JPH03157380A - 新規フラバン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、新規なフラバン誘導体に関する。

本発明の化合物は、ホスホリパーゼＡ２阻害作用有し、
抗炎症剤、抗アレルギー剤等として医薬の分野で利用で
きる。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題）フラ
バン類は、フラボノイドと称される一群の化合物に分類
される。このフラボノイドは高等植物に広く分布し、ま
た生薬成分としても数多く分類されている。

本発明者等は、ニクズク科植物であるＨｏｒｓ−ｆｉｅ
ｌｄｉａ　ａｍｙｇｄａｌｉｎｅ　（Ｗａｌｌ、）　Ｗ
ａｒｂからの抽出成分の生理活性を検討し、その中にフ
ォスフォリパーゼＡ２阻害作用があることを見出した。

そしてその活性成分を純粋忙単離して本発明を完成する
に至った。

本発明で使用した上記植物は中国真南、広西南部の森林
地帯、海南島、ベトナム、ビルマ等に分布し、その果実
は、中国置市の熱帯地帯に住む小数民族ダイ族によって
胃痛、消化不良。

生理不順等の治療に使用されている。

（課題を解決するための手段） 本発明の新規フラバン誘導体は９次の化学構造式で示さ
れる。

上記化合物は、不斉炭素原子２個を有するため４個の異
性体が存在するが８本発明の目的化合物には、それらの
異性体の分離されたもの、あるいは混合物のいずれのも
のも包含する。

Ｈ，ａｍｙｇｄａｌｉｎａ　（Ｗａｌｌ、）Ｗａｒｂか
ら本発明の目的化合物を製造するには、該植物の乾燥果
実をアルコールにて抽出し、抽出物を適宜有機溶媒によ
る抽出、薄層クロマトグラフィー　逆層系高速液体クロ
マトグラフィー等にて分離精製する。

（実施例） 以上２本発明の詳細な説明したが、以下に実施例により
その製造法をさらに具体的に説明する。

実施例 ＨｏｒｓｆｉｅｌｃＨａ　ａｍｙｇｄａｌｆｎａ　（Ｗ
ａｌｌ、）　Ｗａｒｂの乾燥した果実１００ｇを９５％
アルコールで抽出し、抽出物を減圧下６０℃で濃縮乾固
し、活性抽出物１３ｇを得た。

活性抽出物のうち７００■を１００ｍ７のメタノールに
溶解させ、この溶液に１００ｍ１のｎ−へキサンを加え
分液ロート中でよく攪拌する。ｎ−へキサン層を除去し
、得られたメタノール層を濃縮乾固した後に酢酸エチル
２００　ｒｎｌと水１００を加え２分液ロート中でよく
攪拌する。得られた酢酸エチル層を酸性水（ｐＨ２）及
びアルカリ水（ｐＨ９）で洗浄の後、無水硫酸ナトリウ
ムを加えよ（脱水し濃縮すると褐色オイル状物質が２０
０■得られた。褐色オイル状物質２００１？Ｉｇを少量
のメタノールに溶解させ、シリカゲル薄層プレート（メ
ルク社製、　Ａｒｔ、　５７４４　）に帯状に塗布した
後３クロロホルム：メタノール（７：　１　）全展開溶
剤する・薄層クロマトグラフィーを行う。ＵＶランプ（
２５４ｎｍ）照射においてＲｆ値０，３８を示し。

かつＰＬＡ、阻害活性を有する部分をかき取り。

得られたシリカゲル粉末なカラムにつめた後クロロホル
ム−メタノール（７：１）でＰＬ、Ａ、阻害物質を溶出
し、＃縮すると黄褐色オイル状物質が５２ｒｎｇ得られ
た。黄褐色オイル状物質５２ｍｇを少量のメタノールに
溶解し、メタノールで充填したセファデンクスＬＨ−２
０カラム（１５ｍｍＯＸ９００ｍｍ）にのせ、メタノー
ルを展開溶剤とするカラムクロマトグラフィーを行った
。溶出された分画はクロロホルム：メタノール（７：　
１　）ヲＭ開ｍ剤とするシリカゲル薄層クロマトグラフ
ィーを利用してＰＬＡ、阻害活性物質の存在を調べた。

ＵＶランプ（２５４ｍｍ）照射においてＲｆ値０．３８
を示し、かつＰＬＡ、阻害活性を有する分画な集めて、
濃縮すると黄色オイル状物質が１３ｍｇ得られた。黄色
オイル状物質１３ｍｇを少量のメタノールに溶解させ７
分取高速液体クロマトクラフィー［カラム：　ＹＭＣ５
Ｈ−２４３−５（山村化学展）。

移動層＝６０％７“セトニ）　ＩＪル水溶液、検出：Ｕ
ｖ２９０ｍｍ、流速：　１０ｍＪ／ｍｉｎ　］を行った
。保持時間５５〜５８分で単一ピークを示し、かつＰＬ
Ａ、阻害活性を有する両分を集めた。このＰＬＡ２阻害
活性画分を減圧濃縮し、得られた水溶液に酢酸エチルを
加え１分液ロート中でよく攪拌する。

得られた酢酸エチル層を脱水の後、濃縮するとＰＬＡ、
阻害活性を有する純粋な物質（ＣＲ６３−Ｃ２−２物質
）が無色オイル状として５．６ｍｇ得られた。

この物質の理化学性質を示すと表１の通りである。

表　　１ 以上の理化学的性質から９本発明化合物は、前記の化学
構造式（Ｉ）で始されるフラバン訪導体であると同定さ
れた。

（発明の効果） 本発明の新規化合物は、ホスホリパーゼＡ２阻害作用を
有し、抗炎症剤等として有用である。すなわち、従来か
ら炎症、アレルギー等に関与する生体内物質としてはプ
ロスタグランデイン、ロイコトリエン等が知られている
が、これらの生体内物質の生成機構は以下に示す通りで
ある。まず９種々の刺激によってホスホリパーゼＡ２が
活性化され、この酵素の作用によりアラキドン酸が細胞
膜リン脂質から遊離し、このアラキドン酸を出発物質と
してフ“ロスタグランデイン、ロイコト、リエン等が生
体内で合成される。ホスホリパーゼＡ、は、この一連の
生体内反応系の律速酵素であると考えられている。

一方、抗炎症例として、ステロイド系薬剤と非ステロイ
ド系薬剤とが知られている。前者は。

グロスタグランデイン、ロイコトリエン両方の生合成経
路を阻害し、抗炎症作用は強いが、しばしば好ましくな
い副作用が現れる。また、後者は、抗炎症作用が前者に
くらべて弱い。

本発明の化合物は、ホスホリパーゼＡ、の活性を阻害す
ることによってグロスタグランデイン及びロイコ）　Ｉ
Ｊエン両方の生合成を抑えることができ、副作用の少な
い２強い抗炎症剤とすることができる。また抗アレルギ
ー剤をも提供することができる。さらに、ホスフォリパ
ーゼＡ。

が関与しているといわれている虚血性血管障害。

潰瘍１敗血症、膵炎等の治療にも本発明の化合物は有効
であることが期待できる。

次に本発明の化合物のホスホリパーゼＡ、阻害作用につ
いて実験例をあげて説明する。

ホスホリパーゼＡ２阻害活性の測定 ジャーナルオブバイオロジカルケミストリ−〔Ｊ、　Ｂ
ｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、　２６１　（９）、　４２３９−
４２４６　（１９８６）　：］に記載の方法に準じ、以
下の方法で測定した。

１３．５　ｍＭ塩化カルシウムと２７０μｇ／ｌｎｌの
牛血清アルブミンを含む１３５ｍＭ　）　！Ｊス塩酸緩
衝液（ｐＨ８，０）　１００μｌにウサギ血小板由来ホ
スホリパーゼＡ、１１００ｎを加え水中で３０分間イン
キュベーションを行う。

次に本発明の化合物１０μｌ、及びトリチウム標識オレ
イン酸を取り込ませた大腸菌のオートフレイブ標品２５
μｌ（約２０万ｃｐｍ　）を反応液に加え。

６℃で１０分間反応させる。反応は２規定塩酸５０μｌ
の添加によって停止させる。反応停止後２０１１＠／ｍ
ｌの牛血清アルブミン５０μｌを加えて氷中３０分間放
置したのち遠心し、遠心上清のカウントを測定した。

なお、ホスホリパーゼＡ、阻害活性の測定に基質として
用いた。トリチウム標識オレイン酸を取り込んだ大腸菌
のオートフレイブ標品は以下のようにして調製した。−
視程培養した大腸菌培養液を１００ｍ１のトリグトンメ
ディウム（１％バクトドリプトン−０，５％塩化ナトリ
ウム）に加え【３７℃で０Ｄ５５０が０，４となるまで
インキーベーションする。次にＢｒ１ｊ３５　（界面活
性剤）を１７１００量とトリチウム標識オレイン酸５ｍ
Ｃ５を加え。

さらに３７℃で５時間インキュベーションを続けた後、
１２０℃２０分間オートクレイプ処理し。

−夜４℃に放置する。その後、菌体な０．１％牛血清ア
ルブミンと１０ｍＭ塩化カルシウムを含む０．７ＭＭＪ
ス塩酸緩衝液でよく洗浄した後、０．２％アジ化ナトリ
ウムと１０ｍＭ塩化カルシウムを含む０．７ＭＩＪス塩
酸緩衝液に懸濁し、使用時まで４℃で保存する。この方
法で測定した本発明化合物のホスホリパーゼＡ、阻害活
性のＩＣ５０値は、　　７．３Ｘ１０−’Ｍであった。

この結果９本発明の化合物は、ホスホリパーゼＡ２阻害
作用を有し、抗炎症剤等として有用に利用できる。

【図面の簡単な説明】

第１図は２本発明の化合物の紫外線吸収スペクトルを、
第２図は、赤外線吸収スペクトルを。 第３図は　ＩＨ−核磁気共鳴スペクトルを、第４図はｔ
ｓＣ−核磁気共鳴スペクトルを、第５図は質量分析スペ
クトル［ＦＡＢ　（Ｎｅｇ、）　−ＭＳ　］をそれぞれ
示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 下記平面構造式で示される新規フラバン誘導体▲数式、
   化学式、表等があります▼