JPH04202135A - 抗酵素阻害作用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明はアデノシントリホスファターゼ（以下、Ａ　Ｔ
　Ｐ　ａｓｅという）に対する酵素阻害作用を阻止する
ために有効な抗酵素阻害作用剤に関するものである。

［従来の技術および発明が解決しようとする課題］近年
、リノール酸、リルン酸、オレイン酸、アラキドン酸な
どの生体内に存在する不飽和脂肪酸が、生体内で胃酸分
泌に関与する（Ｈ＋、に＋）−ＡＴＰａｓｅの作用を阻
害して、胃酸分泌を抑制していること、腸管内に存在し
て糞便の水分量調節に関与したり、腎臓においては血中
イオンの濃度を調節することによって血圧の調節に関与
する（Ｎ　ａ　十、　Ｋ＋）　　　Ａ　Ｔ　Ｐａ５ｅの
作用を阻害して高血圧などの疾病の原因となっているこ
となどが明らかにされている（Ｂｉｏｃｈｉｍ、Ｂｉｏ
ｐｈｙｓ、Ａｃｔａ、　。

６９２．３５５　（１９８２）；Ｎａｔｕｒｅ、３１４
゜６２０　（１９８５）　　；　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、
Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ。

８４　、８１２５　（１９８７）　　；　Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ。

２７、４２４４　（１９８８）　　；Ｂｉｏｃｈｉｍ、
Ｂｉｏｐｈｙｓ。

Ａｃｔａ、、　９８５．５５　（１９８９）；Ｊ、Ｂｉ
ｏｌ、Ｃｈｉｍ、。

２６５　、７０　（１９９Ｃ１）　；　Ｂｉｏｃｈｉｍ
、Ｂｉ、ｏｐｈｙｓ。

Ａｃｔａ、、１０２４．３２　（１９９０）。

また、二環性ジテルペンカルボン酸の一種であるアビエ
チン酸が、上記各ＡＴＰａｓｅを阻害することも明らか
にされている（Ａｇｒｉｃ、Ｂｉｏｌ　、Ｃｈｊｍ、　
。

５４　　（２）、２８７　　（１９９０））　　。

このようなＡＴＰａｓｅ阻害作用を阻止し、生体内のＡ
ＴＰａｓｅ活性を保護することによって前記のようなＡ
、ＴＰａｓｅ阻害が関与する疾病もしくは生体内の不調
を治療もしくは正常化することが期待できるが、このよ
うなＡＴＰａｓｅ阻害作用を阻止するための抗酵素阻害
作用物質は未だ知られていない。

一方、グリセロリン脂質は動物、植物の細胞膜構成成分
として知られているが、とりわけレシチン（ホスファチ
ジルコリン）は大豆、卵黄などに豊富に存在し、種々の
用途に利用されている。レシチンは、食品、化粧品、医
薬品、農薬、塗料などの乳化剤（界面活性剤）、抗酸化
剤、浸透剤、粘度調整剤、湿潤剤、殺菌剤として広く利
用されている。レシチンの生理作用としては、血中コレ
ステロールを低下させて動脈硬化を予防・治療する効果
が知られ、健康食品、栄養補助食品などとして利用され
ている（例えば、特開昭６０−１５３７７４、特開昭６
０−１７２２５７、特開昭６１−６７４６１、特開平１
−１４１５７２号公報参照）。また、上記以外の生理作
用として、脳内のアセチルコリン量を増加させて老人性
痴呆症などによる脳機能の低下を回復させる作用（特表
昭５６−５００３７４、特開昭６０−２１．４７３４、
特開平２−２１５３５１号公報参照）、睡眠リズムを調
整する作用（特開昭６３−２０９５６０号公報参照）な
どが知られている。　　　　　　□以上のとおり、レシ
チンの種々の用途および作用が知られているが、特定の
酵素に対する阻害作用を阻止し、酵素活性を保護するレ
シチンの作用は全く知られていない。

本発明の解決課題は、Ａ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅ阻害作用を阻
止するために有効な抗酵素阻害作用剤を新たに見い出す
ことである。また、他の解決課題はレシチンの新たな作
用および用途を見い出すことである。

［課題を解決するための手段］ 本発明者らは、Ａ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅ阻害作用を阻止でき
る物質について広く検索を行ったところ、食品添加物な
どとして広く利用されているレシチンが、不飽和脂肪酸
、アビエチン酸などによるＡＴＰａｓｅ阻害作用を阻止
し、ＡＴＰａｓｅを保護することによってＡ　Ｔ　Ｐ　
ａｓｅ活性を維持もしくは回復させるという、全く新規
で、顕著な効果を示すことを見い出し、この知見に基づ
いて本発明を完成させた。

梨ニー毘 本発明は、グリセロリン脂質を有効成分として含有する
Ａ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅに対する酵素阻害作用を阻止するた
めに有効な抗酵素阻害作用剤に関するものである。

発明の詳細な説明 （グリセロリン脂質） 本発明において使用されるグリセロリン脂質としては、
レシチン（ホスファチジルコリン）、ケファリン（ホス
ファチジルエタノールアミン）などが挙げられる。これ
らは天然物から抽出されたものでも、合成されたもので
もよいが、コストなどを考慮すると天然物から抽出され
たものが好ましい。天然物由来のレシチンとしては、大
豆油から抽出された大豆レシチン、卵黄から抽出された
卵黄レシチンが市販されており、本発明に使用すること
ができる。市販されている大豆レシチンは、通常、レシ
チンとともにケファリンなどを含んでいるが、本発明に
おいてはこのような製品をそのまま使用してもよく、単
一成分、例えばレシチンのみを精製または濃縮して使用
してもよい。

（抗酵素阻害作用剤） 本発明の抗酵素阻害作用剤は、Ａ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅがリ
ノール酸、リルン酸、オレイン酸、パルミトレイン酸、
アラキドン酸またはその過酸化物などの不飽和脂肪酸類
、アビエチン酸なとのＡ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅ阻害物質によ
って阻害される阻害作用を阻止し。

ＡＴＰａｓｅを保護することによってＡＴＰａｓｅの活
性を維持もしくは回復させる作用を有するものである。

したがって本発明の抗酵素阻害作用剤は、Ａ　Ｔ　Ｐ　
ａｓｅに対する酵素保護剤ともいいうる。

本発明の抗酵素阻害作用剤は、ＡＴＰａｓｅが阻害され
る環境において、その阻害作用を阻止し。

ＡＴＰａｓｅを保護し、Ａ　Ｔ　Ｐ　ａｇｅ活性を維持
もしくは回復させる目的に使用され、その具体的用途に
は限定されない。

例えば、（Ｈ”、Ｋ”）−ＡＴＰａｓｅが阻害される生
体内環境（例えば、消化管内）において、本発明の抗酵
素阻害作用剤を投与することによって胃酸分泌の抑制を
防止して正常な消化、吸収能を維持し、また腸管内にお
ける吸収能を維持することができる。また、例えば、腎
臓の（Ｎ　ａ　＋、　Ｋ”）−ＡＴＰａｓｅが阻害され
る生体内環境において、本発明の抗酵素阻害作用剤を投
与することによって、血圧の上昇を抑制し、もしくは血
圧を降下させ、腎性の高血圧症を予防または治療するこ
とができる。

したがって、本発明の抗酵素阻害作用剤を上記のような
目的に使用する医薬品、機能性食品または飼料として利
用することができる。

本発明の抗酵素阻害作用剤は、前記のとおり不飽和脂肪
酸類、アビエチン酸などのＡＴＰａｓａ阻害作用を示す
物質とともに生体内に投与された際に効果を発揮するこ
とば以上の説明から明らかであるが、必ずしもこれらＡ
　Ｔ　Ｐ　ａｓｅ阻害物質とともに使用する必要はない
。なぜなら、前記不飽和脂肪酸類は生体内にも存在し、
このような内因性の不飽和脂肪酸類も、生体内のＡ　Ｔ
　Ｐ　ａｓｅを阻害していると考えられるからである。

したがって、本発明の抗酵素阻害作用剤を必ずしもＡ　
Ｔ　Ｐ　ａｓｅ阻害物質とともに使用する必要はなく、
生体内環境においてＡ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅ阻害物質が作用
しているような条件下で使用すればよい。

本発明の抗酵素阻害作用剤を生体内に投与する際の投与
方法は本発明の目的に添うものであればよく、特に限定
されない。すなわち、経口的（経口剤、飲食品、飼料な
どとして）または非経口的（経腸剤、坐剤、外用剤、注
射剤などとして）に投与することができる。

本発明の抗酵素阻害作用剤を生体に投与する際の形態は
、上記投与方法に依存する。

例えば、経口剤として投与する場合、錠剤、コーティン
グ剤、トローチ剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、粉末剤
などの固型製剤として、あるいはシロップ剤、内服用懸
濁剤、内服用乳剤、エリキシル剤などの液状製剤として
投与することができる。

固型の経口剤は、例えばグリセロリン脂質の粉末状、粒
状のものを使用し、これとデンプン、乳糖、白糖、マン
ニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ
、無機塩類などの賦形剤を用いて常法に従って製造され
る。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤１着
色剤、香料などを使用することができる。

液状の経口剤は、例えばグリセロリン脂質の水溶液、油
状物のものを使用し、これと懸濁剤、界面活性剤、非水
性媒体（グリセリン、プロピレングリコール、植物油）
などを適宜用いて常法に従って製造される。

この種の製剤に、必要に応じて矯味矯臭剤、着色剤、防
腐剤を添加してもよい。

また、飲食品として投与する場合、例えば、ドリンク剤
、健康飲料、果実飲料、野菜飲料、コーヒー飲料、チョ
コレート飲料、ヨーグルト飲料、ミルク、アルコール飲
料などの飲料として、マヨネーズ、サラダドレッシング
、焼肉のたれ、めんつゆ、醤油、ソース類、カレールー
などの調味料（調味製品）として、ピーナツツバター、
ママレード、ジャム、チョコレートスプレッド１、マー
ガリンなどのスプレッド製品として、パン、クツキー、
ケーキ、パイ、ペストリーなどのコンフェクショナリー
製品として、キャンデイ、キャラメルなどの菓子として
、または総合栄養強化食品として摂取させることができ
る。

飲食品としての本発明の抗酵素阻害作用剤を製造するに
際しては、食品素材中にグリセロリン脂質を均一に細か
く分散させて摂取しやすい食品に加工することが好まし
い。

例えば、グリセロリン脂質をホモミキサー、ジュースミ
キサー、超音波乳化機などによって水系の均一分散液と
することができる。この分散液に甘味料、食用有機酸（
酢酸、乳酸、コハク酸、りエン酸、リンゴ酸など）、ビ
タミン類（チアミン、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、パ
ントテン酸、ニコチン酸アミド、ビタミンＣ、ビタミン
Ｅなど）、アミノ酸（メチオニン、リジン、アスパラギ
ン酸、グルタミン酸など）、滋養強壮成分（人参エキス
、アロエエキス、ウコギエキス、ローヤルゼリーなど）
、乳製品（練乳、発酵乳など）、果汁、アルコール飲料
、スープ、ソース、エツセンス、香料などを適宜添加し
、各種食品の加工原料として用いたり、飲料として用い
られる。

また、前記分散液の水相に炭水化物（澱粉、デキストリ
ン、乳糖など）、蛋白質（カゼイン、アルブミンなど）
などを添加した後、噴霧乾燥することによって粉体を得
ることができる。このような粉体をパン、クツキー、パ
イなどを製造する際にその原料に添加してもよく、また
、乳製品、香料などと混合してインスタント粉末飲料と
してもよい。

さらに、グリセロリン脂質を、ショートニング、マーガ
リン、液状油などに添加して均一の油状物とし、これを
コンフェクショナリー製品の加工に使用してもよい。

本発明の抗酵素阻害作用剤を生体に投与する場合の投与
量は、投与方法、投与形態によって異なり、−概に決定
することは困難であるが、ＡＴＰａｓｅが阻害される生
体内環境においてグリセロリン脂質が５０〜５００μｇ
／＋ｎＱ程度の濃度で存在するように投与することが好
ましい。具体的には、飲食物として摂取する場合、該食
品中にグリセロリン脂質を１〜５０％（Ｗ／Ｗ）程度含
有させることが望ましい。

［作用および実施例］ 以下、実施例によって本発明の抗酵素阻害作用剤を具体
的に説明する。

実施例 （Ｎ先ち−にυ□二ＡＴＪシ咀１助止詐」ｕ（袂宰擾−
阻止効果 （方法） 酵素は市販のブタ大脳皮質またはイヌ腎臓由来の（Ｎ　
ａ　＋、　Ｋ＋）　−Ａ　Ｔ　Ｐａ５ｅを使用した。阻
害＝１１− 活性の測定法は、ジャーナル・オブ・アンチバイオティ
クス（Ｊ、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）、　３７　、９７
０−９７５　（１９８４）の試験法に準じて行った。す
なわち、５ｍＭアデノシン三リシリン酸０ｍＭトリス−
塩酸緩衝液（ｐＨ７，６）、Ｏ，１Ｍ食塩、１５＋ｎＭ
塩化カリウム、５ｍＭ硫酸マグネシウム、２ｍＭエチレ
ンジアミン四酢酸酢酸ナトリウム塩）を含む反応液０．
９ｍＱに所定濃度のアビエチン酸または不飽和脂肪酸（
リノール酸、リルン酸、オレイン酸）を溶解し、３７℃
で３分間ブレインキュベーション後、所定濃度の大豆レ
シチン（シグマ社製）または卵黄レシチン（シグマ社製
）および酵素液１００μＱ（０，０１単位）を添加し、
３７℃で２０分間反応させた。１０％トリクロロ酢酸０
．５＋ｎＱを加えて反応を停止し、水中で５分間冷却後
、２−ブタノール２ｍＱ、３％モリブデン酸アンモニウ
ム０．５ｍＱを添加して撹拌した。分離した有機層１ｍ
Ｑに０．３６Ｎ硫酸・エノタール溶液１ｍＱおよび１．
３％塩化第−スズ０．０５ｍＱを添加して撹拌後、分光
光度計により７５０ｎｍの＝１２− 吸光度を測定して酵素活性を求め、（Ｎａ”、Ｋ”）−
Ａ　Ｔ　Ｐ　ａｓｅの阻害率（％）を算出した。

（結果） （１）アビエチン酸２５μｇ　／　ｍｕの存在下におい
て、■ブタ大脳由来の（Ｎａ”、Ｋ”）　−ＡＴＰａｓ
ｅは５４．６０％の活性阻害を受けたが、大豆レシチン
２００　ｔｉｇ　／　ｍＱを添加することにより活性阻
害は９．２７％まで減少し、また卵黄レシチン２００ｐ
ｙ、　／　ｍＱを添加することにより１８．２２％まで
減少した。■イヌ腎臓由来の（Ｎ　ａ　＋、　Ｋ”）　
−Ａ　ＴＰ　ａｇｅは６３．７４％の活性阻害を受けた
が、大豆レシチン２００μｇ／ｍ（Ａを添加することに
より活性阻害は１０．５６％まで減少し、また卵黄レシ
チン２００μｇ　／　ｍＱを添加することにより＋６．
ｑ６％まで減少した。

（２）■リノール酸１２．５μｇ／ｍＱの存在下におい
て、ブタ大脳由来の（Ｎ　ａ　＋、　Ｋ”）　−Ａ　Ｔ
　Ｐａ５ｅは５９．３９％の活性阻害を受けたが、大豆
レシチン２００／７ｇ／ｍＱを添加することにより活性
阻害は４．４８％まで減少し、また卵黄レシチン２００
μｇ　／　ｍＱを添加することにより９．９４％まで減
少した。■リノール酸５μｇ／ｍＱの存在下において、
イヌ腎臓由来の（Ｎａ”、に十）−ＡＴＰａｓｅは５６
．８７％の活性阻害を受けたが、大豆レシチン２００μ
ｇ／ｍＱを添加、あるいは卵黄レシチン２００μｇ／ｍ
Ｑを添加することにより活性阻害は完全に阻止された。

（３）■リルン酸１５μｇ／ｍＱの存在下において、ブ
タ大脳由来の（Ｎａ”、Ｋ”）−ＡＴＰａｓｅは５５．
８７％の活性阻害を受けたが、大豆レシチン２００　ｐ
ｇ　／　ｍＱを添加することにより活性阻害は２．２４
％まで減少し、また卵黄レシチン２００μｇ／ｍＱを添
加することにより２．８４％まで減少した。■リルン酸
１０μｇ７ｍ（ｌの存在下において、イヌ腎臓由来の（
Ｎａ”、Ｋ”）−ＡＴＰａｓｅは６９．８８％の活性阻
害を受けたが、大豆レシチン２００μｇ　／　ｍＱを添
加することにより活性阻害は４．３１％まで減少し、ま
た卵黄レシチン２００μｇ／ｍＱを添加することにより
０．８６％まで減少した。

（４）■オレイン酸１２．５μｇ／ｍＱの存在下におい
て、ブタ大脳由来の（Ｎ　ａ　＋、　Ｋ”）　−Ａ　Ｔ
　Ｐａ５ｅは５４．５５％の活性阻害を受けたが、大豆
レシチン２００μｇ／ｍＱを添加することにより活性阻
害は２．０４％まで減少し、また卵黄レシチン２００μ
ｇ　／　ｍＱを添加することにより５．５５％まで減少
した。■４レイン酸５μｇ／ｍＱの存在下において、イ
ヌ腎臓由来の（Ｎａ”、Ｋ”）　−ＡＴＰａｓｅは６０
．５０％の活性阻害を受けたが、大豆レシチン２００μ
ｇ　／　ｍＱを添加することにより活性阻害は３．９３
％まで減少し、また卵黄レシチン２００μｇ　／　ｍＱ
を添加することにより１．０７％まで減少した。

処方例（ドリンク剤） 大豆レシチン（ＰＣ−７０；ツルー レシチン工業（株）馴）　　　　　　　　　　１ｇビタ
ミンＣ１ｇ 塩化チアミン　　　　　　　　　　　　５０■ビタミン
Ｂ２　　　　　　　　　　　　　２５■ビタミンＢＧ　
　　　　　　　　　　　　２５■パントテン酸カルシウ
ム　　　　　　　２５■ニコチン酸アミド　　　　　　
　　　１００■メチオニン　　　　　　　　　　　　１
００■アスパラギン酸ナトリウム　　　　　３００■塩
酸リジン　　　　　　　　　　　　１００■カルニチン
　　　　　　　　　　　　２００■グリセロリン酸　　
　　　　　　　　　３００■人参エキス　　　　　　　
　　　　　　５０■以上の成分に水を加えてよく混和し
、全量を１０１００Ｏとしてドリンク剤を得る。

［発明の効果〕 本発明によるグリセロリン脂質を有効成分として含有す
る抗酵素阻害作用剤を、ＡＴＰａｇｅが阻害される環境
に存在させることによって、ＡＴＰａｓｓ阻害活性を阻
止し、ＡＴＰａｓｅを保護し、ＡＴＰａｓｅ活性を維持
もしくは回復させることができる。したがって、このよ
うな抗酵素阻害作用剤を生体に投与することによって（
Ｎ　ａ　＋、　Ｋ”）　−ＡＴＰａｓｅ活性の阻害に起
因すると考えられる高血圧症を治療または予防すること
ができる。また。

＝１６− （Ｈ”Ｐ　Ｋ”）　　Ａ　Ｔ　Ｐａ５ｅ活性の阻害を防
止シ。

正常な消化、吸収能を維持することができる。

また、レシチンなどのグリセロリン脂質は、食品、医薬
品などに従来より使用されているので、生体に投与する
本発明の抗酵素阻害活性剤の安全性は高い。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）グリセロリン脂質を有効成分として含有するアデノ
   シントリホスファターゼに対する酵素阻害作用を阻止す
   るために有効な抗酵素阻害作用剤。 ２）グリセロリン脂質がレシチンである請求項１記載の
   抗酵素阻害作用剤。 ３）経口剤または飲食品の形態である請求項１または２
   記載の抗酵素阻害作用剤。