JPH025957A - 血液、血液誘導体、血漿乃至は血漿誘導体の殺菌方法 - Google Patents
血液、血液誘導体、血漿乃至は血漿誘導体の殺菌方法Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は生理学的に無害な殺菌剤による血液、血漿、血
液及び血漿誘導体、細胞懸濁液乃至はその類似物の殺菌
方法に関する。
液及び血漿誘導体、細胞懸濁液乃至はその類似物の殺菌
方法に関する。
（従来の技術及び発明が解決しようとする課題）ヒト血
液、ヒト血漿或いはそれらの誘導体は潜在的にウィルス
性感染の媒介の危険を伴う。
液、ヒト血漿或いはそれらの誘導体は潜在的にウィルス
性感染の媒介の危険を伴う。
特に、ＩＩＩＶ ５ＩＩＮＡＮｎＶ、ＩＩＢＹ（７）ヨ
うナヒト病源性脂質ウィルスは特別な役割を果たす。こ
の理由から、ヒト血液或いは血漿から誘導される製剤は
ウィルス不活性にされなければならない。
うナヒト病源性脂質ウィルスは特別な役割を果たす。こ
の理由から、ヒト血液或いは血漿から誘導される製剤は
ウィルス不活性にされなければならない。
因子■或いは因子ＩＸａ縮物のような凝固している製剤
は熱によって殺菌できるが（欧州特許第３７０７８号）
、そのような処理に耐えるためのかなりの量の安定剤が
要求される。他の方法においては、製剤は追加の有機溶
剤、圧力乃至は蒸気の組合わせの使用を伴って凍結状態
で加熱される。
は熱によって殺菌できるが（欧州特許第３７０７８号）
、そのような処理に耐えるためのかなりの量の安定剤が
要求される。他の方法においては、製剤は追加の有機溶
剤、圧力乃至は蒸気の組合わせの使用を伴って凍結状態
で加熱される。
脂質溶剤と界面活性剤の組合わせ或いは紫外線照射と組
合わせたβ−プロピオラクトン（欧州特許第１４３３３
号）のような化学剤もまた使用される。
合わせたβ−プロピオラクトン（欧州特許第１４３３３
号）のような化学剤もまた使用される。
これらの方法の全ては種々の有利性を示すが、適用或い
は効能を害する不利性をも示す。加熱殺菌のために加え
られた溶液中の物質は凝固因子最終製品中に再び移され
なければならない。
は効能を害する不利性をも示す。加熱殺菌のために加え
られた溶液中の物質は凝固因子最終製品中に再び移され
なければならない。
凍結状態での加熱においては、不十分にｖＡ準化された
残余の含水量が方法の有効性を決定する。
残余の含水量が方法の有効性を決定する。
更に、血液の多くの成分は凍結できない。β−プロピオ
ラクトン／紫外線照射は因子■のみを収率の損失なく殺
菌するのに用いることができる。溶剤と界面活性剤は入
念な方法によって生物学的物質から再び除去しなければ
ならない。
ラクトン／紫外線照射は因子■のみを収率の損失なく殺
菌するのに用いることができる。溶剤と界面活性剤は入
念な方法によって生物学的物質から再び除去しなければ
ならない。
これまでは、細胞懸濁液の殺菌は不可能であった。例え
ば、赤血球には細胞が破懐されるので加熱殺菌方法は適
していない。化学的方法（界面活性剤、溶剤或いはβ−
プロピオラクトン）はまた細胞の完全な或いは部分的な
溶血をもたらす。白血球細胞の懸濁液はやはりこの方法
では殺菌できない。
ば、赤血球には細胞が破懐されるので加熱殺菌方法は適
していない。化学的方法（界面活性剤、溶剤或いはβ−
プロピオラクトン）はまた細胞の完全な或いは部分的な
溶血をもたらす。白血球細胞の懸濁液はやはりこの方法
では殺菌できない。
要約すれば、非生理学的な条件と物質がこれまでに述べ
てきた全ての殺菌方法において使用されている。
てきた全ての殺菌方法において使用されている。
本発明は生理学的条件下で且つ生理学的な物質によって
行う血液／血漿或いはそれらの誘導体、細胞懸濁液の殺
菌に適したウィルス不活性な方法を提供するという課題
に基づいている。
行う血液／血漿或いはそれらの誘導体、細胞懸濁液の殺
菌に適したウィルス不活性な方法を提供するという課題
に基づいている。
殺菌されるべき生物学的物質中に残ることができる生理
学的に十分に許容された物質が殺菌剤として使用される
。
学的に十分に許容された物質が殺菌剤として使用される
。
（課題を解決するための手段）
本発明によれば、この課題は殺菌剤としてビタミン或い
はその水溶性塩の使用によって解決される。ビタミンは
自然の生理学的物質で、その抗感染、健康増進活性は既
に知られている。
はその水溶性塩の使用によって解決される。ビタミンは
自然の生理学的物質で、その抗感染、健康増進活性は既
に知られている。
更に、人体はビタミンの供給に依存するので、ビタミン
は殺菌されるべき生理学的物質から除かれなくてもよい
。好ましいビタミンはビタミンＡ、ＢＳＢいＢ６、Ｂ１
０、Ｃ及びＥである。好ましい塩はビタミンＡアセター
ト、ビタミンＥアセタートのようなアセタートである。
は殺菌されるべき生理学的物質から除かれなくてもよい
。好ましいビタミンはビタミンＡ、ＢＳＢいＢ６、Ｂ１
０、Ｃ及びＥである。好ましい塩はビタミンＡアセター
ト、ビタミンＥアセタートのようなアセタートである。
殺菌は、殺菌されるべき生理学的物質をビタミン０，０
１〜１．ＯｖＬ％（殺菌剤容量％当り）、好ましくは０
．２％と混合し、ｐＨは５．６〜８．５に調整し、イン
キュベートを１０〜５０℃で２４時間まで撹拌すること
によって遂行される。
１〜１．ＯｖＬ％（殺菌剤容量％当り）、好ましくは０
．２％と混合し、ｐＨは５．６〜８．５に調整し、イン
キュベートを１０〜５０℃で２４時間まで撹拌すること
によって遂行される。
好ましくはｐｌｌｌｉ［Ｉは７，１５で温度２３〜３７
℃、より好ましくは２３℃或いは３７℃である。好まし
い殺菌時間は３〜４時間である。もし必要ならば、ビタ
ミンの溶解性を向上させるために溶解媒体を加えること
ができる。好ましい溶解補助剤は例えばトウイーン８０
（Ｔｖｃｃｎ ８０ ）である。
℃、より好ましくは２３℃或いは３７℃である。好まし
い殺菌時間は３〜４時間である。もし必要ならば、ビタ
ミンの溶解性を向上させるために溶解媒体を加えること
ができる。好ましい溶解補助剤は例えばトウイーン８０
（Ｔｖｃｃｎ ８０ ）である。
（発明の効果）
本発明による方法は血液、血液細胞、血液血漿、血液血
清、血ｉ（ｌ細胞成分（例えば、インターフェロン、イ
ンターロイキン或いはヘモグロビン、赤血球細胞濃縮物
或いは顆粒球、血小板、リンパ球等のような他の細胞性
血液化音物のｌａ縮物）や血漿誘導物（例えば血漿凍結
貧血漿、凝固因ｒ１寒冷沈降物（例えば、因−ｒ■、■
、Ｘ１℃等）、イムノグロブリン、阻害因子、α１アン
チトリプシン、アンチトロンビン■等）のウィルス不活
性を可能にする。
清、血ｉ（ｌ細胞成分（例えば、インターフェロン、イ
ンターロイキン或いはヘモグロビン、赤血球細胞濃縮物
或いは顆粒球、血小板、リンパ球等のような他の細胞性
血液化音物のｌａ縮物）や血漿誘導物（例えば血漿凍結
貧血漿、凝固因ｒ１寒冷沈降物（例えば、因−ｒ■、■
、Ｘ１℃等）、イムノグロブリン、阻害因子、α１アン
チトリプシン、アンチトロンビン■等）のウィルス不活
性を可能にする。
殺菌剤、即ちビタミンはウィルス不活性化されるべき生
理学的物質中に残存することができる。しかし、それは
、洗浄、ゲル濾過、吸着或いは限外濾過によって殺菌さ
れた製剤から容易に除去できる。
理学的物質中に残存することができる。しかし、それは
、洗浄、ゲル濾過、吸着或いは限外濾過によって殺菌さ
れた製剤から容易に除去できる。
（実施例）
次に本発明を実施例につき説明する。
下記の実施例においては、本発見によるウィルス不活化
を示すためにセンダイウィルスが使用された。センダイ
ウィルスはヒト病原性脂質ウィルスｌｌ３Ｖ 、 ＩＩ
ＮＡＮＩ３Ｖ及びＩＩＩＶノ、？：めノモデルウイルス
として実験において非常に効果的であることか証明され
ている。
を示すためにセンダイウィルスが使用された。センダイ
ウィルスはヒト病原性脂質ウィルスｌｌ３Ｖ 、 ＩＩ
ＮＡＮＩ３Ｖ及びＩＩＩＶノ、？：めノモデルウイルス
として実験において非常に効果的であることか証明され
ている。
更に、ヘルペスウィルスＨ５Ｖ−１を使用した。
実施例１
ビタミンＣによる血漿の殺菌
１００ｍ１のヒト血漿をセンダイウィルスてｔυ染した
後、０．２’、６のビタミンＣと混合した。その混合物
を２３℃、ｐＨ７，１５で４時間インキュベートした。
後、０．２’、６のビタミンＣと混合した。その混合物
を２３℃、ｐＨ７，１５で４時間インキュベートした。
やはり、センダイウィルスで汚染された対照サンプルを
ビタミンを加えないこと以外は前記と同じ条件でインキ
ュベートした。これらサンプルをインキュベート後、−
８０℃で直ちに冷凍した。センダイウィルスの感染力価
はインキュベートされた叩上で測定した。対照サンプル
においては１０２７感染単位／ｍｌの力価が見られた。
ビタミンを加えないこと以外は前記と同じ条件でインキ
ュベートした。これらサンプルをインキュベート後、−
８０℃で直ちに冷凍した。センダイウィルスの感染力価
はインキュベートされた叩上で測定した。対照サンプル
においては１０２７感染単位／ｍｌの力価が見られた。
ビタミンＣによるサンプルにおいては感染性ウィルスは
＞２．７１０ｇ＋ｏの不活化に対応してもはや発見され
なかった。
＞２．７１０ｇ＋ｏの不活化に対応してもはや発見され
なかった。
実施例２
０．９９６塩化ナトリウムで３回洗浄したヒト赤血球を
センダイウィルス（希釈１：Ｉｏｏ ）で汚染した。０
．２５％ビタミンＥアセタートをウィルスで汚染された
赤血球の１アリコツトに加え、その混合物を３７℃で３
時間インキュベートした。
センダイウィルス（希釈１：Ｉｏｏ ）で汚染した。０
．２５％ビタミンＥアセタートをウィルスで汚染された
赤血球の１アリコツトに加え、その混合物を３７℃で３
時間インキュベートした。
第２のウィルスで汚染した１アリコツトをビタミンの添
加なしにインキュベートした。下記の全ての実施例にお
いては、対照サンプルは同様に処理した。感染性センダ
イウィルスの力髄は感染幼包蔵卵中で力価測定し、赤血
球凝集アッセイによって抗原決定した。
加なしにインキュベートした。下記の全ての実施例にお
いては、対照サンプルは同様に処理した。感染性センダ
イウィルスの力髄は感染幼包蔵卵中で力価測定し、赤血
球凝集アッセイによって抗原決定した。
未処理サンプルにおいては５ Ｘ １０４センダイウイ
ルス／ ｍｌが見られたのにビタミンＥアセタートサン
プルにおいては＞４．７１０ｇ＋。のウィルス力価の減
少に対応して感染性センダイウィルスは検出されなかっ
た（表１）。
ルス／ ｍｌが見られたのにビタミンＥアセタートサン
プルにおいては＞４．７１０ｇ＋。のウィルス力価の減
少に対応して感染性センダイウィルスは検出されなかっ
た（表１）。
表 Ｉ
ビタミンＥによるヒト赤血球濃縮物中における実施例３
３回洗浄したヒト赤血球をヘルペスウィルス（Ｈ３ＶＩ
）で汚染し、良好な溶解度のためにトゥイーン８０（
０，０７５％１０１ロ■％）を補充したビタミンＥアセ
タートを用いて実施例２と同様にして処理した。
）で汚染し、良好な溶解度のためにトゥイーン８０（
０，０７５％１０１ロ■％）を補充したビタミンＥアセ
タートを用いて実施例２と同様にして処理した。
ヘルペスウィルスはプラークカウンティングによって細
胞培ｉｔ （１？１ｔａ−ｃｅｌｌｓ）上で力価７１１
ｌｌ定した。
胞培ｉｔ （１？１ｔａ−ｃｅｌｌｓ）上で力価７１１
ｌｌ定した。
その結果を表■に示す。トウイーン８０だけ、はとんど
ウィルス不活化活性を示さない。たとえビタミンＥとの
組合わせで使用されたものより１０倍以上高い濃度でさ
え効果はない。
ウィルス不活化活性を示さない。たとえビタミンＥとの
組合わせで使用されたものより１０倍以上高い濃度でさ
え効果はない。
表 ■
ビタミンＥによるヒト赤血球濃縮物中におけるヘルペス
ウィルス（Ｈ５Ｖ利）の不活化施例１で述べられている
のと同様にして行なった。ビタミンＡアセタートでの処
理は ＞ ２．７１０８ｔｏのセンダイウィルスの減少をもた
らした（表■）。
ウィルス（Ｈ５Ｖ利）の不活化施例１で述べられている
のと同様にして行なった。ビタミンＡアセタートでの処
理は ＞ ２．７１０８ｔｏのセンダイウィルスの減少をもた
らした（表■）。
実施例５
ヒト血漿を実施例４で述べられているのと同様にしてセ
ンダイウィルスで汚染し、トウイーン８０ （０，１５
％）を補充されたビタミンＡアセタート（０，５％）で
処理した。
ンダイウィルスで汚染し、トウイーン８０ （０，１５
％）を補充されたビタミンＡアセタート（０，５％）で
処理した。
この処理によって２．ＯＩＯｇ＋ｏのセンダイウィルス
不活性が達成された（表■）。
不活性が達成された（表■）。
表 ■
ビタミンＥアセタートによるヒト血漿におけるセンダイ
ウィルスの不活化 実施例４ ヒト血漿をセンダイウィルスで汚染しく希釈１：５０）
、汚染された血漿の１アリコツトを０．２９６ビタミ
ンＡアセタートの存在下で２３℃で３時間インキュベー
トした。ウイルス力価ａＦＪ定は実実施例６ ヒト血漿をセンダイウィルスで汚染し、ビタミンａｓ（
０，２％）で処理した。インキュベーションは２３℃で
３時間行った。センダイウィルスの力価測定は前記と同
様にして行った。センダイウィルスの感染力価はビタミ
ン８６による処理によって＞ ２．７１ｏｇ＋ｏに減少
された（表■）。
ウィルスの不活化 実施例４ ヒト血漿をセンダイウィルスで汚染しく希釈１：５０）
、汚染された血漿の１アリコツトを０．２９６ビタミ
ンＡアセタートの存在下で２３℃で３時間インキュベー
トした。ウイルス力価ａＦＪ定は実実施例６ ヒト血漿をセンダイウィルスで汚染し、ビタミンａｓ（
０，２％）で処理した。インキュベーションは２３℃で
３時間行った。センダイウィルスの力価測定は前記と同
様にして行った。センダイウィルスの感染力価はビタミ
ン８６による処理によって＞ ２．７１ｏｇ＋ｏに減少
された（表■）。
０．１％ビタミンＢ６による処理は０．ｌｌ０ｇ＋ｏの
不活化をもたらした。
不活化をもたらした。
実施例１
ヒト血漿をセンダイウィルスで汚染し、ビタミンＢ＋□
（０，２％）で処理した。ビタミンＢＩ２による処理で
達成されたセンダイウィルスの不活性化は＞ ２．７１
０ｇ＋ｏであった（表■）。
（０，２％）で処理した。ビタミンＢＩ２による処理で
達成されたセンダイウィルスの不活性化は＞ ２．７１
０ｇ＋ｏであった（表■）。
表 ■
ビタミンＢによるヒト血漿中におけるセンダイウィルス
の不活化 前記と同様にして洗浄したヒト赤血球をヘルペスウィル
ス（Ｈ３Ｖ−１）によって１６染し、ビタミンＡアセタ
ート（０，２％）とトウイーン８０（０，０７５％）に
よって処理した。この処理による感染性Ｈ３Ｖ−１の力
価の減少は２．０１ｏｇｌｏであった（表Ｖ）。
の不活化 前記と同様にして洗浄したヒト赤血球をヘルペスウィル
ス（Ｈ３Ｖ−１）によって１６染し、ビタミンＡアセタ
ート（０，２％）とトウイーン８０（０，０７５％）に
よって処理した。この処理による感染性Ｈ３Ｖ−１の力
価の減少は２．０１ｏｇｌｏであった（表Ｖ）。
実施例９
ヒト赤血球をヘルペスウィルス（Ｈ５Ｖ−１）で汚染し
、ビタミンＢ１゜で処理した。感染性１１３Ｖ−＋の力
価はビタミンＢ１□による処理によって１．０１０ｇ＋
ｏに減少された（表Ｖ）。
、ビタミンＢ１゜で処理した。感染性１１３Ｖ−＋の力
価はビタミンＢ１□による処理によって１．０１０ｇ＋
ｏに減少された（表Ｖ）。
表 ■
ビタミンＡ及びビタミンＢ１□によるヒト赤血球中にお
けるヘルペスウィルス（Ｈ５Ｖ−１）の不活化 実施例８
けるヘルペスウィルス（Ｈ５Ｖ−１）の不活化 実施例８
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、殺菌剤としてビタミン或いはプロビタミンを用いる
血液、血液誘導体、血漿乃至は血漿誘導体の殺菌方法。 ２、ビタミン或いはプロビタミンの水溶性塩を用いるこ
とを特徴とする請求項１に記載の方法。 ３、ビタミンを組合わせて用いることを特徴とする請求
項１または２に記載の方法。 ４、ビタミンＡを用いることを特徴とする請求項１に記
載の方法。 ５、ビタミンＥを用いることを特徴とする請求項１に記
載の方法。 ６、ビタミンＢ又はビタミンＣを用いることを特徴とす
る請求項１に記載の方法。 ７、ビタミンＡアセタート及び／又はビタミンＥアセタ
ートを用いることを特徴とする請求項２又は３に記載の
方法。 ８、ビタミンＢ＿１、ビタミンＢ＿６又はビタミンＢ＿
１＿２を用いることを特徴とする請求項１又は６に記載
の方法。 ９、ビタミンの水溶液中での溶解度を向上させることが
できる物質を用いることを特徴とする請求項１乃至８の
何れか１項に記載の方法。 １０、トゥイーン８０を用いることを特徴とする請求項
９に記載の方法。 １１、ビタミンの濃度は０．０１〜１．０％の範囲、好
ましくは０．２％であることを特徴とする請求項１乃至
１０の何れか１項に記載の方法。 １２、インキュベーションは１０〜５０℃、好ましくは
２３〜３７℃の範囲、より好ましくは２３℃或いは３７
℃で行うことを特徴とする請求項１乃至１１の何れか１
項に記載の方法。 １３、インキュベーションの時間は１〜２４時間、好ま
しくは３〜４時間であることを特徴とする請求項１乃至
１２の何れか１項に記載の方法。 １４、血液誘導体は赤血球濃縮物、顆粒球、血小板、リ
ンパ球等の他の細胞性血液成分の濃縮物、或いは血清で
あることを特徴とする請求項１乃至１３の何れか１項に
記載の方法。 １５、血漿誘導体は血漿凍結貧血漿、凝固因子、寒冷沈
降物（例えば因子VIII、IX、Ｘ、ＸIII等）、成いはイ
ムノグロブリンであることを特徴とする請求項１乃至１
３の何れか１項に記載の方法。 １６、血漿誘導体はα＿１アンチトリプシン、アンチト
ロンビンIII等の阻害因子であることを特徴とする請求
項１乃至１５の何れか１項に記載の方法。 １７、殺菌剤は洗浄、ゲルろ過、吸着或いは限外ろ過に
よって殺菌された製剤から除去可能であることを特徴と
する請求項１乃至１６の何れか１項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3805459A DE3805459A1 (de) | 1988-02-22 | 1988-02-22 | Verfahren zur sterilisation von blut, plasma, blut- und plasmaderivaten, zellsuspensionen oder dgl. |
| DE3805459.0 | 1988-02-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH025957A true JPH025957A (ja) | 1990-01-10 |
Family
ID=6347890
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1040470A Pending JPH025957A (ja) | 1988-02-22 | 1989-02-22 | 血液、血液誘導体、血漿乃至は血漿誘導体の殺菌方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5011695A (ja) |
| EP (1) | EP0330047B1 (ja) |
| JP (1) | JPH025957A (ja) |
| AT (1) | ATE80803T1 (ja) |
| DE (2) | DE3805459A1 (ja) |
| ES (1) | ES2035384T3 (ja) |
| GR (1) | GR3006630T3 (ja) |
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| US5242642A (en) * | 1989-11-25 | 1993-09-07 | Seiko Epson Corporation | Method of manufacturing a switch substrate |
| JP2006213633A (ja) * | 2005-02-03 | 2006-08-17 | Nippon Menaade Keshohin Kk | 抗菌剤 |
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1989
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1992
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