JPH04503663A

JPH04503663A - 避妊方法とその組成物

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Publication number: JPH04503663A
Application number: JP1509719A
Authority: JP
Inventors: ミア，アブダス・エス
Original assignee: ピットマン―ムーア・インコーポレイテッド
Priority date: 1988-09-29
Filing date: 1989-09-07
Publication date: 1992-07-02
Anticipated expiration: 2016-06-11
Also published as: AU4218689A; EP0437450A1; US5519002A; AU625561B2; WO1990003182A1; US5036047A; JP3176051B2; NZ230820A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】妊　法とその組成物本発明は避妊方法とその組成物、特に哺乳動物の避妊のための黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）およびその類似体を用いた方法と組成物に関する。

主更生！量黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲ）ｆ）は視床下部により分泌され下垂体に運ばれ、ここで卵胞刺激ホルモンと黄体形成ホルモンの分泌を刺激し、ついでこれらが卵胞発達、卵胞から黄体への転化、翠丸における精細管の発達およびプロゲステロンとテストステロンの産生を刺激する。従って、ＬＨＲＨの放出は女性では排卵と黄体形成、男性では精子形成をひき起こす。

ＬＨＲＨは下記の構造を有するデカペプチドであり：ｐＧ］ｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ −３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２、慣例によれば、前記式中の各アミノ酸のアミノ基は左に、カルボキシル基は右にあり末端Ｇｌｙのカルボキシル基の水酸基がＮＨ２基に置換されている。

アミノ酸の協定略語は以下のとおりである：Ｇｌｕ　（グルタミン酸）、ｐＧｌｕ　（ピログルタミン酸）、Ｈｉｓ　（ヒスチジン）、Ｔｒｐ　（）リプトファン）、Ｓｅｒ　（セリン）、Ｔｙｒ　（チロシン）、Ｇｌｙ（グリシン）、Ｌｅｕ　（ロイシン）、Ａｒｇ　（アルギニン）、Ｐｒｏ　（プロリン）、Ｌｙｒ　（リジン）、Ｃｙｓ（システィン）、光学中心のないグリシンを除いた全アミノ酸は特に指示のない限りＬ配置体である。

ＬＨＲＨは米国特許第４．１５９．９８０号と第４．２１３．８９５号に記載の方法で産生できる。

米国特許第３．８８０．８２５号、　３．９４１．７６３号、　４．０３４．０８２号；　４．０７２．６６８号；　４．０７５．１９２号；　４．１４３．１３３号；　４．１４３゜１３６号；　４．２１１．７６９号、　４．２３４．５７１号；および４．２６３．２８２号はＬＨＲＨ作動薬あるいは拮抗薬として作用するＬＨＲＨ類似体を開示している。米国特許第４．０１０．２６１号は、生殖周期に作用する体重１−当たり２〜２００ｍｇのＬＨＲＨ類似体の動物への投与を開示している。

ＬＨＲＨとその類似体は有望な受精抑制剤として研究されてきた。遊離ＬＨＲＨあるいはその作動薬を頻繁に比較的高用量で投与すると、避妊作用を呈する〔Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ（避妊）、２４　：　６４７−６５５（１９８１）およびＦｅｒｔｉｌｉｔｙ　５ｔｅｒｉｌｉｔｙ（妊娠と不妊）　、３８　：　１９０−１９３（１９Ｂ２）　）。

また、強力な拮抗薬の反復投与も避妊剤として用いられる。ＬＨＲＨとその作動薬は下垂体の感受性低下高用量のＬＨＲＨおよびその作動薬あるいは拮抗薬類似体の避妊その他の抗生腺刺激ホルモン作用は即効性であるが持続時間が短く、頻繁な投与を必要とする。

従って、これらはそれ自体では獣医用あるいは野性動物用の実用にはならない。

加えて、大量の類似体が望ましくない有害な副作用をひき起こす場合もある。

担体タンパク質と結合したＬＨＲＨあるいはその適当な類似体もＬＨＲＨの宿主抗体形成を誘発する抗原として動物に投与できる；抗体はその後生体自身のＬＨＲＨに対して作用する。このようにして長期拮抗作用が確立される。ＬＨＲＨあるいは種々のＬ　ＨＲＨ１ｉ似体の抗原としての使用は文献に記載されている：アリムラら、Ｅｎｄｏｃｒ　ｉｎｏ　ＩｏｄＬ、９３　：　１０９２−１１０３（１９７３）　１Ｆｒａｓｅｒら、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＥｎｄｏｃｒｉｎｄｏｄＬ、６３　：　３９９−４０６（１９７４）　；　Ｊｅｆｆｃｏａｔｅら、Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅａ＋１ｓｔｒＬ、Ｖｏｌ、１１．ｐ。

７−５〜７７（１９７４）　；　Ｃ１ａｒｋｅら、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏ旺、７８　：　３９−４７（１９７８）　ｉ　Ｊｏｈｎｓｏｎ　ら、Ａｎｉｍａｌ　５ｃｉｅｎｃｅ、　６６　：　７１９−７２６（１９８８）、Ｆａｌｖｏ　ら、Ａｎｉｍａｌ　５ｃｉｅｎｃｅ、６３：９８６−９９４（１９８６）　；Ｐｉｑｕｅら、Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒ　５Ｖｏ１．１５、ｐ、５５−６０（１９７８）　；　５ｔｅｖｅｎＳ　ら、Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＲｅ　ｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏ　、　１　：　３０７　３１４（１９８１）　；および米国特許第３．９６３．６９１号。米国特許第４．６０８．２５１号は抗ＬＨＲＨ抗体刺激に有用なＬＨＲＨ類似体とこのような類似体を用いたワクチンを開示している。

ＬＨＲＨあるいはこの類似体は通常免疫原性担体と結合した後ワクチンとして哺乳動物に投与され免疫系を刺激しＬ　ＨＲＨと反応してその体内濃度を効果的に減じる抗Ｌ　ＨＲＨ抗体を産生ずる。こうして女性における排卵と黄体形成、男性における精子形成を含むＬＨＲＨの存在に起因する作用を滅弱あるいは消失させる。このようにＬＨＲＨあるいは類似体により誘発された抗ＬＨＲ）（抗体は体内ＬＨＲＨ量を減らすことにより効果的に妊娠を妨げる。

しかし本技法は注射後の最初の期間、期間の長さは様々であるが、完全に避妊に有効ではない。妊娠を妨げうる水準までＬＨＲＨＩ度を減じるに足る量の抗体産性には一般に約４〜６週間あるいはそれ以上かかる。

この遅延期間中に望まれない妊娠が起こりうる。従って、誘発された抗体の代謝寿命中と同様に遅延期間中も妊娠を妨げうる方法が必要である。このような方法は、特に飼いならされた／迷い出たベットや野性動物の望まれない妊娠の避妊法として必要である。

現在米国には４３００万匹の犬と３１００万匹の猫がおりその数は日々増加している。スカンクやアライグマのような野性動物に加えて迷い犬や迷い猫が家畜や人間への狂犬病の主たる感染源であることが知られている。

卯巣摘出や精巣摘出などの生殖器官の外科的除去はこのような動物の繁殖防止に現在一般的に用いられている方法である。しかし手術は比較的費用がかかり、時間を費し、野性動物や迷った動物については実用的ではない。公園や森林保護区域の鹿や馬を含めた野性動物の爆発的な数の増加を防止するため実用的で認容できる野性動物と放し飼い動物の出産制限が必要である。

光盟■盪！従って、本発明の一つの目的は哺乳動物の避妊方法を提供することである。

本発明のもう一つの目的は哺乳動物の避妊のための組成物を提供することである。

本発明のもう一つの目的は哺乳動物の避妊に有用なキットを提供することである。

本発明のもう一つの目的は組成物投与直後に有効となる哺乳動物の避妊方法を提供することである。

本発明のもう一つの目的は長期間の哺乳動物の避妊方法を提供することである。

本発明のもう一つの目的は可逆的な哺乳動物の避妊方法を提供することである。

本発明のもう一つの目的は従来技術のワクチン法の特徴である遅延期間中の補乳類の避妊方法を提供することである。

上記およびその他の目的は、（１）遊離ＬＨＲＨあるいは類似体と（２）タンパク質とＬＨＲＨあるいはその類似体間の免疫原性複合体を含む組成物の哺乳類への投与により達成される。

好ましい具体例では、遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と免疫原性複合体を米国特許第４．６０８．２５１号で開示されるような「ワクチン」として投与する。

「ワクチン」投与から複合体に反応して産生じた抗ＬＨＲＨ抗体が避妊に足る量となるまでの「遅延」期間中の避妊に足る量のＬＨＲＨあるいはその類似体をワクチン製剤に組み込むことを除いて、「ワクチン」は参照特許に開示されるように調製する。一般的には、遊ＭＬＨＲＨあるいばその類似体と複合体の「ワクチン」（注射用製剤）は遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体を体重１　ｋｇあたり約０．１〜２■（■／　ｋｇ　）の用量と複合体約０．ＯＩ〜２■／ｋｇの用量を供するに足る量で　”遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体を含有する。

遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体は投与から約６週間までの間、哺乳動物で避妊作用を発揮し；免疫原性複合体は投与後約６週間から複合体に反応して形成されたＬＨＲＨ抗体が代謝されるまで、−ａに約０．５〜２年、避妊作用を発揮する。米国特許第４．６０８．２５１号に開示された油中水エマルジョンがワクチンのアジュバント（佐剤）として、また遊離ＬＨＲＨあるいはその類イ以体の徐放性賦形剤として作用する。

（１）遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質と次式のノナペプチド：Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒ　ｇ−Ｐ　ｒ　ｏ　− ＣＩ　）’−ＮＨ，あるいは次式のデカペプチド：Ｃｙｓ−Ｌ）ＩＳ−Ｔｒｐ−３ｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇａｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ −Ｇｌｙ−ＮＨ２あるいはその混合物間の複合体を含む組成物を哺乳動物に投与し最初の注射から約２−３年後までの期間避妊することが最も望ましい。

本発明のその他の目的、利点、および新規の特徴は下記の発明の詳細な説明で明らかにする。

ｌ豆夙祥貞星に所ここで用いられる「遊！ＬＨＲＨあるいはその類似体」という術語は、天然２合成９組み換えペプチドおよび削除、伸長、置換その他で変更されたアミノ酸配列をもつｍｕｔｅｉｎペプチドと、Ｌ　ＨＲＨｌｉ似体として機能する他の化合物を含むＬ　ＨＲＨ生物活性のある全ペプチドを包含する。

ここで、用いられるｒ　Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体」という術語は、天然２合成１組み換えペプチドおよび削除、伸長、置換その他で変更したアミノ酸配列をもつｍｕｔｅｊｎペプチドを含むＬＨＲＨ免疫原性のある全ペプチドを包含する。

本発明による哺乳動物における避妊方法は哺乳動物に（１）遊＃ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質とＬＨＲＨあるいはその類似体間の免疫原性複合体を含む組成物を投与することから成る。

複合体は哺乳類の免疫系がＬ　ＨＲ日と反応する抗体を産生ずるように誘導するＬ　ＨＲＨの免疫原として作用する。　Ｌ　ＨＲＨに対する免疫化はＬ　ＨＲＨと反応して男性および女性の内生的Ｌ　ＨＲＨ濃度を下げて妊娠を妨げる抗体を産生ずる。遊離ＬＨＲＨあるいはその作動薬類似体を比較的高用量で投与した場合、これは正規のＬ　ＨＲＨの作用に対する下垂体の感受性を低下させることにより避妊剤として作用する。

ＬＨＲＨ拮抗薬はＬ　ＨＲＨとその受容体を競合して有効り、　ＨＲＨ濃度を下げることにより不妊剤として作用する。

遊Ｍ　Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体は投与から約６週までの期間哺乳動物で避妊作用を発揮する；複合体は投与後約６週から複合体に反応して形成されたＬＨＲＨ抗体が代謝されるまで、一般には約０．５〜２年の期間避妊作用を発揮する。従って、遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体とＬＨＲＨあるいはその類似体の免疫原性複合体の併用は投与時から妊娠を妨げることができる；投与と避妊に充分な抗ＬＨＲＨ抗体の形成までの間の遅延期間中も妊娠は起こらない。

遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体はいずれの適当な供給源からでも得ることができ、すべて当業者周知である。たとえば、米国特許第４．１５９．９８０号と第４．２１３゜８９５号をここに文献として援用するが、これはＬＨＲＨあるいはその類似体の調製法を開示している。

天然および合成Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体を産生、単離、精製する他の方法は当業者周知である。

タンパク質とＬ　ＨＲＨあるいはその類似体から成る免疫原性複合体は、ここに文献として援用する米国特許第４，６０８．２５１号に開示される方法を用いて得られる。

ＬＨＲＨのようなペプチドからハブテン−キャリア複合体を産生ずる他の方法は当業者周知である。

遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体と複合体の用量は個々の哺乳動物と投与する化合物の年令、大きさ、特性により変動するが、一般的には遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体は体重１ｋｇあたり約０．１〜２■（■／ｋｇ）、中でも０．２〜１■／ｋｇが望ましいが、の用量で、また複合体は約０．０１〜２■／ｋｇ、中でも０．２〜１■／ｋｇが望ましいが、の用量で哺乳類に投与する。

化合物は１回投与で投与できるが、６〜８周間隔で２回投与で投与する方がより望ましい。

本発明による遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体と免疫原性複合体は、注射、インブラントの利用その他を含むすべての認容できる方法で哺乳動物に投与できる。

タイミングと投与に用いられる用量レベルの正確な調節ができることから、注射とインブラントが望ましい。

本発明によるＬＨＲＨあるいはその類似体と複合体は非経口的に投与することが望ましい。ここで用いられる非経口的投与とは静脈注射、筋肉注射、腹膜注射あるいは皮下インブラントを意味する。

遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体および免疫原性複合体は（１）米国特許第４．６０８．２５１号記載のように遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体と複合体を「ワクチン」で投与する、（２）米国特許第４．６０８．２５１号記載のように複合体を「ワクチンＪで投与し、遊ｍｌ、ＨＲＨあるいはその類似体を下記のように別の注射用製剤またはインブラントで投与する、（３）遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体と複合体を下記のように−・つの注射用製剤に調製することによって哺乳動物へ投与することが望ましい。

遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体を「ワクチン」投与から抗Ｌ　ＨＲＨ抗体力価が避妊に足る量となる時までの「遅延Ｊ期間中の避妊に足る量で米国特許第４．６０８．２５１号に開示された「ワクチン」に単純に組み入れることが最も望ましい。これは一般に、遊離Ｌ）（ＲＨあるいはその類似体と複合体を哺乳動物の体重に応じて遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体約０．５〜２００■と複合体約０．０５〜２００■を含有する油中水（Ｗｌｏ）エマルジョンに組み入れることを必要とする。遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と複合体の両方が連続的な油相に囲まれた顕微鏡的な水滴中に含まれる。このようにＷ１０エマルジジンは複合体のアジュバントとして、また遊＃ＬＨＲＨあるいはその類似体を投与後体内に徐放する放出調ｗＩ担体として働く。

注射として投与する場合、遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体および／あるいは免疫原性複合体は生物学的適合性と遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体および複合体適合性のある、種々の賦形剤、アジュバント（佐剤）、添加剤、希釈剤のような担体を含有する注射用製剤として哺乳動物に投与できる。

不揮発性発熱物質を含まない水、滅菌水、および静菌水等の水性賦形剤も注射溶液調製に適する。これらの水の形態に加えて、数種の他の水性賦形剤も使用できる。

これには塩化ナトリウム、リンゲル液、ブドウ糖、ブドウ糖と塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル液等の滅菌できる等張性注射用組成物が含まれる。

綿実油、ゴマ油、ビーナツツ油等の非水性賦形剤やミ１７７．チン酸イソプロピル等のエステルも本組成物の溶媒系として使用できる。

加えて、抗菌性保存剤、抗酸化剤、キレート化剤、緩衝側を含む組成物の安定性、無菌性、等張性を高める種々の添加剤を加えることもできる。しかし使用するいずれの賦形剤あるいは添加剤も生物学的適合性と本発明による遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と免疫原性複合体との適合性を持っていなければならない。

本発明による遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体は哺乳動物の皮下に挿入した徐放性皮下インブラントの形で哺乳動物に投与できる。

インブラントは哺乳動物に植えつけた後ゆっくりと溶解する丸薬の形か、当業者周知の生物学的適合性および哺乳動物適合性のある放出モジュールの形をとることができる。

このような周知の投薬形態は活性成分が数日から数週間に渡ってゆっくりと放出されるよう設計されており、比較的大量の遊離Ｌ　ＨＲＨが最初に放出され、時と共に減量されていくことが望ましい。インブラントは最初約０．００２〜０．０４■／ｋｇ１日、約０．００５〜０．０２■／ｋｇ／日が望ましいが、を放出するよう設計される。

インブラントは米国特許第４．６０８．２５１号によるワクチンを投与する時とほぼ同時に哺乳類に挿入すべきである。

要求されてはいないが、本発明の製剤は最初の４〜６週間に２回以上投与できる。

遊離Ｌ　ＨＲＨあるいはその類似体が避妊に足る濃度で体内に存在することを保証し、強い免疫反応を開始するに足る複合体があることを保証するため、製剤を３から６週間隔で２回投与することが望ましい。米国特許第４．６０８．２５１号によると、同用量の複合体を含む年−回の追加抗原刺激ワクチンが効果継続のために推奨される。

好ましい具体例では、（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質と次式のナノペプチド：Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ− Ａｒ　ｇ−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ｇ　ｌ　ｙ−ＮＨｚ　あるいは次式のデカペプチド：Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−３ｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｙ−Ｌ　ｅ　ｕ−Ａｒ　ｇ−Ｐ　ｒ　ｏ−Ｇ　ｌ　ｙ−ＮＨ２あるいはこの混合物間の免疫原性複合体を含む組成物を米国特許第４．６０８．２５１号に開示されるように哺乳動物に「ワクチン」で投与し、最初の注射から約２−３年間にわたり妊娠を妨げる。「ワクチン」は、遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体を、「ワクチン」投与から抗ＬＨＲＨ抗体力価が避妊に足るようになる時までの間に「遅延」期間中の避妊に足る量；一般的にはＬＨＲＨあるいはその類似体約０．　１〜２■／ｋｇと複合体的ｏ、ｏｉ〜２■／ｋｇでワクチン処方に組み入れることを除いて、特許に開示されているとおりに調製する。

遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と免疫原性複合体は別個に投与できるので、本発明は１つの包装内に別個の容器、（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質とＬＨＲＨあるいはその類似体間の免疫原性複合体、を入れたキットの形式をとる製造商品も企図している。本キットは、前記哺乳動物へ投与した時に遊１ｉ１ＬＨＲ）（約０．１〜２■／ｋｇ／口供給するに足る量の遊＠　Ｌ　ＨＲＨあるいはそのｍ１体と、複合体的０．１〜２■／ｋｇ／日供給するに足る量の複合体を含むものとする。

本発明による遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と免疫原性複合体は、各々短期（投与後Ｏ〜６週間）と長期（投与後６週間以上）の哺乳動物の避妊に用いられる。

ここでいう組成物、キットおよび方法は、遊離ＬＨＲＨおよび／あるいはその類似体の種々の配合物および混合物をＬＨＲＨおよび／あるいはその類似体の免疫原性複合体の種々の配合物および混合物と組み合わせて含むことも規定されている。

本発明を一般的に説明してきたが、下記の例を本発明の個別具体例として挙げその実践と利点を説明する。

実施例は実例として挙げるもので、明細書あるいはクレームをこの方法に従うように限定することを意図するものではない。

１施拠よ１群４〜５匹の若い成熟雌ラットに、表１に示すように、遊離ＬＨＲＨ，Ｌｙｓ −Ｔｒｐ−３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２（Ｌｙ　ｓ　ＬＨＲＨ）　、Ｌｙ　ｓ　ＬＨＲＨ−ＫＬＨ複合体、あるいはこれらの配合物を含む製剤０．２ｍｊｌ！を筋注した。

処置後２４〜４８時間以内に繁殖力のある雄ラットを処置雌と一緒に入れ１０５日間観察した。抗体力価測定のため、定期的に採血した。試験終了時に雌ラットを犠牲にし生殖器官を調べた。結果を表１に示す。

表１を見ると、第１群はＬＨＲＨが投与後６週間の期間では妊娠を妨げることを示し、第２群は避妊効果のないことを示し、第３群はＬＨＲＨとＬｙ　ｓ　ＬＨＲＨ−ＫＬＨ（ＬｙｓＬＨＲＨがＫｅｙｈｏＩｅ　Ｌｉｍｐｅｔ　Ｈｏｒｍ。

ｃｙａｎｒｎに結合した）複合体の併用は全試験期間中妊娠を妨げたことを示し、第４群はＬｙ　ｓ　ＬＨＲＨ−ＫＬＨは全ラットが妊娠した遅延期間以降の妊娠を妨げたことを示し、第５群は若干低用量のＬＨＲＨも避妊に有効である（第３群との比較）ことを示し、第６，７群は１／２用量と１／４用量（第３群との比較）も避妊に有効であることを示し、第８群はブラセポを用いた対照群である。

理論に縛られたくはないが、遊離Ｌ　ｙ　ｓ　ＬＨＲＨ（第２群）の避妊の失敗は、ＬＨＲ）（の免疫原性同一性は保たれているが、ピログルタミン酸の排除とヒスタジンからリジンへの置換によると思われる。第４群の全ラットが最初の６週間に妊娠し、その後妊娠しなかったことから、第２群における観察と同様のＬｙｓＬＨＲＨの生物活性の欠如と複合体の遅延期間の存在が確証された。

高用量のＬ）（ＲＨは頻繁な注射や一定注入で観察されるように、感受性を下げることによって妊娠を妨げる。油中水（Ｗｌｏ　）アジュバントの使用により頻繁な注射や一定注入に似たゆっくりした持続性延長型のＬＨＲＨの放出が可能になる。本発明は単回注射でＬＨＲＨの頻繁な注射や注入によるＬ　ＨＲＨに対する活性免疫化への協力効果が得られ、単回注射後長期間妊娠を妨げる。本実施例では油中水エマルジョン中のＬＨＲＨとＬｙ　ｓ　ＬＨＲＨ−ＫＬＨの併用しか用いられていないが、適当な強力ＬＨＲＨ類イ以体とその複合体の併用も同様に用いることができる。

Ｗ１０アジュバント中のＬｙ　ｓ　ＬＨＲＨ−ＫＬＨ複合体の注射後約４〜６週間が、避妊に足る抗ＬＨＲＨ抗体力価発生に必要な期間とみなされる。

上記教義にてらして本発明の斧くの変更や変動が可能であることは明らかである。

従って、添付クレームの範囲内で本発明は詳細に記載された以外の方法で実行可能である。

２　ＬｙｓＬＨＲＨＯ，５ｍｇ　４　４／４　４／４　正常−４／４ＬｙｓＬｔｌＲＨＯ，２５■＋４　ＬｙｓＬＨＲＨ−にＬＨ０，２５ｍｇ　４　４／４／　Ｏ／４　萎縮−４／４８　ＫＬＨ０，２５■　５　５１５　５１５　正常−５１５閑ａ膿審輻牛国際調査報告ＵＳ　８９０３８７０ＳＡ　３１０２８

Claims

【特許請求の範囲】

１．哺乳動物の避妊方法で、前記哺乳動物に（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質とＬＨＲＨあるいはその類似体間の免疫原性複合体から成る組放物を投与することから成る方法。
２．前記組成物が（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質と次式のノナペプチド：Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２あるいは次式のデカペプチド：Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｙ−Ｔｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙ−ＮＨ２あるいはこの混合物間の免疫原性複合体から成る請求項１記載の方法。
３．前記タンパク質がＫｅｙｈｏｌｅＬｉｍｐｅｔＨｅｍｏｃｙａｎｉｎである請求項１記載の方法。
４．前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体を約０．１〜２ｍｇ／ｋｇ／日量で投与し、前記複合体を約０．１〜２ｍｇ／ｋｇ／日量で投与する請求項１記載の方法。
５．前記組成物を非経口的に投与する請求項１記載の方法。
６．前記組成物を注射用製剤で投与する請求項５記載の方法で、前記注射用製剤が生物適合性と組成物適合性のある担体と避妊量の前記組成物を含む方法。
７．前記担体が油中水エマルジョンである請求項６記載の方法。
８．前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と前記複合体を別個に投与する請求項１記載の方法。
９．（１）前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体をインプラントを用いて投与する方法で、前記インプラントが生物適合性および遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体適合性のあるインプラント材料と避妊量の前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体から成り、（２）前記複合体を注射用製剤を用いて投与する方法で、前記注射用製剤が生物適合性と複合体適合性のある担体と避妊量の前記複合体から成る、請求項８記載の方法。
１０．（１）前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体を注射用製剤を用いて投与する方法で、前記注射用製剤が生物適合性と遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体適合性のある担体と避妊量の前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体から成り、（２）前記複合体を注射用製剤を用いて投与する方法で、前記注射用製剤が生物適合性と複合体適合性のある担体と避妊量の前記複合体から成る、請求項８記載の方法。
１１．（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質とＬＨＲＨあるいはその類似体間の免疫原性複合体から成る、哺乳動物の避妊用組成物。
１２．（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質と次式のノナペプチド：Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− ＮＨ２あるいは次式のデカペプチド：Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙ−ＮＨ２あるいはこの混合物間の免疫原性複合体からなる請求項１１記載の組成物。
１３．前記タンパク質がＫｅｙｈｏｌｅＬｉｍｐｅｔＨｅｍｏｃｙａｎｉｎである請求項１１記載の組成物。
１４．前記哺乳動物へ投与した時、ＬＨＲＨ約０．１〜２ｍｇ／ｋｇ／日を供給するに足る量の前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と、複合体約０．１〜２ｍｇ／ｋｇ／日を供給するに足る量の前記複合体を含む請求項１１記載の組成物。
１５．注射用製剤形態の請求項１１記載の組成物で、前記注射用製剤が生物適合性と組成物適合性のある担体と避妊量の前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と複合体からなる組成物。
１６．油中水エマルジョン中に前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と複合体を含む「ワクチン」形態の請求項１５記載の組成物。
１７．（１）前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体がインプラント形態で、前記インプラントが生物適合性と遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体適合性のあるインプラント材料と避妊量の前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体を含み、（２）前記複合体が注射用製剤形態で、前記注射用製剤が生物適合性と組成物適合性のある担体と避妊量の前記複合体を含む請求項１１記載の組成物。
１８．（１）前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体が注射用製剤形態で、前記注射用製剤が生物適合性と遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体適合性のある担体と避妊量の前記遊離ＬＨＲＨを含み、（２）前記複合体が注射用製剤で、前記注射用製剤が生物学的適合性と複合体適合性のある担体と避妊量の前記複合体を含む、請求項１１記載の組成物。
１９．一つの包装中別個の容器に（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質とＬＨＲＨあるいはその類似体間の免疫原性複合体を含むキット。
２０．前記哺乳動物へ投与した時、遊離ＬＨＲＨ約０．１〜２ｍｇ／ｋｇ／日を供給するに足る量の前記遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と、複合体約０．１〜２重ｍｇ／ｋｇ／日を供給するに足る量の前記複合体を含む請求項１９記載のキット。
２１．一つの包装中別個の容器に（１）遊離ＬＨＲＨあるいはその類似体と（２）タンパク質と次式のノナペプチド；Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒ８−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− ＮＨ２あるいは次式のデカペプチド：Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｒｙ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙ−ＮＨ２あるいはこの混合物間の免疫原性複合体を含む請求項１９記載のキット。