JPH03109343A - ２，３′，４，５′―テトラヒドロキシスチルベンの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、チロシナーゼ活性阻害による美白作用物質と
して有用な、２．３′，４，５’−テトラヒドロキシス
チルベンを製造する方法に関するものである。

〔従来の技術〕

皮膚が黒色化する一般的な原因は、紫外線照射を受けた
とき皮膚内でチロシナーゼの活性が著しく増加し、それ
によりメラニンの生成量が増加することにあると考えら
れている。そこで、従来、アスコルビン酸およびその誘
導体、プラセンターエキス、コウジ酸、桑白皮エキス、
その他チロシナーゼ活性阻害作用を存する物質を化粧品
等の外用剤に配合することにより上記原因による皮膚黒
色化やシミ、ソバカスの発生を防止することが提案され
、一部実用化されている。

！、３′，４，Ｓ’−テトラヒドロキシスチルベンも、
チロシナーゼ活性阻害作用に基づく優れた美白作用を示
すことが知られている（特開昭６４−３８００９号）、
シかしながら、この化合物は高価な原料を用いる複雑な
合成反応によって製造されるものであるため、きわめて
高価である。

〔発明が解決しようとする課題〕

そこで本発明の目的は、２．３′，４，５’−テトラヒ
ドロキシスチルベンを合成法によることなしに安価に得
る方法を提供することにある。

〔課題を解決するための手段〕

上記目的を達成することに成功した本発明は、ヤマグワ
（Ｍ＠ｒｓｓ　Ｂｏｍｂｙｃｉｓ　Ｋ０１６ｚ）の根皮
を含水親水性有機溶媒で抽出処理し、得られた抽出物よ
り２．３′，４，Ｓ’−テトラヒドロキシスチルベンを
採取すること特徴とするものである。

ヤマグワの根皮抽出物に美白作用があることは知られて
いたが、その有効成分は確認されていなかった。

本発明は、ヤマグワ抽出物をさらに分画して得られる特
定の両分に強いチロシナーゼ活性阻害作用があることを
見いだし、さらに、その美白作用物質が！、３′，４，
Ｓ′−テトラヒドロキシスチルベンであることを確認し
た結果、完成されたものである。

以下、ヤマグワから２．３’　、４．Ｓ’−テトラヒド
ロキシスチルベンを抽出し精製する方法の代表例につい
て説明する。

ヤマグワの根皮は、適度に粉砕または細断した後、メタ
ノール、エタノール、アセトン、ジオキサン、イソプロ
パツール、烏−プロパノール等の親木性有機溶媒と水と
の混合液を抽出溶媒として抽出する。抽出溶媒中、有機
溶媒の比率は５０％以上、望ましくは７０〜９５％程度
とする。水のほうが多いと２．３′，４，５’−テトラ
ヒドロキシスチルベンの抽出率が悪く、また９５％以上
の溶媒を用いると脂溶性物質の抽出量が多くなり、精製
工程の負担が大きくなる。抽出処理は、ヤマグワ根皮に
上述の抽出溶媒を約５〜１５倍量加え、還流下に加熱す
るか、常温もしくは加温下に静置して行う。

得られる抽出液から溶媒を留去すると、茶褐色の抽出物
が得られる。この抽出物中の２．３′，４，５’−テト
ラヒドロキシスチルベンは、巨大網状構造の合成高分子
吸着体に選択的に吸着される。そこで、上記抽出物を約
１０〜１００倍量の水に溶解し、不溶物があるときは癲
過してそれを除いてから、抽出物の約２０〜１００倍量
の巨大網状構造合成高分子吸着体を充填しｔ；カラムに
通液し、！、３′，４，５’−テトラヒドロキシスチル
ベンを吸着させる。次いでカラムを約５〜１０倍量の水
で洗浄して非吸着物を押し出し、これは廃棄する。その
後、約２０〜８０％、好ましくは３０〜５０％のメタノ
ール、エタノール等の含水親水性有機溶媒をカラムの５
〜１０倍量流して、吸着されていた！、３′，４，５’
−テトラヒドロキシスチルベンを脱着させる。脱着液は
固形分当たり約５０〜７０％の！、３′，４，５’−テ
トラヒドロキシスチルベンを含有し、必要に応じて活性
炭等の脱色剤で脱色処理したのち加熱して溶媒を留去し
、乾燥すると、淡褐色無臭の粉末状になる。上記吸脱着
処理に使用可能な合成高分子吸着体の例としては、ダイ
ヤイオンＨＰ−１０、同２０、同３０、同４０．同５０
、セパビーズ５Ｐ−２０６，同２０７、同８００、・同
９００（いずれも三菱化成株式会社製品）、アンバーラ
イトＸＡＤ−２、同７、同８（いずれもロームアンドハ
ース社製品）などがある。

また、２．３′，４，Ｓ’−テトラヒドロキシスチルベ
ンヲ含有する上記含水親水性有機溶媒抽出物を水に溶か
し、得られた水溶液を炭素数４〜６の一級アルコールま
たは炭素数４〜６のエステルを抽出溶媒として抽出処理
することにより、２．３′，４，５’−テトラヒドロキ
シスチルベンを精製することもできる。この場合に使用
するのに好ましい抽出溶媒の具体例としては、■−ブタ
ノール、１ｅｒｔ−フタノール、鳳−アミルアルコール
、ｎ−ヘキサノール、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸
ブチルなどがある。抽出操作としては、液−液向流分配
が適当である。抽出後、有機溶媒層を採取し、溶媒を留
去して乾燥すると、純度約４０〜６０％の２．３′，４
，！’−テトラヒドロキシスチルベンが得られる。

いずれの精製法により得られたものも、美白外用剤配合
用２．３′，４，Ｓ’−テトラヒドロキシスチルベンと
して使用可能であるが、これをシリカゲルクロマトグラ
フィーまたは逆相シリカゲルクロマトグラフィーなどの
方法で精製すると、さらに高純度のものを得ることがで
きる。

上述のようにして得られる！、３′，４，５’−テトラ
ヒドロキシスチルベンは合成品と同様の優れた美白作用
を示すので、水、含水アルコール、プロピレングリコー
ル、１、トブチレングリコール等に溶解して、化粧水、
クリーム、乳液、バック等、任意の形態の美白外用剤に
美白作用物質として配合することができる。適当な配合
率は、基剤（他の美白外用剤構成成分）に対して通常０
．００１〜ｏ、ｉ％程度である。

（実施例〕 以下、実施例を示して本発明を説明する。なお、各偶に
おいて２．３′，４，５’−テトラヒドロキシスチルベ
ンの定量は高速液体クロマトグラフィーにより行なった
。

実施例１ ヤマグワ根皮の細切物５００ｇを５ｔの９０％エタノー
ルとともに２時間還流下に加熱して、９０％エタノール
可溶成分を抽出した。抽出残渣について同様の操作を繰
り返し、合計８．８Ｑの抽出液を得た。抽出液のエタノ
ールを留去し、さらに乾燥して、゛抽出物３３．１ｇを
得た。この抽出物に５直の温水を加え、６０°Ｃで３０
分撹拌した後、不溶物を遠心分離で除き、清澄な水溶液
を得た。この水溶液を、１１１ＩのダイヤイオンＨＰ　
−２０を詰めたカラム８内径５ｃｍ）に空間速度２７Ｆ
ｉｒで通し、その後、カラムを５Ｉｌの水で洗浄した。

次いで５５％エタノール１０Ｑを用いて被吸着物を脱着
させ、脱着液を濃縮、乾燥すると、２．３′，４，５’
−テトラヒドロキシスチルベン含有率４８％の、淡褐色
無臭の粉末３．１ｇが得られた。

実施例２ ヤマグワ根皮の細切物１００ｇを１１の９５％メタノー
ルとともに２時間還流下に加熱して、９５％メタノール
可溶成分を抽出した。抽出残渣について同様の操作を繰
り返し、合計１．７１の抽出液を得た。抽出液のメタノ
ールを留去し、残渣に温水１Ｍを加えて３０分撹拌した
後、不溶物を除き、清澄な水溶成約Ｉｎ＋を得た。この
水溶液に酢酸エチル１１１を加えて１５分間激しく撹拌
した後、静置し、酢酸エチル層を分取した。酢酸エチル
層から酢酸エチルを留去し、さらに乾燥すると、２．３
′，４，Ｓ’−テトラヒドロキシスチルベン含有率６２
％の、淡褐色無臭の粉末２．４ｇが得られた。

実施例３ 実施例１で得られた粗２．３′，４，５’−テトラヒド
ロキシスチルベン１．０ｇを水２００ｍ１に溶解し、酢
酸ｎ−ブチル２００ｍ１を加えて分液ロートに移した後
、激しく振とうした。１０分間静置後、酢酸ｎ−ブチル
層を分取し、減圧下で蒸留、乾燥を行い、乾燥物０．６
５ｇを得た。乾燥物を３ｍｌのエタノールに溶解後、順
相シリカゲル（ワコーゲルＣ−３００；和光純薬工業株
式会社）１０ｇを加え、真空乾燥した。得られた乾燥物
を、あらかじめシリカゲル３００ｇを充填したカラム（
内径４．０ｃ■）の上に積層充填し、クロロホルム／メ
タノール／水混合液（６５：　２０　：　３）で溶出し
、２．３′，４，Ｓ’−テトラヒドロキシスチルベン画
分０．４１ｇを得た。この両分を２ｍｌのメタノールに
溶解し、逆相シリカゲル（３０〜５０メツシユ、０ＤＳ
Ｇ−３。

水戸化学技術研究所）２ｇを加えて乾燥した。この逆相
シリカゲルを、あらかじめ逆相シリカゲル２５０ｇを充
填したカラム（内径２．５ｃｍ）に積層充填し、水／ア
セトニトリル（１８／８２）で溶出し、ｔ：３′、ｓ、
ｖ−テトラヒドロキシスチルベン画分を採取した。この
両分を減圧下で濃縮乾燥し、はとんど無色の、精製２．
３’。

４．５′−テトラヒドロキシスチルベン０．３２ｇを４
だ。

上記各偶による製品、ならびに対照品としてのアスコル
ビン酸について、チロシナーゼ活性阻害作用を調べた結
果は次のとおりであった。

５０％阻害添加量　阻害効果比 実施例１製品　　　０．０Ｏ０６２ｓＨ４５２実施例２
製品　　　０．０Ｏ０５４Ｂ　　　５１８実施例３製品
　　　０．０００３３ｍｇ　　　８４Ｂアスコルビン酸
　　０．２８Ｂ　　　　　　　　ｌなお、チロシナーゼ
阻害活性は次の方法により測定し　ｊこ。

［試薬］ Ａ：Ｌ−チロシン溶液（１、Ｏｕ／ｍｌ）　０．５　ｍ
ｌＢ　：　Ｍ／＋５リン酸緩衝液（ｐＨ６，８）２．０
ｍ１Ｃ：１％硫酸銅溶液０．０５ｍ１ Ｄ：チロシナーゼ溶液（６層ｇ／１０Ｇ＋ｗｌ）　０．
５　ｍｌ［試料溶液Ｊ 試料をエタノールに溶解した後、ｌ１１１５０リン酸緩
衝液で希釈する。１回２１を使用。

Ｅ操作］ ■　試料溶液にＡ、Ｉ３．Ｃ，Ｄの各液を加え、３７°
Ｃで１時間インキュベートしたのち６４０　ｌ１ｍの吸
光度Ａ５を測定する。

■　Ｅ液の代わりにｍ１５Ｇリン酸緩衝液２．０１を加
え、■と同様に操作して、６４０　ａｍの吸光度Ａ音測
定する。

■　Ｄ液の代わりに精製水を０．５１加え、■と同様に
操作して、６４０　ａｍの吸光変人〇を測定する。

■　種々の濃度の試料溶液について上記測定を行い、次
式によるチロシナーゼ阻害率が５０％になる試料添加量
を内挿法で求める。

〔発明の効果〕

本発明によれば、上述のように天然物であるヤマグワを
原料にして合成法によることなしに２．３′・、４．Ｓ
’−テトラヒドロキシスチルベンを製造することができ
、コスト低減が可能であるだけでなく、製品を美白外用
剤に使用する場合、安全性の点でも有利である。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ヤマグワの根皮を含水親水性有機溶媒で抽出処理し、得
   られた抽出物より２，３′，４，５′−テトラヒドロキ
   シスチルベンを採取すること特徴とする２，３′，４，
   ５′−テトラヒドロキシスチルベンの製造法。