JPH03209385A

JPH03209385A - 免疫抑制活性を持つマクロライド

Info

Publication number: JPH03209385A
Application number: JP2104408A
Authority: JP
Inventors: Matthew J Wyvratt; マシユー　ジエー．ワイヴラツト; Thomas R Beattie; トーマス　アール．ビーテイー; Hyun O Ok; ユン　オー．オク; Byron H Arison; バイロン　エツチ．アリソン; Michael H Fisher; マイケル　エツチ．フイツシヤー
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck and Co Inc
Priority date: 1989-04-21
Filing date: 1990-04-21
Publication date: 1991-09-12
Also published as: CA2014841A1; EP0399579A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】この発明は免疫抑制活性を持つマクロライドに関する。

より詳しくは、この化合物は免疫抑制活性を持つＦＫ−
５０６に関連する環拡大した化合物に関する。

タナ力（Ｔａｎａｋａ）　、クロダ（Ｋｕｒｏｄａ）　
、及び共同研究者等により単離され特徴を述べられた新
規な２３員トリシクロマクロライドであるＦＫ−５０６
と関連化合物はまれな免疫抑制活性を持ち、これについ
てはジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイ
エティ−（Ｊ、　Ａｙｓ、　Ｃｈｅｗｓ、　Ｓｏｃ、）
（１９８７年）、１０９巻、５０３１ページ及び欧州特
許出願公開第０．１８４．１６２号の記述を参照された
い。これらの化合物の骨髄及び臓器移植、自己免疫疾患
の治療、感染性疾患治療における充分な存用性の可能性
は確立されている。

ＦＫ−５０６要約すると、本発明により式及び式（式中、Ｒ”はメチル基、エチル基、プロピル基又はア
リル基であり、Ｒ２４とＲ３″は独立に水素又は通常使
用する水酸基の保護基であり、Ｒ″１は水素、メチル基
、又は水酸基の保護基であり、ｎは１又は２である）の
免疫抑制活性を持つ化合物が提供される。

ＦＫ−５０６及び関連する化合物は構造式（式中、Ｒ２
１はメチル基、エチル基、プロピル基又はアリル基であ
り、ＲＺ４とＲ３ｔは独立に水素又は水酸基の保護基で
あり、Ｒ３１は水素、メチル基、又は水酸基の保護基で
あり、ｎは１又は２である）で示される。式（Ｉ［Ｉ）
の化合物の製造は文献で公知である。生物学的発酵法と
合成法がある。式■の化合物の合成法はポラント（Ｖｏ
ｌａｎｔｅ）等の１９８９年１１月１日に出願された米
国特許願第２９５，８７７号に記述されており、前述文
献は参考例としてここに組み入れる。

生物学的発酵に引き続く合成的変換が式（Ｉ［［）の化
合物の製造方法として現在当業者の間で好ましいとされ
ている。水性栄養培地に植菌したストレプトマイセス・
ツタバエンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｔｓｕｋｕ
ｂａｅｎｓｉｓ）　、ＮＣ１９９９３及びストレプトマ
イセス・ハイグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）、ｌｋ７２３　Ｂのよ
うなストレプトマイセス属に属する微生物は所望の化合
物を分離可能な量で生産することができる。栄養培地は
同化可能な炭素及び窒素源を含有し、好気的条件下下で
発酵させるのが好ましい。発酵中４つの式（ＩＩＩ）の
化合物、すなわち（Ａ）　Ｒ３ｚ　とＲ２４は水素、Ｒ３′ハメチル基、
ＲＺＩはアリル基、ｎは２のＦＫ−５０６、（Ｂ）　　
Ｒ″ｔ　とＲ”は水素、Ｒ３′はメチル基、ＲＺＩはエ
チル基、ｎは２の化合物、（Ｃ）　　Ｒ”　　とＲ２４は水素、Ｒ”とＲ２１はメ
チル基、ｎは２の化合物、及び（Ｄ）　　Ｒ”　　とＲＺ４は水素、Ｒｆｆ′はメチル
基、ＲＺＩはアリル基、ｎはｌの化合物が生産される。

分離されたストレプトマイセス・ツタバエンシス＆９９
９３の凍結乾燥試料は工業技術院微生物工業技術研究所
（茨城県筑波郡谷田部町東１丁目１−３）にＦＥＲＭ　
　Ｐ−７８８６の寄託番号で寄託され（寄託日、１９８
４年１０月５日）、次いで１９８５年１０月１９日ＦＥ
ＲＭ　　ＢＰ９２７の新しい寄託番号で同一寄託機関の
ブタペスト条約ルートに変更された。

上述の発酵で生産される４つの化合物を使用して弐■の
残りの化合物は容易に生産することができる。ＲＺＩの
アリル基は公知の方法により好便にプロピル基に還元す
ることができる。Ｒ２４又はＲ３２の水素は公知の方法
により保護することができる。同様に生成したＲｊ′の
メチル基は所望により水素で置換するか脱メチルし、次
いで保護することができる。このＲ３１の脱メチルは弐
■の化合物をフィード物質として使用して発酵反応で実
行することができる。例えば、上述の弐ｍの中で命名さ
れた化合物Ｂを１９８８年６月２９日出願した米国特許
願第２１３，０２５号に記載されているように微生物ア
クチノミセタレス（Ａｃｔｉｎｏ　ｍｙｃｅｔａｌｅｓ
）ＡＴＣＣｌ１ｈ５３７７１を使用してＲ”を脱メチル
することができ、前記文献は参考例としてここに組み入
れる。同様に、上述の化合物Ａは同じく１９８８年６月
２９日に出願した米国特許願第２１３．０６３号の記述
に従って脱メチルすることができる。

適当な水酸基の保護基は当該技術分野で公知の群を含み
、それらは、低級アルキルチオメチル基（例えばメチルチオメチル基
、エチルチオメチル基、プロピルチオメチル基、イソプ
ロピルチオメチル基、ブチルチオメチル基、イソブチル
チオメチル基、ヘキシルチオメチル基など）などのよう
な１−（低級アルキルチオ）（低級）アルキル基であっ
て、このうち好ましいのはＣＩＣａアルキルチオメチル
基、最も好ましいのはメチルチオメチル基であり、また
。

トリ　（低級）アルキルシリル基（例えばトリメチルシ
リル基、トリエチルシリル基、トリブチルシリル基、ト
リーミープロピルシリル基、ｔｅｒｔ　−ブチル−ジメ
チルシリル基、トリーｔｅｒ　ｔ−ブチルシリル基なと
）、低級アルキル−ジアリールシリル基（例えばメチル
−ジフェニルシリル基、エチル−ジフェニルシリル基、
プロピル−ジフェニルシリル５、ｔｅｒｔ−ブチル−ジ
フェニルシリル基など）などのようなトリ置換シリル基
であって、このうち好ましいのはトリ　（ＣＩ−Ｃ，）
アルキルシリル基とＣ５〜Ｃ４アルキル−ジフェニルシ
リル基、最も好ましいのはｔｅｒｔ〜ブチル−ジメチル
シリル基、トリーミープロピルシリル基及びｔｅｒ　ｔ
−ブチル−ジフェニルシリル基であり、また、芳香族基
で置換された脂肪族アシル基、脂肪族アシル基及び芳香
族アシル基などのようなカルボン酸から得られるアシル
基である。

脂肪族アシル基は１つまたは複数の適当な置換基を持つ
ことができる低級アルカノイル基（例えばホルミル基、
アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリ
ル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、ヘ
キサノイル基、カルボキシアセチル基、カルボキシプロ
ピオニル基、カルボキシブチリル基、カルボキシヘキサ
ノイル基など）、１つ又は複数の低級アルキル基のよう
な適当な置換基をもつことができるシクロ（低級）アル
キルオキシ（低級）アルカノイル基（例えばシクロプロ
ピルオキシアセチル基、シクロブチルオキシプロビオニ
ル基、シクロヘプチルオキシブチリル基、メチルオキシ
アセチル基、メチルオキシプロピオニル基、メチルオキ
シチル基、メチルオキシヘプタノイル基、メチルオキシ
ヘキサノイル基など）などを含むことができる。

芳香族アシル基はアロイル基及び置換されたアロイル基
を含むことができる。芳香族アシル基の例はベンゾイル
基、トルオイル基、キシロイル基、ナストイル基、ニト
ロベンゾイル基、ジニトロベンゾイル基、ニトロナフト
イル基などを含む。

芳香族基で置換された脂肪族アシル基は１つ又は複数の
低級アルコキシ基及びトリハロ（低級）アルキル基のよ
うな適当な置換基を持つことができるアル（低級）アル
カノイル基（例えばフェニルアセチル基、フェニルプロ
ピオニル基、フェニルブチリル基、２−トリフルオロメ
チル−２−メトレキ−２−フェニルアセチル基、２−エ
チル−２−トリフルオロメチル−２−フェニルアセチル
基、２−トリフルオロメチル−２−プロポキシ−２−フ
ェニルアセチル基など）などを含むことができる。

式■の化合物、これを生産する微生物、発酵条件、分離
技術、及び生成物の化学変換は欧州特許第０１８４１６
２号に充分に記述されている。この文献は参考例はとし
てここに組み入れる。

工程図Ａにおいて、式Ｉと■の化合物すなわち本発明の
新規な化合物は式■の化合物から新規な方法によって製
造される。この方法は弐■の化合物をキシレン中で約１
〜約４８時間還流下で加熱することにより単一工程で実
施することができる。

加熱により、式■の化合物はアリル再編成（オキシコー
プ（ｏｘｙ−ｃｏｐｅ）　）を受けて式Ｉの環拡大した
マクロライド化合物及びその脱水アナログである式■の
化合物を生成する。文武■の化合物は式■の化合物単独
を加熱することによっても得られ、これは再編成後脱水
が起こることを示唆している。

この環拡大した化合物への再編成の証拠は式■と■の化
合物のＮＭＲスペクトルに見出だすことができる。そこ
には親の弐■の化合物の’ＨＮＭＲスペクトルにおける
ｃ２ａ　　Ｈについてその元の位置と比較して約０．３
　ｐｐｍ＋の特徴的な下方変位が見出だされる。

もちろんキシレンは溶媒として必須ではない。

他の有機溶媒もそれが加熱工程でほぼキシレンの還流温
度が維持される限り種々な圧力下で使用することができ
る。この場合適当な加熱温度は約り３０℃〜約１５０℃
の範囲にある。好ましい温度は約１３５’〜１４５℃の
範囲にある。

式■と■の化合物は式■の化合物についての公知技術の
方法と用量で免疫抑制剤又は抗菌性化合物として使用す
ることができる。従って、これらの化合物は心臓、腎臓
、肝臓、骨髄、皮膚などのような器官又は組織の移植に
対する抵抗；骨髄移植の際の移植物対宿主疾患；リュー
マチ様関節炎、多発性硬化症、筋無力症、Ｉ型糖尿病性
葡萄膜炎などのような自己免疫疾患及び病原性微生物に
より引き起こされる感染性疾患の治療と予防に有用であ
る。

この発明の化合物は医薬製剤の形態、例えば固体、半固
体又は液体形態で使用することができ、これら製剤は本
発明の化合物を活性成分として外部、腸内又は非経口投
与に適した有機又は無機の担体又は賦形剤と混合した状
態で含有する。活性成分は、例えば錠剤、ベレフト、カ
プセル、座薬、溶液、エマルジョン、懸濁液、及び任意
の他の使用に適した形態の通常の無毒の医薬的に受容可
能な担体と配合することができる。使用することができ
る担体は水、グルコース、乳糖、アカシアゴム、ゼラチ
ン、マンニトール、澱粉糊、三ケイ酸マグネシウム、タ
ルク、コーンスターチ、ケラチン、コロイド性シリカ、
ポテトスターチ、尿素及び固体、半固体又は液体形態で
製剤を製造するための使用に適した他の担体であり、更
に補助的な安定剤、増粘側及び着色剤及び香料を使用す
ることができる。活性の目的化合物は病気の経過又は条
件に望ましい効果を与える充分な量を製剤組成物中に含
有させる。

この組成物を人間に使用するためには非経口又は腸内投
与により使用するのが好ましい。式■と■の化合物の治
療的有効量の用量は変動し、又治療する個々の患者の年
齢と条件によるが、一般に活性成分の毎日の用量（７０
ｋｇの男子を基準として計算）として約０．０１〜１０
００■、好ましくは０．１〜５００■及びより好ましく
は０．５〜１００■が病気を治療するために与えられる
。平均の単一用量として約０．５■、１■、５■、１０
■、５０■、１００■、２５０■及び５００曜が一般に
投与される。

次の実施例は本発明を例証する目的で示すものであり、
本発明の範囲又は思想を限定するものと解釈すべきでは
ない。プロトンＮＭＲスペクトルは溶媒としてｃｏｃｚ
ｉを使用し、３００ＭＨｚで記録した。

実施例１第１図に示す’ＨＮＭＲスペクトルではＲ”＝アリル基
、Ｒ２４＝水素、Ｒ３１＝メチル基、Ｒ３Ｚ−水素及び
ｎ＝２の式■の化合物６４■を３ＴＩｌｌＯ脱気したキ
シレンに溶解した溶液を、窒素ガス下、還流下で２４時
間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物につ
きシリカゲルの調製用薄層クロマトグラフィー（１：４
ヘキサン：エーテル）を反復実施して、第２図に示す’
ＨＮＭＲスペクトルではＲ１１＝アリル基、Ｒ２４＝水
素、Ｒ３′＝メチル基、Ｒ２ｔ＝水素及びｎ＝２の再編
された式Ｉ（７）化合物（７）　３０．４　ｗと、Ｒｚ
ｌ＝アリル基、Ｒ３Ｉ−メチル基、Ｒ”−水素及びｎ＝
２の脱水された式■の化合物４，５■と、回収された出
発物質２０■を得た。生成物はそれらの構造と一致する
適当な質量及び’ＨＮＭＲスペクトルデータを示した。

更にこの弐Ｉの生成物の構造をエックス線結晶学的方法
により確認した。

実施例２Ｒ””７’Ｊル基、ＲＺ４＝水素、Ｒ３１＝　メチル基
、Ｒ３２＝水素及びｎ＝２の弐Ｉの一次熱分解生成物（
１０■）を２艷の脱気したキシレンに溶解した溶液を、
窒素ガス下、還流下で２４時間加熱した。

次いで溶液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルの調
製用ＴＬＣ（５％　ｉ　　ＰｒＯＨ／　ＣＨｚＣｌ　ｇ
）によりクロマトグラフィーにかけ、ＲＺ＋−アリル基
、Ｒｊ′＝メチル基、Ｒ３！＝水素及びｎ＝２の脱水さ
れた式■の化合物３．５■と回収された出発物質（５■
）を得た。

実施例３Ｒ２皿＝エチル基、Ｒ２４＝水素、Ｒ３１＝メチル基、
Ｒ２ｔ＝水素及びｎ＝２の弐■の化合物３０■を窒素ガ
ス下で３−の脱気したキシレンに溶解し、得られる溶液
を還流下で２４時間加熱した。反応混合物を室温まで冷
却し、次いで減圧下で濃縮乾燥した。残留物をシリカゲ
ルの調製用ＴＬＣ（５％ｉ　　ＰｒＯＨ／　ＣＨｚＣ１
ｚ）により反応精製してＲＺＩ＝エチル基、Ｒ２４；水
素、Ｒ３＋−メチル基、Ｒ３２−水素及びｎ＝２の式■
の化合物１８■と、Ｒ２１＝エチル基、Ｒ３１−メチル
基、Ｒ３２＝水素及びｎ＝２の脱水された式■の化合物
６■を得た。質量及びＮＭＲスペクトルデータは生成物
の構造と一致した。

実施例４Ｒ１′−エチル基、ＲＺ４、Ｒ３１及びＲｆｆ２−水素
、及びｎ＝２の式■の化合物（６０■）を不活性雰囲気
下で６ｍの脱気したキシレンに溶解し、還流下で２４時
間加熱した。反応混合物を減圧下で濃縮し、調製用ＴＬ
Ｃ（シリカゲル）により精製してＲ２１−エチル基、Ｒ
”、Ｒ３＋及びＲ３２−水素及びｎ＝２の式■の化合物
と、Ｒ２′＝エチル基、Ｒ３１とＲ３２＝水素及びｎ＝
２の式■の化合物を得た。

実施例５Ｒ２１＝アリル蟇、Ｒ２′＝水素、Ｒ３１＝メチル基、
Ｒ３２＝アセチル基及びｎ＝２の弐■の化合物１００■
を１０−の脱気したキシレンに溶解した溶液を、窒素ガ
ス下、還流下で２４時間加熱し、次いで減圧下で濃縮し
た。残留物をシリカゲルの調製用薄層クロマトグラフィ
ー（多重溶Ｍ）により精製してＲ１１−アリル基、Ｒ２
４＝水素、Ｒ”＝メチル基、Ｒ３２＝アセチル基及びｎ
＝２の式１の化合物と、Ｒ１Ｉ＝アリル基、Ｒ３１＝メ
チル基、Ｒ３２＝アセチル基及びｎ＝２の式■の化合物
を得た。

実施例６Ｒ”＝７１Ｊル基、ＲＺ４＝水素、Ｒ３＋＝メチル基、
Ｒ３２＝水素及びｎ＝１の弐■の化合物６０■を６艷の
脱気したキシレンに溶解した溶液を、窒素ガス下、還流
下で４８時間加熱した後、減圧下で濃縮し、シリカゲル
の調製用薄層クロマトグラフィーにより精製してＲ１１
＝アリル基、Ｒ２４＝水素、ＲｆｆＩ＝メチル基、Ｒ１
２＝水素及びｎ＝１の式■の化合物と、Ｒ”＝アリル基
、Ｒ”−メチル基、Ｒ３ｚ＝水素及びｎ＝１の弐Ｈの化
合物を得た。

出願人メルク　エンド　カムバニインコーボレーテッド手続補正警防式）平成２年１２月１３日

Claims

【特許請求の範囲】１、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾２＾１はメチル基、エチル基、プロピル基
又はアリル基であり、Ｒ＾２＾４とＲ＾３＾２は独立に
水素又は水酸基の保護基であり、Ｒ＾３＾１は水素、メ
チル基、又は水酸基の保護基であり、ｎは１又は２であ
る）の免疫抑制活性を持つ化合物。２、Ｒ＾３＾２とＲ＾２＾４は水素であり、Ｒ＾３＾１
はメチル基であり、Ｒ＾２＾１はアリル基又はメチル基
であり、ｎは２である請求項１記載の化合物。３、Ｒ＾３＾２とＲ＾２＾４は水素であり、Ｒ＾２＾１
はエチル基であり、Ｒ＾３＾１は水素又はメチル基であ
り、ｎは２である請求項１記載の化合物。４、Ｒ＾２＾４は水素であり、Ｒ＾３＾２はアセチル基
であり、Ｒ＾３＾１はメチル基であり、Ｒ＾２＾１はア
リル基であり、ｎは２である請求項１記載の化合物。５、Ｒ＾３＾２とＲ＾２＾４は水素であり、Ｒ＾３＾１
はメチル基であり、Ｒ＾２＾１はアリル基であり、ｎは
１である請求項１記載の化合物。６、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾２＾１はメチル基、エチル基、プロピル基
又はアリル基であり、Ｒ＾３＾２は水素又は水酸基の保
護基であり、Ｒ＾３＾１は水素、メチル基、又は水酸基
の保護基であり、ｎは１又は２である）の免疫抑制活性
を持つ化合物。７、Ｒ＾３＾２は水素であり、Ｒ＾３＾１はメチル基で
あり、Ｒ＾２＾１はアリル基又はメチル基であり、ｎは
２である請求項６記載の化合物。８、Ｒ＾３＾２は水素であり、Ｒ＾２＾１はエチル基で
あり、Ｒ＾３＾１は水素又はメチル基であり、ｎは２で
ある請求項６記載の化合物。９、Ｒ＾３＾２はアチセル基であり、Ｒ＾３＾１はメチ
ル基であり、Ｒ＾２＾１はアリル基であり、ｎは２であ
る請求項６記載の化合物。１０、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾２＾１はメチル基、エチル基、プロピル基
又はアリル基であり、Ｒ＾２＾４とＲ＾３＾２は独立に
水素又は水酸基の保護基であり、Ｒ＾３＾１は水素、メ
チル基、又は水酸基の保護基であり、ｎは１又は２であ
る）の反応物化合物を有機溶媒中で１３０°〜１５０℃
の温度で１〜４８時間加熱することにより生成する免疫
抑制活性を持つ化合物であって、該免疫抑制活性を持つ化合物はＣ＿２＿６−Ｈが出発物
質中のＣ＿２＿３−Ｈの化学シフトに比較して約０．３
ｐｐｍ下方シフトしていることにより特徴付けられる化
合物。