JPH03259096A - 室内塵中のアレルゲン量の測定方法 - Google Patents
室内塵中のアレルゲン量の測定方法Info
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- JPH03259096A JPH03259096A JP5832090A JP5832090A JPH03259096A JP H03259096 A JPH03259096 A JP H03259096A JP 5832090 A JP5832090 A JP 5832090A JP 5832090 A JP5832090 A JP 5832090A JP H03259096 A JPH03259096 A JP H03259096A
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
アレルギー性喘息やアレルギー性鼻炎の主たる原因物質
は室内塵であり、とくにその中に生息するダニ（Ｄｅｒ
ｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ ｆａｒｉｎａｅやＤｅｒ
ｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ ｐｕｔｅｒｏｎｙｓｓｉ
ｎｕｓ ）である事は広く知られている。本発明は、室
内塵中の蛋白分解酵素活性を測定する事により室内塵の
アレルゲン性の強さ及び室内塵中のダニの量を測定し、
室内の汚染状況を知り、環境整備の指標として役立つも
のである。
は室内塵であり、とくにその中に生息するダニ（Ｄｅｒ
ｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ ｆａｒｉｎａｅやＤｅｒ
ｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ ｐｕｔｅｒｏｎｙｓｓｉ
ｎｕｓ ）である事は広く知られている。本発明は、室
内塵中の蛋白分解酵素活性を測定する事により室内塵の
アレルゲン性の強さ及び室内塵中のダニの量を測定し、
室内の汚染状況を知り、環境整備の指標として役立つも
のである。
［従来の技術］
従来、室内塵中のダニの量はダニを物理的手段により室
内塵より分離し、光学顕微鏡を用いて数を数える方法、
化学薬品を用い室内塵を処理し、蛋白質と反応させる方
法（特開昭６０−１３５８４４＞やダニ特異抗体を用い
た免疫学的検出法（特開昭６３−１９１９６１）が知ら
れている。しかし、これらは非常に繁雑であったり、特
異性に欠けていたり、あるいは特異性が良くても非常に
高価でしかも測定方法が複雑である。
内塵より分離し、光学顕微鏡を用いて数を数える方法、
化学薬品を用い室内塵を処理し、蛋白質と反応させる方
法（特開昭６０−１３５８４４＞やダニ特異抗体を用い
た免疫学的検出法（特開昭６３−１９１９６１）が知ら
れている。しかし、これらは非常に繁雑であったり、特
異性に欠けていたり、あるいは特異性が良くても非常に
高価でしかも測定方法が複雑である。
本発明は家屋塵中の主アレルゲンの量を簡便で特異性高
く測定する方法である。
く測定する方法である。
［課題を解決するための手段］
家屋塵のアレルゲンがダニに由来すること、またダニの
アレルゲン成分には蛋白分解酵素活性が在ることに着目
し、蛋白分解酵素の発色性基質、間接発色性基質あるい
は蛍光基質を用い簡単にしかも特異性があり、さらに安
価に家屋塵中のアレルゲン量を測定することにある。
アレルゲン成分には蛋白分解酵素活性が在ることに着目
し、蛋白分解酵素の発色性基質、間接発色性基質あるい
は蛍光基質を用い簡単にしかも特異性があり、さらに安
価に家屋塵中のアレルゲン量を測定することにある。
蛋白分解酵素の基質としては例えばｔ、ブトキシカルボ
ニル−Ｌ−フェニルアラニル−セリル−Ｌ−アルギニン
−４−メチル−クマリル−７−アミド（以下Ｂｏｃ −
ｐｈｅ −ｓｅｒ −ａｒｇ −ＭＣＡ）、 ｔ−ブト
キシカルボニル−Ｌ−バリル−Ｌ−口イシル−１−リジ
ン−４−メチル−クマリル−７−アミド、（以下Ｂｏｃ
−ｖａｌ −１ｅｕ −１ｙｓ −ＭＣＡ）、 Ｎ〜
ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン−ナフチルアミド・ＨＣ
Ｉ、 Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン−ｐ−ニトロ
アニリド・ＨＣＩ、 ）シル−リジン−ナフチルエス
テル、 Ｎ−ｐ−トシル−Ｌ−アルギニン−メチルエス
テル・ＭＣＩ等が用いられるがその他の蛋白分解酵素に
対する基質でもよい。
ニル−Ｌ−フェニルアラニル−セリル−Ｌ−アルギニン
−４−メチル−クマリル−７−アミド（以下Ｂｏｃ −
ｐｈｅ −ｓｅｒ −ａｒｇ −ＭＣＡ）、 ｔ−ブト
キシカルボニル−Ｌ−バリル−Ｌ−口イシル−１−リジ
ン−４−メチル−クマリル−７−アミド、（以下Ｂｏｃ
−ｖａｌ −１ｅｕ −１ｙｓ −ＭＣＡ）、 Ｎ〜
ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン−ナフチルアミド・ＨＣ
Ｉ、 Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン−ｐ−ニトロ
アニリド・ＨＣＩ、 ）シル−リジン−ナフチルエス
テル、 Ｎ−ｐ−トシル−Ｌ−アルギニン−メチルエス
テル・ＭＣＩ等が用いられるがその他の蛋白分解酵素に
対する基質でもよい。
（発明の効果］
本発明の方法は家屋内塵中のアレルゲンの量を簡単にか
つ迅速に測定することができるので、家屋内の汚染状況
を的確に把握し、環境改善の目安として非常に有用であ
る。
つ迅速に測定することができるので、家屋内の汚染状況
を的確に把握し、環境改善の目安として非常に有用であ
る。
以下実施例により本発明の方法を具体的に説明する。
実施例１
Ｂｏｃ −ｐｈｅ −ｓｅｒ −ａｒｇ −ＭＣＡを用
いた室内塵中のアレルゲン活性の測定。
いた室内塵中のアレルゲン活性の測定。
室内塵１ｇを２０ｍ１のリン酸緩衝液で抽高し、Ｂｏｃ
−ｐｈｅ −ｓｅｒ −ａｒｇ −ＭＣＡと３７６Ｃ
３０分間反応させ、生じた蛍光強度を励起波長３８０ｎ
ｍ測定波長４６０ｎｍで蛋白分解酵素活性を測定した。
−ｐｈｅ −ｓｅｒ −ａｒｇ −ＭＣＡと３７６Ｃ
３０分間反応させ、生じた蛍光強度を励起波長３８０ｎ
ｍ測定波長４６０ｎｍで蛋白分解酵素活性を測定した。
表１
実施例２
Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリ
ド・ＨＣＩを用いた室内塵中のアレルゲン活性の測定。
ド・ＨＣＩを用いた室内塵中のアレルゲン活性の測定。
室内塵１ｇを２０ｍ１のリン酸緩衝液で抽出し、Ｔｒｉ
ｓ−ＨＣＩ緩衝液中Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン
−ｐ−ニトロアニリド−ＭＣＩと室温で１夜反応させた
後、肉眼的及び吸光度を測定した。
ｓ−ＨＣＩ緩衝液中Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン
−ｐ−ニトロアニリド−ＭＣＩと室温で１夜反応させた
後、肉眼的及び吸光度を測定した。
表２
表３
実施例３
トシル−リジン−ナフチルエステルを用いた室内塵中の
アレルゲン活性の測定。室内塵１ｇを２０ｍ１のリン酸
緩衝液で抽出し、その０．０５ｍ１とトシル−リジン−
ナフチルエステル０．１ｍｌを３７°Ｃ３０分間反応さ
せた後ファストレッドーＩＴＲ塩０．１ｍｌを加えさら
に３７°ｃ ｉｏ分間反応させ発色した色素量を肉眼的
または吸光度を測定した。
アレルゲン活性の測定。室内塵１ｇを２０ｍ１のリン酸
緩衝液で抽出し、その０．０５ｍ１とトシル−リジン−
ナフチルエステル０．１ｍｌを３７°Ｃ３０分間反応さ
せた後ファストレッドーＩＴＲ塩０．１ｍｌを加えさら
に３７°ｃ ｉｏ分間反応させ発色した色素量を肉眼的
または吸光度を測定した。
実施例４
Ｂｏａ −ｖａｌ −１ｅｕ −１ｙｓ −ＭＣＡを用
いた室内塵中のアレルゲン活性の測定。
いた室内塵中のアレルゲン活性の測定。
室内塵１ｇを２０ｍ１のリン酸緩衝液で抽出し、その０
．１ｍｌとＢｏａ −ｖａｌ −１ｅｕ −１ｙｓ −
ＭＣＡ ０．８ｍｌとを３７°Ｃ３０分間反応させた後
、励起波長３８０ｎｍ、測定波長４６０ｎｍで測定した
。
．１ｍｌとＢｏａ −ｖａｌ −１ｅｕ −１ｙｓ −
ＭＣＡ ０．８ｍｌとを３７°Ｃ３０分間反応させた後
、励起波長３８０ｎｍ、測定波長４６０ｎｍで測定した
。
Claims (2)
- （１）室内塵中のアレルゲン量を蛋白分解酵素活性を指
標として測定する方法。 - （２）室内塵中の蛋白分解酵素により合成基質を加水分
解させ、発色した色の強度または蛍光強度を肉眼的また
は機器的測定することより成る特許請求の範囲第１項の
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5832090A JPH03259096A (ja) | 1990-03-09 | 1990-03-09 | 室内塵中のアレルゲン量の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5832090A JPH03259096A (ja) | 1990-03-09 | 1990-03-09 | 室内塵中のアレルゲン量の測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03259096A true JPH03259096A (ja) | 1991-11-19 |
Family
ID=13080985
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5832090A Pending JPH03259096A (ja) | 1990-03-09 | 1990-03-09 | 室内塵中のアレルゲン量の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH03259096A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2351560A (en) * | 1999-06-11 | 2001-01-03 | Ramin Pirzad | Determining allergen activity in dusts |
| WO2005059166A1 (ja) * | 2003-12-17 | 2005-06-30 | Japan Science And Technology Agency | 環境中のアレルゲンの測定方法及び装置 |
| JP2006166830A (ja) * | 2004-12-17 | 2006-06-29 | Japan Science & Technology Agency | プロテアーゼ活性の測定方法及びそのための試薬 |
| WO2006135071A1 (ja) * | 2005-06-17 | 2006-12-21 | Japan Science And Technology Agency | 環境中のアレルゲンの測定方法及び簡易アレルゲン定量キット |
-
1990
- 1990-03-09 JP JP5832090A patent/JPH03259096A/ja active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2351560A (en) * | 1999-06-11 | 2001-01-03 | Ramin Pirzad | Determining allergen activity in dusts |
| US7195922B1 (en) | 1999-06-11 | 2007-03-27 | City Technology Limited | Allergen detection |
| US7807103B2 (en) | 1999-06-11 | 2010-10-05 | Life Safety Distribution Ag | Allergen detection apparatus |
| WO2005059166A1 (ja) * | 2003-12-17 | 2005-06-30 | Japan Science And Technology Agency | 環境中のアレルゲンの測定方法及び装置 |
| JP2006166830A (ja) * | 2004-12-17 | 2006-06-29 | Japan Science & Technology Agency | プロテアーゼ活性の測定方法及びそのための試薬 |
| JP4690027B2 (ja) * | 2004-12-17 | 2011-06-01 | 独立行政法人科学技術振興機構 | プロテアーゼ活性の測定方法及びそのための試薬 |
| WO2006135071A1 (ja) * | 2005-06-17 | 2006-12-21 | Japan Science And Technology Agency | 環境中のアレルゲンの測定方法及び簡易アレルゲン定量キット |
| JP2006345801A (ja) * | 2005-06-17 | 2006-12-28 | Japan Science & Technology Agency | 環境中のアレルゲンの測定方法及び簡易アレルゲン定量キット |
| US8012708B2 (en) | 2005-06-17 | 2011-09-06 | Japan Science And Technology Agency | Method for determination of allergen in environment and kit for simple quantification of allergen |
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