JPS60120824A - ホルモン活性処方物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はを椎動物種におけるホルモン活性に関している
。

“ホルモン”は、体のひとつの部分から放出されて、少
なくともひとつの、他の離れた部分に選択的に作用する
物質を包含するものとして定義されている。そのような
物質の多くは内分泌腺により分泌される。そのひとつの
例に脳下垂体よりの生長ホルモンの分泌がある。所定の
標的組織（単または複数）に対する選択性の根拠は、そ
の物質に特異的に結合するレセゾター組織のあるかない
かによる。インスリンのような蛋白質の場合には、レセ
プターは細胞の表層にある。インターフェロンは、ウィ
ルスの攻撃に対してを推動物の細胞粉防禦することにあ
づかっている。それは内分泌器官により分泌されるので
なく生長ホルモンの有す−る標的組織特異性を有しない
。しかしそれは大きなグリコジル化された蛋白質分子で
、特殊の細胞表面レセプターに結合する。細胞表層上の
特異的レセプターに結合することにより細胞の活性に影
響する類似のある種の物質もある。たとへば腫瘍壊死因
子およびインターロイキンのようなリンホカインである
。この明細書中では０ホルモン”の用語は、細胞表層レ
セプターを有する、そのような蛋白質またはポリペゾチ
ド単位（グリコシレート化される場合も含む）および類
似のものを包含するものとして、６ホルモン”の用語を
用いる。

インスリンや表皮生長因子（ＥＧＦ　）に対するある種
の抗体は、イン　♂ドローでのそれらのホルセンの活性
を強化しまたはそれらホルモンの類似の活性を示す（シ
ェヒター他（Ｙ、　５ｃｈｅｃｈｔｅｒ　）、プロシー
ディング　ナショナル　アカデミ−サイエンス（Ｐｒｏ
ｃ、　Ｎａｔ、　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ、　）　７６　（６
）　＋２７２０（１９７９）およびシエヒター他（Ｙ、
　５ｃｈｅｃｈｔｅｒ　）、ネイチャー（Ｎａｔｕｒ＋
３　）２７８．８３５（１９７９））。このような現象
がおこるのは、それらの抗体が２価で、細胞衣１（４ｉ
上でのホルモンーレセゾター複合物の凝集をおこさせ、
この凝集が細胞内の第２のメツセンジャーを活性化する
と考えられる。抗体の１価Ｆａｂフラグメントは１、そ
のような活性強化または類似活性を示さない。これらの
研究は単にインスリンおよ゛びＥＧＦレセプターの特徴
づけに関連しそしてそのようなホルモンの作用機構の同
定の面で行なわれた。さらに、それらの研究のすべてが
、そのよ５な活性強化を証明しているわけでない（ドウ
　ピロ他（ｄｅ　Ｐｉｒｒｏ　）　、シアベトロシア（
Ｄｉａｂｅｔｏ−１ｏｇｉａ　）　１９　、１１８　（
１９８０）およびシエヒター他（５ｃｈｅｃｈｔｅｒ　
）、プロシーディング　ナショナル　アカデミ−サイエ
ンス（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ。

ＡｃａｄＳｃｉ、）７５（１２）　、５７８８（１９７
８））。

どうか、その現象がより広く応用できるかどうかの示唆
はない。まさに、インスリンおよび他のホルモンに対し
、イン　ビｆ−で抗体を生成することは、ホルモン−抗
体複合物が体の免疫系により除かれるだろうゆえにはな
はだ望ましくなく、そして、ホルモン作用は強化される
どころか打消されてしまうであろう。たとえば、シュワ
ルツ（Ｓｃｈｗａｒｔｚ　Ｊ、）、　ｘ　＞ドウ＋）／
Ｔ２シー（ＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇＶ　）　、１０７
　（４）　ｒ　８７７　；フレイジャー（Ｆｒａｉｓｉ
ｅｒ　）　、エンドウリン　レビュー　（Ｅｎｄｏｃｒ
ｉｎｅ　Ｒ，ｅｖｉｅｗｓ　）　４　（２）　＋　１５
５およびがウス他（Ｇａｕｓｅ　）　、エンドクリノロ
ジー（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）　１１２　（５）
　ｔ　１５５９　（以上、生長ホルモンについて）およ
びブレークおよびケルヒ（Ｂｌａｋｅ　＆　Ｋｅｌｃｈ
　）　、エンドクリノロジー　（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ
ｏｇＹ　）　１０９　（６）　、　２１７５（黄体ホル
モン放出ホルモンについて）をみられたい。

本発明において、驚くべきことに、抗体のエピトープ（
ｅｐｉｔｏｐｅ　）特異性を適切に選ぶことで、ホルモ
ンに対するある種の特異的抗体がホルモンの活性を強化
するかまたは類似の活性を示しうることを見出だしたの
である。

それで、本発明のひとつの特１徴は、哺乳動物に投与さ
れた時に、処方物がそのを推動物におけるホルモンの投
与効果を強めるかまたはそのホルモンに類似した効果を
発揮するように抗体の少なくともあるもののエピトープ
特異性を選ぶとして、ホルモンに対する抗体を含有する
処方物を提供する。

本発明の第２の特徴として、（ａ）ホルモンと、（ｂ）
哺乳動物に投与された時に、処方物がそのを推動物にお
けるホルモンの投与効果を強めるかまたはそのホルモン
に類似した効果を発揮するように抗体の少なくともある
もののエピトープ特異性を選フトして、そのホルモンに
対する少なくともひとつの型の抗体との、複合物を含有
する処方物を提供することである。

与効果を強めるかまたはそのホルモンに類似した効果を
発揮するように抗体の少なくともあるもののエピトープ
特異性を選ぶとして、そのホルモンに対する抗体を含有
する処方物をを推動物に投与するととＫよる、°正常の
（あとに定義する）°′を推動物におけるホルモン投与
効果を強めるかまたはそのホルモンに類似した効果を発
揮させる方法を提供することである。

”正常の°′の意味は、そのホルモンにより調節される
組織の正常の機能に十分な内生量の該ホルモンを有する
個体をさすものとする。

本発明の第４の特徴は、（ａ）ホルそンと、（ｂ）を推
動物に投与された時に、処方物がそのを推動物における
ホルモンあ投与効果を強めるかまたはそのホルそンに類
似した効果を発揮するように抗体の少なくともあるもの
のエピトープ特異性を選ぶとして、そのホルモンに対す
る少なくともひとつの型の抗体との複合物を含有する処
方物をを推動物に投与することによる、”正常の（上記
定義）のを推動物におけるホルモンの投与効果を強める
かまたはそのホルモンに類似した効果を発揮さす方法を
提供することである。

第５の特徴は、を椎動物に投与された時に、処方物が、
その哺乳動物におけるホルモンの投与効果を強めるか、
または、そのホルモンに類似した効果を発揮するように
抗体の少なくともあるもののエピトープ特異性を選ぶと
して、そのホルモンに対する抗体を含有する薬剤処方物
を哺乳動物に投与することにより、ホルそンにより調節
される組織の機能が異常に低いヒトまたは他のを椎動物
を治療する方法を提供することである。

第６の特徴は、（ａ）異常に低い、ホルモン調節組織の
機能に関与するそのホルそンと、（ｂ）を椎動物に投与
された時に、処方物がそのを椎動物におけるホルモンの
投与効果を強めるかまたはそのホルモンに類似した効果
を発揮するように抗体の少なくともあるもののエピトー
プ特異性を選ぶとして、そのホルモンに対する少なくと
もひとつの型の抗体との複合物を含有する薬剤処方物を
ヒトまたは動物に投与することにより、異常に低い、ホ
ルモン調節組織の機能を有するを椎動物を治療する方法
を提供することである。

生長ホルモン、インスリン、甲状腺刺激ホルモンおよび
インターフェロンを投与する時の効果を強めるかそれら
に類似した効果を発揮さすことが本発明の特に有利な特
徴である。

あるホルモンが欠乏した結果おこる臨床的な異常は多く
の例で特徴づけられており、本明細書では特に列挙しな
い。しかし、例をあげておくと、生長ホルモンの欠乏に
よる脳下垂体性小人症、’Ｉ’ｕｒｎｅｒ氏症候群およ
び悪液質、インスリンの欠乏による糖尿病、そして甲状
腺刺激ホルモンの欠乏によるり１／チン病、単純甲状腺
腫および粘液水腫がある。

特定のホルモンに”対する”抗体とは、そのホルモンに
結合する抗体を意味する。つまり、その抗体は、その特
異的ホルモンに反応して造り出されたものでなくてよい
。たとへば、生長ホルモン（ＧＨ）に対して生成された
いくつかの抗体は、絨毛膜性ソマトマンモトロピン（Ｏ
Ｓ）と交叉反応するが、それは、それら２つのホルモン
のあいだの広範な配列相同性のゆえである。さらに１合
成類縁体！たはその１部のホルモンに対する抗体を生成
さずこともｐ」能でありうる。留意すべきこととして、
抗体は、本発明の処方物または方法が適用サレる動物種
に特異のホルモンである必要は必すしもない。しかし、
なるべくはその方が有利である。そのホルモンに対する
抗体がすべて、そのホルモンが投与された時の効果を強
めたりまたは、類似の効果を示したりするわけでないこ
とが分った。ソウでなく、本発明に従って抗体が作用す
る能力は、ホルモン上にある、その抗体に対する特定の
デターミナンｌ−（つまり、抗原サイト）により支配さ
れるようである。それで容易に分るように、ポリクロー
ナル抗体（つまり、ある範囲のデターミナント特異性を
有している抗体の集まり）は１、モノクローナル抗体よ
りも、本発明の処方物または方法に用いるのにより適当
でない。この方面の技術の専門家は、本明細書を読み、
ふつうの手法により、本発明を実施するのに有効なモノ
クローナル抗体を容易に選びうるであろう。ある事情に
よっては、適当なモノクローナル抗体の混合物を用いう
る。しかし、抗体のエピトープ特異性が記載のようであ
る限り、“従来の”免疫により生成された動物またはヒ
トの抗血清を用いることも可能である。生長ホルモン（
ＧＨ）および絨毛性ソマトマンモトロビン（ａＳ）対す
る特に有利なモノクローナル抗体は１！！ＢＱ１および
ＤＢ（１；）である。抗体１：ＬＢ　０１はゾロラクチ
ン（ＰＲＩＪ　）に有利である。

動物中にホルモンが存在することが、抗体（単独投与の
場合）が上記のように作用するのに必要である。それで
”正常な”個体では、選択された抗体のみの投与で上記
のような効果を示すであろう。しかし、たとへば、脳下
垂体性小人症のように内生ＧＨを欠如する個人では、Ｇ
Ｈも、必ずしも同時でなくてよいが、抗体と共に投与せ
ねばならない。

動物の体外で抗体を調製するのでなく適当な生長ホルモ
ン分子のあらかじめ選択したフラグメントなアジュバン
トと組合わせて動物に注射することにより、適当な特異
性のある抗体を生成さすことができる。そのフラグメン
トは、ホルモンを強化する抗体のひとつまたはひとつよ
り多くが特異的であるエピトープ（単または複数）のみ
を含有するように選択することになるが、ホルモンを適
当に切断するかまたはペプチドフラグメント（またはそ
のフラグメントに類縁のもの）を合成することによりみ
ちびきうる。親水性残基に富むホルモンの部分を選択す
ることにより、完全なホルモン分子表層上にありそして
それゆえに完全な分子と交叉反応するフラグメント（″
抗原デターミナント”）を創出するかまたは選択しうる
可能性が大となる。同様に、フラグメントは、ホルモン
の、細胞表層１／シタ−と結合するサイトを含有すべき
でないし、レセプターとの結合を防ぐようにコンホーメ
ーションを変えてしまう第３の試剤を結合するサイトも
含有すべきでない。さもないと、生成する抗体は、ホル
モンの作用を強化するよう阻害することがありうる。そ
れでこの型の免疫が成功するためには、扱う動物中に、
特異性の狭い抗体のポリクローナルな集合物を生成させ
、外部から抗体を受動的に投与する場合よりも動物への
注射を少くしうるようにする。もちろん、事実上のフラ
グメントな用いないで、分子の望ましからぬエピトープ
が存在するが、なんらかの方式で抗体が近すきにくくな
っている機能的７ラグメントも用いえた。

本明細書中で用いる”フラグメント″の用１ｉ１４は、
事実上および機能上の両方のフラグメントを：音吐する
とする。

それで、本発明は、相応するホルモンの少なくとも１種
のあらかじめ選択された”フラグメント（上記定義）”
を、選ぶならばアジュバントとあわせて含有する調製物
を哺乳動物に投与することによる、哺乳動物のホルモン
調節されている反応を増加さす方法も提供する。

本発明はまた、従来法によるそのような調製物およびそ
れの調製方法を包含１−る。そのような従来法によるワ
クチンでは、抗原の免疫原性を強化するために免疫学的
担体たとえばキーホールリンペットヘモシアニンまたは
破傷風トキソイドをしばしば用いる。同様に免疫系を刺
激するのにアジュバントだとへば水酸化アルミニウム、
サポニンまたはムラミルジペゾチＰのようなものをしば
しば添加する。一般的に単位投与量中に約０．００１か
ら１０μｍｏｌｅ　、なるべくは０．０１から０．０５
μｍｏ’ｌθの抗原が存在すべきで、抗原の適量の選択
は専門家にとって可能であろう。

を椎動物への抗体の受動的移行のためには、任意の適当
な無菌媒体たとへば食塩水約１０４−１０７、なるべく
は１０５−　Ｉ　Ｑ６　ＡＢＴ５ｏ単位の抗体を存在さ
せて、０．０１からＩ　Ｑ　ｍＡ　％なるべり＆亀約Ｑ
、５ｍｌの投与量とすべきである。

例としては、３つだけのホルモン、つまりＧＨ。

Ｃ８およびＰＲＬの場合について述べる。

本発明に準する処方物または方法はつぎの可能性を提供
する。

（ａ）　産業上重要な家畜たとへば牛、豚および家きん
の完全な生長までの期間を短縮するかまたは少ない飼料
でのそのような生長を可能とする。

（ｂ）正常最大値以上にそのような動物を生長させる。

（Ｑ）　を椎動物における催乳の期間または量を増加さ
せる。たとへば、牛よりのミルク収量が大となり、ヒト
の母親の子供への母乳の授乳が可能どなる。

（ｄ）　家畜における赤身の肉と脂肪との比が増加する
。

（ｅ）　動物たとへば羊の毛、毛皮または他の有用な表
面生成物の生長を増加させる。

（ｆ）　ＧＨ欠如の個人、たとへば小人症の子供を治療
して正常の生長をおこさせる。

すべての場合において、本発明に準する処方物および（
または）方法の使用は、ホルモンのみ使用よりも著しく
経費および労力を節約する。これは、ホルモン作用の強
化で投与回数を少なくしうるからである。さらに、処理
動物中の肉またはミルク中に残るかもしれぬ有害な残留
物の減少も期待される。最後に１家畜にはしばしば他の
ワクチンたとへば口てい病ワクチンを投与するので、そ
のようなワクチンに本発明の処方物を添加する便宜さも
ある。

本発明をつぎの非限定的実施例で説明する。

略記 略記のリスト ｈＧＨヒト生長ホルモン ｈＣ８ヒト絨毛膜ソマトマンモトロビンｈＰＲＬ　ヒト
プロラクチン ｂＧＨ牛生長ホルモン ＭＡＢ　モノクローナル抗体 ＰＢＳ　リン酸塩緩衝食塩水 ＦＭＳ　Ｆ　フェニルメチＡ・スルホニルフルホライド
趨　免疫グロブリン ＭＨＯタイジャー組織適合性コンプレックス６１ＰＲ工
Ａ　固相ラジオイムノアッセイＷｔｏ　０時点での重量 日Ｄｆ３−ＰＡＧｌ！＋ＳＤＢポリアクリルアミ　ドｒ
ル電気泳動ＥＤＴ　Ａ　エチレンジアミンテトラ酢酸Ｒ
工Ａ　ラジオイムノアッセイ 統計的計測 従来法により算術平均および標準偏差を計算した。グル
ープ間の差は対でない８　ｔｕＡｅｎ　ｔ’ｓ　を−試
験で評価した。

図面の記載 第１図　例Ａに関するもので、本発明に準する組成物で
処理した短小アウスの体重増加を示す。

第２図　例Ｃに関するもので、正常マウスでの対応する
体重増加を示す。

第３図　例りに関するものでハトそのうの重量と増加を
示す。

第４図　例Ｅに関するものでキヌザルの体重増加を示す
。

調製例 例１　ヒト生長ホルモン（ｈＧＨ）　Ｋ対するモノクロ
ーナル抗体の調製 この研究に用いた抗体は、Ｗｅｌｌｃｏｍｓ　Ｄｉａｇ
ｎｏｓｔｉｃｓＴｅｍｐｌｅ　Ｈｌｌｌ　、　Ｄａｒｔ
ｆｏｒｄ　、　Ｋｅｎｔ　、　Ｕ、に、より入手したも
ので、十分に特徴付けられている（工ｖａｎｙｉ　。

１９　Ｅ３２ａ　ｂ　、　ＡｓｔｏｎおよびＩｖｏｎｙ
ｉ　、　１９８３　）。

ＢＡＬＢ／ｃマウス騨細胞をＮ８’ｆ骨髄腫細胞と融合
させ標章技術（ＩｖａｒｙｔおよびＤａｖｉｓ　、　１
９８０　。

１９８１）でクローン化した。由来した抗体は、ＩｇＧ
、イソタイプのすべてで寒天中２重拡散で調べて沈殿し
なかった。４種のデターミナントが競合アッセイでｈＧ
Ｈ上に同定された（　Ｑ、Ａ　６８、Ｎ入７１、ｌＱｌ
およびＩｎＢ　Ｏ２）。それらのうちの２つはｈｏｅ　
（ｍＢ　Ｑ　１およびｌ　Ｏ２）と完全に共通していた
。しかし、これらの抗体のいずれもヒトプロラクチンと
は交叉反応しなかった。抗体濃度はＡＢＴｂｏ値で表現
した。これは、１２５ニーｈＧＨのＲ工Ａによる５０パ
一セント結合を与えるに必要な抗体タイターの逆数であ
る（工ｖａｎｙｉ、１９８２ａ）。ｈＧＨを蛋白分解に
処して変型したものの結合実験で、４つのデターミナン
トはすべて第１の１−１３９４基中に位置することが示
さｔｌＢＯ１デターミナントはまた配列領域１４６−１
９１にも現われた（　Ａｓｔｏｎおよび工ｖａｎｙｉ　
。

１９８３）。

例　２ ＦｉＢ　Ｑ　１のＦ’ａｂ’フラグメントの１ｇ！！ｉ
！ＫＢＱ１の腹水グロプリｙ　（５ｍｙ／ｍｌ　）を０
ＩＪＢｒ−活性化セファロース上に固定化したｈＧＨ（
１００ｍ９　）上のアフイニテイクロマトグラフイーで
精製した。保留された物質はグリシン−１（ＣＬ緩衝液
ｐＨ２，３で溶出し、蛋白質含有チューブをＮ＆ｏｕ　
（Ｉ　Ｍ　）ですぐにｐ）ｌ　７．５に調整した。精製
抗体は２０ＩＩＵ；／／Ｉｌｌ　（２＋１１Ａ！　）　
Ｋ濃縮し、システィン（０，０１Ｍ　）およびＥＤＴＡ
　（０，００２Ｍ　）を含有するリン酸ナトリウム緩衝
液に対して透析した。

このものは０．４１ｖのパパイン（ＢＤＨ）で３７℃で
４時間消化し、ＰＢＳに対し透析してシスティンおよび
ＥｌｉＤＴ　Ａを除いた。ついで透析物はＤＥＡＪｉｌ
ｔセルロースカラム（２０ｃｒｒＬＫ　１．２鋼）に移
し、リン酸ナトリウム緩衝液のりエアーグラジェント（
０，００５Ｍ　−０，３Ｍ、　Ｔｈ４８．０　）で溶出
した。カラムより溶出された第１のピークは、ＳＤＳ　
−＝ＰＡＧＥで測定して抗体のＨ鎖は含有せず、Ｉ　Ｑ
””’ｘＡＢ″ｉ’ｓ’ｄの活性を示した。

例３　ホルモン エｎ５ｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　ｃｈｉｌｄ　Ｈｅａｌｔｈ
、　Ｌｏｎａｏｎと特に契約して、有効期間のすぎた臨
床用材料より、注射用ヒト生長ホルモンを得た。分析に
用いたのは＞９９　ｓ純度のものである。これはＲ工Ａ
　（ＵＫ　）社、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ　、　Ｄｕｒｈ
ａｍ　、　Ｕ、に、より得た。ラクトパーオキシダーゼ
でｈＧＨを放、射性日−素うペルし、高比活性（８０ｘ
　１０’　ｃｐｍ／　ｇ　）　（Ｌｉｎ４ｓ等、１９８
１）のトレーサーを得た。単量体性１２５１−ｈＧＨを
、アッセイに先立ち、ＵｌｔｒＯｇｅ１カラムクロマト
グラフィーにより凝集物より分けた。

ＵｌｔｒＯｇｅｌは、ＩＩＫＢ社、Ｏａｍｂｒｉｄｇｅ
、　Ｕ、に、の商品名である。動物に投与するための抗
体−ホルモン複合物は、注射に先立ち、溶液を１時間混
合して調製した。敗退にわたり注射する慢性的実験では
、１週分の複合物をまとめて調製し±４度Ｃに保存した
。

０．０５　Ｍ重炭酸ナトリウム２　ｍＭ　ＰＭＳＦ　Ｐ
Ｆ４８．６中で組織をホモジナイズして、キヌデル脳Ｙ
垂体より可溶性抽出物を調製した。生ずるホそジネート
は１０．０００　ｇで２０分遠心し上清（２０ｍｌ　）
を試験した。

生物学的例 例Ａ　ｈＧＨ−１１！Ｂ　Ｑ　１複金物で処理した短小
マウスにおける累積体重増加 ａＷ遺伝子について異質接合子性のマウスからか、また
は、異質接合子性の雌マウスおよびチロキシン処理雄同
質接合子性短小マウスより短小マウスを育種した。９．
１十〇。４．！ｉ１体重の短小マウスが入っているよ５
Ｋｌた。ホルモンは、所定の時間に０．１ｍ／ｉ中に含
有させて背中に皮下注射した。

処理の開始時、処理中として処理後時々体重を測定した
。短時間実数での体重増加は数日の実験での累積体重増
加を、最初の全体重に対する相対値（チ）または重さ１
１）そのもので表わした。

ＨｎｇｈｅｓおよびＴａｎｎｅｒの方法（１９７０）で
尾の長さを測定した。

３週のあいだに、リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ　）処理
対照マウスは、約１５係の相対体重増を示した（第１図
）。１ｏμｇ　ｈＧＨ処理マウスは、同じ期間に２２％
増加した。しかし、ｈＧＨ−ＥＢ　Ｑ　ｌ複合物による
増加は３４チで、ｈＧＨのみよりさらに１２チ上廻った
。

複合物中のｈＧＨ量を１０μｇから１６０１＠に上昇さ
すと体重増は、最初の体重の４４チであった。

第１図から分るように、処理群と対照群との差は２１日
の試験期間中に序々に開いた。ｈＧＨ−ＭＡＲ複合物は
４８時間で著しい増加を与えたのに、ｈＧＨのみ処理群
とＰＢＥＩ注射対照群との差は７日後までははっきりし
なかった。

例ＢＥＢ０１１Ｉ′ａｂ′フラグメントによる成長促進
ｆｉｉＢＱ１抗体の２価が生長促進に必要かどうかをみ
るために、ＦＸＢ　Ｑ　１−　Ｆａｔ／　−ｈＧＨ複谷
物の短小マウスにおける３５Ｂ□、２−取り込みに対す
る効果をみた。

比較的にせまい体重範囲の短小マウス（７−１０ｇ）を
乱数表（Ｆ’ＩＢｈｓｒおよびＹａｔｅｓ、１９５７　
）でランダムにし、最後のホルモン注射後２４時間に体
重に対して、Ｏ−５０１／　Ｆ体重、となるよう３５Ｂ
□、２−を注射した（　Ｈｅｒｂａｉ　、　１９７０　
）。マウスは２０時間後に殺し、胸郭を取り出し、沸騰
水中に２０分おき、飽和硫酸ナトリウムに１夜浸し、水
道水で２時間、蒸留水で１時間洗った。約１關の隣接す
る肋軟骨（ｃｏｓｔｏａｈｏｎｄｒａｌ　ｊｕｎｃｔｉ
ｏｎ）をあわせて切り去り、胸骨に付着した肋軟骨を残
した。軟組織を除き、胸骨に直接に関節でつながってい
る５個のもつとも長い肋軟骨を全体として、胸郭の各側
からはづしひとまとめ処した。各１０個の肋軟骨プール
は室温で一夜乾燥し、秤量し、処理して３５Ｓ０４２−
を定量した。３５Ｂ□、２−の肋軟骨による取り込みは
、肋軟骨ｒｎｙ当たり毎分の崩壊として表わした。

ＫＢＱｌまたはＫＢ　０１−　Ｆａｂ’により強化され
る、軟骨による硫酸塩取り込みの１７ペルは、同じＡＢ
Ｔ５ｏ処理量で比較した抗体およびフラグメントとあま
り変わらない０表１）。しかしｈＧＨのみの存在で観察
された成長はＴａｂ’　−ｈＧＨについての値より有意
に少ない。”第２の°”モノクローナル抗り鎖抗体（Ｔ
ｃ　１８７　）またはポリクローナル抗マウスエｇ抗体
を含めることによりＦａｔ／フラグメントの価を増加さ
せても　３５Ｂ□、２−の取り込みは有意に変わらない
。さらにＩ＋’ａｂ’フラグメントがＫＢＱｌ抗体の強
める効果を拮抗的に阻害することはない。ＦｆＢ　Ｑ　
１と等モル量のｈＧＨおよびｈＣ８の複合物もまた、強
化の程度を減少さすことをしない。この複合物は主にｈ
ＧＨ−ＥＢＢ　０１−　ｈｏｅ種を含有するが、ｈＣ８
はｈＧＨのわづか１０チの成長ホルモン活性を有するの
みなので、２価が必要ならば、ｈＧｌ（−１１ｉＢＱ　
１−ｈ０８は減少した活性を有するはづのところである
。実際、”Ｂｏ　１−　ｈａｓ複合物では対応するｈＧ
Ｈとの複合物より活性が著しく低下する。

例Ｃ幼若ＢＡＴ、Ｂ／ｃマウスにおける生長の強化短小
マウスにおける生長促進は、非常に遅い活性をバックベ
ラランドとして表われるので、正常の、つまり生長の早
い幼若７ウスで抗体の媒介する強化効果が表われるかど
うかをみるのは興味深い。７−１０Ｉｌの体重の３週令
ＢＡＬＢ／ｃマウスを無作為に分けて、上記の短小マウ
スにおけるように注射した。慢性試験では毎週３度体重
を測定した。グループ１には、ずっと１週２度宛ＰＢ８
を投与した。グループ２には１週間３度１６０μｇのｈ
（）Ｈを投与した。グループ３には、４週にわたり、同
様に投与した。グループ４および５には、１６０μｙの
ｈＧＨと２００μｇの１１ｆＢ　Ｑ　１の複合物とを、
１および４週にわたり、毎週３度投与した。

グループ乙には、該複合物を４週間に及び毎日投与した
。グループ５および６は、ＰＢ８注射対照より３１チお
よび３７チだけ余計生長した（第２図）。

ｈＧＨ−ＥＢ　Ｑ　１の著しい体重増加効果は投与後４
８時間ですでに明らかであった（表２）。Ｉ！１ＢＱ１
の存在での１０．４０または１６０μｇのｈＧＨ投与動
物は、ｈＧＨのみに比して有意の体重増加を示した。

表　２ ＥＢ　Ｑ　ｉ抗体と複合させたｈＧＨの種々投与量注射
した幼若ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける体重増加 例Ｄ　ｈＧＨの乳汁分泌活性の強化 ヒト生長ホルモンは、４ｙ、；ボーでノ・トのそのうま
たは乳組織への効果および乳腺１／セプターへの結合よ
り１２６エーｈＰ　ＲＬにおき代わる能力からみて、者
しい乳汁分泌活性を示す。ハトのそのうバイオアッセイ
操作はホルモンの乳汁分泌活性を測定し、ラットまたは
マウスの乳腺または黄体を用いる他の乳汁分泌活性分析
と類似する。ホルモ皮内注射した。各群５羽を用いた。

注射は、第１日にのみ１回投与（２に１Ｑ４　ＡＢＴ５
ｏ）か、または、６６時間に及んで６回（それぞれ２に
１０３ＡＢＴ５０　）　、または、第２日にさらに２回
の追加とした。鳥は第６日に殺し２．５　ａｎ直径のそ
のうの粘膜の湿重量を測定した（　Ｎ１ｃｏｌｌ、　１
９６７　）。２つの個々の片側ぞのうのそれぞれに隣接
して複合物は遊離ホルモンを皮下投与することにより、
全身的なホルモン分布のない条件下で強化効果を調べた
。１００μｇのｈＧＨを３回投与したあとのそのう粘膜
の重量は１００〜であったが、対照（ＰＢＳのみは抗体
のみ）粘膜は１０から１６〜であった（第３ｊ図）。

１０μ９のホルモンのみでは４８〜の粘膜を与えたがＰ
３Ｂ０１またはＩＢ　Ｑ　２の存在では、粘膜の重量は
それぞれ１０８Ｉｎ９および８ｏダに増加した。

短小マウスにおけるように、ＮＡ７１は強化活性がなく
、ＱＡ６８は粘膜分泌を著しく抑制した。

さらに、ＫＢＱｌは、ホルモン投与１回または３回のい
ずれでも同じ程度に、その址に比例し′（乳汁分泌効果
を強化した。しかし、ＥＢｏｌはｈＯＨの飽和投与の乳
汁分泌効果を強化しぇなかった。

Ｉｒ１Ｂ０１は、同様にｈａｓに結合するので、我々は
このホルモンの乳汁分泌活性の強化も調べてみた。

ソノ結果１０μｇ　ｈａｓとの抗体複合物は、ホルモン
のみ投与の対照に比してそのう粘膜の重量を２倍にした
。

例Ｅ　キヌずルにおける成長促進 ネズミ類の生長がハトそのうの反応への強化効果は、外
来性のｈＧＨの投与によるものであった。

理由は、本明細書に記載の抗体のいずれもきつし両目生
長ホルモンと交叉反応しなかったゆえである。

しかし、我々は、イムノゾロットアツセイで、ＫＢ　Ｑ
　ｉ抗体がキヌデル生長ホルモンに結合することを発見
した。この観察は、外来性の投与されたホルモンの存在
しない状態でのキヌザルの生長の促進に対するＫＢＱｌ
の評価を可能とした（第４図）。体重に関して無作為と
した１６頭の動物を４１＃に分けて、０．４　ｒｎｇ　
ｈＧＨのみ、ｈｃｉＨ（０，４１１）十ｇＢ０１　（２
１ｎ９）、１ｌｉＢＱ　１　（２ｍｙ　）ノミ、！？、
：はＰＢＳを、１週間当たり３度投与ｔ７た。２頭の同
腹動物は、体重減少がつづくので１週後に除かねばなら
なかった。ＰＢＳで４４日間処理した動物の体重は６８
ｇ増加した。Ｆ：ＢＱｌのみ投与群の平均体重増加は約
１０３ｇである。ホルモンのみまたは接合物投与群の体
重増加は、ＫＢＱｌのみと対照との中間であった。抗体
投与の動物の相対的体重増加（最初の体重に対するチ）
は８９チで、他方対照群の体重増加はわづか６１チであ
った。

キヌザルに異質の抗体を６週連続投与したのに、副作用
たとへばアナフィラキシ−性のものはいままで観察され
なかった。

例Ｆ　ハトそのうアッセイの追加 例りのハトそのうアッセイは、ｈＰＲＬの高度精製物り
の１μＩまたはＱＢ　Ｑ　１−　ＭＡＢアフ・イニティ
クロマトグラフィー精製調製物Ｈの、ｈＰＲＬのみ、ま
たは、それのモノクローナル抗体の２５００ＡＢ’ｌ’
ｓ。

の一定量との複合物を用いて反復した。ＣＬＵＢ　０１
抗体調製物は例１記載と同様ですでに報告されている（
Ｉｖａｎｙｉ　＆　Ｄａｖｉｅｓ　、　１９８１　）。

表６の結果は、ｈＰＲＬの両方の鯛製物について、抗体
Ｑ、ＢＯ１での強い強化を示している。同は、１群６個
のそのうの平均値および１ｘ標準偏差を示している。

表　３ 例Ｇ　短小マウスの生長および組成 短小（ｄＷ／ｄＷ）マウスを１８頭宛の３群に分け、１
０日間にわたり、自由摂取飼料量の１００優、７５％、
５０％の餌を与えた。各餌には、６頭のマウスでは食塩
水、６頭はｈＧＨ（４Ｑ　ミＩＪ単位）６頭はｈｅＨ／
ｉＢ０１　（１０４ＡＢＴ、ｏ量の抗体）複合物を与え
た。マウスの全体としての生育（硫酸塩を９日目に注射
して３５Ｂ□、の胸骨軟骨への取り込み）、脂肪含量、
体重変化および尾長を測定した結果は表４から７に示し
た。

ホルモン／抗体複合物が、飼の減少分を補なっているこ
とは明らかで、筋肉を選択的に生長さすので、脂肪の割
合は減少し、後者の利点は、飼の少ない場合により明ら
かである。

表　４ 胸骨間軟骨への硫酸塩の取り込み 結果は、組織ミリグラム当たり毎分の崩壊量で表現：平
均±８．Ｅ。

表　５ 脂肪含量 数字は脂肪量（ミリグラム） 表　６ 最初の体重に対するチ体重変化（最初体重＝＝１００１
）数字は平均値士Ｓ、ＦＸ。

表　７ 尾の長さの増加（増加量、酎） 数字は平均値±８．１！！。

例Ｈ正常マウスにおける生長 例Ｃの実験を反復したが、体重増加でなく３５Ｂ□、の
胸骨軟骨への取り込みで分析した。４週令（体重１０ｇ
）、６週令（１４，９）および９週令（１９ｇ）のマウ
スを用い　３５Ｂ□、の投与の２日前に、食塩水、ｈＧ
Ｈ（１００μｇ）またはｈ（ＩＨ−３ＣＢＱ　１複合物
（１００４／　１０’ＡＢＴ５ｏ）を０．１ｍ１４で皮
下注射した。軟骨は２４時間に除去した。結果を表８に
示した。複合物では有意の生長増加が示された（最高令
のマウスでｐ（０，Ｏｏ　ｏ　ｓ　）表　８ 単位：カウント／分ＺＩＲ＆軟骨 例工　特異性の少ないポリクローナル抗体の使用７Ｋ（
７０００ダルトン）フラグメントをｈＧｌｉのＣ末端よ
りサブティリジンにより切り出し変性条件でのクロマト
グラフィーに処した（　ＡｓｈｔＯｎ＆　Ｉｖａｎｌ　
１９８３　）。２頭のマウスのそれぞれに、フロイント
完全アジュバントで乳化しであるが担体な有しないフラ
グメントの５０μ９を注射し、２１日後に、アジュバン
トなしにさらに５０μｇを注射した。第２のチャレンジ
のあと１０日後に血清を採取し、ｈＧａ（ＩＱμＩＩ）
と複合させそして短小マウスに注射した。ひきつづくマ
ウスの生長を、上記のような３５Ｂ０４を測定して分析
した。

結果は表９に示すように、ポリクローナル抗血清で生長
が強化された。

表　９ 例Ｊ　ヒツジ生長ホルモン活性の強化 ヒツジ（たとへばメンヨー）生長ホルモン（ｏＧＨ）　
Ｋ対するモノクローナル抗体を例１のように調製したも
のを、Ｄｅｎａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆｌｘｐｅｒｉｍｏｎ
ｔａｌ工ｍｍｕｎｏｌｏｇ７．　Ｗｅｌｌｃｏｍｅ　Ｒ
ｅａａａｒｃｈＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｌａｎｇ
ｌｓｙ　Ｃｏｕｒｔ、　Ｂａｃｋｅｎｈａｍ、Ｋｏｎｔ
。

ＢＲ５？ＳＢ８　、　ｔＴＫより入手した。ｏＧＨに反
応する短小マウスを６駅宛のグループに分け、ホルモン
の５０４をそのままか、または抗体４種のうちのひとつ
と複合物として　３５Ｂ０４注射の前に２日間続けて注
射した。胸骨間軟骨は２４時間後に取り、ぎ酸に溶解し
放射活性をカウントした。結果を表１０に示す。

表１０ 処　理　ＭＡＢタイター　３５Ｂ０４の取り込み（平均
＋８．臥；ＣＸｘｙ′に９組織）ｏＧＨ−−１４１１±
２６１ ｏＧＨ＋ＩＤ１１Ｈ９１に１０−４　５８７１±１３３
９０Ｇ正（＋４Ｂ６２Ｄ９　３．２に１０−’　４３２
３±６７１ｏＧＨ−＋−２Ｂ１１　４．２ｘ１０−’　
３４０８±６４２ｏＧＨ＋３Ｂ１１　．５．６に１０−
２　３４３４±７１９−５５７±７９ 例Ｋ　メンヨウにおける生長の強化 ２頭のメンヨウ（平均体重１７ｋｇ）の群に、抗ｏＧＨ
抗体２Ｂ１１（例Ｊをみよ）の種々の投与量かまたは対
照としてのマウスグロブリンを３５ＢＯ４（１４６μａ
ｔ／ｋｇ）の腹腔注射の前に２日連続して投与した。２
４時間後、各サイトより胸骨間軟骨の４試料を採取し、
上記のように分析した。結果を表１１に示す。

表１１ １０６ＡＢＴ５ｏ２Ｂ１１　３０９４±６３０（１，２
ｘＩＱａＡＢＴ５ｏ２Ｂ１１　５１６８±２４Ｑ、９４
　Ｘ　１０６ＡＢ’ｌ’５ｏ２Ｂ１１　２３７３±１８
３対　照　２０８４±７７１ ’　Ｒ８Ｂ　／　ＮＤＯ／　７ｔｈ　Ａｕｇｕｓｔ、　
１９８４これらの分散分析の結果は高度に有意で、本発
明に準する処方物が経済的に重要な種においてＧＨの作
用を強化しうろことを示している。

例Ｌ　メンヨーにおける生長の強化 異なるモノクローナル抗体ＩＤ１１Ｈ９を用いて例Ｋを
反復した。１グル一プ５頭とし、平均体重２４に９．結
果は表１２に示す。

表１２ 処　理　３５Ｂ□、の取り込み （平均上ａ、ｍ、；ｃｐｍ／１０ダ） ８．８に１０５ＡＢＴ５ｏ２Ｂ１１　３３１５±５６０
２ｘＩＱ’ＡＢＴ５０１Ｄ１１Ｈ９２８１８±３４３対
照イムノグロブリン　１９０８±２９９ＭＡＢ−処理群
で、有意の（ｐ　（０，０５）の生長増加がみられた。

例Ｍ　甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）活性の強化Ｔ８Ｈ
は脳下垂体により産生されを椎動物の甲状腺を活性化す
る糖蛋白質である。ＴＳＨが不足すると甲状腺が退化し
、上皮が扁平化する。ヒトではその不足は、フレチン病
、単純甲状腺腫、ひっくるめて粘液水腫といわれる１連
の異常状態をおこしうる。それは、ヨー素化合物または
甲状腺抽出物で治療しうる。短小マウスでは、脳下垂体
の機能が低下し、甲状腺は退化している。ＴＳＨで処理
すると血清Ｔ４レベルが上昇し、甲状腺は組織学的にあ
るところまで恢復する。

ＴＳＨよりモノクローナル抗体（ａｃ７３）が上記例Ｊ
のように調製でき、例Ｊに示した機関より入手しうる。

ａｃ　７３はＴＳＨのβ−鎖に特異的である。短小マウ
スを１グル一プ５頭づつにランダムに分け、表１３に示
したような処方で連続５日処理した。ラジオイムノアッ
セイで血清中のＴ４を分析した。食塩溶液中１０係ホル
マリンで固定しろうまたはプラスチック中に埋め込んだ
甲状腺組織を検鏡して組織学的に調べた。表１３にＴ４
データを示す。結果は、検鏡によってもたしかめられた
。

表１３ 処　理　Ｔ４レベル（平均上Ｓ、Ｅ、）０．１国際単位
Ｔ８Ｈ６２，８±６．７０．０　り単位ＴＳＨ３６，４
±６．３食塩水　５以下 １０’ＡＢＴ５ｏＧＣ７３のみ　５以下引　用　文　献 アストン他（Ａｓｔｏｎ、　Ｒａｎｄ　Ｉｖａｎｙｉ、
　Ｊ、）エンボジャーナル（Ｔｈｅ　ＥＭＢＯＪｏｕｒ
ｎａｌ　）　乙４９３−４９７（１９８３）　。

フィッシャー他（Ｆｉｓｈｅｒ、Ｒ，Ａ、ａｎｄ　Ｆ、
　Ｙａｔｅｓ　）（Ｅｄ、）生物学、農学、医学研究の
ための統計表（５ｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｔａｂｌｅｓ
　ｆｏｒ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ。

ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　ｍｅｄｉｃａｌ　
ｒｅｓｅａｒｃｈ　）　０１ｉｖｅｒＢｏｙｄ　（１９
５７）　− バーパイ（Ｈｅｒｂａｉ＋　Ｇ、）アクタ　フィシオル
　スカンジナビ力（Ａｃｔａ、Ｐｈｙｓｉｏｌ、　５ｃ
ａｎｄｉｎａｖｉｃａ　）８０（１９７０）４７０−４
９１　。

ヒユーおよびターナ−（Ｈｕｊ（ｈｅｓ、　Ｐ、Ｃ，Ｒ
，ａｎｄＴａｎｎｅｒ、Ｊ、Ｍ、）　ア　す　ト　ミ　
−　（Ｊ、八ｎａｔｏｍｙ　）　１　０６（１９７０）
３４９−３７０゜ 、イワンニ（Ｉｖａｎｙｉ　Ｊ、　）　Ｉｎ：モノクロ
ナル　ハイシリドーマ抗体（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　Ｈ
ｙｂｒｉｄｃｍａＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　）　：　Ｔｅ
ｃｈｎｉｑｕｅｓ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ
（Ｅｄｉｔｅｄ　ｂｙ　Ｔ（ｕｓｓｅｌｌ、Ｊ、Ｇ、Ｒ
，）　ＣＲＣＰｒｅｓｓ。

Ｃ１ｅｖｅｌａｎｄ、、　０ｈｉｏ　（１９８２）　ｐ
ｐ５９−７９−イワンニ（Ｉｖａｎｙｉ　Ｊ、　）　′
％ル　イミュノロジ−（Ｍｏ１．　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　
）　１９　（１９８２）　１６１１−１６１８゜ イワンニおよびディビス（Ｉｖａｎｙｉ、　Ｊ、ａｎｄ
　Ｐ。

Ｄａｖｉｓ、　）モル　イミュノロジー（Ｍｏ１．　Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ、）１７（１９８０）２８７−２９０゜ イワンニおよびディビス（Ｉｖａｎｙｉ、　Ｊ、ａｎｄ
　Ｐ。

Ｄａｖｉｓ、　）プロチド　オプ　バイオロジカル　フ
ルイド（Ｐｒｏｔｉｄｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｉｏｌ、
ｏｇｉｃａｌ　Ｆｌｕｉｄｓ　）２９　ｔｈ　ＣＣｏ１
１ｏｑｕｉｕ　１９８１　、　Ｅｄ、　Ｔ（−Ｐｅｅｔ
ｅｒｓＰｅｒｇａｍｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、　０ｘｆｏｒｄ
　ａｎｄ　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　１９８２゜８５５−８
６０゜ リンデ他（Ｌｉｎｄｅ、Ｓ、、　Ｂ、Ｈａｕｓｅｎ、　
Ａ、Ｌｅｒｎｍａｒｌｃ、　）アナリテイ力ル　バイオ
ケミストリー（ＡｎａｌｙｔＢｉｏｃｈｅｍ　）　１０
７　（１９８０）　１６５−１７６−ニコル（Ｎ１ｃｏ
ｌｌ、　Ｃ，Ｓ、　）エンドクリノロジー（Ｅｎｄｏｃ
ｒｉｎｏｌｏｇＹ　）　８０　６４１−６５５（１９６
７）。

【図面の簡単な説明】

第１図は、例ＡＫ関するもので本発明に準する組成物で
処理した短小マウスの体重増加を示す。 横軸は注射後の日数を示し、縦軸は体重増加量を初めの
体重圧対するチで示す。 第２図は、例Ｃに関するもので正常マウスでの対応する
体重増加を示す。横軸は注射後の日数を示し、縦軸は体
重増加量を、初めの体重に対する−で示す。 第６図は、例りに関するものでハトそのうの重量増加を
示す。第１欄のｈＧＨ、ｈｏｅ等はホルモンの種類で、
第２の欄の１００／１３に等は、投与量μν１回宛を３
回投与することを示す。第３の欄は、ＭＡＢ　（モノク
ローナル抗体）を示す。棒線グラフで、そのう粘膜の増
加重量を、〜±ＳＤで表わしである。ＭへＢ添加の場合
が合が斜線で、添加が横線で示しである。 第４図は、例Ｅに関するもので、キヌデルの体重増加を
示す。横軸は注射後の日数を示し、縦軸は累積体重増加
量（９）を示す。 犠−一　・・　％１６０苅／Ｚ報苅） 第１頁の続き 優先権主張　［株］１　叱郊８月２５叶０イギリス＠発
　明　者　アンドリュー・トーマ　イス　ホルダー、　
− （Ｇ　Ｂ　）＠８３２２８２６ ギリス国、キックストン　オン　テムズ、グロウブ　レ
ン招 手続補正書（カッ４；） 昭和５９年１２月之７１．１ 特許庁長官殿 ２、発明の名称 ホルモン活性処方物 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 １３、所 氏　名　デ　ウェルカム　ファウンデーション（名　称
）　リミテッド ４、代理人

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）背椎動物に投与された時に、処方物が、その背椎
   動物におけるホルモンの投与効果を強めるかまたはその
   ホルモンに類似した効果を発揮するように抗体の少なく
   ともあるもののエピトープ特異性を選ぶとして、薬剤と
   して許容されうる担体とホルモンに対する抗体を含有す
   る処方物。 （２１（ａ）ホルモンと、（ｂ）背椎動物に投与された
   時に、処方物がその背椎動物におけるホルモ、ンの投与
   効果を強めるかまたはそのホルモンに類似した効果を発
   揮するように抗体の少なくともあるもののエピトープ特
   異性を選ぶとして、そのホルモンに対する少なくともひ
   とつの型の抗体との複合物を、薬剤として許容されうる
   担体とあわせて含有する処方物。 （３）ホルモンが生長ホルモン、プロラクチンまたは絨
   毛性ソマトマンモトロＶンである上記（１）項記載の処
   方物。 （４）ホルモンが生長ホルモンである、上記（３）項記
   載の処方物。 （５）抗体がモノクローナル抗体である上記（１）項記
   載の処方物。 （６）落体が１！ｉＢ　Ｑ　１またはＪ［ｆＢ　０２と
   実質的に同じエビ）　−７’％異性を有しているモノク
   ローナル抗体ある上記（４）項記載の処方物。 （７）上記各項のいずれかに記載の処方物を“正常の”
   （明細書に定義）背椎動物に投与することによる、該背
   椎動物におけるホルモン投与効果を強めるかまたは該ホ
   ルモンに類似した効果を発揮さす方法。 （８）適当なホルモンの少なくともひとつのあらかじめ
   選択された”フラグメント（本明細書中に定義）″を、
   選ぶならばアジュバントと組合わせて含有する調製物を
   哺乳動物に投与することＫよる背椎動物のホルモン調節
   されている反応を増加さす方法。 （９）該反応が生長ホルモンにより調節されている上記
   （８）項記載の方法。 （ＩＩ　ホルモンの”フラグメント（本明細書定義）″
   および（または）免疫学的担体および（または）アトシ
   ュバントを薬剤として許容されうる担体とあわせて含有
   する処方物。 旧）（ａ）ホルモンに対して限定された特異性を有する
   モノクローナル抗体を調製し、 （ｂ）　段階（ａ）よりの抗体が、そのホルモンの活性
   を強化するかまたはそのホルモンに類似の活性を示すか
   を決定し、そして、そうであるならば、（Ｃ）該抗体と
   薬剤として許容されうる担体とをあわせるところの段階
   を包含する、上記（り項記載の処方物の調製方法。 ｒ１２ｉ　段階（ｂ）のあとで段階（（り　お前におい
   て、抗体を該ホルモンと複合物とする１、上記（２）項
   の処方物調製のための上記（１］）項記載の方法。 （１３１背椎動物に投与された時に、処方物が、その哺
   乳動物におけるホルモンの投与効果を強める力＼または
   、そのホルモンに類似した効果を発揮するように、抗体
   の少なくともあるもののエピトープ特異性を選ぶとして
   、そのホルモンに対する抗体を含有する薬剤処方物を背
   椎動物に投与することＫより、ホルモンにより調節され
   る組織の機能が異常に低いヒトまたは他の背椎動物を治
   療する方法。 （１４１（ａ）異常に低いホルモン調節組織の機能に関
   与するそのホルモンと、（ｂ）背椎動物に投与された時
   に、処方物がその背椎動物におけるホルそンの投与効果
   を強めるかまたはそのホルモンに類似した効果を発揮す
   るように抗体の少なくともあるものの工ぎトーゾ特異性
   を選ぶとして、そのホルモンに対す少なくともひとつの
   型の抗体との、複合物を含有する薬剤処方物をヒトまた
   は動物に投与することにより、異常に低い、ホルモン調
   節組織の機能を有する背椎動物を治療する方法。−