JPH03115958A - 生体組織螢光観察装置 - Google Patents
生体組織螢光観察装置Info
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- JPH03115958A JPH03115958A JP1254389A JP25438989A JPH03115958A JP H03115958 A JPH03115958 A JP H03115958A JP 1254389 A JP1254389 A JP 1254389A JP 25438989 A JP25438989 A JP 25438989A JP H03115958 A JPH03115958 A JP H03115958A
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Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
- Measurement Of The Respiration, Hearing Ability, Form, And Blood Characteristics Of Living Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、生体組織に螢光物質を与え、生体組織から放
射される螢光によりその生体組織の観察を行う生体組織
螢光観察装置に関する。
射される螢光によりその生体組織の観察を行う生体組織
螢光観察装置に関する。
生体組織を観察する方法として、従来、総合倍率が２０
０〜４００倍の高倍率顕微鏡を用いて生体組織の透過光
像を観察する方法が知られている。
０〜４００倍の高倍率顕微鏡を用いて生体組織の透過光
像を観察する方法が知られている。
かかる方法では、顕微鏡ステージ上に動物の体内から引
っ張り出した器官や組織が静置、固定され、ステージの
下方から照明が行われて上方がらその透過光像が観察、
記録され、器官や組織内を流れる血球の移動速度が解析
される。
っ張り出した器官や組織が静置、固定され、ステージの
下方から照明が行われて上方がらその透過光像が観察、
記録され、器官や組織内を流れる血球の移動速度が解析
される。
しかし、上述の観察方法では観察視野が限られてしまい
、測定面積が非常に狭くなるため、組織全体の血流状態
の観察が困難である。これは、血球像を観察するために
高倍率の顕微鏡が使用されているからである。
、測定面積が非常に狭くなるため、組織全体の血流状態
の観察が困難である。これは、血球像を観察するために
高倍率の顕微鏡が使用されているからである。
また、上述の観察方法では器官や組織を顕微鏡ステージ
の上に固定するために、動物体内からそれらを無理やり
引っ張り出さなければならない。
の上に固定するために、動物体内からそれらを無理やり
引っ張り出さなければならない。
この処理は、器官や組織に対して大きなストレスを与え
ることとなり、平静時における器官や組織の状態とは異
なる観測結果を得る可能性を否定できない。また、動物
体内から引っ張り出すことのできない組織の観察はでき
ない。
ることとなり、平静時における器官や組織の状態とは異
なる観測結果を得る可能性を否定できない。また、動物
体内から引っ張り出すことのできない組織の観察はでき
ない。
更に、透過光像による観察であるため、ステージ上に置
かれる組織は光を透過する程度に薄くなければならない
。しかし、動物体内の組織等は、通常、厚みを持ったか
たまりであることから、上述の方法はほとんどの組織に
適用できない。
かれる組織は光を透過する程度に薄くなければならない
。しかし、動物体内の組織等は、通常、厚みを持ったか
たまりであることから、上述の方法はほとんどの組織に
適用できない。
そこで本発明は、かかる課題を解決することを目的とし
ている。
ている。
上述の目的を達成するため、本発明による生体組織螢光
観察装置においては、生体組織を固定する固定治具と、
生体組織を照明する螢光用落射照明装置と、固定治具に
対向して配設される低倍率顕微鏡とを備えた構成となっ
ている。
観察装置においては、生体組織を固定する固定治具と、
生体組織を照明する螢光用落射照明装置と、固定治具に
対向して配設される低倍率顕微鏡とを備えた構成となっ
ている。
この様な構成とすることにより、生体を平静時に近い状
態に保ちながら、広い観察視野でその生体組織の螢光観
察が可能となる。
態に保ちながら、広い観察視野でその生体組織の螢光観
察が可能となる。
以下、本発明の実施例について第１図および第２図を参
照しつつ説明する。
照しつつ説明する。
第１図は本発明による生体組織螢光観察装置の一実施例
の概略構成を示した図である。
の概略構成を示した図である。
図示したように、本発明による生体組織螢光観察装置に
おいては、観察実験中に実験動物の生命を一定の状態で
維持するための恒温槽１および生命維持装置２を備えて
いる。また、実験動物に螢光物質を一定の速度で投与す
るための定速注射装置３を備えると共に、生体組織を観
察するための低倍率顕微鏡５を備えている。低倍率顕微
鏡５には落射照明装置６が接続されると共に、高感度カ
メラ７が取り付けられている。高感度カメラ７により捕
えられた映像は、画像処理装置８、画像記憶装置１０、
モニタ１１によりそれぞれ処理、記憶、再生されるよう
になっている。
おいては、観察実験中に実験動物の生命を一定の状態で
維持するための恒温槽１および生命維持装置２を備えて
いる。また、実験動物に螢光物質を一定の速度で投与す
るための定速注射装置３を備えると共に、生体組織を観
察するための低倍率顕微鏡５を備えている。低倍率顕微
鏡５には落射照明装置６が接続されると共に、高感度カ
メラ７が取り付けられている。高感度カメラ７により捕
えられた映像は、画像処理装置８、画像記憶装置１０、
モニタ１１によりそれぞれ処理、記憶、再生されるよう
になっている。
恒温槽１内には、その生体組織の観察をしようとする実
験動物１５が静置された状態で収容される。図示した実
験動物はねずみである。実験動物１５は観察対象とされ
る組織近傍が切開され、当該組織が露出させられている
。実験動物１５には生命維持装置２が接続されており、
実験動物１５の生命が実験中維持される。また、実験動
物１５の体内には、螢光物質の定速注射装置３がら螢光
ラベルした高分子物質、あるいは赤血球ゴーストが一定
の速度でその血管から注入されている。赤血球ゴースト
は浸透圧ショックによって細胞膜内の物質が除去され、
細胞膜とそれに結合する構造体だけにされた赤血球の細
胞内および細胞表面に螢光物質を取り込ませたものであ
る。螢光物質としては、例えばフルオレセインを含んだ
フルオレセインイソチアネートが用いられる。フルオレ
セインイソチアネートを赤血球の細胞膜に結合させれば
、細胞膜から螢光が放射されるようになる。
験動物１５が静置された状態で収容される。図示した実
験動物はねずみである。実験動物１５は観察対象とされ
る組織近傍が切開され、当該組織が露出させられている
。実験動物１５には生命維持装置２が接続されており、
実験動物１５の生命が実験中維持される。また、実験動
物１５の体内には、螢光物質の定速注射装置３がら螢光
ラベルした高分子物質、あるいは赤血球ゴーストが一定
の速度でその血管から注入されている。赤血球ゴースト
は浸透圧ショックによって細胞膜内の物質が除去され、
細胞膜とそれに結合する構造体だけにされた赤血球の細
胞内および細胞表面に螢光物質を取り込ませたものであ
る。螢光物質としては、例えばフルオレセインを含んだ
フルオレセインイソチアネートが用いられる。フルオレ
セインイソチアネートを赤血球の細胞膜に結合させれば
、細胞膜から螢光が放射されるようになる。
実験動物１５の露出させられた観察対象たる組織１６（
例えば、胃の内壁）には、固定治具１７が当接させられ
、これにより固定されている。固定治具１７は筒状に形
成されており、これに対向して総合倍率２００倍未満の
低倍率顕微鏡５が配設されている。低倍率顕微鏡５には
落射照明装置６が接続されており、落射照明装置６から
観察目的たる組織１６に螢光物質を光らせるための励起
光が照射されるようになっている。
例えば、胃の内壁）には、固定治具１７が当接させられ
、これにより固定されている。固定治具１７は筒状に形
成されており、これに対向して総合倍率２００倍未満の
低倍率顕微鏡５が配設されている。低倍率顕微鏡５には
落射照明装置６が接続されており、落射照明装置６から
観察目的たる組織１６に螢光物質を光らせるための励起
光が照射されるようになっている。
そして、螢光物質から放たれる螢光は、低倍率顕微鏡５
を介して高感度カメラ７にて螢光像として撮像される。
を介して高感度カメラ７にて螢光像として撮像される。
高感度カメラ７によって撮影された映像は画像処理装置
８に送られ、ここで螢光像の光強度分布から血液分布が
解析され、赤血球ゴーストの螢光輝点の移動量から血流
速度が解析される。さらに、この映像は画像記憶装置１
ｏに送られ記憶されると共に、モニタ１１に再生される
ようになっている。
８に送られ、ここで螢光像の光強度分布から血液分布が
解析され、赤血球ゴーストの螢光輝点の移動量から血流
速度が解析される。さらに、この映像は画像記憶装置１
ｏに送られ記憶されると共に、モニタ１１に再生される
ようになっている。
第２図に、第１図に示した本発明による生体組織螢光観
察装置の主要部たる低倍率顕微鏡等を示す。
察装置の主要部たる低倍率顕微鏡等を示す。
上述したように、低倍率顕微鏡５には落射照明袋Ｗ６が
接続されている。落射照明袋Ｗ６の光源たる励起ランプ
６ａから実験動物体内の螢光物質を光らせるための励起
光が放たれると、励起光は集光レンズ６ｂにより集光さ
れた後、特定波長の励起光（例えば、４９０ ｎ ｍ
）のみがバンドパスフィルタ６Ｃを透過して顕微鏡内に
設けられたダイクロイックミラー５ａにより反射され、
対物レンズ５ｂを介して固定治具１７により固定された
組織１６に照射される。
接続されている。落射照明袋Ｗ６の光源たる励起ランプ
６ａから実験動物体内の螢光物質を光らせるための励起
光が放たれると、励起光は集光レンズ６ｂにより集光さ
れた後、特定波長の励起光（例えば、４９０ ｎ ｍ
）のみがバンドパスフィルタ６Ｃを透過して顕微鏡内に
設けられたダイクロイックミラー５ａにより反射され、
対物レンズ５ｂを介して固定治具１７により固定された
組織１６に照射される。
固定治具１７は、顕微鏡の下端部に着脱自在に嵌合した
円錐状の筒１８の下端部に固定されている。このように
、固定治具１７を顕微鏡の下部に固定しておけば、顕微
鏡の焦点を固定治具１７の下端部に固定しておいて固定
治具１７を組織１６に当接させるだけで、組織１６との
間の焦点距離調整を行わなくとも焦点距離が組織１６に
合うこととなり、観察が容易となる。固定治具１７は筒
１８と共に顕微鏡の下端部から取り外すことができ、観
察対象に応じて形状の異なる固定治具に取り替えること
ができるようになっている。なお、環状に形成された固
定治具１７の下端部、すなわち観察対象に当接する部分
には、透明なガラス板２０が嵌め込まれて固定されてい
る。このガラス板２０は必ずしも必要ではないが、これ
を設けることによって固定治具１７内側の組織］−６を
平坦にすることができ、組織が盛り上がることによって
顕微鏡の焦点距離が固定治具１７内側の組織１６全体に
わたって合わなくなることを防止できる。
円錐状の筒１８の下端部に固定されている。このように
、固定治具１７を顕微鏡の下部に固定しておけば、顕微
鏡の焦点を固定治具１７の下端部に固定しておいて固定
治具１７を組織１６に当接させるだけで、組織１６との
間の焦点距離調整を行わなくとも焦点距離が組織１６に
合うこととなり、観察が容易となる。固定治具１７は筒
１８と共に顕微鏡の下端部から取り外すことができ、観
察対象に応じて形状の異なる固定治具に取り替えること
ができるようになっている。なお、環状に形成された固
定治具１７の下端部、すなわち観察対象に当接する部分
には、透明なガラス板２０が嵌め込まれて固定されてい
る。このガラス板２０は必ずしも必要ではないが、これ
を設けることによって固定治具１７内側の組織］−６を
平坦にすることができ、組織が盛り上がることによって
顕微鏡の焦点距離が固定治具１７内側の組織１６全体に
わたって合わなくなることを防止できる。
励起光が照射された組織１６には、上述したように螢光
物質の定速注射装置３から螢光物質が供給されており、
この螢光物質が励起光を受けて波長５２０ｎｍ以上の螢
光を放射する。螢光は対物レンズ５ｂ、ダイクロイック
ミラー５ａを透過した後、螢光のみを通すシャープカッ
トフィルタ５ｃおよびリレーレンズ５ｄを介して高感度
カメラ７に入射する。なお、ダイクロイックミラ５ａは
バンドパスフィルタ６Ｃを透過した特定波長（この実施
例では、４９０ｎｍ）の励起光のみを反射する。従って
、これよりも長波長の螢光はダイクロイックミラー５ａ
を透過する。
物質の定速注射装置３から螢光物質が供給されており、
この螢光物質が励起光を受けて波長５２０ｎｍ以上の螢
光を放射する。螢光は対物レンズ５ｂ、ダイクロイック
ミラー５ａを透過した後、螢光のみを通すシャープカッ
トフィルタ５ｃおよびリレーレンズ５ｄを介して高感度
カメラ７に入射する。なお、ダイクロイックミラ５ａは
バンドパスフィルタ６Ｃを透過した特定波長（この実施
例では、４９０ｎｍ）の励起光のみを反射する。従って
、これよりも長波長の螢光はダイクロイックミラー５ａ
を透過する。
そして、シャープカットフィルタ５Ｃとリレーレンズ５
ｄの間に反射鏡５ｅを挿入すれば、顕微鏡を肉眼観察用
に切り替えることができ、接眼レンズ５ｆを介して螢光
像を肉眼で観察することも可能となっている。
ｄの間に反射鏡５ｅを挿入すれば、顕微鏡を肉眼観察用
に切り替えることができ、接眼レンズ５ｆを介して螢光
像を肉眼で観察することも可能となっている。
以上説明したように、本発明による生体組織螢光観察装
置においては、従来は困難と考えられていた焦点距離が
長い低倍率顕微鏡による落射照明装置を用いての螢光観
察が可能となった。これにより、従来よりも広い観察視
野で生体組織の観察が可能となり、観察組織全体の血流
状態等を容易に観察できる。従って、螢光ラベルした物
質の器官や組織における局在性を容易に観察できる。
置においては、従来は困難と考えられていた焦点距離が
長い低倍率顕微鏡による落射照明装置を用いての螢光観
察が可能となった。これにより、従来よりも広い観察視
野で生体組織の観察が可能となり、観察組織全体の血流
状態等を容易に観察できる。従って、螢光ラベルした物
質の器官や組織における局在性を容易に観察できる。
また、従来のように、観察組織を生体内から無理やり引
っ張り出す必要がなくなると共に、透過像による観察で
はないので、動物体内の裸出させることが可能なほとん
ど全ての器官（例えば、脳、肝臓、胃、腎臓など）や組
織の表層の血液分布、血流状態の観察が可能となり、よ
り平静時に近い状態で生体観察ができる。
っ張り出す必要がなくなると共に、透過像による観察で
はないので、動物体内の裸出させることが可能なほとん
ど全ての器官（例えば、脳、肝臓、胃、腎臓など）や組
織の表層の血液分布、血流状態の観察が可能となり、よ
り平静時に近い状態で生体観察ができる。
第１図は本発明による生体組織螢光観察装置の概略構成
を示した図、第２図はその主要部を示した図である。 １・・・恒温槽、２・・・生命維持装置、３・・・螢光
物質の定速注射装置、５・・・低倍率顕微鏡、６・・・
落射照明装置、７・・・高感度カメラ、８・・・画像処
理装置、１０・・・画像記憶装置、１１・・・モニタ、
１５・・・実験動物、１６・・・組織、１７・・・固定
治具、１８・・・筒、２０・・・ガラス板。
を示した図、第２図はその主要部を示した図である。 １・・・恒温槽、２・・・生命維持装置、３・・・螢光
物質の定速注射装置、５・・・低倍率顕微鏡、６・・・
落射照明装置、７・・・高感度カメラ、８・・・画像処
理装置、１０・・・画像記憶装置、１１・・・モニタ、
１５・・・実験動物、１６・・・組織、１７・・・固定
治具、１８・・・筒、２０・・・ガラス板。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 生体組織に螢光物質を与え、生体組織から放射される螢
光によりその生体組織の観察を行う生体組織螢光観察装
置であって、 生体組織に当接してこれを固定する固定治具と、生体組
織を照明する螢光用落射照明装置と、前記固定治具に対
向して配設される低倍率顕微鏡とを備えた生体組織螢光
観察装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1254389A JPH0614921B2 (ja) | 1989-09-29 | 1989-09-29 | 生体組織螢光観察装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1254389A JPH0614921B2 (ja) | 1989-09-29 | 1989-09-29 | 生体組織螢光観察装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03115958A true JPH03115958A (ja) | 1991-05-16 |
| JPH0614921B2 JPH0614921B2 (ja) | 1994-03-02 |
Family
ID=17264300
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1254389A Expired - Fee Related JPH0614921B2 (ja) | 1989-09-29 | 1989-09-29 | 生体組織螢光観察装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0614921B2 (ja) |
Cited By (25)
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