JPH03101623A - インフルエンザウィルス感染予防剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はインフルエンザウィルス感染予防剤に関し、詳
しくはインフルエンザＡ型およびＢ型ウィルスの感染を
阻止することによるインフルエンザウィルス感染予防剤
に関する。

〔従来の技術、発明が解決しようとする課題〕インフル
エンザは過去周期的に人類を襲い、何千万人という死亡
者を出してきた。ここ数年は栄養・衛生面が改善され、
さらに医学的技術進歩により他の感染症は減少し、イン
フルエンザは以前ほどの脅威がなくなったとはいえ、い
まなお空中感染によって不特定多数の人々が感染し、毎
年のように流行を引き起こしている． これまでにインフルエンザ感染を予防する薬剤として種
々提案されているが、その効果は十分なものではない。

現在、ワクチン接種が主たるインフルエンザ予防法とさ
れているが、ウィルス抗原の絶えざる変異に対応しつつ
ワクチン開発を続けるのは多大な困難が伴う上、威功率
も低い。抗原性に依存せずウィルスの感染を有効に防ぎ
、さらに人体に対し有害な副作用を持たず安心して使用
できる薬剤の開発が望まれている． 〔課題を解決するための手段〕 そこで、本発明者は化学合戒品でなく、天然物の中から
目的とする薬効を有する物質を検索すべく研究を重ねた
結果、茶および茶ポリフェノール類に該物質が含まれて
いることを見出し、本発明に到達した。

インフルエンザウィルスは核蛋白質および膜蛋白質の血
清型によりＡ，Ｂ，Ｃの３型に分類される。

ヒト以外にトリ，ブタ，ウマなどにも感染し、Ａ型が最
も悪性である。インフルエンザウィルスは動物細胞に感
染し増殖するが、その感染開始にはウィルス粒子表面に
存在する糖蛋白質へマグルチニン（ＨＡ）が大きく関与
している。ヘマグルチニンは細胞融合能を持ち、ウィル
ス膜と細胞膜とを融合し、細胞内へウィルス核酸を侵入
させて感染を威立させる．標的細胞として赤血球を用い
た場合、ヘマグルチニン活性により赤血球は凝集し、細
胞融合と溶血が観察される。一方、ウィルスの細胞膜か
らの遊出をつかさどるのがノイラミニダーゼ（ＮＡ）で
あり、その活性を抑制することば同様にウィルス感染を
阻止することにつながる。

本発明者は茶および茶ポリフェノール類を主成分とする
本発明物質がこのヘマグルチニンおよびノイラごニダー
ゼの活性を失活させ、インフルエンザの細胞への感染を
阻止することを見出した。

゜感染阻止は赤血球凝集作用だけではなくウィルスの増
殖にともなうブラーク形戒においても確かめられた。本
発明物質によりウィルスあるいは細胞のいづれかを処理
することにより、この感染阻止能は発現し、それにより
インフルエンザの予防が可能となる。さらに、抗原性を
利用していないため、ワクチンのように有効性が制限さ
れることはない。本発明は茶を有効威分とするインフル
エンザウィルス感染予防剤を提供するものである。

本発明のインフルエンザウィルス感染予防剤の主成分で
ある茶ポリフェノールは、下記の一般弐■で表される茶
カテキン類と一般式■で表される茶テアフラビン類であ
る。

一般式 ０■ （−）エビ力テキンガレート ｆｌ｝ｌ （−）エピガロカテキンガレート ０■ ０Ｈ カチキン類を具体的に示すと、以下のものがある。

（−）エビカテキン （一般式■中、Ｒ．＝Ｈ，Ｒｔ＝Ｈ） （−）エピガロカテキン （一般式Ｉ中、Ｒ，＝ＯＨ，Ｌ＝Ｈ） テアフラビン類を具体的に示すと、以下のものがある． 遊離型テアフラビン （一般式■中、Ｒｊ＝Ｈ，Ｒ．＝Ｈ） テアフラビンモノガレートＡ テアフラビンジガレート（一般式■中、上記茶ポリフェ
ノールは茶葉を原料として製造することができ、その製
法や組或の１例は特開昭５９−２１９３８４号公報，同
６０−１３７８０号公報．同６１−１３０２８５号公報
などに記載されている。

本発明のインフルエンザウィルス感染予防剤を飴などの
食品，うがい薬，トローチなどの薬剤にする場合は、上
記した主威分である茶ポリフェノールおよび茶を直接ま
たは水，アルコール等に溶解させて混合すればよい。そ
の際の濃度は茶は通常飲用濃度（２　ｇ／１　０　０ｄ
）の１〜２６０倍希釈濃度、茶ポリフェノールは１−１
００μｇ　／　ｍｌである． 〔実施例〕 次に、本発明を実施例により説明する。

ａ）　ウィルス：インフルエンザＡ型ウイルスＡ／Ｓｉ
ｃｈｕａｎ／２／８７　（ｔｌ３Ｎ２）インフルエンザ
Ｂ型ウィルス Ｂ／ＵＳＳＡ／１００／８３Ｂ ｂ）紅茶：紅茶　２０　ｗ／ｖ　’Ｘ，　　リン酸パッ
ファ一［ＰＢＳ］抽出液。

Ｃ）　エピガロカテキンガレートおよびテアフラビンジ
ガレートは緑茶および紅茶から分離精製した標品をＰＢ
Ｓでｌ■／一に溶解。

紅茶および茶ポリフェノールは上記ａ），ｂ）をさらに
希釈して用いた。

ウィルス　　　　　　　　の　　： ０．５％ニワトリ赤血球を用い、１時間で判定した。

１ｊ：づｑ肚定： イヌ腎臓継代細胞［ＭＤＣＫ］を用いた。ウィルス増殖
用培地には、トリブシン２μｇ　／　！ＩＩ１，牛血清
アルブミン０．４％，基本培地イーグルビタξンを含む
０．９％寒天培地を用いた．細胞にウィルスを感染後、
培地を上掛けし、３３．５゜Ｃで３〜５日培養した。こ
れをホルマリンで固定後、寒天を除去、メチレンプルー
染色をしてプラークを算出した． 蒐３１創魂泣暮』■Ｕ茫察： ホスホトランスアセチラーゼ［ＰＴＡｌ染色法によった
。

実施例１ インフルエンザＡ型ウィルスを紅茶抽出液、あるいはエ
ピガロカテキンガレート（Ｅｃｃｇ）で３０分〜ｌ時間
処理し、血液凝集活性（ヘマグルチニン活性）および感
染性（ブラーク数）を調べた。

その結果は以下の通りである。

血清凝集活性：３０分処理後の血清凝集活性（ヘマグル
チニン活性）は、１０倍希釈濃度の紅茶で完全に失活し
た。

感染性（プラーク測定）：１時間処理 以上のようにウィルスを直接処理することにより、その
感染を阻止することができた。

なお、ヘマグルチニン（ＨＡ）活性阻止および感染性阻
止は、紅茶およびＥＧＣｇ濃度依存性であった（第１図
参照）。

実施例２ インフルエンザＡ型ウィルスの細胞感染後の増殖を阻止
できるか否かを調べた．ウィルスを感染させた動物細胞
（ＭＤＣＫ）を、８０倍希釈濃度になるように紅茶を添
加した培地、あるいは無添加の培地（コントロール）中
へ投入し４８〜９６時間培養した。

培養後、各培地上清中のへマグルチニン（ＨＡ）活性を
調べた。培養開始時のウィルス活性はあらかじめプラー
ク・アッセイを行って２グループ間に差がないことを確
認した。

その結果、コントロール培地は、感染４８時間後のＨＡ
活性が５１２であったのに対し、紅茶８０倍希釈濃度添
加培地では、９６時間後でもＨＡ活性は認められなかっ
た。

実施例３ 感染前の細胞を前処理することにより、インフルエンザ
Ａ型ウィルスの感染を阻止できるか否かを調べた． ＭＤＣＫ細胞をあらかじめ紅茶あるいはＥＧＣｇで１時
間処理した後にウィルスを感染させ、プラーク・アッセ
イを行った。

結果を以下に示す． 以上のように、感染前の細胞を前処理することにより、
インフルエンザウィルスの感染を阻止できることが確認
された。

実施例４ 実施例１と同様な実験でインフルエンザＢ型ウィルスの
感染を阻止できるか否かを調べた。

結果を下表に示す。

ｄＰ３：テアフラビンジガレート 以上のようにＢ型ウィルスに対しても細胞を前処理する
ことにより、感染を阻止できることが確認された。

実施例５ インフルエンザＢ型ウィルスに対する感染阻止率をノイ
ラξニダーゼ（ＮＡ）活性で比較検討した。方法として
は、Ｆｅｔｕｉｎを基質としてＴＢＡ法で′Ｍ離シアル
酸を測定した。その結果、以下の表に示すように無処理
のコントロールのＮＡ活性が１１であるのに対し、紅茶
，エピガロカテキンガレー｝　（ＥＧＣｇ），テアフラ
ビンジガレート（Ｔ　Ｆ　３　）で処理することにより
ＮＡ活性は８〜２までに減少し、これらの感染阻止効果
が確認された。

実施例６ ＥＧＣｇをウィルス液に添加し、その様子を電子顕微鏡
で調べた。その結果、ＥＧＣｇ添加により瞬時にウィル
スの凝集塊が観察され、ＥＧＣｇが抗ウィルス剤の機能
を有することが確認された。

実施例７ 紅茶と市販うがい薬を各々インフルエンザウィルスに１
時間処理し、各′Ｉｊ４度におけるプラーク減少効果を
調べた．市販うがい薬Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄの主要成分は以下
の通りである。

Ａ：塩化デカリニウム，チモール Ｂ：ボビドンヨード Ｃ：水溶性アズレン．塩化ペンゼトニウムＤ＝セチルピ
リジニウムクロライド 結果を第２図に示す。第２図から明らかなように、常用
濃度では、うがい薬ＢおよびＤに感染阻止効果が認めら
れたが、紅茶に比べてその効果は十分ではなかった。

〔発明の効果〕

本発明のインフルエンザウイルス感染予防剤は、日常相
当量飲用されている天然物を主成分とするため、薬剤と
してはもとより食品に添加しても人体に対する副作用の
心配がなく、しかも低濃度のでインフルエンザウィルス
の感染を阻止することができる。従って、本発明品は極
めて有用なインフルエンザウィルス感染予防剤である。

【図面の簡単な説明】

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）茶を有効成分とするインフルエンザウィルス感染
   予防剤。
2. （２）茶の成分である茶ポリフェノールを有効成分とす
   る請求項１記載のインフルエンザウィルス感染予防剤。
3. （３）茶ポリフェノールがエピガロカテキンガレート、
   エピカテキンガレート、エピガロカテキン、エピカテキ
   ン、（＋）カテキンおよびこれらの異性体、遊離型テア
   フラビン、テアフラビンモノガレートＡ、テアフラビン
   モノガレートＢ並びにテアフラビンジガレートの中から
   選ばれた少なくとも１種の物質である請求項１記載のイ
   ンフルエンザウィルス感染予防剤。