JPH04226915A

JPH04226915A - 抗炎症剤

Info

Publication number: JPH04226915A
Application number: JP3116466A
Authority: JP
Inventors: Michel Guichardant; ミシェル　ギュイシャルダン; Michel Rigaud; ミシェル　リゴウ
Original assignee: Societe des Produits Nestle SA; Nestle SA
Current assignee: Societe des Produits Nestle SA; Nestle SA
Priority date: 1990-05-23
Filing date: 1991-05-22
Publication date: 1992-08-17
Anticipated expiration: 2015-07-17
Also published as: EP0457950A1; US5158975A; DK0457950T3; EP0457950B1; DE69004081T2; IE911450A1; IE65969B1; ES2059880T3; JP3065710B2; DE69004081D1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は抗炎症医薬組成物におけ
るステアリドン酸の使用に関する。ステアリドン酸（Ｓ
Ａ、Ｃ１８：４　　Δ６、９、１２、１５）はｎ−３系
列の多価不飽和脂肪酸である（命名はメチル基から最初
の二重結合の位置によって示す）。生物体によって利用
されるためには、ｎ−３系列の原点であり、かつ大部分
の摂取食物中にあるα−リノレン酸（ＡＬＡ、Ｃ１８：
３　　Δ９、１２、１５）は、酵素Δ６デサチュラーゼ
により不飽和化してＳＡに代謝されねばならない。この
酵素の活性は弱く、加齢によってそして或る種の病気の
後に減少することは知られている。

【０００２】例えば、喘息のようなアレルギー型、そし
てオデキ、乾癬、湿疹のような皮膚型、又はリューマチ
型の炎症作用、および例えば嚢胞性線維症のような外傷
、ショック状態又は病変に重要な関与をする物質の中で
、ロイコトリエンは主に細胞膜から放出されるアラキド
ン酸（ＡＡ、Ｃ２０：４　　Δ５、８、１１、１４）の
リポキシゲナーゼによる酸化によって生成される。更に
詳述すると、多形核のヒト白血球はＡＡをロイコトリエ
ンに変換し、更に特別には５−リポキシゲナーゼによっ
て安定な（ＳＳ、１２Ｒ）−５，１２−ジヒドロキシ−
６，１４−シス−８，１０−トランス−エイコサテトラ
エン酸（ＬＴＢ４）に変換することは知られている。Ｌ
ＴＢ４は種々の炎症作用に主要な関与を演じている。

【０００３】

【従来の技術】この理由のために、５−リポキシゲナー
ゼのインヒビターを開発することによって炎症の要因を
減ずる試みが行なわれた。例えばＬｅｅ．Ｔ．Ｈ．等に
よって、「Ｊ．Ｃｌｉｎ　　Ｉｎｖｅｓｔ」７４巻、１
９２２−１９３３頁（１９８４）に、エイコサペンタエ
ン酸（ＥＰＡ、Ｃ２０：５　　Δ５、８、１１、１４、
１７）のようなｎ−３系列の或種の高級脂肪酸はロイコ
トリエンの合成を調節することができ、かつ炎症の状態
を改善できることが記載してある。このことは又、ｎ−
６系列の脂肪酸、ジホモ−γ−リノレン酸（ＤＨＬＡ、
Ｃ２０：３　　Δ８、１１、１４）についても証明され
た（例えば、Ｔａｔｅ．Ｇ等による、「Ｊ．Ｒｈｅｕｍ
ａｔｏｌ」１６巻７２９−７３３頁、（１９８９年）参
照）。ＳＡはロイコトリエンの生合成を阻害する性質を
有することを本発明者は見出した。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明は哺乳動物の炎
症原因の疾患、更に特別にはアレルギー性疾患、皮膚疾
患、リューマチ性疾患および外症、ショック状態そして
病変から生ずる疾患の予防および治療を目的とする、医
薬組成物を調製するためにステアリン酸、又は医薬的に
受容可能なその誘導体の使用に関する。本発明において
、医薬的に受容可能な誘導体は脂肪酸に相当する塩、エ
ステル又はアミドである。望ましい塩はアミノ酸、例え
ばアルギニンの塩である。望ましいエステルは例えばモ
ノ、ジ、トリグリセリドおよびリン脂質である。

【０００５】

【課題を解決するための手段】特定の実施態様では、Ａ
Ａの酸素代謝を阻害する１つ以上の多価不飽和脂肪酸と
ＳＡは併用される。この不飽和脂肪酸はＮ３系列の５−
リポキシゲナーゼ−阻害性多価不飽和脂肪酸、例えばＥ
ＰＡ、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ、Ｃ２２：６　　Δ
４、７、１０、１３、１６、１９）、又はＮ−６系列の
５−リポキシゲナーゼ−阻害性多価不飽和脂肪酸、例え
ばＤＨＬＡ又はその前駆物質のγ−リノレン酸（ＧＬＡ
、Ｃ１８：３　　Δ６、９、１２）、又は上記のような
型の脂肪酸の医薬的に受容可能な誘導体である。この併
用の好ましい実施態様はクロフサスグリ種子油由来のＧ
ＬＡおよびＳＡを本質的に含有する濃縮物、例えばＥＰ
Ａ第０３９９４１７号明細書の例１、２により調製した
濃縮物を使用する点で特徴がある。この併用の他の好ま
しい実施態様は魚油由来のＳＡ、ＥＰＡおよびＤＨＡを
本質的に含有する濃縮物、例えばＥＰＡ第０３９９４１
７号明細書の例３の第１節により調製した濃縮物を使用
する点で特徴がある。

【０００６】本発明により使用するＳＡ又は多価不飽和
脂肪酸又はそれ等の誘導体の混合物は酸化防止剤、例え
ばアスコルビル　　パルミテート、トコフェロール、レ
シチンの存在下のアスコルビン酸のような酸化防止剤の
混合物により酸化を防止するのが有利である。

【０００７】医薬組成物は投与方法により、例えば経口
の、腸溶性の直腸の、腸管外の又は局所の投与により種
々の方法で製剤化することができる。例えば医薬組成物
をカプセル、ゼラチン被覆をした錠剤、座薬又はシロッ
プとして製剤化することができる。腸溶性の又は腸管外
の投与のため、組成物は化学的におよび物理的に安定化
した、無加熱の無菌溶液又はエマルジョンとして製剤化
される。特殊な局所外用薬の場合、例えば、オデキ、湿
疹又は乾癬型の皮膚の炎症を治療するために、組成物を
例えば軟膏、膏薬、クリーム又はローションとして製剤
化することができる。投与量は治療する疾患の型と程度
により異なる。それは、１回の投与で又は好ましくは２
から３回に分けた投与で１日当り総量で０．０５から１
０ｇのステアリドン酸の量とすることができる。

【０００８】

【実施例】次例により本発明を更に具体的に説明する。例中、部および％は特に断わらない限り、重量基準とす
る。

【０００９】例　　１ロイコトリエンの生合成に及ぼすＳＡの効果ロコイトリ
エンの生合成に及ぼすＳＡの効果を研究するため、分離
したヒト白血球をＳＡと共に温置し、ＥＰＡおよびＤＨ
ＬＡとの比較のために、ＡＡに５−リポキシゲナーゼを
作用させて得た代謝生成物を二次元薄層クロマトグラフ
ィ（ＴＬＣ）により同定し、高性能液体クロマトグラフ
ィ（ＨＰＬＣ）により定量的分析する。ＡＡとＳＡの代
謝を追求するため、Ｃ１　の位置にＣ１４で識別したこ
れ等の脂肪酸で若干の実験を行なった。

【００１０】１．実験条件１．１　　細胞サスペンションの調製献血前少くとも１０日間薬剤を使用していない正常な献
血者の血液を、抗凝血物質としてクエン酸、クエン酸三
ナトリウムおよびデキストロースの混合物に入れた。２
００Ｇで１５分間遠心分離した後、血小板の多い血漿を
除去し、残留する血液画分を改修し、３％のデキストラ
ン２５０と０．９％の食塩を含有する水溶液の０．５容
量をそれに加えた。赤血球は環境温度で約９０分間放置
して沈降させ、その後上澄液を回収し、８０Ｇで１５分
間遠心分離する。得た沈降物は約２×１０６　の細胞に
相当し、次に１ｍｌの蒸留水で１５秒間、再懸濁し、そ
の後１ｍｌの２倍濃縮のＴｙｒｏｄｅ／ＨＥＰＥ溶液を
添加して再び等モル濃度とする。次にサスペンションを
６０Ｇで１０分遠心分離し、白血球の沈降物を回収し、
ついで２ｍＭ（ミリモル／リットル）のカルシウムを含
有するＴｙｒｏｄｅ／ＨＥＰＥＳ溶液で再懸濁する。白
血球をイオン泳動性カルシウムＡ２３１８７（１μＭ）
、ＡＡ（２０μＭ）で３７℃、１０分間刺激した後、そ
れ等を下記に示す量の脂肪酸（任意にＳＡ又はＡＡの１
位にＣ１４で標識をした）により３７℃で３０分間温置
する。２ナノモルの１３−ヒドロキシオクタデカジエン酸（１
３−ＨＯＤＥ）（リノレン酸に大豆リポキシゲナーゼを
作用させて得る）および２ナノモルのプロスタグランジ
ンＢ２　（ＰＧＢ２）を含有するエタノールで、サスペ
ンションの量に比し３倍の容量のエタノールにより、培
養を終結させる。脂質はサスペンションの容量の６倍量
のクロロホルムで（エタノール無し）抽出する。１３−
ＨＯＤＥおよびＰＧＢ２は定量分析の標準として使用す
る。

【００１１】１．２　　モノヒドロキシル化脂肪酸の分
析抽出した脂質をシリカゲルＧのプレートで二次元薄層
クロマトグラフィーにより分離する。モノヒドロキシル
化脂肪酸を第１次元でヘキサン、ジエチルエーテルおよ
び氷酢酸の５９：４０：１の容量比の溶媒混合物により
展開し、ジヒドロキシル化脂肪酸はプレートの初めに残
留する。放射能検出器で識別したこれ等のモノヒドロキ
シル化脂肪酸を検出し、１３−ＨＯＤＥと共にプレート
から回収し、ジエチルエーテルで抽出し、ついで窒素下
で溶媒を蒸発させた後、逆相ＨＰＬＣによりメタノール
とｐＨ３の酢酸水の７３：２７の容量比の溶離溶媒混合
物で分離する。それ等を波長２３４ｎｍのＵＶ分光法に
より検出し、１３ＨＯＤＥ標準品との比較によりそれ等
全てが３×１０４　Ｍ−１ｃｍ−１の同一の比吸収係数
を有するという仮説を基礎として定量化する。

【００１２】１．３　　ジヒドロキシル化脂肪酸の分析
プレートの初めの部分に残留するジヒドロキシル化脂肪
酸は第二次元で、ヘキサン、ジエチルエーテルおよび氷
酢酸の２５：７４：１の容量比の溶媒混合物を使用して
、一次元と垂直に展開する。それ等の検出、回収、抽出
、分離および定量分析は上記に記載したと同様な方法で
行ない、但しＨＰＬＣに使用する溶離溶媒混合物はメタ
ノールおよびｐＨ３の酢酸水溶液の６６：３４の容量比
の混合物である。ＰＧＢ２は、それ等のそれぞれの最高
ＵＶ吸収によるジヒドロキシル化脂肪酸の定量値の標準
として使用する（波長２７０ｎｍ，ＰＧＢ２およびジヒ
ドロキシ誘導体の吸光はそれぞれ２．８×１０４　およ
び５×１０４　Ｍ−１ｃｍ−１）。

【００１３】２．結　　果アラキドン酸（ＡＡ）（シグマ・ケミカル・カンパニィ
，セントルイス、Ｍｏ．／米国）は対照として使用する
。即ち白血球は他の脂肪酸と培養しない。白血球で培養
した脂肪酸は、ＥＰＡ第０３９９４１７号明細書に従っ
てクロフサスグリ種子油の精製した形態の油から得たス
テアリドン酸（ＳＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ
）（シグマ・ケミカル・カンパニィ）およびジホモ−γ
−リノレン酸（ＤＨＬＡ）（シグマ・ケミカル・カンパ
ニィ）である。５−ヒドロキシエイコサテトラエン酸（
５−ＨＥＴＥ）（ケーマンケミカル　　Ａｎｎ　　Ａｒ
ｂｏｒ　　Ｍｉ．／米国）、最高波長（λｍａｘ　）：
２３４ｎｍ、保持時間（Ｒｔ）：４２，６９分，５Ｓ，
１２Ｓ〔Ｅ，Ｚ，Ｅ，Ｚ〕−ジヒドロキシエイコサテト
ラエン酸（ｄｉ−ＨＥＴＥ）（Ｍ．Ｇｕｉｃｈａｒｄａ
ｎｔ等による、「Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．」２５６巻、８
７９−８８３頁、１９８８年）、λｍａｘ　：２５９、
２６８および２７９ｎｍ、Ｒｔ：２９．９６分、５Ｓ，
１２Ｒ〔Ｚ，Ｅ，Ｅ，Ｚ〕−５，１２−ジヒドロキシ−
６，１４−シス−８，１０−トランス−エイコサテトラ
エン酸（ＬＴＢ４）（ケーマンケミカル）、λｍａｘ　
：２６１、２７１および２８２ｎｍ、ＲＴ：２７．４６
分、ＬＴＢ４のＡ異性体、５Ｓ，１２Ｒ〔Ｅ，Ｅ，Ｅ，
Ｚ〕−ＬＴＢ４（Ｍ，Ｇｕｉｃｈａｒｄａｎｔ等、「Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．」、２５６巻、８７９−８８３頁、
１９８８年）、Ｒｔ：２１．４６分およびＬＴＢ４のＢ
異性体、５Ｓ，１２Ｓ〔Ｅ，Ｅ，Ｅ，Ｚ〕−ＬＴＢ４（
Ｍ．Ｇｕｉｃｈａｒｄａｎｔ等、「Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ
．」、２５６巻、８７９−８８３頁、１９８８年）、Ｒ
Ｔ：２４．２７分。得た代謝量はピコモル／１０８　白
血球で示し、ｎ分析の５つの実験の平均で表わす。有意
の程度Ｐは対照に関する試験ｔによって決定する。結果
を次表に示す。

【００１４】

【表１】

【００１５】ＳＡ、ｎ−３系列の多価不飽和脂肪酸はヒ
ト白血球の５−リポキシゲナーゼによりロイコトリエン
になるＡＡの代謝に効果を有することを上記の結果はは
っきりと示している。それは５−ＨＥＴＥおよびＤ１−
ＨＥＴＥの生成を約２５％まで、そしてＢ４ロイコトリ
エンの生成を約５０％迄、即ち同一濃度（２０μｍ）の
ｎ−３系列の多価不飽和脂肪酸であるＥＰＡに匹敵し得
る水準まで減ずる。然し、その活性はジホモ−γ−リノ
レン酸、Ｎ−６系列の多価不飽和脂肪酸の活性ほど強く
無く、それは同じ濃度（２０μｍ）でＢ４ロイコトリエ
ンの生成を約８０％迄、そして５−ＨＥＴＥの生成を約
４０％まで阻害する。その効果は又、そのヒドロキシル
化代謝生成物のどれかに起因することができ、それは標
識したＳＡから検出された。

【００１６】例２から５２．クロフサスグリ種子油から得た２５０ｍｇのＳＡを
含有する、経口投与用のゼラチンカプセルを調製する。３．魚油から得た２５０ｍｇのＳＡを含有する、経口投
与用のゼラチンカプセルを調製する。４．８０％のＧＬＡおよびクロフサスグリ種子油から得
た１５％のＳＡを含有する脂肪酸混合物の５００ｍｇを
含有する経口投与用のゼラチンカプセルを調製する。５．１６％ＳＡ、３５％ＥＰＡおよび魚油由来の３９％
ＤＨＡを含有する脂肪酸混合物の５００ｍｇを含有する
経口投与用のゼラチンカプセルを調製する。

【００１７】例６から９局所用である次の組成物を調製する。６．撥水性膏薬　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　％　　　　　　ＳＡ　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５　　
　　微粉状ポリエチレン　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１０　　　　ミリスチン酸イソプロピル　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　８５７．撥水性軟膏　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　％　　　　　　ＳＡ　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１　　　　カプリン酸、カプリル酸およびステアリ
ン酸のトリグリセリド　　４０　　　　カプリン酸およ
びカプリル酸のトリグリセリド　　　　　　　　　　　
　　　　　３０　　　　ワセリン　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　２０　　　　ワセリン
油　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　９８．クリーム　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　％　　　　　　ＳＡ　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
０．５　　　　セチルアルコール、２０モルのエチレン
オキシドを　　　　エトキシ化したセチルアルコール、
モノステアリン　　　　酸グリセロール　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　６　　　　カプリン酸お
よびカプリル酸のトリグリセリド　　　　　　　　　　
　　　　　　１５　　　　プロピレングリコール　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　１０　　　　水　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　６８
．５９．ローション　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　％　　　　　　ＳＡ　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０
．１　　　　エタノール　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　５０　　　　プロピレングリコール
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　４９．９上記の例６から９
の組成物を調製し、光の入らない不活性雰囲気中に貯蔵
する。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　ステアリドン酸又はその医療的に受容
可能な誘導体を活性成分として含有することを特徴とす
る、哺乳動物の炎症原因の疾患予防用および治療用医薬
組成物。
【請求項２】　　アラキドン酸の酸素代謝を抑制する１
つ以上の多価不飽和脂肪酸又は１つ以上のその酸の１つ
以上の医薬的に受容可能な誘導体を併用する、請求項１
記載の医薬組成物。
【請求項３】　　エイコサペンタエン酸および／又はド
コサヘキサエン酸を併用する、請求項２記載の医薬組成
物。
【請求項４】　　γ−リノレン酸および／又はジホモ−
γ−リノレン酸を併用する、請求項２記載の医薬組成物
。
【請求項５】　　クロフサスグリ種子油又は魚油が強化
された濃縮状態がある、請求項２記載の医薬組成物。
【請求項６】　　経口の、直腸の、腸溶性の又は腸管外
の投与に適する形態である、請求項１から５の何れか１
項に記載の医薬組成物。
【請求項７】　　局所性投与に適した剤形である、請求
項１から５の何れか１項記載の医薬組成物。
【請求項８】　　１日／０．０５〜１０ｇのステアリド
ン酸又はその医薬的に容認可能な誘導体を供する剤型で
ある、請求項１記載の組成物。
【請求項９】　　有効量のステアリドン酸又はその医薬
的に受容可能な誘導体を、任意にアラキドン酸の酸素代
謝を抑制する１つ以上の多価不飽和脂肪酸又は１つ以上
のその酸の１つ以上の医薬的に受容可能な誘導体とを併
用して疾患動物に投与することを特徴とする、哺乳動物
の炎症原因の疾患の予防および治療方法。
【請求項１０】　　１日／０．０５から１０ｇのステア
リドン酸又はその医薬的に受容可能な誘導体を投与する
、請求項９記載の方法。