JPH0363276A - 新規な５，１１―ジヒドロ―６Ｈ―ジピリド〔３，２―ｂ：２′，３′―ｅ〕〔１，４〕ジアゼピン―６―オンおよび該化合物を含有するＡＩＤＳの予防および治療用医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規な５．１１−ジヒドロ−６Ｈ−ジビリドＣ
３，２−ｂ：２′，３′　−ｅ〕　［１，４〕ジアゼピ
ン−６−オンおよびその薬学上許容し得る酸付加塩、こ
れら化合物の調製方法、これら化合物のＡＩＤＳの予防
または治療用の用途、およびこれら化合物を含有する薬
剤組成物に関する。

発明の背景 ヒトの病気、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）はヒト
免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）、特にＨＩＶｌとして知ら
れる菌株に起因する。

他のウィルスのように、ＨＩＶ−１はこれが感染したホ
スト細胞の生合成装置を強制的に取除く以外には複製す
ることができない。ＨＩＶ−１はこの装置にウィルス子
孫を作る構造たん白質を産生させる。これらのたん白質
はその感染性ウィルス粒子即ちピリオン内に含まれた遺
伝子物質によりコードされる。しかしながら、レトロウ
ィルスであるので、ＨＩＶの遺伝子物質はホスト細胞の
ゲノムにおけるようなりＮＡではなくＲＮＡである。従
って、ウィルスＲＮＡは、ホスト細胞が所要のウィルス
たん白質を産生ずるためには、先ずＤＮＡに転化し次い
でホスト細胞ゲノム中に組み込まれねばならない。ＲＮ
ＡのＤＮＡへの転化は酵素、即ち、逆転写酵素（ＲＴ）
の使用により行なわれ、この酵素は感染性ピリオン内で
ＲＮＡに沿って含有されている。逆転写酵素は３つの酵
素機能を有し、ＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼとして
、リボヌクレアーゼとしておよびＤＮＡ依存依存性ＤＮ
Ａポリラリラーゼて作用する。先ずＲＮＡ依存性ＤＮＡ
ポリメラーゼとして作用して、ＲＴはウィルスＲＮＡの
単一鎖Ｄ　Ｎ　Ａコピーを作る。次に、リボヌクレアー
ゼとして作用して、ＲＴは元のウィルスＲＮＡから丁度
産生されたＤＮＡを遊離し次いで元のＲＮＡを破壊する
。最後に、再びＤＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼとして
作用して、ＲＴは第１のＤＮＡストランドを鋳型として
使用し第２の相補ＤＮＡストランドを作る。２つのスト
ランドは二重鎖ＤＮＡを形成し、このＤＮＡはインテグ
ラーゼと称される他の酵素によりホスト細胞ゲノム中に
組み込まれる。

ＨＩＶ−１逆転写酵素の酵素機能を抑制する化合物は感
染細胞中でのＨＩＶ−１の複製を抑制するであろう。そ
のような化合物はヒトのＨＩＶ−１感染の予防または治
療に有用である。

光咀坐血容 組成物の態様において、本発明は式： （式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なるものであり
、水素、または直鎖または枝分れの１〜５個の炭素原子
を有するアルキルであり得る〉の５．１１−ジヒドロ−
６Ｈ−ジピリド〔３，２−ｂ：！′，３′−ｅ）（１，
４）ジアゼピン６−オン、およびその薬学上許容し得る
酸付加塩を含む。

式■の化合物は公知の方法またはその明らかな変法によ
り調製できる。以下に述べる方法Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは
該化合物を調製する方法の例示である。

五迭−人 一般式ｌａ： （式中、Ｒ１は前述したような意味を有し、Ｒ２／は水
素を除いてはＲ２の意味を有する）の化合物は、一般式
ｒＩ： （式中、Ｒ１およびＲｌ　ｌは式１ａについて述べたの
と同じ意味を有し、Ｈａｌはフッ素、塩素、臭素または
沃素を示す） のカルボン酸アミドを環化することによって得ることが
できる。環化は好ましくは一般式■の化合物をそのアル
カリ金属塩に転化し、その後、４０〜１５０℃、好まし
くは５０〜８０℃の温度で縮合させることによって行う
。

一般式Ｈの出発化合物において、Ｒ１が水素と異なる場
合、金属塩化（ｏ＋ｅｔａｌｌａｔｉｏｎ）には少なく
とも１モルの金属塩化剤を必要とする。一方、Ｒ１が水
素である場合には、少なくとも２モルの金属塩剤を使用
すべきである。金属塩化には、チリウム、ナトリウムお
よびカリウムの各水素化物、ｎ−ブチルリチウムのよう
なりチウムアルキル類の使用が好ましい。

反応は不活性溶媒、例えば、テトラヒドロフラン、１．
４−ジオキサン、グリコールジメチルエーテル、ジエチ
レングリコールジメチルエーテル、トリエチレングリコ
ールジメチルエーテル、ジメチルスルホン中、ベンゼン
またはアニソール中で通常行う。環化はまた一般式Ｈの
カルボン酸アミドを双極性非プロトン溶媒中、好ましく
はスルホランまたはジメチルスルホン中で加熱すること
によっても行い得、それには、触媒量の強酸、例えば、
硫酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、ポリリン酸、メタン
スルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸の使用が有利
である。必要な反応温度は１１０〜２２０℃であり、好
ましい温度範囲は１３０〜１７０℃である。

去広−旦 弐　　■　ｂ　＝ （式中、Ｒ１は前記で定義したとおりである）の化合物
は、一般式ＵＩ： Ｒ’　　　　　０ （式中、Ｒ１は前記で定義したとおりであり、Ａｒはフ
ェニルまたは４−メトキシフェニル基であり得る） の化合物のアリールメチル基の加水分解開裂によって調
製できる。加水分解は一２０〜＋１５０℃の温度で強酸
またはルイス酸によって行う。そのような酸は硫酸、メ
タンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタ
ンスルホン酸、リン酸またはポリリン酸であり得る。リ
ン酸またはポリリン酸を使用するときには、ベンゼン、
トルエン、フェノール、アニソールまたはベラトロール
のような溶媒の添加が有利である。

塩化または臭化アルミニウムのようなルイス酸をアリー
ルメチル基を除去するのに使用する場合、芳香族炭化水
素、例えば、ベンゼン、トルエン、アニソール、または
これらとジクロロメタンとの混合物のような溶媒が適す
る。

１迭−旦 一般式ＩＣ： （式中、Ｒ１′は水素を除いてＲ１と同じ意味を有し、
Ｒ２は前記で定義したとおりである）の化合物は、弐■
： （式中、Ｒ２は前記で定義したとおりである）の５，１
１−ジヒドロ−６Ｈ−ジピリド〔３，２ｂ：２′，３′
−ｅ）（１，４）ジアゼピン−６−オンを相応する５−
アルカリ金属またはアルカリ土類金属化合物に転化し、
次いでこのアルカリ金属化合物を式Ｖ： Ｒ”Ｘ　　　　　　　　　　　　　（Ｖ）（式中、Ｒ”
は式Ｉｃにおけるのと同じ意味を有し、Ｘは反応性エス
テルの基であって、ハロゲン原子、基Ｏ８Ｏ□ＯＲ”メ
タンスルホニルオキシまたはエタンスルホニルオキシ、
または芳香族スルホニルオキシ基を示す）の反応性エス
テルと反応させることによって得ることができる。一般
式■の化合物を第一段階でその相応するアルカリ金属塩
に転化させる代りに、弐■の化合物のアルキル化はトリ
エチルアミン、ジアゼビシクロウンデセンまたは４−（
ジメチルアミノ）ピリジンのようなアミノの存在下での
式Ｖの化合物と炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは重
炭酸ナトリウムのようなアルカリ炭酸塩または重炭酸塩
との反応によっても行い得る。

一般式■の化合物の相応するアルカリ金属またはアルカ
リ土類金属化合物への転化は式■の化合物を水酸化リチ
ウム、水酸化バリウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化
カリウムのようなアルカリ金属またはアルカリ土類金属
水酸化物と、ナトリウムメタル−トまたはカリウムｔｅ
ｒｔ、　　−ブトキシドのようなアルカリ金属アルコレ
ート、と、ナトリウムアミンまたはカリウムアミンのよ
うなアルカリ金属アミンと、または水素化ナトリウムま
たは水素化カリウムのようなアルカリ金属水素化物と反
応させることによって行い得る。反応は好ましくは適当
な有機溶媒の存在下に昇温下に行う。

テトラヒドロフランまたはグリコールジメチルエーテル
のような不活性溶媒がアルカリ金属水素化物を金属導入
化剤として使用する場合には好ましく、アルカリまたは
アルカリ土類金属水酸化物を使用する場合には、メタノ
ールまたはテトラヒドロフランのような有機溶媒との水
性混合物も使用できる。かくして得られたアルカリまた
はアルカリ土類金属置換５．１１−ジヒドロ−６Ｈ−ジ
ピリド（３，２−ｂ：２′，３′−８）（１，４）ジア
ゼピン−６−オンの一般式１ｃの化合物の転化のために
は、アルカリまたはアルカリ土類化合物の溶液または懸
濁液を直接、即ち、単離することなしに、式■の化合物
と室温または昇温下で、好ましくは溶媒または反応媒体
のいずれか低い方の沸点で反応させる。置換は、１当量
の塩基と１当量の式■の化合物を使用したと仮定して、
式■の出発物質中のＲ２が水素原子であってもジヒドロ
ジピリドジアゼピノンの５位置の窒素原子で殆んど全面
的に起る。一般式１ｃの置換生成物は、必要ならば、そ
の酸付加塩への転化により精製することができ、この酸
付加塩は通常の方法により調製できる。

左広−旦 一般式ＩＣ： ｈ （式中、Ｒ２１Ｆは１〜５個の炭素原子を有する直鎮ま
たは枝分れのアルキル基を示し、Ｒ１ま前述の基を示す
〉 の化合物は一般式Ｉｂの５，１１−ジヒドロ−６Ｈ−ジ
ピリド〔３，２−ｂ　：　２’　、　　３’　−ｅ］Ｃ
１，４〕ジ了ゼピン−６−オンを一般式■ａの、または
式ｒｂの化合物中のＲ１が水素である場合には式■ｂ＝ （式中、Ｒ’は前記で定義したとおりであり、Ｍはリチ
ウム、ナトリウム、カリウム、ルビジウムまたはセシウ
ムのようなアルカリ金属を示すかまたはＭは基１ｇＨａ
１を示し、Ｈａｎは塩素、臭素、または沃素原子である
） の化合物の相応する金属塩に転化し、次いで、式： ％式％（） （式中、Ｒ１＃およびＸは前記で定義したとおりである
） の化合物でアルキル化することによって得ることができ
る。

一般式Ｉｂの化合物の式Ｖｌａおよび■ｂの相応するア
ルカリ金属化合物への転化は式Ｉｂの化合物を必要に応
じてのテトラメチルエチレンジアミンの存在下のアルキ
ルリチウム（例えば、ｎ−ブチルリチウムまたはｔ−ブ
チルリチウム）、リチウムジアルキルアミド（例えば、
リチウムジイソプロピルアミ、ド、リチウムジシクロへ
キシルアミドおよびリチウムイソプロピルシクロへキシ
ルアミド）、アリールリチウム（例えば、フェニルリチ
ウム）、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウ
ム、ナトリウムまたはカリウム）、アルカリ金属水素化
物（例えば、水素化ナトリウムまたはカリウム〉または
アルカリ金属アミド（例えば、ナトリウムまたはカリウ
ムアミド）、またはグリニヤール試薬（例えば、沃化メ
チルマグネシウム、臭化メチルマグネシウムまたは臭化
フェニルマグネシウム）と反応させることによって行い
得る。１当量の塩基を式ＶＩａ化合物の調製に必要とし
、また、２当量の塩基を式ｖｉｂの化合物の調製に必要
とする。金属導入は有利には不活性有機溶媒中で一１０
０℃から当該反応混合物の沸点の間の温度で行う。アル
キルリチウム、アリールリチウム、リチウムジアルキル
アミドまたはグリニヤール試を金属導入に使用する場合
、好ましい溶媒は必要に応じてのヘキサンまたはベンゼ
ンのような脂肪族または芳香族炭化水素との混合物中で
のテトラヒドロフラン、ジエチルエーテルまたはジオキ
サンのようなエーテルであり、操作は一２０〜＋８０℃
の温度で行う。金属導入をアルカリ金属水素化物および
アルカリ金属アミドで行う場合、上述の溶媒以外に、キ
シレン、トルエン、アセトニトリル、ジメチルホルムア
ミドおよびジメチルスルホキシドを使用することもでき
、また、アルカリ金属水酸化物を用いる場合には、エタ
ノール、メタノールのようなアルコール、およびアセト
ンのような脂肪族ケトン、並びにこれら溶媒と水の混合
物も使用できる。

かくして得られたアルカリ金属５，１１−ジヒドロ−６
Ｈ−ジピリドー　（３，２−ｂ　：　２　’、３　’−
ｅ）（１，４）ジアゼピン−６−オンの式Ｉｂへの転化
のためには、アルカリ金属化合物の溶液または懸濁液を
直接、即ち、反応生成物を単離することなしに式■の化
合物と昇温下で好ましくは溶媒また懸濁媒の沸点または
化合物■の沸点のいずれか低い方で反応させる。

出発物質として使用する一般式■のカルボン酸アミドは
、例えば、一般式■： （式中、Ｒ１およびＨａｌは前記で定義したとおりであ
る） の２−クロロ−ニコチン酸アξドの−ＩＱ式Ｉ　Ｘ　：
Ｈ，Ｎ−Ｒ”　　　　　　　　（ＩＸ）（式中、Ｒｇ　
／は前記で定義したとおりである）の第一級アミンによ
るア【ノ化により得られ、このアミノ化においては少な
くとも当量の式ＪＸのアミノを用いる。反応はまたトリ
エチルアミン、Ｎ、Ｎ−ジメチルアニリン、炭酸ナトリ
ウムおよびカリウムのような無機または有機補助塩基の
存在下で行い得る。反応は溶媒の使用なしでも行い得る
が、不活性有機溶媒を０℃〜１５Ｑ”Ｃの温度、好まし
くは還流温度で用いることが幾っがの利点を有する。使
用できる適当な溶媒には、過剰量の一般式ＩＸの第一級
アミン：テトラヒド口フラン、１．４−ジオキサン、グ
リコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジメ
チルエーテルのような開放鎖または環状エーテル：ベン
ゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼンまたはピリ
ジンのような芳香族炭化水素；メタノール、エタノール
、イソプロパノールのようなアルコール；ジメチルホル
ムアミドのような双極性非プロトン溶媒；１．３−ジメ
チル−２−イミダリジノン、１．　３＝ジメチル−テト
ラヒドロ−２（１１（）−ビリ果ジノンおよびスルホラ
ンがある。Ｒ′が水素と異なる一般式■の出発物質は、
一般式Ｘ：の２−クロロニコチン酸アミドから、一般式
■のアルキル化剤と、例えば、トリエチルアミン、ジア
ザビシクロウンデセン、４−（ジメチルアミノ）ピリジ
ンのようなアミン類、水酸化ナトリウム、水酸化カルシ
ウム、水酸化カルシウムのようなアルカリまたはアルカ
リ土類金属水酸化物、または炭酸ナトリウム、炭酸カリ
ウムまたは炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属炭酸
塩またはアルカリ土類金属の炭酸塩または重炭酸塩のプ
ロトン受容体の存在下で反応させることにより調製する
。

一般式Ｘの２−クロロニコチン酸アミドは２−クロロニ
コチン酸クロリドと３−アミノ−２−ノ飄ロゲンーピリ
ジンとの周知の反応条件下での縮合により調製できる。

他の出発物質はすべて文献公知であり、購入し得、ある
いは文献公知の手順により得ることができる。

式■の化合物は、必要に応じ、その無毒性の薬学上許容
し得る酸付加塩に通常の方法により、例えば、この遊離
の塩基化合物Ｉを適当な溶媒に溶解し、得られた溶液を
１モル当量以上の所望の酸で酸性化することにより転化
できる。

式■の化合物と無毒の薬学上許容し得る酸付加塩を形成
する無機および有機酸の例は次の如くである：塩酸、臭
化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、酒石酸、クエン酸、メ
タンスルホン酸、８−クロロ−テオフィリン等、一般式
■の化合物は通常１モル当量の酸と酸付加塩を形成する
。

上述の式Ｉの化合物は、適当な投与形で投与したとき、
ＨＩＶ−１逆転写酵素に対する抑制活性を有する。これ
らの化合物はＡＩＤＳ、ＡＲＣおよびＨＩＶＩ染に伴う
関連不整合の予防または治療において有用である。、従
って、本発明のもう１つの局面はＨＩＶ−１に暴露また
は感染したヒトに対し予防または治療量の前記したよう
な新規な式■の化合物を投与することを含むＨＩＶ−１
感染の予防または治療方法である。

弐Ｉの化合物は経口、非経口または局所的経路により単
一または分割投与で投与できる。式■の化合物の適当な
経口投与量は約１０〜５００ｍｇ／日の範囲であろう。

非経口製剤においては、適切な投与量単位は１〜ｂ 得、局所的投与においては、０．０１−１％の活性成分
を含有する製剤が好ましい。しかしながら、理解すべき
ことは投与量は患者間で変化し、ある特定の患者の投与
量はその臨床的判断に依存し、適切な投与量を決める基
準としては、患者の体重および状態並びに患者の薬剤に
対する応答性を用いるであろうということである。

本発明の化合物を経口ルートで投与すべきときには、こ
れら化合物を適合性ある製剤上のキャリヤー物質と共に
含有する製薬調合物の形の医薬として投与できる。その
ようなキャリヤー物質は経口投与に適する不活性有機お
よび無機キャリヤー物質であり得る。そのようなキャリ
ヤー物質の例は水、ゼラチン、タルク、スターチ、ステ
アリン酸マグネシウム、アラビアゴム、植物泊、ポリア
ルキレングリコール、石油シェリー等である。

製薬調合物は通常の方法で調製でき、最終の投与形は固
形投与形、例えば、錠剤、ドラジェ、カプセル等または
液状投与形、例えば、溶液、懸濁液、乳化液等であり得
る。製薬調合物は滅菌のような通常の製薬上の操作に供
し得る。さらに、製薬調合物は防腐剤、安定剤、乳化剤
、風味改良剤、湿潤剤、バフファー、浸透圧変化用の塩
類等の通常のアジュバントを含有し得る。使用できる固
形キャリヤー物質には、例えば、スターチ、ラクトース
、マンニトール、メチルセルロース、微結晶性セルロー
ス、タルク、シリカ、二塩基性リン酸カルシウム、およ
び高分子量ポリマー類（ポリエチレングリコールのよう
な）がある。

非経口用途においては、式Ｉの化合物を薬学上許容し得
る油または液体混合物中の水性または非水性の溶液、懸
濁液または乳化液で投与することが好ましく、これらの
液は殺菌剤、抗酸化剤、防腐剤、溶液を血液と等張性に
するバッファーまたは他の溶解物、増粘剤、悲濁剤また
は他の薬学上許容し得る添加剤を含有し得る。このタイ
プの添加剤には、例えば、酒石酸塩、クエン酸塩および
酢酸塩の各バッファー、エタノール、プロピレングリコ
ール、ポリエチレングリコール、複合体形成剤（ＥＤＴ
Ａのような）、抗酸化剤（重亜硫酸ナトリウム、メタ重
亜硫酸ナトリウムおよびアスコルビン酸のような〉、粘
度調製用の高分子量ポリマー（液状ポリエチレンオキサ
イドのような）およびソルビトール無水物のポリエチレ
ン誘導体がある。安息香酸、メチルまたはエチルパラベ
ン、ベンズアルコニウムクロリドおよび他の第４級アン
モニウム化合物のような防腐剤も必要に応じて添加し得
る。

本発明の化合物はまた鼻投与用の溶液として投与でき、
本発明の化合物に加え、適当なバッファ、緊張性調製剤
、微生物的防腐剤、抗酸化剤および水性ベヒクル中での
増粘剤を含有し得る。増粘に使用する剤の例はポリビニ
ルアルコール、セルロース誘導体、ポリビニルピロリド
ン、ポリソルベートまたはゼラチンである。添加する微
生物的防腐剤にはベンズアルコニウムクロライド・チメ
ロサール、クロロブタノール、またはフェニルエチルア
ルコールがある。

さらに、本発明の化合物は座薬としても投与できる。

前述したように、本発明の化合物はＨＩ　Ｖ　−ＩＲＴ
の酵素活性を抑制する。これら化合物のかなり広範な試
験に基づいて、ＨＩＶ　　ＲＴのＲＮＡ依存性ＤＮＡポ
リメラーゼ活性が抑制されることを知見した。それより
少ない試験により、ＤＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ活
性も抑制されるものと信じている。

以下の逆転写酵素（ＲＴ）アッセイを用いて、各化合物
をそのＨＩＶ　　ＲＴのＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラー
ゼ活性を抑制する能力について試験できる。以下の各実
施例で示すあるいくつかの特定の化合物をそのようにし
て試験した。この試験結果は後の第１表に示す。

（ＲＴ）アッセイ アッセイ理論： ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ−１）がコードする酵素
のなかには、ＲＮＡ鋳型（テンブレー１−）からＤＮＡ
コピーを転写することからそのように命名された逆転写
酵素（１）が存在する。この活性は、前述した無細胞酵
素アッセイ　（２）において定量的に測定でき、逆転写
酵素が合成鋳型〔オリゴｄ　（Ｇ）で感作したポリｒ（
ｃ））を用いて’Ｈ−ｄＧＴＰを基質として用いた放射
標識した酸沈降性ＤＮＡストランドを転写できるという
観察に基づく。

材料： ａ）酵素の調製 ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ−１）のＬＡＶ株からの
逆転写酵素（１）を発現ベクターｐＴＢＩ２１（４）中
のｌａｃプロモーターの制御下にあるＤＮＡクローンｐ
　Ｂ　ＰＴ　ｐｒｔｊｉ！”　　（２）を発現する菌株
ＪＭ１０９　　（３）から単離した。陽性選択用の１０
０μｇ／−のアンピシリン加ＺＸＹＴ培地中で増殖させ
た一夜培養物（３７℃、２２５　ｒｐｍ）（５）を１１
０１ｔ／ｍｌのチアミン、０．５％ノカサミノ酸および
５０μｇ　／　ｍｌのアンピシリン加Ｍ９培地（５）中
に１：４０希釈で接種する。培養物を０．３〜０．４の
０Ｄ５４０に達するまでインキュベートする（３７℃、
２２５ｒｐｍ）。この時点で、リプレッサーインヒビタ
ーＩＰＴＧ（イソプロピルｂ−Ｄ−チオガラクトピラノ
シド）を０．５　ｍＭに加えさらに２時間インキュベー
トする。菌をペレット化し、５０ｍＭのトリス、０．６
ｍＭのＥＤＴＡ。

０．３７５ＭのＮａＣ１のバッファー中に再！懸濁すセ
、リゾチームを加えて３０分間氷上で消化する。細胞を
０．２％のＮＰ−４０の添加により溶解し１ＭＮａＣｆ
ｆにする。

不溶性細片を遠心により除去したのち、たん白質を３容
量の飽和硫酸アンモニウム水溶液の添加により沈降させ
る。得られた酵素をペレット化し、ＲＴバフファー（５
０ｍＭのトリスｐＨ７，５、ｌｌＩＩＭのＥＤＴＡ、５
ｍＭのＤＴＴ、０．１％のＮＰ−４０，０，１ＭのＮａ
Ｃ１，および５０％のグリセリン）中に再懸濁させ、７
０℃で後の使用のために保存する。

ｂ）２倍濃縮保存反応混合物の組成 保存薬剤　　　　　　　　２倍混合濃縮ＩＭのトリスｐ
Ｈ７，４１００ｍＭ １Ｍのジチオスリエトール　　　　４０ｍＭＩＭのＮａ
Ｃｌ１１２０ｍＭ １％のノニデットＰ−４００，１％ ＩＭのＭｇＣ１４ｍＭ 〔ポリｒ　（Ｃ）　／オリゴｄ（Ｇ））　　（５：１）
　　　　　　　　　　　　　２　　μｇ／ｍｌ。

３Ｈ−ｄＧＴＰ　　（８１ＨＭ）　　　　　　０．６μ
Ｍアッセイ手順： ２倍濃縮保存反応混合物を小分けし一２０℃で保存する
。混合物は安定であり各アッセイの使用のために溶解さ
せる。この酵素活性は９ｂウエルマイクロタイタープレ
ート装置に適合し、従来開示されている（６）。トリス
バッファー（５０ｍＭ。

ｐＨ７，４）、ベヒクル（化合物の希釈に適合するよう
に希釈した溶媒）、またはベヒクル中の化合物を９６ウ
エルマイクロタイタープレート中に分配する（１０μｍ
／ウェル；３ウ工ル／化合物）。

ＨＩＶＲＴ酵素を溶解し、５０Ｉｌ１ＭのトリスｐＨ７
，４中で希釈して希釈酵素の１５μｌが０．００１ユニ
ツト（ｌユニットは２５℃で１分当り１マイクロモルの
基質を形質転換する酵素の量である）を含有するように
し、各ウェルに分配する。０．１２−０．５ＭのＥＤＴ
Ａの２０μｌをマイクロクイタープレートの最初の３つ
のウェルに加える。ＥＤＴＡは存在するＭｇ”をキレー
ト化し逆転写を防止する。

この群はすべての他の群から差引く背景重合として働く
。２５μｌの上記２倍反応混合物をすべてのウェルに加
え、そのアッセイを室温で６０分間インキュベートさせ
る。ア・ノセイは各ウェル中でＤＮＡをピロリン酸ナト
リウム（１％ｗ／ｖ　）中トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）（
１０％ｗ／ｖ　）の５０ｐｌで沈降させることにより終
結させる。マイクロタイタープレートを４℃で１５分間
インキュベートし、沈降物をスカトロン（Ｓｋａｔｒｏ
ｎ）半自動ハーベスタ−を用いて＃３０ガラス繊維紙（
Ｓｅｈｌｅｔｃｈｅｒ＆　５ｃｈｕｅｌ１社）上に固定
する。次いで、このフィルターを追加の１％のピロリン
酸ナトリウムを含有する５％ＴＣＡで洗浄し、７０％水
性アルコールですすぎ、乾燥させ、シンチレーション　
バイアルに移す（６）。各バイアルは’ｌ　ｍｌのシン
チレーションカクテルを受は入れベックマンベータカウ
ンター内で計数する。

％抑制の計算は次のとおりである： 文献： １．　　Ｂｅｎｎ、　Ｓ、等、Ｓ［ｌ：Ｉ［ＥＮＣＢ　
２３０　：　９４９．　１９８５２、　　Ｆａｒｍｅｒ
ｉｅ、　Ｗ、Ｇ、等、５ＣＩＢＮＣＢ　２３６：３０５
．１９８７３、　　Ｙａｎｉｓｃｈ−Ｐｅｒｒｏｎ、　
Ｃ，、Ｖｉｅｒａ、　Ｊ、、およびＭｅｓｓｉｎｇ、　
Ｊ、　ＧＥＮＢ　３３　：　１０３　、１９８５４、　
　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ
ｏｇｉｅｓ、　Ｉｎｃ、Ｐ、Ｏ。

ボックス９５５８．ニューヘブン　（コネチカッート州
）　０６５３５ ５、　　Ｍａｎｉａｔｉｓ、　Ｔ、、　Ｆｖｉｔｓｃｈ
、　Ｂ、　Ｆ、、およびＪ、　　Ｓａｍｂｒｏｏｋ　　
編、　　ＭＤＬＥＣＬＩＬ八ＲＣＬＯへ［ＮＧ　　：Ａ
　ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ　ＭへＮＵへり、　ｉ　−Ｊし
）’　　スプリングハーバ−ラボラトリ−社、１９８２ ５、　３ｐｉｒａ、　Ｔ、等、Ｊ、　Ｃ１１ｎｉｃａｌ
　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ。

２５　：　９７　、　１９８７ ＲＴアッセイにおいて活性である化合物が生体系におい
てもＨＩＶ複製を抑制する能力を有することを確認する
ために、本発明の各化合物を以下に述べるヒトＴ−細胞
培養アッセイにおいても試験した。

ヒトＴ細胞培養アッセイ アッセイ理論：融合細胞の生成はＨＩＶ−１感染ＣＤ４
＋Ｔ細胞のインビトロ培養物の特徴を有する。このアッ
セイにおいては、Ｔ細胞を推定の複製抑制性化合物で処
理し次いでＨＩＶ−１で感染させる。インキュベーショ
ン後、培養物を融合細胞の生成についてチエツクする。

融合細胞の不存在または減少を試験化合物のＨＩＶ複製
を抑制する能力の尺度として使用する。

アッセイ方法：ターゲット細胞、標示Ｃ８１６６はＴ細
胞起源のヒトリンパ細胞のサブクローンであり、９ｂウ
エル平底プレート中のＲＰＭ１１６４０（＋１０％ウシ
胎児血清）培地中での５Ｘ１０’／１００μｌの初期密
度で確立する。ＤＭＳＯ中に溶解させた選定量の試験化
合物を含有させる。

２４時間後、ＨＩＶ−１のＨＴＬＶ−１１１Ｂ株の５０
−１００ＴＣＩＤ、。（試験培養物の５０％において誘
起した効果をもたらす投与量）（２）を各培養物に接種
する。対照培養物は化合物またはウィルスのみを受は入
れる。ウィルス攻撃の５日後、培養物をウィルス誘起巨
大細胞融合細胞のひん度および分布について目視試験す
る。試験化合物による％抑制を対照値との比較により決
定する。

ウィルス複製の存在または不存在の確認はすべての試験
群からの無細胞培養液を収穫することによって行い、３
日後の二次ヒトＴ細胞培養物中の融合細胞生成の誘発を
介しての感染子孫の存在または不存在を測定する。

文献： （１）　　Ｍ、　Ｓｏｍａｓｕｎｄａｒａｎおよび１１
．１５．　Ｒｏｂｉｎｓｏｒ＋。

５ｃｉｅｎｃｅ　２４２．１５５４　（１９９８）（２
）　Ｇ、　Ｍ、　Ｓｈａｗ、Ｒ，Ｈ，１ｌａｈｎ、　Ｓ
、　Ｋ、　Ａｒｙａ。

Ｊ、　Ｅ、　Ｇｒｏｏｐｍａｎ、　Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ
およびＦ、　Ｗｏｎｇ−３ｔｅａｌ　ｓ　５ｃｉｅｎｃ
ｅ　２２６．１１６５（１９８４） 本発明の化合物の酵素抑制活性の特異性を評価するため
に、それ自体公知の方法を用い、２，３の化合物をネコ
白血病ウィルス由来逆転写酵素およびウシ胸腺由来ＤＮ
Ａアルファーポリメラーゼを抑制するその能力について
試験した。かくして試験した化合物で上記の酵素に対し
て何らかの抑制活性を有することが観察されたものはな
かった。

これらの結果は本発明の化合物の酵素抑制活性がＨＩＶ
ＲＴに対しむしろ特異的であることを示している。

本発明の化合物の細胞毒性をお覧よそ評価するために、
幾つかのそのような化合物を以下に述べるＭＴＴ細胞細
胞毒性アッセイで試験した。この試験の結果は第１表に
示す。比較的高いＥＣ５゜を有する化合物が好ましい。

真七理■Ｕ生悲琶ＴＴアッセイ アッセイ理論、： ＭＴＴ　（３−（４，５−ジメチルチアゾール２イル）
−２，５ジフエニルテトラゾリウムブロマイド〕アツセ
イは代謝的に活性な細胞によるテトラゾリウムブロマイ
ドの分裂に基づき、高定堵性の青色を生じる。このアッ
セイは以前に開示されているが（１）、本試験の目的に
最適である。

アッセイ方法： Ｈ９細胞系（２）、即ち、１０％ウシ胎児血清加ＲＰＭ
１１６４０中で増殖させた確立ヒトリンパ球懸濁細胞系
をこのアッセイのターゲソト細胞系として用いる。細胞
（１００μ０を種々の濃度の抑制剤の存在下で１０５細
胞／−の濃度でマイクロテストプレートウェル中に塗抹
する。細胞を３７℃で湿潤Ｃ○２インキュベーター中で
インキュベートする。５日後、２０μｌのＭＴＴ　（音
波処理し、０．２ミクロンフィルター処理し、４℃で保
存したＲＰＭ１１６４０中５■／−）を各ウェル中に加
える。３７℃で追加の４時間インキュベーション後、６
０μｌのトリトン−Ｘを各ウェルに加え、十分に混合し
て結晶の溶解を促進する。

無水アルコール（５μｌ）を各ウェルに加え、得られた
混合物を６０℃で３０分間インキエベートし、直ちに５
７０ｎｍの波長でプレートリーダー（Ｄｙｎａｔｅｃｈ
社）を読む。

このアッセイからのデータを用いてＥＣ５゜、最高無毒
濃度を与える非直線回帰分析を行う。

文献： １、　Ｍｏｓｍａｎｎ、　Ｔｉｍ＋　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ、　Ｍｅｔｈｏｄｓ。

６５：５５，１９８３ ２、　Ｊａｃｏｂｓ、　Ｊ、　Ｐ、、　Ｊ、　Ｎａｔｌ
、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、。

３４：２３１，１９６５ 築−一」ニーー表 ４ ４ ８ ０　Ｏ Ｔ Ｔ Ｏ，１９ｍＭ Ｔ 注：　　ＮＴ＝試験せず Ｔ Ｔ ２ｍＭ Ｔ 去」０烈 以下の実施例は本発明をさらに具体的に説明するもので
あり、当業者が本発明をより完全に理解するのを可能に
する。しかしながら、本発明は以下の特定の実施例に限
定されるものでないことを理解すべきである。

実施例　１ ５．１１−ジヒドロ−６Ｈ−ジビリド〔３，２ｂ：２′
，３′−４）（１，４）ジアゼピン効率的なレフランク
スコンデンサー、機械的攪拌器および滴下ロートを取り
付けた３つ目丸底フラスコに、４００−のジオキサン、
５０〇−のシクロヘキサンおよび１３０−のピリジンと
の混合物中に溶解させた２１５ｇ（１，６７２モル）の
３−アミノ−２−クロロピリジンを入れた。２９’９．
２　ｇ　（１，７モル）の新たに調製した２−クロロ−
３−ピリジンカルボン酸クロリドの２００−ジオキサン
中溶液を制御下に激しい反応を保持するような速度で加
えた。その後、反応混合物を室温に冷却し、得られた結
晶沈澱物を濾別し、シクロヘキサンとエーテルで連続的
に洗浄した。

暗褐色生成物を５１の水酸化ナトリウム３％水溶液に溶
解させた。得られた溶液を活性炭で処理し、吸引濾過し
、濾液を５０％希酢酸を添加して酸性化した。得られた
沈澱物を濾過により集め十分に水洗した。室温の窒素流
中で一夜乾燥させたのち、殆んど無色の生成物は１５６
〜１５９℃のｍ、ｐ、（融点）を有しておりさらなる反
応のために十分に純粋であった。収量は３７６．０　ｇ
であった（理論値の８４％）。

１３．４　ｇ　（０，０５モル）の工程ａ）で得た生成
物を２０−のキシレン中に溶解し、得られた溶液を１３
．８ｇ（０，１モル）のｐ−メトキシベンジルアミドと
混合した。その後、混合物を２時間リフラックスさせた
。反応混合物を真空蒸発させ、残留物をシリカゲル（０
，２〜０．５ｎ＋）上でのカラムクロマトグラフにより
ジクロロメタン／酢酸エチル１０　／　１　　（ｖ／ｖ
）を溶出剤として用いて精製した。１２２〜１２４℃で
溶融する無色結晶を得た（アセトニトリルからの再結晶
後に）。収量は１７．２　ｇであった（理論値の９３％
）。

１６．７ｇ（０，０４５３モル）の工程ｂ）で得た生成
物を１５０−の無水アルコールに溶解し、得られた溶液
を６．７ｇ（０，１４モル）の鉱油中５０％水素化ナト
リウム分散液と混合した。その後、混合物を、低窒素流
により外的雰囲気に対して保護しながら、出発物質がＴ
ＬＣにより検出できなくなるまでリフラツクスさせた。

水素化ナトリウムの余剰分を１０１１１１のメタノール
とテトラヒドロフラン（５０／　５０　ｖ／ｖ）の混合
物を注意深く添加することにより分解させた。

反応混合物を酢酸の添加により中和し次いで真空蒸発さ
せた。残留物をシリカゲル（０，２〜０．５＋ｅｓ）上
のカラムクロマトグラフィによりジクロロメタン／酢酸
エチル（１０／１０、ν／ν）およびジクロロメタン／
酢酸エチル１／ｌ（ν／ｖ）を溶出剤として連続的に用
いて精製した。適当なフラクションの蒸発により得た結
晶生成物をアセトニトリルおよび２−プロパノールから
再結晶させた。生成物は２１３〜２１５℃のｍ、　ｐ。

を有し、５，１１−ジヒドロ−１１−（（４−メトキシ
フェニル）メチル）−６８−ジピリド（３，２−ｂ：２
’、　３’−８）　（１，４〕ジアゼピン−６−オンと
して固定した。収量は１０、３　ｇであった（理論値の
６８％）。Ｒ，０，７（Ｍａｒｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅ
１社、ポリダラムＳＩＬ　Ｇ／ＵＶｚｓ４、ＴＬＣ用プ
リコートプラスチックシート；ジクロロメタン／酢酸エ
チル１／ｌｖ／ｖ）。

ｄ）５．１１−ジヒドロ−６Ｈ−ノビリドアゼビン−６
−オンとして同定した。

実施例　２ １０．０ｇ（０，３モル）の工程Ｃ）で得た生成物を５
９ｍＺのトリフルオロ酢酸に溶解し、それによって混合
物は幾分温かくなった。その後、反応混合物を６０℃で
１時間攪拌した。出発物質はその時点でＴＬＣによって
は検出できなかった。次いで、混合物を真空蒸発させた
。かくして得られた残留物を０．５％アンモニア水と十
分に攪拌し次いで吸引濾過した。生の生成物を１５０−
のジメチルスルホキシドから再結晶させて〉３４０℃の
ｍ、ｐ、を有する無色結晶を得た。収量は４．８ｇであ
った（理論値の７５％）。

ＣＩＩＨＩ　Ｎ４０　（２１２，２１）計算値：Ｃ６２
／２６　　Ｈ３／８０　　Ｎ　　２６／４０分析値：　
　　６２／４０　　　３／９８　　　２６１５２この生
成物はＩＲ，’Ｈ−ＮＭＲスペクトルおよびＭＳにより
５，１１−ジヒドロ−６Ｈ−ジピリドＣ３，２−ｂ：２
’、　３’−ｅ）　　（１，４）ジアミン ２６．８ｇ（０，１モル）の２−クロロ−Ｎ−（２−ク
ロロ−３−ピリジニル）−３−ビリジンカルボキサミン
を２００−のジオキサンにン容解し、得られた溶液を２
１．４　ｇ　（０，３６２モル）のプロピルアミンと混
合した。その後、混合物をステンレススチール圧力容器
中で１５０℃で６時間振とうさせた。次いで、反応混合
物を真空蒸発させ、残留物をシリカゲル（０，２〜０．
５璽１）上でのカラムクロマトグラフによりジクロロメ
タン／酢酸エチル１０　／　１　　（ｖ／ｖ）およびジ
クロロメタン／シクロヘキサン／酢酸エチル１　／　２
　／　１　　（ｖ／ｖ／ｖ　）を溶出剤として連続的に
用いて精製した。蒸発後に得られた生成物はＲＦ　０．
３　［Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅ１社、ポリグラムＳ
　Ｉ　Ｌ　　Ｇ／ＵＶ２Ｓ４　、ＴＬＣ用７”Ｊ：］　
−１７”ラスチソクシート；ジクロロメタン／シクロヘ
キサン／酢酸エチル１／２／１（ｖ／ν／Ｖ）〕の高高
粘稠能であり、このものは次の反応に満足できる品質を
有していた。

実施例１−ｃ）で記載したのと同し手順を用いて、５．
１１−ジヒドロ−１１−プロピル−６Ｈ−ジピリド（３
，２−ｂ　：　２　’、３　’−ｅ）（１，４）ジアゼ
ピン−６−オン、ｍ、ｐ。

１８４〜１８６℃（アセトニトリルから再結晶させて）
を上記工程ａ）で得られた生成物および水素化ナトリウ
ムとから調製した。収率は理論値の７４％であった。

実施例　３ ■ 機械的攪拌器、滴下ロート、温度計および効率的なりフ
ラックスコンデンサーを備えた４つ日丸底フラスコに、
２６８．１ｇ（１，０モル）の２−クロロ−Ｎ−（２−
クロロ−３−ピリジニル〉−３−ピリジンカルボキサミ
ド、２６０Ｔｎｉの５０％水酸化ナトリウム水溶液、１
５００ｍｆのトルエンおよび８．０　（０，０３５２モ
ル）のベンジルトリエチルアンモニウムクロリドとを装
入した。攪拌を開始し、１１のトルエン中１３４１ｎｆ
ｆｉ（１７８，５ｇ、１．４１５モル）の硫酸ジメチル
の溶液を約３時間に亘って滴下して加え、それによって
温度は５０〜６０℃に上昇した。硫酸ジメチルの添加終
了後に、６０℃での撹拌をさらに２時間続行した。

反応混合物を室温に冷却し、ｉｆの水を加えた。各層を
分離し、水性相を３００Ｔｎｉ部のトルエンで３回抽出
した。有機相は一緒にし、３００ｄの水、３００−の１
％酢酸水溶液および３００−の水で連続的に洗浄した。

−緒にした有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶
媒を減圧下での蒸留により除去した。残留物をシリカゲ
ル（０，２〜０．５ｍｍ）上でのカラムクロマトグラフ
により溶出剤としてトルエンと酢酸エチル／シクロヘキ
サン／テトラヒドロフラン１／９／１０　　（Ｖ／’Ｖ
／Ｖ）とを連続的に用いて精製した。適当なフラクショ
ンの蒸発により得た生成物をアセトニトリル／ｌ−ブチ
ルメチルエーテル１／１（ｖ／ｖ）から再結晶させた。

生成物はジクロロメタンに高度に溶解性であり、９８〜
ｔｏｉ’ｃの融点を有し、２−クロロ−Ｎ−（２−クロ
ロ−３−ピリジニル）−Ｎ−メチル−３−ピリジンカル
ボキサミドであると同定した。

収量は２３２．５　ｇであった（理論値の８２．５％）
。

ｂ）５．１１−ジヒドロ−５−メチル−■１−プ溶媒と
してジオキサンの代りにテトラヒドロフランを用いまた
当モル量のみの水素化ナトリウームを用いた以外は、実
施例１−ｃ）で記載したのと同じ手順を用いて、５．１
１−ジヒドロ−５−メチル−１１−プロピル−６Ｈ−ジ
ピリド〔３，２−ｂ：２’　、　３’−ｅ］［，１，４
〕ジアゼピン−６−オン、Ｒｐ　０．２　（Ｍａｃｈｅ
ｒｅｙＮａｇｅ　１社、ポリグラムＳＩＬ　　Ｇ／ＵＶ
２，４、ＴＬＣ用のプリコートプラスチックシート；ジ
クロロメタン／酢酸エチル９／ＩＶ／Ｖ）；０．３（ジ
クロロメタン／シクロヘキサン／酢酸エチル１／２／ｌ
ｖ／ｖ／ｖ）；０．７５　　（ジクロロメタン／酢酸エ
チル／シクロヘキサン／メタノール／アンモニア水３１
５／Ｌ、５１０／４６１０／４６１０１０６　ｖ／ｖ／
ｖ／ｖ／ｖ）の高粘稠油状物を上記工程ａ）で得た生成
物から調製した。収率は理論値の７５％であった。

実施例　４ ６．４ｇ（０，０３モル）の５，１１−ジヒドロ−６１
（−ジビリド（３，２−ｂ：２′，３′　−ｅ〕〔１，
４）ジアゼピン−６−オンを１００−の無水ジメチルホ
ルムアミドに溶解し、得られた溶液を３．４　ｇ　（０
，０７１モル）の鉱油中５０％水素化ナトリウム分散液
と混合した。窒素流により外気に対して保護しながら、
混合物を５０〜７０℃で１時間攪拌した。水素の発生が
終ったのち、混合物を３０℃に冷却し、１０．９　ｇ　
（０，０７モル）の沃化エチルを１５分間で滴下しなが
ら添加した。

発熱反応の終了のために、混合物をさらに１時間８０〜
９０℃で加熱した。溶媒を減圧下での蒸留により除去し
た。残留物を水と混合し、そのようにして得た懸濁液を
ジクロロメタンで完全に抽出した。通常の処理後に得た
生成物を１．５０１Ｒ１のイソオクタンから再結晶させ
た。生成物は１０２〜１０３℃のｍ、ｐ、を有しており
、５，１１−ジエチル−５，１１−ジヒドロ−６０−ジ
ピリド（３，２−ｂ　：　２　’、　　３−ｅ）　　（
１，４）ジアゼピン−６−オンとして同定した。収量は
５．７ｇであった（理論値の７１％）。

実施例　５ −６−オン キシレンの代りに溶媒としてジエチレングリコールジメ
チルエーテルを用いた以外は、実施例１−ｂ）で記載し
たのと同じ手順を用いて、Ｎ−（２−クロロ−３−ピリ
ジニル）−２〔（フェニルメチル）アミノコ−３−ピリ
ジンカルボキサミド、ｍ、ｐ、９５〜９７℃〈ジエチレ
ングリコールジメチルエーテルから再結晶させて）を２
−クロロ−Ｎ−（２−クロＩコー３ピリジニル）−３−
ピリジンカルボキサミドとベンジルアミンより調製した
。収率は理論値の７２％であった。

ｃ）５．１１−ジヒドロ−５−エチル−１１ジオキサン
の代りに溶媒としてジエチレングリコールジメチルエー
テルを用いた以外は、実施例１−ｃ）で記載したのと同
じ手順を用いて、５．１１−ジヒドロ−１１−（フェニ
ルメチル〉６　Ｈ−ジビリド（３，２−ｂ：２′，３′
ｅ）（１，４）ジアゼピン−６−オン、ｍ、ｐ。

２１２〜２１３℃（１−プロパノールから再結晶させて
）　、ＲＦ　０．７　（Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅ１
社、ポリグラムＳ　Ｉ　Ｌ　　Ｇ／　Ｕ　ＶＺＳ４　、
Ｔ　Ｌ　Ｃ用のプリコートプラスヂソクシート；ジクロ
ロメタン／酢酸エチル１／ｌｖ／Ｖ）を工程ａ）で得た
生成物と水素化ナトリウムから調製した。収率は理論値
の６１％であった。

実施例３−ａ）で記載したのと同じ手順を用いて、５．
１１−ジヒドロ−５−エチル−（１−（フェニルメチル
）−６Ｈ−ジピリド［３，２−ｂ　：　２’　、　　３
−ｅ〕〔１，４〕ジアゼピン−６−オン、ｍ、ｐ、２０
９〜２１１℃（トルエン／アセトニトリル１／ｌｖ／ｖ
から再結晶させて）　、Ｒｐ　Ｏ，５（Ｍａｃｈｅｒｅ
ｙ−Ｎａｇｅ１社、ポリグラムＳＩＬ　　Ｇ／ＵＶ、Ｓ
、、ＴＬＣ用のプリコートプラスチックシート；ジクロ
ロメタン／メタノール９９／１　ｖ／ｖ）を工程ｂ）で
得た生成物と硫酸ジエチルとから調製した。収率は理論
値の８２％であった。

開放容器の代りに圧力容器を用いまた混合物を１２０℃
で１０時間加熱した以外は、実施例１−ｄ）で記載した
のと同じ手順を用いて、５．１１−ジヒドロ−５−エチ
ル−６Ｈ−ジピリド［３，２−ｂ　：　２　’、３　’
−ｅ）　　（１，４）ジアゼピン−６−オン、ｍ、ｐ、
１６１〜１６３℃（イソオクタン／酢酸エチルｌ　／　
ｌ　ｖ　／　ｖから再結晶させて）　、ＲＦ　Ｏ，３（
ＭａｃｈｅｒｅｙＮａｇｅ１社、ポリグラムＳ　Ｉ　Ｌ
　　Ｇ／　Ｕ　Ｖｚｓａ、ＴＬＣ用プリコートプラスチ
ックシート；ジクロロメタン／メタノール９９／ｌｖ／
ｖ）を工程Ｃ）で得た生成物から調製した。収率は理論
値の５７％であった。

実施例　６ いて、Ｎ−〈２−クロロ−３−ピリジニル）−Ｎメチル
−２−〔（フェニルメチル）アミノコ３−ピリジンカル
ボキサミド、ｍ、ｐ、１１４〜１１６℃（ｔ−ブチルメ
チルエーテルから再結晶させて）　、Ｒｙ　Ｏ，７５（
Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅ１社、ポリグラムＳ　Ｉ　
Ｌ　　Ｇ／　Ｕ　Ｖｚｓ４、Ｔ　Ｌ　Ｃ用のプリコート
プラスチックシート；ジクロロメタン／酢酸エチル３／
１　ｖ／ｖ）を２−クロロＮ−（２−クロロ−３−ピリ
ジニル１−Ｎ−メチル−３−ピリジン−カルボキサミド
とベンジルアミンから調製した。収率は理論値の８７％
であった。

実施例１−ｂ）で記載したのと同じ手順を用＝６−オン 実施例３−ｂ〉で記載したのと同じ手順を用いて、５，
１１−ジヒドロ−５−メチル−１１−（フェニルメチル
）−６Ｈ−ジビリド（３，２−ｂ　：　２　’　−３’
　−ｅ）　　（１，４）ジアゼピン−６−オン、ｍ、ｐ
、１９８〜１９９℃　（アセトニトリルから再結晶させ
て）、Ｒ，０，４５（Ｍａｒｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅ１
社、ポリグラム５ｒＬＧ／　Ｕ　Ｖｚｓａ　、Ｔ　Ｌ　
Ｃ用のブリコートプラスチソクシート；ジクロロメタン
／シクロヘキサン／酢酸エチル１／２／１　ｖ／ｖ／ｖ
）を工程ａ）で得た生成物から調製した。収率は理論値
の８０％であった。

７５．５　ｇ（０，２３９モル）の工程ｂ）で得た生成
物、２．５　ｋｇのポリリン酸、および４２５−のアニ
ソールとからなる混合物を１４０〜１６０℃で２時間攪
拌した。まだ熱いあいだに、反応混合物を砕氷中に攪拌
した。その後、混合物をアンモニア水の添加によりわず
かにアルカリ性とし次いでジクロロメタンで完全に抽出
した。

−緒にした有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ真空蒸発
させた。残留物をシリカゲル（０，２〜０．５ｍ）上で
ジクロロメタン／酢酸エチル１／１（ｖ／ｖ）を溶出剤
として用いるクロマトグラフィー処理した。適当なフラ
クションの蒸留により得られた生成物をアセトニトリル
から再結晶させて２３６〜２３７℃のｍ、　ｐ、　、Ｒ
ｙＯ，３５（Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅ１社、ポリグ
ラム５ＩＬＧ／ＵＶ！５４　、ＴＬＣ用プリコートプラ
スチ・ノクシート；ジクロロメタン／酢酸エチル１／１
ｖ　／　ｖ　）を有する２１．６ｇ／理論値の４０％）
の無色結晶を得た。

実施例　７ ローオン ３．８　ｇ　（０，０１２６モル）の実施例５−ｂ）で
得た生成物を２０−のトリフルオロ酢酸に溶解し、それ
によって混合物はわずかに温まった。その後、反応混合
物を８時間リフラックスさせた。出発物質はその時点で
ＴＬＣにより検出できなかった。

次いで、混合物を真空蒸発させ、そのようにして得られ
た残留物を０．５％アンモニア水と十分に撹拌し次いで
吸引濾過した。生の物質を２０−のアセトニ）　ＩＪル
中に懸濁させ、１５分間リフラックスさせ、熱いうちに
吸引濾過した。フィルターケーキを熱ジメチルスルホキ
シドから再結晶させて１．２ｇ（理論値の４５％）の無
色結晶を得、この結晶はｍ、　　ｐ、　＞３４０ｔ’を
有し、ｍ、ｐ、、混合ｍ、ｐ、、およびＵＶ−ＪＲ−お
よびＭＳスペクトルにより実施例ｉｄ）で得た化合物と
同一であると同定した。

実施例　８ ａ）　　２−クロロ−Ｎ−（２−クロロ−３−ピリジニ
ル）−３−ピリジンカルボキサミド実施例１ａ〉で記載
したのと同じ手順を用いて、２−クロロ−Ｎ−（２−１
０ロー３−ピリジニル）３−ピリジンカルボキサミドを
調製した。精製生成物は反応混合物を室温に冷却し上澄
液を沈澱物からデカンテーションすることによって得た
。次いで、固形物を塩化メチレンに溶解し、溶液を水洗
し、乾燥させ（無水硫酸ナトリウム）、溶媒を真空除去
した。次いで、固形物を酢酸エチルで洗浄し乾燥させて
次の反応に適する７、２４ｇ（理論値の８４％）の生成
物を得た。

ｂ）Ｎ−（２−クロロ−３−ピリジニル）−２〔〔（４
−メトキシフェニル）メチル〕アミノ〕＝３−ピリジン
カルボキサミド 実施例１−ｂ）で記載したのと同じ手順を用いて、Ｎ−
（２−クロロ−３−ピリジニル）＝２−（（（４−メト
キシフェニル）メチル〕アミノ〕−３−ピリジンカルボ
キサごドを調製した。精製生成物は溶媒を真空除去し、
残留物に水を加え、生成物を塩化メチレンで抽出するこ
とによって得た。この溶液を乾燥させ（無水硫酸ナトリ
ウム）、溶媒を除去して褐色油状物を得、これを１０−
のエーテルで処理した。結晶化した生成物を濾過し、エ
ーテルとへキサンで順次洗浄して７８．０ｇ（理論値の
９１％）のベージュ色粉末、ｍ、ｐ、１２１〜１２２℃
を得た。

ｃ）５．１１−ジヒドロ−１１−（（４−メトキシフェ
ニル）メチル）−６Ｈ−ジビリド〔３，２−ｂ：２’、
３−ｅ）（１，４）ジアゼピン６−オン １．４４ｇの鉱油中５０％水素化ナトリウム分散液をｌ
Ｏ〇−のジメチルホルムアミド中３．６９ｇ（０，０１
０モル）のＮ−（２−クロロ−３−ピリジニル）−２−
ＣＣ（４−メトキシフェニル）メチルコア藁ノ〕−３−
ピリジンカルボキサミドの溶液に加えた。水素の発生が
停止したのち、混合物を１６時間加熱しく１００℃）、
次いで８時間リフラックスさせた。混合物を冷却したの
ち、過剰の水素化ナトリウムを氷のゆっくりした添加に
より分解させた。混合物を水でさらに希釈し、生成物を
エーテルで抽出し濃縮した。結晶化残留物を濾過し、エ
ーテルで洗浄して１．６０ｇの５，１１−ジヒドロ−１
１−〔（４−メトキシフェニル）メチル）−６Ｈ−ジピ
リドＣ３，２−ｂ：２′，３′−ｅ）（１，４）　’；
アセヒン−６−オン（理論値の５０％）を脱臼色粉末、
ｍ、ｐ、２０９〜２１０℃として得た。

５．１１−ジヒドロ−１１−ＣＣ４−メトキシフェニル
）メチル〕−５−メチルー６Ｈ−ジビリド（３，２−ｂ
：２′，３′−ｅ）（１，４）ジアゼピン−６−オン １０．０　ｇ　（０，０３０モル〉の５，１１−ジヒド
ロ−１１−（［４−メトキシフェニル）メチルツー６Ｈ
−ジビリド（３，２−ｂ　：　２　’、３　’−ｅ）（
１，４）ジアゼピン−６〜オンを２．１６ｇの鉱油中５
０％水素化ナトリウム分散液および１００−のジメチル
ホルムアミドを含有するフラスコに加えた。得られた混
合物を室温で３０分間攪拌し次いで３０分で５０’Ｃに
加熱した。冷却後、ＬＯｍｌのジメチルホルムアミド中
（７）８．５１　ｇ　（０，０６０−ｒ−ル）　（Ｄ沃
化メチ７１／Ｇ滴下しながら加え、混合物を室温で一夜
攪拌させた。過剰の水素化ナトリウムを氷の注意深い添
ｄ） 加により分解させた。次に、水を加え、生成物をエーテ
ルで抽出し、乾燥させ（無水硫酸ナトリウム）、濃（宿
して１０．３ｇ（理論イ直の９９％）の５．１１−ジヒ
ドロ−１１−（（４−メトキシフェニル）メチルツー５
−メチル−６０−ジビリド（３，２−ｂ　：　２　’、
３　’−ｅ）　　（１，４）ジアゼピン−６−オンを次
の反応に適する淡黄色油状物として得た。

ｅ）５．１１−ジヒドロ−５−メチル−６Ｈ−ジビリド
（３，２−ｂ　：　２　’、３　’−ｅ）　　（１，４
）ジアゼピン−６−オン ５０ｍ１のトリフルオロ酢酸を１０．３　ｇ　（０，０
３０モル）の５，１１−ジヒドロ−１１−（（４−メト
キシフェニル）メチル〕−５−メチルー６Ｈ−ジビリド
（３，２−ｂ：２′，３′−ｅ）（１，４）ジアゼピン
−６−オンに加え、混合物を室温で１時間攪拌した。酸
を真空除去し、残留物を０．５％アンモニアと１時間攪
拌した。

固形物を濾過し乾燥させて６．７０ｇ（理論値の９８％
）の純粋５．１１−ジヒドロ−５−メチル−６Ｈ−ジビ
リド（３，２−ｂ：２′，３′ｅ）（１，４）ジアゼピ
ン−６−オン、ｍ、ｐ。

２３０〜２３２°Ｃを得た。

ｆ）５．１１−ジヒドロ−１１−エチル−５−メチル−
６Ｈ−ジビリド（３，２−ｂ　：　２　’、３　’−８
）　　（１，４）ジアゼピン−６−オン２、　ＯＯｇの
鉱油中５０％水素化ナトリウム分散液をｔｏｏｌｎｌの
ジメチルホルムアミド中５．７５　ｇ　（０，０２５モ
ル）の５，１１−ジヒドロ−５−メチル−６ｌ−１−ジ
ヒドロ（３，２−ｂ：２′，３′−ｅ）（１，４）ジア
ゼピン−６−オンの溶液に加えた。水素の発生が停止し
たとき、混合物を５０℃に３０分間加熱し、得られた混
合物を室温で一夜攪拌せしめた。過剰の水素化ナトリウ
ムを氷次いで水の注意深い添加により分解させた。生成
物をエーテルで抽出し、乾燥させ（無水硫酸ナトリウム
）、蒸発させて４．５ｇ（理論値の７０％）の５，１１
−ジヒドロ−１１−エチル−５−メチル−６Ｈ−ジピリ
ド（３，２−ｂ：２’、　３’　−ｅ：ｌ　（１，４）
ジアゼピン−６−オン、ｍ、ｐ、１３０〜１３２℃を得
た。

実施例　Ａ カプセルまたは錠剤 Ａ−Ｉ　　　　　　　　　　Ａ−２ 戊分　量　　成分　量 実施例２の化合物　５０ｍｇ　　実施例２５０ｍｇスタ
　−チ　　　　　　　　１６０ｍｇ　　　リ　ン酸二カ
ルシウム　　　１６０ｍｇマイクロクリスタルセルロー
ス　　　９０ｍｇ　　　マイクロクリスタルセルロース
　　　９０ｍｇナトリウムスターチグルクテート　　ｌ
ｏｍｇ　　　ステア　リ　ン酸　　　　　　５ｍｇステ
アリン　酸マグネシウム　　　　２ｍｇ　　　ナトリウ
ムスダーチグリコレー）　　　１０ｍｇヒユー五トコロ
イド　状シリカ　　　１ｍｇ　　　ヒユームドコロイド
　状シリカ　　　１ｍｇ実施例２の化合物を潤滑剤を除
いた上記の予備混合賦形剤物質と混合して粉末混合物に
する。次いで、潤滑剤を混合して、得られた混合物を錠
剤に圧縮加工するかあるいは硬質ゼラチンカプセルに充
填する。

実施例　Ｂ 実施例２の化合物　　　　　５００ｍｇ酒石酸　　　　
　１．５ｇ ベンジルアルコール　　　　　　ｏ、ｔｉｉ％注射用水
　　　　　　　　１００−に達する量付形剤物質を水と
混合し、その後、実施例２の化合物を加える。混合を溶
液が透明になるまで続行する。この溶液のｐＨを３．０
に調製し次いで適当なバイアルまたはアンプルに濾過し
て入れオートクレイブ処理により滅菌する。

実施例　Ｃ 実施例２の化合物　　　　　ｌＯＯ■ クエン酸　　　　　　　　　　　　１．９２　ｇペンス
アルコニウムクＵライＦ　　　　　　　　　　　　　　
　Ｏ，０２５Ｉｉ量％ＥＤＴＡ　　　　　　　　　　　
０．１　　重量％ポリビニルアルコール　　　ｔｏ　　
　ｍｕ％水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１００ｒｆに達する量付形剤物質を水と混合し、その
後、実施例２の化合物を加え、混合を溶液が透明になる
まで続行する。この溶液のｐｌ＋を４．０に調製し、次
いで、適当なバイアルまたはアンプルに濾過して入れる
。

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼ I （式中、Ｒ＾１およびＲ＾２は同一または異なるもので
   あって、水素、１〜５個の炭素原子を有する直鎖または
   枝分れのアルキル基である）の５，１１−ジヒドロ−６
   Ｈ−ジピリド〔３，２−ｂ：２′，３′−ｅ〕〔１，４
   〕ジアゼピン−６−オン、またはその薬学上許容し得る
   塩。
2. （２）５，１１−ジヒドロ−１１−プロピル−６Ｈ−ジ
   ピリド〔３，２−ｂ：２′，３′−ｅ〕〔１，４〕ジア
   ゼピン−６−オン、またはその薬学上許容し得る塩。
3. （３）５，１１−ジヒドロ−５−メチル−１１−プロピ
   ル−６Ｈ−ジピリド〔３，２−ｂ：２′，３′−ｅ〕〔
   １，４〕−ジアゼピン−６−オン、またはその薬学上許
   容し得る塩。
4. （４）５，１１−ジエチル−５，１１−ジヒドロ−６Ｈ
   −ジピリド〔３，２−ｂ：２′，３′−ｅ〕〔１，４〕
   ジアゼピン、またはその薬学上許容し得る塩。
5. （５）５，１１−ジヒドロ−１１−エチル−５−メチル
   −６Ｈ−ジピリド〔３，２−ｂ：２′，３′−ｅ〕〔１
   ，４〕ジアゼピン−６−オン、またはその薬学上許容し
   得る塩。
6. （６）ＨＩＶ−１に暴露または感染したヒトに予防また
   は治療上の有効量の請求項１、２、３、４または５記載
   の式 I の化合物を投与することを特徴とするＨＩＶ−
   １感染の予防または治療方法。
7. （７）予防上または治療上の有効量の請求項１、２、３
   、４または５記載の式 I の化合物、および薬学上許容
   し得るキャリヤーとを含むＨＩＶ−１感染の予防または
   治療用医薬組成物。