JPH03502338A - 常磁性化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 常　　磁　　性　　化　　合　　物 本発明は、巨大分子の常磁性化合物、このような化合物を含有する造影剤（ｃｏ ｎｔｒａｓｔ　ａｇｅｎｔｓ）並びにヒト及びヒト以外の被検対象の磁気共鳴イ メージング（ＭＲＩ）におけるそれらの使用、このような化合物の製造にむける 使用のためのキレート化剤並びに治療及び診断におけるこのようなキレート化剤 並びにキレート及びその塩の使用に関する。

ＭＲＩにおいては、生成される像におけるコントラストは、撮像される帯域中に 、それから像が生成される共鳴信号の原因である核（“イメージング核”、一般 にはプロトンでありさらに特定的には水のプロトンである）のスピン再平衡特性 に影響を与える薬剤を導入することによって増大される。これに関して、コント ラストの増大は常磁性、超常磁性または強磁仕種を含む造影剤を使用することに 起因することが見い出されている。常磁性造影剤に関しては、増大した像のコン トラストは、Ｔ、とじてまたはスピン−格子緩和時間として知られているスピン 再平衡係数における減少、常磁性中心によって生成される場のイメージング核に 対する効果から生じる減少から主に誘導される。

Ｍｌ’２＋における造影剤としての常磁性化合物の使用は広く支持されてきて、 そしてこれに関連して広い範囲の常磁性化合物が示唆されてきた。かくして例え ばＬａｕｔｅｒｂｕｒ及びその他の人々によりマンガン塩並びにその他の常磁性 無機塩及び錯体の使用が示唆され（Ｌａｕ　ｔ　ｅ　ｒ　ｂｕ　ｒら、“生物学 的エネルギー論のフロンティア″、１巻、７５２〜７５９頁、アカデミツク出版 社（１９７８）、Ｌａｕｔｅｒｂｕｒ％Ｐｈ１１．　Ｔｒａｎｓ、　Ｒ，Ｓｏｃ 、　Ｌｏｎｄ、　Ｂ　２８９：　４８３〜４８７　（１９８０）及びＤｏｙｌｅ ら、Ｊ、　Ｃｏｍｐｕｔ、　Ａｓ５ｉｓｔ、　Ｔｏｍｏｇｒ。

５　（２）　：　２９５−２９６　（１９！３１）参照）　、Ｒｕｎｇｓらは粒 子状シュウ酸ガドリニウムの使用を示唆しく　ＵＳ−Ａ−４６１５８７９及び放 射線学、１４７（３）　：　７８９〜７９１　（１９８３）参照）　、Ｓｃｈｅ ｒｉｎｇＡＧは常磁性金属キレート、例えばアミノポリカルボン酸例えばニトリ ロ三酢酸（ＮＴＡ）　、Ｎ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴ Ａ）　、Ｎ−ヒドロキシエチル−Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−エチレンジアミン三酢酸（Ｈ ＥＤＴＡ）　、Ｎ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ“、Ｎ“−ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴ ＰＡ）及び１，４，７．１０−テトラアザシクロドデカン四酢酸（ＤＯＴＡ）の 使用を示唆しく例えばＥＰ−Ａ−７１５６４、ＥＰ−Ａ−１３０９３４及びＤＥ −Ａ−３４０１０５２参照）、そしてＮｙｃｏｍｅｄ　ＡＳはイミノニ酢酸の常 磁性金属キレートの使用を示唆した（ＥＰ−Ａ−１６５７２８参照）。多くのそ の他の常磁性造影剤が、文献中で、例えばＥＰ−Ａ−２３０８９３、ＥＰ−Ａ− ２３２７５１，ＥＰ−Ａ−２９２６８９、ＥＰ−Ａ−２５５４７１，ＥＰ−Ａ− ２９２６８９、ＥＰ−Ａ−２８７４６５、ＬＩＳ−Ａ−４６８７６５９及びＷＯ ３６／　０２００５中で示唆された。ＤＯＴＡ及びＤＴＰＡのキレート以外に、 Ｎ、Ｎ″（ビスメチル−カルバモイルメチル）　Ｎ、Ｎ’、Ｎ”−ジエチレント リアミン三酢酸（ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）　、１−オキサ−４，７，１０−１−リア ザシクロドデカン−Ｎ、Ｎ’、Ｎ“−三酢酸（ＯＴＴＡ）及びＮ−［２，３−ジ ヒドロキシ−Ｎ−メチル−プロピルカルバモイルメチル−三酢酸など（ＤＯ３Ａ ）のキレートが特別に注目される。

常磁性中心がキレート錯体中に結合されている常磁性化合物は、例えばガドリニ ウムのような毒性の重金属がこのようにすると生物が耐えられる形で提供され得 るので特に望ましいと考えられてきた。かくして、重金属解毒剤としてそれらの 効能が知られているキレート化剤、例えばＥＤＴＡ，　ＤＴＰＡなどの使用が特 別の注意を向けられてきた（例えば（Ｗｅｉｎｍａｎｎら、ＡＪＲ１１４２：　 ６１９　〜６２４　（１９８４）参照）。

常磁性キレートの毒性は、一般に、同じ常磁性金属種の無機塩の毒性よりも低い けれども、コントラスト増大におけるこのようなキレート錯体の効率は塩の効率 に比べて大幅には改良されない。

しかしながら、常磁性種を比較的重い担体、例えば巨大分子に結合させることに よって、多分少なくとも一部はこの重い担体が常磁性種の回転動作（ｔｕｍｂｌ ｉｎｇｍｏ目ｏｎｓ）を遅くする効果のために、コントラスト効果の増大を達成 することができることが見い出された。このことはＴｅｃｈｎ　ｉｃａｒｅ社に よってＥＰ−Ａ−１３６８１２中で十分説明されている。巨大分子を常磁性化合 物に結合させることもまた、組織特異性（ｔｉｓｓｕｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ）の 常磁性造影剤を製造することができる手段として示唆された。かくして、例えば 、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ　ＡＧはＥＰ−Ａ−７１５６４におし１て、常磁性キレート を生体分子例えばホルモン、蛋白質などに結合させて投与後に造影剤が身体の特 別な部位に集まるようにせしめることを示唆している。Ｔｅｃｈｎ　ｉｃａｒｅ 社もＥＰ−Ａ−１３６８１２において同様に常磁性イオンを組織特異性の巨大分 子、例えば抗体に結合させることを示唆してｌ，Ｎる。

また、常磁性キレートをアルブミンに結合させて血液貯留（ｂｌｏｏｄ　ｐｏｏ ｌｉｎｇ）造影剤を製造することも示唆されており、このような化合物の一つ、 Ｇｄ　ＤＴＰＡ−アルブミンがＳｃｈｍｉｅｄｌらによって放射線学、１６２　 ：　２０５　（１９８７）中で論じられている。アルブミンのような蛋白質は非 常に複雑な構造の物質であり、そして一般的に安定性が限定される。特に、蛋白 質が結合した物質は溶液に調製するのが困難であり熱処理にかけてはならないの で、このような物質を含む造影剤は熱の適用によって殺菌することができない。

さらにまた、アレルギー反応の危険を減少するために、一般的にヒト由来の蛋白 質、例えばヒトアルブミンを使用すれば適切であるが、そうなるとヒト起源のウ ィルス汚染の危険性が生じる。従って、ＮｙｃｏＴｏｅｄ　ＡＳは、ＥＰ−Ａ− １８５８９９及びＥＰ−Ａ−１８６９４７において、熱に安定な、容易に特性付 けられる、生物学的に比較的不活性な（ｐａｓｓ　ｉｖｅ）巨大分子例えば多糖 、例えばデキストランを伴った常磁性キレートから成るＭＲＩ造影剤を示唆した 。

かくして、ＥＰ−Ａ−　１８６９４７は、腎臓閾値以上の分子量な有する場合に は血液貯留ＭＲＩ造影剤として機能する可溶性の巨大分子の常磁性化合物を開示 している。

Ａｍｅｒｓｈａｍ　　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　　ＰＬＣはまた、ｗｏ８５ １０５５５４において、ＭＲＩ造影剤として使用するための常磁性キレートのだ めの巨大分子の担体の使用を示唆した。しかしながら、キレート錯体がｉｎ　　 ｖｉｖｏで安定でなければならない（特に常磁性金属イオンそれ自体が毒性であ る場合には）という重要さを強調して、Ａｍｅｒｓｈａｍは、キレート部位（ｅ ｎｔｉｔｙ）による常磁性金属種の、巨大分子で立体的に障害を与えるキレート 化の可能性を、キレート部位を結合体分子の作用によって巨大分子に結合させる ことによッテ、例えば化合物Ｘ−ＯＣＯＮＨ−（ＣＨｚ）−ＮＨＣＯ−Ｙ　［式 中、Ｘは巨大分子でありモしてＹはキレート部位である］を生成させることによ って回避することができることを示唆した。このようなキレート−結合体−巨大 分子化合物の一つであるＧｄＤＯＴＡ−グリシン−デキストランはまたＥＰ−Ａ −１８６９４７中に開示されている。

その他の常磁性ＭＲＩ造影剤は文献中に開示されており（例えばｗｏ８７／　０ ２８９３、ＵＳ−Ａ−４６３９３６５及びｗｏ８７／　０１５９４並びにこれら の文献中の引例を参照せよ）、常磁性ＭＲＩ造影剤についてのいくつかの総説も ある（例えばＡＪＲ　　１４１：　１２０９−１２１５（１９８３）、Ｓｓｍ． 　Ｎｕｃｌ．　Ｍｅｄ．旦：　３６４（１９８３）、放射線学１４７　：　７８ １　（１９８３）及びＪ．　Ｎｕｃｌ．　Ｍｅｄ．　２５：５０６（１９８４） を参照せよ）。

常磁性化合物が撮像されるべき対象の心臓血管系中に投与されるとき、この化合 物の運命は多数の要因に依存する。もしそれが不溶性の粒子状物質から成るなら ば、それは、網内の系（ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｓｙｓｔｅｍ ）　（ＲＥＳ）によって、特に肝臓のクツペル細胞によって血液流から除去され るであろう；もしそれが比較的大きな粒子、例えばリポソームを含むならば、こ れらは肺中に止まるかもしれない；そしてもしこの化合物が可溶性でかつ比較的 低分子量のものであるならば、それは、比較的急速に腎臓を通して血液から取り 除かれるかもしれない（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ　ＡＧによって開発されそしてテスト された薬剤である、ＧｄＤＴＰＡ−ジメグルミン（ｄｉｍｅｇｌｕｍｉｎｅ）の 場合にはそうである）。かくしてＧｄＤＴＰＡ−ジメグルミンは、約２０分の血 液中での半減期を有する（Ｗａｉｎｍａｎｎら、ＡＪＲ１４２：　６１９〜６２ ４　（１９８４）参照）。

しかしながら、常磁性ＭＲＩ造影剤が血液貯留剤として適当であるためには、即 ち心臓血管系から容易には除去されないものであるためには、この常磁性化合物 が可溶性であること、それが、腎臓を通しての急速に排泄されない程度に充分に 高い分子量を持つべきこと、そしてそれが、血液貯留中の適切な半減期を確保す るために必要とされる安定性と、この化合物、またはさらに特定的にはその中に 含まれる常磁性種が排泄可能であるために必要とされる不安定性との間のバラン スを達成する１ｎｖｉｖｏ安定性を持つべきことが必要である。

エステル基によって巨大分子にそしてアミド基によってキレート部分に結合され ていて、そしてこのエステル基とアミド基の間に少なくとも２原子の長さの炭素 鎖を供給する結合体部分（ｌｉｎｋｅｒ　ｍｏｉｅｔｙ）の使用によって、改良 された性質を有する、特に心臓血管系のイメージングのだめの巨大分子の常磁性 ＭＲＩ造影剤を供給することが可能であることがここに見い出された。さらには 、このような結合体部分の使用によってｉｎ　ｖｉｖｏ安定性と１ｎｖｉｖｏ不 安定性との間の特に望ましいバランスが達成されることが見い出された。

かくして、−面においては、本発明は、エステル基によって巨大分子に結合され た結合体基それ自体にアミド基によって結合されたキレート部分によってキレー ト化された常磁性金属種から成る常磁性化合物であって、該結合体基が該アミド 基及び該エステル基の間に少なくとも２原子の炭素鎖を供給する化合物を提供す る。

本発明の常磁性化合物中の結合体基は、好ましくは、式Ｉ ＨＯＯＣＣＨ２（ＣＨＲ）ｎ　ＮＯ３（Ｉ　）［式中、ｎは１〜１０の整数であ り、モしてＲはそれぞれ同一または異なっていてもよく、水素原子またはヒドロ キシル、ヒドロキシアルキル若しくはＣｌ−４アルキル基を表すが但しアミン基 に結合した炭素上のＲはヒドロキシル基を表さない］ のアミノ酸の残基である。

上記の式Ｉにおいて、ｎは好ましくは１〜６、そして特に好ましくは１〜３の整 数であり、モしてＲは好ましくは水素、メチル、エチル、ヒドロキシル、七ノー またはポリ−ヒドロキシ（ＣＩ−ａアルキル）、特に七ノーまたはポリ−ヒドロ キシ（ＣＩ−４アルキル）、例えばヒドロキシメチルまたは２．３−ジヒドロキ シーグロビルである。

Ｒがポリヒドロキシアルキル基である場合には、ヒドロキシル基と炭素原子との 比は、好ましくはｌ：ｌまでである。ｎが１〜１０でありモしてＲが水素である 式Ｉの化合物の残基もまた、本発明の常磁性化合物中の結合体基として好ましい 。結合体基として特に好ましいものには、β及びγアミノ酸、例えばβ−アラニ ン及び４−アミノ−酪酸の残基があげられる。

本発明の常磁性化合物のキレート部分は、好都合には、通常の金属キレート化剤 の残基でよい。適当なこのようなキレート化剤は、上述しｆ：、　Ｍ　ＲＩ造影 剤に関する文献から（例えばＥＰ−Ａ−７１５６４、ＥＰ−Ａ−１３０９３４、 ＥＰ−Ａ−１８６９４７、ＵＳ−Ａ−４６３９３６５、ＥＰ−Ａ−２３０８９３ 、ＥＰ−Ａ−２３２７５１、ＥＰ−Ａ−２９２６８９、ＥＰ−Ａ−２５５４７１ 、ＬＩＳ−Ａ−４６８７６５９、ｗｏ−８６１０２００５及びＤＥ−Ａ−３４０ １０５２参照）並びに重金属解毒のためのキレート化剤に関する文献からよく知 られている。

選ばれるキレート部分は、明らかに、ｉｎ　ｖｉｖｏで安定でありそして選択さ れた常磁性種とキレート錯体を生成することができるものでなければならない。

しかしながら、好ましくは、このキレート部分は、ＥＰ−Ａ−１８６９４７中で 述べられたもの、またはアミノポリ（カルボン酸若しくはカルボン酸誘導体）（ 本明細書中では以後ＡＰＣＡと称する）若しくはその塩の残基、例えばＳｃｈｅ ｒｉｎｇ　ＡＧによってＥＰ−Ａ−７１５６４、ＥＰ−Ａ−１３０９３４及びＤ Ｅ−Ａ−３４０１０５２中でそしてＮｙｃｏｍｅｄ　ＡＳによって国際特許出願 ＰＣＴ／ＧＢ　８８１００５７２号中で議論されたものの一つであろう。この最 後の出願は、例えばアミン窒素上にまたはアミン窒素を結合するアルキレン鋼上 に親木基を有するＡＰＣＡ、例えば式％式％（） ［式中、 基Ｚの各々は、基−ＣＨＲ、Ｘであるか、または基２は、ｌｆｊ　ニナッテ’１ ＆　−（ＣＨＲｒ　）　ｚ−０−（ＣＨＲｒ　）　ｚ−であり；Ｙ　ハ基−（Ｃ ＨＲ＋　）　２−Ｎ（ＣＨＲＩ　Ｘ）　ｚまたは基−ＣＨＲ，Ｘ−Ｃ’あり；Ｘ はそれぞれ同一または異なっていてもよく、カルボキシル基またはその誘導体ま たは基Ｒ１であり；Ｒ１はそれぞれ同一または異なっていてもよく、水素原子、 ヒドロキシアルキル基または場合によりヒドロキシル化されたアルコキシ基であ る：が 但し少なくとも二つの窒素が−ＣＨＲ、Ｘ部分（式中Ｘはカルボキシル基または その誘導体である）を有し、そして好ましくは 各々の−ＣＨＲＩ　Ｘ部分はメチル基以外であり、そしてＹ及びＺが−ＣＨＲ、 Ｘ基である場合には少なくとも一つのＲ１は水素以外であり、そしてまた好まし くはＸ−ＣＨＲ、Ｘ部分（式中Ｘはカルボキシル基またはその誘導体である）を 有する各々の窒素原子は少なくとも一つの−ＣＨ２Ｘ部分以外である部分を有す る］ の化合物及びそれらの塩を開示している。

本発明の常磁性化合物のためのキレート部分として特に好ましいのは以下の残基 である：　ＥＤＴＡ　、　ＤＴＰＡ　、　０ＴＴＡ　。

ＤＯ３Ａ　、　ＤＴＰＡ−ＢＭＡ　；　ＤＯＴＡ　、デスフェリオキサミン（ｄ ｅｓｆｅｒｒｉｏｘａｍｉｎｅ）　；及びそれらの生理学的に許容できる塩、殊 にＤＴＰＡ、　ＤＯＴＡ、及びそれらの塩。

本発明の常磁性化合物中のキレート部分が不安定な対イオンを有する場合には、 その対イオンは、生理学的に許容できるイオン、例えばアルカリ金属、非毒性ア ミン（例えばトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、エタノールアミン、ジ ェタノールアミン及びＮ−メチルグルカミン）、ハロゲン、または非毒性有機若 しくは無機酸のイオンでなければならない。

本発明の常磁性化合物の巨大分子成分としては、巨大分子の常磁性ＭＲＩ造影剤 のために以前に示唆された任意の巨大分子を使用することができる。好ましくは 、選ばれる巨大分子は、生理学的に許容でき、そしてヒドロキシル基を含むかま ｔ；は化学的に改質してヒドロキシル基を導入するか保護されたヒドロキシル基 の保護をはずすことができるものであろう。

特に好ましくは、この巨大分子は、高分子炭水化物及び重合炭水化物並びに重合 糖アルコール及びそれらの誘導体から成る群から選ばれたヒドロキシル基含有物 質であろう。“高分子炭水化物”という用語は炭水化物上ツマ−の累積した天然 の高分子物質を指すために使用され、そして“重合炭水化物”という用語は、炭 水化物分子を例えばカップリングまたは橋かけ剤の助けによって重合させること によって得られｔ；合成ポリマーを指すＩ；めに使用される。同様に、“重合糖 アルコール”という用語は、糖アルコール分子を例えばカップリングまたは橋か け剤の助けによって重合させることによって得られた合成ポリマーを指すために 使用される。

かくして、本巨大分子は、好都合には、環式または非環式の多糖、例えばグルカ ン、例えば澱粉、アミロース、アミロペクチン（それの巨大分子のデキストリン を含む）、グリコーゲン、デキストラン及びプラシン、またはフルクタン、例え ばイヌリン及びレバン、シクロデキストリン、または植物、微生物若しくは動物 由来のその他の生理学的に許容できる多糖類でよい。

巨大分子として使用することができる重合炭水化物または重合糖アルコールの例 は、グルコースの重合によって得られるいわゆるポリグルコース、及び炭水化物 または糖アルコール（例えばマニトール若しくはソルビトール）を少なくとも一 つの二官能性の橋かけ剤、例えばエビクロロヒドリン、ジエボキシド若しくは対 応するハロゲンヒドリンによってかまｔ；は二官能性のアシル化剤によって橋か けして得られる巨大分子の生成物を含む。

商業的に入手できるこのような生成物の一例は、エピクロロヒドリンの助けによ ってスクロースを橋かけして得られるＦｉｃｏｌｌ　（Ｆｉｃｏｌｌは、スエー ダン、ＵｐｐｓａｌａのＰｈａｒｍａｃｉａ　Ｆｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ　 ＡＢの商標である）である。

本巨大分子のための基礎を形成することができる物質の別の例は、上で述べられ た多糖類の生理学的に許容できる誘導体、例えばヒドロキシル、カルボキシアル キル、アシルまたはアルキル誘導体、例えばこのような多糖類のヒドロキンエチ ル、ジヒドロキシプロピル、カルボキシメチル、アセチル及びメチル誘導体を含 む。

不溶性多糖類の（例えばセルロース）の水溶性誘導体並びに上で述べられた水溶 性巨大分子も考慮してよい。

多くのこのような巨大分子は、商業的に入手でき及び／または広く文献中に述べ られている。

本発明の常磁性化合物は、これらの化合物が可溶性でありそして腎臓閾値以上の 分子量を有するときには血液貯留剤としての使用に特に適しているが、本発明の それより低い分子量の常磁性化合物は、その他のＭＲＩ造影剤、例えば腎臓、膀 胱または胃腸管の検査のＩ；めの薬剤に使用してもよい。

巨大分子は、一般的には、巨大分子の常磁性キレートの意図された用途に従って 選ばれるであろう。もし例えばキレートが外に通じる排出管（ｏｕｔｗａｒｄ　 ｅｓｃａｐｅ　ｄｕｃｔｓ）を有する体の空洞、例えば胃腸管、膀胱及び子宮の 検査において使用するだめのものであれば、巨大分子は生物分解性である必要は ない。さらにまたキレートが非経口的な投与を意図されている場合には、その分 子量が尿中へのそれの排泄を可能にするほど充分に小さい限り、巨大分子はやは り生物分解性である必要はない。しかしながら、キレートを血液貯留剤において 使用する予定である場合には、その分子量が腎臓閾値を越える生物分解性の巨大 分子を使用するかまたは各々の分子が一つより多い巨大分子を含む巨大分子の化 合物、例えば巨大分子−結合体−キレート−結合体−巨大分子の構造を有する化 合物を使用するかのどちらかが望ましい。生物分解性の巨大分子を使用する場合 には、これらは、例えば、加水分解によって酵素で分解できる〔例えば巨大分子 中のグリコサイド結合を加水分解する内部加水分解酵素（ｅｎｄｏｈｙｄｒｏｌ ａｓｅｓ）によって〕巨巨大子でよい。従って、例えばα−アミラーゼによって 分解できる巨大分子、例えば澱粉ベースの巨大分子を選択してよい。

本発明の常磁性化合物のために使用される巨大分子は、中性でもよくまたは溶液 中で正味の負若しくは正の電荷を有してもよい。非経口的な使用のためには、溶 液中で正味の電荷を持たないかまたは負の正味の電荷を持つ巨大分子が好ましい 。負の正味の電荷は、例えば巨大分子中にカルボキシル基またはその他の負に荷 電された基が既に存在するのでなければ、そのような基を巨大分子中に導入する ことによって得ることができる。

本発明の化合物中の巨大分子は多糖そして殊に好ましくはデキストランまたはそ の誘導体であり、特に４０．０００〜５００，０００殊に約７０　、０００の重 量平均分子量を有することが特に好ましい。

本発明の常磁性化合物の分子量は、この化合物の特定の最終用途に合うように容 易に選択することができる。

上で述べたように、これは、適当な大きさの巨大分子の選択によってかまたは二 つまたはそれより多い巨大分子を一緒に結合して最終の化合物を生成させること によってかのどちらかで行うことができる。一般的な診断の目的のためには、常 磁性化合物の重量平均分子量は、好ましくは１，０００〜約２，０００，０００ 、特に好ましくは３．０００〜約２．０００，０００の範囲内にある。このよう な常磁性化合物の製造のためには、所望の分子量の巨大分子は、通常の方法によ って得ることができる。

常磁性化合物が事前の分解なしに尿中に排泄できることが望まれる場合には、分 子量は好ましくは４０．０００未満、例えば３０，０００未満またはさらに特定 的には２０．０００未満である。しかしながら、本発明の常磁性化合物を、それ らが特にうまく使用に適している血液貯留剤として使用する場合には、常磁性化 合物の分子量は、好ましくは４０．０００〜２，０００，０００、さらに好まし くは４０，０００〜１５０，０００、そして特に好ましくはａｏ、ｏｏｏ〜１０ ０，０００の範囲内にあるべきである。常磁性化合物が単一の巨大分子残基から 成る場合には、上で述べられた分子量範囲限界はまた、巨大分子の分子量に関す る適当な範囲限界であると考えてもよい。

本発明の常磁性化合物においては、常磁性金属種、即ち常磁性金属原子またはイ オンは、好ましくは放射性ではなく、そして特に好ましくは原子番号２１〜２９ ．４２．４４及び５７〜７１の元素の群から選ばれる。原子場合２４〜２９また は６２〜６９の元素が特に好ましい。適当なランタニドの例には、ガドリニウム 、ユウロピウム、ジスプロシウム、ホルミウム、及びエルビウムがあり、そして その他の適当な元素の例としては、マンガン、鉄、ニッケル、クロム及び銅をか あげられる。特に好ましい常磁性金属種には、Ｃｒ（Ｉ［［）、Ｍｎ（Ｉ［）、 Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｄｙ（Ｉ［Ｉ）及びＧｄ（ＩＩ）があり、殊にＧｄ及びＤｙ及 びＣｒがあげられる。

別の一面においては、本発明は、少なくともほんの少しは可溶性の常磁性金属化 合物、例えば塩化物、酸化物または炭酸塩を、エステル基によって巨大分子に結 合された結合体基それ自体にアミド基によって結合されたキレート部分を含む巨 大分子のキレート化剤（ここで該結合体基は、該アミド基及び該エステル基の間 に少なくとも２原子の炭素鎖を供給する）と−緒に、溶媒中で混合することから 成る、本発明の巨大分子の常磁性化合物の製造方法を提供する。

前節で述べられた巨大分子のキレート化剤それ自体が、本発明の別の一面を代表 する。

従ってさらに別の一面においては、本発明は、エステル基によって巨大分子に結 合された結合体基それ自体にアミド基によって結合されたキレート部分を含む巨 大分子のキレート化合物であって、該結合体基が該アミド基及び該エステル基の 間に少なくとも２原子の炭素鎖を供給するキレート化合物、またはその塩若しく は金属キレートを提供する。

巨大分子のキレート化剤はそれ自体、ヒドロキシル基含有巨大分子をアミノ酸ま たはその塩と縮合させること、そしてこのようにして得られた生成物をカルボキ シル基まｌ；は反応性カルボキシル誘導体含有キレート化剤と反応させることに よって製造することができる。かくしてなおさらに別の一面においては、本発明 は、ヒドロキシル基含有巨大分子をアミノ酸まｔ；はその塩（ここで該アミノ酸 はそのカルボキシル基とアミン基の間に少なくとも２原子の炭素鎖を有し、そし て好都合には上で定義されたような式Ｉのアミノ酸である）と反応させること； このようにして得られた生成物をカルボキシル基または反応性カルボキシル誘導 体含有キレート化剤と反応させること；そして、場合により、このようにして得 られた生成物をその塩または金属キレートに変換させることから成る、本発明に よる巨大分子のキレート化剤の製造方法を提供する。

本発明の常磁性化合物をＭＲＩ造影剤としてヒトまたはヒト以外の動物の体に投 与する場合には、それらは、好都合には、一つ以上の製薬上の担体または賦形剤 と一緒に調製されるであろう。かくして別の一面においては、本発明は、少なく とも一つの製薬上の担体または賦形剤と一緒に本発明による巨大分子の常磁性化 合物を含む診断の造影媒体を提供する。

本発明によるキレート化剤及び塩及びキレートはまた、キレート化剤及びキレー トが使用されてきたその他の分野において、例えば医薬製剤用の安定剤として、 有毒な重金属積用の解毒剤として、そして放射線療法のための金属種（例えば原 子またはイオン）の投与のためのまたは診断技術例えばＸ線、そして超音波イメ ージング若しくはシンチグラフィー用の診断剤としても有用である。

加えて、本常磁性化合物はまた、リンパ管撮影法のような技術においても有用で あろう。それ故別の一面において、本発明は、キレート部位が、本発明によるキ レート化合物の残基である、金属キレートと一緒に少なくとも一つの製薬上の担 体または賦形剤を含有する診断または治療用の組成物を提供する。

さらに別の一面において、本発明はまた、少なくとも一つの製薬上の担体または 賦形剤と一緒に、場合により生理学的に許容しうる対イオンとの塩またはキレー トの形態の本発明によるキレート化合物を含有する解毒剤を提供する。

本発明の組成物、例えば造影媒体は、通常の調製助剤、例えば安定剤、酸化防止 剤、浸透性調節剤、緩衝液、ｐＨ調節剤などを含有することができ、そして非経 口的なまたは小腸経由の投与、例えば注射または注入、または外部への排出管を 有する体の空洞、例えば胃腸管、膀胱または子宮中への直接投与に適した形態に することができる。かくして本発明の組成物は、通常の製薬上の投与形態例えば 錠剤、カプセル、粉末、溶液、懸濁液、分散液、シロップ、座薬などでよい。し かしながら、生理学的に許容しうる担体媒体、例えば注射用水中の溶液、懸濁液 及び分散液が、一般的には好ましいであろう。

本発明の組成物が毒性の金属種例えば重金属または放射性金属イオンのキレート を含む場合には、例えばＤＥ−Ａ−３６４０７０８（及びＡＵ−Ａ−８１８８９ ／８７）中で５ｃｈａｒｉｎ５　ＡＣによって論じられているように、少し過剰 の、例えば０．５〜２０モル％、好ましくは１〜ｌＯモル％の、キレート化合物 、または生理学的に許容できる対イオンとそれの一層弱いキレートを組成物中に 含むことが望ましいであろう。

本組成物が非経口的な投与のために調製される場合には、例えば造影媒体が血液 貯留剤として使用されることになる場合には、無菌の生理学的に許容しうる媒体 、例えば等張またはいくらか高張の水溶液中の溶液が好ましいであろう。

ＭＩ？Ｉ検査のためには、本発明の造影媒体は、溶液、懸濁液または分散液の形 態ならば、一般的に、１リツトルあたり１マイクロモル〜１．５モル、好ましく は０．１〜７００ｍＭの範囲の濃度で常磁性金属種を含存するであろう。しかし ながら、造影媒体は、投与の前に希釈するためにはさらに濃縮された形で供給さ れてもよい。本発明の造影媒体は、好都合には、体重１キログラムあたり１０１ 〜３ミリモル例えば１０−３〜１ミリモルの常磁性金属種、例えば約１ミリモル Ｄｙ／　ｋｇ体重の量で投与してよい。

Ｘ線検査のためには、造影剤の投与量は一般的にＭＲ検査より多くするべきであ り、そしてシンチグラフイックな検査のためには、投与量は一般的にＭＲ検査の ためよりも少なくするべきである。放射線療法及び解毒のためには、通常の投与 量を使用してよい。

なお別の一面においては、本発明はまた、ヒトまたはヒ以外の動物の体の診断方 法であって、これらの体に、本発明による巨大分子の金属キレート、好ましくは 常磁性化合物を投与すること、及びこれらの体の少なくとも一部のＸ線像、磁気 共鳴像、超音波像またはシンチグラフィー像を生成させることから成る方法を提 供する。

さらに別の一面においては、本発明は、ヒトまたはヒト以外の動物の体の重金属 解毒方法であって、これらの体に、場合により生理学的に許容しうる対イオンと の塩またはキレートの形の本発明によるキレート化合物を投与することから成る 方法を提供する。

なおさらに別の一面においては、本発明はまた、ヒトまたはヒト以外の動物の体 の放射線治療方法であって、これらの体に、放射性の金属種と本発明によるキレ ート化合物とのキレートを投与することから成る方法を提供する。

さらに別の一面においては、本発明はまた、ヒトまたはヒト以外の動物の体の像 生成、解毒または治療の方法における使用のための診断剤の製造のための、本発 明による巨大分子の化合物またはその塩若しくはキレートの使用を提供する。

上で述べたように、特定の結合体基の使用の結果として、本発明の常磁性化合物 は、先行技術の化合物の性質に関して特別に改良されｔ；性質を有する。

かくして常磁性キレ−）　ＧｄＤＴＰＡがデキストランに直接結合されている場 合には、生成する化合物はｉｎ　ｖｉｖ。

でもｉｎ　　ｖｉｔｒｏでも安定ではない。このような化合物、ＧｄＤＴＰＡ− デキストラン（分子量７０，０００）のウサギへの投与では、血液貯留効果は観 察されず、そして観察された尿中へのガドリニウムの急速な排泄は、ＧｄＤＴＰ Ａまたはその塩に関して観察されるものと非常に類似していた。対照的に、分子 量７０，０００のデキストランにβ−アラニンによって結合されたＧｄＤＴＰＡ 、即ち本発明による化合物は、ｉｎ　ｖｉｔｒｏで安定であり、そしてそれが約 ６時間の血液中での半減期を示しかつ０．０ＦＭ！／ｋｇの分布体積を有すると いう点に関する限りほとんど理想的な血液貯留性を有する。ここでこの分布体積 は、少なくとも分解までは、この化合物の分布は本質的に血液貯留の内部だけに あることを示す。

それにもかかわらず、アミノ酸残基結合体を用いて達成される血液貯留効果の増 大は、常磁性化合物中の巨大分子と結合体の間のエステル結合の存在による常磁 性種の容易な排泄性を犠牲にして得られるのではない。このエステル結合は、ｗ ｏ−８５／　０５５５４の巨大分子−結合体−キレート化合物中の本質的に生物 分解性でないアミド結合とは違って、生物分解性である。

本明細書中で述べられたすべての文書の開示は引用によって本明細書中に組み込 まれる。

以下の実施例は、非限定的な方法で本発明を例示するために提供される。しかし ながら、実施例１及び１４の生成物が特に好ましい。本明細書中では以下の略語 を使用する： デキストランＸ　：　　Ｘ、ｌＯ’ドルトンの分子量を有するデキストラン（こ のようなデキストランはＳｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから入手できる） ＤＭＳＯ−Ａ　：　　ジメチルスルホキシドＤＴＰＡ−Ａ　：　　ジエチレント リアミン五酢酸ビス無水物（ｂｉｓａｎｈｙｄｒｉｄｅ） ＥＣＤＩ：　　Ｎ〜エチル−Ｎ′（３−ジメチルアミノプロピル）−力ルポジイ ミド ＦＭＯＣ−ＢＡ　：　　フルオレニルメチルオキシカルボニル−β−ＰＰ：４− ピロリジノピリジン 水：　逆浸透によって脱イオンされた水実施例　Ｉ ＧｄＤＴＰＡ−β−アラニン−デキストラン（分子量７０．０００）６５０ｍ（ ２の乾燥ＤＭＳＯ中の１５．９　ｇのデキストラン７０の溶液に、３５０＋ｎＱ の乾燥ＤＭＳＯ中に溶解した２０．３ｇのＦＭＯＣ−ＢＡ。

１３．７ｇのＥＣＤ　Ｉ及び９６８ｍｇのＰＰを添加した。この反応混合物を周 囲の温度で１８時間撹拌し、そして４３．１ｇのピペリジンを添加した。７０分 後に、７．３ｍｆｆの濃塩酸を滴加し、そして氷／水バスで冷却しそして１．７ ｆｆのエーテル／クロロホルム混合物（７：　３ｗ／Ｗ）を滴加すると黄色のオ イルが生成した。デカンテーションの後で、このオイルラミ留水中に溶解させモ してｐＩ（を４に調節した。塩の濃度が１４００ｍ（２の溶液中で０．９％とな るまで塩化ナトリウムを添加し、そして生成物を中空繊維カートリッジ（Ａｍｉ ｃｏｎＨＰ　１０〜２０）中でｐＨ４で水中の０．９％塩化ナトリウムに対して ２４時間透析した。次にこの溶液を同じ装置を用いて蒸留水に対して１１５０ｍ ＋２の体積まで濃縮し、Ｎ−メチルモルホリンによってｐＨを９に調節し、そし て同じ塩基を用いてｐｕを８で保持しながら２９．１８ｇのＤＴＰＡ−Ａを添加 した。

溶液が透明になった時に、この反応混合物を２時間撹拌ン酸を添加し、そして濃 塩酸でｐｎを６．０ｉ：調節した。２００ｍＱの蒸留水中に溶解された３０．３ ７ｇの塩化ガドリニウム六水和物を素早く添加し、そしてＩＯＮのＮａＯＨを用 いてｐｎを５．５に調節した。この溶液を、緩和時間Ｔｌ　（ＮＭＲプロトンス ピンアナライザー（ＲＡＤＸ社、ヒユーストン、テキサス、ＵＳＡ）を用いてｌ ＯＭＨｚ及び３７℃で測定〕が２０００ｍ５より上になるまで蒸留水に対して透 析した。この溶液を凍結乾燥すると、１５．３ｇの薄黄色に着色した粉末が生成 しに　。

分　　析 元素分析： Ｃ，ｄ　４．６％；Ｎ２．１５％；　Ｎａ　Ｏ，１６％、　ＣＩ　０．０１％未 満。

遊離Ｇｄ　（キシレン　オレンジ滴定）、ＤＴＰＡＳＧｄＤＴＰＡ、クエン酸、 まｔ；はＤＭＳＯ（ＨＰＬＣ）　：　　０．０１％未満（分析結果中のパーセン トは重量による）。

蒸留水中の比緩和速度（Ｔ１）増大（ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ ｒａｔｅ　ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）（ＳＲＲＥ）　（ＮＭＲプロトンスピンア ナライザーＣＲＡＤＸ社、ヒユーストン、テキサス、ＵＳＡ）でｌＯＭＨｚ及び ３７℃で測定〕は９．６ｓ−’ｍＭ−’Ｇｄであった。

７８．６ｍｇのガドリニウム（ＩＩ　）ＤＴＰＡ−β−アラニン−デキストラン （分子量７０．０００）を実施例１に従って製造し、モして１０ｍＱの蒸留水中 に溶解させた。この溶液を無菌濾過し、そしてｌ　Ｏｍ（２のバイアル中に詰め た。この溶液は０．０５ｍｍｏｌＧｄ／　＋ｎ１２を含んでいた。

実施例２の溶液を、０．０５ｍｍｏｌＧｄ／　ｋｇ体重の投与量で三匹のウサギ 中に静脈注射した。別の三匹のウサギは、０．０５ｍｍｏｌＧｄ／　ｋｇ体重の 投与量でガドリニウム（Ｉ［［）ＤＴＰＡ−ジメグルミン塩を静脈内投与された 。

血液のサンプルを、注射の前及び注射後１，５．１０゜１５．３０．１２０．１ ８０及び３００分並びに２４及び４８時間で耳の静脈から採取した。血液のサン プルから血清を調製しそシテ緩和時間Ｔ１及びＴ２をＲＡＤｘノＮＭＲ分光計で （３７°Ｏ％１０ＭＨｚ）測定した。血清のサンプル中のガドリニウム濃度はＩ ＣＰ　（高周波誘導結合プラズマ）によって測定した。

分布の見かけの体積（ＶＤ）及び生物学的半減期（ｔｌ／ｌ）を二区画（ｃｏｍ ｐａｒｔｍｅｎｔ）モデルを用いて測定した。結果は以下の表に示される。

ｃｄ（Ｉ［Ｉ　）ＤＴＰＡ−β−アラニン−デキストラン　　　　　　　０．０ ５±０．００３　　６．７±０．１８Ｇｄ（ＩＩＩ　）ＤＴＰＡ−ジメグルミン 　　　０．２６±０．０３７　　０．７２±０．１１上で示された結果は、実施 例１の化合物がＧｄＤＴＰＡよりもかなり長い半減期を有するが、注射後４８時 間の血清において緩和効果も血清ガドリニウムも観察されなかったので、それで いてなお生物分解性であることを示す。観察された０、０５の分布の見かけの体 積は、その血液貯留性を確認する。

１０．０ｇのデキストラン７０を、６００ｍ１２の乾燥ＤＭＳＯ中の１２．８ｇ のＦＭＯＣ−ＢＡ、　８．７ｇのＥＣＤＩ、０．６１　ｇのＰＰ及び３１．５ｍ Ｑのピペリジンと、そして次に２２ｇのＤＴＰＡ−Ａと、実施例１において述べ たようにして、クエン酸緩衝液を添加するところまで反応させた。６ＭのＨＣＩ でｐＨを５．１に調節し、そしてこの溶液を４Ｑの水に対して透析した。この溶 液を凍結乾燥すると５．５ｇの薄黄色の固体が得られに　。

元素分析 Ｎ　　２．８２％、Ｃ４２，５２％、Ｈ６，７４％０．５ｇの実施例４の生成物 を７０ｍＱの水に溶解し、そしてこれに、１０ｍ＋２の水中に溶解した１、３８ ｇのクエン酸、１−４９ｍＱのＩＯＮのＮａＯＨ及び４１７＋ｎｇのＦｅＣ１５ を添加した。

ＩＯＮのＮａＯＨでｐＨを５に調節しそして一夜反応させた後で、この溶液を濾 液中のＴ、が２０００ｍ５より上となるまで水に対して透析した。凍結乾燥する と、０．４７　ｇの薄茶色の固体が得られた。５．５％Ｆｅ、緩和性（ｒｅｌａ ｘｉｖｉｔｙ）０．８デキストラン７０−β−アラニン−ＤＴＰＡ−ＤＹｏ、５ ｇの実施例４の生成物を１．１ｇのＤＹＣ１、と錯体を形成させ、そして実施例 ５において述べたようにして単離した。０．５７ｇの収量の白色固体、９．８％ Ｄｙ１緩和性０．２ｓ−’ｍＭ−’。

０．５ｇの実施例４の生成物を１．１５ｇのＹｂ（ＮＯａ）ｓと錯体を形成させ 、そして実施例５において述べたようにして単離した。０．５ｇの収量の黄色味 がかった固体、３．５％Ｙｂ１緩和性０．０３Ｓ−’ｍＭ−’ａ ０．５ｇの実施例４の生成物を６４２ｍｇのＣｕ５Ｏ，と錯体を形成させ、そし て実施例５において述べたようにして単離した。０．５５ｇの収量の薄青色の固 体、１．５％Ｃｕ、緩和性２．０ｇのデキストラン４０を、実施例１中で述べた ようにして、乾燥ＤＭＳＯ中（７）２．６ｇ　ノＦＭＯＣ−ＢＡ、　１．７３ｇ 　ノＥＣＤＩ、１２２ｍｇのＰＰ及び６．３ｍ４のピペリジンと反応させた。生 成物をさらにここで述べたようにして３．７７ｇのＤＴＰＡ−Ａと反応させ、そ してクエン酸塩緩衝液中で３．８２ｇのＧｄＣ１、・６Ｈ２０と錯体を形成させ た後、生成物を透析しそして凍結乾燥すると１．０５ｇの白色固体が生成した。

５．１％Ｇｄ、緩和性５．１ｓ−’ｍＭ−’。

分子量１３１０００及び置換の程度０．５２の２．Ｏｇのヒドロキシエチル澱粉 （ＵＳ−Ａ−２５１６６３４中に述べられた方法に従ってワックス状澱粉をエチ レンオキシドによってヒドロキシエチル化することによって製造された）を１２ ０ｍ（２の乾燥ＤＭＳＯ中に溶解させた。それを、実施例９中で述べたのと同じ 試薬と、同じ量で反応させそして単離した。２．３ｇの収量の白色固体、５．１ ％Ｇｄ、緩和性６．０ｓ−’ｍＭ−’。

２．０ｇのデキストラン４０を、実施例９で述べたようにして、デキストラン４ ０−β−アラニン水溶液をｐＨ４，２で透析するところまで反応させた。２．６ ５　ｇのＥＤＴＡ−ビス−無水物（Ｅｃｋｅｌｍａｎら、Ｊ、　　Ｐｈａｒｍ、 　　Ｓｃｉ、、６４　（１９７５）　７０４の方法を用いて製造された）をこの デキストラン誘導体と反応させ、２．７４ｇのＣｒＣｌ３・６Ｈ２０と錯体を形 成させ、そして生成物を実施例９中で述べたようにして単離した。２．９ｇの収 量の紫色の固体、３．１％Ｃｒ、緩和性１．１２、Ｏｇのデキストラン５００を 、４．４ｇのＤＴＰＡ−Ａを使用した以外は実施例９で述べたようにして反応さ せた。この反応混合物を、Ｎ−メチルモルホリンによってｐＨを８に保持しなが ら３時間撹拌した。次に６ＮのＨＣＩによってｐＨを５に調節し、そして５．５ ｇのクエン酸及び５．９６ｍ（ｌの１ＯＮのＮａＯＨを含む緩衝溶液を添加した 。３．８９ｇのＢ１Ｃ１゜を１００ｍ１２のＩＭのＨＣＩ中に溶解させることに よってＢｉ（ＩＩＩ）の溶液を調製し、そして飽和したアンモニア水によってｐ Ｈを７に調節した。この懸濁液を遠心分離し、そして上澄み液を傾斜して分けた 。沈殿物を再懸濁させそして二回遠心分離し、そして白色のシェリー状の沈殿物 をデキストランの緩衝溶液に添加した。ｐＨは５．０であった。−夜反応させた 後で、透明な溶液を１２ｆｆの水に対して透析し、そして凍結乾燥するとＯ−８ ｇの白色固体が生成した。

９．４％Ｂｉｎ （ａ）　　ＤＴＰＡ誘導体３，６．９−トリス−カルボキシメチル−４−（２− ヒドロキシエチル）−３，６，９−トリアザウンデカンニ酸（ＨＥｔＤＴＰＡ） をｐｃ丁／ＧＢ　８８１００５７２の方法に従って合成した。ＨＥｔＤＴＰＡを 強い陰イオン交換体の上に充填しそしてＩＭのＨＣＩによって溶出しそして引き 続いて蒸発させることによってＨＥｔＤＴＰＡ　ｌ−リヒドロクロリドを製造し た。生成物は白色固体であった。融点、３５０℃より高い（分解）。

元素分析： 計算値：　Ｃ３５，１４％、　Ｈ５，５４％、　Ｎ７．６９％、　ＣＩ　１９． ４５％測定値：　Ｃ３４，７６％、　Ｈ５，４６％、　Ｎ７．７４％、　ｃｔ　 １９．５６％（ｂ）　　２．０　ｇのデキストラン２０００を、実施例９におけ るようにしてＤＴＰＡ−Ａ反応の前の点まで反応させた。この溶液を凍結乾燥す ると１．９ｇの白色固体が生成した。この生成物を２００ｍＣの乾燥ＤＩＪＳＯ 中に溶解させ、そして２−２４　ｇのＨＥｔＤＴＰＡ　ト’Ｊ　ヒトｏ）７０Ｉ Ｊド、０．８６　ｇ　（７）ＥＣＤＩ及び３５ｍｇ（７）ＰＰを添加した。２４ 時間撹拌した後で、この溶液を３ｏｏｍＩ２のエーテル及び１２５ｎ＋１２のＣ ＨＣ１３の混合物に添加した。上澄み液のデカンテーションによって生成物を単 離した。生成物を１２０ｍＱの水の中に溶解させ、モしてＩＯＮのＮａＯＨによ ってｐＨを５に調節した。この溶液に、５．５ｇのクエン酸及び５．９６ｍＱの ＩＯＮのＮａＯＨを含む緩衝液、そして次に１０ｍｆｆの水中に溶解させた１、 ５３ｇのＧｄＣ１５・６Ｈ，Ｏを添加した。

ＩＯＮのＮａＯＨによってＩ）Ｈを５に調節し、そして３時間後に実施例９で述 べたようにして生成物を透析しそして単離した。２．５ｇの収量の薄茶色の固体 、５．７％Ｇｄ、緩和性デキストラン７０−β−７ラニ７−ＤＯＴＡ−Ｇｄ−テ トラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡ）５．２６　ｇ　（７）ｌ　、４，７．１０ −テトラアザシクロドデカン（Ｓｔｅｔｔｅｒらによってテトラヘドロン、３７ 　（１９８１）　７６７中で述べられたようにして製造された）を５０ｍ（２の 水中に溶解させた。濃ＨＢｒによってｐＨを１０に調節し、２０．１６　ｇのブ ロモ酢酸を７ｍＱの水中に溶解させ、・そして氷／水バス中で冷却しなからＬｉ ＯＨの溶液を注意深く添加した。ブロモ酢酸リチウム溶液を１．４，７．１０− テトラアザシクロドデヵン溶液ｌニ一度に添加した。４ＮのＬｉＯＨによってｐ Ｈを８と９．５の間に保持し、一方４時間の間に温度を次第に高くして８０°Ｃ にした。冷却後、この溶液を、１．５０の水中の４９４ｍ１２の湿ったＤｏｗｅ ｘ　５０ＷＸ　４酸性イオン交換樹脂と混合しそして１時間撹拌した。水で完全 に洗浄した後で、このゲルを２ｘ７５０ｍ＋２の飽和アンモニアによって洗浄し た。

濾液を蒸発させるとｌＯ，９ｇの白色固体が生成した。融点３５０°Ｃより高い 。ＦＡＢ−ｍｓ　Ｍ　＋　１　４１１及び４１７−モラー及びジ−リチウム塩。

＋３（−及び’Ｈ−ＮＭＲで構造を確認した。

８．７２ｇのこの固体をｌ［３ｍ（２の水中に溶解させそして濃ＨＣＩによって ｐＨを２．５に調節した。白色固体を濾別し、そしてこのプロセスを蒸発した濾 液に関して繰り返した。集められた固体を乾燥すると４．５ｇの白色固体が生成 した。

融点は３５０°Ｃより高かった（分解）。

（ｂ）デキストラン７０−β−ア５　＝　７−ＤＯＴＡ−Ｇｄ２．０ｇのデキス トラン７０を、実施例９において述べたようにしてＤＴＰＡ−Ａを反応させる前 の点まで反応させた。

この生成物を凍結乾燥しそして１００ｍｆｆの乾燥ＤＭＳＯ中に溶解させた。１ ．６６ｇの沈殿したＤＯＴＡ、　０．８６ＨのＥＣＤ　Ｉ及び６２ｍｇのＰＰを 添加し、そしてこの反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物に１ ５０ｍｆｆのエーテル及び６２ｍＱのＣＩ（Ｃｌ　ｓの混合物を添加し、白色沈 殿物をデカンテーション及びエーテルによる洗浄によって単離し、そして次に８ Ｏｎ＋Ｑの水中に溶解させた。ＩＯＮのＮａＯＨによってｐｎを５に調節しそし て５．５ｇのクエン酸及び５．９６ｍｆｆのＩＯＮのＮａＯＨの混合物そして次 に０．７６６ｇのＧｄＣｌ３’６ＨｚＯを添加した。反応混合物を５０時間撹拌 し、そして生成物を透析及び凍結乾燥によって単離した。２．４ｇの収量の白色 固体、７．４％Ｇｄ、緩和性１１．７ｓ−’ｍＭ−’。

５．６５　ｇの９−フルオレニルメチルオキシカルボニル−５−アミ７吉草酸（ ＣａｒｐｉｎｏらによってＪ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、＋３７（１９７２）　３ ４０４中で述べられたようにして５−アミノ−吉草酸及び９−フルオレニルメチ ルクロロホルメートから製造された）を、実施例９で述べられたようにして２． ０ｇ１）デキストラン７０．３．５ｇ（７）ＥＣＤＩ及び０．２５ｇｆｌ）ＰＰ と反応させた。この反応混合物を１２．７５＋＋＋１２のピペリジンによって処 理し、生成物を単離しそして水の中に溶解させそしてここで述べたようにして７ ．４４　ｇのＤＴＰＡ　−Ａと反応させた。この生成物をクエン酸塩緩衝液中の ７．７４ｇのＧｄＣｌ　３・６Ｈ２０と錯体を形成させ、そして上で述べたよう にして透析及び凍結乾燥によって単離した。６．６ｇの収量の薄茶色の固体、１ １．４％Ｇｄ、緩和性５．６ｓ−’ｍＭ−’＋＋２．０ｇのウシの肝臓のグリコ ーゲン（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を実施例９中で述べたようにして反 応させそして単離した。２．７ｇの収量の白色固体、７．５％Ｇｄ、緩和性６． ８ｓ−’ｍＭ−’。

実施例　１７ デキストラン７０−β−アラニン−ＤＴＰＡを含むバイアルバイアルを２０ｍｇ のデキストラン７０−β−アラニンＤＴＰＡ（実施例４）及び乾燥した固体とし ての０．２ｍｇの５ｎ（ＩＩ）Ｃ１，によって満たす。

０．９％の無菌の塩化ナトリウム中の過テクネチウム酸塩としてのＩ　！　ｍ　 ７　ｃの溶液を、使用前に添加しなければならない。デキストラン７０−β−ア ラニン−ＤＴＰＡとのテクネチウムキレートは、静脈または皮下投与のためであ り、そして脈管系のためのまたはリンパ管撮影のだめの造影剤である。

実施例　１８ デキストラン７０−β−アラニン−ＤＴＰＡ−Ｇｄ及びデキストラン７０−β− アラニン−ＤＴＰＡのカルシウム三ナトリウム塩７６０ｍｇのデキストラン７０ −β−アラニンＤＴＰＡ　（実施例４）を１０ｍ＋２の水の中に溶解させそして ２８ｍｇのＣａ（ＯＨ）ｚを添加した。周囲の条件下でＮａＯＨでｐＨを調節し た。１ｍ（２の生成した溶液を９ｍＱの水の中の１．０ｇのデキストラン７〇− β−アラニン−ＤＴＰＡ　−Ｇｄ　（実施例１）の溶液に添加し、そして生成し た溶液を無菌濾過し、２０ｎ＋１２のバイアル中に満たしそして凍結乾燥した。

実施例　１９ デキストラン７０−β−アラニン−ＤＴＰＡ−Ｇｄ及びＤＴＰＡのカルシウム三 ナトリウム塩 １０ｍ４の水の中の１．０ｇのデキストラン７０−β−アラニン−ＤＴＰＡ−Ｇ ｄ　（実施例１）の溶液に、１７ｍｇのＤＴＰＡのカルシウム−＝ナトリウム塩 （Ｆｌｕｋａ）を添加した。この溶液を無菌濾過し、２０ｍ１２のバイアル中に 満たしそして凍結乾燥した。

補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成２年７月２５日

Claims (28)

【特許請求の範囲】
1. １．エステル基によって巨大分子に結合された結合体基それ自体にアミド基によ って結合されたキレート部分によってキレート化された常磁性金属種から成り、 該結合体基が該アミド基及び該エステル基の間に少なくとも２原子の炭素鎖を供 給する常磁性化合物。
2. ２．該結合体基が、式Ｉ ＨＣＯＣ−ＣＨ２−（ＣＨＲ）ｎ−ＮＨ２（Ｉ）［式中、ｎは１〜１０の整数で あり、そしてＲはそれぞれ同一または異なっていてもよく、水素原子またはヒド ロキシル、ヒドロキシアルキル若しくはＣ１−６アルキル基を表すが、但しアミ ン基に結合した炭素上のＲはヒドロキシル基を表さない］ のアミノ酸の残基である、請求項１記載の化合物。
3. ３．式Ｉにおいて、ｎは１〜１０の整数であり、そしてＲは水素原子を表す、請 求項２記載の化合物。
4. ４．該結合体基がβまたはγアミノ酸の残基である、請求項１記載の化合物。
5. ５．該結合体基がβ−アラニンの残基である、請求項１記載の化合物。
6. ６．該キレート部分が、アミノポリ（カルボン酸またはカルボン酸誘導体）の残 基である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
7. ７．該キレート部分が、式ＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）〔式中、 基Ｚの各々は、基−ＣＨＲ１Ｘであるか、または基Ｚは、一緒になって基−（Ｃ ＨＲ１）２−Ａ′−（ＣＨＲ１）２−であり；Ｙは基−（ＣＨＲ１）２−Ｎ（Ｃ ＨＲ１Ｘ）２または基−ＣＨＲ１Ｘであり；各々のＸは、同一または異なってい てもよくカルボキシル基またはその誘導体または基Ｒ１であり；各々のＲ１は、 同一または異なっていてもよく水素原子、ヒドロキシアルキル基または場合によ りヒドロキシル化されたアルコキシ基である；が 但し少なくとも二つの窒素が−ＣＨＲ１Ｘ部分（式中Ｘはカルボキシル基または その誘導体である）を有する］の化合物またはその塩の残基である、請求項１〜 ６のいずれか１項に記載の化合物。
8. ８．該キレート部分が、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、及びそれらの塩から選ばれた化合 物の残基である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
9. ９．該巨大分子が、高分子炭水化物及び重合炭水化物並びに重合糖アルコール及 びそれらの誘導体から成る群から選ばれた、ヒドロキシル基含有物質である、請 求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
10. １０．該巨大分子が多糖である、請求項９記載の化合物。
11. １１．該巨大分子がデキストランまたはその誘導体である、請求項９記載の化合 物。
12. １２．該巨大分子が４０，０００〜５００，０００の重量平均分子量を有する、 請求項１１記載の化合物。
13. １３．該常磁性金属が、原子番号２１〜２９、４２、４４または５７〜７１のも のである、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
14. １４．該常磁性金属がＧｄ、ＤｙまたはＣｒである、請求項１〜１３のいずれか １項に記載の化合物。
15. １５．少なくとも一つの製薬上の担体または賦形剤と一緒に請求項１〜１４のい ずれか１項に記載の巨大分子の常磁性化合物を含む診断造影媒体。
16. １６．少なくとも極くわずかに可溶性の常磁性金属化合物を、エステル基によっ て巨大分子に結合された結合体基それ自体にアミド基によって結合されたキレー ト部分から成る巨大分子のキレート化剤（ここで該結合体基は、該アミド基及び 該エステル基の間に少なくとも２原子の炭素鎖を供給する）と一緒に、溶媒中で 混合することから成る、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の巨大分子の常磁 性化合物の製造方法。
17. １７．該方法が、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の巨大分子の常磁性化合 物を、少なくとも一つの製薬上の担体または賦形剤と一緒に混合することから成 る、請求項１５記載の診断媒体の製造方法。
18. １８．エステル基によって巨大分子に結合された結合体基それ自体にアミド基に よって結合されたキレート部分を含む巨大分子のキレート化合物であって、該結 合体基が該アミド基及び該エステル基の間に少なくとも２原子の炭素鎖を供給す るキレート化合物、またはその塩若しくは金属キレート。
19. １９．該キレート部分、該結合体基及び該巨大分子の少なくとも一つが、請求項 ２〜１２のいずれか１項に記載の通りである、請求項１８記載のキレート化合物 。
20. ２０．ヒドロキシル基含有巨大分子をアミノ酸またはその塩（ここで該アミノ酸 はそのカルボキシルとアミン基の間に少なくとも２原子の炭素鎖を有する）と反 応させること；このようにして得られた生成物をカルボキシル基または反応性カ ルボキシル誘導体含有キレート化剤と反応させること；そして、場合により、こ のようにして得られた生成物をその塩または金属キレートに変換させることから 成る、請求項１８及び１９のいずれか１項に記載のキレート化合物の製造方法。
21. ２１．キレート部位が、請求項１８及び１９のいずれか１項に記載のキレート化 合物の残基である、金属キレートと一緒に少なくとも一つの製薬上の担体または 賦形剤を含有する診断用または治療用組成物。
22. ２２．少なくとも一つの製薬上の担体または賦形剤と一緒に、場合により生理学 的に許容しうる対イオンとの塩またはキレートの形態の請求項１８及び１９のい ずれか１項に記載のキレート化合物を含有する解毒剤。
23. ２３．ヒトまたはヒト以外の動物の体に行われる像生成、解毒、または治療の方 法に使用するための診断用または治療用薬剤の製造のための、請求項１〜１４、 １８及び１９のいずれか１項に記載の巨大分子の化合物またはその塩若しくはキ レートの使用。
24. ２４．ヒトまたはヒト以外の動物の体に請求項１〜１４、１８及び１９のいずれ か１項に記載の巨大分子の金属キレートを投与すること、及びそれらの体の少な くとも一部のＸ線像、磁気共鳴像、超音波像またはシンチグラフイー像を生成さ せることを含む、像生成の方法。
25. ２５．ヒトまたはヒト以外の動物の体に行われる重金属解毒の方法であって、そ れらの体に、場合により生理学的に許容しうる対イオンとの塩またはキレートの 形態の請求項１８及び１９のいずれか１項に記載のキレート化合物を投与するこ とから成る方法。
26. ２６．ヒトまたはヒト以外の動物の体に行われる放射線治療の方法であって、そ れらの体に、請求項１８及び１９のいずれか１項に記載の放射性金属種のキレー トを投与することから成る方法。
27. ２７．実施例のいずれか一つにおいて本明細書中で前に実質的に述べられたよう な巨大分子のキレートまたはキレート化剤。
28. ２８．本明細書中で開示されたすべての新規な化合物、媒体、プロセス、方法及 び使用。