JPH037592A - 抗生物質オキシスポロンの製造法およびその生産菌 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は抗生物質オキシスポロンの製造法およびその生
産菌に関する。

オキシスポロンは下記の式（Ｉ） で表わされる抗生物質であり、ファイトケミストリ　　
イ　　（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　　第　１８
巻　　（１９７９年　）　　第　１８８６〜１８８７頁
に、ナイジェリアの赤痢の民間療法薬中の糸状菌フザリ
ウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ旦」上工憇）
の生産する抗生物質として報告されている。

［従来の技術、発明が解決しようとする課題］上記した
ように、オキシスポロンは糸状菌フザリウム・オキシス
ポラムによって生産される既知の抗生物質である。

本発明者らは、チャ輪斑病の病原菌であるペスタロチア
・ロンギセタ（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａ　１ｏｎｇｉｓｅ
ｔａ）の生産する植物毒素についての研究過程において
、該植物毒素の生産量が最も多い菌株、培地、培養条件
を検討し、該植物毒素を同定することにより本発明を完
成するに到った。

［課題を解決するための手段］ 本発明は、ペスタロチア・ロンギセタＰＬ　８５０１株
（ＩＦｏ、３−ｕＴλ）を培養し、培養物から抗生物質
オキシスポロンを採取することを特徴とする抗生物質オ
キシスポロンの製造法並びに抗生物質オキシスポロンを
生産する能力を有するペスタロチア・ロンギセタＰＬ　
８５０１株（Ｉ　ＦＯ、ｙ＋ｔｘ）に関する。

本発明のペスタロチア・ロンギセタＰＬ　８５０１株は
、愛知県豊橋市において採集したチャ輪斑病罹病葉から
分離されたものである。すなわち、上記チャの切り離し
葉を用いた付備接種法による病原性検定（「茶業技術研
究」第６７号（１９８５年）、第２１〜２７頁参照）か
ら最も病原性の強い菌株としてペスタロチア・ロンギセ
タ約１００菌株の中から選択されたものである。来園は
財団法人発酵研究所にＩＦＱき１ν５として寄託されて
おり、その菌学的性質は以下の通りである。

［形態的所見］ ペスタロチア・ロンギセタの分生胞子は、やや湾曲、５
胞よりなり、褐色の中央３胞のうち２胞が下の１胞より
濃色、大きさ平均２４．５Ｘ　７．６μｍ、頂部付厘毛
は通常３本、平均長２５．９μｍ、基部付厘毛は平均７
．１μｍである。

［生育状態］ ２％シェークロース加用ジャガイモ煎汁寒天培地上での
生育は良好である。菌叢の色は白色で、のちにやや灰色
がかる。はとんどの菌株は、菌叢上に多数の黒色の水滴
状の胞子塊を容易に多数形成する。

［生理的性′ｊＩｔ］ （１）生育温度条件：最適生育温度は２７〜２８℃。

３２℃ではほとんど生育しない。

次に、来園を用いて抗生物質オキシスポロンを製造する
ための培養条件について検討し、次の結果を得た。

（１）培！！液組成；ジャガイモ煎廿培地（ジャガイモ
２ｏｏｇ／水ＩＱＱＯｆｆｌｉ＋）に下記成分を添加し
、オキシスポロンの生産性への効果を調べた。

忠１」に ２％Ｄ−グルコース　　　　　　　　　　　±２％Ｄ−
グルコース十０．２％酵母エキス　±２％０−グルコー
ス＋０．５％酵母エキス　±２％し一アラビノース十〇
、５％ペプトン　±２％Ｄ−グルコース十〇。２％ペプ
トン　　柵２％Ｄ−グルコース＋０．５％ペプトン　　
÷２％Ｄ−クルコース＋１．０％ペプトン　　÷２％Ｄ
−フルクトース＋０．５％ペプトン２％Ｄ−マンノース
＋０．５％ペプトン　　÷２％Ｄ−ガラクトース＋０．
５％ペプトン２％Ｄ−マンニトール＋０．５％ペプトン
　＋２％シュークロース＋０．５％ペプトン　妊２％マ
ルトース＋０．５％ペプトン　　　＋−各培養炉液のチ
ャ葉への壊死斑形成能により検定 一：検出されず、±：徹量、＋：小、 ＋：中、　÷−大 （２）温度条件：生産温度範囲は２４℃〜２９℃で、最
大生産温度は２８℃。

（３）光条件：光は本菌によるオキシスポロンの生産を
阻害し、暗黒下で最大の生産量を示す。

なお、培養は目的とするオキシスポロンが十分に生成、
蓄積されるまで行えばよく、通常は上記条件下で４〜６
日間程度行う。

抗生物質オキシスポロンの分離、精製は常法により行え
ばよく、たとえば培養液から菌体および他の固形物を濾
過、遠心分離その他の手・段により除いて得た培養を２
液に酢酸エチル、ジクロロメタンなどの有機溶媒を加え
て抽出し、抽出液を濃縮乾固して粗製品を得る。使用目
的によってはこの粗製品を抗生物質として供することが
出来るが、さらに精製が望まれる場合は、該粗製品を適
当な有機溶媒に溶かし、カラムクロマトグラフィーイオ
ン交換処理法、限外濾過法等の手段を単独もしくは適宜
組合せて適用すればよい。

本発明により得られるオキシスポロンは赤痢等の治療に
有用である。

［実施例］ 次に、本発明を実施例により詳しく説明する。

実施例１ グルコース２％、ペプトン０．５％を含むジャガイモ煎
汁培地（ｐ）１６．２〜６□３、オートクレーブ後）５
０１を３００ｍＮ容の三角フラスコに入れ、１２１℃で
１０分間加熱滅菌した。

ペスタロチア・ロンギセタＰＬ　８５０１株（ＩＦＯン
）−ユ）を２％シュークロース加用ジャガイモ爪壮寒天
培地で３日間培養して得た菌叢の周縁部から直径４ｍｍ
＋のコルクポーラ−で打ち抜いた菌最片を前記培地を入
れた三角フラスコ２０木にそれぞれ１信ずつ接種し、２
８℃で５日間暗黒下で静置培養した。

培養終了後、培養液から菌体その他の固形物を炉別し、
培！！を２液８００ａ＋ｉ！を得た。この炉液に等量の
酢酸エチルを加えて抽出する操作を２回行い、目的物を
含有する酢酸エチル溶液１６００ｍ！’を得た。

これを減圧下で濃縮乾固して粗製品２１０ｍｇを得た。

この粗製品２１０ｍｇをトルエン−酢酸エチル（５：　
５）よりなる溶媒に溶解し、予めトルエン−酢酸エチル
（５：　５）で充填したシリカゲルカラム（２，５ｃｍ
　ｘ　４０ｃｍ）上に吸着させた。次いで、トルエン−
酢酸エチル（５：　５）で溶土を行い、各両分について
チャ葉への壊死斑形成能を指標として検定すると共に、
酢酸エチル−アセトン（６：　４）を展開溶媒とした薄
層クロマトグラフィーにより目的物を確認しくＲｆ＝　
０．５３）　、活性画分を集めた。

さらに、溶出溶媒としてトルエン−酢酸エチル（４：　
６）を用いて同様のカラムクロマトグラフィーをさらに
１回実施し、質量分析スペクトルおよび核磁気共鳴スベ
ク）・ルよりオキシスポロンと同定される物質のみを含
有する画分を濃縮乾燥してオキシスポロン１６６ｍｇを
得た。

［発明の効果］ 本発明によれば、赤痢等の治療に有用な抗生物質オキシ
スポロンを効率よく製造する方法およびその方法に用い
られる新規微生物が提供される。

澁シ与

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）ペスタロチア・ロンギセタＰＬ８５０１株（ＩＦ
   Ｏ３２１７２）を培養し、培養物から抗生物質オキシス
   ポロンを採取することを特徴とする抗生物質オキシスポ
   ロンの製造法。
2. （２）抗生物質オキシスポロンを生産する能力を有する
   ペスタロチア・ロンギセタＰＬ８５０１株（ＩＦＯ３２
   １７２）。