソン住血吸虫、日本住 血吸虫、Ｂａｂｅｓｉａ　ｂｏｖｉｓ、Ｅｌｍｅｒｉａｔｅｎｅｌｌａ、回旋糸 状虫、熱帯リシュマニア、旋毛虫、Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ　ｐａｒｖａ、胞状条虫 、Ｔａｅｎｉａｏｖｉｓ、無鉤条虫、単包条虫、及び Ｍｅｓｏｃｅｓｔｏｉｄｅｓ　ｃｏｒｔｉから成る群から選択される原生動物で ある請求項１又は２記載の製剤又は使用。
11. １１．上記病原体が蠕虫又はマラリア寄生虫である請求項１又は２記載の製剤又 は使用。
12. １２．上記病原体が、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａａｒｔｈｒｉｔｉｄｉｓ、Ｍ．ｈｙ ｏｒｈｉｎｉｓ、Ｍ．ｏｒａｌｅ、Ｍ．ａｒｇｉｎｉｎｉ、 Ａｃｈｏｌｅｐｌａｓｍａ　ｌａｉｄｌａｗｉｉ、Ｍ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｍ、 及び肺炎マイコプラズマから成る群から選択されるマイコプラズマである請求項 １又は２記載の製剤又は使用。
13. １３．２〜７２時間内に１０〜８５％まで患者の循環中の上記結合体の量を低減 するのに十分な量で、上記結合体と特異的に結合する第２抗体を別個の製剤とし て医薬的に許容可能な滅菌注入ビヒクルと組み合わせてさらに包含する請求項１ 記載の製剤。
14. １４．上記結合体と特異的に結合する第２抗体を上記薬剤を調製するために別個 の製剤として用い、上記方法において、上記感染の部位での上記結合体の取り込 みを最適化するのに十分な上記結合体の投与後の時点で、２〜７２時間内に１０ 〜８５％まで患者の循環中の上記結合体の量を低減するのに十分な量の第２抗体 の上記別個の製剤を上記患者に投与する請求項２記載の使用。
15. １５．上記治療薬がその投与の副作用として増血毒性を引き起こす抗生物質又は 細胞毒性剤であり、別個の製剤としてサイトカインをさらに含有し、そして上記 方法において、上記薬剤の増血毒性を軽減又は防止するのに十分な量の上記サイ トカインが、上記治療用結合体投与の前、同時、又は後の時点で上記患者に投与 される請求項１記載の製剤。
16. １６．上記薬剤を調製するために別個の製剤としてサイトカインを用い、そして 上記方法において、上記薬剤の増血毒性を軽減又は防止するのに十分な量の上記 サイトカインを、上記治療用結合体投与の前、同時、又は後の時点で上記患者に 投与する請求項２記載の使用。
17. １７．病原体に感染した患者に、感染の上記病巣に付着した上記病原体又は病原 体関連抗原の１つ又は複数の接近可能なエピトープと特異的に結合する単一特異 性又は多特異性抗体結合体を非経口的に注入することを包含し、上記抗体結合体 が上記感染を検出、造影、又は治療するための結合診断又は治療剤をさらに含有 する、感染病巣を診断又は治療剤の標的にする方法。