JPH04279526A

JPH04279526A - 腎疾患治療薬

Info

Publication number: JPH04279526A
Application number: JP6796691A
Authority: JP
Inventors: Takayuki Ishii; 隆幸石井; Makiko Kasano; 笠野　真紀子; Kazue Yasunaga; 安永　多恵; Mamoru Sugimoto; 守杉本; Masaaki Numata; 昌明沼田; Isao Suda; 須田　功; Makoto Tanaka; 誠田中; Kenkichi Tomita; 冨田　謙吉; Tomoya Ogawa; 智也小川
Original assignee: Mect Corp
Current assignee: Mect Corp
Priority date: 1991-03-07
Filing date: 1991-03-07
Publication date: 1992-10-05

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、コロミン酸又はコロミ
ン酸部分加水分解物を有効成分とする腎疾患治療薬に関
する。

【０００２】

【従来の技術】コロミン酸は、シアル酸（Ｎ−アセチル
ノイラミン酸、ＮｅｕＡｃで表わされる）を構成単位と
し、分子量１００００程度のホモポリマーであって、大
腸菌や髄膜炎双球菌などの血清型分類の基準となる多糖
体である。

【０００３】コロミン酸は、エシエリヒア属菌のような
微生物を培養することにより、製造される〔特公昭４７
−２６３１９号、特開平１−１４４９８９号〕。さらに
、コロミン酸は、部分加水分解することにより、コロミ
ン酸より分子量の小さいオリゴマーを製造できる〔Ｈ．
ノモトら、Ａｒｃｈ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ．　Ｂｉｏｐｈ
ｙｓ．，２１８巻、３３５−３４１ページ（１９８２）
〕。

【０００４】しかるに、コロミン酸及びその部分加水分
解物の生理活性については、あまり研究されていない。

【０００５】ところで、コロミン酸の構成単位であるＮ
−アセチルノイラミン酸については、従来より抗ウィル
ス作用、抗炎症作用、抗アレルギー作用を示すことが報
告されている〔■ロバート・エル・ハーシュ（Ｈｅｓｓ
，　Ｅ．　Ｌ．）他、ザ・ジャーナル・オブ・イムノロ
ジー（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｍｍｎｏｌｏ
ｇｙ）　、１２７巻５号（１９８１年）Ｐ１７４０〜Ｐ
１７４３■ピー・グールーグ（Ｇｏｒｏｇ，　Ｐ．　）
他、エージェンツアンド　　アクションズ（Ａｇｅｎｔ
ｓ　ａｎｄ　Ａｃｔｉｏｎｓ）、８巻５号（１９７８年
）Ｐ５４３〜Ｐ５４５■イトウ　　ヒロミ他、薬理と治
療　　１３巻７号（１９８５年）Ｐ４７９〜Ｐ４９４■
第６１回日本薬理学会総会（昭和６３年３月２３日〜２
６日、「モルモットにおける　Ｎ−ａｃｅｔｙｌｎｅｕ
ｒａｍｉｎｉｃ　ａｃｉｄ（ＮＡＮＡ）の抗アレルギー
作用」）など〕。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、コロ
ミン酸及びコロミン酸の部分加水分解物を用いた新規な
医薬品を提供することにある。

【０００７】本発明者は、コロミン酸及びコロミン酸の
部分加水分解物が腎炎に対する抑制作用及び血小板凝集
抑制効果を有することを見出し、本発明に到達した。近
年、腎炎の発症及び進展において血液凝固系の関与が注
目されており、抗血小板薬の腎炎治療分野への導入が目
立っている。腎炎の発症時には、血液凝固系が亢進する
ことが知られている。例えば、障害を受けた糸旧態には
血小板または血小板関連物質が認められるし、腎炎患者
の血中免疫複合体は血小板の活性化を引き起こす。この
様に、腎炎には血小板が深く関わっており、今や腎炎治
療に血小板凝集抑制効果を有する薬剤は書かせないもの
と成っている。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明は、コロミン酸、
下記一般式〔Ｉ〕で示される化合物又はその薬学的に許
容される塩を有効成分とする腎疾患治療薬に関する。

【０００９】

【化２】（式中、ｎは０〜１０の整数である）

【００１０】以下本発明について説明する。一般式〔Ｉ
〕で示されるコロミン酸部分加水分解物は、市販のコロ
ミン酸からノモトらの方法（Ａｒｃｈ．　Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．　Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２１８巻、３３５−３４１ペ
ージ（１９８２）〕を用いて得ることができる。即ち、
塩酸を用いてコロミン酸を部分加水分解し、次いで分解
物を、ＤＥＡＥ−セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）
Ａ−２５クロマトグラフィー等の精製手段を用いて分画
することにより、ｎが０〜１０のＮ−アセチルノイラミ
ン酸ユニットが２〜１２のオリゴマーを得ることができ
る。ｎは１〜９であることが好ましい。

【００１１】本発明には、一般式〔Ｉ〕の化合物の薬学
的に許容される塩も用いることができる。塩を形成する
対イオンとしては、ナトリウム、カリウム、アンモニウ
ム、アミン等を例示できるが、これらに限定されるもの
ではない。

【００１２】本発明の腎疾患治療薬は、０．１〜１００
ｍｇ／体重１Ｋｇを経口投与、注射投与等することによ
り用いられる。

【００１３】

【発明の効果】本発明は、腎炎に対する抑制作用を有す
る腎疾患治療薬を提供する。本発明の腎疾患治療薬は、
血小板凝集抑制効果を有する。

【００１４】

【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに説明する
。尚、本実施例中、（ｎｅｕ５Ａｃ）２、（ｎｅｕ５Ａ
ｃ）３、（ｎｅｕ５Ａｃ）４、（ｎｅｕ５Ａｃ）５、（
ｎｅｕ５Ａｃ）６、（ｎｅｕ５Ａｃ）７、（ｎｅｕ５Ａ
ｃ）８、（ｎｅｕ５Ａｃ）９及び（ｎｅｕ５Ａｃ）１２
は、それぞれ、ｎが０、１、２、３、４、５、６、７及
び１０の一般式〔Ｉ〕のコロミン酸部分加水分解物のナ
トリウム塩である。

【００１５】実施例１ −受身アルサス反応に対する作用− （１）　　実験動物体重２５０ｇ前後のハートレー（Ｈａｒｔｌｅｙ）系雄
性モルモットを用いた。

【００１６】（２）　　実験材料抗血清は、抗オバルブミンウサギ血清（抗体価＝１／８
００００以上）を、抗原はＯＡ（オバルブミン）を用い
た。被験薬は市販のコロミン酸ナトリウム塩（半井化学
製）または、コロミン酸をノモトらの方法〔Ｎｏｍｏｔ
ｏ、Ｈ．　ｅｔ　ａｌ．　Ａｒｃｈ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ
．　Ｂｉｏｐｈｓｏ．，２１８、３３５−３４１（１９
８２）〕に従い酸で部分的に分解することにより調製し
た。

【００１７】（３）　　実験方法受身アルサス反応は、カタヤマらの方法〔Ｋａｔａｙａ
ｍａ、Ｓ．　ｅｔａｌ．，　Ａｒｚｅｉｍ−Ｆｏｒｓｃ
ｈ．，３１、１１９６（１９８１）〕に準じて行った。すなわち、２５０ｇ前後のモルモットに、抗オバルブミ
ンウサギ血清２．５ｍｌ／Ｋｇを静脈内に投与すること
により感作した。その３０分後に、０．０２５ｍｇを含
む抗原液０．０５０ｍｌを前日剪毛しておいた腹部に皮
内投与して反応を惹起した。抗原チャレンジ２時間後、
刺激部位における出血の面積を測定し反応の程度の指標
とした。また、抗原投与の３０分前に、すなわち、感作
直後に下記のごとくＩ〜ＸＩ群のモルモットに被験薬お
よび生理食塩水を静脈内投与した。モルモットは各群５
匹とした。

【００１８】　　Ｉ　　群：コロミン酸　　　　　　１０ｍｇ／（モ
ルモット体重１Ｋｇ当たり）を投与　　ＩＩ　　群：（
ｎｅｕ５Ａｃ）２　　　　　　１０ｍｇ／（モルモット
体重１Ｋｇ当たり）を投与　　ＩＩＩ　群：（ｎｅｕ５
Ａｃ）３　　　　　　１０ｍｇ／（モルモット体重１Ｋ
ｇ当たり）を投与　　ＩＶ　　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）４
　　　　　　１０ｍｇ／（モルモット体重１Ｋｇ当たり
）を投与　　Ｖ　　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）５　　　　　
　１０ｍｇ／（モルモット体重１Ｋｇ当たり）を投与　
　ＶＩ　　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）６　　　　　　１０ｍ
ｇ／（モルモット体重１Ｋｇ当たり）を投与　　ＶＩＩ
　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）７　　　　　　１０ｍｇ／（モ
ルモット体重１Ｋｇ当たり）を投与　　ＶＩＩＩ群：（
ｎｅｕ５Ａｃ）８　　　　　　１０ｍｇ／（モルモット
体重１Ｋｇ当たり）を投与　　ＩＸ　　群：（ｎｅｕ５
Ａｃ）９　　　　　　１０ｍｇ／（モルモット体重１Ｋ
ｇ当たり）を投与　　Ｘ　　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）１２
　　　　１０ｍｇ／（モルモット体重１Ｋｇ当たり）を
投与　　ＸＩ　　群：生理食塩水　　　　　　２．５ｍ
ｌ／（モルモット体重１Ｋｇ当たり）を投与

【００１９
】（４）　　統計処理１群５例の実験を行い、得られた実験結果を平均±標準
誤差として示した。また、有意差検定には　Ｓｔｕｄｅ
ｎｔのｔ検定を用い、ｐ＜０．０５を統計学的に有意で
あるとした。

【００２０】（５）　　実験結果表１はＩ〜ＸＩ群の刺激部位における出血の面積を示し
ている。数字は、ＸＩ群（生理食塩水投与群）のデータ
を１００％として抑制率を算出したものである。Ｉ〜Ｘ
群では有意に刺激部位における出血色素浸出面積を抑制
した。

【００２１】

【表１】

【００２２】（６）　　判定上記アルサス反応の結果より、コロミン酸およびその部
分分解物はＩＩＩ　型アレルギー抑制効果を有している
ことを示している。

【００２３】実施例２（ｎｅｕ５Ａｃ）７を抗原投与の１時間前にモルモット
体重１Ｋｇ当たり１０、３０、１００ｍｇ経口投与した
以外は実施例１と同様にして受身アルサス反応の試験を
行った。結果を表２に示す。

【００２４】

【表２】

【００２５】表２のアルサス反応の結果より、コロミン
酸およびその部分分解物はＩＩＩ　型アレルギー抑制効
果を有していることを示している。

【００２６】実施例３ −ピュロマイシンアミノヌクレオシド（Ｐｕｒｏｍｙｃ
ｉｎ　ａｍｉｎｉｎｕｃｌｅｏｃｉｄｅ　：ＰＡＮ）腎
炎に対する作用−（１）　　実験動物体重１６０〜１８０ｇの　ｓｐｒａｕｇｅ−Ｄａｗｌｅ
ｙ（ＳＤ）系雄性ラットを用いた。（２）　　実験材料
ＰＡＮは、シグマ（Ｓｉｇｍａ　）社より購入した。被
験薬は実施例１と同様に入手した。

【００２７】（３）　　実験方法ラットの腹腔内に体重１Ｋｇ当り８０ｍｇのＰＡＮを投
与し、腎炎を惹起させた。その後、上記ラットに下記の
被験薬（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ　、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ
　、ＶＩＩＩ群）または生理食塩水（ＩＸ、Ｘ群）をＰ
ＡＮ投与直後より１日１回１５日間連続皮下投与あるい
は経口投与した。ＸＩ群のラットも対照薬としてメチル
プレドニゾロンをＰＡＮ投与直後より１日１回１５日間
連続皮下投与した。また、ＰＡＮ投与後３、６、９、１
３日目にそれぞれ水５ｍｌを負荷し、６時間採尿した。ＰＡＮ投与後１４日目に解剖を行い。腎臓を摘出して湿
重量を測定した。

【００２８】Ｉ　　　　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）６　　　　１０ｍｇ／
（ラット体重１Ｋｇ当たり）を経口投与ＩＩ　　　　群
：（ｎｅｕ５Ａｃ）６　　　　　　５ｍｇ／（ラット体
重１Ｋｇ当たり）を経口投与ＩＩＩ　　　群：（ｎｅｕ
５Ａｃ）６　　　　　　５ｍｇ／（ラット体重１Ｋｇ当
たり）を皮下投与ＩＶ　　　　群：（ｎｅｕ５Ａｃ）６
　　　　　　１ｍｇ／（ラット体重１Ｋｇ当たり）を皮
下投与Ｖ　　　　群：コロミン酸　　　　３０ｍｇ／（
ラット体重１Ｋｇ当たり）を経口投与ＶＩ　　　　群：
コロミン酸　　　　１０ｍｇ／（ラット体重１Ｋｇ当た
り）を経口投与ＶＩＩ　　群：コロミン酸　　　　２０
ｍｇ／（ラット体重１Ｋｇ当たり）を皮下投与ＶＩＩＩ
　群：コロミン酸　　　　　　５ｍｇ／（ラット体重１
Ｋｇ当たり）を皮下投与ＩＸ　　　　群：生理食塩水　
　　　２．５ｍｌ／（ラット体重１Ｋｇ当たり）を経口
投与Ｘ　　　　群：生理食塩水　　　　２．５ｍｌ／（
ラット体重１Ｋｇ当たり）を皮下投与ＸＩ　　　　群：
メチルフ゜レト゛ニソ゛ロン　　　　　　２ｍｇ／（ラ
ット体重１Ｋｇ当たり）を皮下投与

【００２９】（４）
　　統計処理１群１０例の実験を行い、得られた実験結果を平均±標
準誤差として示した。また、有意差検定には　Ｓｔｕｄ
ｅｎｔのｔ検定を用い、ｐ＜０．０５を統計学的に有意
であるとした。

【００３０】（５）　　実験結果 ■Ｉ〜ＸＩＩ　群の体重増加率および腎臓湿重量を表３
に示す。ＰＡＮ投与により体重の増加が抑制される（Ｉ
Ｘ、Ｘ群）が、（ｎｅｕ５ｃ）６投与群（Ｉ〜ＩＶ群）
およびコロミン酸投与群（Ｖ〜ＶＩＩＩ群）では体重増
加の抑制を防御し、全身症状の改善が認められた。しか
し、陽性対照薬であるメチルプレドニゾロン投与群（Ｘ
Ｉ群）では、体重増加の改善結果は認められなく、全身
症状の改善も認められなかった。また、ＰＡＮ投与によ
り腎湿重量が増加する（ＩＸ、Ｘ群）が、（ｎｅｕ５ｃ
）６投与群（Ｉ〜ＩＶ群）およびコロミン酸投与群（Ｖ
〜ＶＩＩＩ群）では腎湿重量の増加を抑制した。陽性対
照薬であるメチルプレドニゾロン投与群（ＸＩ群）でも
同程度の抑制効果が認められた。

【００３１】

【表３】

【００３２】■Ｉ〜ＸＩＩ　群の３、６、９、１３日目
の尿中蛋白質を表４に示す。ＰＡＮ投与により６日目か
ら尿中蛋白量が増加する（ＩＸ、Ｘ群）が、シアル酸６
個のポリマー投与群（Ｉ〜ＩＶ群）およびコロミン酸投
与群（Ｖ〜ＶＩＩＩ群）では６、９、１３日目で用量依
存的に尿中蛋白量の増加を抑制した。陽性対照薬である
メチルプレドノゾロン投与群（ＸＩ群）でも同程度の抑
制効果が認められた。

【００３１】

【表４】

【００３２】（６）　　判定上記ＰＡＮ腎炎実験の結果より、コロミン酸および（ｎ
ｅｕ５Ａｃ）　６は経口投与及び皮下投与で腎炎抑制効
果を有していることを示している。

【００３３】実施例４ −アラキドン酸致死に対する作用− （１）　　実験動物体重２０〜２５ｇのｄｄｙ　系雄性マウスを用いた。（２）　　実験材料アラキドン酸は、シグマ（Ｓｉｇｍａ　）社より購入し
た。被験薬は実施例１と同様に入手した。

【００３４】（３）　　実験方法マウスの腹腔内に下記の被験薬（Ｉ、ＩＩ群）または生
理食塩水（ＩＩＩ群）を投与した。ＩＶ群のマウスには
対照薬としてアスピリンを腹腔内投与した。被験薬投与
後３０分後に、上記マウスの尾静脈より体重１Ｋｇ当り
１００ｍｇのアラキドン酸を投与し、死亡するまでの時
間（秒）を計測した。但し、５分以上生存した場合は３
００秒として計算した。

【００３５】Ｉ　　　　群：生理食塩水　　　　０．２ｍｇ／（ラッ
ト体重１Ｋｇ当たり）を投与ＩＩ　　　　群：（ｎｅｕ
５Ａｃ）６　　　　１０ｍｇ／（ラット体重１Ｋｇ当た
り）を投与ＩＩＩ　　　群：コロミン酸　　　　１０ｍ
ｇ／（ラット体重１Ｋｇ当たり）を投与ＩＶ　　　　群
：アスピリン　　　　３０ｍｇ／（ラット体重１Ｋｇ当
たり）を投与

【００３６】（４）　　統計処理１群１０例の実験を行い、得られた実験結果を平均±標
準誤差として示した。また、有意差検定には　Ｓｔｕｄ
ｅｎｔのｔ検定を用い、ｐ＜０．０５を統計学的に有意
であるとした。

【００３７】（５）　　実験結果表５にＩ〜ＩＶ群の死亡時間（秒）及び生存率（％）を
示す。Ｉ群（生理食塩水投与群）に対してＩＩ、ＩＩＩ
　群では有意に死亡時間を延長し、生存率も増加し、対
照薬のアスピリンと同程度の効果が認められた。

【００３８】

【表５】

【００３９】（６）　　判定上記アラキドン酸実験の結果より、コロミン酸および（
ｎｅｕ５Ａｃ）　６は血小板凝集抑制効果を有している
ことを示している。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　コロミン酸、下記一般式〔Ｉ〕で示さ
れる化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分と
する腎疾患治療薬。【化１】（式中、ｎは０〜１０の整数である。）
【請求項２】　
　ｎが１〜７の整数である一般式〔Ｉ〕の化合物又はそ
の薬学的に許容される塩を有効成分とする請求項１記載
の腎疾患治療薬。