JPH0320646A - ジゼロシン分析法及びその装置 - Google Patents
ジゼロシン分析法及びその装置Info
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- JPH0320646A JPH0320646A JP15515689A JP15515689A JPH0320646A JP H0320646 A JPH0320646 A JP H0320646A JP 15515689 A JP15515689 A JP 15515689A JP 15515689 A JP15515689 A JP 15515689A JP H0320646 A JPH0320646 A JP H0320646A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（イ）産業上の利用分野
この発明はジゼロシン分析法及びその装置に関する。さ
らに詳しくは、魚粉等の飼料に含有されるジゼロシンの
分析に好適なノゼロシン分析法及びその装置に関する。
らに詳しくは、魚粉等の飼料に含有されるジゼロシンの
分析に好適なノゼロシン分析法及びその装置に関する。
（０）従来の技術
ニワトリに胃潰瘍を起こす原因物質が魚粉かみ抽出され
、これがジゼロシンとよばれろ化学物質であることが判
明している。このジゼロシンはヒスタミンとリジンとが
イミノ結合をした構造をしているものである。このジゼ
ロシンを飼料等から分粁するには通常液体クロマトグラ
フィの手法を用いて行われている。すなわちこの方法は
、分析対象飼料から適当な溶媒で抽出された抽出液を液
体クロマトグラフィに付した後、分離戊分含有流路にア
ミノ基の誘導体化試薬として知られているシステインを
含むオルトフタルアルデヒド試薬を、ポストカラム誘導
体化法により導入してアミノ基を有する分離成分を発蛍
光性誘導体に誘導し、該誘導体の蛍光光度に基づいてジ
ゼロシンを検出す？ものである。
、これがジゼロシンとよばれろ化学物質であることが判
明している。このジゼロシンはヒスタミンとリジンとが
イミノ結合をした構造をしているものである。このジゼ
ロシンを飼料等から分粁するには通常液体クロマトグラ
フィの手法を用いて行われている。すなわちこの方法は
、分析対象飼料から適当な溶媒で抽出された抽出液を液
体クロマトグラフィに付した後、分離戊分含有流路にア
ミノ基の誘導体化試薬として知られているシステインを
含むオルトフタルアルデヒド試薬を、ポストカラム誘導
体化法により導入してアミノ基を有する分離成分を発蛍
光性誘導体に誘導し、該誘導体の蛍光光度に基づいてジ
ゼロシンを検出す？ものである。
（ハ）発明ｈ＜解決しようとする課題
しかしながら、上記方法ではジゼロシンと共存する他の
一級アミノ酸やアミン等が同時に蛍光検出されるため、
ジゼロシンを選択的に分析することが困難である。
一級アミノ酸やアミン等が同時に蛍光検出されるため、
ジゼロシンを選択的に分析することが困難である。
この発明はかかる状況に鑑み為されたものであり、ジゼ
ロシンを選択的に分折しうる方法及びその装置を提供し
ようとするものである。
ロシンを選択的に分折しうる方法及びその装置を提供し
ようとするものである。
（二）課題を解決するための手段
かくしてこの発明によれば、ジゼロシンを含有する試料
を液体クロマトグラフィに付して該ジゼロシンを分離し
た後、ポストカラム誘導体化法によりオルトフタルアル
デヒドを含有するがシステイン類を含有しない試薬を用
いて上記分離ジゼロシンを発蛍光性誘導体に誘導し、該
誘導体の蛍光光度に基づいて試料中のジゼロシンを分析
することからなるジゼロシン分析法が提供される。
を液体クロマトグラフィに付して該ジゼロシンを分離し
た後、ポストカラム誘導体化法によりオルトフタルアル
デヒドを含有するがシステイン類を含有しない試薬を用
いて上記分離ジゼロシンを発蛍光性誘導体に誘導し、該
誘導体の蛍光光度に基づいて試料中のジゼロシンを分析
することからなるジゼロシン分析法が提供される。
この発明の方法において分析対象とされるジゼロシンは
、ヒスタミンとり■ジンとがイミノ結合をした構造を骨
格として有する一級アミノ酸であるが、上記骨格を変更
しない範囲で若干化学的に修飾されていてもよい。上記
ジゼロシンは通常ニワトリ等の飼料中に含有されるニワ
トリの筋胃，！ＩＫの原因物質として知られているもの
を意味する。
、ヒスタミンとり■ジンとがイミノ結合をした構造を骨
格として有する一級アミノ酸であるが、上記骨格を変更
しない範囲で若干化学的に修飾されていてもよい。上記
ジゼロシンは通常ニワトリ等の飼料中に含有されるニワ
トリの筋胃，！ＩＫの原因物質として知られているもの
を意味する。
この発明の方法において上記飼料を分析対象とする場合
、通常飼料から適当な抽出溶媒（例えば過塩素酸水溶液
等）でジゼロシンを抽出し、得られる抽出夜をロ過後ｐ
Ｈ８整し、注入することが好ましい。また、飼料を塩酸
加水分解後口過し、ｐＨ調整し、注入することも好まし
い。
、通常飼料から適当な抽出溶媒（例えば過塩素酸水溶液
等）でジゼロシンを抽出し、得られる抽出夜をロ過後ｐ
Ｈ８整し、注入することが好ましい。また、飼料を塩酸
加水分解後口過し、ｐＨ調整し、注入することも好まし
い。
この発明の方法に用いる液体クロマトグラフィは、誘導
体化試薬に下記する特定のものを用いる以外は、一級ア
ミノ酸及びアミンをポストカラム誘導体化法で分析する
当該分野で公知の液体クロマトグラフィを利用すること
ができる。
体化試薬に下記する特定のものを用いる以外は、一級ア
ミノ酸及びアミンをポストカラム誘導体化法で分析する
当該分野で公知の液体クロマトグラフィを利用すること
ができる。
この発明の方法において、誘導体化試薬としては、オル
トフタルアルデヒドを含有するがシステイン類を含有し
ない試薬が用いられる。すなわち一級アミノ酸やアミン
等の当該分野で公知のオルトフタルアルデヒド誘導体化
試薬から、システイン類を除いたものか用いられる。こ
の試薬の好ましい調製例としては、オルトフタルアルデ
ヒドのエタノール性液を界面活性剤と共にアルカリ水溶
液（１）Ｈｌ．Ｏ程度が好ましい）に調製する等が挙げ
られろ。
トフタルアルデヒドを含有するがシステイン類を含有し
ない試薬が用いられる。すなわち一級アミノ酸やアミン
等の当該分野で公知のオルトフタルアルデヒド誘導体化
試薬から、システイン類を除いたものか用いられる。こ
の試薬の好ましい調製例としては、オルトフタルアルデ
ヒドのエタノール性液を界面活性剤と共にアルカリ水溶
液（１）Ｈｌ．Ｏ程度が好ましい）に調製する等が挙げ
られろ。
この発明の方法において、前記ジゼロシンは液体クロマ
トグラフィにより分離された後、上記誘導体化試薬によ
り発蛍光物質に誘導されるが、このとき夾雑する他の一
級アミノ酸やアミン等から選択的に誘導体化される。こ
の誘導体化への反応は通常液体クロマトグラフィの分析
流路上で行われる。この場合該反応部としては分離威分
と誘導体化試薬が効率良く混合されるよう混合コイル状
のものが好適に用いられる。
トグラフィにより分離された後、上記誘導体化試薬によ
り発蛍光物質に誘導されるが、このとき夾雑する他の一
級アミノ酸やアミン等から選択的に誘導体化される。こ
の誘導体化への反応は通常液体クロマトグラフィの分析
流路上で行われる。この場合該反応部としては分離威分
と誘導体化試薬が効率良く混合されるよう混合コイル状
のものが好適に用いられる。
この発明の方法において、上記試薬により誘導さ把た発
蛍光物質は、当該分野で公知の蛍光光度計を用いて検出
される。
蛍光物質は、当該分野で公知の蛍光光度計を用いて検出
される。
この発明はまた次に挙げるごとき基本構戊を有移動相供
給部から試料導入口、液体クロマトグラフ用カラム、反
応部を経て蛍光光度計に延役される分析流路と、オルト
フタルアルデヒドを含有するがシステイン類を含有しな
いジゼロシン誘導体化試薬を上記カラムとｌ昆合コイル
との間に導入しうる誘導体化試薬流路とから構成されて
なるジゼロシン分析装置が提供される。
給部から試料導入口、液体クロマトグラフ用カラム、反
応部を経て蛍光光度計に延役される分析流路と、オルト
フタルアルデヒドを含有するがシステイン類を含有しな
いジゼロシン誘導体化試薬を上記カラムとｌ昆合コイル
との間に導入しうる誘導体化試薬流路とから構成されて
なるジゼロシン分析装置が提供される。
（ホ）作用
この発明によれば、分Ｆｒｙ路に導入されたジゼロシン
は、液体クロマトグラフ用力ラムで分離された後、オル
トフタルアルデヒドを含有するがシステイン類を含有し
ない試薬と混合されて選択的に発蛍光性誘導体に誘導さ
れた後、該誘導体の蛍光光度に基づいて検出される，＝
色となる。
は、液体クロマトグラフ用力ラムで分離された後、オル
トフタルアルデヒドを含有するがシステイン類を含有し
ない試薬と混合されて選択的に発蛍光性誘導体に誘導さ
れた後、該誘導体の蛍光光度に基づいて検出される，＝
色となる。
以下実施例によりこの発明を詳細に説明するが、これに
よりこの発明は限定されるものではない。
よりこの発明は限定されるものではない。
（へ）実施例
第１図はこの発明のジゼロシン分析装置の一例の構戊税
明図である。
明図である。
液ポンプ（３）、試料インジェクタ（４）、肢体クロマ
トグラフ用カラム（５）、ジョイント部（６）、混合コ
イル（０，５１ｌｚφｘ ７０ｃｍＬ ） （７）をこ
の順に経て蛍光光度計（８）に延設される分析流路（ａ
）と、誘導体化試薬貯留漕（９）から送夜ボンプ（１０
）を介して上記分析流路（ａ）のジフィント部（６）に
接続される誘導体化試薬供給流路（ｂ）とから主として
構成されている。なお、（１１）はカラム恒温Ｉｆ（Ｇ
ＴＯ−６Ａ，（株）島津製作所製） ， （１２）は記
録計、（ｃ）はドレインへ延設される排出用管路である
。
トグラフ用カラム（５）、ジョイント部（６）、混合コ
イル（０，５１ｌｚφｘ ７０ｃｍＬ ） （７）をこ
の順に経て蛍光光度計（８）に延設される分析流路（ａ
）と、誘導体化試薬貯留漕（９）から送夜ボンプ（１０
）を介して上記分析流路（ａ）のジフィント部（６）に
接続される誘導体化試薬供給流路（ｂ）とから主として
構成されている。なお、（１１）はカラム恒温Ｉｆ（Ｇ
ＴＯ−６Ａ，（株）島津製作所製） ， （１２）は記
録計、（ｃ）はドレインへ延設される排出用管路である
。
以上のごとく構成された分析装置（１）において、２０
ｐｐｌｌ＋．程度の濃度でジゼロシンを含有する過塩素
酸溶液をｐＨ約２．２に調整したものについて、下記に
示す条件にて分析を行ったところ、第２図に示す結果を
得た。
ｐｐｌｌ＋．程度の濃度でジゼロシンを含有する過塩素
酸溶液をｐＨ約２．２に調整したものについて、下記に
示す条件にて分析を行ったところ、第２図に示す結果を
得た。
カラム： Ｓｈｉｎ−ｐａｃｋｌｓｃ−０７／Ｓ１５０
４Ｎａ（４朋１．Ｄ．Ｘｌ５ Ｌ，，（株）島津製作
所製）移動相；下記Ａ，．Ｂ２液を２二８で混合したち
のＡ．０．２Ｎクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ３．２
）Ｂ；０．８Ｎクエン酸ナトリウム４ｌ衡岐（ｐＨＬＯ
．ｏ）誘導体ｆヒ試薬：０．８ｉオルトフタルアルデヒ
ド／１４村エタノール０，４ｇボリオキンエチレンラウ
リルエーテルアルカリ緩衝液（ｐＨ１０）でＩｆ２とす
る。
４Ｎａ（４朋１．Ｄ．Ｘｌ５ Ｌ，，（株）島津製作
所製）移動相；下記Ａ，．Ｂ２液を２二８で混合したち
のＡ．０．２Ｎクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ３．２
）Ｂ；０．８Ｎクエン酸ナトリウム４ｌ衡岐（ｐＨＬＯ
．ｏ）誘導体ｆヒ試薬：０．８ｉオルトフタルアルデヒ
ド／１４村エタノール０，４ｇボリオキンエチレンラウ
リルエーテルアルカリ緩衝液（ｐＨ１０）でＩｆ２とす
る。
カラム温度：５５℃
移動相流ＩＩ ： ＯＪ＋Ｑ／ｍｉｎ誘導体化試薬流
ｉｔ ：０．２ｘＬ’ｍｉｎ蛍光光度計： ＲＦ−５３
５ （（株）島津製作所製）（蛍光： Ｅｘ＝３４８ｎ
ｍ， Ｅ＋ｓ＝４５０ｎｍ）上記条件に従って分析した
ところ、ジゼロシンを選択的に検出することかできた。
ｉｔ ：０．２ｘＬ’ｍｉｎ蛍光光度計： ＲＦ−５３
５ （（株）島津製作所製）（蛍光： Ｅｘ＝３４８ｎ
ｍ， Ｅ＋ｓ＝４５０ｎｍ）上記条件に従って分析した
ところ、ジゼロシンを選択的に検出することかできた。
比較例
誘導体化試薬を下記のものに変更する以外は上記実施例
と同機な条件で、同一調製の試料について分析装置（１
）により分析を行ったところ、第３図に示す結果を得た
。
と同機な条件で、同一調製の試料について分析装置（１
）により分析を行ったところ、第３図に示す結果を得た
。
誘導体化試薬：０．８ｇオルトフタルアルデヒド／１４
ｉ（エタノール０．４ｇポリオキシエチレンラウリルエ
ーテルｔｇ Ｎ−アセチルシステイン アルカリ緩衝液（ｐＨＩＯ）で１＆とする。
ｉ（エタノール０．４ｇポリオキシエチレンラウリルエ
ーテルｔｇ Ｎ−アセチルシステイン アルカリ緩衝液（ｐＨＩＯ）で１＆とする。
上記第３図によれば、ジゼロシン以外にもビークが検出
されており、この誘導体化試薬ではジゼロシンを選択的
に検出することは不可能であることが分かる。
されており、この誘導体化試薬ではジゼロシンを選択的
に検出することは不可能であることが分かる。
以上のことから、Ｎ−アセチルシステインを含まないオ
ルトフタルアルデヒド含有誘導体化試薬を用いることに
より、ジゼロシンを選択的に検出できることが分かる。
ルトフタルアルデヒド含有誘導体化試薬を用いることに
より、ジゼロシンを選択的に検出できることが分かる。
（ト）発明の効果
この発明によれば、ジゼロシンに対する検出の選択性を
向上させることができ、より迅速に分粁することができ
る。従って飼料の品質管理に好適な方法を提供すること
ができる。
向上させることができ、より迅速に分粁することができ
る。従って飼料の品質管理に好適な方法を提供すること
ができる。
第ｌ図はこの発明の方法を実施する装置の一例の構成説
明図、第２図はこの発明の方法により得られたー実施例
のクロマトグラム図、第３図は従来の方法により得られ
たクロマトグラム図である。 （２）・・・・・・移動相貯留漕、（３），（１０）・
・・・・・送演ポンブ、０）・・・・・・試料インジェ
クタ、 （５）・・・・・・液体クロマトグラフ用カーラム、（
６）・・・・・・ジョイント部、 （７）・・・・・・
混合コイル、（８）・・・・・・蛍光光度計、 （９）・・・・・・誘導体化試薬貯留博、（１１）・・
・・・カラム恒温博、（１２）・・・・・・記録計、（
ａ）・・・・・分析流路、 （ｂ）・・・・・・誘導体化試薬供給流路。 筑 ２ 筒 笛 ３ 宵 イ呆アテ−１１５（ウナ） イ呆枡峙間（分） 手続補正書 ″−１ｆ件の表示 平戊ｌ年特許願第１５５１５６号 発明の名称 ノゼロンノ分析法及びその装置 Ｖ正をずる者 ｆｊＧ件ξの関係 特許出願人 住 所 京都市中京区西ノ京栗原町１番地名 称
（１９９）株式会社 島津製作所代表者 四八條
實
明図、第２図はこの発明の方法により得られたー実施例
のクロマトグラム図、第３図は従来の方法により得られ
たクロマトグラム図である。 （２）・・・・・・移動相貯留漕、（３），（１０）・
・・・・・送演ポンブ、０）・・・・・・試料インジェ
クタ、 （５）・・・・・・液体クロマトグラフ用カーラム、（
６）・・・・・・ジョイント部、 （７）・・・・・・
混合コイル、（８）・・・・・・蛍光光度計、 （９）・・・・・・誘導体化試薬貯留博、（１１）・・
・・・カラム恒温博、（１２）・・・・・・記録計、（
ａ）・・・・・分析流路、 （ｂ）・・・・・・誘導体化試薬供給流路。 筑 ２ 筒 笛 ３ 宵 イ呆アテ−１１５（ウナ） イ呆枡峙間（分） 手続補正書 ″−１ｆ件の表示 平戊ｌ年特許願第１５５１５６号 発明の名称 ノゼロンノ分析法及びその装置 Ｖ正をずる者 ｆｊＧ件ξの関係 特許出願人 住 所 京都市中京区西ノ京栗原町１番地名 称
（１９９）株式会社 島津製作所代表者 四八條
實
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、ジゼロシンを含有する試料を液体クロマトグラフィ
に付して該ジゼロシンを分離した後、ポストカラム誘導
体化法によりオルトフタルアルデヒドを含有するがシス
テイン類を含有しない試薬を用いて上記分離ジゼロシン
を発蛍光性誘導体に誘導し、該誘導体の蛍光光度に基づ
いて試料中のジゼロシンを分析することからなるジゼロ
シン類分析法。 ２、移動相供給部から試料導入口、液体クロマトグラフ
用カラム、反応部を経て蛍光光度計に延設される分析流
路と、オルトフタルアルデヒドを含有するがシステイン
類を含有しないジゼロシン誘導体化試薬を上記カラムと
混合コイルとの間に導入しうる誘導体化試薬流路とから
構成されてなるジゼロシン分析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15515689A JPH0320646A (ja) | 1989-06-16 | 1989-06-16 | ジゼロシン分析法及びその装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15515689A JPH0320646A (ja) | 1989-06-16 | 1989-06-16 | ジゼロシン分析法及びその装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0320646A true JPH0320646A (ja) | 1991-01-29 |
Family
ID=15599757
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15515689A Pending JPH0320646A (ja) | 1989-06-16 | 1989-06-16 | ジゼロシン分析法及びその装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0320646A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100493611B1 (ko) * | 2001-12-11 | 2005-06-10 | 미쓰비시덴키 가부시키가이샤 | 차량용 교류발전기 및 그 브러시 마모검지 시스템 |
| CN102692384A (zh) * | 2012-05-24 | 2012-09-26 | 广东工业大学 | 一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法 |
| CN105092766B (zh) * | 2015-09-29 | 2016-08-17 | 通威股份有限公司 | 一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法 |
-
1989
- 1989-06-16 JP JP15515689A patent/JPH0320646A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100493611B1 (ko) * | 2001-12-11 | 2005-06-10 | 미쓰비시덴키 가부시키가이샤 | 차량용 교류발전기 및 그 브러시 마모검지 시스템 |
| US7116032B2 (en) | 2001-12-11 | 2006-10-03 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Automotive alternator and automotive alternator brush abrasion detection system |
| CN102692384A (zh) * | 2012-05-24 | 2012-09-26 | 广东工业大学 | 一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法 |
| CN105092766B (zh) * | 2015-09-29 | 2016-08-17 | 通威股份有限公司 | 一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法 |
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