JPH0322927A - 新規細胞質を持つイネ及びその作出方法 - Google Patents
新規細胞質を持つイネ及びその作出方法Info
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- JPH0322927A JPH0322927A JP1154511A JP15451189A JPH0322927A JP H0322927 A JPH0322927 A JP H0322927A JP 1154511 A JP1154511 A JP 1154511A JP 15451189 A JP15451189 A JP 15451189A JP H0322927 A JPH0322927 A JP H0322927A
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、新規細胞質を持つイネ及びその作出方法に関
する． ［従来の技術］ 植物育種の為に異種の細胞質を利用するための手段とし
２ては、従来、戻し交配の技術が利用されていた．この
技術により細胞質を置換した核置換体を得ることが可能
であった． 一方で５細胞と細胞を融合させる細胞融合の技術が開発
され、多数の植物で体細胞雑種の作出が可能となってい
る．この技術を用いることにより、従来の育種法では不
可能であった両親の細胞質を共存させることが可能とな
った。
する． ［従来の技術］ 植物育種の為に異種の細胞質を利用するための手段とし
２ては、従来、戻し交配の技術が利用されていた．この
技術により細胞質を置換した核置換体を得ることが可能
であった． 一方で５細胞と細胞を融合させる細胞融合の技術が開発
され、多数の植物で体細胞雑種の作出が可能となってい
る．この技術を用いることにより、従来の育種法では不
可能であった両親の細胞質を共存させることが可能とな
った。
近年、イネにおいてら細胞融合した雑種細胞からの体細
胞雑種の作出が可能となった（ Ｔｏｒｉｙａ＋ｍａｅ
ｔ ａｔ．． １９８８． Ｔｈｅｏ． Ａｐｐｌ．
Ｇｅｎｅｔ．． ７６：６６５ｆ＋６８： Ｙａｎ
ｇ ｅｔ ａｌ．． １９８９． ７７：３０５−３１
０； Ａｋａｇｉ ｅｔａｌ．． Ｍｏｌｅ． Ｇｅｎ
ｅ Ｇｅｎｅｔ．． ２１５：５０１−５０６１．とこ
ろで、興味深いことに、細胞融合によって異種のミトコ
ンドリアを同じ細胞質に共存させた場合、タバコやニン
ジンなどでは異種のミトコンドリアゲノム間で組み変え
が起こり、新たな遺伝的組み合わせを持った（＝雑種）
ミトコンドリアが形成されたことが報告されている． しかしながら、細胞融合の技術によって形成される蛯種
ミトコンドリアが植物体にとってどの様な意味（機能）
を持つかは全く不明である．イネについては雑種ミトコ
ンドリアの形成についてすら明確には示されておらず，
ましてその機能については示唆すらされていない． なお、以下、本明細書において細胞質に関して明らかに
雑種であるものについてハイブリッドの語を用いる． 一般に、ハイブリッドライス（Ｆｌｌｉ子）は、収量が
多く劣悪な環境に対する耐性が強いなどの優れた性質を
有するイネであることがよく知られている．この種子を
商業的な規模で生産する場合には、一方の親（＝メス親
）の花粉を全く形成させなくする必要がある．このよう
な性質を効率よく発揮する遺伝的な要因として細胞質雄
性不稔の因子が存在することが知られている． この因子はインド型イネの細胞質に存在し、この細胞質
と日本型イネの核とが組み合わさった場合に、細胞質雄
性不稔の形質が発現する．しかしながらこの細胞質と核
との組み合わせはそれ以外の形質に関しては必ずしち好
ましいちのではなく、開花の遅れや耐寒性の劣化等をも
たらすことがある． これらの形質はインド型イネの細胞質と日本型イネの核
との組み合わせの不親和性によって起こると理解されて
いる．より性能の高いハイブリッドライスを合成するた
めには、これらの好ましくない不親和性は発揮させず細
胞質雄性不稔性質だけが発現する様な性質を持った細胞
質が必要とされる． ［発明が解決しようとする問題点１ 従って、本発明の目的は、イネの育種及びハーｒブリッ
ドライス生産のための細胞質雄性不稔親として好適なイ
ネ及びその作出方法を提供することである． ［問題を解決するための千段］ 本発明者らは、上記問題点を解決するために鋭意研究の
結果、細胞質融合の手法を用いてインディ力型とジャポ
ニカ型の双方の性質を合わせ持つ全く新しい細胞質、す
なわちＩ１種細胞質を創製し、それらの中からジャポニ
カ型イネに対して細胞質雄性不稔となり，かつその他の
形質に関しては親和性の高い雑種細胞質を選択してこの
発明を完成した． すなわち、本発明は，インディ力型イネとジャポニカ型
イネのミトコンドリアから構成される新規なｉ１種ミト
コンドリアを有し、かつインディカ型細胞質に対し稔性
回復能力を持たないイネの花粉を交配した場合に、細胞
質雄性不稔の性質を示すことを特徴とする新規細胞質を
有するイネを提供する． さらにまた、本発明は、インディ力型イネとジャポニカ
型イネのミトコンドリアから構成される新規なｆｌ種ミ
トコンドリアを有し、かつインディ力型細胞質に対し稔
性回復能力を持たないイネの花粉を交配した場合に、細
胞質雄性不稔の性質を示すことを特徴とする新規細胞質
を有するイネを提供する． ［発明の具体的な説明１ 以下，本発明を詳細に説明する． 本発明は，ジャボニ力型イネの核に対して親和性が高く
、かつ細胞質雄性不稔の形質を示す新規細胞質を有する
イネを作出するための手段として，細胞質融合を行ない
、インディカ型イネとジャポニカ型イネの雑種の細胞質
をまず創製し、そのような細胞質を有する細胞から植物
体を再生させ、その中から雑種ミトコンドリアをもつ細
胞質雄性不稔イネでかつ育成の安定したちのを選抜する
ものである． イネのｆｉ種細胞質を持つサイブリッドの作出は，藤村
らの方法（Ｆｕｊｕｓｕｒａ ｅｔ ａｌ．． １９８
５．Ｐｌａｎｔ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｌｅ
ｔｔｅｒｓ． ２（２１：７４−７５１及び赤木らの方
法（Ａｋａｇｉ ｅｔ ａｌ．． １９８９． Ｍｏｌ
ｅＧｅｎｅ Ｇｅｎｅｔ．． ２１５：５０１−５０６
１に従い、行なうことができる．すなわち、インディ力
型及びジャポニカ型の細胞質を持つイネの胚盤から誘導
したカルスから！Ａ層培養細胞系を確立し、この細胞か
らブロトブラストを得ることができる．これら二種類の
プロトプラストをそれぞれＸ綿，ヨードアセトアミド（
ＩＯＡ）を用いて不活性化させた後，Ｔ４気刺激を与え
て融合させ雑種細胞を得ることができる．この雑種細胞
を増殖させ分化培地に移植することによって細胞質雑種
植物（サイブリッド）を再生させることができる． 細胞融合に用いるイネとしては、ミトコンドリアＤＮＡ
の分析から細胞質雄性不稔因子を有すると考えられるイ
ネ品種インディカ型（例えば−Ｔ−Ｃ１１Ａ５及び−Ｔ
−ＣＩＪＡ９等）及びジャポニカ型（例えばササ二シキ
及び農林８号等）を用いる． ＭＴ−（ＪＩＡ５品種は
Ｃｈｉｎｓｕｒａ Ｂｏｒｏ ＩＩ由来の細胞質雄性不
稔因ｒを有すると考えられ． ＭＴ−（ＪＩＡ９品種は
ディエン型の細胞質雄性不稔因子を有すると考えられる
． 次いで、得られたサイブリッドを温室内で育成させ、不
稔の固体を選び出し，そのミトコンドリアが雑種になっ
ているか否かを調べる．これは、例メ，ば得られた不稔
の植物体の幼穂から常法によりカルスを形成させ，カル
スを横成する細胞のミトコンドリアのＤＮＡを分析する
ことにより行なうことができる．ミトコンドリアが雑種
になっているか否かは、例えば、常法によりミトコンド
リアＤＮＡを抽出し、数種類の制限酵素、例えばＩＩ
ｉ ｎｄ ＩＩＩ、ＰｓｔＩ． Ｂｇｌ ＩＩ、Ｅｃｏ
Ｒｌ等でミトコンドリアＤＮＡを消化し、その切断パ
ターンを両親のミトコンドリアＤＮＡ切断パターンと比
較することにより行なうことができる． 次いで、このようにして選び出した、雄性不稔でかつ，
ミトコンドリア雑種の固体にジャポニカ型イネの正常な
花粉を交配し種子を得る．これらの種子から植物体を育
成させ、その育成状態の調査を行ない通常の核置換体に
比べ育成の旺盛なものを選択する． 以上のようにしてジャボニ力型イネの核に対して親和性
が高くかつ細胞質雄性不稔である新規細）ｔａ質（イン
デｆ力型とジャポニカ型細胞質の雑種細胞質）を作出す
ることができる． ［実施例］ 以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。
胞雑種の作出が可能となった（ Ｔｏｒｉｙａ＋ｍａｅ
ｔ ａｔ．． １９８８． Ｔｈｅｏ． Ａｐｐｌ．
Ｇｅｎｅｔ．． ７６：６６５ｆ＋６８： Ｙａｎ
ｇ ｅｔ ａｌ．． １９８９． ７７：３０５−３１
０； Ａｋａｇｉ ｅｔａｌ．． Ｍｏｌｅ． Ｇｅｎ
ｅ Ｇｅｎｅｔ．． ２１５：５０１−５０６１．とこ
ろで、興味深いことに、細胞融合によって異種のミトコ
ンドリアを同じ細胞質に共存させた場合、タバコやニン
ジンなどでは異種のミトコンドリアゲノム間で組み変え
が起こり、新たな遺伝的組み合わせを持った（＝雑種）
ミトコンドリアが形成されたことが報告されている． しかしながら、細胞融合の技術によって形成される蛯種
ミトコンドリアが植物体にとってどの様な意味（機能）
を持つかは全く不明である．イネについては雑種ミトコ
ンドリアの形成についてすら明確には示されておらず，
ましてその機能については示唆すらされていない． なお、以下、本明細書において細胞質に関して明らかに
雑種であるものについてハイブリッドの語を用いる． 一般に、ハイブリッドライス（Ｆｌｌｉ子）は、収量が
多く劣悪な環境に対する耐性が強いなどの優れた性質を
有するイネであることがよく知られている．この種子を
商業的な規模で生産する場合には、一方の親（＝メス親
）の花粉を全く形成させなくする必要がある．このよう
な性質を効率よく発揮する遺伝的な要因として細胞質雄
性不稔の因子が存在することが知られている． この因子はインド型イネの細胞質に存在し、この細胞質
と日本型イネの核とが組み合わさった場合に、細胞質雄
性不稔の形質が発現する．しかしながらこの細胞質と核
との組み合わせはそれ以外の形質に関しては必ずしち好
ましいちのではなく、開花の遅れや耐寒性の劣化等をも
たらすことがある． これらの形質はインド型イネの細胞質と日本型イネの核
との組み合わせの不親和性によって起こると理解されて
いる．より性能の高いハイブリッドライスを合成するた
めには、これらの好ましくない不親和性は発揮させず細
胞質雄性不稔性質だけが発現する様な性質を持った細胞
質が必要とされる． ［発明が解決しようとする問題点１ 従って、本発明の目的は、イネの育種及びハーｒブリッ
ドライス生産のための細胞質雄性不稔親として好適なイ
ネ及びその作出方法を提供することである． ［問題を解決するための千段］ 本発明者らは、上記問題点を解決するために鋭意研究の
結果、細胞質融合の手法を用いてインディ力型とジャポ
ニカ型の双方の性質を合わせ持つ全く新しい細胞質、す
なわちＩ１種細胞質を創製し、それらの中からジャポニ
カ型イネに対して細胞質雄性不稔となり，かつその他の
形質に関しては親和性の高い雑種細胞質を選択してこの
発明を完成した． すなわち、本発明は，インディ力型イネとジャポニカ型
イネのミトコンドリアから構成される新規なｉ１種ミト
コンドリアを有し、かつインディカ型細胞質に対し稔性
回復能力を持たないイネの花粉を交配した場合に、細胞
質雄性不稔の性質を示すことを特徴とする新規細胞質を
有するイネを提供する． さらにまた、本発明は、インディ力型イネとジャポニカ
型イネのミトコンドリアから構成される新規なｆｌ種ミ
トコンドリアを有し、かつインディ力型細胞質に対し稔
性回復能力を持たないイネの花粉を交配した場合に、細
胞質雄性不稔の性質を示すことを特徴とする新規細胞質
を有するイネを提供する． ［発明の具体的な説明１ 以下，本発明を詳細に説明する． 本発明は，ジャボニ力型イネの核に対して親和性が高く
、かつ細胞質雄性不稔の形質を示す新規細胞質を有する
イネを作出するための手段として，細胞質融合を行ない
、インディカ型イネとジャポニカ型イネの雑種の細胞質
をまず創製し、そのような細胞質を有する細胞から植物
体を再生させ、その中から雑種ミトコンドリアをもつ細
胞質雄性不稔イネでかつ育成の安定したちのを選抜する
ものである． イネのｆｉ種細胞質を持つサイブリッドの作出は，藤村
らの方法（Ｆｕｊｕｓｕｒａ ｅｔ ａｌ．． １９８
５．Ｐｌａｎｔ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｌｅ
ｔｔｅｒｓ． ２（２１：７４−７５１及び赤木らの方
法（Ａｋａｇｉ ｅｔ ａｌ．． １９８９． Ｍｏｌ
ｅＧｅｎｅ Ｇｅｎｅｔ．． ２１５：５０１−５０６
１に従い、行なうことができる．すなわち、インディ力
型及びジャポニカ型の細胞質を持つイネの胚盤から誘導
したカルスから！Ａ層培養細胞系を確立し、この細胞か
らブロトブラストを得ることができる．これら二種類の
プロトプラストをそれぞれＸ綿，ヨードアセトアミド（
ＩＯＡ）を用いて不活性化させた後，Ｔ４気刺激を与え
て融合させ雑種細胞を得ることができる．この雑種細胞
を増殖させ分化培地に移植することによって細胞質雑種
植物（サイブリッド）を再生させることができる． 細胞融合に用いるイネとしては、ミトコンドリアＤＮＡ
の分析から細胞質雄性不稔因子を有すると考えられるイ
ネ品種インディカ型（例えば−Ｔ−Ｃ１１Ａ５及び−Ｔ
−ＣＩＪＡ９等）及びジャポニカ型（例えばササ二シキ
及び農林８号等）を用いる． ＭＴ−（ＪＩＡ５品種は
Ｃｈｉｎｓｕｒａ Ｂｏｒｏ ＩＩ由来の細胞質雄性不
稔因ｒを有すると考えられ． ＭＴ−（ＪＩＡ９品種は
ディエン型の細胞質雄性不稔因子を有すると考えられる
． 次いで、得られたサイブリッドを温室内で育成させ、不
稔の固体を選び出し，そのミトコンドリアが雑種になっ
ているか否かを調べる．これは、例メ，ば得られた不稔
の植物体の幼穂から常法によりカルスを形成させ，カル
スを横成する細胞のミトコンドリアのＤＮＡを分析する
ことにより行なうことができる．ミトコンドリアが雑種
になっているか否かは、例えば、常法によりミトコンド
リアＤＮＡを抽出し、数種類の制限酵素、例えばＩＩ
ｉ ｎｄ ＩＩＩ、ＰｓｔＩ． Ｂｇｌ ＩＩ、Ｅｃｏ
Ｒｌ等でミトコンドリアＤＮＡを消化し、その切断パ
ターンを両親のミトコンドリアＤＮＡ切断パターンと比
較することにより行なうことができる． 次いで、このようにして選び出した、雄性不稔でかつ，
ミトコンドリア雑種の固体にジャポニカ型イネの正常な
花粉を交配し種子を得る．これらの種子から植物体を育
成させ、その育成状態の調査を行ない通常の核置換体に
比べ育成の旺盛なものを選択する． 以上のようにしてジャボニ力型イネの核に対して親和性
が高くかつ細胞質雄性不稔である新規細）ｔａ質（イン
デｆ力型とジャポニカ型細胞質の雑種細胞質）を作出す
ることができる． ［実施例］ 以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。
大社Ｕ生±
インディ力型イネ゛ＭＴ−ＣＭＡ５” とジャポニカ型
イネ゛ササニシキ゜の種子を材料として、藤村らの方法
（」二掲）に従って悲濁培養細胞株を確立し、これらの
細胞からブロトブラストを単離した．次に、赤木らの方
法（上掲）に従いＸ綿（ｌ２５κｒａｄ）を明射した’
ＭＴ−ＣＪＩＡ５゜のブロトプラストとＩＯＡ（３０ｍ
ｌ４１で処理した゛ササニシキ゜のブロトブラストを電
気的刺激により融合させサイブリッドを作出した．得ら
れた雑種細胞を培養し形成したコロニーを植物再生培地
に移植し２８０固体の植物体を再生させた． 得られた植物体を馴化させ温室内で成育させ、常法によ
り稔性を調査し、細胞質雄性不稔であった植物体を選抜
した．更に選抜した植物体の幼穂から常法によりカルス
を誘導し、そのミトコンドリアＤＮＡの抽出、分析を行
ないミトコンドリアがｆｌ種である植物体１２固体を選
抜した．これらに正常な゛ササニシキ゜の花扮を戻し交
配し種子を得た．この種子から植物体を育成させた．対
ｙ３として゜ＭＴ−ＣＭ＾５゜に゛ササニシキ゜を連続
戻し交配して得られた核置換体を育成させた．これらの
植物体の育成調査を行ない合成植物の中で対唄に比べ育
成が旺盛であったｌ株’ＭＴ−１’を選抜した． 上記細胞融合によって得られた植物体’ＭＴ−１’のミ
トコンドリアＤＮＡを三種類の制限酵素ｆｔｌｉｎｄｌ
ｌｆ、Ｐｓｔｌ．ＢｇｌｌＩ． ＥｃｏＲＩｌ を用い
て分析し，その制限酵素パターンを図１に、さらにそれ
らの特徴の模式図を図２に示した．比較としてＭＴ−Ｃ
ＭＡ５“と゜ササニシキ゜のミトコンドリアＤＮＡを用
いた． ＭＴ−Ｆは両親である゜＆４Ｔ−ＣＩ４Ａ５゜と゛ササ
ニシキ゛のそれぞれの特異的なバンドを合わせ持ってお
り，これらの雑種であることが分かった。さらに、これ
らの両親に見られるバンドのうち少なくとちＰｓｔｌで
４本． ｔｌｉｎｄｌｌｌで３本、Ｂｇｌｌｌで２本消
失していた．また、両親には見られないバンドがＢｇｌ
ｌ＋で１本認められた．以上の結果からＭ’ｒ−Ｆは
゛ＭＴ−ＣＭＡ５’＋４：’ サ＋ｊ：シキ゛ノミトコ
ンドリアから構成される新たな雑種ミトコンドリア持つ
ことが証明される． 亙且盟ヱ インディ力型イネ゜ＭＴ−ＣＭＡ５ ’とジャポニカ型
イネ“農林８号゛の種子を材料として、実施例ｌと同様
にして５６０固体の植物体を再生した。これらの植物体
から実施例ｌと同様にして，ミトコンドリアが雑種であ
る植物体２５固体を選抜した．これらに正常な゜農林８
号゜の花扮を戻し交配し種子を得た．この種子から植物
体を育成させた．対昭として１Ｔ−ＣＭＡ５゜に゜農林
８号゛を連続戻し交配して得られた核置換体を育成させ
た．これらの植物体の育成調査を行ない合成植物の中で
対照に比べ育成が肛盛であった１株１Ｔ−２’を選抜し
た． 上記細胞融合によって得られた植物体１Ｔ−２゜のミト
コンドリアＤＮＡを三ｆＩ類の制限酵素（ｌｌｉｎｄｌ
ｌｌ．Ｐｓｔｒ． Ｂｇｌｌｌ． ＥｃｏＲＩｌ を用
いて分析し、その制限酵素パターンを図ｌに、さらにそ
れらの特徴の模式図を図２に示した．比較としてＭＴ−
ＣＭＡ５’ と゜農林８号゛のミトコンドリアＤＮＡを
用いた． １丁−２゜は両親である’ＭＴ−ＣＭＡ５’と゜農林８
号のそれぞれの特異的なバンドを合わせ持っておりこれ
らのＨ種であることが分かった。さらに，これらの両親
に見られるバンドのうち少なくとちＰｓｔＩで３本．
Ｈｉｎｄｌｌｌで３本消失していた。以−上二の結果か
ら１丁−２“は’ＭＴ−ＣＭＡ５“と゛農林８号゛のミ
トコンドリアから横成される新たな雑種ミトコンドリア
持つことが証明された． 笈五五ユ インディ力型イネ’ＭＴ−Ｃ＆ｌＡ９゜とジャポニカ梨
イネ“ササニシキ゜の種子を材料として、実施例ｌと同
様にして１７０固体の植物体を再生した．これらの植物
体から実施例ｌと同様にして，ミトコンドリアが雑種で
ある植物体６固体を選抜した．これらに正常な゛ササニ
シキ゜の花粉を戻し交配し種子を得た。この種子から植
物体を育成させた．対明として’ＭＴ−ＣＭＡ９’に゜
ササニシキ“を連続戻し交配して得られたＩｔｉ置換体
を育成させた．これらの植物体の育成調査を行ない合成
植物の中で対昭に比べ育成が旺盛であったｌ株’ＭＴ−
３’とＭＴ−４“を選抜した． ｌ二記細胞融合によって得られた植物体’ＭＴ−２’と
ＭＴ−４゜のミトコンドリアＤＮＡを三種類の制限酵ｔ
Ａ ｔＨｉｎｄｌｌｌ． Ｐａｓｔｌ． Ｂｇｌｌｌ．
ＥｃｏＲＩｌを用いて分析し、その制限酵素パターン
を図１に、さらにそれらの特徴の模式図を図２に示した
．比較としてＭＴ−Ｃ１４Ａ９’ と゜ササニシキ゜の
ミトコン卜リアＤＮ＾を用いた． ＭＴ−３゜は両親である’ＭＴ−ＣＭＡ９’ と゛ササ
ニシキ゜のそれぞれの特異的なバンドを合わせ持つてお
りこれらの雑種であることが分かった．さらに，これら
の両親に見られるバンドのうち少なくと（，Ｐｓｔｌで
３本、ｌｌｉｎｄｌｌｌで３本、ＢａｌＩＩで１本消失
していた．また，両親には見られないバンドがＥｃｏＲ
Ｉで１木、Ｈｉｎｄｌｌｌで１本、Ｂａｌｌ＋で１本認
められた．以上の結果から゜ＭＴ−３’は “１４Ｔ−
Ｃ１４Ａ９ ’と゛ササニシキ゛のミトコンドリアから
構成される新たな雑種ミトコンドリア持つことが証明さ
れた．また、１Ｔ−４”も両親である“ＭＴ−ＣＭＡ９
゜と゜ササニシキ“のそれぞれの特異的なバンドを合わ
せ持っておりこれらの雑種であることが分かった．さら
に、これらの両親に見られるバンドのうち少なくともＰ
ｓｔｌで４本、｝ｌｉｎｄｌＩＩで３本消失していた．
以上の結果から１Ｔ−４’は ’ＭＴ−ＣＭＡ９ ’と
゜サザニシキ゜のミトコンドリアから構成される新たな
ａ種ミトコンドリア持つことが証明された．［発明の効
果］ 本発明により、インディ力型とジャポニカ型の双方の性
質を持ちあわせ、かつジャポノカ型イネに対して細胞質
雄性不稔であるがその他の形質に対しては親和性の高い
雑種細胞質を有するイネが提供された．これにより細胞
質を置換したことによってｉｔしる生育力の低下などの
悪影響を引き起こすことなく細胞質雄性不稔化をするこ
とが可能となった．また、本発明のイネはイネの育種な
らびにハイブリッドライス生産のための細胞質雄性不稔
親を創造するために利用することができる．４ 図の簡
単な説明 図ｌは、細胞融合に用いた’ＭＴ−ＣＭ＾５゜、゜ササ
ニシキ゜および細胞融合により得られた１Ｔ−１’、Ｍ
Ｔ−２′． ’ＭＴ〜３”、’ＭＴ−４“のミトコン
ドリアＤＮＡの制限酵素Ｈｉｎｄｌｌｌ． Ｐｓｔｌ．
Ｂｇｌｌｌ． ＥｃｏＲＩによる制限酵素切断パター
ンを示す図， 図２ないし図５は、細胞融合に用いたｒ ＭＴ−ＣＭ＾
５」、「ササニシキ」、ｒＭＴ−ＣＭＡ９ Ｊ及び「農
林８号ｊ並びに細胞融合により得られた１Ｔ−１’、Ｍ
Ｔ−２”． ’ＭＴ−３“． １Ｔ−４’のミトコ
ンドリアＤＮＡの、それぞれ制限酵素ＰｓｔＩ、Ｈｉｎ
ｄＩＩＩ． ＥｃｏＲＩ．Ｂｇｌｌ１、による制限酵素
切断パターンの特徴を模式化した図である．
イネ゛ササニシキ゜の種子を材料として、藤村らの方法
（」二掲）に従って悲濁培養細胞株を確立し、これらの
細胞からブロトブラストを単離した．次に、赤木らの方
法（上掲）に従いＸ綿（ｌ２５κｒａｄ）を明射した’
ＭＴ−ＣＪＩＡ５゜のブロトプラストとＩＯＡ（３０ｍ
ｌ４１で処理した゛ササニシキ゜のブロトブラストを電
気的刺激により融合させサイブリッドを作出した．得ら
れた雑種細胞を培養し形成したコロニーを植物再生培地
に移植し２８０固体の植物体を再生させた． 得られた植物体を馴化させ温室内で成育させ、常法によ
り稔性を調査し、細胞質雄性不稔であった植物体を選抜
した．更に選抜した植物体の幼穂から常法によりカルス
を誘導し、そのミトコンドリアＤＮＡの抽出、分析を行
ないミトコンドリアがｆｌ種である植物体１２固体を選
抜した．これらに正常な゛ササニシキ゜の花扮を戻し交
配し種子を得た．この種子から植物体を育成させた．対
ｙ３として゜ＭＴ−ＣＭ＾５゜に゛ササニシキ゜を連続
戻し交配して得られた核置換体を育成させた．これらの
植物体の育成調査を行ない合成植物の中で対唄に比べ育
成が旺盛であったｌ株’ＭＴ−１’を選抜した． 上記細胞融合によって得られた植物体’ＭＴ−１’のミ
トコンドリアＤＮＡを三種類の制限酵素ｆｔｌｉｎｄｌ
ｌｆ、Ｐｓｔｌ．ＢｇｌｌＩ． ＥｃｏＲＩｌ を用い
て分析し，その制限酵素パターンを図１に、さらにそれ
らの特徴の模式図を図２に示した．比較としてＭＴ−Ｃ
ＭＡ５“と゜ササニシキ゜のミトコンドリアＤＮＡを用
いた． ＭＴ−Ｆは両親である゜＆４Ｔ−ＣＩ４Ａ５゜と゛ササ
ニシキ゛のそれぞれの特異的なバンドを合わせ持ってお
り，これらの雑種であることが分かった。さらに、これ
らの両親に見られるバンドのうち少なくとちＰｓｔｌで
４本． ｔｌｉｎｄｌｌｌで３本、Ｂｇｌｌｌで２本消
失していた．また、両親には見られないバンドがＢｇｌ
ｌ＋で１本認められた．以上の結果からＭ’ｒ−Ｆは
゛ＭＴ−ＣＭＡ５’＋４：’ サ＋ｊ：シキ゛ノミトコ
ンドリアから構成される新たな雑種ミトコンドリア持つ
ことが証明される． 亙且盟ヱ インディ力型イネ゜ＭＴ−ＣＭＡ５ ’とジャポニカ型
イネ“農林８号゛の種子を材料として、実施例ｌと同様
にして５６０固体の植物体を再生した。これらの植物体
から実施例ｌと同様にして，ミトコンドリアが雑種であ
る植物体２５固体を選抜した．これらに正常な゜農林８
号゜の花扮を戻し交配し種子を得た．この種子から植物
体を育成させた．対昭として１Ｔ−ＣＭＡ５゜に゜農林
８号゛を連続戻し交配して得られた核置換体を育成させ
た．これらの植物体の育成調査を行ない合成植物の中で
対照に比べ育成が肛盛であった１株１Ｔ−２’を選抜し
た． 上記細胞融合によって得られた植物体１Ｔ−２゜のミト
コンドリアＤＮＡを三ｆＩ類の制限酵素（ｌｌｉｎｄｌ
ｌｌ．Ｐｓｔｒ． Ｂｇｌｌｌ． ＥｃｏＲＩｌ を用
いて分析し、その制限酵素パターンを図ｌに、さらにそ
れらの特徴の模式図を図２に示した．比較としてＭＴ−
ＣＭＡ５’ と゜農林８号゛のミトコンドリアＤＮＡを
用いた． １丁−２゜は両親である’ＭＴ−ＣＭＡ５’と゜農林８
号のそれぞれの特異的なバンドを合わせ持っておりこれ
らのＨ種であることが分かった。さらに，これらの両親
に見られるバンドのうち少なくとちＰｓｔＩで３本．
Ｈｉｎｄｌｌｌで３本消失していた。以−上二の結果か
ら１丁−２“は’ＭＴ−ＣＭＡ５“と゛農林８号゛のミ
トコンドリアから横成される新たな雑種ミトコンドリア
持つことが証明された． 笈五五ユ インディ力型イネ’ＭＴ−Ｃ＆ｌＡ９゜とジャポニカ梨
イネ“ササニシキ゜の種子を材料として、実施例ｌと同
様にして１７０固体の植物体を再生した．これらの植物
体から実施例ｌと同様にして，ミトコンドリアが雑種で
ある植物体６固体を選抜した．これらに正常な゛ササニ
シキ゜の花粉を戻し交配し種子を得た。この種子から植
物体を育成させた．対明として’ＭＴ−ＣＭＡ９’に゜
ササニシキ“を連続戻し交配して得られたＩｔｉ置換体
を育成させた．これらの植物体の育成調査を行ない合成
植物の中で対昭に比べ育成が旺盛であったｌ株’ＭＴ−
３’とＭＴ−４“を選抜した． ｌ二記細胞融合によって得られた植物体’ＭＴ−２’と
ＭＴ−４゜のミトコンドリアＤＮＡを三種類の制限酵ｔ
Ａ ｔＨｉｎｄｌｌｌ． Ｐａｓｔｌ． Ｂｇｌｌｌ．
ＥｃｏＲＩｌを用いて分析し、その制限酵素パターン
を図１に、さらにそれらの特徴の模式図を図２に示した
．比較としてＭＴ−Ｃ１４Ａ９’ と゜ササニシキ゜の
ミトコン卜リアＤＮ＾を用いた． ＭＴ−３゜は両親である’ＭＴ−ＣＭＡ９’ と゛ササ
ニシキ゜のそれぞれの特異的なバンドを合わせ持つてお
りこれらの雑種であることが分かった．さらに，これら
の両親に見られるバンドのうち少なくと（，Ｐｓｔｌで
３本、ｌｌｉｎｄｌｌｌで３本、ＢａｌＩＩで１本消失
していた．また，両親には見られないバンドがＥｃｏＲ
Ｉで１木、Ｈｉｎｄｌｌｌで１本、Ｂａｌｌ＋で１本認
められた．以上の結果から゜ＭＴ−３’は “１４Ｔ−
Ｃ１４Ａ９ ’と゛ササニシキ゛のミトコンドリアから
構成される新たな雑種ミトコンドリア持つことが証明さ
れた．また、１Ｔ−４”も両親である“ＭＴ−ＣＭＡ９
゜と゜ササニシキ“のそれぞれの特異的なバンドを合わ
せ持っておりこれらの雑種であることが分かった．さら
に、これらの両親に見られるバンドのうち少なくともＰ
ｓｔｌで４本、｝ｌｉｎｄｌＩＩで３本消失していた．
以上の結果から１Ｔ−４’は ’ＭＴ−ＣＭＡ９ ’と
゜サザニシキ゜のミトコンドリアから構成される新たな
ａ種ミトコンドリア持つことが証明された．［発明の効
果］ 本発明により、インディ力型とジャポニカ型の双方の性
質を持ちあわせ、かつジャポノカ型イネに対して細胞質
雄性不稔であるがその他の形質に対しては親和性の高い
雑種細胞質を有するイネが提供された．これにより細胞
質を置換したことによってｉｔしる生育力の低下などの
悪影響を引き起こすことなく細胞質雄性不稔化をするこ
とが可能となった．また、本発明のイネはイネの育種な
らびにハイブリッドライス生産のための細胞質雄性不稔
親を創造するために利用することができる．４ 図の簡
単な説明 図ｌは、細胞融合に用いた’ＭＴ−ＣＭ＾５゜、゜ササ
ニシキ゜および細胞融合により得られた１Ｔ−１’、Ｍ
Ｔ−２′． ’ＭＴ〜３”、’ＭＴ−４“のミトコン
ドリアＤＮＡの制限酵素Ｈｉｎｄｌｌｌ． Ｐｓｔｌ．
Ｂｇｌｌｌ． ＥｃｏＲＩによる制限酵素切断パター
ンを示す図， 図２ないし図５は、細胞融合に用いたｒ ＭＴ−ＣＭ＾
５」、「ササニシキ」、ｒＭＴ−ＣＭＡ９ Ｊ及び「農
林８号ｊ並びに細胞融合により得られた１Ｔ−１’、Ｍ
Ｔ−２”． ’ＭＴ−３“． １Ｔ−４’のミトコ
ンドリアＤＮＡの、それぞれ制限酵素ＰｓｔＩ、Ｈｉｎ
ｄＩＩＩ． ＥｃｏＲＩ．Ｂｇｌｌ１、による制限酵素
切断パターンの特徴を模式化した図である．
Claims (2)
- （１）インディカ型イネとジャポニカ型イネのミトコン
ドリアから構成される新規な雑種ミトコンドリアを有し
、かつインディカ型細胞質に対し稔性回復能力を持たな
いイネの花粉を交配した場合に、細胞質雄性不稔の性質
を示すことを特徴とする新規細胞質を有するイネ。 - （２）インディカ型イネ細胞とジャポニカ型イネ細胞と
を融合させる工程と、得られた融合細胞からイネ植物を
再生する工程と、再生した植物のうち細胞質雄性不稔を
示し、かつそのミトコンドリアがインディカ型イネ由来
のミトコンドリアとジャポニカ型イネ由来のミトコンド
リアとの雑種になっているイネを選抜する工程と、該選
抜したイネをジャポニカ型イネと交配し、種子を得る工
程と、該種子を育成し、旺盛に育成する個体を選抜する
工程を含む請求項１記載のイネの作出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1154511A JPH0322927A (ja) | 1989-06-19 | 1989-06-19 | 新規細胞質を持つイネ及びその作出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1154511A JPH0322927A (ja) | 1989-06-19 | 1989-06-19 | 新規細胞質を持つイネ及びその作出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0322927A true JPH0322927A (ja) | 1991-01-31 |
Family
ID=15585850
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1154511A Pending JPH0322927A (ja) | 1989-06-19 | 1989-06-19 | 新規細胞質を持つイネ及びその作出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0322927A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102342243A (zh) * | 2010-07-28 | 2012-02-08 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种机械化生产水稻种子的生产方法 |
| CN103314843A (zh) * | 2013-07-11 | 2013-09-25 | 江西省农业科学院水稻研究所 | 一种快速培育水稻新型胞质雄性不育系的方法 |
| CN103444511A (zh) * | 2013-08-14 | 2013-12-18 | 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所 | 一种水稻籼型亲粳恢复系的育种方法 |
| CN104160949A (zh) * | 2014-08-14 | 2014-11-26 | 淮南市种子公司 | 一种杂交稻开优18号的选育方法 |
| CN112042528A (zh) * | 2020-10-10 | 2020-12-08 | 上海市农业科学院 | 一种杂交粳稻机械赶粉的方法 |
-
1989
- 1989-06-19 JP JP1154511A patent/JPH0322927A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102342243A (zh) * | 2010-07-28 | 2012-02-08 | 安徽省农业科学院水稻研究所 | 一种机械化生产水稻种子的生产方法 |
| CN103314843A (zh) * | 2013-07-11 | 2013-09-25 | 江西省农业科学院水稻研究所 | 一种快速培育水稻新型胞质雄性不育系的方法 |
| CN103444511A (zh) * | 2013-08-14 | 2013-12-18 | 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所 | 一种水稻籼型亲粳恢复系的育种方法 |
| CN104160949A (zh) * | 2014-08-14 | 2014-11-26 | 淮南市种子公司 | 一种杂交稻开优18号的选育方法 |
| CN112042528A (zh) * | 2020-10-10 | 2020-12-08 | 上海市农业科学院 | 一种杂交粳稻机械赶粉的方法 |
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